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1 血 管 瘤 型 禽 白 血 病 的 诊 断 * 王 锡 增, 张 丹 英 ( 厦 门 正 大 农 牧 有 限 公 司, 厦 门 ) 摘 要 : 禽 白 血 病 是 由 反 转 录 病 毒 科 禽 白 血 病 / 肉 瘤 病 毒 群 病 毒 (AL/SV) 引 起 的 禽 类 多 种 肿 瘤 性 疾 病 的 总 称, 感 染 率 高, 发 病 率 低,AL/SV 可 通 过 水 平 和 垂 直 两 种 方 式 传 播 感 染 鸡 群, 是 危 害 养 鸡 业 的 主 要 疾 病 之 一 为 了 对 2010 年 5 月 份 发 生 于 福 建 省 福 清 某 农 场 商 品 蛋 鸡 疑 似 禽 白 血 病 的 疫 情 进 行 确 诊, 采 用 流 行 病 学 调 查 病 理 检 查 病 原 核 酸 鉴 定 等 进 行 诊 断, 针 对 ALV 群 特 异 性 抗 原 P27 基 因 进 行 PCR 扩 增, 肝 脏 病 料 样 本 中 核 酸 的 检 出 率 为 100%(3/3), 且 对 同 样 肝 脏 病 料 样 品 进 行 gp85 基 因 PCR 扩 增, 结 果 检 出 率 为 33.3%(1/3) 试 验 结 果 表 明, 该 疫 病 是 由 A J 亚 群 禽 白 血 病 病 毒 引 起 的 血 管 瘤 型 禽 白 血 病 关 键 词 : 禽 白 血 病 ; 流 行 病 学 ; 病 理 变 化 ;PCR 鉴 定 Diagnosis of Hemangioma Type of Avian Leucosis in Layers Wang Xizeng, Zhang Danying (Xiamen CHIATAI AGRICULTURE CO.,LTD.,XiaMen ) Abstract: Avian leucosis is a joint name of a variety of tumor diseases in avian caused by avian leucosis/sarcoma virus(al/sv),infection with AL/SV is widespread in commercia1 poultry flocks,but the incidence of death is usually low. AL/SV can infect chicks by the vertical and horizontal transmission. Avian leucosis is mainly a disease of the chicken industry.in order to diagnose definitely a loemia that occurred in a layer flock in Fuqing Fujian in May,2010,the epidemiological investigation,pathological lesion observation,and PCR identification were carried out.the PCR has been performed against P27 gene of ALV group specific antigen and the detectionrates of etiological nucleic acid in liver samples were 100% (3/3), and the gp85 gene of ALV envelope glycoprotein were 33.3%(1/3).The results suggested that this loemia was caused by subgroup A J of avian leukosis virus. Keywords:Avian leucosis;epidemiology;pathological lesion;pcr identification 0 引 言 禽 白 血 病 (Avian leucosis,al ) 是 危 害 养 禽 业 的 一 种 重 要 传 染 病, 是 由 禽 白 血 病 病 毒 (Avian leucosis virus,alv) 引 起 的 家 禽 多 种 肿 瘤 性 疾 病 的 总 称, 主 要 以 造 血 细 胞 恶 性 增 生 为 特 征 的 一 类 传 染 病, 包 括 淋 巴 细 胞 性 白 血 病 成 红 细 胞 性 白 血 病 成 髓 细 胞 性 白 血 病 骨 髓 细 胞 瘤 病 血 管 瘤 内 皮 瘤 肾 真 性 瘤 纤 维 肉 瘤 和 骨 化 石 症 等 [1,2] 血 管 瘤 型 禽 白 血 病 是 由 ALV 引 起 的 肿 瘤 性 疾 病 之 一, 属 于 内 皮 性 肿 瘤, 多 为 血 管 内 皮 细 胞 增 生 形 成 [3] 血 管 瘤 易 发 于 病 鸡 皮 肤 或 内 脏 器 官 的 表 面, 瘤 壁 破 裂 后 引 起 流 血 不 止, 病 鸡 表 现 贫 血 症 状 并 常 死 于 大 量 失 血 该 病 自 1908 年 首 次 报 道 并 分 离 到 ALV 以 来, 世 界 上 许 多 国 家 都 有 发 生, 但 由 于 该 病 造 成 的 直 接 经 济 损 失 相 对 较 小, 并 未 受 到 重 视 直 到 1988 年,J 亚 群 禽 白 血 病 在 世 界 范 围 内 发 生 [4], 给 养 禽 业 造 成 了 巨 大 的 经 济 损 失 [5] 该 病 的 危 害 主 要 表 现 在 以 下 几 个 方 面 : 一 是 直 接 发 病, 病 鸡 产 生 肿 瘤, 最 终 死 亡 ; 二 是 导 致 感 染 鸡 产 生 免 疫 抑 制, 易 造 成 发 病 鸡 继 发 其 它 病 原 的 多 重 感 染, 对 疫 苗 免 疫 应 答 差, 严 重 影 响 鸡 的 生 产 性 能 [6], 三 是 通 过 直 传 播 危 害 子 代 鸡, 所 以 祖 代 或 父 母 代 鸡 场 一 旦 发 病, 将 会 严 重 影 响 鸡 雏 的 质 量 因 此,ALV 对 养 禽 业 造 作 者 简 介 : 王 锡 增 (1984-), 男, 长 期 从 事 兽 医 临 床 工 作. zhangdanying5558@163.com - 1 -
2 成 的 危 害 是 多 方 面 的 禽 白 血 病 在 我 国 已 广 泛 存 在, 近 几 年 该 病 的 流 行 日 趋 严 重, 特 别 是 自 2009 年 初 以 来, 湖 北 山 东 等 地 鸡 白 血 病 疑 似 病 例 频 发, 鸡 群 ALV 的 感 染 率 高 达 60%, 病 死 率 高 达 50% 以 上 2010 年 5 月 期 间 福 建 福 清 某 商 品 蛋 鸡 群 发 生 一 起 疑 似 禽 白 血 病 的 疫 情, 为 对 本 次 疫 情 做 出 确 诊, 本 文 采 用 流 行 病 学 调 查 病 理 剖 检 和 病 原 核 酸 鉴 定 等 3 个 方 面 进 行 了 诊 断, 现 将 试 验 结 果 报 告 如 下 1 材 料 与 方 法 1.1 发 病 情 况 调 查 1.2 病 理 学 观 察 对 病 蛋 鸡 进 行 剖 检, 观 察 并 记 录 其 病 变 取 发 病 鸡 的 心 肝 脾 肾 肌 胃 胰 脏 等 主 要 脏 器, 切 成 大 小 约 为 1cm 1cm 0.5cm 的 组 织 块, 10% 中 性 甲 醛 溶 液 固 定, 石 蜡 包 埋 切 片, H.E 染 色 后 供 病 理 组 织 学 镜 检 1.3 禽 白 血 病 病 原 核 酸 鉴 定 RNA 提 取 病 料 总 RNA 样 本 提 取 取 3 只 病 鸡 肝 病 料 分 别 剪 碎, 按 1 5 的 比 例 添 加 生 理 盐 水 研 磨 组 织 匀 浆 液 用 MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver.4.0 试 剂 盒 提 取 RNA, 按 试 剂 盒 说 明 书 操 作 RT-PCR 用 TransScript TM Two-Step RT-PCR SuperMix 试 剂 盒 对 提 取 的 总 RNA 反 转 录 后 进 行 ALV 特 异 性 PCR 扩 增 引 物 的 设 计 与 合 成 通 过 GenBank 数 据 库 获 蛋 鸡 ALV 基 因 序 列,ALV 引 物 引 物 合 成 由 广 州 Invitrogen 公 司 完 成 针 对 禽 白 血 病 病 毒 P27 [7-11] 基 因 设 计 禽 白 血 病 病 毒 群 特 异 性 引 物 Pl/P2, 上 游 引 物 : 5 -TATGCCTTATGGATGGACGCTT-3, 下 游 引 物 : 5 -ATCTGGCTGTGACTTCTGCCTA-3, 片 段 大 小 为 405bp; 同 时 针 对 A 亚 群 禽 白 血 病 病 毒 多 聚 酶 poly 基 因 的 3 端 选 择 设 计 上 游 引 P3, 针 对 A 亚 群 禽 白 血 病 病 毒 gp85 基 因 的 可 变 序 列 选 择 设 计 下 游 引 物 P4,P3/P4 [9-12] 即 赋 予 PCR 扩 增 的 A 亚 群 特 异 性, 上 游 引 物 : 5 -GGA TGA GGT GAC TAA GAA AG-3 下 游 引 物, 片 段 大 小 :5 -CGA ACC AAA CCT AAC ACA CG PCR 扩 增 测 序 与 PCR 条 件 :PCR 反 应 总 体 系 为 50 μl, 包 括 2 μl RT 产 物,2 μl 10 pmol/ul 目 的 基 因 引 物, 25 μl 2 TransScript TM HiFi PCR supermix Ⅱ,ddH 2 O Pl+P2 引 物 按 下 列 条 件 进 行 扩 增 :95 预 变 性 5 min, 然 后 进 人 34 个 循 环,94 变 性 40 [13-15] s,56 退 火 1 min,72 延 伸 1 min 最 后 72 再 延 伸 10 min P3+P4 引 物 采 用 95 5 min,94 30 S,60 1 min,72 1 min,2 cycles, 之 后 每 两 个 循 环 退 火 温 度 降 1, 直 至 退 火 温 度 为 46, 在 此 退 火 温 度 上 循 环 25 个 循 环,72 延 伸 10 min - 2 -
3 取 5 μl PCR 产 物 在 2% 琼 脂 糖 凝 胶 上 电 泳 回 收 与 预 计 产 物 长 度 相 似 的 条 带 并 送 大 连 宝 生 物 公 司 测 序 测 序 结 果 与 Genbank 已 有 的 cdna 序 列 行 Blast 比 较 分 析, 结 果 显 示 ALV 表 现 出 较 高 的 同 源 性 结 果 2 结 果 2.1 发 病 情 况 调 查 饲 养 至 140 日 龄 时 蛋 鸡 群 开 始 发 病, 主 要 表 现 鸡 冠 苍 白 皮 肤 表 面 ( 包 括 头 部 背 部 胸 部 及 翅 膀 ) 可 见 直 径 为 1.5~2.0 cm 的 血 疱, 青 紫 色, 顶 部 已 结 痂, 质 地 柔 软, 界 限 分 明, 血 疱 附 近 的 羽 毛 染 上 大 片 血 污 血 疱 破 裂 以 后 流 血 不 止, 病 鸡 因 出 血 过 多 而 死 亡 在 疫 病 流 行 期 间 死 鸡 呈 现 缓 慢 上 升 的 趋 向, 至 170 日 龄 时 蛋 鸡 群 的 死 亡 率 达 到 8.57% 剖 检 6 只 病 死 鸡, 胴 体 普 遍 消 瘦, 胸 骨 轻 度 弯 曲 ; 肝 脾 肾 肿 胀, 肝 表 面 覆 盖 一 层 血 凝 块, 掀 开 血 凝 块 后, 肝 被 膜 表 面 及 边 缘 可 见 多 个 凸 起 的 血 疱, 直 径 为 0.5~1 cm, 呈 现 鲜 红 色 或 暗 红 色 (2/6, 占 33.3%) 肝 脏 表 面 及 实 质 可 见 大 小 不 等 的 灰 白 色 肿 瘤 结 节, 肿 瘤 结 节 与 周 围 肝 组 织 分 界 清 楚, 不 凸 出 于 肝 脏 表 面 (1/6, 占 16.7%) 心 外 膜 亦 可 见 少 量 的 血 疱, 直 径 较 小 (1~3 mm); 肺 表 面 观 察 到 紫 红 色 或 鲜 红 色 的 血 疱 相 嵌 在 淡 红 色 的 肺 组 织 中, 显 现 色 彩 斑 斓 的 病 变 特 征 (1 /6, 占 16.7%) 卵 巢 发 育 不 完 全, 未 见 成 熟 的 卵 泡 (3/6, 占 50%) 法 氏 囊 已 经 萎 缩 或 消 失 (5/6, 占 83.3%) 图 片 1,2,3. 图 1 病 鸡 爪 有 出 血 图 2 肝 脏 表 面 肿 瘤 图 3 肝 脏 表 面 表 面 及 可 见 多 个 血 疱 Fig. 1 The claw had hemorrhage Fig. 2 tumor on liver Fig. 3 Blood blister on liver 2.2 组 织 病 理 学 观 察 血 管 瘤 主 要 分 布 在 肝 脏 脾 脏 肾 脏 等 主 要 内 脏, 血 管 瘤 发 育 呈 现 出 不 同 的 阶 段, 在 同 一 个 内 脏 中 往 往 有 多 个 甚 至 密 布 的 血 管 瘤 存 在 有 部 分 病 例 中 就 在 血 管 瘤 周 同 的 间 质 中 即 含 有 髓 样 细 胞 瘤, 髓 样 细 胞 呈 圆 形, 较 大, 胞 质 中 含 有 嗜 酸 性 红 色 颗 粒, 胞 核 偏 于 一 侧 有 部 分 病 例 在 心 脏 肝 脏 脾 脏 或 肾 脏 内 出 现 数 量 不 等 局 灶 范 嗣 不 一 的 髓 样 细 胞 瘤 肝 脏 结 构 破 坏 严 重, 肝 细 胞 结 构 模 糊 不 清, 肝 索 结 构 基 本 消 失 肝 组 织 出 血 严 重, 髓 样 细 胞 在 组 织 内 散 在 分 布, 同 时 还 有 大 量 炎 性 细 胞, 见 图 5 图 5 肝 脏 病 理 切 片 HE 染 色 (100 ) Fig 5 Histopathology change (HE 100 ) - 3 -
4 2.3 病 原 核 酸 鉴 定 结 以 P1/P2 引 物 进 行 PCR 扩 增, 从 病 鸡 肝 病 料 样 本 扩 增 出 一 条 约 405 bp 的 条 带, 与 预 期 扩 增 长 度 相 符, 而 ddh 2 O 对 照 样 本 显 现 阴 性 反 应 ( 图 1) 结 果 表 明, 发 病 蛋 鸡 群 已 感 染 了 禽 白 血 病 A 亚 群 病 毒 以 P3/P4 引 物 进 行 PCR 扩 增, 从 病 鸡 肝 病 料 样 本 中 一 个 样 品 扩 增 出 一 条 约 545 bp 的 条 带, 其 余 样 品 和 ddh 2 O 对 照 样 本 呈 现 阴 性 反 应 ( 图 2) 结 果 表 明, 发 病 蛋 鸡 群 部 分 同 时 已 经 感 染 禽 白 血 病 J 亚 群 病 毒 M. DNA 标 准 DL 5000;1~3 送 检 病 样 ;N. 空 白 对 照 M. DNA Marker DL 5000; 1-3 samples; N. Control 图 1 禽 白 血 病 病 毒 P27 基 因 PCR 扩 增 结 果 图 2 A 亚 群 禽 白 血 病 病 毒 gp85 基 因 PCR 扩 增 Fig 1 The amplification of P27gene for ALV Fig 2 The amplification of gp85 gene for ALV-A 3 讨 论 3.1 血 管 瘤 是 禽 白 血 病 的 一 种 临 床 症 状, 由 禽 白 血 病 病 毒 引 起, 病 毒 侵 害 鸡 血 管 内 皮 细 胞 时, 形 成 血 疱, 在 感 染 鸡 内 脏 器 官 或 体 表 皮 肤 成 为 血 管 瘤 血 管 瘤 通 常 单 个 出 现 在 皮 肤 或 内 脏 表 面, 瘤 内 充 盈 血 液, 最 终 血 疱 溃 破 流 血, 部 分 病 鸡 常 因 大 量 失 血 引 起 贫 血 归 于 死 [16] 亡 ; 血 疱 出 现 在 内 脏 器 官 时, 造 成 鸡 胸 腔 腹 腔 积 血, 也 会 加 速 病 鸡 死 亡 张 向 磊 在 110~170 日 龄 的 蛋 鸡 群 中 观 察 到 爪 部 和 胫 部 出 现 血 疱, 血 疱 较 柔 软, 其 内 充 满 血 液, 根 据 临 床 表 现 和 剖 检 变 化 初 步 诊 断 为 鸡 病 毒 性 血 管 瘤 病 本 次 发 病 的 商 品 蛋 鸡 群 经 实 验 室 诊 断 确 诊 为 由 A 亚 群 禽 白 血 病 病 毒 引 起 的 血 管 瘤, 从 病 鸡 体 表 皮 肤 和 肝 脏 均 可 看 见 血 疱, 某 些 病 鸡 血 疱 已 经 破 溃 一 般 而 言, 禽 白 血 病 在 商 品 鸡 群 中 普 遍 存 在, 但 出 现 临 床 症 状 的 病 鸡 数 量 并 不 多, 鸡 群 呈 渐 进 性 发 生 和 持 续 性 的 死 亡, 蛋 鸡 群 产 蛋 率 下 降 单 纯 的 血 管 瘤 病 死 率 高, 但 A 亚 群 禽 白 血 病 病 毒 除 侵 害 毛 细 血 管 内 皮 细 胞 形 成 血 管 瘤 外, 还 可 能 侵 害 B 淋 巴 细 胞, 形 成 淋 巴 细 胞 性 血 病, 破 环 鸡 的 免 疫 系 统 [17-18] 一 旦 发 展 为 淋 巴 细 胞 白 血 病, 病 鸡 死 亡 率 将 大 幅 上 升, 造 成 大 批 鸡 死 亡 同 时 本 次 检 测 出 有 A 亚 群 和 J 亚 群 禽 白 血 病 3.2 ALV-J 于 1988 年 由 Payne 等 首 次 从 商 品 代 肉 用 鸡 中 分 离 [19],ALV-J 是 一 外 源 性 ALV 与 禽 内 源 性 反 转 录 病 毒 囊 膜 (E51) 的 重 组 体 [19], 可 以 通 过 水 平 和 垂 直 传 播 在 鸡 群 中 广 泛 传 播 高 玉 龙 [20] 等 报 道 ALV-J 毒 株 的 致 病 性 明 显 增 强, 自 然 感 染 时 引 起 发 病 的 日 龄 逐 渐 提 前 最 近 国 内 的 报 道 白 表 明 蛋 鸡 发 生 骨 髓 细 胞 瘤 型 J 亚 群 禽 白 血 病 病 例, 该 病 造 成 蛋 鸡 产 蛋 量 下 降, 死 亡 率 明 显 增 加 [21] ALV-J 的 宿 主 范 围 逐 渐 扩 大, 不 仅 局 限 于 白 羽 肉 鸡 感 染 发 病, 在 蛋 鸡 甚 至 我 国 地 方 品 种 麻 鸡 也 普 遍 发 生 [22-23] 以 往 报 道 ALV-J 主 要 引 起 成 年 肉 鸡 骨 髓 细 - 4 -
5 胞 瘤, 但 近 些 年 陆 续 报 道 有 血 管 瘤 型 J 亚 群 禽 白 血 病 病 例 发 生 [24-25], 而 且 日 趋 更 为 常 见 3.3 防 治 目 前 对 禽 白 血 病 的 防 治 没 有 疫 苗 可 以 利 用, 也 没 有 有 效 的 药 物 可 以 治 疗, 控 制 禽 白 血 病 的 主 要 方 法 是 通 过 病 原 检 测, 淘 汰 阳 性 鸡, 净 化 种 群 根 据 禽 白 血 病 的 特 点, 可 从 以 下 三 个 方 面 采 取 措 施 : 消 除 垂 直 传 播 : 本 病 以 垂 直 传 播 为 主, 在 尚 未 有 疫 苗 预 防 的 情 况 下, 只 能 依 靠 灵 敏 的 诊 断 方 法, 早 期 诊 断, 淘 汰 带 毒 种 蛋 和 种 鸡, 以 净 化 种 群 ; 防 止 水 平 传 播 : 育 雏 阶 段, 特 别 是 5 日 龄 之 内 的 鸡 容 易 发 生 水 平 传 播, 因 此 育 雏 舍 要 进 行 彻 底 熏 蒸 消 毒, 进 育 雏 舍 后 进 行 带 鸡 消 毒 孵 化 用 具 彻 底 消 毒, 粪 便 集 中 处 理, 防 止 饲 料 或 饮 水 被 污 染 做 好 一 些 免 疫 抑 制 病 的 预 防, 选 用 无 污 染 的 疫 苗, 再 适 当 时 间 接 种, 防 止 鸡 抵 抗 力 下 降 而 感 染 ; 加 强 饲 养 管 理 : 饲 养 管 理 良 好 的 鸡 群, 机 体 免 疫 机 能 强, 即 使 是 感 染 了 ALV 也 可 以 不 发 病 [ 参 考 文 献 ] (References) [1] 殷 震, 刘 景 华. 动 物 病 毒 学 [M], 2 版, 北 京 : 科 学 出 版 社,1997: [2] 王 全 胜, 闫 强. 敖 日 格 勒. 禽 白 血 病 研 究 进 展 [J]. 疫 病 控 制,2007,10(3): [3] CALNEK.B.W.Disease of Poultry,Nineth Edition[M].Ames Iowa USA,1991: [4] Payne L N,Brown S R,Bunstead N,et al.a novel subgroup of exogenous avian leucosis virus in chickens[j].j Gen Virol, 1991,72: [5] Payne L N.HPRS-103:a retrovirus strikes back.the emergence of subgroup J avian leucosis virus[j].avian Pathol,1998,27(1): [6] 商 营 利, 刘 思 当, 丁 宝 君, 等. 鸡 感 染 J 亚 群 禽 白 血 病 病 毒 的 免 疫 抑 制 机 理 [J]. 中 国 兽 医 学 报,2005,25(6): [7] Smith L M.Development and application of polymerase chain reaction(pcr)tests for the detection of subgroup J avian leukosis virus[j].virus Research,1998,54: [8] Sinmn P F.Single and concurrent avian leukosis virus infections with avian leukosis virus-j and avian leukosis virus -A in Australian meat-type chickens[j].avi Pathol,2005,34(1): [9] Pham T n Detection of exogenous and endogenous avian leukosis virus in commercial chicken eggs using reverse transcription and polymerase chain reaction assay[j].avi Pathol,1999,28: [10] 刘 公 平. 禽 白 血 病 病 毒 囊 膜 基 因 gp85 片 段 的 克 隆 与 鉴 定 [J]. 中 国 预 防 兽 医 学 报, (1): [11] 乔 彩 霞, 关 云 涛, 陈 洪 岩, 等. 禽 白 血 病 劳 斯 肉 瘤 病 毒 衣 壳 蛋 白 P27 基 因 的 克 隆 原 核 表 达 及 多 克 隆 抗 体 的 制 备 口 ]. 中 国 预 防 兽 医 学 报.2004,26(3):169-I72. [12] 姜 荣 忱, 梁 德 诚, 张 玲 娟. 蛋 鸡 J 亚 群 禽 白 血 病 的 病 理 学 诊 断 [J]. 中 国 兽 医 杂 志,2006,42(6):37. [13] 王 辉, 崔 治 中. 蛋 鸡 J 亚 群 白 血 病 病 毒 的 分 离 鉴 定 及 序 列 分 析 [J]. 病 毒 学 报,2008,24(5): [14] 成 子 强, 刘 思 当, 孟 祥 凯, 等. 商 品 蛋 鸡 成 髓 细 胞 瘤 血 管 瘤 型 J 亚 群 白 血 病 病 理 学 初 报 FJ]. 畜 牧 兽 医 学 报,2008,39(7): [15] 叶 建 强, 秦 爱 建 召 红 霞, 等 J 亚 群 禽 白 血 病 (A 工 V- J ) ELASA 检 测 力 祛 的 建 立 [J] 中 国 兽 医 学 报, 2006,26(3): [16] 张 向 磊. 一 例 商 品 蛋 鸡 病 毒 性 血 管 瘤 病 的 诊 治 [J]. 家 禽 科 学,2007(9): [17] 韦 平. 几 种 引 起 家 禽 免 疫 抑 制 的 病 毒 性 疾 病 及 其 作 用 机 理 [J]. 中 国 预 防 兽 医 学 报,2000,22(4);317. [18] 甘 永 华. 鸡 淋 巴 细 胞 性 白 血 病 的 研 究 进 展 [J]. 中 国 兽 医 科 技,1996,6(9): [19] Payne L N,Brown S R,Bunstead N,et al.a novel subgroup of exogenous avian leucosis virus in chickens[j].j Gen Virol,1991,72: [20] Bai J,Payne L N,Skinner M A.HPRS-103(exogenous avian leukosis virus,subgroup J)has an env gene related to those of endogenous elements EAV-0 and E51 and an E element found previously only in sarcoma viruses[j].j Virol,1995,69: [21] Xu B R,Dong W X,Yu C M,et al.occurrence of avian leukosis virus subgroup J in commercial layer flocks in China[J].Avian Pathol,2004,33(1), [22] Sun S,Cui Z.Epidemiological and pathological studies of sub group J avian leukosis virus infections in Chinese local"yellow" chickens[j].avian Pathol,2007,36(3): [23] 成 子 强, 张 利, 刘 思 当, 等. 中 国 麻 鸡 中 发 现 禽 J 亚 群 白 血 病 [J]. 微 生 物 学 报,2005,45(4): [24] 赖 汉 漳, 曹 伟 胜, 张 贺 楠, 等. 血 管 瘤 病 变 型 J 亚 群 禽 白 血 病 病 毒 的 分 离 与 鉴 定 [C]. 中 国 畜 牧 兽 医 学 会 2008 年 学 术 年 会 暨 第 六 届 全 国 畜 牧 兽 医 青 年 科 技 工 作 者 学 术 研 讨 会 论 文 集,2008,339. [25] 孟 祥 凯, 刘 青, 王 海 伦, 等. 商 品 蛋 鸡 成 髓 细 胞 瘤 血 管 瘤 型 J 亚 群 白 血 病 病 毒 特 性 的 研 究 [J]. 畜 牧 兽 医 学 报,2008,39(11):
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