中国防痨杂志年月第卷第期 34$$+*&3+#(#5 如果.5 水平升高既有可能是分泌.5 的效应, 细胞数量增加也有可能是单个细胞的分泌水平增加所致因此 4 方法是在群体细胞水平检测.5 的分泌情况重点检测.5 的生成量只是间接反映机体的细胞免疫功能二对 :64 检测结果的临

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了锹喻
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1 中国防痨杂志年月第卷第期 34$$+*&3+#(#5 述评干扰素释放试验临床应用的价值问题与展望吴雪琼梁艳王国治我国的结核病疫情和结核分枝杆菌 7$* 感染情况都相当严重潜伏结核感染 #"$$$+*&+ #'&$,- 是宿主感染 7$* 后没有结核病临床表现和影像学改变的一种带菌状态应用试验检测我国,- 率约为 22 应用酶联免疫斑点试验 (!#!!+)$""(8, 检测健康人群,- 率约为 2,- 者未经治疗约有会发展成活动性结核病若同时伴有感染这种概率会更高,- 者是结核病患者的重要来源新诊断的活动性肺结核患者是由其发展而来的此外年第五次全国结核病流行病学抽样调查结果显示岁及以上人群活动性肺结核的患病率为 2 万涂阳的肺结 2 核患病率为万这意味着临床结核病患者中的活动性肺结核是菌阴患者由此可见,- 和菌阴结核病的诊断和鉴别诊断是当前结核病防控中面临的重大难题尽管以结核菌素皮肤试验 $+*&+# $$,, 作为评价,- 的方法存在争议但长期以来试验依然是临床上最常用且最简便的一种,- 的主要检测手段反应越强表示结核感染可能性越大由于包含许多非结核分枝杆菌及卡介菌的共同抗原成分因此试验的特异度差尤其是在实行卡介苗儿童计划免疫的中国近年来干扰素释放试验 $'%"!!" #"""(:64 作为一种新型的细胞免疫检测技术已用于临床检测但对其临床价值存在较大争议为此中华医学会结核病学分会和中华结核和呼吸杂志编辑委员会组织专家撰写了干扰素释放试验在中国应用的建议笔者对于 :64 在临作者单位北京解放军第三九医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室吴雪琼梁艳中国食品药品检定研究院菌苗一室王国治通信作者吴雪琼!"#+0%/+&! 床应用过程中大家所关切的问题进行阐述并对其应用前景进行展望! 在临床应用中存在的问题一对 :64 两种技术的原理缺乏了解目前临床上应用的结核感染, 细胞免疫检测的 :64 技术有两种一是 8, 一是酶联免疫吸附试验 (!#!!+*$""( 4 :64 8, 方法也称为细胞检测采用的 8, 技术是细胞培养技术与 4 技术结合产生的新的检测技术固相酶联免疫斑点技术可从万个外周血单个核细胞 -7 中检出每个分泌干扰素.5 的细胞结核感染者 -7 被 7$* 特异性抗原刺激后活化的, 淋巴细胞 5 细胞单核细胞树突状细胞分泌的.5 被位于细胞下方的包被在膜上的抗.5 单克隆抗体所捕获洗去细胞后通过酶联免疫显色在膜上细胞分泌.5 的相应位置上显现清晰可辨的斑点通过显微镜人工计数或通过全自动的斑点图像分析仪计数斑点个斑点代表个分泌.5 的细胞可计算出分泌.5 细胞的频率这些细胞被称为斑点形成细胞 )$'!%&#. 斑点的强弱和数量反映了机体效应, 细胞对刺激物的反应能力和分泌.5 的能力因此 8, 方法是在单细胞水平检测.5 的分泌情况重点检测活细胞的功能即检测单个细胞分泌.5 的能力及分泌.5 的细胞频率结果直观清楚如果检验员认真遵循标准化的操作流程重复性也较好可直接反映机体的细胞免疫功能 :64 4 方法全血检测采用的是经典的 4 技术可从!# 外周血中检测出细胞分泌的.5 的总量结核感染者外周血经 7$* 特异性抗原刺激后活化的, 淋巴细胞 5 细胞单核细胞树突状细胞和少量的造血干细胞等分泌产生.5 通过酶联免疫显色反应在酶标仪上测定吸光度根据标准曲线计算出分泌.5 的量

2 中国防痨杂志年月第卷第期 34$$+*&3+#(#5 如果.5 水平升高既有可能是分泌.5 的效应, 细胞数量增加也有可能是单个细胞的分泌水平增加所致因此 4 方法是在群体细胞水平检测.5 的分泌情况重点检测.5 的生成量只是间接反映机体的细胞免疫功能二对 :64 检测结果的临床意义不太清楚认识存在偏面性 :64 试验是通过人体的效应, 细胞是否被 7$* 特异性抗原激活分泌.5 而间接地判断机体内是否存在 7$* 感染 :64 检测阳性说明存在 7$* 感染临床上可用于,- 的诊断菌阴结核病的辅助诊断和鉴别诊断 8, 斑点数越高或.5 水平越高结核感染的可能性越大目前 :64 试剂盒主要以 7$* 增殖期早期分泌抗原 4, 培养滤液蛋白. 为刺激剂并不能区分是,- 带菌者还是活动性结核病患者此外机体的反应存在较大的个体差异受机体免疫状况的影响也受疾病类型的影响一般肺结核结核性胸膜炎和淋巴结核的阳性率高于骨关节结核临床应用后发现也存在假阳性和假阴性问题 :64 阴性并不能排除,- 的可能性虽然在免疫功能低下合并感染血液病器官移植和使用免疫抑制剂等结核病患者中 :64 8, 方法不受患者外周血淋巴细胞数差异的影响较 :64 4 更能客观准确地反映机体对 7$* 特异性的免疫功能敏感度高于 :64 4 方法和试验但部分患者, 细胞功能异常较免疫功能正常的结核病患者更易出现假阴性而肿瘤等患者也可能出现非特异性的.5 释放而导致假阳性应引起高度重视三应用目前商品化的 :64 试剂盒检测非血体液标本的效果缺乏验证部分实验室直接应用目前商品化的 :64 试剂盒直接检测非血液标本是不合适的因为目前销售的 :64 8, 试剂盒和 :64 4 试剂盒均是用于检测血液标本的其检测流程及界限值并不完全适用于非血体液标本目前国内外多数报道应用 :64 8, 方法少数报道应用 :64 4 方法检测非血体液标本如胸腔积液脑脊液腹腔积液支气管灌洗液等结果显示非血体液标本 :64 的敏感度及特异度高于血液标本胸腔积液 8, 检测的假阳性率明显低于血液标本这是因为效应, 细胞在浆膜腔或支气管黏膜局部浸润集聚所致似乎胸腔积液采用 :64 8, 检测的诊断效能高于 :64 4 方法但目前研究报道较少患者例数也不多因此尚需进行大样本量研究确定 :64 检测非血体液标本的操作流程诊断标准和临床价值并获得国家食品药品监督管理局的临床批文 :64 是否可用于检测关节腔积液标本也需进一步研究四以试剂盒的名称作为 :64 技术方法的名称不妥目前采用 :64 8, 方法的试剂盒主要有英国牛津免疫技术公司研制的结核感染, 细胞斑点试验,8,,- 试剂盒以 7$* 基因组差异区 %''&6 中的 4,. 合成多肽为刺激抗原和 )$9 试剂盒后者在,8,,- 试剂盒的基础上掺入了 61& 也位于 6 多肽抗原使其检测灵敏度提高了 2 上海铭源数康生物科技有限公司生产的.8, 结核分枝杆菌效应, 细胞检测试剂盒以. 与 4, 融合蛋白为刺激剂采用 :64 4 方法的试剂盒主要有澳大利亚 #$!$"%&$"4+$"#" 制备的 ;+"$. 685,-$$;., 试剂盒以抗原为刺激剂和 ;+"$. 685,- :# ;.,: 试剂盒以 4,. 合成多肽为刺激抗原最近又出现了一种改良的试管方法 ;+"$. 685,-:#,+*$$;.,:, 试剂盒以 4,. 和,- 合成多肽为刺激抗原,- 位于 6 2 这个试剂盒均已获得美国.4 批文 ;.,: 试剂盒已获得我国的医疗器械证书北京万泰生物药业股份有限公司生产的结核感染, 细胞检测试剂盒和海南海口, 公司生产的 7$* 特异性细胞免疫反应检测试剂盒两者均以 4, 与. 融合蛋白为刺激剂由于,8,,- 试剂盒首先在国内推广应用有些人将,8, 作为 :64 检测的代名词这是不准确的五生产厂家对 :64 检测试剂盒的质量控制需要加强试剂盒中检测试剂的生产应注意下列几个问题淋巴细胞分离液.&# 的质量这是有效分离 -7 的关键试剂.&# 质量好细胞回收率高植物血凝素 4 很容易失效应关注制备时大肠杆菌中表达的重组蛋白抗原的纯度应达到以上以免导致假阳性所有实验试剂细胞培养板等均应做无菌处理应注意无菌操作以免发生污

3 2 中国防痨杂志年月第卷第期 34$$+*&3+#(#5 染界限值的设定要合理六两种 :64 方法操作步骤较多对检验技术人员的素质及检验质量要求较高操作人员认真负责的态度仔细准确的操作将决定实验结果的可靠性 :64 8, 方法有一定的技术难度尤其是 -7 的分离计数及形成斑点的准确计数是检测的关键环节个过多可能会导致假阳性过少可能会导致假阴性不能完全根据全自动的斑点图像分析仪的斑点计数报告结果对于处于临界值的结果应肉眼进行核对血液采集后最好在 2 内分离放置时间不要超过随着放置时间的延长效应, 细胞的活化会受到影响冷冻保存的 -7 形成斑点的细胞数减少使检测敏感度降低操作中还应注意避免对细胞的损伤和微生物的污染以免导致假阴性结果或影响结果的判定目前的 :64 8, 检测较难实现高通量检测但其结果直观清楚重复性较好较适用于临床检验 :64 4 方法相对比较成熟操作简便快速经济通过显色反应在酶标仪上测定吸光度与标准曲线比较得出.5 总量若应用自动化的酶标检测仪较易实现高通量的检测较适用于体检筛查其主要问题是无论是应用仪器自动化或手工操作干扰因素较多尤其是温度和时间的影响最大导致板与板间吸光度值差别大批内与批间的重复性不太好结核! 试验在临床应用需要深入研究的问题近年来 :64 试验逐步在临床推广应用取得了显著进展对其试验的本质也有了较清醒的认识但 :64 试验所反映的深层次的基础问题及临床意义值得我们更深入地探讨一 :64 试验原理所反映的基础问题结核感染者 -7 被 7$* 特异性抗原刺激后增殖分化形成效应, 细胞并分泌细胞因子其中分泌.5 的效应, 细胞通过 :64 8, 检测而分泌的.5 通过 :64 4 检测需要进一步探讨的问题是 :64 8, 试验所产生的斑点是 7$* 特异性抗原刺激, 细胞后所形成的效应, 细胞还是效应, 细胞分泌的细胞因子如白细胞介素白细胞介素进一步诱导产生的效应, 细胞这种次级效应有多强次级效应活化的, 细胞和产生的.5 是否是 :64 8, 和 :64 4 产生假阳性的原因目前认为 8, 的斑点代表分泌.5 的细胞斑点的数量和强弱反映了机体分泌.5 的细胞的频率和对刺激物的反应能力与机体的细胞免疫功能直接相关但个斑点是否真能代表个分泌.5 的细胞斑点的大与小是如何形成的有何意义目前结核感染的诊断没有金标准如何确定 :64 的界限值以准确地反映结核感染的真实情况二试验与两种 :64 方法的相关性试验与两种 :64 方法三者之间一致性差相关性低 2 目前,- 的诊断缺乏金标准无法评价试验和两种 :64 方法诊断的准确性试验与两种 :64 方法一致性差的原因分析由于中含有许多分枝杆菌包括致病性分枝杆菌环境中非致病性分枝杆菌和卡介菌共同的抗原理论上试验诊断 7$* 感染的特异度低不能鉴别是 7$* 感染还是接触环境中非结核分枝杆菌或卡介苗接种后造成的致敏而 :64 方法应用 4, 和. 作为抗原刺激剂其编码基因只存在于 7$* 牛结核分枝杆菌非洲分枝杆菌和 2 种非结核分枝杆菌堪萨斯分枝杆菌海分枝杆菌苏尔加分枝杆菌微黄分枝杆菌基因组中在卡介苗和大多数环境非结核分枝杆菌基因组中缺失笔者根据手臂上有无卡痕来判断是否接种了卡介苗例平均年龄岁的男性新兵有卡痕试验硬结平均直径!!:64 8, 检测. 平均为个其中例试验阳性硬结平均直径为 22!!2 例为 8, 阳性平均. 为个例 2 无卡痕试验硬结平均直径!!:64 8, 检测. 平均为 2 个其中例是试验阳性硬结平均直径为 2!! 例为 8, 阳性. 平均为 22 个 2 例试验阴性的无 -: 接种者中例 :64 8, 检测阳性由此可见该人群的结核自然感染率为在试验阳性的卡介苗接种人群中扣除结核自然感染率还有 22 的阳性者可能是由于卡介苗接种和环境非结核分枝杆菌感染所致两种 :64 方法虽然敏感度低于试验但特异度

4 中国防痨杂志年月第卷第期 34$$+*&3+#(#5 高不受卡介苗接种和环境非结核分枝杆菌感染的影响这对于普种卡介苗的国家如我国是非常有益的 :64 方法能够更有效地筛查结核感染试验是将注射于人体皮肤内激发 7$* 感染的机体产生细胞免疫反应激活, 淋巴细胞单核细胞和巨噬细胞释放大量细胞因子并使这些细胞增殖聚集包裹抗原形成结节被称为迟发型变态反应 #"($()()$1$( 型因此皮肤反应可通过激活记忆, 细胞反应检测潜伏休眠的 7$* 感染这可能是应用试验检测,- 人群的阳性率较高的另一个原因由于,- 者体内的 7$* 并不是完全处于静息状态而是不定期增殖即休眠期和复制期不定期地转换当体内 7$* 增殖分泌蛋白 4,. 激活致敏机体时 :64 检测才可能出现阳性因此特异性.5 应答是依赖于抗原介导的效应, 细胞的存在 :64 检测的是效应, 细胞而不是记忆, 细胞效应, 细胞存活时间短检测的是近期感染或活动性感染两种 :64 试验检测,- 人群的阳性率低于试验如笔者对例胸片上显示肺部有钙化点的新兵进行试验和 8, 试验结果试验阳性硬结平均直径 22!! 而 8, 试验 2 阳性平均. 为个 :64 8, 方法和 :64 4 方法一致性差的原因分析从方法学上来说 8, 技术是从单细胞水平进行检测可及时捕获细胞分泌于表面的细胞因子因此 :64 8, 检测的敏感度高于 :64 4 方法可从万个细胞中检出个分泌.5 的细胞当,- 者体内的 7$* 真正处于潜伏休眠状态时其效应, 细胞并不会被 7$* 早期分泌蛋白 4,. 所激活而不分泌.5 此时 :64 检测呈现假阴性当,- 者体内 7$* 处于早期激活状态时少部分效应, 细胞被 7$* 早期分泌蛋白 4,. 所激活但分泌.5 的水平较低应用 :64 8, 方法可检出所有分泌.5 的效应, 细胞而 :64 4 方法只能检出那些群体效应, 细胞分泌的.5 水平达到一定量的,- 者因此在这部分人群 :64 8, 检测的敏感度高于 :64 42 而当体内 7$* 处于高度活跃的增殖状态时结核活动感染者或称结核感染高危人群及活动性结核病患者的效应, 细胞分泌的.5 水平较高 :64 8, 和 :64 4 方法检测的敏感度相似三 :64 检测与结核病患者临床状况的关系目前关于 :64 8, 检测的斑点数或 :64 4 检测的.5 水平与结核病患者临床状况的关系尚存在争议部分 7$* 感染者中可检出大量. 和高水平的.5 张娟等和吴雪琼等的研究结果也显示初治结核病患者检测的斑点数明显高于复治患者大多数菌阳患者检测的斑点数显著高于菌阴的患者肺部有空洞患者检测的斑点数明显高于无空洞的患者中青年患者检测的斑点数明显高于老年患者这些现象说明机体免疫功能正常时斑点数越多或.5 水平越高则 7$* 在体内增殖的可能性越大结核活动程度越高机体调动细胞免疫抗结核的作用越强结核活动性感染或活动性结核病的可能性越大这些现象与机体细胞免疫状况密切相关但与结核病严重程度不一定有关系是否与体内 7$* 载量相关尚需进一步研究结核活动性感染者或活动性结核病患者 :64 检测大多数为阳性. 或.5 水平增高经过有效抗结核治疗后体内 7$* 被杀灭或抑制抗原分泌减少诱导的细胞免疫应答降低 :64 再次检测时活化的效应, 细胞数减少释放.5 的水平下降部分受检者下降至界限值以下使 :64 的检测结果由阳性转阴性四卡介苗接种对 :64 检测的影响理论上卡介苗接种不影响 :64 检测的特异度目前我军驻京部队仍实行对试验阴性的入伍新兵进行卡介苗接种的策略笔者多次研究结果均证实卡介苗接种前后或个月后 :64 8, 检测的. 数量基本一致差异无统计学意义对例入伍新兵检测血液中.5 水平例有卡痕者 )%!# 和例无卡痕者 )%!# 差异无统计学意义显然卡介苗虽具有免疫增强作用但 :64 检测不受卡介苗接种的影响这对于普种卡介苗国家进行,- 者的筛查及结核病的防控具有现实的意义五肿瘤对 :64 检测的影响 :64 检测应用于临床后发现肺癌和癌性胸膜炎的患者也会出现 :64 阳性笔者的研究显示约的胸部肿瘤 :64 8, 会出现假阳性未发表资料刘旭辉等报道肺癌患者,8,,- 的假阳性率为而黄毅等应用 :64 4

5 中国防痨杂志年月第卷第期 34$$+*&3+#(#5 检测肺癌和肺炎的假阳性率分别为和不同类型肺癌患者之间的假阳性率差异无统计学意义肿瘤患者出现 :64 检测阳性的可能原因如下肿瘤患者可能同时合并结核感染一部分肺癌患者是由肺结核恶变产生的抗肿瘤免疫也主要是由细胞免疫介导的部分肿瘤效应, 细胞在 4, 和. 蛋白刺激下也会非特异性地释放.5 这就是卡介苗制剂具有非特异性免疫增强作用多年来一直用于肿瘤尤其是膀胱癌辅助治疗的主要原因因此 :64 检测在肿瘤患者中的假阳性问题应引起临床大夫的高度重视该方法无法鉴别结核感染和肿瘤但还需进一步扩大肿瘤患者的样本量深入地研究 7$* 特异性抗原是诱导少数还是多数肿瘤效应, 细胞非特异性地释放低水平的还是高水平的.5 这对于了解两种 :64 方法的特异性更好地确定鉴别诊断的界限值是非常有意义的六试验和 :64 检测阳性患者未来发展为活动性结核病的风险评估目前的研究显示无论是试验强阳性者还是 :64 阳性者未来发展为活动性结核病的只是少数笔者随访例强阳性和例 8, 阳性的战士个月均未发病 -" 2 等随访例,8,,- 阳性的涂阳肺结核患者接触者最终例发病由此可见这种方法的检测结果只反映受试者当时机体对 7$* 抗原的细胞免疫应答状况间接说明机体是否感染 7$* 并不能预测 7$* 感染者未来发病的风险但李晋等应用试验和 :64 8, 方法同时检测例肺结核患者密切接触者跟踪随访年结果例发生活动性肺结核病未发病和发病人群第一次试验阳性率和和 8, 试验阳性率和比较试验差异无统计学意义 2 8, 试验差异有显著统计学意义尽管 8, 阳性者发生结核病的可能性大于 8, 阴性者但 8, 阴性者人群数量远大于 8, 阳性者就发病数量而言不一定会低于 8, 阳性者鉴于结核感染者未来是否发病存在很大的个体差异受诸多因素的影响因此结核发病高危人群的筛查仍是未来需要重点攻克的难关之一展望目前尽管就机体对 7$* 感染产生的免疫应答进行了大量的研究并建立了一些新的结核病免疫诊断方法 :64 检测技术在临床推广应用未来可能成为临床免疫学检测的主要方法但它只是诊断结核感染的方法在技术方法上还需不断地发展完善仍有许多问题值得进一步进行研究细胞刺激抗原的筛选 7$* 分泌蛋白和细胞壁表面的蛋白是主要的免疫反应抗原有必要对 7$* 抗原进行进一步分析筛选比较制备以获得特异高效的纯化抗原为结核感染的免疫诊断奠定基础结核感染不同时期分子标志物的研究通过对不同 7$* 感染状态下抗原生物学特性的研究了解 7$* 感染休眠期 7$* 感染增殖期结核病非活动期结核病活动期耐药结核病和肺外结核的抗原结构功能及表达情况发现新的诊断分子标志物以鉴别结核感染与发病多种细胞因子联合检测部分结核病患者 :64 检测阴性.5 水平不升高与其他细胞因子如联合检测可提高检测的敏感度 2 建立新的免疫诊断体系通过研究诊断试剂中的关键原料如标记物新型纳米材料示踪染料等建立新的免疫诊断体系如 :64 化学发光或荧光检测试剂盒的开发将会提高检测的敏感度建立免疫诊断评价体系针对我国结核病的特点建立供结核病免疫诊断制品实验室质量控制用的标准品参考品和评价标准建立规范的结核病免疫诊断试剂临床评价体系使新的免疫诊断方法实现产品化成为可能加强实用性免疫检测仪器的研发研发相配套的免疫检测仪器达到简化操作提高结果判断的客观性和准确性的目的同时实现高通量的检测节省人力产学研用相结合整合科研单位和企业的优势资源联合攻关将免疫基础研究的创新成果有效地转化为诊断产品服务于临床接受临床的验证并进一步改进创新参考文献全国结核病流行病学抽样调查技术指导组第四次全国结核病流行病学抽样调查报告中华结核和呼吸杂志?+<"%E?"%$"#"$$$+*&+#'&$ "!%/&+$$$"!(-%" 472 陈心春廖明凤朱秀云等结核菌特异性.5 8, 检测在活动性结核病和结核感染诊断中的应用中国防痨杂志 2

6 中国防痨杂志年月第卷第期 34$$+*&3+#(#5 2 全国结核病流行病学抽样调查技术指导组全国结核病流行病学抽样调查办公室年全国第五次结核病流行病学抽样调查报告中国防痨杂志 22 徐苗王国治浅谈我国结核分枝杆菌感染人数及其调查方法中国防痨杂志 2 中华医学会结核病学分会中华结核和呼吸杂志编辑委员会干扰素释放试验在中国应用的建议中华结核和呼吸杂志 2222 (5#45(%$"#4#)" (!#!!+)$8,""('+!"$ ')&'& "$*(&$% &#3!!+# 7$ 黄毅党丽云郭琪等全血干扰素释放试验对结核病与恶性肿瘤患者检测结果的比较研究中国防痨杂志 2 白雪娟梁艳刘银萍等 8, 检测胸水干扰素效应, 细胞对结核性胸膜炎的诊断价值研究中国病原生物学杂志 2 +.:"7="%<$"#$'%"!!"#"" "()'!"&')#+"#'#+"))"#*#)#+"# $+*&+#8 "%3E6"%5$"##&"#9$#$(',/ $'%"!!"6#"4"(#+"#.#+'$"% ',+*&+#+#+(,+*&6) +# 2 7-&&77"$"4$"#6#'$0+"$ ',-$$+#%+$)#+"#$+*&+#"!+#$&$ $+($ 3!!+)"$# "!"&#2 ",34$"#!)1"%$& 1"#+"$'+)&$$+*&+#4$ 7 2 2""&4&$:."*"$"#;+"$. 685,- :#,+*$$ ;.,:,'$&%'#"$$ $+*&+#&$!!%"$$$"#(5/ 7&*# 2 蒋俊结核分枝杆菌感染, 细胞斑点试验的质量控制与质量保证中国防痨杂志 22 梁艳王兰张翠英等两种干扰素释放试验及试验结果在结核感染论断中的比较中国防痨杂志 22 王兰梁艳吴雪琼等年驻京部队入伍新兵结核感染及随访情况分析解放军医学杂志?+<+E"%E$"# 1"#+"$'"$+*&+# /# *# $' &!#+!&$!!+""( "!%!#$"(&+$7#"%, 22 张娟孙娇李莹等例结核感染, 细胞斑点试验检测阳性患者的临床分析中国防痨杂志?+<;"%E$"##&"#1"#+"$'"!!"(!#!!+)$""('$"%'"& $1$+*&+# "7#-$&#2 白雪娟梁艳阳幼荣等卡介苗接种对酶联免疫斑点试验检测结核分枝杆菌感染的影响中国防痨杂志梁艳吴雪琼王兰等应用酶联免疫斑点试验检测入伍新兵结核潜伏感染中国感染控制杂志 2222 刘旭晖乐军张忠顺等干扰素释放试验 :64 的诊断价值探讨高感染率背景下的研究结果中国防痨杂志 2-"77#%$4("#4$"#%$&1"#+' ",&#*"$'%"!!"*!"&# /$ $+*&+#&$"&$ 4 $ 72 李晋杨倩婷岳建荣等干扰素释放试验与结核菌素皮肤试验在肺结核患者密切接触者随访中的应用比较中国防痨杂志 2 收稿日期本文编辑薛爱华读者作者编者关于外文字母使用正体的常用场合计量单位符号和词头数学式中的运算符号指数和对数函数符号特殊常数符号缩写符号等例如连加 # 自然对数 #% 常用对数 #! 极限圆周率!" 最大值! 最小值等生物学中亚族以上含亚族的拉丁文学名及定名人 2 化学元素符号仪器元件样品等的型号或代号用作序号和编号的字母例如附录 4 组 - 外文的人名地名书名和机关名及其缩略语首字母缩写词等本刊编辑部

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材料方法生物技术通报姜燕采用鼠抗人血红蛋白单克隆抗体和胶体金标记鼠抗人血红蛋白单克隆抗体及对照抗体羊抗鼠利用双抗体免疫夹心反应原理特异性地结合人血红蛋白抗原在内可得到胶体金显色结果的原理研制便潜血单克隆一步法胶体金检测试卡用于诊断因各种原因引起的消化道出血疾病应用杂交瘤技术制备两株鼠抗人血红蛋白抗体方法检测效价免疫胶体金技术制备胶体金检测试卡法检测效价的结果显示鼠抗人