658 解放军医学杂志 2012 年 8 月 1 日第 37 卷第 8 期 [ 1 在我国有约 7 6 % 的新生儿接种卡介苗 ], 但 是由于 PPD(purified protein derivative) 皮肤试验无法鉴 别结核感染和卡介苗接种 [2-3], 因此目前结核潜伏 感染的诊断缺乏

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1 Med J Chin PLA, Vol. 37, No. 8, August 1, 年驻京部队入伍新兵结核感染及随访情况分析 王兰, 梁艳, 吴雪琼, 张翠英, 王志耘, 阳幼荣, 张俊仙, 侯英, 赵文娟 [ 摘要 ] 目的了解 2009 年驻京部队入伍新兵结核感染及发病情况, 评价酶联免疫斑点试验 (ELISPOT) 在检测结 核分枝杆菌感染中的应用价值 方法 2009 年 907 例驻京部队入伍新兵, 行胸部 X 线检查 PPD 皮肤试验和 ELISPOT 检测 PPD 皮肤试验阴性者, 接种卡介苗 7 个月后抽查 110 例, 再进行 PPD 皮肤试验和 ELISPOT 检测 随访 18 个月了解 结核病发病情况 结果 907 例入伍新兵中,PPD 皮肤试验和 ELISPOT 的阳性率分别为 50.2% 和 30.7% 452 例 PPD 阴性 和 455 例 PPD 阳性者中, 分别有 132 例 (29.2%) 和 146 例 (32.1%)ELISPOT 阳性, 两者的一致率为 51.4%(466/907) 65.6% 的 PPD 阳性者和 27.8% 的 ELISPOT 阳性者 [ 斑点形成细胞 (SFC) 12.2±21.2] 有卡介苗接种 ;21.3% 的 PPD 阳性者和 35.9% 的 ELISPOT 阳性者 (SFC 18.3±34.6) 没有卡介苗接种 PPD 皮肤试验阴性的新兵接种卡介苗 7 个月后抽查的 110 例中,85 例 (77.3%)PPD 皮肤试验阳性 21 例 (19.1%) 强阳性,21 例 (19.1%)ELISPOT 阳性 13 例 (11.8%) 强阳性 ; 两者的一致率为 38.2%(42/110) 12 例新兵发现胸片异常, 其中 12 例 (100%)PPD 皮肤试验阳性,6 例 (50%)ELISPOT 阳性 随访 18 个月, 均未发现发展为结核病 结论 结核感染,ELISPOT 技术能够更有效地筛查结核感染 驻京部队入伍新兵的结核感染率低于既往报道, 提示卡介苗接种能部分保护人群抵抗 [ 关键词 ] 结核, 肺 ; 卡介苗 ; 结核菌素试验 ; 军事人员 [ 中图分类号 ] R521 [ 文献标志码 ] A [ 文章编号 ] (2012) Analysis of Mycobacterium tuberculosis infection and follow-up in recruits of army stationed in Beijing in 2009 WANG Lan, LIANG Yan, WU Xue-qiong *, ZHANG Cui-ying, WANG Zhi-yun, YANG You-rong, ZHANG Jun-xian, Hou Ying, ZHAO Wen-juan Institute of Tuberculosis Research, 309 Hospital of PLA, Beijing , China * Corresponding author, wu-xueqiong@263.net This work was supported by the National Nature and Science Foundation of China ( ), the Special Foundation of China for Serious Infectious Diseases (2008ZX ) and Beijing Science and Technology Special Foundation (Z ) [Abstract] Objective To investigate Mycobacterium tuberculosis infection and incidence of tuberculosis in the recruits of army stationed in Beijing Military command, and evaluate the value of enzyme-linked immunospot (ELISPOT) assay for detection of mycobacterial infections. Methods From December 2009 to February 2010, a total of 907 new recruits to the army were examined by chest radiography, purified protein derivative(ppd) skin test and with recombinant CFP-10/ESAT-6 fusion protein (rcfp-10/esat-6) as a stimulus. The PPD-negative recruits were vaccinated with BCG vaccine, and 110 were retested with and ELISPOT 7 months later. The recruits were followed up for 18 months to find out whether they would develop active tuberculosis. Results The prevalence of latent tuberculosis infection (LTI), as estimated by and ELISPOT assay, was 50.2% and 30.7%, among new recruits, respectively. Of 452 PPD-negative and 455 PPD-positive volunteers, 132(29.2%) and 146(32.1%) were ELISPOT positive, respectively. Overall agreement between tests was 51.4% (466/907). About 65.6% of PPDpositive volunteers and 27.8% of ELISPOT-positive volunteers (SFC 12.2±21.2) had received with scars on their arms. About 21.3% of PPD-positive volunteers and 35.9% of ELISPOT-positive volunteers (SFC 18.3±34.6) had not received vaccination with no scar on their arms. Of 110 PPD-negative recruits who received, 77.3% turned to positive, 19.1% turned to strongly positive, 7 months later, and 19.1% were ELISPOT-positive, 11.8% were ELISPOT-strongly positive. Overall agreement between tests was 38.2% (42/100). No one developed active tuberculosis during 18-month follow-up. Conclusions The M. tuberculosis infection rate in army recruits in China is lower than that previously reported. could partly protect the population against the infection of M. tuberculosis. ELISPOT technique may be a more accurate method for screening M. tuberculosis infection in China. [Key words] tuberculosis, pulmonary; BCG vaccine; tuberculin test; military personnel [ 基金项目 ] 国家自然科学基金 ( ); 国家重大传染病防治科技重大专项基金 (2008ZX ); 北京市科技重大专项重点 项目 (Z ) [ 作者简介 ] 王兰, 技师 主要从事结核病快速诊断技术的研究 王兰 梁艳对本研究贡献相同 [ 作者单位 ] 北京解放军 309 医院全军结核病研究所 ( 王兰 梁艳 吴雪琼 张翠英 王志耘 阳幼荣 张俊仙 侯英 赵文娟 ) [ 通讯作者 ] 吴雪琼, wu-xueqiong@263.net

2 658 解放军医学杂志 2012 年 8 月 1 日第 37 卷第 8 期 [ 1 在我国有约 7 6 % 的新生儿接种卡介苗 ], 但 是由于 PPD(purified protein derivative) 皮肤试验无法鉴 别结核感染和卡介苗接种 [2-3], 因此目前结核潜伏 感染的诊断缺乏 金标准 酶联免疫斑点试验 (ELISPOT) 是一个新的建立于 T 细胞基础上的 γ 干扰 素 (IFN-γ) 释放试验, 可以克服 PPD 皮肤试验的部 分缺点 [4-6], 灵敏 特异地检测结核感染 我们曾以 结核分枝杆菌重组 CFP-10/ESAT-6 作为刺激剂, 建立 了一个新的 结核特异的 ELISPOT 检测方法, 该方 法能够检测分泌结核特异的 IFN-γ 的效应 T 细胞数 量 [7-9] 军事人员是结核感染的高危人群 [10],2007 年 我们首次应用 ELISPOT 方法检测了 100 例入伍新兵 的结核感染情况 [9] 本研究在既往研究的基础上应 用新的 ELISPOT 方法检测 2009 年驻京部队入伍新兵 结核潜伏感染 (latent tuberculosis infection,lti) 情 况, 为制定军队结核预防 控制策略提供依据 1 资料与方法 1.1 一般情况 2009 年驻京部队入伍新兵 907 例 ( 来 源见表 1), 均为男性, 年龄 19.3±1.6(17~24) 岁 胸 部 X 线检查 : 在胸部 X 线检查车上拍摄小型胸片 PPD 皮肤试验 : 吸取卡介苗 (50U/ml)0.1ml(5U), 采 用曼图氏法注射于前臂掌侧皮内 于注射后 72h 检 表 年 907 例驻京部队入伍新兵来源 Tab.1 The sources of 907 recruits in troops stationed in Beijing in 2009 Province City Case(%) Total Weifang 123(50.4) Shandong Qingdao 107(43.9) 244 Other 14(5.7) Shaanxi Baoji 98(100.0) 98 Yangquan 23(59.0) Shanxi Taiyuan 15(38.5) 39 Other 1(2.5) Yancheng 64(72.7) Jiangsu Suzhou 12(13.6) Wujiang 7(8.0) 88 Other 5(5.7) Sichuan Guangyuan 26(92.9) Other 2(7.1) 28 Hunan Loudi 51(96.2) Other 2(3.8) 53 Guixi 39(50.0) Jiangxi Yingtan 34(43.6) 78 Other 5(6.4) Henan 18 cities 181(100.0) 181 Hebei Shijiazhuang 87(98.9) Other 1(1.1) 88 Other 10 Total 907 查注射部位反应, 并记录卡痕 硬结横径及纵径的平均数 5mm 为阳性, 15mm 为强阳性 1.2 ELISPOT 检测方法的建立采用上海铭源数康生物芯片有限公司的 FS-SPOT 结核检测试剂盒, 按说明书操作, 简述如下 1 外周血单个核细胞分离及计数 : 取 4~5ml 外周抗凝血, 用淋巴细胞分层液分离 提取单个核细胞 (PBMC), 调整细胞浓度至 /L 2 分泌 IFN-γ 的 T 细胞检测 : 每个测试样本均取微孔板 3 孔, 其中阴性对照孔内加入完全细胞培养液 50µl; 阳性对照孔内加入阳性对照血凝素 (PHA)50µl; 测试孔内加入重组的 CFP10/ ESAT6 融合蛋白 50µl 分别在上述各孔内, 加 100µl 含有 个 PBMCs 的悬液, 置于 37 5%CO 2 孵箱中孵育 20h; 弃培养上清, 加入 200µl 4 预冷的无菌蒸馏水裂解细胞 10min; 用 200µl 1 PBST 洗板 7 次,1min/ 次, 最后洗板后拍干 ; 在每孔中加入 100µl 用 PBS 稀释的生物素标记抗体 (1:200 稀释 ), 置 37 孵育 1h; 洗板后, 加入 100µl 用 PBS 稀释的链亲和素 - 碱性磷酸酶 (1:200 稀释 ), 置 37 孵育 30min; 洗板后, 每孔加入显色液 100µl, 置 37 避光显色 7~15min 板底显示紫蓝色斑点后, 在 96 孔 PVDF 膜板中加入双蒸水或去离子水终止反应, 将板放入 37 烘箱中干燥 30min 使用酶联斑点分析仪或放大镜计数着色斑点, 每个点代表 1 个分泌 γ 干扰素的 T 淋巴细胞 当阴性对照孔点数 <13, 检测孔点数与阴性对照孔点数之差 13 时, 判断所检测标本为阳性 ; 如果阴性对照孔点数 13, 检测孔点数为阴性对照孔两倍, 亦可判断所检测标本为阳性 1.3 卡介苗接种和复查 PPD 皮肤试验阴性新兵常规接种卡介苗,7 个月后抽查 110 例进行 PPD 皮肤试验和 ELISPOT 检测 1.4 随访随访 18 个月了解结核病发病情况 1.5 统计学处理采用 SPSS 18.0 软件进行统计学处理, 检测孔点数与阴性对照孔点数的差值以 x±s 表示, 各组间差异的比较采用 t 检验 应用 S P S S 18.0 软件绘制 ROC 曲线, 计算灵敏度和特异度 2 结果 2.1 入伍新兵 PPD 皮肤试验和 ELISPOT 检测结果 ROC 曲线分析结果显示, 当斑点数分别为 和 时, 其检测的灵敏度分别为 % % 和 %, 特异性分别为 % % 和 89.8% 907 例驻京部队入伍新兵的 PPD 皮肤试验和 ELISPOT 检测结果见表 例中,PPD 皮肤试验阳性者 例 ( % ), 其中强阳性者 例 (14.6%);ELISPOT 阳性者 278 例 (30.7%) 在 452 例 PPD 阴性者中,132 例 (29.2%) 为 ELISPOT 阳性 ; 在

3 Med J Chin PLA, Vol. 37, No. 8, August 1, 表 例新兵 PPD 皮肤试验和 ELISPOT 检测结果比较 Tab.2 Results of and in 907 new recruits of the army Diameter of (mm) Case (SFC 13)[case(%)] (SFC 31) < (29.2) 45(10.0) 12.6± (31.3) 39(12.1) 14.7± (34.1) 18(13.6) 19.2±33.4 Total (30.7) 102(11.2) 16.0±28.4 SFC. Spot forming cells 455 例 PPD 阳性者中,146 例 (32.1%) 为 ELISPOT 阳性, 两者的一致率为 51.4%(466/907) 在 132 例 PPD 强阳性者中,45 例 (34.1%) 为 ELISPOT 阳性 2.2 卡介苗接种对 PPD 皮肤试验和 ELISPOT 检测结果的影响 590 例 (65.2%) 新兵有卡痕 ( 大多数新兵不明确自己是否接种过卡介苗, 只能根据手臂上是否有卡痕来判断 ), 其 PPD 平均直径为 8.2±6.5mm, ELISPOT 斑点形成细胞 (spot forming cells,sfc) 为 12.2±21.2; 其中 387 例 (65.6%) 是 PPD 阳性, 平均直径为 12.1±4.4mm,164 例 (27.8%) 为 ELISPOT 阳性,SFC 为 13.5± 例 (34.8%) 无卡痕, 其 PPD 平均直径为 3.2±5.5 mm,elispot SFC 为 18.3±34.6; 其中 67 例 (21.3%) 是 PPD 阳性, 平均直径为 12.6±4.6mm,113 例 (35.9%) 为 ELISPOT 阳性,SFC 为 18.3± 例 PPD 阴性的未接种卡介苗的新兵中,81 例 (32.7%) ELISPOT 阳性 ( 表 3) 2.3 PPD 皮肤试验阴性者卡介苗接种 7 个月后检查结果 PPD 皮肤试验阴性的新兵给予接种卡介苗, 7 个月后抽查 110 例进行 PPD 皮肤试验和 ELISPOT 检测, 结果见表 4 5 其中 PPD 皮肤试验阳性者 85 例 (77.3%) 强阳性者 21 例 (19.1%),ELISPOT 阳性者 21 例 (19.1%) 强阳性者 13 例 (11.8%) 在 25 例 PPD 阴性者中,2 例 (8.0%)ELISPOT 阳性者均为强阳性 ; 在 85 例 PPD 阳性者中,19 例 (22.4%) 为 ELISPOT 阳性,11 例 (12.9%) 为 ELISPOT 强阳性 ; 两者的一致率为 38.2%(42/110) 在 21 例 PPD 强阳性者中,3 例 (14.3%) 为 ELISPOT 阳性,2 例 (9.5%) 为 ELISPOT 强 阳性 2.4 陈旧性结核对 PPD 皮肤试验和 ELISPOT 检测结果的影响 12 例新兵发现胸片异常,PPD 皮肤试验直径 12.7±4.4mm,ELISPOT 斑点数 15.5±11.6 其中 PPD 皮肤试验阳性者 12 例 (100%) 强阳性者 3 例 (25%),ELISPOT 阳性者 6 例 (50%) 强阳性者 2 例 (25%) 12 例新兵胸片 PPD 皮肤试验和 ELISPOT 检查结果见表 不同省市新兵结核感染情况来自 9 个省市的 897 例新兵的 PPD 皮肤试验和 ELISPOT 检测结果见表 7 根据 PPD 强阳性率, 来自山东省 (21.7%) 和陕西省 (19.4%) 的新兵结核感染率较严重, 而来自湖南 (7.5%) 山西(7.7%) 和河南 (9.9%) 省的新兵较轻 但根据 ELISPOT 结果, 来自河北 (53.4%) 河南 (33.7%) 江西(30.8%) 和湖南省 (30.2%) 的新兵结核感染率较严重, 而来自山东 (23.4%) 陕西(25.5%) 山西 (25.6%) 和江苏省 (27.3%) 的新兵较轻 考虑与 PPD 阳性受卡介苗接种的影响, 而 ELISPOT 不受其影响有关 2.6 不同区域新兵结核感染情况 906 例来自城市 城镇和农村新兵的 PPD 皮肤试验和 ELISPOT 检测结果见表 8 来自城市新兵的 PPD 皮试强阳性率高于城镇和农村, 来自城市和城镇新兵的 ELISPOT 阳性率高于农村, 但差异无统计学意义 来自城市新兵的卡介苗接种率高于城镇和农村, 来自城镇新兵高于农村 (P<0.05) 2.7 随访 18 个月结核病发病情况随访 18 个月, Case 表 3 Tab.3 卡介苗接种对 PPD 皮肤试验和 ELISPOT 检测结果的影响 Effect of on and Diameter (mm, x±s) Yes (65.6) 109(18.5) 8.2± (27.8) 12.2±21.2 PPD(-) 203 0(0.0) 0(0.0) 0.8±1.5 50(24.6) 9.6±14.6 PPD(+) (100.0) 109(28.2) 12.1± (29.5) 13.5±23.8 No (21.3) 22(7.0) 3.2± (35.9) 18.3±34.6 (1) PPD(-) 248 0(0.0) 0(0.0) 0.6±1.4 81(32.7) 14.9±30.6 (1) PPD(+) 67 67(100.0) 22(32.8) 12.6±4.6 32(47.8) 30.9±44.5 (1) (1)P<0.001 compared with soldiers with

4 660 解放军医学杂志 2012 年 8 月 1 日第 37 卷第 8 期 表 4 Tab.4 Diameter of (mm) Tab 例 PPD 皮肤试验阴性新兵卡介苗接种 7 个月后 PPD 皮肤试验和 ELISPOT 检测结果 and in 110 PPD-negative recruits 7 months after Case <5 25 2(8.0) 2(8.0) 40.0± (25.0) 9(14.1) 13.4± (14.3) 2(9.5) 5.7±10.3 Total (19.1) 13(11.8) 10.2±22.0 表 例 PPD 皮肤试验阴性新兵卡介苗接种前后 PPD 皮肤试验和 ELISPOT 检测结果比较 Comparison of and in 110 PPD-negative recruits before and after Diameter (mm, x±s) Before ± (30.9) 13(11.8) 13.4±22.6 After 85(77.3) 21(19.1) 9.80± (19.1) 13(11.8) 10.2±22.0 Tab.6 表 6 12 例新兵胸片 PPD 皮肤试验和 ELISPOT 检查结果 Results of chest X-ray, and in 12 recruits No. Chest X-ray Diameter of PPD skin(mm) 1 Spotty calcification in the hilum of left lung Small punctate calcification in the both hilum of lung Small punctate calcification in the hilum of left lung Small punctate calcification in the hilum of right lung Small punctate calcification in the lower right lung and hilum of left lung Punctate calcification in the hilum of left lung Punctate calcification in the hilum of left lung Punctate calcification in the upper lung Punctate calcification in the hilum of right lung Small punctate calcification in the upper right lung and hilum of left lung Small punctate calcification in the upper right lung and hilum of right lung Punctate calcification in the upper right lung and hilum of left lung Tab.7 表 7 来自 9 个省的 897 例新兵 PPD 皮肤试验和 ELISPOT 检测结果比较 Comparison of and in 897 recruits from nine provinces Province Case Shandong (64.8) 130(53.3) 53(21.7) 57(23.4) 11.0±18.6 Shaanxi 98 72(73.5) 55(56.1) 19(19.4) 25(25.5) 14.9±43.8 Shanxi 39 25(64.1) 19(48.7) 3(7.7) 10(25.6) 9.5±11.5 Jiangsu 88 81(92.0) 50(56.8) 13(14.8) 24(27.3) 9.3±12.0 Sichuan 28 28(100.0) 13(46.4) 3(10.7) 8(28.6) 9.9±9.3 Hunan 53 31(58.5) 24(45.3) 4(7.5) 16(30.2) 12.6±16.6 Jiangxi 78 46(59.0) 41(52.6) 9(11.5) 24(30.8) 16.5±29.0 (1)(3) Henan (53.6) 71(39.2) 18(9.9) 61(33.7) 15.1±22.6 (1)(3)(4) Hebei 88 54(61.4) 45(51.1) 9(10.2) 47(53.4) 28.4±42.7 (2)(3)(4) (1)P<0.05, (2)P<0.001 compared with Shandong; (3)P<0.05 compared with Jiangsu; (4)P<0.05 compared with Shanxi Tab.8 表 8 不同区域新兵 PPD 皮肤试验和 ELISPOT 检测结果比较 Comparison of and between recruits from different districts District Case City (70.5) 140(52.2) 48(17.9) 87(32.5) 14.0±24.1 Town (67.9) (1) 87(46.5) 20(10.7) 61(32.6) 13.0±18.2 Country (54.3) (1)(2) 227(50.3) 64(14.2) 129(28.6) 15.1±30.9 (1)P<0.05 compared with city; (2)P<0.05 compared with town

5 Med J Chin PLA, Vol. 37, No. 8, August 1, 例驻京部队入伍新兵均未发现结核病 3 讨论 年驻京部队入伍新兵的 P P D 皮 肤试验阳性率为 % [ 1 1 ], 年为 % [ 9 ] ; 年东北部队入伍新兵的 P P D 皮肤试 验阳性率为 % 鉴于目前 P P D 皮肤试验的灵 敏度只有 7 0 % ~ 8 0 % [ 1 2 ], P P D 阴性人群中应该有 2 0 % ~ 3 0 % 的假阴性结果, 本研究选择 1 3 个斑点 作为阳性界限值 根据此界限值, 本研究 PPD 皮 肤试验阳性率为 50.2%(455/907), 略高于以往水 平 但是, E L I S P O T 试验的阳性率在本组仅为 30.7%(278/907), 显著低于 PPD 皮肤试验 表 2 结果 显示 PPD 阴性和 PPD 阳性新兵中 ELISPOT 阳性率分 别为 29.2% 和 32.1%, 这与以前的报道一致,PPD 皮 肤试验与 ELISPOT 试验无相关性 [3, 13] ; 但 PPD 阳性 新兵的 ELISPOT 斑点数高于 PPD 阴性者, 进一步证 明 PPD 阳性者中存在更多的结核感染者 我国新生儿第一针免疫接种的就是卡介苗, 表 3 显示这批新兵的卡介苗接种率是 65.6%,CFP- 10 和 ESAT-6 存在于结核分枝杆菌和牛结核分枝杆 菌基因组的 RD1 区中, 但在卡介苗和大多数非结核 分枝杆菌基因组中缺失 因此, 应用重组 CFP-10/ ESAT-6 融合蛋白作为 ELISPOT 试验的刺激剂不受卡 介苗接种的影响 [4-6] 但本研究结果显示, 卡介苗 接种者中 PPD 阳性率和强阳性率显著高于未接种卡 介苗者, 这可能是由于 PPD 中含有结核分枝杆菌和 卡介苗的共同抗原所致 与之相反, 卡介苗接种者 中 ELISPOT 试验的阳性率和斑点数均显著低于未接 种卡介苗者, 尤其是那些 PPD 阳性的未接种卡介苗 者 结果证明卡介苗接种能部分保护人群抵抗结核 感染, 减少结核高危人群 35.4%PPD 阴性的卡介 苗接种者的存在也间接证明了卡介苗接种失败或 PPD 皮试存在假阴性 对 PPD 皮试阴性者无论其 ELISPOT 结果如何, 我们均给予卡介苗接种,7 个月后检测结果 ( 表 4 5) 显示卡介苗接种阳转率只有 77.3%, 与以前报道的 [14] 卡介苗接种成功率一致 21 例 (19.1%)PPD 皮试 强阳性者中, 仅 3 例 ELISPOT 阳性,2 例 ELISPOT 强 阳性, 说明卡介苗 PPD 皮试强阳性的临床辅助诊断 价值有限 卡介苗接种前后,ELISPOT 斑点数和强 阳性率虽无显著差异 (P>0.05), 但 ELISPOT 阳性率 明显减少, 再次证明卡介苗接种能部分保护人群抵 抗结核感染, 减少结核高危人群 因此, 有必要给 PPD 皮试阴性和 ELISPOT 阴性的儿童和成人接种卡 介苗, 我们将在驻京部队中继续实行该预防策略 表 6 结果显示, 陈旧性结核病用两种方法均可 检测阳性, 但 ELISPOT 阳性率低于 PPD 皮肤试验, 这可能是由于 PPD 皮肤反应是通过激活中心记忆性 T 细胞反应来检测之前的 休眠的结核感染, 因而 其反应性比特异性 IFN-γ 反应持续的时间更长 ; 而 特异性 IFN-γ 应答是依赖于抗原介导的效应性 T 细 胞的存在, 检测的是近期感染或活动性感染, 在结 核感染后随着时间的推移会逐渐减弱 根据 PPD 强阳性率, 来自山东省和陕西省的新 兵中有较多的结核高危人群 ; 而 ELISPOT 结果提示 来自河北 河南 江西和湖南省的新兵中有较多的 结核高危人群 ; 而来自山东 陕西 山西和江苏 省的新兵中结核高危人群较少 ELISPOT 结果与以 前的报道较一致,2008 年中国结核病监测报告显示 湖南 四川 河南 江西 陕西 山西 河北 江苏和山东省肺结核发病率分别为 (/10 万 ) 和 45.22, 涂阳肺结核发病率分别为 (/10 万 ) 和 24.66, 河南 江西和湖南省可能由于结核病疫 情较严重而导致当地结核潜伏感染率较高 本研究 中来自城市 城镇和农村的新战士之间结核感染率 并无显著差异, 可能是因为这批新战士中 72.6% 是 高中毕业生, 也可能是来自城市 城镇新战士的卡 介苗接种率高于农村所致 [15] Doherty 等发现对 ESAT-6 反应强的近期暴露 [16] 者很可能在 2 年内发展为活动性结核病 Bakir 等 报道 381 例 T-SPOT TB 阳性的涂阳肺结核患者接触 者中, 最终 11 例 (2.9%) 发展为活动性结核病 本 研究中 PPD 强阳性或 ELISPOT 阳性的战士随访 18 个 月, 均未发现发展为活动性结核病 综上所述, 本组驻京部队新战士的感染率要低 于以往的相关报道, 提示卡介苗接种能部分保护人 群抵抗结核感染,ELISPOT 技术能够更有效地筛查 结核感染 但仍有以下几个问题需要进一步解决, 即 ELISPOT 诊断技术在临床上如何定位, 其临床意 义是什么, 是 潜伏 结核感染 活动 结核感 染还是结核病,ELISPOT 强阳性者是否更易发展为 活动性结核病以及是否需要预防治疗等 [17-19] 参考文献 [1] National Technical Steering Group of the Epidemiological Sampling Survey for Tuberculosis, Duanmu H. Report on fourth national epidemiological sampling survey of tuberculosis[ J]. Chin J Tuberc Respir Dis, 2002, 25(1): 3-7. [2] Huebner RE, Schein MF, Bass JB Jr. The tuberculin skin test[ J]. Clin Infect Dis, 1993, 17(6): [3] Farhat M, Greenaway C, Pai M, et al. False-positive tuberculin skin tests: w hat i s the absolute ef fect of BCG and nontuberculous mycobacteria[ J]? Int J Tuberc Lung Dis, 2006,

6 662 解放军医学杂志 2012 年 8 月 1 日第 37 卷第 8 期 10(11): [4] Harboe M, Oettinger T, Wiker HG, et al. Evidence for occurrence of the ESAT6 protein in Mycobacterium tuberculosis and virulent Mycobacterium bovis and for its absence in Mycobacterium bovis BCG[ J]. Infect Immun, 1996, 64(1): [5] Menzies D, Pai M, Comstock G. Meta-analysis: new tests for the diagnosis of latent tuberculosis infection: areas of uncertainty and recommendations for research[ J]. Ann Intern Med, 2007, 146(5): [6] Pai M, Zwerling A, Menzies D. Systematic review: T-cell based assays for the diagnosis of latent tuberculosis infection: An update[ J]. Ann Intern Med, 2008, 149(3): [7] Porsa E, Cheng L, Graviss EA. Comparison of an ESAT-6/ CFP-10 peptide-based enzyme-linked immunospot assay to a tuberculin skin test for screening of a population at moderate risk of contracting tuberculosis[ J]. Clin Vaccine Immunol, 2007, 14(6): [8] Hill PC, Jackson-Sillah D, Fox A, et al. ESAT-6/CFP-10 fusion protein and peptides for optimal diagnosis of mycobacterium tuberculosis infection by ex vivo enzyme-linked immunospot assay in the Gambia[ J]. J Clin Microbiol, 2005, 43(5): [9] Wu X, Li Q, Yang Y, et al. Latent tuberculosis infection among new soldiers in Chinese army: comparison of and tuberculin skin test[ J]. Clin Chim Acta, 2009, 405(1-2): [10] DiStasio AJ 2nd, Trump DH. The investigation of a tuberculosis outbreak in the closed environment of a US Navy ship, 1987[ J]. Mil Med, 1990, 155(8): [11] Zhang CY, Dong EJ, Zhu L, et al. Tuberculosis infection survey in new recruits to the army in Beijing( )[ J]. J Prev Med Chin PLA, 2007, 25(3): [ 张翠英, 董恩军, 朱琳, 等. 驻京部队 2003~2006 年新兵结核感染情况调查 [ J]. 解 放军预防医学杂志, 2007, 25(3): ] [12] Kang YA, Lee HW, Yoon HI, et al. Discrepancy between the tuberculin skin test and the whole-blood interferon gamma assay for the diagnosis of latent tuberculosis infection in an intermediate tuberculosis-burden country[ J]. JAMA, 2005, 293(22): [13] Mori T, Harada N, Higuchi K, et al. Waning of the specific i n ter f e ro n - gamma response a f ter y ears o f t u b e rc u l o s i s infection[ J]. Int J Tuberc Lung Dis, 2007, 11(9): [14] Guang PF, Xu HZ, Pu YY, et al. The sur veillance report on immunization effect and inoculation quality of neonatals receiving BCG[ J]. Prac Prev Med, 2003, 10(3): [ 管培 煜, 徐惠忠, 浦永元, 等. 新生儿卡介苗接种后免疫效果和接 种质量监测结果报告 [ J]. 实用预防医学, 2003, 10(3): ] [15] Doherty TM, Demissie A, Olobo J, et al. Immune responses to the Mycobacterium tuberculosis-specific antigen ESAT-6 signal subclinical infection among contacts of tuberculosis patients[ J]. J Clin Microbiol, 2002, 40(2): [16] Bakir M, Millington KA, Soysal A, et al. Prognostic value of a T-cell-based, interferon-gamma biomarker in children with tuberculosis contact[ J]. Ann Intern Med 2008, 149(11): [17] Hill PC, Jackson-Sillah DJ, Fox A, et al. Incidence of tuberculosis and the predictive value of ELISPOT and Mantoux tests in Gambian case contacts[ J]. PLoS One, 2008, 3(1): e1379. [18] Andersen P, Doherty TM, Pai M, et al. The prognosis of latent tuberculosis: can disease be predicted[ J]? Trends Mol Med, 2007, 13(5): [19] Dosanjh DPS, Hinks TSC, Innes JA, et al. Improved diagnostic evaluation of suspected tuberculosis[ J]. Ann Intern Med, 2008, 148(5): ( 收稿日期 : ; 修回日期 : ) ( 责任编辑 : 熊晓然 )

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