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1 Rapid ID 32 STREP 只限用於体外诊断 4 小时快速鉴定链球菌的鉴定系统快速 ID 32 STREP 是可在 4 小时内鉴定链球菌和有关细菌的鉴定系统 它由标准化 微量化的酶反应和相应数据库组成 本系统能鉴定的所有细菌见使用说明后的菌名表 读取结果和判定鉴定结果即可自动进行也可人工进行 原理快速 ID 32 STREP 鉴定试条包括 32 个小孔, 每孔含有一种脱水培养基及基质 培养 4 小时后通过 ATB 仪或微型 API 仪检测或肉眼观察反应结果 然后通过鉴定软件的判断分析得到鉴定结果 试剂一个快速 ID 32 STREP 试剂盒包括 : 25 条快速 ID 32 STREP 鉴定试条 ; 25 个培养用的盒子 ; 25 份结果报告单 ; 1 份使用说明 另需以下产品 ( 不包括在试剂盒内 ): 悬浮液 2ml(#70 600) 或 3ml(#70 630)( 如用 ATB 接种器 ); 试剂 :NIN 试剂 (#70 490),FB 试剂 (#70 560); VP 试剂 A(#70 570) 和 VP 试剂 B(#70 580); 棉签 (#70 610); ATB 电子加样器 (#99 040) 或接种器 (#15 740) 和 Tip 头 (#15 710); 浊度仪 : 浊度计 (#99 234) 或 ATB 浊度仪或麦氏标准浊度管 (#70 900); ATB Express 仪或微型 API 仪和鉴定软件 ; 安瓿管架子 (#70 200) 需配备的实验室设备 : 37 培养箱冰箱本生灯或酒精灯记号笔 培养基和试剂的成份 悬浮液 2ml 或 3ml FB 试剂 蒸馏水 坚牢兰 BB(>0.1%) 0.35g 12- 烷基 - 硫酸钠 7.5g 有机溶剂 NIN 试剂 VP A 试剂 VP B 试剂 R20/21/22: 吸入 接触皮肤 吞咽均有害 R36: 刺激眼睛 S53: 避免暴露试剂 ( 避免接触皮肤和眼睛, 雾化吸入, 和过热 ) 茚三酮 7g 2- 甲基 - 乙醇 R60: 可致不孕 R10: 易燃 R20/21/22: 吸入 接触皮肤 吞咽均有害 S53: 避免暴露试剂 ( 避免接触皮肤和眼睛, 雾化吸入, 和过热 ) KOH 20g 蒸馏水 腐蚀性 R35: 致严重灼伤 S2: 放在小孩接触不到的地方 S26: 假如进入眼睛, 立即用充足的水冲洗并找医生 S27: 立即脱下所有污染的衣服 S37/S39: 戴上适合的手套, 保护眼 脸 α- 萘酚 12g 有机溶剂 R60: 可致不孕 R10: 易燃 R20/21/22: 吸入 接触皮肤 吞咽均

2 有害 S53: 避免暴露试剂 ( 避免接触皮肤 和眼睛, 雾化吸入, 和过热 ) 贮存快速 ID 32 STREP 鉴定试条 NIN 和 FB 试剂 2-8 保存, 包装袋上标有有效日期 VP 试剂 A 可在室温存放 打开安瓿将试剂倒入滴管瓶后, 试剂的有效期为一个月 试剂开启后立即倒入滴瓶, 并在瓶身记录开启日期 NIN 试剂对水和空气敏感, 应用干燥的吸管分装在滴瓶中, 并确保盖严瓶子 FB 试剂对光敏感, 应用铝箔包住瓶子, 用时才拿出冰箱, 不要在外放置时间过长 FB 试剂一变黑褐色, 应立即弃用 试剂的使用使用前应将试剂置室温 (20 ~30 ) 1. VP A 和 VP B 试剂 : - 按 注意事项 指南打开装有试剂的安瓿 ( 有滴嘴帽 ) - 滴一滴试剂 - 用完后小心盖好瓶盖, 按 试剂保存 指南保存试剂 2. FB 试剂 : - 按 注意事项 指南打开装有试剂的安瓿 ( 无滴嘴帽 ) - 用干燥吸管吸取安瓿管中的试剂放入滴瓶中 ( 含有脱水底物的活化成分 ) - 把滴头装好 - 小心盖紧滴瓶 - 振摇 - 等 5 分钟至活化成分完全溶解 - 使用这个重新配好的试剂, 小心盖好滴瓶, 按 试剂保存 指南保存试剂 3. NIN 试剂 : - 按 注意事项 指南打开装有试剂的安瓿 ( 无滴嘴帽 ) - 用干燥吸管吸取安瓿管中的试剂放入滴瓶中 - 把滴头装好 - 滴一滴试剂 - 用完后小心盖好瓶盖, 按 试剂保存 指南保存试剂 注意事项 : 仅用于体外诊断 实验技术人员需进行无菌操作并且警惕病原菌的传染 不要用嘴通过吸管吸取样本或试剂 不要使用过期试剂 置冰箱试剂使用之前应放至室温 (20 ~30 ) 按以下方法小心打开安瓿管 : - 用一手垂直握住安瓿管 ( 白色的塑料管向上 ) - 用力向下压住盖子 - 用拇指压在瓶盖的斜面向外用力折断瓶盖里面的安瓿管上部 - 对无滴嘴帽的安瓿管 : 小心移动盖子 - 有滴嘴帽的安瓿管 : 将安瓿倒置, 保持垂直位置, 挤压瓶盖将所有试剂挤入滴管瓶中 所有接种物均需认作具有传染性, 应适当处理 所有病人标本和微生物培养物均是潜在的传染体, 并根据 1993 年 NCCLS M29-T2:CDC 微生物学和生物医学实验室的生物安全手册 预防污染 在完成实验, 读取和判定结果后, 所有的标本 溢出物和培养物品均须高压灭菌, 经杀菌剂浸泡或烧毁 结果的解释应由了解病人的病史 标本来源 菌落特征及显微镜形态学特征的微生物专家的进行, 若有需要应结合抗生素敏感情况 使用说明 标本和细菌培养物均应当作传染体, 并由受过训练 有经验的技师做适当处理 无菌操作和对细菌的防备措施均应按严格的操作程序进行 ; 防备措施参考 :(NCCLS M29-T2, 第 2 版, 试行指南 : 防止实验人员通过血液 体液 和组织感染传染性疾病的保护措施 ) 附加的预防措施, 参考 微生物学和生物医学实验室的生物安全手册 (CDC , 第 3 版,1993 年 5 月 ) 或各国的规程 菌落的选择根据革兰氏染色, 触酶等确定菌株属链球菌属 - 记录溶血类型 (a 或 B) 和产色素情况 ( 作为补充实验 ) - 挑取一个单菌落在 Columbia 绵羊血平板上划线 ( 加或不力粘菌素 / 萘啶酮酸 ) 培养 - 根据菌株生长条件在厌氧或好氧条件下于 35 一 37 培养 小时 注意 : 在 24 小时培养后 B 溶血链球菌和肠球菌的菌落已足够大, 而对于其它链球菌最好厌氧培养 48 小时 鉴定试条的准备 从包装袋中取出鉴定试条 ;

3 去掉干燥剂 ; 盖上鉴定试条的盖子 ; 在鉴定试条伸出的边沿处记录菌株信息 接种液的准备 打开一支装有 2ml 悬浮液 ( 如用 ATB 接种器则 3m1) 的安瓿或用一支装有无菌蒸馏水的试管 用消毒棉签从血平板上擦下菌落, 制成菌悬液, 浊度调整到浊度计 No.30 处 ( 相当于 4 麦氏单位 ) 注意 : 如果自动读取鉴定试条的结果, 必须用浊度计调整菌悬液浊度 ( 至 No.30) 0.E) 的值 ; 第 11 位数是 CDEX,URE(1.F,0.F) 的值 将这组 11 位数编码输入计算机, 通过鉴定软件得鉴定结果 无乳链球菌 接种自动接种 : 分别将鉴定试条, 装有菌悬液的安瓿和 Tip 头装在 ATB 接种器的架子上 接种器将自动混匀安瓿中菌悬液, 分加在各孔中加入 55μl 手工接种 : 一混匀安瓿中的菌悬液, 然后用 ATB 电子加样器将其分加在各孔中 (55μl/ 孔 ) 盖上鉴定试条的盖子 好氧条件下在 37 培养 4 小时 读取结果观察 0 行的反应 : -VP 试验 (0.0 孔 ): 分别加一滴 VP 试剂 A 和 VP 试剂 B; -APPA 到 GTA( 孔 ): 各加一滴 FB 试剂 ; -HIP 试验 (0.6 孔 ): 加一滴 NIN 试剂 5 分钟后观察结果 ( 不要超过 10 分钟 ) 自动读取结果 : - 使用 ATB Express 仪或微型 API 仪 阅读器会检测每孔的颜色, 并将数据输入计算机 人工读取结果 : - 根据结果判定要点, 在记录单上记下结果 鉴定自动读取结果后 : - 计算机通过鉴定软件分析得到鉴定结果 人工读取结果后 : - 将所得的结果转换成数字编码, 根据编码检索表得到鉴定结果 在结果报告单上, 每三个试验划为一组, 每组中的试验如阳性分别值 1,2,4( 如阴性则为 0) 然后将各组中 3 个试验得值相加 得到一组 11 位数的编码, 前 4 位数是 (1.0-1.B) 的值, 接着 4 位数是 (0.0-0.B) 的值, 最后 3 位数由下面补充试验组成 : 第 9 位数是 SAC,LARA,DARL(1.C,1.D,1.E) 的值 ; 第 10 位数是 MBDG,TAG,BMAN(0.C,0.D, 废弃物的处理所有使用过的安瓿 鉴定试条 Tip 头都要经过高压灭菌 焚烧或经消毒剂浸泡处理后再丢弃 范围快速 ID 32 STREP 系统仅限于鉴定包括在数据库中的链球菌, 不能用于鉴定其它的微生物或排除它们的存在 建议使用快速 ID 32 STREP 鉴定试条时为得到准确结果应注意以下几点 : 根据使用手册使用推荐的培养基 (Columbia 血平板 ); 调整菌悬液浊度在 diode No.30( 如果用 ATB Express 仪或微型 API 仪读取结果, 须用浊度计检测 ) 或 4 麦氏单位 ; 用 ATB 电子加样器或接种器准确分加 55μl 于每孔中 ( 尤其在用 ATB Express 仪或微型 API 仪自动读取结果时 ); 注意培养时间 (4 小时 最多不超过 5 小时 ) 和读取结果时间 ( 滴加试剂后 分钟 ); 选用合格的指示剂, 注意有效日期和保存条件 安瓿打开后超过一个月不要再使用

4 质量控制生产厂家已对不同保存时期的鉴定试条进行了系统的质控检查, 对于希望进行质控的试验者建议使用以下菌株 : 1. 马链球菌马亚种 (Streptococcus equi ssp equi)atcc 猪丹毒丹毒丝菌 (Erysipeiothrix rhusiopathiae)atcc 鸟肠球菌 (Enterococcus avium)atcc 格氏李斯特菌 (Listeria grayi)atcc 无乳链球菌 (Streptococcus agalactiae)atcc 解糖链球菌 (Streptococcus saccharolytious)atcc 前庭链球菌 (Streptococcus vestibularis)atcc 49124

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