云 南 农 业 大学 学报 菌病 害 标 本 种 分 别 选择 新 鲜 症 状 典 型的 标 本 又 或 直 接抱 子 振 落 法 进 行单 抱 分 离 箱 提 精选 小 麦 种 子 片 灭 菌 水 冲洗 两组 径 对 照 用 清水 粒 置入 倍 鉴定 先将 系列 浓 度 产 生 菌 的鉴 定 天

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2 云 南 农 业 大学 学报 菌病 害 标 本 种 分 别 选择 新 鲜 症 状 典 型的 标 本 又 或 直 接抱 子 振 落 法 进 行单 抱 分 离 箱 提 精选 小 麦 种 子 片 灭 菌 水 冲洗 两组 径 对 照 用 清水 粒 置入 倍 鉴定 先将 系列 浓 度 产 生 菌 的鉴 定 天 抱子 形状 定 件 观察 菌 的 生 长 色 泽 菌落 形 态 着生部位 然 后 用 黑暗 法 购入 配 制成 并 得 保 留时 间为 法纯 化 存在 再经 由峰 面积 大 小 定 颜色 排列方 法等 菌 丝形 态 培养基上 接在 特征 分 生抱 子 梗 及 分 生 按通常 鉴定方法 进行 属的分类 鉴 的 方 法 选 拔认 可 的 菌 株 按 分别 变 换 接 种 各 株 系 进 行 培 养 比 较 天 促使 幼 芽生 图 从 将 生 测 显 示 有 活性 的 菌 株 高 产 菌 株 复筛 及 产 品 提 纯 观 测 幼根 解析 确认 天 用 柱 层析 和 倍系列浓度 作 成 标 准检 量 线 用 保 留 时 间与 标 样 吻 合 的 峰 即 视 为 天然 培养 倍 标 准 试样 然 后 将 生 测 表 现 出 活 性 的 粗 抽 提物 结合 取 灭菌 液 或 其 近似 成 分 温 箱 中培 养 取 乙 组 烧 杯 中各 移 入 待 测 粗 品 稀 释 其上 垫 层 灭 菌圆 形 滤 纸 甲 组 烧 杯 中各 移 入 预 先 配 制 好 的 标 准 次 加 溶 剂抽 多菌灵 悬浮 液 内吸 温 处理 八 杯底 各 放 入小 玻球 粒 每 浓 度 重复 天然型 量 低 温冰 胚 芽 鞘 生 长法 长 有 无 抑 制 现 象而 初 步 判 断 抽提 粗 品 中 是 否 含 有 低 温 冰 箱 保存 备 用 刚 好 浸没 种 子 柑 桔 皮 粉 培 养后 预浸 空瘪 系列浓度 分析 用 组 织 分 离 或稀 释 法 菌种 接 入 煮 至 半 熟 灭 菌 麦粒 上 纸上再各 匀 布小麦种子 采 用 抑制 小 麦 汰除 病 损 高 表面消毒 纯 化 培养 快 速 生 测 筛选 试 验 培 养基 为 浓缩 干 燥 即 得 粗 品 烧杯 卷 保 存 备用 生 产 培 养 与抽 提 第 装 入 保鲜 袋 置 低 温 冰 箱 中保 存 光照 测 定 产生 天 交替 培 养 固定 培 养 基 和 培 养 条 量 的 多少 培 养基 加 产 量 提 高 培 养 后 抽 提 得粗 产 品 用 柱 层析 选 拔 较 高 产株 系 照射蓝光培养等方 桔 皮粉 和 分 离 提纯 结果 菌 种 分 离 与 生 产 抽提 染 株 系外 生产 获菌种 株 采 集 植 物 真 菌 病 害 标本 共 计 依 次编 为 抽 提 液浓缩 得粗 品 天然 十 后 分别是 (+ 应用 H PLC 结合 H ) A N M 按方法 除 弃污 进行培养 菌 种 培养 或 其 近 似 物 生 物 活性 的 共 有 方法 生物 测 定 结 果 按 株 其中 或 其近 似 物. 的 鉴 定 按 1 4 的 方 法 对 各 抽提 物 作 预 处 理 去 杂 纯 化 : 图 2 证 实 经 生 测 筛选 初 步 判 定 的 菌 解析 B A R 已分离 培 养基 产 生 菌 的 快 速筛 选 置 冰 箱 内 保存 初 步 断 定 这 些 菌株 能 够 产生 天 然 抽提物中 提 取 物 中 表 现 出 具 有 标堆 株 活性较 高 ( 3 4)

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