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1 Journal of Pharmaceutical Medicine 15, 3(3): Published Online, September, 15 ( M arc & John U K P u b lis h in g 托匹司他片在不同溶出介质中的溶出行为并与原研产品一致性研究 孙方杰 1, 马瑞青 2, 何雪玲 3, 杨俊 1, 2, 3, 4 * 新乡市高新医药研究院, 新乡, 河南, 中国斯丹德科技股份有限公司, 新乡, 河南, 中国新乡市高新区美加医药科技有限公司, 新乡, 河南, 中国新疆尼堪卡生物技术有限公司, 伊犁, 新疆, 中国 Received: June 16, 15; Received revised: July 13, 15; Accepted: August 5, 15 摘要 目的 : 考察自制托匹司他片和原研厂家生产的托匹司他片在 4 种不同溶出介质中溶出行为, 选出合适的溶出介质, 并比较其与原研产品溶出曲线的一致性 方法 : 照 中国药典 1 年版 ( 二部 ) 附录 XC 溶出度检查法, 分别选用磷酸盐缓冲液 (ph6.) 醋酸 - 醋酸钠缓冲液 (ph4.5).1mol/lhcl 溶液和水作为溶出介质, 考察自制片剂和原研制剂在不同溶出介质中的溶出行为, 分别在 5min,1min,15min,min,3min,45min 6min 和 1min 时取样, 采用 Agilent 高效液相色谱仪, 对溶出情况进行检测, 以取样时间为横坐标, 溶出量为纵坐标, 绘制溶出曲线, 计算自制片剂和原研制剂在不同溶出介质中溶出过程的相似因子, 判断其溶出行为是否一致 结果 : 托匹司他片, 无论是自制制剂还是原研制剂, 其在磷酸盐缓冲液 (ph6.) 醋酸 - 醋酸钠缓冲液 (ph4.5) 和水中的溶出度均比较小, 随着时间的延长, 呈现逐渐缓慢递增的趋势, 但溶出速度并没有显著增加 在.1mol/LHCl 溶液中溶出较快, 在 1min 时溶出即超过 9%, 以后趋于平缓, 溶出量不在显著增加 在较小的 ph 环境下溶出比在较高 ph 环境下的溶出要迅速, 且溶出量也比较大 自制片剂和原研制剂在 4 中不同溶出介质中溶出过程的相似因子均大于 85% 结论 : 托匹司他片在.1mol/LHCl 溶液中溶出较快 自制片剂和原研制剂在 4 种溶出介质中的溶出行为相似性均非常高, 说明自制片剂的处方及工艺设计较为合理 关键词 : 托匹司他片 ; 自制片剂 ; 原研制剂 ; 溶出曲线 ; 相似性 Study the Dissolution of Topiroxostat in Different Dissolution Medium and Compare the Cimilarity with the Orginal Drug Fang-Jie Sun 1, Rui-Qing Ma 2, Xue-Ling He 3, Jun Yang 1, 2, 3, 4 * 1 Xinxiang Institute for New Medicine, Xinxiang, Henan, China 2 Standard Scientific and Technological Co., Ltd., Xinxiang, Henan, China 3 Xinxiang Meijia Medical Co., Ltd., Xinxiang, Henan, China 4 Xinjiang Nikanka Biological Co., Ltd., Yili, Xinjiang, China * 通讯作者 : 杨俊, 新乡市高新医药研究院, 向阳路 416 号, 新乡, 河南,4533, 中国电话 : 传真 : bcd9@126.com. Copyright 12 MJPub. ISSN: JPM

2 ABSTRACT Objective: Study the dissolution of topiroxostat in four different dissolution medium, choose appropriate dissolution medium, and compare the similarity with the orginal drug. Methods: Study the dissolution of homemade topiroxostat tablets and orginal tablets in four different dissolution medium which were phosphate buffer (PBS, ph6.), acetic acid-sodium acetate buffer (ph4.5),.1mol/lhcl solution and water, according to the dissolution test method in ChP. 1 (second) appendix XC. Sampling in 5, 1, 15,, 3, 45, 6 and 1min, respectively, then detect with HPLC, draw the dissolution curve, dissolution as ordinate and sampling time as abscissa, calculate the similar factor of homemade tablets and orginal tablets in four different dissolution medium to decide whether the dissolution behavior are consistent. Results: The dissolution of topiroxoatat in PBS (ph 6.), acetic acid-sodium acetate buffer (ph4.5) and water were all smaller whether homemade tablets or orginal tablets, the dissolution amounts present increase gradually over time, but the dissolution rate was not significant increase. The dissolution of topiroxoatat were quickly in.1mol/lhcl solution, the dissolution amount were more than 9% in 1min and then leveling off. The dissolution rate was quickly and dissolution amount is relatively large at smaller ph environment then at higher ph environment. The similar factor of homemade tablets and orginal tablets in four different dissolution medium were all more than 85%. Conclusion: The dissolution rate of topiroxoatat were quickly in.1mol/lhcl solution. The similar factor of homemade tablets and orginal tablets in four different dissolution medium were very high, showed that the formulation and manufacturing processes of homemade tablets were more reasonable. Keywords: Topiroxostat tablets; Homemade tablets; Orginal tablets; Dissolution curve; Similarity 1 前言 托匹司他片是非嘌呤类黄嘌呤氧化酶抑制剂, 对氧化型和还原型的黄嘌呤氧化酶均有抑制作用, 抑制尿酸的生成 [1] 本品于 13 年 9 月在日本正式上市, 上市规格为 mg/ 片 4mg/ 片 6mg/ 片, 主要用于痛风, 高尿酸血症的治疗, 与传统药物别嘌呤醇 ( 嘌呤类似物 ) 相比, 不会影响嘌呤及吡啶代谢及其酶的活性, 不需要重复大剂量给药来维持较高的药物水平, 不良反应相对较少, 具有更好的安全性 [1] 本文主要考察托匹司他片 ( mg/ 片 ) 在不同介质中的溶出度并比较其与原研厂家 ( 日本富士药品株式会社 ) 上市药品溶出曲线的一致性 以考察本品的内在质量特性, 为药品的质量监督检查和临床使用提供依据 2 仪器与试剂 仪器 :RC-6 型药物溶出度测定仪, 购于天津新天光分析仪器技术有限公司 ;Agilent 高效液相色谱仪 ( 配置四元泵, 全自动进样器, 柱温箱,DAD 检测器 ), 购于安捷伦科技 ( 中国 ) 有限公司, 试药与试剂 : 托匹司他原料药做对照品, 自己实验室合成, 纯度为 99.8%; 托匹司他片 ( mg/ 片 ), 自己实验室制备 ; 托匹司他片 ( mg / 片, 批号 : H2J), 原研厂家日本富士药品株式会社生产 ; 乙腈 ( 色谱级 ) 和甲醇 ( 色谱级 ), 购于天津市科密欧化学试剂有限公司 ; 磷酸二氢钾 醋酸 醋酸钠, 购于天津市恒光化学试剂制造有限公司 ;ph6.86 标准缓冲液和 ph4. 标准缓冲液, 自己配制 ;1% 磷酸溶液和 1% 磷酸溶液, 自己配制 ; 纯水, 市场购置, 经脱气处理后使用 3 实验方法 3.1 对照品溶液的配制精密称取托匹司他原料药 1.mg, 置 5ml 容量瓶中, 用.1mol/LHCl 溶液溶解并稀释至刻度, 精密移取 1.ml 至 1ml 容量瓶中, 用.1mol/LHCl 溶液稀释至刻度, 作为对照品溶液 3.2 托匹司他片在四种不同溶出介质中溶出曲线的测定照 中国药典 1 年版 ( 二部 ) 附录 XC 溶出度检查法 [2], 仪器参数设置如下 : 溶出介质分别为磷酸盐缓冲液 (ph6.) 醋酸 - 醋酸钠缓冲液 (ph4.5).1mol/lhcl 溶液和脱气处理的水 9ml, 温度为 37 ±.5, 转速 75 转 / 分钟, 取样时间分别为 5min, 1min,15min,min,3min,45min 6min 和 1min 实验样品 : 自制片剂和原研片剂各 6 片 采用 Agilent 高效液相色谱仪, 对溶出情况进行检测, 以取样时间为横坐标, 溶出量为纵坐标, 绘制溶出曲线 [3] 色谱条件 : 色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 (25mm*4.6mm,5µm), 检测波长为 273nm, 以.2mol/L 磷酸二氢钾 (ph 3.5)- 乙腈 (7:3) 为流动相, 流速.8ml/min, 柱温 4, 进样量 1µl 3.3 自制片剂与原研制剂溶出度的测定, 并比较二者溶出曲线相似性照 中国药典 1 年版 ( 二部 ) 附录 XC 溶出度检查法 [2], 仪器参数设置如下 : 溶出介质为.1mol/LHCl 溶液 9ml, 温度为 37 ±.5, 转速 75 转 / 分钟, 取样时间分别为 5min,1min,15min,min,3min, 45min 6min 和 1min 实验样品 : 自制片剂和原 Copyright 12 MJPub. ISSN: JPM

3 研片剂各 6 片 采用 Agilent 高效液相色谱仪, 对溶出情况进行检测, 以取样时间为横坐标, 溶出量为纵坐标, 绘制溶出曲线 [3] 3.4 相似因子 f2 的计算相似因子计算公式为 : n f2 = 5lg 1+ ( Rt Tt) 1 nt= 1 式中,Rt 和 Tt 分别为原研产品和自制产品在时间 t 时刻的平均溶出度,n 为取样次数 由 f 2 的计算公式可以看出, 当两药品溶出曲线完全重合时 f 2 的值为 1; 而溶出度之间的差值无论在哪个时间点都不会超过 1%, 所以 f 2 的最小值接近于, 即 f 2 的有效范围在 -1 当 f 2 值大于 5 时, 则表示两药品的溶出度相似, 且 f 2 值越接近 1, 表明两者相似性越高 [4-7] 4 结果与结论 4.1 托匹司他片在 4 种不同溶出介质中的溶出情况自制片剂和原研片剂在 4 中不同溶出介质中的溶出情 况如表 1 所述 从表 1 可以看出 : 托匹司他片, 无论是自制制剂还是原研制剂, 其在磷酸盐缓冲液 (ph6.) 醋酸 - 醋酸钠缓冲液 (ph4.5) 和水中的溶出度均比较小, 而且随着时间的延长, 其溶出速度并没有显著增加 连续测定 1min, 其在磷酸盐缓冲液 (ph6.) 和水中最高溶出量还未达到 3%; 在醋酸 - 醋酸钠缓冲液 (ph4.5) 中的最大溶出量超过 3%, 未达到 35%; 在.1mol/LHCl 溶液中溶出较快, 在 1min 时溶出即超过 9%, 随着时间的延长, 溶出度并没有显著的增加, 这是因为片剂中的有效成分在 1min 之内已经溶出大部分, 只有少许未溶出的缘故 比较其在 4 种不同溶出介质中的溶出量可以看出, 其在较小的 ph 环境下溶出比在较高的 ph 环境下的溶出要迅速, 且溶出量也比较大 4.2 托匹司他片在 4 种不同溶出介质中的溶出曲线根据上表实验数据, 以取样时间为横坐标, 溶出量为纵坐标, 绘图, 以便可以更明显的看出托匹司他片在 4 种不同溶出介质中的溶出情况 溶出介质 片剂 表 1 托匹司他片在 4 中不同溶出介质中的溶出情况 取样时间 /min 磷酸盐缓冲液 自制 (ph6.) 原研 醋酸 - 醋酸钠缓 自制 冲液 (ph4.5) 原研 mol/LHCl 溶 自制 液 原研 水 自制 原研 自制制剂与原研制剂在磷酸盐缓冲液 (ph6.) 中的溶出曲线 图 1 自制制剂与原研制剂在磷酸盐缓冲液 (ph6.) 中的溶出曲线 自制制剂与原研制剂在醋酸 - 醋酸钠缓冲液 (ph4.5) 中的溶出曲线 图 2 自制制剂与原研制剂在醋酸 - 醋酸钠缓冲液 (ph4.5) 中的溶出曲线 Copyright 12 MJPub. ISSN: JPM

4 自制制剂与原研制剂在.1mol/L 盐酸中的溶出曲线 图 3 自制制剂与原研制剂在.1mol/L 盐酸中的溶出曲线 自制制剂与原研制剂在水中的溶出曲线 图 4 自制制剂与原研制剂在水中的溶出曲线 从图 1 到图 4 托匹司他片在不同溶出介质中的溶出曲线可以看出, 托匹司他片在磷酸盐缓冲液 (ph6.) 醋酸 - 醋酸钠缓冲液 (ph4.5) 和水中的溶出比较缓慢, 呈现逐渐递增的趋势 ; 在.1mol/L 盐酸中的溶出较为迅速,5min 溶出即超过 8%,1min 以后趋于平缓, 溶出量不在显著增加 4.3 托匹司他片在.1mol/L 盐酸中的溶出情况从图 3 可以得出结论 : 托匹司他片在.1mol/L 盐酸溶液中的溶出较为迅速,5min 溶出即超过 8%,1min 以后趋于平缓, 溶出量不在显著增加 为了进一步研究托匹司他片在.1mol/L 盐酸溶液中的溶出行为, 对其在.1mol/L 盐酸溶液中前 1min 的溶出行为进行研究, 分别在 2min,4min,6min,8min,1min 时取样, 并以取样时间为横坐标, 溶出量为纵坐标, 绘制溶出曲线 表 2 托匹司他片在.1mol/L 盐酸溶液中前 1min 的溶出情况 片剂 取样时间 /min 自制 原研 从图 5 可以很明确的看出 : 托匹司他片剂在.1mol/L 盐酸中的溶出呈现递增的趋势, 而且在 6min 之后基本趋于平衡,1min 时溶出度高达 95% 以上, 说明该片剂中的有效成分托匹司他在.1mol/L 盐酸的酸性环境中, 溶出迅速, 溶出比较完全 该实验也对托匹司他片质量标准控制时溶出度检查项下溶出介质的选择提供了依据 实验结果也间接说明了人在服用托匹司他片剂后, 在胃酸酸性环境中, 有效成分托匹司他的溶出较快而且较完全 4.4 自制片剂与原研制剂溶出曲线相似性利用上述提到的相似因子计算公式, 分别对自制托匹司他片与原研片剂在 4 种溶出介质中溶出 1min 的相似性进行计算, 结果显示 : 在磷酸盐缓冲液 (ph6.) 中溶出曲线的相似因子为 94.43, 在醋酸 - 醋酸钠缓冲液 (ph4.5) 中溶出曲线的相似因子为 93.11, 在.1mol/L 盐酸中溶出曲线的相似因子为 89.77, 在水中溶出曲线的相似因子为 结果显示自制托匹司他片剂与原研片剂在 4 种溶出介质中的相似性均非常高, 也说明自制片剂的处方及工艺设计较为合理 5 讨论 目前临床上常用抗痛风药品种不多 [8-1], 临床治疗主要以秋水仙碱 非甾体类抗炎药 激素 促进尿酸排泄药 ( 如丙磺舒 磺吡酮及苯溴马隆 ) 和抑制尿酸合成药 ( 别嘌呤醇 ) 为主 [11-14], 这些药物临床副作用比较明显, 尤其对需要长期服用的患者更为突出 [15, 16] 托匹司他为非嘌呤类黄嘌呤氧化酶选择性抑制剂, 与传统药物别嘌呤醇 ( 嘌呤类似物 ) 相比, 不会影响嘌呤及吡啶代谢及其酶的活性, 不需要重复大剂量给药来维持较高的药物水平, 不良反应相对较少, 具有更好的安全性 [1] 但是托匹司他难溶于水, 在其制剂的开发过程中因为药物的溶出受限而成为开发过程的瓶颈 托匹司他片剂在 13 年 6 月于日本上市 [1], 其产品的溶出较高而且溶出迅速, 该产品的上市也提示在药物的开发过程中, 尤其是新制剂的研究过程中选用适宜的辅料能很大程度的提高药品的质量 对于该产品更深一步的探索还需要广大的医药研发者进行不懈的努力 自制制剂与原研制剂在.1mol/L 盐酸中的溶出曲线 图 5 自制制剂与原研制剂在.1mol/L 盐酸中前 1min 的溶出曲线 参考文献 [1] 托匹司他药品说明书. 日本标准商品分类标准编号 , 13 年 9 月修订 ( 第 2 版 ). [2] 中国药典 1 年版 ( 二部 )[M]. 国家药典委员会编. [3] 国家食品药品监督管理总局关于发布普通口服固体制剂溶出度试验技术指导原则和化学药物 ( 原料药和制剂 ) 稳定性研究技术指导原则的通告 (15 年第 3 号 ). Copyright 12 MJPub. ISSN: JPM

5 [4] 王萌. 口服制剂中药物的溶出及影响药物溶出度的因素 [J]. 综合论坛, 14, 4( 中 ). [5] 李凯, 樊鑫. 不同溶出介质对尼莫地平片剂溶出度的影响 [J]. 宁夏医科大学学报, 14, 36(3): [6] 谢沐风. 溶出曲线相似性的评价方法 [J]. 中国医药工业杂志, 9, 4(4): [7] 余春梅, 陈兰, 徐洁, 等. 自制左炔诺孕酮片溶出度 生物利用度与国外制剂比较研究 [J]. 重庆医学, 13, 42(12): [8] 王洋. 高尿酸血症及痛风药物合理应用 [J]. 中外健康文摘, 13, 1(1): 169. [9] 徐娜, 陈海生. 治疗痛风药物研究进展 [J]. 药学实践杂志, 13, 31(1): [1] 张照伟, 傅继华. 痛风的药物治疗新进展 [J]. 安徽医药, 11, 15(4): [11] 孙锡芹, 李顺兰, 王玉玲. 痛风的药物治疗进展 [J]. 中国实用医药, 11, 6(7): [12] 赵占正, 肖静, 刘章锁等. 苯溴马隆与别嘌醇治疗高尿酸血症痛风的疗效观察 [J]. 中国误诊学杂志, 5, 5(2): [13] Hayden MR, Tyagi SC. Uric acid: a new look at an old risk marker for cardiovascular disease, metabolic syndrome, and type diabetes mellitus: the urate redox shuttle[j]. Nutr Metab(Lond), 4, 1(1): 1. [14] Bhattacharyya B, Panda D, Gupta S, et al. Anti-mitotic activity of colchicine and the structural basis for its interaction with tubulin[j]. Med Res Rev, 8, 28(1): [15] 袁建丽, 彭梦仙, 孙敏等. 痛风发病机理及其药物治疗现状和展望 [J]. 中国药事, 14, 28(1): [16] Martinon F, Petrilli V, Mayor A, et al. Gout associated uric acid crystals activate the NALP3 inflammasome[j]. Nature, 6, 44(9): Copyright 12 MJPub. ISSN: JPM

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