上海中医药杂志 5年第 9卷第 期 S H J TCMD 5 V 9N 69 体质量 5m 盐酸异丙肾上 射毛果芸香碱 每 材料与方法 腺素 每 体质量 m 刺激唾液分泌记录给 材料 动物 BABL C小鼠雄性 6 只体质量 8 由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供 实验 动物生产许可证号 SCXK

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1 68 DOI: /j 生 津 润 燥 方 治 疗 干 燥 综 合 征 及 调 控 CD4 + CD25 + Foxp3T 细 胞 /Th17 机 制 研 究 陆 燕 1, 张 启 春 2, 汪 悦 1 2, 朱 浩 涵 1. 江 苏 省 中 医 院 风 湿 免 疫 科 ( 江 苏 南 京 );2. 南 京 中 医 药 大 学 ( 江 苏 南 京 ) 摘 要 目 的 研 究 生 津 润 燥 方 对 免 疫 诱 导 干 燥 综 合 征 模 型 小 鼠 外 周 血 CD4 + CD25 + Foxp3T 细 胞 (Treg 细 胞 ) 及 Th17 细 胞 水 平 的 影 响, 同 时 观 察 腺 体 受 累 的 改 善 状 况 和 外 周 血 淋 巴 细 胞 亚 群 的 变 化 方 法 雄 性 BABL/C 小 鼠 分 为 空 白 组, 模 型 组, 硫 酸 羟 氯 喹 组, 生 津 润 燥 方 高 中 低 剂 量 组 除 空 白 组 外, 其 余 各 组 小 鼠 采 用 免 疫 诱 导 法 建 立 干 燥 综 合 征 小 鼠 模 型 各 组 采 取 相 应 干 预 措 施 采 用 流 式 细 胞 术 检 测 模 型 小 鼠 外 周 血 中 CD4 + CD8 + CD4 + CD25 + Foxp3T 细 胞 及 Th17 细 胞 水 平, 并 测 定 模 型 鼠 唾 液 泪 液 分 泌 量 ; 治 疗 的 末 期, 观 察 下 颌 腺 的 组 织 形 态 学 改 变 结 果 与 空 白 组 比 较, 模 型 组 第 1 周 到 第 4 周 小 鼠 唾 液 和 泪 液 流 量 均 显 著 降 低 (P<0.05); 与 模 型 组 比 较, 生 津 润 燥 方 各 剂 量 组 第 周 小 鼠 唾 液 流 量 和 泪 流 量 升 高 (P<0.05) 与 空 白 组 比 较, 模 型 组 Th17 淋 巴 细 胞 水 平 升 高 (P<0.05) 与 模 型 组 比 较, 生 津 润 燥 方 各 剂 量 组 分 别 可 升 高 CD8 + T 淋 巴 细 胞 水 平, 降 低 Th17 淋 巴 细 胞 水 平, 升 高 小 鼠 Treg 细 胞 水 平, 差 异 有 统 计 学 意 义 (P<0.05) 组 织 形 态 学 观 察 显 示, 生 津 润 燥 方 可 抑 制 模 型 组 小 鼠 颌 下 腺 间 质 的 淋 巴 细 胞 浸 润 结 论 生 津 润 燥 方 通 过 调 节 干 燥 综 合 征 小 鼠 淋 巴 细 胞 的 应 答 作 用, 从 而 能 改 善 SS 小 鼠 的 症 状 关 键 词 干 燥 综 合 征 ;CD4 + ;CD8 + ;Th17;CD4 + CD25 + Foxp3T 细 胞 Theresearchof ShengjinRenzaoPrescription inthetreatmentofsj gren ssyndromeand regulationmechanism ofcd4 + CD25 + Foxp3T/Th17cels LUYan 1,ZHANGQi chun 2,WANGYue 1,ZHUHao han 2 1.JiangsuProvincialHospitalofTCM,Nanjing,Jiangsu;2.NanjingChineseMedicalUniversity,Nanjing,Jiangsu Abstract:Objective TodetecttheimmuneinducedSj gren ssyndromemodelrat scd4 + CD25 + Foxp3Tcels(Treg)andTh17cellevelfromperipheral blood,atthesametimeobservetheimprovementoftheafectedglandsandthechangesofperipheralbloodlymphocytesubsets.methods MaleBABL/Cmice weredividedintoblankgroup,modelgroup,hydroxychloroquinegroupand ShengjinRenzaoPrescription high,middle,low dosegroups.themiceinalthe groupsexcepttheblankgroupwereestablishedthesjogren ssyndromeinmicemodelbytheimmuneinducing.eachgroupwasintervenedrespectively.thelevel ofcd4 + CD8 + CD4 + CD25 + Foxp3TcelsandTh17celintheperipheralbloodofmicewasdetectedbyusingflowcytometry,andsaliva,tearsecretionof modelratswasdetermined;attheendofitstreatment,observethechangeofsubmaxilaryglandtisuemorphology.results Comparedwithblankgroup,saliva andtearsecretionofthemicefromthefirstweektothefourthweekinthemodelgroupdecreasedobviously(p<0.05);comparedwithmodelgroup,salivaandtear secretionofthemicein ShengjinRenzaoPrescription eachdosegroupincreasedfromthesecond,thethirdandthefourthweek(p<0.05).comparedwith blankgroup,thelevelofth17lymphocytecelinmodelgroupincreased(p<0.05).comparedwithmodelgroup, ShengjinRenzaoPrescription eachdose groupcanincreaselevelofcd8 + TlymphocytecelanddecreaseTh17lymphocytecel,andincreaselevelofTregcel,andtherewassignificantdiference (P<0.05).Themorphologicobservationshowedthat ShengjinRenzaoPrescription caninhibitlymphocyteinfiltrationofsubmandibularglandstromainmodel mice.conclusion ShengjinRenzaoPrescription canimprovethesymptomofthessinmicebyadjustingtheresponsefunctionoflymphocytes. Keywords:Sj gren ssyndrome;cd4 + ;CD8 + ;Th17;CD4 + CD25 + Foxp3Tcel 干 燥 综 合 征 (Sj gren ssyndrome,ss) 是 一 种 以 侵 犯 唾 液 腺 和 泪 腺 等 外 分 泌 腺 为 主 的 慢 性 炎 症 性 自 身 免 疫 疾 病, 以 高 度 淋 巴 细 胞 浸 润 为 特 征, 以 明 显 的 口 眼 干 燥 为 常 见 症 状, 同 时 伴 有 其 他 外 分 泌 腺 损 害 SS 免 疫 [ 基 金 项 目 ] 江 苏 省 中 医 药 管 理 局 资 助 项 目 (LZ13032); 国 家 中 医 药 管 理 局 中 医 痹 病 学 重 点 学 科 开 放 基 金 项 目 (BBXK ) [ 作 者 简 介 ] 陆 燕, 女, 博 士, 主 任 中 医 师, 硕 士 生 导 师, 主 要 从 事 风 湿 免 疫 学 方 面 研 究 工 作 异 常 的 主 要 表 现 是 外 分 泌 腺 淋 巴 细 胞 浸 润, 且 大 部 分 为 T 淋 巴 细 胞 生 津 润 燥 方 是 金 实 教 授 多 年 治 疗 干 燥 综 合 征 和 干 眼 症 的 经 验 处 方, 具 有 滋 阴 润 燥 增 液 宣 肺 通 络 布 津 之 功, 临 床 应 用 广 泛 [1] 本 研 究 主 要 考 察 生 津 润 燥 方 对 于 T 淋 巴 细 胞 亚 群 的 调 节 作 用, 以 及 这 种 调 节 作 用 与 腺 体 分 泌 功 能 唾 液 腺 淋 巴 细 胞 浸 润 程 度 的 相 关 性, 从 现 代 医 学 角 度 来 解 释 从 肺 论 治 干 燥 综 合 征 的 作 用 机 制

2 上海中医药杂志 5年第 9卷第 期 S H J TCMD 5 V 9N 69 体质量 5m 盐酸异丙肾上 射毛果芸香碱 每 材料与方法 腺素 每 体质量 m 刺激唾液分泌记录给 材料 动物 BABL C小鼠雄性 6 只体质量 8 由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供 实验 动物生产许可证号 SCXK 沪 药物与试剂 生津润燥方 由北沙参 麦冬 紫 菀 丹参等组成南京中医药大学植物药研究与新药开 8 m 发中心制剂室提供生药含量 5 5m 内总的唾液流量计算 S TFR 将自制的 药后 mm宽的 p H试纸放置在小鼠的眼睑下 5m 测量 ph试纸颜色改变的长度即 S h m 试验 3 T淋巴细胞检测 治疗结束后用肝素化的 硬质微量玻璃采血管从小鼠颞后静脉取血 5μ 流 式细胞分析仪进行外周血淋巴细胞亚群 CD CD8 硫酸羟氯喹 片剂批号 3 上海中西制药 T Th 7检测 CD CD8 细胞检测取5μ抗凝 有限公司 氯化钠 批号 成都市科龙化 血每管中分别加入荧光标记的 CD CD8 单克隆抗 工试剂厂 氯化钾 批号 西陇化工股份有限 体液 μ 振荡混匀室温避光孵育 m 加入溶血 公司 磷酸二氢钾 批号 6 南京化学试剂有限 素 m 振荡混匀室温避光放置m m 公司 磷酸氢二钠 批号 67 南京化学试剂有限 离心 5m 弃上清液 加入 PBS液 m m 离 公司 CMC N 批号 F 3 国药集团化学试剂 弃上清液 加入 PBS液 μ 混匀后上机检 心 5m 有限公司 细胞检测使用 CD和 F x p 3抗体标记Th 7 测 T 3 仪 器 A5型 组 织 匀 浆 机德 国 弗 鲁 克 细胞使用 CD和 I L 7抗体标记方法同上 F u S 酶标仪美 国 伯 腾 B T A u 3 3 颌下腺组织形态学观察 治疗结束处死动 D s d C6流 式 细 胞 仪美 国 BD B 物取颌下腺并以含 甲醛的 PBS溶液 ph7 固 C mp CPS 型 超 声 波 粉 碎 仪上 海 超 声 波 仪 定 h乙醇梯度脱水后进行石蜡包埋制备 3μm厚 器厂 z 的组织切片常规苏木素伊红 HE 染色 参照 Cu 造模 分组及给药 参考文献建立干燥综合征动 的方法 5 进行评价按淋巴细胞浸润的严重程度记为 物模型 取出同种鼠颌下腺用含 5 L叠氮钠 3分 分没有或轻度淋巴细胞浸润 轻度 分少 N3 的 9 N C溶液洗净血迹和污物洗净后粉 N 3分显著的淋巴细胞浸润并 量淋巴细胞浸润 中度 m 离心 碎成匀浆保持 超声破碎 h3 伴有组织破坏 重度 双盲法评分 5m 取上清液用 M磷酸盐缓冲溶液 PBS液 统计学方法 实验数据采用 SPSS 统计软件 稀释成 75m L将颌下腺抗原与等体积的完全弗氏 进行处理 计量资料以 x±s表示采用单因素方差分 5m L 佐剂 FCA 混匀即得注射用抗原液 37 析 以 P 5为差异有统计学意义 将小鼠随机分为空白组模型组硫酸羟氯喹组 结果 只 将 生津润燥方高 中 低剂量组共 6组每组 对腺体分泌功能的影响 与空白组比较给药第 制备好的抗原液分别多点注射于小鼠的足垫 背部皮 周到第 周模型组小鼠唾液和泪液流量均显著低于 下总量为 5m 背部注射百日咳疫苗 5m 空 正常组 P 5 见表 表 白组注射等体积 9 N C溶液 3 周生津润燥方高 中 与模型组比较给药第 将小鼠喂养 周后若颌下腺组织切片病理示淋 剂量组及硫酸羟氯喹组小鼠唾液流量均明显提高给 巴细胞浸润存在则次日开始给药 空白组给予等容积 药第 3 周生津润燥方低剂量组小鼠唾液流量也明显 5 CMC N 模型组给予等容积 5 CMC N 硫 5 生津润燥方 提高差异均有统计学意义 P 酸羟氯喹组给予硫酸羟氯喹 5 生津润燥方 高 中 低剂量组及硫酸羟氯喹治疗组唾液流量各时间 高 中 低 剂 量 组 分 别 给 予 生 津 润 燥 方 7 段差异均无统计学意义 P 5 见表 表 8 7 各组均灌胃给药每日 次共给 药 周 量组及硫酸羟氯喹组小鼠泪液流量明显提高同时给 3 取材及指标检测 3 唾液和泪液流量分析 与模型组比较给药第 3 周生津润燥方高剂 药第 3 周生津润燥方中 低剂量组小鼠泪液流量也 3 各组给药后每周测 5 与硫酸羟 明显提高差异均有统计学意义 P 定 次小鼠唾液的刺激后总流速 s mu d f w 氯喹组比较给药第 周生津润燥方高 中 低剂量组 S TFR 并进行泪液 S h m 试验 小鼠腹腔注射 泪液流量差异有统计学意义 P 5 给药第 3 水合氯醛 每 体质量 5m 中度麻醉后腹腔注 周生津润燥方高 中 低剂量组泪液流量差异无统计学

3 70 意 义 (P>0.05) 与 生 津 润 燥 方 高 剂 量 组 比 较, 给 药 第 2 周 生 津 润 燥 方 中 低 剂 量 组 泪 液 流 量 差 异 有 统 计 学 意 表 1 各 组 小 鼠 唾 液 流 量 比 较 (n=10,x±s,g) 义 (P<0.05); 给 药 第 周 生 津 润 燥 方 各 剂 量 组 泪 液 流 量 差 异 无 统 计 学 意 义 (P>0.05) 见 表 1 表 2 组 别 剂 量 (g/kg) 第 1 周 第 2 周 第 3 周 第 4 周 空 白 组 ± ± ± ±0.05 模 型 组 ± ± ± ±0.08 硫 酸 羟 氯 喹 组 ± ± ± ±0.04 生 津 润 燥 方 高 剂 量 组 ± ± ± ±0.07 生 津 润 燥 方 中 剂 量 组 ± ± ± ±0.08 生 津 润 燥 方 低 剂 量 组 ± ± ± ±0.06 注 : 与 模 型 组 比 较, P<0.05, P<0.01 表 2 各 组 小 鼠 泪 液 流 量 比 较 (n=10,x±s,cm) 组 别 剂 量 (g/kg) 第 1 周 第 2 周 第 3 周 第 4 周 空 白 组 ± ± ± ±0.18 模 型 组 ± ± ± ±0.11 硫 酸 羟 氯 喹 组 ± ± ± ±0.20 生 津 润 燥 方 高 剂 量 组 ±0.26 # 1.14± ± ±0.19 生 津 润 燥 方 中 剂 量 组 ±0.12 # 0.90± ± ±0.13 生 津 润 燥 方 低 剂 量 组 ±0.23 # 0.89± ± ±0.10 注 : 与 模 型 组 比 较, P<0.05, P<0.01; 与 硫 酸 羟 氯 喹 组 比 较,#P<0.05; 与 生 津 润 燥 方 高 剂 量 组 比 较, P< 对 外 周 T 淋 巴 细 胞 阳 性 率 的 影 响 与 空 白 组 比 表 3 较, 模 型 组 CD4 + T 淋 巴 细 胞 有 所 升 高 ; 与 模 型 组 比 较, 硫 酸 羟 氯 喹 组 和 生 津 润 燥 方 高 剂 量 组 CD4 + T 淋 巴 细 胞 水 平 有 所 降 低, 但 差 异 均 无 统 计 学 意 义 (P>0.05) 生 津 润 燥 方 高 低 剂 量 组 之 间 CD4 + T 淋 巴 细 胞 水 平 差 异 有 统 计 学 意 义 (P<0.05) 见 表 3 与 空 白 组 比 较, 模 型 组 CD8 + T 淋 巴 细 胞 有 所 降 低, 但 差 异 无 统 计 学 意 义 (P>0.05) 与 模 型 组 比 较, 生 津 润 燥 方 低 剂 量 组 小 鼠 CD8 + T 淋 巴 细 胞 水 平 明 显 升 高, 差 异 有 统 计 学 意 义 (P<0.01) 与 生 津 润 燥 方 高 剂 量 组 比 较, 生 津 润 燥 方 低 剂 量 组 小 鼠 CD8 + T 淋 巴 细 与 空 白 组 比 较, 模 型 组 Th17 淋 巴 细 胞 水 平 升 高, 差 异 有 统 计 学 意 义 (P<0.05) 与 模 型 组 比 较, 生 津 润 燥 方 高 低 剂 量 组 Th17 淋 巴 细 胞 水 平 降 低 (P<0.05), 但 生 津 润 燥 方 中 剂 量 组 Th17 淋 巴 细 胞 水 平 无 显 著 变 化 (P>0.05) 见 表 3 与 空 白 组 比 较, 模 型 组 Treg 淋 巴 细 胞 水 平 差 异 无 统 计 学 意 义 (P>0.05) 与 模 型 组 比 较, 生 津 润 燥 方 中 剂 量 组 小 鼠 Treg 淋 巴 细 胞 水 平 升 高 (P<0.05) 与 生 津 润 燥 方 中 剂 量 组 比 较, 生 津 润 燥 方 低 剂 量 组 Treg 淋 巴 细 胞 水 平 差 异 有 统 计 学 意 义 (P<0.05) 见 表 3 胞 水 平 明 显 升 高, 差 异 有 统 计 学 意 义 (P<0.01) 见 表 3 各 组 小 鼠 CD4 + T CD8 + T Th17 Treg 淋 巴 细 胞 水 平 比 较 (n=10,x±s,%) 组 别 剂 量 (g/kg) CD4 + T 淋 巴 细 胞 CD8 + T 淋 巴 细 胞 Th17 淋 巴 细 胞 Treg 淋 巴 细 胞 空 白 组 ± ± ± ±0.46 模 型 组 ± ± ± ±0.49 硫 酸 羟 氯 喹 组 ± ± ± ±0.50 生 津 润 燥 方 高 剂 量 组 ±0.25 # 0.21±0.12 ## 0.90± ±0.79 生 津 润 燥 方 中 剂 量 组 ± ± ± ±0.53 生 津 润 燥 方 低 剂 量 组 ± ± ± ±0.18 注 : 与 模 型 组 比 较, P<0.05, P<0.01; 与 生 津 润 燥 方 低 剂 量 组 比 较,#P<0.05,##P<0.01; 与 生 津 润 燥 方 中 剂 量 组 比 较, P< 对 颌 下 腺 组 织 形 态 学 的 影 响 模 型 组 小 鼠 颌 下 坏 死, 间 质 未 见 充 血 水 肿 和 炎 细 胞 浸 润 等 病 理 变 化 腺 间 质 可 见 淋 巴 细 胞 浸 润, 腺 泡 上 皮 和 导 管 未 见 变 性 见 图 1 坏 死, 各 给 药 组 小 鼠 颌 下 腺 腺 泡 上 皮 和 导 管 未 见 变 性

4 上海中医药杂志 5年第 9卷第 期 S H J TCMD 5 V 9N 7 图 各组小鼠颌下腺组织病理 HE染色 3 讨论 原发性干燥综合征的发病是一个多基因 多因素 参与的过程表现为外分泌腺体的破坏进而导致器官 功能障碍 6 外分泌腺的破坏与持续的淋巴细胞浸润 的泪液分泌功能 生津润燥方对模型小鼠外分泌腺的 改善具有一定的作用 本研究用实时荧光定量 PCR技术以及流式细胞 术从 mrna和蛋白水平检测模型小鼠外周血 CD T 密切相关在细胞免疫过程中T淋巴细胞发挥作用进 细胞 CD8 T细胞 Th 7细胞及 T 细胞水平 T细 而引起 B淋巴细胞功能的异常产生多种自身抗体 多 胞亚群中包括有 CD 淋巴细胞 辅助 诱导 T细胞 和 克隆的免疫球蛋白以及免疫复合物致使泪腺和唾液 CD8 淋巴细胞 抑制 细胞毒 T细胞 前者调节 协助 腺等组织发生炎症反应和破坏性病变进而引起干燥 免疫反应后者抑制免疫效应 杀伤靶细胞 8 机体的 综合征的发生 7 相对免疫平衡状态主要由它们之间的相互影响来维 颌下腺病理分析发现模型组小鼠颌下腺间质可 持两亚群细胞比例的失调会产生免疫功能失常 见淋巴细胞浸润说明造模成功 而各给药组小鼠均无 本研究结果显示干燥综合征模型小鼠 CD T细 颌下腺病理变化表明生津润燥方高 中 低剂量均能 胞阳性率有一定水平升高生津润燥方高剂量组 CD 不同程度地抑制颌下腺淋巴细胞的浸润对模型小鼠 T细胞有所降低 干燥综合征模型小鼠 CD8 T细胞阳 颌下腺的组织形态学改变具一定的防治作用 性率呈下降趋势生津润燥方低剂量组 CD8 T细胞升 唾液流量和泪液流量的检测结果显示模型组小 高 P 5 模型组 CD T细胞升高CD8 T细胞 鼠唾液和泪液流量显著低于正常组小鼠其差异具有 降低有利于局部产生自身免疫性疾病的自身抗体从 5 说明模型组的小鼠外分泌腺腺 统计学意义 P 而导致腺泡或腺管的损伤和破坏 9 生津润燥方高剂 体受到不同程度的损伤这些腺体的损伤使其唾液和 量组的 CD 淋巴细胞增殖转化能力较模型组小鼠有 泪液的分泌功能明显下降 在各给药组中高 中剂量 所降低而生津润燥方低剂量组 CD8 T细胞增殖转化 组给药后第 周起低剂量组在给药后第 周均可明 能力有所升高说明生津润燥方对淋巴细胞免疫功能 显提高小鼠唾液流量 中剂量组在给药后第 3周起可 的调节发挥正向作用维持了机体的免疫平衡 明 显 提 高 小 鼠 泪 液 流 量其 差 异 有 统 计 学 意 义 有研究表明干燥综合征中 B淋巴细胞的活性增 5 说明生津润燥方各给药组均能提高模型小 P 强和 T淋巴细胞缺陷有关 T细胞是淋巴细胞中数 鼠的唾液分泌功能因此生津润燥方可用于临床上改 量最多 功能最复杂的一类细胞 在免疫系统中 善患者口干症状 对小鼠泪液分泌的影响生津润燥方 T细胞为最重要的免疫细胞之一活化的 T细胞产生分 在达到一定剂量并使用一段时间后可以提高模型小鼠 子信号进一步刺激 B细胞的分化和发育完成免疫反

5 72 应 研 究 发 现 新 型 的 CD4 + T 细 胞 亚 群 Th17 细 胞 以 及 高 表 达 的 CD4 + CD25 + (hi)foxp3 + T 细 胞 ( 即 Treg 细 胞 ) 在 自 身 免 疫 性 疾 病 慢 性 炎 症 反 应 肿 瘤 等 过 程 中 发 挥 重 要 作 用 T 淋 巴 细 胞 作 为 原 发 性 干 燥 综 合 征 发 病 媒 介,Th17 细 胞 是 机 体 中 不 同 于 Th1 和 Th2 细 胞 的 一 种 新 型 CD4 + Th 细 胞 亚 群, 具 有 独 立 的 分 化 和 发 育 调 节 机 制, 参 与 自 身 免 疫 的 调 节 大 量 研 究 证 实, Th17 细 胞 与 自 身 免 疫 疾 病 之 间 的 关 键 纽 带 即 为 IL 17 因 子 IL 17A 作 为 Th17 细 胞 分 泌 的 代 表 性 因 子, 具 有 强 烈 的 促 炎 作 用, 可 诱 导 促 炎 细 胞 因 子 趋 化 因 子 基 质 金 属 蛋 白 酶 表 达 和 急 性 期 反 应 蛋 白 产 生, 引 起 组 织 破 坏 [12] 调 节 性 T 细 胞 (regulatorycel), 即 Treg 细 胞, 是 一 类 控 制 体 内 自 身 免 疫 反 应 性 的 T 细 胞 亚 群, 可 分 为 天 然 产 生 的 自 然 调 节 性 T 细 胞 和 诱 导 产 生 的 适 应 性 调 节 性 T 细 胞 自 然 调 节 性 T 细 胞 主 要 为 CD4 + CD25 + Treg, 其 特 征 标 志 为 其 高 表 达 转 录 因 子 Foxp3, 故 本 实 验 以 CD4 + CD25 + Foxp 3T + 细 胞 作 为 Treg 细 胞 的 检 测 指 标 Treg 细 胞 以 效 应 细 胞 为 作 用 对 象, 能 够 对 效 应 细 胞 所 介 导 的 免 疫 应 答 进 行 调 控 [13] Treg 细 胞 具 有 抑 制 炎 症 反 应 的 作 用, 通 过 对 机 体 自 身 反 应 性 T 细 胞 和 效 应 性 T 细 胞 的 选 择 性 抑 制 是 免 疫 自 稳 形 成 和 维 持 的 重 要 机 制 之 一, 其 正 常 水 平 和 功 能 有 助 于 免 疫 系 统 对 自 身 抗 原 的 刺 激 建 立 良 好 的 耐 受 状 态, 避 免 自 身 免 疫 性 疾 病 的 发 生 [14] 本 实 验 结 果 表 明, 干 燥 综 合 征 模 型 小 鼠 Th17 细 胞 阳 性 率 明 显 升 高 (P<0.05), 而 Treg 细 胞 差 异 无 明 显 改 变 (P>0.05); 生 津 润 燥 方 高 低 剂 量 组 Th17 细 胞 水 平 显 著 降 低 (P<0.05); 生 津 润 燥 方 中 剂 量 组 Treg 细 胞 水 平 显 著 升 高 (P<0.05) 模 型 组 小 鼠 Th17 细 胞 免 疫 应 答 增 强, 自 身 免 疫 应 答 亢 进 生 津 润 燥 方 给 药 组 Th17 细 胞 应 答 减 弱,Treg 细 胞 应 答 增 强, 不 仅 可 以 发 挥 抑 制 过 度 亢 进 的 Th17 的 重 要 作 用, 又 可 以 使 激 活 的 自 身 反 应 性 T 淋 巴 细 胞 减 少, 从 而 维 持 机 体 自 身 的 免 疫 功 能 因 此, 可 以 认 为 生 津 润 燥 方 能 对 干 燥 综 合 征 小 鼠 的 淋 巴 细 胞 免 疫 功 能 的 调 节 发 挥 作 用 综 上, 生 津 润 燥 方 通 过 调 节 干 燥 综 合 征 小 鼠 淋 巴 细 胞 的 应 答 作 用, 改 善 症 状, 对 干 燥 综 合 征 具 有 一 定 的 疗 效 参 考 文 献 : [1] 韩 善 夯, 金 实, 刘 征 堂, 等. 宣 肺 布 津 颗 粒 治 疗 原 发 性 干 燥 综 合 征 38 例 临 床 研 究 [J]. 中 国 中 医 药 信 息 杂 志,2008,15(12): [2] 肖 林, 杨 军, 暨 兴 华, 等. 干 燥 综 合 征 模 型 的 建 立 [J]. 重 庆 医 学, 2003,32(3):306. [3] 吴 国 琳, 普 兴 宏. 养 阴 益 气 活 血 法 对 干 燥 综 合 征 NOD 小 鼠 颌 下 腺 的 干 预 作 用 研 究 [J]. 西 部 中 医 药,2012,25(6): [4] 钟 琴, 曹 跃 朋, 刘 正 奇, 等. 白 芍 总 苷 对 干 燥 综 合 征 模 型 小 鼠 饮 水 量 和 唾 液 量 及 T 细 胞 亚 群 的 影 响 [J]. 风 湿 病 与 关 节 炎,2013,2 (11):39 41,69. [5]CutlerLS,BulisD,GreinerDI.Experimentalautoalergicsialadenitisin thelew rat:areproducibleanimalmodelofsj gren ssyndrome[j]. TransplantProc,1987,19(11): [6] 吴 琛. 原 发 性 干 燥 综 合 征 Th17 细 胞 研 究 [D]. 北 京 : 北 京 协 和 医 学 院,2011. [7] 魏 斐 菲, 杨 麟, 王 永 福.Th17 细 胞 及 IL 17 与 干 燥 综 合 征 的 研 究 进 展 [J]. 包 头 医 学 院 学 报,2013,29(6): [8] 王, 曹 炬, 张 莉 萍. 多 种 炎 性 疾 病 患 者 外 周 血 CD4 + 和 CD8 + T 淋 巴 细 胞 的 检 测 与 临 床 意 义 分 析 [J]. 检 验 医 学 与 临 床,2014,11 (21): ,2957. [9] 覃 羽 华, 岑 光 旅, 韦 叶 生, 等. 原 发 性 干 燥 综 合 征 患 者 T 细 胞 亚 群 及 CD4 + CD25 + T 细 胞 检 测 的 意 义 [J]. 右 江 民 族 医 学 院 学 报,2010, 32(5): [10] 岳 鸿 丽, 吕 昭 萍. 原 发 性 干 燥 综 合 征 血 液 系 统 损 伤 的 研 究 进 展 [J]. 中 华 临 床 医 师 杂 志 : 电 子 版,2012,6(16): [11] 周 洲, 冯 娟, 王 宪. 调 节 性 T 细 胞 的 分 化 及 其 影 响 因 素 [J]. 生 物 物 理 学 报,2012,28(2): [12] IvanovI,MokenzieBS,ZhouL,etal.Theorphannuclearreceptor RORgammatdirectsthediferentiationprogram ofproinflammatoryil 17 + Thelpercels[J].Cel,2006,126(6): [13] 莫 莉, 许 礼 发. 调 节 性 T 细 胞 与 风 湿 性 疾 病 [J]. 中 华 临 床 医 师 杂 志 : 电 子 版,2011,5(11): [14] 冯 宁 翰, 吴 宏 飞, 吴 军, 等.CD4 + CD25 + Treg 细 胞 调 节 T 细 胞 作 用 机 制 的 实 验 研 究 [J]. 南 京 医 科 大 学 学 报,2004,18(4): 编 辑 : 季 春 来 收 稿 日 期 :

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