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- 麻雕 云
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1 ISSN CN / Q 中 国 生 物 化 学 与 分 子 生 物 学 报 http: / / cjbmb. bjmu. edu. cn Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology 2014 年 4 月 30(4):409 ~ 414 技 术 与 方 法 结 合 GAL4 / UAS 系 统 与 CyO GFP 平 衡 子 获 取 表 达 RNA 干 扰 序 列 果 蝇 幼 虫 并 有 效 干 扰 Tis11 表 达 张 梅 超, 刘 勇, 韦 有 恒, 马 维 骏 ( 上 海 交 通 大 学 医 学 院 / 中 国 科 学 院 上 海 生 命 科 学 研 究 院 健 康 科 学 研 究 所, 上 海 ) 摘 要 TIS11 是 转 录 后 调 控 因 子 TTP 在 果 蝇 中 的 同 源 物, 在 果 蝇 幼 虫 免 疫 发 育 和 代 谢 等 多 种 生 理 过 程 中 都 发 挥 重 要 作 用. 为 研 究 TIS11 的 功 能, 需 要 利 用 GAL4 / UAS 系 统 获 得 整 体 高 干 扰 效 率 的 Tis11 RNAi 果 蝇 幼 虫. 为 平 衡 GAL4 转 基 因 果 蝇 高 活 性 启 动 子 的 致 死 效 应, 需 要 使 用 带 有 成 蝇 卷 翅 标 记 CyO 的 第 二 染 色 体 的 平 衡 子, 但 CyO 标 记 在 幼 虫 中 无 可 见 表 型, 因 此 无 法 区 分 杂 交 幼 虫 的 基 因 型. 为 解 决 这 一 问 题, 引 入 了 带 有 CyO GFP 标 记 的 平 衡 子. 携 带 CyO GFP 平 衡 子 的 G Actin 果 蝇 与 携 带 Tis11 RNAi 序 列 的 果 蝇 杂 交, 杂 交 幼 虫 可 以 通 过 GFP 标 记 进 行 区 分, 剔 除 带 有 CyO GFP 平 衡 子 的 幼 虫, 从 而 挑 选 出 表 达 Tis11 RNAi 序 列 的 幼 虫, 最 后 经 real time PCR 检 测 所 得 幼 虫 具 有 整 体 高 干 扰 效 率. 关 键 词 中 图 分 类 号 果 蝇 幼 虫 ;TIS11;GAL4 / UAS 系 统 ;CyO GFP 平 衡 子 ;RNA 干 扰 Q812 Combining GAL4 / UAS System and CyO GFP Balancer to Obtain RNA Interference Sequences expressing Drosophila Larvae in Which Tis11 is Down regulated ZHANG Mei Chao, LIU Yong, WEI You Heng, MA Wei Jun ( Institute of Health Sciences, Shanghai Jiao Tong University School of Medicine & Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai , China) Abstract Drosophila TIS11 is a homologue of the mammalian post transcriptional regulation factor TTP ( Tristetraproline). TIS11 plays crucial roles in the immunity, development and metabolism of Drosophila larvae. It is one of the basic requirements for the study of TIS11 to obtain Tis11 RNAi Drosophila larvae with high interference efficiency in the whole. However, the high activity promoters in GAL4 transgene Drosophila can induce homozygous lethal effect, so the CyO balancer of the second chromosome is needed. The CyO balancer presenting a curl wing phenotype in adult has no visible phenotype in larvae, which makes it impossible to identify the genotype of the progeny larvae. To solve this problem, a CyO GFP balancer was introduced with a GFP fused CyO label. G Actin Drosophila carrying CyO GFP balancer was hybridized with carrying the Tis11 RNAi sequence. We remove the progeny larvae with GFP label so that the larvae expressing Tis11 RNAi sequence were selected. The Tis11 interference was highly efficient in the whole of the Tis11 RNAi larvae tested by real time PCR. Key words Drosophila larvae; TIS11; GAL4 / UAS system; CyO GFP balancer; RNA interference 收 稿 日 期 : ; 接 受 日 期 : 国 家 自 然 科 学 基 金 资 助 项 目 (No ) 联 系 人 Tel: ; E mail: wjma@ sibs. ac. cn Received: October 15,2013; Accepted: January 8,2014 Supported by National Natural Science Foundation of China ( No ) Corresponding author Tel: ; E mail: wjma@ sibs. ac. cn
2 410 中 国 生 物 化 学 与 分 子 生 物 学 报 第 30 卷 基 因 表 达 过 程 是 基 因 通 过 转 录 和 翻 译 而 产 生 蛋 白 质 产 物 或 转 录 后 直 接 产 生 其 RNA 产 物 的 过 程. 在 这 一 过 程 中, 基 因 的 启 动 和 关 闭 活 性 的 增 加 与 减 弱 等 都 受 到 严 格 地 调 控 [1]. 其 中 转 录 后 水 平 调 控 是 指 在 RNA 转 录 后 对 基 因 表 达 的 调 控. 许 多 RNA 结 合 蛋 白 都 是 重 要 的 转 录 后 调 控 因 子, 如 HuR TTP AUF1 等 [2]. Tristetraproline(TTP) 家 族 成 员 含 有 2 个 高 度 保 守 的 串 联 Cys X8 Cys X5 Cys X3 His (Cys3His) 锌 指 结 构 [3], 能 够 识 别 并 结 合 mrna 的 3 端 非 编 码 区 (3 UTR) 中 富 含 AU 元 件 ( AU rich element,are) 介 导 RNA 降 解 过 程 [4,5], 或 者 参 与 [6] RNA 干 扰 途 径 在 转 录 后 水 平 调 控 许 多 有 重 要 生 理 功 能 基 因 的 表 达, 从 而 影 响 了 生 物 体 的 免 疫 反 应 身 体 发 育 癌 症 发 生 等 生 理 病 理 过 程 [7 9]. 生 物 信 息 学 分 析 数 据 表 明,TTP 在 果 蝇 斑 马 鱼 鸡 小 鼠 人 等 许 多 物 种 中 都 存 在 同 源 物, 可 能 影 响 其 体 内 许 多 3 UTR 含 有 ARE 元 件 的 mrna 半 衰 期 长 短, 或 者 参 与 某 些 mrna 的 翻 译 水 平 调 控 [10]. TTP 蛋 白 在 果 蝇 中 的 同 源 物 称 为 TIS11 ( 或 dtis11). 研 究 发 现,TIS11 蛋 白 通 过 在 转 录 后 水 平 调 控 多 个 基 因 表 达, 参 与 调 节 果 蝇 的 天 然 免 疫 发 育 代 谢 等, 影 响 范 围 广 泛 [4,11,12]. 果 蝇 具 有 饲 养 简 单 生 命 周 期 短 繁 殖 能 力 强 遗 传 背 景 清 楚 等 优 点, 而 且 果 蝇 在 进 化 上 较 低 等, 身 体 结 构 相 对 简 单, 便 于 生 理 生 化 操 作. 但 很 多 蛋 白 与 高 等 动 物 具 有 高 度 保 守 性, 因 此, 成 为 常 用 的 模 式 生 物 [13], 其 幼 虫 常 用 于 免 疫 发 育 代 谢 等 方 面 的 研 究 [14,15]. 欲 研 究 TIS11 的 功 能, 果 蝇 幼 虫 是 必 不 可 少 的 研 究 对 象. 在 果 蝇 中 常 利 用 二 元 表 达 体 系 GAL4 / UAS 系 统 实 现 基 因 的 RNA 干 扰 [16], 从 而 研 究 基 因 的 功 能. 该 系 统 包 含 GAL4 转 基 因 系 和 UAS 靶 基 因 系 两 种 转 基 因 品 系 : GAL4 转 基 因 系 中 表 达 转 录 激 活 子 GAL4, 但 没 有 靶 基 因 ; 在 UAS 靶 基 因 系 中, 转 录 激 活 子 不 存 在, 因 而 靶 基 因 处 于 沉 默 状 态 ; 只 有 将 GAL4 转 基 因 系 与 UAS 靶 基 因 系 进 行 杂 交, 才 可 能 产 生 表 达 靶 基 因 的 后 代 [17]. 为 获 得 整 体 高 干 扰 效 率 的 Tis11 RNA 干 扰 果 蝇 幼 虫, 一 方 面 应 选 用 携 带 高 启 动 活 性 启 动 子 ( 如 肌 动 蛋 白 启 动 子 ) 的 GAL4 品 系 果 蝇 [18,19], 另 一 方 面 应 该 选 用 携 带 有 效 RNA 干 扰 序 列 的 UAS 品 系 果 蝇. 但 启 动 子 活 性 高 会 造 成 GAL4 品 系 果 蝇 纯 合 致 死, 需 要 平 衡 子 才 能 维 持 品 系 稳 定 [20]. 我 们 从 Vienna Drosophila RNAi Center( VDRC) 选 用 的 UAS 品 系 果 蝇 中 外 源 的 Tis11 RNAi 序 列 插 入 位 点 位 于 第 二 染 色 体 [12,21], 所 以 选 用 的 GAL4 品 系 果 蝇 外 源 序 列 插 入 位 点 也 必 须 位 于 第 二 染 色 体 上, 对 应 地, 也 需 要 选 用 第 二 染 色 体 的 平 衡 子. 第 二 染 色 体 的 平 衡 子 常 用 的 标 记 CyO 在 成 蝇 中 为 显 性 卷 翅 表 型, 但 在 幼 虫 中 没 有 可 见 表 型. 这 样 GAL4 品 系 和 UAS 品 系 杂 交 后 代 的 幼 虫 无 法 根 据 表 型 区 分 基 因 型, 不 表 达 干 扰 序 列 的 幼 虫 与 表 达 干 扰 序 列 的 幼 虫 混 在 一 起, 不 能 用 于 实 验 研 究. 同 样 的 问 题 也 会 出 现 在 获 取 其 它 基 因 的 RNA 干 扰 或 过 表 达 果 蝇 幼 虫 中. 为 解 决 该 问 题, 我 们 引 入 了 在 果 蝇 幼 虫 中 可 出 现 绿 色 荧 光 表 型 的 带 有 CyO GFP 标 记 的 平 衡 子, 该 平 衡 子 常 用 于 基 因 突 变 果 蝇 的 保 种 和 幼 虫 筛 选. 使 用 携 带 CyO GFP 平 衡 子 的 GAL4 品 系 果 蝇 G Actin 与 UAS 品 系 果 蝇 杂 交, 通 过 GFP 标 记 筛 选 可 获 取 高 干 扰 效 率 的 Tis11 RNAi 果 蝇 幼 虫. 1 材 料 与 方 法 1 1 材 料 UAS 品 系 果 蝇 和 ATTP 品 系 果 蝇 购 自 Vienna Drosophila RNAi Center ( VDRC, Austria); GAL4 品 系 果 蝇 Actin ( Actin GAL4 / CyO, Bloomington Drosophila Stock Center ) 和 G Actin (Actin GAL4 / CyO GFP) 由 中 国 科 学 院 上 海 生 命 科 学 研 究 院 神 经 科 学 研 究 所 黄 福 德 研 究 组 惠 赠. 培 养 条 件 为 : 温 度 25 ± 0 5, 湿 度 60% ± 5%, 光 照 周 期 12 h / 12 h. 1 2 Real time PCR 引 物 序 列 本 研 究 中 所 用 real time PCR 引 物 均 用 Primer Premier5 设 计, 由 生 物 工 程 ( 上 海 ) 有 限 公 司 合 成. 具 体 引 物 序 列 见 Table 1. Table 1 The primer sequences used in real time PCR Name Primer Rp49 For 5 GCCGCTTCAAGGGACAGT 3 Rp49 Rev 5 CGATCTCGCCGCAGTAAA 3 Tis11 For 5 CAGTCGTCGTCGCAGAACTT 3 Tis11 Rev 5 GGGCTTAGCGGCAGATAGAA 果 蝇 培 养 基 配 制 果 蝇 采 用 玉 米 粉 培 养 基 进 行 饲 养 : 称 取 玉 米 粉 80 g, 蔗 糖 g, 酵 母 粉 16 g, 琼 脂 6 5 g 加 水 至 1 L, 搅 拌 加 热 至 煮 沸 ; 加 入 6 5 ml 丙 酸 和 20 ml 浓 度 为 12 5% 尼 泊 金 甲 酯 ( 溶 剂 为 乙 醇 ), 搅 拌 混 匀 后 分 装 入 果 蝇 管 中, 每 管 5 ml. 冷 却 待 用. 1 4 处 女 蝇 收 集 及 果 蝇 杂 交 各 品 系 果 蝇 每 2 周 传 代 1 次, 传 代 时 每 个 含 新
3 第 4 期 张 梅 超 等 : 结 合 GAL4/ UAS 系 统 与 CyO GFP 平 衡 子 获 取 表 达 RNA 干 扰 序 列 果 蝇 幼 虫 并 有 效 干 扰 Tis11 表 达 411 鲜 培 养 基 的 果 蝇 管 中 分 入 10 对 成 蝇,4 d 后 将 其 移 除, 继 续 培 养. 自 传 代 起 约 10 d, 有 果 蝇 开 始 羽 化. 在 25 C 条 件 下, 新 羽 化 8 h 内 雌 性 果 蝇 不 会 与 雄 蝇 交 配. 收 集 羽 化 未 超 过 8 h 的 和 品 系 雌 蝇 即 为 杂 交 所 用 处 女 蝇. 选 取 4 d 内 羽 化 的 Actin G Actin 品 系 雄 蝇 作 为 杂 交 父 本. 每 个 杂 交 管 中 处 女 蝇 和 父 本 雄 蝇 各 10 只, 杂 交 4 d 后 将 其 移 除, 继 续 培 养. 1 5 子 代 三 龄 幼 虫 挑 取 及 总 RNA 抽 提 杂 交 后 培 养 约 7 d, 子 代 三 龄 幼 虫 爬 至 管 壁, 其 体 型 较 粗 大 行 动 缓 慢, 用 镊 子 小 心 挑 出. 父 本 为 Actin 雄 蝇 的 子 代 幼 虫 直 接 分 入 1 5 ml EP 管 中, 每 管 5 只. 父 本 为 G Actin 雄 蝇 的 子 代 幼 虫 在 荧 光 显 微 镜 下 按 是 否 带 绿 色 荧 光 标 记 进 行 分 选, 分 别 放 入 1 5 ml EP 管 中, 每 管 5 只. 每 管 加 入 500 μl TRIzol (Invitrogen,Cat. # ) 后 迅 速 研 磨 g 离 心 5 min, 将 上 清 吸 入 新 的 1 5 ml EP 管 中, 按 说 明 书 抽 提 RNA, 最 后 获 得 的 RNA 沉 淀 用 20 μl 去 离 子 水 溶 解. 用 Nanodrop 2000 进 行 定 量 后 待 用. 1 6 cdna 制 备 及 real time PCR 检 测 取 1 μg 已 抽 提 的 总 RNA, 按 照 RQ1 RNase Free DNase( Promega,Cat. #M6101) 说 明 书 去 除 DNA 杂 质. 然 后 按 照 M MLV 逆 转 录 酶 ( Promega, Cat. # M5301) 说 明 书 进 行 逆 转 录, 获 得 cdna. 逆 转 录 完 成 后, 将 反 应 产 物 稀 释 20 倍, 以 此 作 为 real time PCR 反 应 模 板. 按 照 SYBR Green Real Time PCR Master Mix(TOYOBO,QPK 201) 说 明 书 配 制 10 μl 反 应 体 系, 并 按 说 明 书 反 应 程 序 上 机 ( ABI,Prism 7900HT) 检 测. 2 结 果 2 1 杂 交 所 用 亲 本 果 蝇 基 因 型 与 表 型 本 研 究 以 GAL4 品 系 雄 蝇 作 父 本 :Actin 品 系 果 蝇 基 因 型 为 Actin GAL4 / CyO, 其 成 蝇 表 型 为 白 眼 卷 翅, 其 幼 虫 无 可 见 表 型 ;G Actin 品 系 果 蝇 基 因 型 为 Actin GAL4 / CyO GFP, 其 成 蝇 表 型 为 红 眼 卷 翅, 其 幼 虫 在 荧 光 显 微 镜 下 可 见 绿 色 荧 光, 尤 其 在 身 体 前 部 可 见 2 条 荧 光 很 强 的 条 带 ( Fig. 1A). 本 研 究 以 UAS 品 系 处 女 蝇 作 母 本, 基 因 型 为 UAS Tis11 RNAi, 其 成 蝇 表 型 为 红 眼 直 翅. 对 照 品 系 为 带 有 attp2 的 果 蝇,attp2 为 UAS 序 列 的 插 入 位 点, 品 系 成 蝇 表 型 为 白 眼 直 翅 (Fig. 1B). 2 2 杂 交 子 代 三 龄 幼 虫 基 因 型 与 表 型 Actin 品 系 雄 蝇 与 和 品 系 处 女 蝇 杂 交 后, 子 代 幼 虫 表 型 无 差 异. G Actin 品 系 雄 蝇 与 和 品 系 处 女 蝇 杂 交 后, 挑 取 子 一 代 中 爬 至 管 壁 体 型 肥 大 行 动 缓 慢 的 幼 虫, 在 荧 光 显 微 镜 下 观 察, 并 拍 照 记 录. G Actin 雄 蝇 与 处 女 蝇 杂 交 后 代, 基 因 型 为 Actin GAL4 / + 和 CyO GFP / + ( Fig. 2A); G Actin 雄 蝇 与 处 女 蝇 杂 交 后 代, 基 因 型 为 Actin GAL4 / UAS Tis11 RNAi 和 CyO GFP / UAS Tis11 RNAi (Fig. 2B). 后 代 中 基 因 型 为 Actin GAL4 / + 或 Actin GAL4 / UAS Tis11 RNAi 的 三 龄 幼 虫 在 荧 光 显 微 镜 下 不 产 生 绿 色 荧 光 ; 在 荧 光 显 微 镜 下, 基 因 型 为 CyO GFP / + 或 CyO GFP / UAS Tis11 RNAi 的 三 龄 幼 虫 在 荧 光 显 微 镜 下 可 见 绿 色 荧 光, 尤 其 在 身 体 前 部 可 见 2 条 荧 光 很 强 的 条 带. 2 3 果 蝇 三 龄 幼 虫 体 内 Tis11 mrna 相 对 表 达 量 Actin 品 系 雄 蝇 与 携 带 Tis11 RNAi 序 列 的 品 系 和 其 对 照 品 系 处 女 蝇 杂 交 后 代 幼 虫 因 无 可 见 标 记, 无 法 区 分 其 基 因 型, 子 代 三 龄 幼 虫 为 Actin GAL4 / + 与 CyO / + 混 在 一 起,Actin GAL4 / UAS Tis11 RNAi 与 CyO / UAS Tis11 RNAi 混 在 一 起. 由 于 带 CyO 平 衡 子 的 幼 虫 不 能 启 动 表 达 Tis11 RNAi 序 列, 检 测 不 到 杂 交 后 代 混 合 幼 虫 Tis11 mrna 水 平 的 明 显 变 化 (Fig. 3A). G Actin 品 系 雄 蝇 与 和 品 系 处 女 蝇 杂 交 后, 挑 取 子 代 三 龄 幼 虫, 在 荧 光 显 微 镜 下 分 选 出 发 绿 色 荧 光 的 Actin GAL4 / UAS Tis11 RNAi Actin GAL4 / + 与 不 发 绿 色 荧 光 的 CyO GFP / UAS Tis11 RNAi CyO GFP / + 幼 虫, 进 行 real time PCR 检 测. 表 达 Tis11 RNAi 序 列 的 Actin GAL4 / UAS Tis11 RNAi 三 龄 幼 虫 与 对 照 Actin GAL4 / + 相 比,Tis11 mrna 相 对 表 达 量 降 低 了 近 70% ; 带 CyO GFP 标 记 的 2 种 杂 交 果 蝇 幼 虫 都 不 含 Actin GAL4, 不 表 达 Tis11 RNAi 序 列,Tis11 mrna 相 对 表 达 量 与 对 照 没 有 明 显 差 异 (Fig. 3B). 以 上 结 果 说 明, 引 入 CyO GFP 平 衡 子 后, 能 通 过 区 分 荧 光 挑 选 出 表 达 Tis11 RNAi 序 列 的 幼 虫, 并 检 测 到 了 较 高 的 干 扰 效 率. 3 讨 论 GAL4 / UAS 系 统 是 一 种 二 元 表 达 的 转 基 因 技 术 体 系, 常 用 来 实 现 基 因 的 RNA 干 扰 或 过 表 达, 现 已 广 泛 应 用 在 果 蝇 家 蚕 斑 马 鱼 小 鼠 玉 米 等 物 种 中 [16,18,19]. 该 系 统 分 别 构 建 启 动 子 GAL4 转 基 因 系 和 UAS 外 源 序 列 转 基 因 系, 一 方 面 便 于 两 种 转 基 因
4 ４１２ 中国生物化学与分子生物学报 第 ３０ 卷 Ｆｉｇ ２ Ｔｈｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ ａｎｄ ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｆ１ ｔｈｉｒｄ ｉｎｓｔａｒ Ｆｉｇ １ Ｔｈｅ ｐａｒｅｎｔ Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ ｕｓｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ Ａ ｌａｒｖａｅ Ｔｈｅ Ｇ Ａｃｔｉｎ ｍａｌｅｓ ｈｙｂｒｉｄｉｚｅｄ ｗｉｔｈ ６０１００ ａｎｄ １０１７６５ Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ Ａｃｔｉｎ ＧＡＬ４ ＣｙＯ Ｔｈｅ ｏｎｅ ｗｉｔｈ ｃｕｒｌ ｗｉｎｇ ａｎｄ ｒｅｄ ａｎｄ ｐｈｏｔｏｇｒａｐｈｅｄ ｕｎｄｅｒ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ Ｔｈｅ ｌａｒｖａｅ Ｔｈｅ ＧＡＬ４ ｌｉｎｅ ｗｉｔｈ ｃｕｒｌ ｗｉｎｇ ａｎｄ ｗｈｉｔｅ ｅｙｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ ｉｓ Ａｃｔｉｎ ｅｙｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ ｉｓ Ｇ Ａｃｔｉｎ Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ Ａｃｔｉｎ ＧＡＬ４ ＣｙＯ ＧＦＰ Ｔｈｅ ｌａｒｖａｅ ｏｆ Ｇ Ａｃｔｉｎ Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ ｃａｎ ｂｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｇｒｅｅｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｕｎｄｅｒ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙ ａｔ ｔｈｅ ｆｒｏｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｂｏｄｙ ｗｈｅｒｅ ｔｗｏ ｇｒｅｅｎ ｂａｎｄｓ ｃａｎ ｂｅ ｅａｓｉｌｙ ｆｏｕｎｄ ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｌａｒｖａｅ ｏｆ Ｇ Ａｃｔｉｎ Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ ｃａｎ ｔ Ｔｈｅ ｍａｌｅｓ ｏｆ ｔｈｅｓｅ ｔｗｏ ＧＡＬ４ ｌｉｎｅｓ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｆａｔｈｅｒ ｆｌｉｅｓ Ｂ Ｔｈｅ ＵＡＳ ｌｉｎｅ ｗｉｔｈ ｆｌａｔ ｗｉｎｇ ａｎｄ ｗｈｉｔｅ ｅｙｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ ｉｓ ６０１００ Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ ｗｈｏ ｈａｓ ａｔｔｐ２ ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ ｓｉｔｅｓ ｆｏｒ ＵＡＳ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｎ ｔｈｅ ｓｅｃｏｎｄ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ Ｔｈｅ ｏｎｅ ｗｉｔｈ ｆｌａｔ ｗｉｎｇ ａｎｄ ｒｅｄ ｅｙｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ ｉｓ １０１７６５ Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ ＵＡＳ Ｔｉｓ１１ ＲＮＡｉ Ｔｈｅ ｆｅｍａｌｅｓ ｏｆ ｔｈｅｓｅ ｔｗｏ ＵＡＳ ｌｉｎｅｓ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｍｏｔｈｅｒ ｆｌｉｅｓ 系果蝇的保种 另一方面可根据需要进行组合获取 ｆｅｍａｌｅｓ ａｎｄ ｔｈｅ Ｆ１ ｔｈｉｒｄ ｉｎｓｔａｒ ｌａｒｖａｅ ｗｅｒｅ ｃｈｏｓｅｎ ｔｏ ｂｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｐｈｏｔｏｓ ｓｈｏｗｎ ｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｔａｋｅｎ ｕｎｄｅｒ ｂｒｉｇｈｔ ｆｉｅｌｄ ａｎｄ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｌｅｆｔ ｏｒ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｏｎｌｙ ｒｉｇｈｔ Ａ Ｔｗｏ ｋｉｎｄ ｐｒｏｇｅｎｉｅｓ ｏｆ Ｇ Ａｃｔｉｎ ａｎｄ ６０１００ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｔｈｅ ｌａｒｖａｅ ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｇ Ａｃｔｉｎ ｌａｒｖａｅ ｇｒｅｅｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ａｎｄ ｔｗｏ ｂｒｉｇｈｔ ｇｒｅｅｎ ｂａｎｄｓ ａｔ ｔｈｅ ｆｒｏｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｂｏｄｙ ｗｅｒｅ ＣｙＯ ＧＦＰ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒｓ ｗｉｔｈｏｕｔ ｇｒｅｅｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｗｅｒｅ Ａｃｔｉｎ ＧＡＬ４ Ｂ Ｔｈｅ ｓａｍｅ ａｓ ｔｈｅ ｐｒｏｇｅｎｉｅｓ ｏｆ Ｇ Ａｃｔｉｎ ａｎｄ ６０１００ ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｔｗｏ ｋｉｎｄ ｐｒｏｇｅｎｉｅｓ ｏｆ Ｇ Ａｃｔｉｎ ａｎｄ １０１７６５ ｔｈｅ ｌａｒｖａｅ ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇ ｇｒｅｅｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ａｎｄ ｔｗｏ ｂｒｉｇｈｔ ｇｒｅｅｎ ｂａｎｄｓ ａｔ ｔｈｅ ｆｒｏｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｂｏｄｙ ｗｅｒｅ ＣｙＯ ＧＦＰ ＵＡＳ Ｔｉｓ１１ ＲＮＡｉ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒｓ ｗｉｔｈｏｕｔ ｇｒｅｅｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｗｅｒｅ Ａｃｔｉｎ ＧＡＬ４ ＵＡＳ Ｔｉｓ１１ ＲＮＡｉ Ｔｈｅ ｌａｔｔｅｒ ｗｅｒｅ ａｂｌｅ ｔｏ ｅｘｐｒｅｓｓ Ｔｉｓ１１ ＲＮＡｉ ｓｅｑｕｅｎｃｅ 实验所需的杂交后代 ＵＡＳ 下游外源序列的表达实 色体都存在各自对应的平衡子 如带有卷翅标记的 用带有特定启动子的 ＧＡＬ４ 转基因系 一些高启动 体 Ｌ 平衡子 带有棒眼标记的 Ｘ 染色体 Ｂａｒ 平 衡 致死 如肌动蛋白启动子等 此时就需要用平衡子进 携带 Ｔｉｓ１１ ＲＮＡｉ 序列的 ＵＡＳ 品系果蝇可以利 际受 ＧＡＬ４ 上游启动子的调控 可根据研究需求选 第二染色体 ＣｙＯ 平衡子 带有裂翅标记的第三染色 活性的启动子可能会导致 ＧＡＬ４ 转基因系出现纯合 子等 行平衡 平衡子 ｂａｌａｎｃｅｒ 是特殊的隐性致死基因 用在细胞中具有高干扰效率的序列通过转基因获 衡致死突变 平衡子有 ３ 个特征使其能够用于遗传 Ｃｅｎｔｅｒ ＶＤＲＣ Ａｕｓｔｒｉａ 选择 我们选用的 １０１７６５ 品 １９１８ 年 Ｍｕｌｌｅｒ 首次在果蝇中分离得到了第 １ 个平 得 另 外 还 可 以 直 接 从 Ｖｉｅｎｎａ Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ ＲＮＡｉ 分析 １ 平衡子能够抑制同源染色体间的重组 ２ 系可以用来获取组织特异性高干扰效率的成蝇 １２ 平衡子在成蝇中 有的在幼虫中 表型为显性 ３ 平 衡子具有纯合致死或致不育效应 ２０ ２２ 果蝇每个染 实验室 前 期 研 究 中 也 已 利 用 该 品 系 获 得 了 Ｔｉｓ１１ ＲＮＡｉ 成蝇 父本选用的是分别携带热激启动子和肌
5 第 4 期 张 梅 超 等 : 结 合 GAL4/ UAS 系 统 与 CyO GFP 平 衡 子 获 取 表 达 RNA 干 扰 序 列 果 蝇 幼 虫 并 有 效 干 扰 Tis11 表 达 413 Fig. 3 The relative expression levels of Tis11 mrna in the third instar larvae The third instar larvae were sorted, and then homogenized in TRIzol to extract total RNA. Each RNA sample was treated by DNA enzyme RQ1 before reverse transcription. Tis11 and Rp49 levels in the cdna samples were analyzed by real time PCR. Rp49 was taken as a calibrator. (A) Tis11 mrna levels of the third instar larvae hybridized by actin with and had no significant difference. Take the Tis11 mrna level of the third instar larvae hybridized by actin with as 100%. Values represent the mean ± SD. (B) Tis11 mrna in the Tis11 RNAi larvae ( Actin GAL4 / UAS Tis11 RNAi ) were about 70% less than control ( Actin GAL4 / + ). Take the Tis11 mrna level of actin GAL4 / + larvae as 100%. Values represent the mean ± SD 动 蛋 白 启 动 子 的 两 种 GAL4 转 基 因 系. 研 究 结 果 表 明, 热 激 启 动 子 在 室 温 下 活 性 低, 所 得 杂 交 后 代 RNA 干 扰 效 率 不 理 想 ; 若 进 行 热 激 刺 激, 由 于 果 蝇 体 内 存 在 内 源 的 热 激 蛋 白 基 因, 在 热 激 时 也 会 促 进 相 关 的 受 热 激 蛋 白 调 控 的 内 源 基 因 的 表 达, 可 能 对 实 验 结 果 产 生 不 确 定 影 响 [21]. 为 获 得 整 体 高 干 扰 效 率 的 Tis11 RNAi 果 蝇 幼 虫, 我 们 选 用 了 携 带 肌 动 蛋 白 启 动 子 的 GAL4 转 基 因 果 蝇. 由 于 Actin 启 动 子 活 性 高, 会 导 致 GAL4 转 基 因 系 果 蝇 纯 合 致 死, 必 需 使 用 平 衡 子 进 行 平 衡 以 维 持 品 系 的 稳 定 ; 而 对 应 外 源 基 因 插 入 位 置 ( 本 实 验 所 选 果 蝇 插 入 位 点 均 位 于 第 2 染 色 体 ), 常 用 的 平 衡 子 标 记 CyO 在 成 蝇 中 表 型 为 显 性, 但 在 幼 虫 中 无 可 见 表 型. 鉴 于 以 上 两 点, 我 们 最 终 选 用 了 带 有 GFP 标 记 的 CyO 平 衡 子 ( CyO GFP) 的 G Actin 品 系. 在 荧 光 显 微 镜 下 带 有 CyO GFP 标 记 平 衡 子 的 果 蝇 幼 虫 可 见 绿 色 荧 光, 尤 其 在 身 体 前 部 可 见 2 条 明 显 亮 斑. G Actin 与 携 带 RNA 干 扰 序 列 的 UAS 品 系 果 蝇 杂 交, 根 据 孟 德 尔 遗 传 定 律 可 知, 可 发 出 绿 色 荧 光 的 子 代 幼 虫 基 因 型 为 CyO GFP / UAS Tis11 RNAi, 不 能 发 出 绿 色 荧 光 的 基 因 型 为 Actin GAL4 / UAS Tis11 RNAi. 实 验 结 果 表 明, 利 用 GFP 标 记 平 衡 子 法 可 方 便 地 由 杂 交 后 代 幼 虫 的 表 型 方 便 地 区 分 出 不 同 基 因 型, 经 挑 选 区 分 后 获 得 了 干 扰 效 率 达 到 70% 的 Tis11 RNAi 幼 虫 ; 而 以 未 经 GFP 标 记 的 Actin 品 系 为 父 本 的 杂 交 后 代 幼 虫 由 于 无 法 区 分 不 同 基 因 型, 所 挑 取 的 三 龄 幼 虫 为 Actin GAL4 / UAS Tis11 RNAi 与 CyO / UAS Tis11 RNAi 的 混 合, 与 对 照 相 比, 检 测 到 的 是 表 达 Tis11 RNAi 序 列 和 不 表 达 Tis11 RNAi 序 列 的 幼 虫 的 混 合 数 值, 不 能 符 合 实 验 要 求. 本 研 究 所 用 方 法 具 有 以 下 优 点 : 表 型 可 见, 易 分 辨 ; 不 用 标 记 目 的 基 因, 基 因 分 离 重 组 后 CyO GFP 标 记 的 染 色 体 不 出 现 在 能 够 表 达 外 源 序 列 的 果 蝇 体 内, 避 免 了 标 记 基 因 ( 或 序 列 ) 对 实 验 的 潜 在 影 响. 该 方 法 同 样 可 应 用 于 果 蝇 其 它 基 因 RNA 干 扰 或 过 表 达 中 利 用 表 型 确 定 基 因 型, 以 获 得 所 需 果 蝇 成 虫 或 幼 虫. 本 研 究 获 得 了 整 体 高 干 扰 效 率 的 Tis11 RNAi 果 蝇 幼 虫, 为 研 究 果 蝇 转 录 后 调 控 因 子 TIS11 奠 定 了 基 础, 为 进 一 步 研 究 TTP 家 族 起 到 促 进 作 用, 有 利 于 深 入 研 究 TTP 在 人 及 其 它 物 种 中 对 免 疫 发 育 代 谢 等 的 影 响. 致 谢 感 谢 中 国 科 学 院 上 海 生 命 科 学 研 究 院 神 经 科 学 研 究 所 黄 福 德 研 究 组 为 我 们 提 供 果 蝇 品 系. 参 考 文 献 (References) [ 1 ] Orphanides G,Reinberg D. A unified theory of gene expression [ J]. Cell,2002,108(4): [ 2 ] Barreau C, Paillard L, Osborne H B. AU rich elements and associated factors: are there unifying principles? [ J]. Nucleic Acids Res,2006,33(22): [ 3 ] Varnum B C, Ma Q F, Chi T H, et al. The TIS11 primary response gene is a member of a gene family that encodes proteins with a highly conserved sequence containing an unusual Cys His repeat[ J]. Mol Cell Biol,1991,11(3): [ 4 ] Vindry C, Lauwers A, Hutin D, et al. dtis11 Protein dependent polysomal deadenylation is the key step in AU rich element mediated mrna decay in Drosophila cells [ J]. J Biol Chem,
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标题
吉林农业大学学报 ２０１６ ３８ １ ８７ ９１ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｊｉｌｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｈｔｔｐ ｘｕｅｂａｏ ｊｌａｕ ｅｄｕ ｃｎ Ｅ ｍａｉｌ ｊｌｎｄｘｂ ｖｉｐ ｓｉｎａ ｃｏｍ 神 经 生 长 因 子 ｍｒｎａ 在 鹅 等 级 前 卵 泡 中 的 表达 刘璐璐 隋玉健 朱海洋 武惠岩 杨 辉 孙永峰 吉林农业大学动物科学技术学院 长春 １３０１１８
240 生 异 性 相 吸 的 异 性 效 应 [6] 虽 然, 心 理 学 基 础 研 [7-8] 究 已 经 证 实 存 在 异 性 相 吸 异 性 相 吸 是 否 存 在 于 名 字 认 知 识 别 尚 无 报 道 本 实 验 选 取 不 同 性 别 的 名 字 作 为 刺 激 材 料, 通
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2011 年 Journal of Capital Medical University 4月 第2 期 Apr 2011 Vol 32 No 2 基础研究 doi: 10 3969 / j issn 1006-7795 2011 02 015 人脑识别不同性别名字反应时的差异研究 高迎霄 陈昭燃 * 张明霞 ( 首都医科大学神经生物系高级脑功能中心) 摘要 目的 探讨男女对不同性别名字认知加工速度是否存在差异
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2011 GUANGDONG WEILIANG YUANSU KEXUE 18 12 1006-446X 2011 12-0001-28 1 2 2 1. 201800 2. 510070 R 244. 9 A 1 1. 1 3 2000 1. 1. 1 1973 3 52 299 31 136 100 32 1 13 2011-10 -20 1 2011 GUANGDONG WEILIANG YUANSU
211 better than those in the control group, with significant difference between two groups (P < 0.05). The ocular hypertension of patients in the cont
210 毛 果 芸 香 碱 联 合 拉 坦 前 列 素 治 疗 原 发 性 急 性 闭 角 型 青 光 眼 的 疗 效 观 察 符 元 党 1, 郑 振 优 2, 林 再 雄 2, 周 吉 良 1. 昌 江 黎 族 自 治 县 中 西 医 结 合 医 院, 海 南 昌 江 572700 2. 海 南 医 学 院 附 属 医 院 眼 科, 海 南 海 口 570100 1 摘 要 : 目 的 探 讨
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864 现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 6 期 2016 年 6 月 of apoptosis related factors, decrease the incidence of adverse reactions, which is of great
现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 6 期 2016 年 6 月 863 曲 妥 珠 单 抗 联 合 多 西 紫 杉 醇 治 疗 Her-2 阳 性 乳 腺 癌 的 临 床 研 究 * 周 永 安, 刘 训 碧 黄 石 市 中 心 医 院 ( 普 爱 院 区 ) 乳 腺 肿 瘤 外 科, 湖 北 黄 石 435000 摘 要 : 目 的 探 析 注 射 用 曲
University of Science and Technology of China A dissertation for master s degree Research of e-learning style for public servants under the context of
中 国 科 学 技 术 大 学 硕 士 学 位 论 文 新 媒 体 环 境 下 公 务 员 在 线 培 训 模 式 研 究 作 者 姓 名 : 学 科 专 业 : 导 师 姓 名 : 完 成 时 间 : 潘 琳 数 字 媒 体 周 荣 庭 教 授 二 一 二 年 五 月 University of Science and Technology of China A dissertation for
% GIS / / Fig. 1 Characteristics of flood disaster variation in suburbs of Shang
20 6 2011 12 JOURNAL OF NATURAL DISASTERS Vol. 20 No. 6 Dec. 2011 1004-4574 2011 06-0094 - 05 200062 1949-1990 1949 1977 0. 8 0. 03345 0. 01243 30 100 P426. 616 A Risk analysis of flood disaster in Shanghai
Syngene GBOXHR Retsch MM400 KQ DE Eppendorf Table 1 The sources of Astragali Radix and Hedysarum Radix No. 1 AMM2011_NMGTY Astr
PCR 龙平, 崔占虎, 李虔全, 徐建平, 张春红, 周立社 * *, 李旻辉 ( 包头医学院, 内蒙古包头 014060) DNA 30 28 DNA trnl-trnf PCR PCR 136 bp 323 bp 10% PCR PCR Astragalus membranaceus Fisch. Bge. var. mongho- licus Bge. Hsiao A. membranaceus
Microsoft Word - 793-797 tb20150504赵宏宇s-高校教改纵横.doc
微 生 物 学 通 报 Microbiology China tongbao@im.ac.cn Apr. 20, 2016, 43(4): 793 797 http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn DOI: 10.13344/j.microbiol.china.150504 高 校 教 改 纵 横 生 物 工 程 专 业 发 酵 课 程 群 建 设 探 索 * 赵 宏 宇
Microsoft Word - 201506定版
56 Chinese Journal of Library and Information Science for Traditional Chinese Medicine Dec. 2015 Vol. 39 No. 6 综 述 中 医 药 学 语 言 系 统 研 究 综 述 于 彤, 贾 李 蓉, 刘 静, 杨 硕 *, 董 燕, 朱 玲 中 国 中 医 科 学 院 中 医 药 信 息 研 究 所,
戊 酸 雌 二 醇 片 联 合 宫 颈 注 射 利 多 卡 因 用 于 绝 经 后 妇 女 取 环 的 临 床 效 果 评 价 陆 琴 芬, 等 371 Keywords groups, no removal difficulties and failure, was statistically s
370 临 床 与 病 理 杂 志 J Clin Pathol Res 2015, 35(3) http://www.lcbl.net doi: 10.3978/j.issn.2095-6959.2015.03.009 View this article at: http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.2095-6959.2015.03.009 戊 酸 雌 二 醇 片 联
United Nations ~ ~ % 2010
42 3 2018 5 Vol. 42 No. 3 May 2018 38 Population Research 2014 60 3% ~ 4% 10% 60 +
380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂
![380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂](/thumbs/43/23114460.jpg "380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂")
中 国 细 胞 生 物 学 学 报 Chinese Journal of Cell Biology 2011, 33(4): 379-384 http://www.cjcb.org 全 小 麦 啤 酒 酵 母 菌 株 的 诱 变 育 种 及 应 用 研 究 袁 仲 1* 张 百 胜 1 张 慎 举 1 马 绮 云 2 陈 柯 羽 2 ( 1 商 丘 职 业 技 术 学 院 园 林 食 品 加 工 系,
TGF-β AngⅡ B SD ~ 220g SPF. SCXK No SYXK ~ 25 40% ~ 70% OR37G-C
2017 7 43 4 Journal of Southwest Minzu University Natural Science Edition Jul. 2017 Vol. 43 No. 4 doi10. 11920 /xnmdzk. 2017. 04. 008 1 1 1 2 1 1 3 1. 610212 2. 6100413. 610031 AngⅡ TGF-β. SD 60 180 ~
600 现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 5 期 2016 年 5 月 were significantly decreased, but the levels of IL-12 in two groups were significantly increa
现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 5 期 2016 年 5 月 599 喘 可 治 注 射 液 联 合 细 辛 脑 注 射 液 治 疗 小 儿 毛 细 支 气 管 炎 的 临 床 研 究 唐 辉 英, 佘 定 平, 马 颐 娇 深 圳 市 儿 童 医 院 呼 吸 科, 广 东 深 圳 518026 摘 要 : 目 的 探 讨 喘 可 治 注 射 液 联 合
20 世 纪 80 年 代 国 际 社 会 提 出 流 产 后 保 健 (post abortion care,pac) 理 念,1991 年 国 际 项 目 支 持 与 服 务 组 织 (IPAS) 首 次 把 流 产 后 保 健 服 务 定 位 为 一 种 重 要 的 生 殖 保 健 服 务,
中 国 流 产 后 保 健 服 务 (PAC) 的 实 施 与 效 果 1 杨 薇, 李 阳, 梁 霁 2, 钱 序 复 旦 大 学 公 共 卫 生 学 院, 卫 生 部 卫 生 技 术 评 估 重 点 实 验 室 ( 上 海 ) 200032 摘 要 : 流 产 后 保 健 服 务 (PAC) 是 国 际 社 会 倡 导 的 改 善 妇 女 生 殖 健 康 以 及 生 活 质 量 的 一 种 服
<4D6963726F736F667420576F7264202D20B2CCA3BA4542B2A1B6BE52746120496747BFB9CCE5D3EBB1C7D1CAB0A9B7D6C6DAB5C4B9D8CFB52E646F63>
EB 病 毒 Rta/IgG 抗 体 与 鼻 咽 癌 分 期 的 关 系 蔡 永 林, 郑 裕 明, 成 积 儒, 李 军, 莫 永 坤, 钟 青 燕 ( 广 西 梧 州 市 红 十 字 会 医 院, 梧 州 市 肿 瘤 防 治 研 究 所, 广 西 梧 州 543002) 摘 要 : 目 的 探 讨 EB 病 毒 Rta/IgG 抗 体 与 鼻 咽 癌 临 床 分 期 的 关 系 方 法 用 酶
4期
中 国 农 学 通 报 2013,29(04):39-43 Chinese Agricultural Science Bulletin 中 药 荆 芥 最 新 研 究 进 展 1,2 1,2 赵 立 子, 魏 建 和 ( 1 北 京 协 和 医 学 院 药 用 植 物 研 究 所, 北 京 100193; 2 中 草 药 物 质 基 础 与 资 源 利 用 教 育 部 重 点 实 验 室, 北 京
19
2010 7 32 4 Modern Law Science Jul. 2010 Vol. 32 No. 4 1001-2397 2010 04-0018 - 12 210046 DF6 A DOI 10. 3969 /j. issn. 1001-2397. 2010. 04. 02 2010-04 - 21 1971-18 19 1 A A0 A1 A2 A3 A0 A1 A2 A0 A0 A1
标题
环 球 中 医 药 2016 年 5 月 第 9 卷 第 5 期 摇 Global Traditional Chinese Medicine, May 2016,Vol 郾 9, No 郾 5 摇 557 两 种 电 针 对 脊 髓 损 伤 14 天 后 大 鼠 运 动 功 能 神 经 元 及 MEK2 p 鄄 ERK1 表 达 的 影 响 论 著 宋 良 玉 摇 吕 威 摇 景 泉 凯 摇 莫 雨
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103 年 度 生 科 司 學 門 發 展 規 劃 及 成 果 報 告 科 技 部 生 命 科 學 研 究 發 展 司 中 華 民 國 104 年 1 月 31 日 目 錄 1. 生 物 科 學 學 門... 1 2. 農 產 資 源 科 學 學 門... 13 3. 農 業 環 境 科 學 學 門... 33 4. 生 物 多 樣 性 及 長 期 生 態 學 門... 45 5. 形 態 及 生
相 关 报 道 近 年 来 临 床 上 运 用 多 种 针 灸 疗 法 治 疗 肥 胖 及 其 引 起 的 并 发 症, 如 高 脂 血 症 糖 尿 病 高 血 压 及 痛 经 等, 均 获 得 满 意 疗 效. caused by sedentary lifestyle and genetic f
在 线 投 稿 : http://www.baishideng.com/wcjd/ch/index.aspx 帮 助 平 台 : http://www.wjgnet.com/esps/helpdesk.aspx DOI: 10.11569/wcjd.v24.i5.815 世 界 华 人 消 化 杂 志 2016 年 2 月 18 日 ; 24(5): 815-820 ISSN 1009-3079 (print)
1 y ml / h kg x mg /d y 2. 5 ml / h kg 0. 3 ml / h kg y = 0. 143 + 0. 046 x r = 0. 994 7 10 PAVELKA 2 Wistar 5 Br - Cl - HCO3 - ClO - 4 SCN - 14 d 82
1006-446X 2011 10-0001-021 1 2 1. 201800 2. 201800 2001 2010 80% 8 5 O 613. 43 R 969 A 1857 1912 1980 20 1 1. 1 SOREMARK 1960 12 d 1 SANGSTER 1983 10 d MAY 1992 8 ~ 14 d 6 ~ 8 d RAUWS 1975 91 mg /kg 3
22 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2011 Vol. 43 No % 3% 3% /% % 6. 67% 1. 71% 1. 11% 0. 14% 0.
2011 43 5 21 3 1 1* 1 2 3 1 1. 2. 3. 78. 68±2. 95 g 28 300 3 5 3% 3 1 ALT TP ALB AST 0. 05 P>0. 05 ALT TP ALB P>0. 05 AST 0. 05 GLOB P>0. 05 2 INS 0. 05 TSH T 3 0. 05 P>0. 05 GLU GH T4 IGF-I P>0. 05 S816.
1 1. M J M M J M J M M J
2018 3 40 2 Modern Law Science Mar. 2018 Vol. 40 No. 2 1001-2397 2018 02-0041 - 16 100872 DF092 A DOI 10. 3969/j. issn. 1001-2397. 2018. 02. 03!"# 1 2017-12 - 05 2017 17CFX006 1. 1982 M. 1997 73-146 216-244.
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212 绎 Vol.14 No.5 ScienceDirect 阴 元元 元元 / 99978 5 doi: 1.3969/j.issn.1674-3849.212.5.3 2 1 29 72.7% 21 27.1% 24.26% 1 [1] 1 2 21 7.85 [2] 1 29 21% 662 26 9.38 211 3.8 27.2% 1 212-3-26 212-1-19 元 UL16/9-Y4/CMS/WYT1/ICMS
,,,, 1980,,,,, 1980, (, J,1980) (,,1980) (,,1982) (,1980) (,1982) (, 1983) (,1983) (, 1983) (,1983) (,1985) (, C,1985), 1981 1982,,, : (1980 ),,,,,, (
2006 2 No. 2,2006 122 JOURNAL OF HISTORIOGRAPHY Serial No. 122 (, 100875 ;, 100006) [ ],, [ ] [ ] K092 [ ]A []100225332 (2006) 0220001211, :,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, [] 2005212220 1924 ;,, ( :,,1924 ),,,,,,,,,
200 31 5 SWAN 0. 01 0. 01 6 min TITAN Thunder Identification Tracking Analysis SWAN TITAN and Nowcasting 19 TREC Tracking Radar Echo by Correlaction T
31 1 2013 3 Journal of Arid Meteorology Vol. 31 No. 1 March 2013. SWAN J. 2013 31 1 199-205. doi 10. 11755 /j. issn. 1006-7639 2013-01 - 0199 SWAN 730020 2011 7 7 SWAN SWAN 2012 2 SWAN 1006-7639 2013-01
instillation therapy combined with Western medicine can reduce the levels of ALT, TBA, ALP, TBIL, DBIL and GGT, and improve the anti-cmv-igm negative
在 线 投 稿 : http://www.baishideng.com/wcjd/ch/index.aspx 帮 助 平 台 : http://www.wjgnet.com/esps/helpdesk.aspx DOI: 10.11569/wcjd.v23.i28.4568 世 界 华 人 消 化 杂 志 2015 年 10 月 8 日 ; 23(28): 4568-4573 ISSN 1009-3079
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38 3 2014 5 Vol. 38 No. 3 May 2014 55 Population Research + + 3 100038 A Study on Implementation of Residence Permit System Based on Three Local Cases of Shanghai Chengdu and Zhengzhou Wang Yang Abstract
Dan Buettner / /
39 1 2015 1 Vol. 39 No. 1 January 2015 74 Population Research 80 + /60 + 90 + 90 + 0 80 100028 Measuring and Comparing Population Longevity Level across the Regions of the World Lin Bao Abstract Appropriate
* 0 0 50 0 0 1 196 Rachel Carson 0 50 0 0 011 1986 1994 009 7 0 4007 zlhhorse@ 16. com * 1949 010 11YJC7907 1 181 017 0 0 1950 195 1 195 1 1955 1 1956 1 1956 7 1 1957 10 1958 11 1960 5 196 0 1 18 7 199
第 37 卷 第 5 期 自 然 论 坛 亿, 相 当 于 总 人 口 的 1/4; 到 2050 年, 比 重 将 达 到 1/3, 相 当 于 三 个 人 中 就 有 一 个 老 年 人 2013 年 上 海 市 60 岁 及 以 上 老 年 人 口 为 387.62 万 人, 占 总 人 口
Chinese Journal of Nature Vol. 37 No. 5 NATURE FORUM doi:10.3969/j.issn.0253-9608.2015.05.007 医 学 模 式 和 健 康 服 务 12 姚 志 洪 1 中 国 科 学 院 上 海 健 康 科 学 研 究 所, 上 海 200025;2 上 海 交 通 大 学 医 学 院 附 属 瑞 金 医 院, 上 海 200025
JOURNAL OF EARTHQUAKE ENGINEERING AND ENGINEERING VIBRATION Vol. 31 No. 5 Oct /35 TU3521 P315.
31 5 2011 10 JOURNAL OF EARTHQUAKE ENGINEERING AND ENGINEERING VIBRATION Vol. 31 No. 5 Oct. 2011 1000-1301 2011 05-0075 - 09 510405 1 /35 TU3521 P315. 8 A Earthquake simulation shaking table test and analysis
/MPa / kg m - 3 /MPa /MPa 2. 1E ~ 56 ANSYS 6 Hz (a) 一阶垂向弯曲 (b) 一阶侧向弯曲 (c) 一阶扭转 (d) 二阶侧向弯曲 (e) 二阶垂向弯曲 (f) 弯扭组合 2 6 Hz
31 3 Vol. 31 No. 3 218 9 Journal of Shijiazhuang Tiedao University Natural Science Edition Sep. 218 1 1 2 1 2 1 1. 543 2. 543 U462. 3 217-2 - 16 A 295-373 218 3-63 - 6 1-4 5-7 8-11 1 11 11 398 mm 86 mm
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On comprehensive prevention and control strategies of hand foot mouth disease Zhao-min Yang Center for Disease Control and Prevention of Shangluo City, Shangluo, Shanxi, China Received: Jul 08, 2016 Accepted:
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16 3 2011 6 Vol 16 No 3 JOURNAL OF HARBIN UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY Jun 2011 1 2 3 1 150040 2 150040 3 450052 1 3 4 > 1 ~ 3 > > U414 A 1007-2683 2011 03-0121- 06 Shrinkage Characteristics of
~ 10 2 P Y i t = my i t W Y i t 1000 PY i t Y t i W Y i t t i m Y i t t i 15 ~ 49 1 Y Y Y 15 ~ j j t j t = j P i t i = 15 P n i t n Y
* 35 4 2011 7 Vol. 35 No. 4 July 2011 3 Population Research 1950 ~ 1981 The Estimation Method and Its Application of Cohort Age - specific Fertility Rates Wang Gongzhou Hu Yaoling Abstract Based on the
H 2 SO ml ml 1. 0 ml C 4. 0 ml - 30 min 490 nm 0 ~ 100 μg /ml Zhao = VρN 100% 1 m V ml ρ g
16 6 2018 11 Chinese Journal of Bioprocess Engineering Vol. 16 No. 6 Nov. 2018 doi 10. 3969 /j. issn. 1672-3678. 2018. 06. 004 1 2 1 1 1. 330200 2. 330006 4 Box-Behnken 1 25 g /ml 121 92 min 2 6. 284%
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 1339 非 酒 精 性 脂 肪 性 肝 病 (nonalcoholic fatty liver disease,nafld) 是 一 种 与 胰 岛 素 抵 抗 遗
1338 中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 九 味 肝 泰 胶 囊 对 高 脂 饮 食 诱 导 大 鼠 非 酒 精 性 脂 肪 肝 的 治 疗 作 用 陈 菲 1 2,, 艾 国 3, 盛 柳 青 1, 麻 佳 蕾 1, 黄 正 明 1. 金 华 职 业 技 术 学 院 医 学 院, 浙 江 金 华
固本解郁法?治
81 J Chin Med 13(2): 81-88, 2002 固 本 解 鬱 法 論 治 中 風 後 抑 鬱 症 (poststroke depression) 對 照 研 究 劉 慶 憲 1,2 宋 永 建 3 1 浙 江 省 平 湖 市 中 醫 醫 院 神 經 內 科 浙 江, 平 湖, 中 國 2 上 海 第 二 醫 科 大 學 2002 屆 高 級 醫 師 班 3 上 海 第 二 醫 科
rights and interests of doctors and patients. But it is insufficient jurisprudential basis and legitimacy crisis of legal forms through the form of mi
1 Vol. 3 6 No. 1 36 2 0 1 8 1 Hebei Law Science Jan. 2 0 1 8 DOI 10. 16494 /j. cnki. 1002-3933. 2018. 01. 011 511436 DF36 A 1002-3933 2018 01-0117-13 Study on the Jurisprudential Basis on the Implementation
43 14. 45 3 7 220 1 2 cm /s 2 1. 5 3 1 4 c d 1 /40 1 /4 1 /9 600 0. 129 6 7 1 /6 400 1 /256 000 1. 5 2 2 2. 1 /m /Hz /kn / kn m 6 6 0. 1 ~ 50 600 1 80
43 14 2013 7 Building Structure Vol. 43 No. 14 Jul. 2013 * 1 1 1 2 3 3 3 2 2 1 100013 2 430022 3 200002 1 40 ETABS ABAQUS TU355 TU317 +. 1 A 1002-848X 2013 14-0044-04 Compairion study between the shaking
3期
中 国 农 学 通 报 2014,30(3):15-19 Chinese Agricultural Science Bulletin 棉 花 叶 面 施 肥 研 究 进 展 李 永 旗, 李 鹏 程, 刘 爱 忠, 董 合 林 ( 中 国 农 业 科 学 院 棉 花 研 究 所 / 棉 花 生 物 学 国 家 重 点 实 验 室, 河 南 安 阳 455000) 摘 要 : 作 物 叶 面 施 肥
Vol. 22 No. 4 JOURNAL OF HARBIN UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY Aug GPS,,, : km, 2. 51, , ; ; ; ; DOI: 10.
22 4 2017 8 Vol. 22 No. 4 JOURNAL OF HARBIN UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY Aug. 2017 150080 GPS,,, : 27. 36 km, 2. 51, 110. 43, ; ; ; ; DOI: 10. 15938 /j. jhust. 2017. 04. 015 U469. 13 A 1007-2683
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中 国 环 境 科 学 2012,32(5):933~941 China Environmental Science 系 统 动 力 学 在 空 港 区 域 规 划 环 境 影 响 评 价 中 的 应 用 刘 慧 1,2, 郭 怀 成 1*, 盛 虎 1, 都 小 尚 1,3, 李 娜 1 1, 杨 永 辉 (1. 北 京 大 学 环 境 科 学 与 工 程 学 院, 北 京 100871; 2.
,,,,,,,,,,1861 12 ; (),,,,,,,, 1862,1864 8,,() () () () () () (), :,,,,,,,,,,,,,,,, 95 %,, 1.,,, 20 (1838 ) (1873 ),1 1 1953 1953 18731953 ( ) 54440 3
() FUDAN JOURNAL (Social Sciences) 2000 5 No. 5 2000 ( 200433) [] [ ],,,, [] K254 C921 [] A [ ] 0257 0289(2000) 05 0033 012 The Effect of the War of the Taiping Heavenly Kingdom On the Population of Zhejiang
38 張 元 素 歸 經 引 經 理 論 研 究 本 文 以 張 元 素 著 述 為 主 要 材 料, 采 用 上 海 涵 芬 樓 景 印 元 杜 思 敬 濟 生 拔 粹 刊 本 4 ; 醫 學 啟 源 為 任 應 秋 點 校 本, 任 本 以 明 成 化 八 年 刊 本 為 底 本, 旁 校 上
J Chin Med 24(1): 37-47, 2013 37 1 1,2, * 1,2 1,2 1 2 101 04 09 101 09 26 張 元 素, 字 潔 古, 金 代 易 州 ( 河 北 易 水 ) 人, 他 學 識 淵 博, 臨 證 經 驗 豐 富, 善 於 化 裁 古 方 他 建 立 了 以 臟 腑 辨 證 為 核 心 的 臨 床 證 治 體 系, 創 新 了 用 藥 理 論,
临床路径管理模式下医疗服务流程的关键环节分析
临 床 路 径 管 理 模 式 下 医 疗 服 务 流 程 的 关 键 环 节 分 析 郭 淑 岩 陶 红 兵 曲 豪 柯 晓 华 刘 鹏 珍 梁 婧 摘 要 采 取 文 献 综 述 相 关 资 料 分 析 和 医 生 意 愿 调 查 等 方 法 找 出 影 响 医 院 临 床 路 径 管 理 服 务 流 程 的 主 要 环 节, 邀 请 已 经 开 展 临 床 路 径 的 医 院 相 关 人 员
《红楼梦》中茗烟与李贵的对比分析
第 13 卷 第 2 期 中 南 大 学 学 报 ( 社 会 科 学 版 ) Vol.13 No.2 2007 年 4 月 J. CENT. SOUTH UNIV. (SOCIAL SCIENCE) Apr. 2007 红 楼 梦 茗 烟 与 李 贵 形 象 比 较 研 究 李 鸿 渊, 奉 旨 亨 ( 湖 南 科 技 大 学 人 文 学 院, 湖 南 湘 潭,411201) 摘 要 : 茗 烟 与
畜牧 动物医学 蚕 蜂
中国农学通报 2015,31(20):181-185 Chinese Agricultural Science Bulletin 老河口市砂梨花期的物候特点分析 邓 环 1 马德栗 1 徐洪海 2 洪国平 1 2 武汉区域气候中心 武汉 430074 老河口气象局 湖北老河口 441800 1 摘 要 为掌握湖北省老河口市砂梨花期的物候规律 利用老河口市 20 年的砂梨裂蕾期 初花期 和盛花期 4
标题
012 Journal of Library Science in China 嘉 兴 模 式 的 延 伸 与 深 化 : 从 总 分 馆 体 系 到 图 书 馆 服 务 体 系 李 超 平 摘 要 嘉 兴 模 式 包 含 两 个 体 系 : 一 是 以 总 分 馆 为 核 心 的 公 共 图 书 馆 服 务 体 系, 二 是 跨 系 统 的 图 书 馆 服 务 联 盟 体 系 研 究 发 现, 从
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国 际 中 医 中 药 杂 志 2016 年 6 月 第 38 卷 第 6 期 Int J Trad Chin Med, June 2016, Vol. 38, No.6 481 国 外 传 统 医 学 管 理 模 式 探 讨 一 带 一 路 胡 艳 敏 李 宗 友 徐 俊 李 彦 文 王 俊 文 姜 威 赵 阳 摘 要 传 统 医 学 以 其 在 疾 病 治 疗 及 预 防 保 健 中 的 确 切
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journal.newcenturyscience.com/index.php/gjanp Global Journal of Advanced Nursing Practice,214,Vol.1,No.1 The practicality of an improved method of intravenous infusion exhaust specialized in operating
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中 国 科 学 院 生 物 物 理 研 究 所 年 鉴 2010 生 物 物 理 研 究 所 二 〇 一 一 年 六 月 1 主 编 : 陈 长 杰 责 任 编 辑 : 姜 兆 林 封 面 设 计 : 汪 会 盛 摄 影 : 王 强 2 目 录 前 言... 6 总 类... 7 中 国 科 学 院 生 物 物 理 研 究 所 2010 年 度 总 结... 8 中 共 中 国 科 学 院 生 物
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* CO3 A 1674-2486 2011 04-0005 - 18 P. 253 * 5 1. 1949 1991 1949 1991 6 2. 7 1 2001 2 2008 8 1 2 2008 11 http / /www. rnd. ncnu. edu. tw /hdcheng /method /ways. doc 2008 / 9 disciplinary matrix 1 1. 2001
168 健 等 木醋对几种小浆果扦插繁殖的影响 第1期 the view of the comprehensive rooting quality, spraying wood vinegar can change rooting situation, and the optimal concent
第 31 卷 第 1 期 2013 年 3 月 经 济 林 研 究 Nonwood Forest Research Vol. 31 No.1 Mar. 2013 木醋对几种小浆果扦插繁殖的影响 健 1,2 杨国亭 1 刘德江 2 (1. 东北林业大学 生态研究中心 黑龙江 哈尔滨 150040 2. 佳木斯大学 生命科学学院 黑龙江 佳木斯 154007) 摘 要 为了解决小浆果扦插繁殖中生根率及成活率低等问题
. 弘 光 學 報 65 期. 壹 前 言 脊 髓 損 傷 (spinal cord injury) 是 人 生 遭 遇 的 一 項 重 大 災 難 事 件, 常 與 意 外 伴 隨 發 生 例 如 車 禍 高 處 跌 落 等 ( 周 陳 賴,2008), 台 灣 每 年 約 有 一 千 兩 百 人
運 用 Watson 理 論 照 顧 一 位 脊 髓 損 傷 患 者 之 護 理 經 驗 1 廖 惠 雅 2 劉 紋 妙 1 弘 光 科 技 大 學 護 理 系 2 中 臺 科 技 大 學 護 理 系 收 到 日 期 :100.3.4 修 訂 日 期 :100.6.2 接 受 日 期 :100.6.22 摘 要 本 文 乃 運 用 全 人 評 估 方 法 收 集 資 料, 依 Watson 人 性
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止 善 創 刊 號 主 題 論 述 26 年 12 月 頁 13-113 科 技 大 學 通 識 教 育 中 心 新 時 代 通 識 教 育 中 生 命 科 學 概 論 的 課 程 與 教 學 新 時 代 通 識 教 育 中 生 命 科 學 概 論 的 課 程 與 教 學 陳 靖 棻 科 技 大 學 生 物 技 術 研 究 所 通 識 教 育 中 心 助 理 教 授 摘 要 自 DNA 雙 股 螺
~ ~ ~
36 4 2015 385 ~ 397 The Chinese Journal for the History of Science and Technology Vol. 36 No. 4 2015 1951 ~ 1956 100049 100190 1951 ~ 1966 1951 ~ 1956 N092 P62-092 A 1673-1441 2015 04-0385-13 1951 ~ 1966
第一章 緒論
Journal of China Institute of Technology Vol.30-2004.6 A Study on the Value Concept and Related Factors of the Students in Vocational High School in Taiwan Tseng-Chai ChengJan- Shing SunChing-Kuo Cheng
220 20, Vol. 32, No. 6 食 品 科 学 分 析 检 测 荡 体 系 被 用 来 检 测 和 鉴 别 组 成 极 其 复 杂 的 中 药 2007 年 [7-20] 张 泰 铭 等 提 出 了 中 药 非 线 性 化 学 指 纹 图 谱 的 概 念, 并 对 其 形 成 的 原
![220 20, Vol. 32, No. 6 食 品 科 学 分 析 检 测 荡 体 系 被 用 来 检 测 和 鉴 别 组 成 极 其 复 杂 的 中 药 2007 年 [7-20] 张 泰 铭 等 提 出 了 中 药 非 线 性 化 学 指 纹 图 谱 的 概 念, 并 对 其 形 成 的 原](/thumbs/42/22870184.jpg "220 20, Vol. 32, No. 6 食 品 科 学 分 析 检 测 荡 体 系 被 用 来 检 测 和 鉴 别 组 成 极 其 复 杂 的 中 药 2007 年 [7-20] 张 泰 铭 等 提 出 了 中 药 非 线 性 化 学 指 纹 图 谱 的 概 念, 并 对 其 形 成 的 原")
29 赵 哲, 张 泰 铭, *, 方 宣 启 2, 向 凤 琴, 乔 君 喜, 朱 蓉 (. 中 南 大 学 化 学 化 工 学 院, 湖 南 长 沙 40083;2. 湖 南 省 食 品 质 量 监 督 检 验 所, 湖 南 长 沙 40002) 通 过 向 稳 态 体 系 溴 酸 钠 - 硫 酸 锰 - 硫 酸 - 丙 酮 中 加 入 不 同 的 茶 饮 料, 获 得 来 自 不 同 产 家
2 JCAM. June,2012,Vol. 28,NO. 6 膝 关 节 创 伤 性 滑 膜 炎 是 急 性 创 伤 或 慢 性 劳 损 所 致 的 关 节 滑 膜 的 无 菌 性 炎 症, 发 病 率 达 2% ~ 3% [1], 为 骨 伤 科 临 床 的 常 见 病 多 发 病 近 年 来
![2 JCAM. June,2012,Vol. 28,NO. 6 膝 关 节 创 伤 性 滑 膜 炎 是 急 性 创 伤 或 慢 性 劳 损 所 致 的 关 节 滑 膜 的 无 菌 性 炎 症, 发 病 率 达 2% ~ 3% [1], 为 骨 伤 科 临 床 的 常 见 病 多 发 病 近 年 来](/thumbs/42/22962570.jpg "2 JCAM. June,2012,Vol. 28,NO. 6 膝 关 节 创 伤 性 滑 膜 炎 是 急 性 创 伤 或 慢 性 劳 损 所 致 的 关 节 滑 膜 的 无 菌 性 炎 症, 发 病 率 达 2% ~ 3% [1], 为 骨 伤 科 临 床 的 常 见 病 多 发 病 近 年 来")
针 灸 临 床 杂 志 2012 年 第 28 卷 第 6 期 1 临 床 研 究 针 刀 治 疗 膝 关 节 创 伤 性 滑 膜 炎 的 临 床 研 究 向 伟 明 1, 丁 思 明 1, 张 秀 芬 2, 权 五 成 2, 唐 吉 莲 1, 杨 友 金 1, 黄 涣 强 1, 颜 勋 1, 曾 晓 宇 1, 朱 传 芳 1 1, 张 雄 ( 1. 重 庆 市 梁 平 县 第 二 人 民 医 院,
1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法
![1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法](/thumbs/40/22057924.jpg "1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法")
1448 相 对 校 正 因 子 在 中 药 多 指 标 测 定 中 的 应 用 研 究 进 展 1, 罗 祖 良 2, 仇 峰 1 1,, 韦 日 伟 2 1,, 覃 禹 2, 张 坤 1, 覃 洁 萍 2, 杨 美 华 1. 北 京 协 和 医 学 院 药 用 植 物 研 究 所, 中 草 药 物 质 基 础 与 资 源 利 用 教 育 部 重 点 实 验 室, 北 京 100193 2. 广
1.0 % 0.25 % 85μm % U416 Sulfate expansion deformation law and mechanism of cement stabilized macadam base of saline areas in Xinjiang Song
1.0 % 0.25 % 85μm 0.97 0.136 % U416 Sulfate expansion deformation law and mechanism of cement stabilized macadam base of saline areas in Xinjiang Song Liang 1,2 Wang Xuan-cang 1 1 School of Highway, Chang
ELECTRIC DRIVE FOR LOCOMOTIVES The Research and Development of Modern Railway Traction and Control Technology (CSR Zhuzhou Institute Co., Ltd., Zhuzhou, Hunan 412001, China) Abstract: The technology of
: 307, [], [2],,,, [3] (Response Surface Methodology, RSA),,, [4,5] Design-Expert 6.0,,,, [6] VPJ33 ph 3,, ph, OD, Design-Expert 6.0 Box-Behnken, VPJ3
![: 307, [], [2],,,, [3] (Response Surface Methodology, RSA),,, [4,5] Design-Expert 6.0,,,, [6] VPJ33 ph 3,, ph, OD, Design-Expert 6.0 Box-Behnken, VPJ3](/thumbs/42/23094730.jpg ": 307, [], [2],,,, [3] (Response Surface Methodology, RSA),,, [4,5] Design-Expert 6.0,,,, [6] VPJ33 ph 3,, ph, OD, Design-Expert 6.0 Box-Behnken, VPJ3")
微 生 物 学 通 报 FEB 20, 2008, 35(2) 306~30 Microbiology 2008 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@im.ac.cn 生 物 实 验 室 响 应 面 分 析 法 优 化 副 溶 血 性 弧 菌 生 长 条 件 刘 代 新 宁 喜 斌 * 张 继 伦 2 (. 200090) (2. 20202) 摘 要
[1-3] (Smile) [4] 808 nm (CW) W 1 50% 1 W 1 W Fig.1 Thermal design of semiconductor laser vertical stack ; Ansys 20 bar ; bar 2 25 Fig
![[1-3] (Smile) [4] 808 nm (CW) W 1 50% 1 W 1 W Fig.1 Thermal design of semiconductor laser vertical stack ; Ansys 20 bar ; bar 2 25 Fig](/thumbs/91/106435555.jpg "[1-3] (Smile) [4] 808 nm (CW) W 1 50% 1 W 1 W Fig.1 Thermal design of semiconductor laser vertical stack ; Ansys 20 bar ; bar 2 25 Fig")
40 6 2011 6 Vol.40 No.6 Infrared and Laser Engineering Jun. 2011 808 nm 2000 W 1 1 1 1 2 2 2 2 2 12 (1. 710119 2. 710119) : bar 808 nm bar 100 W 808 nm 20 bar 2 000 W bar LIV bar 808 nm : : TN248.4 TN365
304 吳淑鈿 4 的文化理想其境界比夏氏於唐詩中最推重的孟郊詩更高 第二部份討論夏注梅詩 所表現的詩歌審美觀念夏氏肯定梅堯臣在詩學上能學唐而有所樹立開拓宋詩新 境他一方面推崇梅詩能開多種境界的平淡一方面強調梅詩開宋詩面目的能鍊和 求生新綜融唐宋開發無窮境界也是夏氏的詩學理想第三部份討論夏注梅詩 的
夏注 梅堯臣詩 的詩學意義 吳淑鈿 香港浸會大學中文系 近代學者夏敬觀 1875 1953 於 1940 年出版了六本唐宋金詩選注其一為 梅堯臣 1 詩 梅堯臣的詩歌在宋代備受推崇但元明後肯定其成就者卻不多清代至後期 2 始由同光派重新提倡 夏敬觀是同光派中最大力推舉梅詩的學人對梅詩作了深入 3 研究選注之外尚對全部詩作做了校注 於現代梅詩研究有重要意義具有探討 價值本論文以夏注梅詩的詩學意義作為研究範圍考察夏氏選注的詩學思想詩
by industrial structure evolution from 1952 to 2007 and its influence effect was first acceleration and then deceleration second the effects of indust
2011 2 1 1 2 3 4 1. 100101 2. 100124 3. 100039 4. 650092 - - - 3 GDP U 20-30 60% 10% TK01 A 1002-9753 2011 02-0042 - 10 Analysis on Character and Potential of Energy Saving and Carbon Reducing by Structure
助 剂 改 善 其 止 血 效 果 1 实 验 1.1 原 料 和 试 剂 家 蚕 蛹 经 过 提 取 蛹 油 蛋 白 质 后 剩 余 的 残 渣 ( 主 要 成 分 为 蛹 皮 ), 烘 干 除 杂 粉 碎 后 待 用 ; 壳 聚 糖 ( 成 都 市 科 龙 化 工 试 剂 厂 ), 脱 乙 酰
研 究 与 技 术 蚕 蛹 壳 聚 糖 复 合 止 血 材 料 的 制 备 及 凝 血 性 能 初 探 陈 超, 单 其 艳, 杨 铭, 蓝 广 芊, 吴 大 洋 ( 西 南 大 学 纺 织 服 装 学 院, 重 庆 400716) 摘 要 : 探 讨 以 蚕 蛹 壳 聚 糖 (CS) 和 明 胶 (GEL) 为 主 要 原 料 制 备 复 合 止 血 材 料 的 工 艺 及 凝 血 效 果 首 先
度 身 體 活 動 量 ; 芬 蘭 幼 兒 呈 現 中 度 身 體 活 動 量 之 比 例 高 於 臺 灣 幼 兒 (5) 幼 兒 在 投 入 度 方 面 亦 達 顯 著 差 異 (χ²=185.35, p <.001), 芬 蘭 與 臺 灣 幼 兒 多 半 表 現 出 中 度 投 入 與 高 度
臺 灣 與 芬 蘭 幼 兒 園 室 內 自 由 遊 戲 內 涵 之 探 討 林 昭 溶 毛 萬 儀 經 國 管 理 暨 健 康 學 院 幼 兒 保 育 系 副 教 授 joyce@ems.cku.edu.tw 吳 敏 而 國 家 教 育 研 究 院 研 究 員 rozwu@mail.naer.edu.tw wanyi@ems.cku.edu.tw 摘 要 自 由 遊 戲 被 視 為 是 幼 兒 的
标题
医 药 导 报 2016 年 8 月 第 35 卷 第 8 期 803 特 约 稿 鱼 腥 草 制 剂 上 市 后 安 全 性 再 评 价 吴 健 鸿 1 ꎬ 杨 晓 燕 2 ꎬ 柳 强 妮 2 ꎬ 尹 平 2 2 ꎬ 曾 繁 典 (1. 武 汉 药 品 医 疗 器 械 检 验 所 ꎬ 武 汉 430075ꎻ2. 华 中 科 技 大 学 同 济 医 学 院 ꎬ 武 汉 430030) 摘 要 目 的
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64 4 Journal of Taiwan Agricultural Engineering 107 12 Vol. 64, No. 4, December 2018 DOI: 10.29974/JTAE.201812_64(4).0005 WASP - Applying the WASP Model to Evaluate the Effect of Wastewater Sewer Takeover
基于因子分析法对沪深农业类上市公司财务绩效实证分析
山 东 农 业 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ),2014,45(3):449-453 VOL.45 NO.3 2014 Journal of Shandong Agricultural University (Natural Science Edition) doi:10.3969/j.issn.1000-2324.2014.03.024 基 于 因 子 分 析 法 对 沪 深 农 业
3 461 DNA lx PDV PDV 2 10% ~ 15% PDV PDV 1 PDV PDV PDV Tagashira PDV d 5 Co
Chinese Bulletin of Entomology 2010 47 3 460 ~ 466 檻檻 檻檻檻檻檻檻檻檻檻檻檻檻 * 450002 Parasitic effects on host Plutella xylostella testes by two endoparasitoids. HE Fan BAI Su-Fen LI Xin CHAO Yun-Fei College of
those four kinds of factors are significantly associated with the intention to institutional care of the elderly without ADL disability. However for t
2014 6 207 POPULATION & ECONOMICS No. 6 2014 Tot. No. 207 100872 Logistic C913. 6 A 1000-4149 2014 06-0022 - 13 DOI 10. 3969 /j. issn. 1000-4149. 2014. 06. 003 A Study on the Factors Associated with Preferences
197 2 相 关 背 景 多 巴 胺 D 2 类 受 体 包 括 D 2 D 3 和 D 4 受 体 1975 年,Randrup 首 先 提 出, 多 巴 胺 可 能 参 与 抑 郁 症 的 发 病 后 来 Maj 等 通 过 一 系 列 的 实 验 证 明, 几 乎 所 有 的 长 期 抗 抑
196 未 来 药 物 新 型 多 巴 胺 D 2 类 受 体 部 分 激 动 剂 brexpiprazole 刘 长 鹰 1, 于 鹏 2, 李 祎 亮 1 1. 天 津 药 物 研 究 院 天 津 市 新 药 设 计 与 发 现 重 点 实 验 室, 天 津 300193 2. 天 津 药 物 研 究 院 医 药 信 息 中 心, 天 津 300193 摘 要 : 在 多 巴 胺 D 2 类 受
% 8. 48% 3 80 Alcalase Novozymes Alcalase 2. 4 L Bacillus licheniformis 2. 4 AU /g 1. 2 Hitachi S-4700 JEOL JEM-1200EX Olympus Bu
2011 33 6 1117-1121 http / /xuebao. jxau. edu. cn Acta Agriculturae Universitatis Jiangxiensis E - mail ndxb7775@ sina. com * 311400 Alcalase 2. 4 L TS225. 1 + 6 A 1000-2286 2011 06-1117 - 05 A Study on
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第 26 卷 第 5 期 2013 年 9 月 北 京 航 空 航 天 大 学 学 报 ( 社 会 科 学 版 ) Journal of Beijing University of Aeronautics and Astronautics( Social Sciences Edition) Vol. 26 摇 No. 5 September, 2013 中 国 国 防 科 技 研 发 投 入 特 点
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网 络 环 境 下 元 认 知 策 略 运 用 的 性 别 差 异 研 究 王 志 茹 ( 湖 北 大 学 外 国 语 学 院, 武 汉 430062) 摘 要 : 研 究 以 问 卷 的 形 式 对 参 加 网 络 英 语 课 程 学 习 的 520 名 大 学 生 的 元 认 知 策 略 使 用 中 的 性 别 差 异 进 行 调 查 研 究 采 用 独 立 样 本 T 检 验 对 性 别 差
第 33 卷 第 2 期 2010 年 4 月 - 149 - 脱 蛋 白 较 好 的 方 法 是 Sevag 法, 它 是 根 据 蛋 白 质 在 氯 仿 等 有 机 溶 剂 中 变 性 的 特 点, 使 蛋 白 质 变 性 成 胶 状, 此 法 条 件 温 和, 可 避 免 多 糖 的 降 解
- 148 - Drug Evaluation Research Vol.33 No.2 April 2010 植 物 多 糖 的 研 究 进 展 陶 遵 威 1, 郑 夺 1, 邸 明 磊 2, 单 晓 菊 1 天 津 市 医 药 科 学 研 究 所, 天 津 300020; 2 天 津 中 医 药 大 学, 天 津 300073 2 摘 要 多 糖 是 由 单 糖 连 接 而 成 的 多 聚 物,
PCA+LDA 14 1 PEN mL mL mL 16 DJX-AB DJ X AB DJ2 -YS % PEN
21 11 2011 11 COMPUTER TECHNOLOGY AND DEVELOPMENT Vol. 21 No. 11 Nov. 2011 510006 PEN3 5 PCA + PCA+LDA 5 5 100% TP301 A 1673-629X 2011 11-0177-05 Application of Electronic Nose in Discrimination of Different
貓兒見了魚鮮飯—嚐不出甜味
蘇 東 坡 的 秘 方 淺 談 鮮 味 受 器 味 道 就 好 比 人 生, 酸 甜 苦 鹹, 哇! 有 夠 新 鮮! 宋 朝 元 豐 三 年, 蘇 東 坡 因 烏 臺 詩 案 而 被 貶 到 黃 州, 他 在 那 兒 平 日 就 是 吟 詩 作 對, 恬 淡 度 生 以 忘 卻 官 場 的 不 順 遂 某 日 家 中 將 有 客 人 來 訪, 東 坡 兄 草 草 將 豬 肉 洗 滌 乾 淨 後,
, 12 2,, 6486 22372 ( IARC) / ( IACR) 41528 (CIFC), 1993 1997 89489 31307,,, 1, 1996 1997 2, 1993 1997 5 ; + 4, 19931997, ( 19961997 ) ; () 19931997 1
12 1993 1997 1, 2, 1, 1 3, (1., 100021 ;2., 100044 ;3., 100021) :[ ], [ ] /, 12 1993 1997 [ ], 12 108 915 759, 230 024, 161 602 88 %, 0. 578,,,,12 14/ 10 21/ 10 11/ 10 15/ 10 ; 169. 3/ 10 359. 7/ 10 48.
2013-04-A4
第 47 卷第 4 期 2013 年 4 月 武汉体育学院学报 武汉体育学院学报 Journal of Wuhan Institute of Physical Education Vol.47 No.4 第 47 卷 Apr. 2013 中国武术技术传承要树立 拳种意识 周建新 南京晓庄学院 体育系 江苏 南京 210038 摘 要 运用文献资料法 逻辑分析法等研究方法 对中国武术拳种所具有的文化内涵进行探究
林学 园艺
中国农学通报 2015,31(10):153-157 Chinese Agricultural Science Bulletin 蚬壳花椒资源繁育与有效成分研究进展 杨 辉 李 猛 王 平 孙吉康 代明龙 中南林业科技大学生命科学与技术学院 长沙 410004 摘 要 总结了蚬壳花椒的一般特性及生长发育特征 地理分布差异 组织培养 扦插嫁接 有性繁育 遗 传多样性分析 药用成分的种类 有效成分的分离纯化方法
θ 1 = φ n -n 2 2 n AR n φ i = 0 1 = a t - θ θ m a t-m 3 3 m MA m 1. 2 ρ k = R k /R 0 5 Akaike ρ k 1 AIC = n ln δ 2
35 2 2012 2 GEOMATICS & SPATIAL INFORMATION TECHNOLOGY Vol. 35 No. 2 Feb. 2012 1 2 3 4 1. 450008 2. 450005 3. 450008 4. 572000 20 J 101 20 ARMA TU196 B 1672-5867 2012 02-0213 - 04 Application of Time Series
- 14 - Drug Evaluation Research 第 36 卷 第 1 期 2013 年 2 月 料 ), 山 西 皇 城 相 府 药 业 有 限 公 司, 批 号 20111003 ( 人 口 服 推 荐 剂 量 为 每 日 3 次, 每 次 4 粒, 成 人 体 质 量 按 60
Drug Evaluation Research 第 36 卷 第 1 期 2013 年 2 月 - 13 - 柴 青 消 癖 胶 囊 对 乳 腺 增 生 模 型 大 鼠 的 治 疗 作 用 研 究 * 刘 聪, 岳 永 花, 郝 旭 亮 山 西 省 中 医 药 研 究 院, 山 西 太 原 030012 摘 要 : 目 的 探 讨 柴 青 消 癖 胶 囊 对 乳 腺 增 生 模 型 大 鼠 的 治
Abstract The adult higher education is a vital part of the higher education. As an essential tache of selecting qualified students, the adult college entrance examination plays an important role in securing
6期
中 国 农 学 通 报 015,1(6):58-64 Chinese Agricultural Science Bulletin 村 委 会 在 落 实 农 村 低 保 政 策 中 的 优 劣 势 及 战 略 选 择 基 于 五 竹 镇 行 政 村 的 实 地 调 查 研 究 梁 小 云, 尚 明 瑞 ( 甘 肃 农 业 大 学 人 文 学 院, 兰 州 70070) 摘 要 : 村 委 会 作 为
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聞 風 色 變 跨 越 物 種 界 線 的 禽 流 感 林 煥 雯 臺 中 市 立 忠 明 高 級 中 學 前 言 如 果 出 現 一 場 流 感 大 爆 發,500 萬 到 1.5 億 人 將 會 喪 生 世 界 衛 生 組 織 (WHO) 專 家 大 衛 納 巴 羅 (David Nabarro) 博 士 9 月 29 日 說 今 年 無 疑 是 流 行 病 學 家 戒 慎 恐 懼 的 一 年,
吴 郁 玲 等 : 农 户 对 宅 基 地 使 用 权 确 权 效 应 的 认 知 研 究 以 武 汉 市 为 例 29 the paper tried to provide a basis to improve the confirmation policy efficiency and to f
第 30 卷 第 4 期 2016 年 4 月 中国土地科学 China Land Sciences Vol.30 No.4 Apr.,2016 doi: 10.11994/zgtdkx.20160523.153245 农户对宅基地使用权确权效应的认知研究 以武汉市为例 吴郁玲 1 侯 娇 1 冯忠垒 2 周 勇 1 1. 华中师范大学城环学院 湖北 武汉 430079 2. 中国地质大学 武汉 经济管理学院
34 22 f t = f 0 w t + f r t f w θ t = F cos p - ω 0 t - φ 1 2 f r θ t = F cos p - ω 0 t - φ 2 3 p ω 0 F F φ 1 φ 2 t A B s Fig. 1
22 2 2018 2 Electri c Machines and Control Vol. 22 No. 2 Feb. 2018 1 2 3 3 1. 214082 2. 214082 3. 150001 DOI 10. 15938 /j. emc. 2018. 02. 005 TM 301. 4 A 1007-449X 2018 02-0033- 08 Research of permanent
SVM OA 1 SVM MLP Tab 1 1 Drug feature data quantization table
38 2 2010 4 Journal of Fuzhou University Natural Science Vol 38 No 2 Apr 2010 1000-2243 2010 02-0213 - 06 MLP SVM 1 1 2 1 350108 2 350108 MIP SVM OA MLP - SVM TP391 72 A Research of dialectical classification
10.11648.j.sd.20160403.18
Science Discovery 2016; 4(3): 202-206 http://www.sciencepublishinggroup.com/j/sd doi: 10.11648/j.sd.20160403.18 ISSN: 2331-0642 (Print); ISSN: 2331-0650 (Online) Construction for the Engineering Application-Oriented
2 ( 自 然 科 学 版 ) 第 20 卷 波 ). 这 种 压 缩 波 空 气 必 然 有 一 部 分 要 绕 流 到 车 身 两 端 的 环 状 空 间 中, 形 成 与 列 车 运 行 方 向 相 反 的 空 气 流 动. 在 列 车 尾 部, 会 产 生 低 于 大 气 压 的 空 气 流
第 20 卷 第 3 期 2014 年 6 月 ( 自 然 科 学 版 ) JOURNAL OF SHANGHAI UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE) Vol. 20 No. 3 June 2014 DOI: 10.3969/j.issn.1007-2861.2013.07.031 基 于 FLUENT 测 轨 道 交 通 隧 道 中 电 波 折 射 率 结 构 常 数 张 永