深圳市乳腺癌研究报告（2014）

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1 深 圳 市 乳 腺 癌 研 究 报 告 (2014) 深 圳 市 科 技 创 新 委 员 会 2014 年 12 月 1

2 目 录 第 一 章 概 述... 4 第 一 节 报 告 的 背 景... 4 第 二 节 报 告 的 范 围... 5 第 二 章 国 内 外 乳 腺 癌 研 发 现 状 及 发 展 趋 势... 7 第 一 节 国 内 外 乳 腺 癌 早 期 诊 断 技 术 研 发 现 状 及 发 展 趋 势... 7 一 国 内 外 乳 腺 癌 早 期 诊 断 技 术 研 发 现 状... 8 二 国 内 外 乳 腺 癌 早 期 诊 断 技 术 研 发 趋 势 第 二 节 国 内 外 乳 腺 癌 机 制 及 新 药 靶 标 研 究 现 状 及 发 展 趋 势 一 国 内 外 乳 腺 癌 机 理 及 药 物 靶 标 研 究 现 状 二 国 内 外 乳 腺 癌 分 子 机 制 及 药 物 靶 点 研 究 趋 势 第 三 节 国 内 外 新 药 研 发 现 状 及 发 展 趋 势 一 国 内 外 抗 体 / 重 组 蛋 白 药 物 研 发 现 状 与 发 展 趋 势 二 国 内 外 新 型 肿 瘤 疫 苗 发 展 现 状 及 趋 势 三 国 内 外 小 分 子 靶 向 药 物 研 发 现 状 及 发 展 趋 势 四 国 内 外 免 疫 细 胞 治 疗 现 状 及 发 展 趋 势 五 国 内 外 新 型 制 剂 技 术 现 状 与 发 展 趋 势 第 三 章 深 圳 乳 腺 癌 技 术 研 发 状 况 第 一 节 深 圳 乳 腺 癌 早 期 诊 断 研 发 状 况 一 深 圳 早 期 诊 断 发 展 对 比 分 析 二 深 圳 乳 腺 癌 早 期 诊 断 研 发 面 临 的 挑 战 第 二 节 深 圳 分 子 机 制 及 新 药 靶 标 研 发 状 况 一 深 圳 乳 腺 癌 基 础 研 究 情 况 二 深 圳 乳 腺 癌 基 础 研 究 面 临 的 挑 战 第 三 节 深 圳 乳 腺 癌 新 药 研 发 状 况 一 深 圳 乳 腺 癌 抗 体 / 重 组 蛋 白 药 物 研 发 状 况 二 深 圳 小 分 子 靶 向 药 物 研 发 状 况 三 深 圳 肿 瘤 免 疫 细 胞 治 疗 研 发 状 况 四 深 圳 新 型 制 剂 及 技 术 研 发 状 况

3 第 四 章 深 圳 乳 腺 癌 技 术 研 发 指 引 第 一 节 深 圳 高 危 人 群 早 期 诊 断 研 发 指 引 一 发 展 战 略 二 发 展 目 标 三 核 心 技 术 开 发 方 向 四 发 展 成 果 第 二 节 深 圳 分 子 机 制 及 新 药 靶 标 研 发 指 引 一 发 展 战 略 二 发 展 目 标 三 核 心 技 术 开 发 方 向 四 发 展 成 果 第 三 节 深 圳 新 药 研 发 指 引 一 抗 体 / 重 组 蛋 白 药 物 / 疫 苗 发 展 指 引 二 小 分 子 靶 向 药 物 发 展 指 引 三 免 疫 细 胞 治 疗 发 展 指 引 第 五 章 乳 腺 癌 技 术 路 线 图 实 施 路 径 一 高 危 人 群 早 期 诊 断 二 分 子 机 制 及 新 药 靶 标 研 究 三 新 药 研 发 附 深 圳 市 乳 腺 癌 研 究 指 南 ( 征 集 中 )

4 第 一 章 概 述 本 报 告 以 女 性 易 发 肿 瘤 乳 腺 癌 为 靶 标, 整 合 基 础 研 究 早 期 诊 断 新 药 研 发 等 创 新 链 条, 以 期 打 造 深 圳 市 一 批 拳 头 产 品 及 核 心 竞 争 力, 加 强 和 巩 固 深 圳 市 生 物 医 药 产 业 的 特 色 与 优 势 第 一 节 报 告 的 背 景 在 发 达 国 家 和 地 区, 乳 腺 癌 是 女 性 肿 瘤 发 病 率 和 死 亡 率 排 名 第 一 的 恶 性 肿 瘤 在 世 界 范 围 内, 乳 腺 癌 占 所 有 癌 症 发 病 率 的 10%, 占 女 性 癌 症 发 病 率 的 32% 女 性 癌 症 死 亡 率 的 15% 根 据 2014 年 的 数 据, 我 国 女 性 乳 腺 癌 患 者 数 占 全 部 女 性 恶 性 肿 瘤 患 者 数 的 16.97%, 位 列 女 性 患 癌 的 第 二 位, 发 病 呈 年 轻 化 趋 势 我 国 乳 腺 癌 死 亡 率, 上 世 纪 70 年 代 为 2.95/10 万, 年 为 5.90/10 万,30 年 间 上 升 了 近 1 倍 而 欧 美 发 达 国 家 乳 腺 癌 死 亡 率 自 1987 年 起 呈 显 著 下 降 趋 势 深 圳 市 作 为 我 国 改 革 开 放 的 前 沿 城 市, 其 经 济 产 业 发 展 速 度 一 直 位 居 国 内 前 列, 其 乳 腺 癌 的 发 病 率 也 逐 年 递 增, 并 高 于 全 国 平 均 增 长 率, 乳 腺 癌 发 病 率 居 女 性 最 常 见 恶 性 肿 瘤 的 第 一 位, 已 成 为 深 圳 女 性 的 第 一 杀 手, 乳 腺 癌 发 病 年 龄 高 峰 期 在 40 岁 至 49 岁 之 间 4

5 乳 腺 癌 发 病 率 和 死 亡 率 的 持 续 上 升, 表 明 现 有 的 诊 断 与 治 疗 技 术 还 不 能 满 足 临 床 的 需 求, 与 乳 腺 癌 相 关 的 产 业 存 在 巨 大 的 发 展 空 间 比 如 在 治 疗 药 物 方 面, 美 国 专 业 的 医 疗 产 业 市 场 调 查 公 司 Decision Resources 公 司 称,2009 年 全 球 乳 腺 癌 药 物 的 市 场 约 为 102 亿 美 元,2013 年 中 国 乳 腺 癌 治 疗 药 物 市 场 价 值 约 为 3 亿 美 元 第 二 节 报 告 的 范 围 报 告 内 容 包 括 : 乳 腺 癌 早 期 诊 断 技 术 研 究 乳 腺 癌 分 子 机 理 及 药 物 靶 点 研 究 乳 腺 癌 新 药 研 发 等 乳 腺 癌 早 期 诊 断 包 括 : 深 圳 市 乳 腺 癌 流 行 病 学 调 查 研 究 乳 腺 癌 高 危 人 群 筛 查 技 术 开 发 乳 腺 癌 精 确 分 子 分 型 标 记 物 研 究 乳 腺 癌 早 期 检 测 及 监 控 技 术 研 究 乳 腺 癌 高 通 量 基 因 测 序 质 量 管 理 体 系 和 检 测 性 能 标 准 的 建 立 等 乳 腺 癌 分 子 机 理 药 物 靶 点 研 究 包 括 : 乳 腺 癌 新 颖 靶 向 分 子 的 发 现 与 鉴 定 乳 腺 癌 相 关 的 重 要 信 号 通 路 的 研 究 乳 腺 癌 相 关 的 重 要 基 因 及 其 蛋 白 的 研 究 乳 腺 癌 相 关 的 重 要 细 胞 过 程 的 研 究 乳 腺 癌 相 关 的 肿 瘤 干 细 胞 研 究 乳 腺 癌 耐 药 机 制 及 评 估 指 标 研 究 实 验 室 至 临 床 的 转 化 医 学 研 究 乳 腺 癌 新 药 研 发 包 括 : 抗 体 药 物 重 组 蛋 白 药 物 肿 瘤 疫 苗 小 分 子 靶 向 药 物 和 相 关 制 剂 的 研 发, 以 及 乳 腺 癌 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 开 发 5

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7 第 二 章 国 内 外 乳 腺 癌 研 发 现 状 及 发 展 趋 势 与 乳 腺 癌 相 关 的 研 究, 从 检 测 到 治 疗, 已 取 得 长 足 的 进 步 乳 腺 癌 诊 断 研 究 方 面, 已 由 早 期 的 物 理 诊 断 技 术, 发 展 到 基 于 基 因 分 析 的 精 确 分 子 诊 断 与 分 型 技 术, 再 发 展 到 基 于 循 环 肿 瘤 细 胞 的 无 创 检 测 技 术 ; 乳 腺 癌 基 础 研 究 及 药 物 靶 点 研 究 方 面, 已 发 现 一 批 如 BRCA1 和 BRCA2 等 乳 腺 癌 风 险 基 因 ; 乳 腺 癌 药 物 研 发 方 面, 抗 体 药 物 小 分 子 靶 向 药 新 型 制 剂 及 细 胞 免 疫 治 疗 技 术 更 是 发 展 迅 速 第 一 节 国 内 外 乳 腺 癌 早 期 诊 断 技 术 研 发 现 状 及 发 展 趋 势 近 年 来, 乳 腺 癌 普 查 得 到 逐 步 推 广 而 对 于 早 期 较 小 的 乳 腺 癌 病 灶, 采 用 普 查 常 用 的 B 超 钼 靶 以 及 磁 共 振 等 辅 助 检 查 技 术, 其 诊 断 率 并 不 理 想 ; 通 过 这 些 辅 助 检 查 技 术 得 到 确 诊 时, 很 多 患 者 已 出 现 了 典 型 的 临 床 症 状, 错 过 了 保 乳 手 术 的 最 佳 时 机 多 学 科 的 综 合 治 疗, 即 手 术 化 疗 放 疗 内 分 泌 治 疗 及 分 子 靶 向 治 疗, 一 直 是 乳 腺 癌 治 疗 的 成 熟 模 式 然 而, 同 样 是 乳 腺 癌, 不 同 患 者 之 间 也 可 能 存 在 明 显 的 异 质 性 ; 对 两 个 组 织 学 类 型 分 期 都 相 同 的 乳 腺 癌 患 者, 实 施 同 一 标 准 化 治 疗 方 案, 各 自 的 疗 效 及 预 后 也 可 能 会 有 很 大 差 异 因 此, 对 乳 腺 癌 患 者 进 行 个 体 化 精 准 治 疗 就 显 得 尤 为 重 要 7

8 利 用 高 通 量 测 序 方 法 对 乳 腺 癌 精 确 分 型, 是 乳 腺 癌 个 体 化 精 准 治 疗 的 基 础 ; 对 这 一 新 方 法, 目 前 还 未 建 立 相 应 的 质 量 管 理 体 系 和 检 测 性 能 标 准 一 国 内 外 乳 腺 癌 早 期 诊 断 技 术 研 发 现 状 ( 一 ) 乳 腺 癌 分 子 诊 断 标 志 物 判 断 乳 腺 癌 预 后 的 指 标, 如 肿 瘤 大 小 临 床 分 期 淋 巴 结 转 移 等, 虽 已 被 公 认 ; 但 凭 借 这 些 指 标 做 出 的 判 断 并 不 准 确 全 面 因 此 寻 找 相 关 性 更 强 的 乳 腺 癌 预 后 指 标, 是 近 年 来 临 床 研 究 的 热 点 随 着 分 子 生 物 学 研 究 的 不 断 深 入, 已 相 继 开 展 了 一 些 新 的 预 后 因 子 检 测 与 判 断, 如 ER PR HER-2 等 ( 见 表 2-1) 表 2-1 乳 腺 癌 分 子 标 志 物 研 究 情 况 分 子 标 志 物 目 前 临 床 应 用 目 前 存 在 问 题 ER PR HER-2 血 清 标 记 物 CA15-3/ BR27.29 upa 和 PAI-1 多 基 因 标 志 ( 多 个 肿 瘤 基 因 复 合 筛 查 ) 评 价 乳 腺 癌 预 后 ; 指 导 内 分 泌 治 疗 的 指 标 预 后 不 良 的 独 立 生 物 学 指 标 及 靶 向 治 疗 参 考 判 断 乳 腺 癌 的 进 展 与 转 移 参 考 指 标, 已 有 部 分 检 测 试 剂 盒 上 市 转 移 指 标 预 后 及 监 测 免 疫 组 织 化 学 检 测 假 阳 性 高 适 用 于 部 分 患 者 特 异 性 和 灵 敏 性 不 足, 只 能 作 为 参 考 需 采 用 新 鲜 活 检 样 本 检 测, 可 操 作 性 差 仍 待 研 究 Brca1 和 Brca2 家 族 性 乳 腺 癌 风 险 预 测 适 用 于 部 分 患 者 8

9 1. 雌 激 素 受 体 (ER-α) 和 孕 激 素 受 体 (PR) 从 上 世 纪 70 年 代 起, 配 体 结 合 实 验, 被 用 来 检 测 乳 腺 癌 患 者 的 雌 激 素 受 体, 进 而 指 导 乳 腺 癌 的 临 床 治 疗 约 20 年 后, 免 疫 组 织 化 学 法, 因 操 作 简 便 重 复 性 好 成 本 低 廉 等 优 势, 逐 渐 取 代 配 体 结 合 实 验 法, 成 为 临 床 上 广 泛 应 用 的 雌 激 素 受 体 (ER-α) 孕 激 素 受 体 (PR) 检 测 技 术 采 用 雌 激 素 受 体 (ER-α) 孕 激 素 受 体 (PR) 指 标 评 价 乳 腺 癌 预 后 和 指 导 内 分 泌 治 疗, 其 阳 性 表 达 者 肿 瘤 细 胞 分 化 好 增 殖 率 低 病 程 发 展 较 慢 内 分 泌 治 疗 反 应 好 目 前, 美 国 临 床 肿 瘤 学 会 (ASCO) 认 为, 所 有 新 确 诊 的 浸 润 性 乳 腺 癌 患 者 均 应 进 行 雌 激 素 受 体 (ER-α) 孕 激 素 受 体 (PR) 检 测, 对 于 同 时 发 现 的 多 发 肿 瘤 病 灶, 应 至 少 检 测 一 个 病 灶, 优 选 最 大 的 病 灶 对 于 新 确 诊 的 导 管 原 位 癌 (DCIS) 患 者, 通 常 也 推 荐 检 测 雌 激 素 受 体 (ER-α) 孕 激 素 受 体 (PR) 据 最 新 资 料, 目 前 雌 激 素 受 体 (ER-α) 孕 激 素 受 体 (PR) 免 疫 组 织 化 学 检 测 结 果 的 假 阳 性 和 假 阴 性 率 高 达 20% 这 就 意 味 着 部 分 乳 腺 癌 患 者, 在 接 受 不 应 该 接 受 的 治 疗, 或 者 未 接 受 应 该 接 受 的 治 疗 为 此 需 要 加 强 对 雌 激 素 受 体 (ER-α) 孕 激 素 受 体 (PR) 免 疫 组 织 化 学 检 测 技 术 的 质 量 控 制 2008 年 美 国 临 床 肿 瘤 学 会 (ASCO) 对 于 该 项 内 容 进 行 了 严 格 的 规 定, 以 确 保 检 测 过 程 规 范 结 果 准 确 报 告 清 晰 9

10 2.HER-2 基 因 HER-2( 又 称 c-erbb-2/neu) 是 一 种 细 胞 来 源 的 原 癌 基 因, 位 于 l7 号 染 色 体 q21 上, 编 码 p185 跨 膜 糖 蛋 白, 是 人 类 表 皮 生 长 因 子 受 体 家 族 的 第 2 个 成 员 HER-2 基 因, 具 有 酪 氨 酸 激 酶 活 性, 可 促 进 细 胞 分 裂 和 蛋 白 水 解 酶 分 泌 DNA 合 成 增 加 癌 细 胞 生 长 加 快 细 胞 运 动 能 力 增 强, 促 进 肿 瘤 细 胞 的 侵 袭 和 转 移 HER-2 阳 性, 是 乳 腺 癌 预 后 不 良 的 独 立 生 物 学 指 标 它 比 激 素 受 体 肿 瘤 体 积 更 有 价 值, 是 仅 次 于 淋 巴 结 状 况 的 乳 腺 癌 预 后 指 标 研 究 表 明,HER-2 表 达 与 乳 腺 癌 组 织 学 分 级 呈 正 相 关, 表 达 率 越 高, 预 后 越 差 ;HER-2 过 度 表 达 和 ( 或 ) 扩 增, 是 选 择 赫 赛 汀 治 疗 的 基 本 条 件 和 治 疗 疗 效 预 测 因 子 HER-2 作 为 靶 向 治 疗 的 参 考 已 运 用 于 临 床, 并 取 得 了 较 好 效 果 3. 血 清 标 记 物 CA15-3/BR27.29 乳 腺 癌 特 异 性 标 志 物 CA15-3, 是 大 分 子 糖 蛋 白 抗 原 类 似 的 蛋 白 肿 瘤 标 志 物 还 有 BR27.29 CA-549 MCA 等 这 类 蛋 白 的 灵 敏 度 和 特 异 性 相 似, 同 时 使 用 多 个 这 类 蛋 白 肿 瘤 标 志 物, 并 不 能 提 供 更 多 的 信 息 美 国 FDA 和 我 国 CFDA 都 批 准 了 一 些 采 用 ELISA 和 化 学 发 光 法 等 技 术 的 CA15-3 检 测 试 剂 盒 上 市 但 是 美 国 临 床 肿 瘤 学 会 (ASCO) 临 床 应 用 准 则 规 定 : 不 能 使 用 CA15-3 进 行 10

11 乳 腺 癌 的 筛 选 诊 断 和 分 期, 允 许 采 用 CA15-3 和 BR27.29 来 判 断 乳 腺 癌 的 进 展 与 转 移 我 国 对 血 清 CA15-3 作 为 乳 腺 癌 早 期 诊 断 指 标 进 行 过 一 些 探 讨, 但 都 非 常 初 步 临 床 结 果 显 示, 乳 腺 癌 转 移 病 人 中 60-80% 的 CA15-3 水 平 会 升 高 ;CA15-3 可 用 于 乳 腺 癌 病 人 治 疗 过 程 中 病 情 的 进 展 和 消 退 的 监 测 4.uPA 和 PAI-1 尿 激 酶 型 纤 溶 酶 原 激 活 剂 (upa) 是 一 种 丝 氨 酸 蛋 白 酶, 功 能 是 使 纤 溶 酶 原 转 变 为 纤 溶 酶 在 细 胞 迁 移 和 组 织 重 建 过 程 中,uPA 介 导 细 胞 周 围 的 蛋 白 分 解 upa 系 统 在 恶 性 肿 瘤 的 侵 袭 转 移 过 程 中 发 挥 着 极 其 重 要 的 作 用 upa 与 乳 腺 癌 的 研 究 很 多, 都 表 明 upa 与 乳 腺 癌 患 者 预 后 有 关 PAI-1 和 PAI-2 是 upa 的 抑 制 剂 纤 溶 酶 原 激 活 剂 抑 制 剂 (PAI-1 和 PAI-2) 由 正 常 细 胞 和 肿 瘤 细 胞 产 生, 与 其 受 体 结 合 可 抑 制 upa 的 活 性 PAI-1 活 性 远 高 于 PAI-2, 是 主 要 的 upa 抑 制 剂, 它 由 血 小 板 上 皮 细 胞 颗 粒 细 胞 和 肿 瘤 细 胞 生 成 PAI-2 由 肿 瘤 细 胞 滋 养 层 细 胞 单 核 细 胞 生 成, 妊 娠 妇 女 血 浆 中 高 度 存 在 Harbeck 等 通 过 测 定 乳 癌 组 织 中 upa 和 PAI-1, 提 示 淋 巴 结 阴 性 的 乳 癌 中, 低 upa/pai-1 与 低 复 发 风 险 相 关, 从 辅 助 化 疗 中 获 益 的 可 能 性 小 而 高 upa PAI-1 者 则 更 可 能 从 11

12 辅 助 化 疗 中 获 益 在 晚 期 转 移 的 患 者 中, 其 水 平 高 者 往 往 内 分 泌 治 疗 效 果 不 佳 在 国 外, 临 床 上 还 未 广 泛 采 用 upa 和 PAI-1 检 测 ; 原 因 是, 要 采 新 鲜 的 活 检 样 本 进 行 检 测, 实 施 难 度 较 大 在 我 国, 有 一 些 关 于 检 测 血 清 upa 和 PAI-1 蛋 白 和 核 酸 样 本 的 报 道, 但 由 于 没 有 经 过 系 统 的 评 价 和 确 认, 故 不 建 议 采 用 血 清 检 测 的 方 法 来 做 乳 腺 癌 的 预 后 或 预 测 指 标 相 信 随 着 研 究 的 不 断 深 入,uPA 系 统 在 恶 性 肿 瘤 的 预 防 诊 断 治 疗 及 预 后 方 面 会 占 有 重 要 的 地 位 5. 多 基 因 标 志 肿 瘤 发 生 会 有 一 系 列 基 因 状 态 异 常 肿 瘤 种 类 与 这 些 基 因 有 关, 归 纳 出 它 们 的 共 性 本 质, 就 能 找 到 此 类 肿 瘤 的 标 志 性 基 因 变 化 用 多 参 数 试 验 已 经 得 到 癌 症 患 者 某 些 最 有 潜 力 的 预 后 信 息, 即 用 基 因 表 达 微 矩 阵 或 多 重 RT-PCR 试 验 测 定 多 种 mrna (1)70 种 基 因 表 达 谱 检 测 70 种 基 因 表 达 谱 检 测 (MammaPrint panel) 是 一 种 研 究 基 因 标 志 的 好 方 法, 可 用 来 预 测 新 诊 断 乳 腺 癌 患 者 的 预 后 最 近 来 自 欧 洲 5 个 中 心 的 一 份 研 究 证 实, 这 70 个 基 因 标 志 是 有 效 的 这 项 研 究 样 本 包 含 302 例 淋 巴 结 阴 性 乳 腺 癌 患 者 与 传 统 的 辅 助 在 线 预 测 系 统 ( 基 于 经 典 的 临 床 病 理 因 素 ) 比 较,70 个 基 因 标 志 预 测 预 后 还 要 好 12

13 基 于 这 种 基 因 表 达 谱 的 商 品 化 产 品 是 Mamma-Print 在 2007 年,Mamma-Print 被 美 国 FDA 批 准 在 年 龄 <61 岁 I 期 或 Ⅱ 期 疾 病 肿 瘤 5cm 及 淋 巴 结 阴 性 的 乳 腺 癌 患 者 中 应 用, 同 其 他 临 床 病 理 因 素 联 合 决 定 预 后 (2)21 基 因 检 测 (Oncotype Dx) 21 个 基 因 检 测 (Oncotype Dx), 最 初 用 于 在 淋 巴 结 阴 性 雌 激 素 受 体 (ER) 阳 性 的 接 受 他 莫 昔 芬 (tamoxifen) 辅 助 治 疗 的 乳 腺 癌 患 者 中, 预 测 肿 瘤 远 程 转 移 危 险 性 的 能 力 这 21 个 基 因, 包 括 16 个 肿 瘤 相 关 基 因 及 5 个 参 考 基 因 其 中 肿 瘤 相 关 基 因 包 括 : 增 殖 相 关 基 因 (Ki-67 STK15 Survivin CyclinB1 MYBL2) 侵 袭 相 关 基 因 (Stromelysin3 Cathepsin L2) Her-2 相 关 基 因 (GRB7 Her-2) 激 素 相 关 基 因 (ER PR Bcl-2 SCUBE2) GSTM1 BAG1 C D 6 8; 而 5 个 参 考 基 因 则 为 B e t a - a c t i n GAPDH RPLPO GUS TFRC 按 照 美 国 临 床 肿 瘤 学 会 (ASCO) 指 南, 在 用 他 莫 昔 芬 治 疗 的 患 者 中,21 基 因 检 测 (Oncotype Dx) 能 预 测 肿 瘤 复 发 的 危 险 性 6. 乳 腺 癌 易 感 基 因 Brca1 和 Brca2 乳 腺 癌 患 者 中,5%-10% 的 患 者 有 家 族 史 对 乳 腺 癌 家 系 的 研 究 发 现, 两 个 乳 腺 癌 易 感 基 因 Brca1 和 Brca2, 存 在 可 遗 传 的 突 变 约 近 一 半 的 家 族 性 乳 腺 癌 患 13

14 者 Brca1 有 突 变 ; 家 族 性 乳 腺 癌 中 Brca2 突 变 率 达 到 35%, 在 男 性 乳 腺 癌 患 者 中 Brca2 突 变 的 更 为 多 见 乳 腺 癌 易 感 基 因 Brca1 或 Brca2 突 变 基 因 携 带 者, 一 生 中 患 乳 腺 癌 的 危 险 性 估 计 为 90% 虽 然 在 散 发 乳 腺 癌 中 Brca1 体 细 胞 突 变 比 较 少 见, 但 在 50% 散 发 乳 腺 癌 和 70% 的 散 发 卵 巢 癌 中 可 见 Brca1 等 位 基 因 的 杂 合 丢 失, 而 且 检 测 到 Brca1 表 达 降 低 流 行 病 学 资 料 表 明, 在 人 群 中 高 外 显 的 Brca1 突 变 频 率 为 1/500-1/2000, 这 些 突 变 占 了 70 岁 前 乳 腺 癌 患 者 的 约 2% ( 二 ) 乳 腺 癌 无 创 检 测 及 监 控 技 术 在 生 物 标 记 物 无 创 检 测 及 监 控 的 关 键 技 术 方 面, 已 经 上 市 的 捕 捉 或 富 集 循 环 肿 瘤 细 胞 (CTC) 的 方 法 超 过 40 种 如 利 用 抗 体 捕 获 表 达 有 上 皮 细 胞 表 面 蛋 白 的 CTC 较 有 影 响 的 包 括 CellSearch,HBCTC-Chip,MagSweep 等 2012 年 8 月,CFDA 正 式 批 准 美 国 CellSearch 循 环 肿 瘤 细 胞 检 测 与 分 析 系 统 用 于 乳 腺 癌 患 者 的 预 后 分 析 这 是 继 美 国 FDA 批 准 采 用 CellSearch 检 测 系 统 用 于 转 移 性 乳 腺 癌 结 直 肠 癌 及 前 列 腺 癌 的 预 后 评 估 无 进 展 生 存 (PFS) 期 和 总 生 存 (OS) 期 的 预 测 之 后, 中 国 首 次 批 准 进 入 临 床 检 测 国 内 相 应 技 术 研 发 还 处 于 探 索 阶 段, 但 有 的 已 取 得 了 突 破 性 进 展 例 如 以 华 大 基 因 为 代 表 的 研 究 机 构 与 重 点 医 院 积 极 合 作, 自 主 开 发 CTC 捕 获 系 统 试 点 应 用 于 临 床 实 践, 目 前 已 达 到 国 际 先 进 技 术 水 平 14

15 ( 三 ) 乳 腺 癌 分 子 分 型 根 据 美 国 国 家 综 合 癌 症 网 络 (NCCN) 指 南, 临 床 上 乳 腺 癌 主 要 分 为 四 大 类 :1.ER 阳 性 (ER 阳 性 Her-2 阴 性 ), 约 占 乳 腺 癌 的 65%~70%, 根 据 Ki-67( 一 种 增 殖 细 胞 相 关 的 核 抗 原 ) 表 达 的 高 低, 可 进 一 步 分 为 LuminalA 型 和 LuminalB 型 ;2.Her-2 阳 性 (Her-2 阳 性 ER 阴 性 ), 约 占 8.5%~15%; 3. 三 阴 性 (ER PR Her-2 均 为 阴 性 ), 约 占 15%;4. 三 阳 性 (ER PR Her-2 均 为 阳 性 ), 约 占 10% 三 阴 性 15% 三 阳 性 10% Her-2 阳 性 10% ER 阳 性 65% 图 2-1 乳 腺 癌 各 亚 型 分 布 情 况 多 基 因 分 型 应 用 也 有 长 足 发 展,21- 基 因 复 发 评 分 (RS) 技 术 将 一 些 不 能 从 化 疗 获 益 的 淋 巴 结 阴 性 患 者 或 淋 巴 结 阳 性 患 者 鉴 别 出 来 ;70 种 基 因 表 达 谱 定 义 出 的 预 后 好 的 那 一 组 人 群, 即 使 没 有 接 受 化 疗, 其 5 年 无 远 处 复 发 生 存 期 也 非 常 优 异 根 据 2012 年 Nature 杂 志 的 一 篇 报 道, 国 际 知 名 癌 症 合 作 组 织 TheCancerGenomeAtlas(TCGA)Network 采 用 组 学 15

16 (omics) 方 法, 将 乳 腺 癌 最 全 面 的 序 列 信 息 整 合 起 来, 揭 示 了 基 因 表 达 谱 亚 型 间 特 有 的 分 子 异 质 性 ( 见 图 2-2) 这 些 基 因 异 常 或 涉 及 到 的 信 号 通 路, 同 药 效 或 预 后 风 险 之 间 存 在 密 切 的 相 关 性 在 这 方 面 国 内 已 经 拥 有 相 同 水 平 技 术, 但 没 有 系 统 地 开 展 临 床 应 用 研 究, 在 产 业 应 用 上 尚 存 在 差 距 图 2-2 乳 腺 癌 分 型 技 术 的 发 展 ( 四 ) 乳 腺 癌 基 因 筛 查 技 术 应 用 现 状 经 过 近 二 十 年 的 发 展, 发 达 国 家 已 形 成 一 套 以 第 二 代 高 通 量 测 序 技 术 为 主 导 的 乳 腺 癌 个 体 化 诊 疗 服 务 产 品 及 健 康 服 务 产 业 模 式 在 乳 腺 癌 风 险 基 因 筛 查 方 面, 美 国 Myriad Genetics 公 司, 先 后 发 现 包 括 BRCA1 BRCA2 在 内 的 众 多 遗 传 风 险 基 因, 并 以 专 利 独 占 (2013 年 已 终 止 ) 的 形 式 开 展 相 关 基 因 检 测, 积 累 了 数 以 万 记 的 人 群 遗 传 信 息 资 料, 构 建 了 完 整 的 高 加 索 16

17 人 有 色 人 种 数 据 库 和 风 险 预 测 模 型, 建 立 起 包 括 医 院 保 险 传 媒 在 内 的 完 整 产 业 链 国 内 乳 腺 癌 风 险 基 因 相 关 研 究 尚 处 于 初 期 阶 段, 且 未 形 成 标 准 化 的 乳 腺 癌 基 因 检 测 及 风 险 评 估 产 业 模 式, 但 用 于 乳 腺 癌 风 险 基 因 检 测 筛 查 的 目 标 序 列 捕 获 + 高 通 量 测 序 分 析 技 术 条 件 已 经 成 熟 如 在 易 感 基 因 检 测 研 究 方 面, 目 前 只 局 限 于 百 人 量 级 的 BRCA1 BRCA2 基 因 突 变 研 究, 没 有 形 成 国 人 自 己 的 乳 腺 癌 基 因 模 型 及 系 统 化 的 健 康 服 务 平 台 从 深 圳 乳 腺 癌 发 病 现 状 看, 系 统 性 地 开 展 深 圳 市 乳 腺 癌 流 行 病 学 相 关 研 究 及 形 成 乳 腺 癌 防 治 产 业 化, 具 有 重 要 的 社 会 意 义 与 临 床 价 值 二 国 内 外 乳 腺 癌 早 期 诊 断 技 术 研 发 趋 势 寻 找 新 的 乳 腺 癌 诊 断 预 后 监 测 分 子 标 志 物, 探 索 和 建 立 新 的 筛 查 检 测 方 法, 依 然 是 乳 腺 癌 分 子 诊 断 技 术 发 展 的 重 点 方 向 特 别 是 非 侵 入 性 的 筛 选 血 液 样 本 技 术 的 开 发 随 着 乳 腺 癌 基 因 筛 查 技 术 的 应 用 推 广, 商 业 化 的 乳 腺 癌 筛 查 技 术 具 有 很 大 的 需 求 及 市 场 前 景 ( 见 表 2-2) 表 2-2 乳 腺 癌 早 期 诊 断 发 展 趋 势 分 析 内 容 目 前 发 展 情 况 未 来 发 展 趋 势 分 子 标 志 物 基 于 单 个 分 子 标 记 物 的 检 测 基 于 大 数 据 和 多 组 学 的 风 险 基 因 筛 查 分 子 分 型 方 法 基 于 ER PR Her-2 的 乳 腺 癌 分 型 基 于 21- 基 因 复 发 评 分 17

18 (RS) 技 术 ; 诊 断 技 术 大 部 分 是 活 体 检 测 70- 基 因 表 达 谱 ; 多 组 学 联 合 研 究 等 多 基 因 的 分 型 技 术 伴 随 诊 断 特 别 是 外 周 血 无 创 检 测 ( 一 ) 乳 腺 癌 伴 随 诊 断 1. 伴 随 诊 断 概 念 伴 随 诊 断 未 来 将 成 为 各 类 癌 症 的 诊 断 监 测 预 后 的 主 要 手 段 目 前 伴 随 诊 断 还 处 于 初 期 发 展 阶 段 伴 随 诊 断 (Companion Diagnostic,CD) 是 一 种 体 外 诊 断 技 术 患 者 接 受 特 定 药 物 治 疗 后 有 何 反 应, 采 用 伴 随 诊 断 就 能 够 获 取 相 关 信 息 这 些 信 息 将 有 助 于 确 定 某 种 治 疗 对 患 者 是 否 有 效, 因 而 可 以 改 善 治 疗 预 后 并 降 低 保 健 开 支 伴 随 诊 断 体 现 了 个 性 化 治 疗 的 特 点 随 着 靶 向 性 治 疗 产 品 的 大 量 开 发, 伴 随 诊 断 的 试 剂 盒 开 发 也 就 应 运 而 起 目 前 该 领 域 中 大 多 数 企 业 正 与 制 药 公 司 合 作, 为 其 管 线 药 物 开 发 伴 随 诊 断 试 剂 盒 从 适 应 症 划 分, 伴 随 诊 断 对 象 可 分 为 肿 瘤 心 血 管 疾 病 中 枢 神 经 系 统 炎 症 等 其 中, 肿 瘤 是 伴 随 诊 断 应 用 最 广 的 疾 病 领 域 现 在 已 有 多 种 伴 随 诊 断 试 剂 盒 开 发 出 来, 用 于 检 18

19 测 各 类 肿 瘤 生 物 标 志 物 其 研 发 的 主 要 驱 动 力, 是 靶 向 性 药 物 的 使 用 需 要 有 配 对 的 伴 随 诊 断 试 剂 盒 从 技 术 层 面 划 分, 伴 随 诊 断 技 术 可 分 为 免 疫 组 化 技 术 和 分 子 诊 断 技 术 由 于 实 时 PCR 原 位 杂 交 新 一 代 测 序 技 术 的 广 泛 使 用, 分 子 诊 断 技 术 得 到 快 速 发 展 另 外, 分 子 诊 断 技 术 诊 断 结 果 具 有 更 高 的 准 确 性 和 精 确 度, 推 动 了 该 项 技 术 的 广 泛 应 用 和 发 展 2013 年 度 The Scientist 杂 志 评 选 出 本 年 度 生 命 科 学 领 域 10 大 最 具 创 新 性 及 竞 争 力 的 产 品 与 技 术, 其 中 就 包 括 美 国 生 物 技 术 公 司 NanoString 开 发 的 乳 腺 癌 预 后 基 因 信 号 芯 片 NanoString 开 发 的 这 款 乳 腺 癌 预 后 基 因 信 号 芯 片, 就 是 一 个 很 好 的 伴 随 诊 断 产 品 综 上 可 知, 找 寻 新 的 乳 腺 癌 诊 断 预 后 预 示 分 子 标 志 物, 探 索 和 建 立 创 新 的 检 测 方 法 仍 将 是 乳 腺 癌 分 子 诊 断 技 术 的 发 展 重 点 2. 循 环 肿 瘤 细 胞 (circulating tumour cell CTC) 检 测 现 行 的 乳 腺 癌 预 后 预 测 指 标 都 得 通 过 乳 腺 活 检 的 方 式 进 行 测 定, 其 检 测 成 本 昂 贵 如 在 美 国, 在 不 含 保 险 的 情 况 下, 活 检 的 成 本 高 达 美 元 因 此, 开 发 非 侵 入 性 的 筛 选 血 液 样 本 新 技 术 将 非 常 有 前 景 自 上 世 纪 90 年 代, 科 学 家 们 就 已 经 知 道, 与 孕 妇 的 血 液 中 携 带 胎 儿 的 遗 传 信 息 相 类 似, 血 液 中 也 携 带 死 亡 肿 瘤 细 19

20 胞 的 基 因 片 段 Nature 杂 志 2013 年 3 月 刊 有 研 究 报 道 称 : 癌 症 患 者 的 肿 瘤 坏 死 细 胞 碎 片 大 部 分 进 入 血 液 循 环 然 而, 血 液 中 肿 瘤 碎 片 的 浓 度 极 低 ( 大 约 1/200), 其 检 测 的 可 靠 性 让 人 质 疑 波 士 顿 On-Q-ity 公 司 经 过 反 复 尝 试, 通 过 计 算 和 描 述 病 人 个 体 血 液 中 肿 瘤 DNA 来 治 疗 癌 症, 并 开 发 了 专 有 技 术, 即 循 环 肿 瘤 细 胞 (circulating tumour cell, 简 称 CTC), 开 启 了 个 性 化 的 癌 症 治 疗 的 新 时 代 2014 年 初, 美 国 Guardant Health 公 司 宣 布 其 已 开 发 出 一 种 非 侵 入 性 的 筛 选 血 液 样 本 新 技 术 Guardant 360 该 技 术 可 通 过 血 液 检 测 乳 腺 癌 肺 癌 结 直 肠 癌 皮 肤 癌 和 前 列 腺 癌 5 大 癌 症 在 恶 性 肿 瘤 转 移 过 程 中, 循 环 肿 瘤 细 胞 的 作 用 日 益 受 到 关 注 CTC 检 测 被 看 作 液 体 活 检, 具 有 实 时 监 测 功 能 CTC 的 计 数 和 分 子 分 析 还 可 以 为 肿 瘤 的 转 移 疗 效 评 价 预 后 判 断 以 及 个 体 化 治 疗 提 供 可 靠 的 依 据 大 量 研 究 已 经 证 实,CTC 检 测 将 有 助 于 乳 腺 癌 复 发 转 移 监 控 判 断 患 者 预 后 指 导 术 后 辅 助 治 疗 等 ( 二 ) 乳 腺 癌 基 因 检 测 服 务 应 用 发 展 趋 势 在 发 达 国 家 和 地 区, 已 经 形 成 乳 腺 癌 基 因 组 学 研 究 临 床 监 测 预 防 指 导 基 因 支 持 的 一 体 化 服 务 模 式 如 癌 症 全 基 因 组 测 序 公 司 Foundation Medicine, 在 2012 年 下 半 年 推 20

21 出 了 包 括 乳 腺 癌 在 内 的 多 种 肿 瘤 个 体 化 指 导 基 因 检 测 产 品 自 2013 年 底 首 次 公 开 募 资 以 来,Foundation Medicine 公 司 市 值 达 到 4 亿 美 金 又 如 在 乳 腺 癌 风 险 基 因 BRCA1 BRCA2 检 测 评 估 方 面, 美 国 Myriad 公 司 已 建 立 成 熟 的 临 床 应 用 模 式, 并 积 累 数 十 万 例 乳 腺 癌 高 危 人 群 的 风 险 基 因 及 临 床 数 据, 形 成 了 完 善 的 乳 腺 癌 基 因 检 测 和 风 险 预 测 管 理 系 统 在 2013 年 美 国 高 院 判 定 基 因 专 利 无 效 后, 这 一 检 测 技 术 得 到 了 广 泛 的 扩 散, 是 遗 传 性 乳 腺 癌 预 防 筛 查 的 首 选 方 法 国 内 乳 腺 癌 基 因 检 测 服 务 技 术, 仍 处 于 以 第 一 代 测 序 技 术 及 芯 片 检 测 技 术 为 主 的 阶 段, 主 要 在 一 线 城 市 的 三 甲 医 院 开 展 国 内 可 以 借 鉴 发 达 国 家 的 早 期 筛 查 模 式, 形 成 乳 腺 癌 防 治 一 体 化 的 应 用 模 式, 有 效 降 低 乳 腺 癌 发 病 率 与 死 亡 率, 提 高 目 标 人 群 的 有 效 生 存 质 量 ( 三 ) 质 量 管 理 体 系 和 检 测 性 能 标 准 趋 势 高 通 量 测 序 一 次 性 能 够 检 测 数 以 亿 计 的 基 因 位 点 如 何 对 这 数 以 亿 计 的 基 因 位 点 以 及 突 变 进 行 检 测 质 量 控 制, 是 一 个 重 要 的 课 题 目 前, 高 通 量 测 序 质 量 控 制 问 题 还 处 于 起 步 阶 段 2013 年 11 月, 美 国 基 因 测 序 公 司 Illumina 的 测 序 仪 MiseqDx 及 配 套 的 试 剂 盒 MiSeqDx Cystic Fibrosis 139-Variant Assay, 第 一 个 获 得 了 美 国 FDA 的 上 市 前 许 可 21

22 这 个 试 剂 盒 用 基 于 CFTR 基 因 139 个 临 床 相 关 位 点 的 已 知 突 变 样 品 进 行 质 量 控 制 2014 年 6 月 30 日, 国 家 食 品 药 品 监 督 管 理 总 局 经 审 查, 批 准 了 华 大 基 因 BGISEQ-1000 基 因 测 序 仪 BGISEQ-100 基 因 测 序 仪 和 胎 儿 染 色 体 非 整 倍 体 (T21 T18 T13) 检 测 试 剂 盒 ( 联 合 探 针 锚 定 连 接 测 序 法 ) 胎 儿 染 色 体 非 整 倍 体 (T21 T18 T13) 检 测 试 剂 盒 ( 半 导 体 测 序 法 ) 医 疗 器 械 注 册 这 是 国 家 食 品 药 品 监 督 管 理 总 局 首 次 批 准 注 册 的 第 二 代 基 因 测 序 诊 断 产 品 试 剂 盒 同 样 也 是 用 已 知 突 变 的 样 品 进 行 质 量 控 制 在 肿 瘤 领 域, 尤 其 是 乳 腺 癌 领 域, 国 内 外 并 未 形 成 公 认 的 高 通 量 基 因 测 序 质 量 管 理 体 系 和 检 测 性 能 标 准 第 二 节 国 内 外 乳 腺 癌 机 制 及 新 药 靶 标 研 究 现 状 及 发 展 趋 势 乳 腺 癌 致 病 因 素, 有 内 在 遗 传 方 面 的, 如 基 因 突 变 ; 也 有 环 境 方 面 的, 如 暴 露 于 各 种 有 害 的 化 学 物 质 物 理 辐 射 和 病 毒 侵 害 ; 还 有 生 活 方 式 婚 育 状 况 和 饮 食 等 方 面 的 婚 育 膳 食 和 遗 传, 是 乳 腺 癌 致 病 的 主 要 因 素 深 入 探 究 乳 腺 癌 的 起 始 发 生 凋 亡 侵 袭 转 移 肿 瘤 干 细 胞 肿 瘤 微 环 境 免 疫 逃 逸 药 物 作 用 耐 药 和 多 药 耐 药 等 方 面 的 机 制, 寻 找 准 确 的 标 记 分 子 和 药 物 靶 点, 对 于 推 进 乳 腺 癌 诊 断 检 测 预 防 治 疗 等 技 术 以 及 药 物 研 发, 都 具 有 重 要 的 意 义 ( 见 表 2-3) 22

23 表 2-3 乳 腺 癌 基 础 研 究 现 状 及 发 展 趋 势 目 前 研 究 现 状 未 来 发 展 趋 势 发 生 机 制 转 移 机 制 易 感 基 因 BRCA1 BRCA2; 参 与 激 素 和 致 癌 物 代 谢 酶 的 基 因 参 与 基 因 修 复 的 基 因 生 长 因 子 及 其 受 体 和 细 胞 周 期 调 控 因 子 ; 细 胞 黏 附 分 子 ; 肿 瘤 侵 袭 相 关 蛋 白 酶 ; 化 学 趋 化 因 子 受 体 ; Rho 家 族 小 G 蛋 白 ; 目 前 仍 没 发 现 乳 腺 癌 直 接 病 因 的 单 一 或 复 合 因 素, 需 未 来 进 一 步 研 究 乳 腺 癌 转 移 的 机 理 知 之 甚 少, 有 待 进 一 步 研 究 信 号 通 路 研 究 乳 腺 癌 干 细 胞 新 药 靶 点 研 究 eif-4e 等 受 体 酪 氨 酸 激 酶 介 导 的 信 号 转 导 通 路 ; ER 信 号 转 导 通 路 ; Notch 信 号 转 导 通 路 ; Wnt 信 号 转 导 通 路 乳 腺 癌 干 细 胞 理 论 的 提 出 及 应 用 于 药 物 筛 选 已 发 现 一 批 乳 腺 癌 药 物 靶 点 乳 腺 癌 的 发 生 由 多 条 信 号 通 路 共 同 参 与, 同 时 也 是 药 物 作 用 靶 点, 尚 需 深 入 研 究 乳 腺 癌 干 细 胞 的 特 异 性 筛 选 方 法 ; 干 细 胞 细 胞 周 期 调 控 及 损 伤 应 答 的 信 号 调 控 通 路 ; 诱 导 乳 腺 癌 干 细 胞 定 向 分 化 新 的 药 物 靶 标 ; 药 物 作 用 机 制 耐 药 性 和 多 药 耐 药 性 的 研 究 23

24 一 国 内 外 乳 腺 癌 机 理 及 药 物 靶 标 研 究 现 状 不 同 亚 型 乳 腺 癌, 其 肿 瘤 细 胞 生 长 侵 袭 转 移 器 官 的 选 择 都 存 在 明 显 的 差 异 后 者 如 基 底 样 细 胞 乳 腺 癌 易 出 现 肝 脑 肺 转 移 和 远 处 淋 巴 结 转 移, 但 少 出 现 骨 转 移 ; 而 Her2 高 表 达 者 易 出 现 肝 脑 肺 转 移 ( 一 ) 乳 腺 癌 易 感 基 因 及 其 致 病 机 理 乳 腺 癌 发 生 机 理 : 在 多 种 致 癌 因 子 作 用 下, 乳 房 腺 上 皮 细 胞 发 生 了 基 因 突 变 和 / 或 表 观 遗 传 的 改 变, 致 使 其 增 殖 失 控, 变 为 癌 细 胞 在 遗 传 性 乳 腺 癌 患 者 中, 易 感 基 因 BRCA1 和 BRCA2 起 着 重 要 的 作 用 这 类 患 者 中, 约 50% 的 BRCA1 基 因 有 变 异, 约 30% 的 BRCA2 基 因 有 变 异 BRCA1 被 ATM 蛋 白 激 酶 磷 酸 化 修 饰 后, 一 方 面 去 参 与 转 录 调 节 或 偶 联 的 修 复, 另 一 方 面 与 mrad51 BRCA2 和 mrad52 表 位 群 分 子 等 一 起, 去 参 与 DNA 损 伤 修 复 BRCA1 和 BRCA2 两 者 中 有 一 个 发 生 突 变,DNA 的 损 伤 修 复 过 程 就 会 遭 到 破 坏, 进 而 会 导 致 其 他 有 关 基 因 ( 包 括 p53) 失 去 活 性, 最 终 乳 腺 细 胞 发 生 癌 变 ( 二 ) 乳 腺 癌 侵 袭 和 转 移 机 理 癌 细 胞 的 侵 袭 性 与 转 移 能 力, 是 其 区 别 于 正 常 细 胞 的 根 本 所 在, 也 是 导 致 患 者 肿 瘤 复 发 病 情 恶 化 直 至 死 亡 的 病 理 学 基 础 大 多 数 乳 腺 癌 患 者, 并 非 死 于 原 发 性 癌, 而 是 死 于 24

25 转 移 性 癌 因 此, 研 究 肿 瘤 的 侵 袭 转 移 机 制, 了 解 其 相 关 因 子 通 路 和 调 控 机 理, 对 乳 腺 癌 诊 治 至 关 重 要 1. 生 长 因 子 及 其 受 体 和 细 胞 周 期 调 控 因 子 Her-2/neu 扩 增, 是 影 响 乳 腺 癌 生 长 与 转 移 的 重 要 基 因 乳 腺 癌 患 者 中, 约 30% 的 出 现 Her-2 基 因 过 表 达, 且 常 常 导 致 肿 瘤 转 移 Her-2 具 有 转 移 启 动 子 作 用 它 通 过 激 活 PI3K/AKT 生 存 通 路 增 高 癌 细 胞 增 殖 活 性 抑 制 凋 亡 乳 腺 癌 转 移 灶 中 Her-2 基 因 和 蛋 白 表 达 水 平, 明 显 高 于 原 发 灶 中 的 ; 浸 润 性 癌 细 胞 伪 足 中 的 Her-2 蛋 白, 也 呈 高 表 达 这 些 证 据 提 示,Her-2 基 因 与 癌 转 移 密 切 相 关 Her-2 基 因 过 度 表 达, 促 进 金 属 基 质 蛋 白 酶 (MMPs) 分 泌, 降 解 细 胞 外 基 质 和 基 底 膜, 增 强 癌 细 胞 浸 润 能 力 ; 它 与 整 合 素 α6β4 相 互 作 用, 使 细 胞 内 肌 动 蛋 白 重 组, 促 进 癌 细 胞 运 动, 并 上 调 癌 细 胞 血 管 内 皮 生 长 因 子 (VEGF) 表 达, 增 强 癌 细 胞 与 内 皮 细 胞 黏 附, 诱 导 血 管 生 成 和 血 管 植 入, 促 进 乳 腺 癌 的 转 移 细 胞 周 期 蛋 白 家 族 的 某 些 成 员, 如 cyclind1 cycline 及 其 下 游 的 CDKs 和 E2F 等, 促 癌 细 胞 进 入 细 胞 周 期, 使 乳 腺 癌 获 得 生 长 优 势, 助 癌 细 胞 转 移 25

26 2. 细 胞 黏 附 分 子 在 肿 瘤 浸 润 转 移 过 程 中, 多 种 细 胞 黏 附 分 子 异 常 表 达 其 中 以 钙 粘 素 ( 如 E-cad P-cad) 连 环 素 ( 如 β- 连 环 蛋 白 ) 和 CD44 显 著 正 常 成 人 乳 腺 组 织, 表 达 上 皮 型 粘 合 素 (E-cad) 和 胎 盘 型 粘 合 素 (P-cad) 前 者 常 表 达 于 腺 上 皮, 后 者 多 表 达 于 肌 上 皮 两 者 均 介 导 乳 腺 上 皮 同 质 性 黏, 即 上 皮 细 胞 彼 此 密 切 接 触, 以 维 持 组 织 结 构 完 整 性 在 良 性 乳 腺 肿 瘤 中, 粘 合 素 正 常 表 达 相 关 在 转 移 性 乳 腺 癌 中,E-cad 与 P-cad 表 达 均 下 调, 尤 以 P-cad 下 调 显 著 细 胞 间 黏 附 减 弱, 癌 细 胞 易 脱 离 原 发 灶, 浸 润 间 质, 发 生 转 移 此 外, 粘 合 素 分 布 状 态 改 变 也 会 影 响 乳 腺 癌 转 移 在 具 有 高 血 道 转 移 能 力 的 浸 润 性 微 小 乳 头 状 癌 中, 其 粘 合 素 主 要 分 布 于 癌 细 胞 彼 此 的 连 接 面 上, 使 浸 润 在 细 胞 外 间 质 和 血 管 内 的 癌 细 胞 黏 附 成 团 块 ; 而 团 块 外 周 面 上 缺 乏 E-cad 表 达, 肿 瘤 细 胞 便 以 团 块 方 式 浸 润 转 移 ; 逃 逸 NK 细 胞 杀 伤, 形 成 转 移 瘤 β- 连 环 蛋 白 具 有 双 重 功 能 在 细 胞 膜 表 达 时, 它 是 E-cad/cat 复 合 体 重 要 组 成 部 分, 协 助 E-cad 发 挥 同 质 性 黏 附 功 能 抑 制 肿 瘤 转 移 ; 在 胞 浆 和 核 表 达 时, 则 发 挥 Wnt 信 号 传 导 通 路 下 游 元 件 的 功 能, 参 与 默 写 某 些 基 因 的 转 录, 促 进 细 胞 增 殖 有 研 究 表 明, 在 乳 腺 癌 转 移 灶 中, 癌 细 胞 膜 型 β 26

27 - 连 环 蛋 白 表 达 降 低 或 丧 失, 且 与 E-cad 的 变 化 趋 势 一 致, 提 示 β- 连 环 蛋 白 在 乳 腺 癌 转 移 中 起 重 要 作 用 CD44 是 一 种 分 布 于 细 胞 表 面 的 跨 膜 糖 蛋 白, 能 与 细 胞 外 基 质 中 的 纤 维 粘 连 蛋 白 层 粘 连 蛋 白 I 型 胶 原 和 细 胞 骨 架 蛋 白 结 合, 即 异 质 性 黏 附 CD44 蛋 白 参 与 癌 细 胞 伪 足 形 成, 促 进 癌 细 胞 迁 移 其 剪 接 变 异 体 CD44v6 在 高 度 侵 袭 性 和 淋 巴 结 转 移 性 乳 腺 癌 细 胞 中 呈 高 表 达, 属 于 促 进 乳 腺 癌 转 移 的 黏 附 分 子 3. 肿 瘤 侵 袭 相 关 蛋 白 酶 细 胞 外 基 质 和 基 底 膜, 是 癌 细 胞 脱 落 游 走 的 主 要 障 碍 在 从 原 位 增 殖 发 展 到 侵 袭 转 移 过 程 中, 肿 瘤 细 胞 须 借 助 某 些 酶 降 解 细 胞 外 基 质 及 血 管 基 底 膜 这 类 酶, 研 究 得 多 的 有 基 质 金 属 蛋 白 酶 家 族 (MMPs) 组 织 蛋 白 酶 (Cath-D) 和 尿 激 酶 型 纤 溶 酶 激 活 物 (upa) 等 乳 腺 癌 研 究 常 涉 及 的 MMPs, 有 MMP-1 MMP-2 MMP-3 MMP-9 MT1 MMP; 一 同 被 研 究 的, 还 有 它 们 的 抑 制 剂 TIMP-1 和 TIMP-2 等 MMP-2 和 MMP-9 是 降 解 基 底 膜 Ⅳ 型 胶 原 最 主 要 的 基 质 金 属 蛋 白 酶 ; 在 乳 腺 癌 组 织 中,MMP-9 及 MMP-2 均 过 度 表 达 TIMP-1 水 平 同 MMP-1 原 MMP-2 和 激 活 的 MMP-2 MMP-3 及 MMP-9 显 著 相 关 间 质 细 胞 产 生 的 TIMP-3 及 TIMP 4mRNA 过 度 表 达, 是 宿 主 细 胞 对 肿 瘤 侵 袭 的 应 答 反 应, 27

28 可 能 是 转 移 行 为 的 负 性 调 节 因 子 在 肿 瘤 形 成 过 程 中,MMPs 和 TIMPs 表 达 平 衡 改 变, 将 助 恶 性 肿 瘤 侵 袭 转 移 乳 腺 癌 中 最 具 活 性 的 蛋 白 水 解 酶 Cath-D, 在 降 解 基 底 膜 和 基 质 形 成 局 部 溶 解 区 及 构 成 肿 瘤 移 动 的 通 道 中 起 关 键 作 用 乳 腺 癌 细 胞 中 的 Cath-D 分 泌 受 雌 二 醇 诱 导, 雌 激 素 水 平 增 高,Cath-D 自 主 分 泌 增 加 有 学 者 认 为,Cath-D 水 平 升 高 促 进 了 乳 腺 癌 转 移 在 组 织 中, 丝 氨 酸 蛋 白 酶 upa 以 无 活 性 酶 形 式 存 在 (Pro-uPA) 肿 瘤 细 胞 分 泌 Pro-uPA, 与 细 胞 外 间 质 中 的 upa 受 体 结 合 后, 被 激 活 为 双 链 活 化 形 式, 随 后 激 活 纤 溶 酶, 降 解 细 胞 外 基 质 和 基 底 膜, 调 节 或 参 与 肿 瘤 细 胞 的 迁 移 和 浸 润 过 程, 最 终 导 致 肿 瘤 细 胞 的 淋 巴 道 和 血 道 转 移 4. 化 学 趋 化 因 子 受 体 一 些 在 炎 症 中 起 趋 化 作 用 的 细 胞 因 子 及 其 受 体, 参 与 肿 瘤 的 转 移, 尤 其 在 肿 瘤 转 移 的 器 官 选 择 方 面 具 有 重 要 作 用 如 化 学 趋 化 因 子 受 体 CXCR4 和 IL-6 IL-8 及 其 受 体 等 研 究 发 现, 乳 腺 癌 细 胞 可 表 达 CXCR4 当 癌 细 胞 通 过 血 流 到 达 某 一 器 官 时 与 具 有 CXC 配 体 的 间 质 细 胞 结 合, 在 该 器 官 驻 足 生 长, 形 成 新 的 转 移 瘤 这 种 现 象 类 似 于 炎 症 中 的 白 细 胞 的 趋 化 运 动 或 淋 巴 细 胞 的 归 巢 行 为, 也 称 肿 瘤 的 归 巢 性 转 移 28

29 在 原 发 灶 中, 有 些 肿 瘤 细 胞 只 表 达 低 水 平 的 趋 化 因 子 受 体 ; 在 浸 润 转 移 过 程 中, 这 类 受 体 表 达 水 平 逐 步 增 加, 到 达 特 定 器 官 时, 已 具 有 较 高 的 表 达 水 平, 与 配 体 结 合 的 能 力 显 著 加 强 有 人 将 这 种 现 象 称 之 为 肿 瘤 转 移 中 的 分 子 进 化 过 程 已 有 研 究 提 示, 乳 腺 癌 的 肺 骨 脑 转 移 可 能 与 此 有 关 5. 新 发 现 的 相 关 基 因 近 年 来, 陆 续 发 现 了 一 些 与 乳 腺 癌 转 移 相 关 的 基 因, 如 Rho 蛋 白, 包 括 RhoA Racl Cdc42 等 它 们 与 三 磷 酸 鸟 苷 (guanosine triphosphate,gtp) 结 合 后 被 激 活, 增 强 细 胞 内 肌 动 蛋 白 表 达, 并 与 黏 附 分 子 CD44v3 结 合, 助 癌 细 胞 运 动 Rho 基 因 表 达, 还 可 明 显 上 调 细 胞 因 子 和 血 管 生 成 因 子 VEGF bfgf IL-6 IL-8 表 达, 促 进 癌 细 胞 移 动 侵 犯 和 血 管 淋 巴 管 生 成, 参 与 乳 腺 癌 的 转 移 eif-4e, 是 又 一 个 促 进 乳 腺 癌 转 移 的 基 因 在 正 常 乳 腺 上 皮 中, 它 低 表 达 ; 在 乳 腺 癌 中, 它 的 表 达 量 则 增 加 3-30 倍 在 多 数 复 发 或 转 移 的 乳 腺 癌 中,eIF-4E 表 达 量 会 超 过 正 常 表 达 量 的 7 倍 eif-4e 过 表 达 导 致 细 胞 形 态 改 变, 促 进 细 胞 增 殖 和 转 化, 并 助 肿 瘤 转 移 这 是 因 为 eif-4e 能 特 异 性 地 提 高 多 种 癌 基 因 的 转 录 活 性, 上 调 VEGF cyclind1 MMP-9 蛋 白 表 达, 诱 导 肿 瘤 血 管 生 成, 提 高 癌 细 胞 的 存 活 能 力, 降 29

30 解 细 胞 外 基 质 和 基 底 膜, 侵 犯 邻 近 组 织 和 血 管 淋 巴 管 等, 最 终 推 动 肿 瘤 细 胞 的 浸 润 和 转 移 进 程 eif-4e 已 被 作 为 乳 腺 癌 治 疗 靶 点 和 肿 瘤 复 发 转 移 标 志 ( 三 ) 乳 腺 癌 相 关 信 号 通 路 1. 受 体 酪 氨 酸 激 酶 (RTK) 介 导 的 信 号 转 导 通 路 RTK 家 族 是 一 类 具 有 内 源 性 蛋 白 酪 氨 酸 激 酶 PTK 活 性 的 细 胞 表 面 受 体 RTK 参 与 多 种 细 胞 活 动 的 调 控, 尤 其 是 参 与 细 胞 的 生 长 与 分 化 RTK 家 族 分 为 多 种 亚 类 : 表 皮 生 长 因 子 受 体 家 族 (EGFR) 胰 岛 素 受 体 家 族 (IGF) 血 管 内 皮 细 胞 生 长 因 子 受 体 (VEGFR) 等 其 中 EGFR 家 族 与 乳 腺 癌 关 系 最 为 密 切 这 些 生 长 因 子 与 其 相 应 的 配 体 结 合 后, 激 活 配 体 胞 内 段 的 酪 氨 酸 激 酶 并 引 发 一 系 列 的 胞 内 信 号 转 导, 产 生 多 向 性 的 生 物 效 应, 如 细 胞 的 增 殖 迁 移 分 化 和 内 环 境 的 稳 定 等, 并 和 乳 腺 恶 性 肿 瘤 的 发 生 发 展 和 转 移 有 密 切 的 关 系 (1)EGFR 家 族 介 导 的 信 号 通 路 EGFR 家 族 包 括 EGFR/Her-1 erbb-2/her-2/neu erbb-3/her-3 和 erbb-4/her-4 乳 腺 癌 研 究 得 多 的 是 EGFR 和 Her-2 EGFR 是 原 癌 基 因 c-erbb-1 表 达 产 物, 定 位 于 7q12, 含 26 个 外 显 子, 在 多 种 上 皮 间 叶 和 神 经 起 源 的 组 织 中 表 达, 30

31 是 细 胞 生 长 分 化 和 存 活 的 重 要 调 节 因 子 ; 当 其 过 度 表 达 时 则 成 为 具 有 转 化 活 性 的 基 因 Her-2 是 原 癌 基 因 c-erbb-2 表 达 产 物, 定 位 于 17q21, 编 码 分 子 量 为 185KD, 正 常 情 况 下 具 有 重 要 的 生 理 作 用, 是 细 胞 进 行 生 命 活 动 必 不 可 少 的 ; 乳 腺 癌 细 胞 中 检 测 到 该 基 因 扩 增 或 蛋 白 过 度 表 达, 通 过 抑 制 凋 亡 促 进 肿 瘤 血 管 生 成 和 增 加 肿 瘤 细 胞 侵 袭 力 等 方 面 引 起 肿 瘤 的 发 生 和 发 展 EGFR 和 Her-2 多 位 点 的 酪 氨 酸 残 基 发 生 自 身 磷 酸 化 磷 酸 化 的 受 体 可 激 活 众 多 下 游 信 号 途 径 其 中, 经 Grb2 和 Shc 传 递 的 Ras-raf1-MAPK 途 径 和 PI3K-PKC-IKK 途 径, 是 乳 腺 癌 细 胞 中 两 条 重 要 的 信 号 转 导 通 路 (2) 其 他 RTK 受 体 家 族 介 导 的 信 号 转 导 通 路 除 了 EGFR 外, 还 有 其 他 RTK 受 体 如 胰 岛 素 样 生 长 因 子 受 体 (IGF-IR) 及 其 受 体 底 物 介 导 的 信 号 转 导 通 路, 在 乳 腺 癌 细 胞 增 殖 及 侵 袭 转 移 中 起 重 要 作 用 IGF-IR 是 一 种 四 聚 体 结 构 的 跨 膜 酪 氨 酸 蛋 白 受 体, 广 泛 表 达 于 细 胞 表 面 它 与 细 胞 的 生 长 分 化 胚 胎 的 发 育 密 切 相 关 在 乳 腺 癌 中,IGF-IR 高 表 达 和 高 活 性, 在 与 其 他 生 长 因 子 如 血 管 内 皮 生 长 因 子 (VEGF-C) 的 信 号 通 路 相 互 作 用 下 实 现 促 瘤 作 用 这 与 诱 导 和 保 持 肿 瘤 细 胞 的 表 型 和 浸 润 转 移 密 切 相 关 31

32 2.ER 信 号 转 导 通 路 ER 是 类 固 醇 激 素 受 体 超 家 族 成 员, 包 括 ER-α 和 ER-β ER-α 基 因 位 于 6q24-25, 含 7 个 内 含 子 和 8 个 外 显 子, 其 中 8 个 外 显 子 编 码 595 个 氨 基 酸 的 蛋 白 质 ER-β 基 因 位 于 14q22-24, 编 码 含 530 个 氨 基 酸 和 蛋 白 质 ER-α 和 ER-β 主 要 在 位 于 乳 腺 导 管 上 皮 细 胞 细 胞 核 及 胞 质 中 表 达 调 控 乳 腺 的 生 长 发 育 和 细 胞 增 殖 等 功 能, 主 要 是 通 过 ER 介 导 的 信 号 转 导 通 路 完 成 的 近 年 研 究 显 示, 定 位 于 胞 膜 的 ER-α 能 参 与 雌 激 素 非 基 因 组 作 用 模 式 的 信 号 转 导 这 是 使 正 常 乳 腺 组 织 发 生 转 化 增 殖 失 控 以 及 抗 凋 亡 特 征 形 成 的 分 子 基 础 在 乳 腺 癌 发 展 过 程 中,ER-α 是 预 测 乳 腺 癌 预 后 的 一 个 最 重 要 因 素 阐 明 雌 激 素 受 体 的 信 号 途 径, 将 有 助 于 研 发 新 一 代 有 效 的 雌 激 素 受 体 及 相 关 蛋 白 的 调 节 剂, 为 开 辟 乳 腺 癌 治 疗 的 新 方 法 奠 定 基 础 3.Notch 信 号 转 导 通 路 Notch 信 号 通 路 在 肿 瘤 发 生 发 展 中 的 作 用 十 分 复 杂 它 不 仅 影 响 细 胞 增 殖 分 化 凋 亡 粘 附 及 上 皮 细 胞 - 间 叶 细 胞 转 变 等 活 动, 而 且 在 胚 胎 发 育 肿 瘤 形 成 和 血 管 生 成 等 方 面 也 发 挥 重 要 的 调 节 作 用 研 究 表 明,Notch 在 乳 腺 癌 患 者 中 乳 腺 上 皮 过 度 表 达 Notch4, 在 多 发 性 骨 髓 癌 细 胞 中 表 达 下 调, 在 人 类 T 淋 巴 母 32

33 细 胞 白 血 病 中 是 致 癌 基 因, 在 角 质 细 胞 的 肿 瘤 发 展 中 是 抑 癌 基 因 异 常 表 达 的 Notch 基 因 可 以 阻 止 乳 腺 干 细 胞 的 分 化, 突 变 的 Notch 基 因 可 以 使 乳 腺 上 皮 细 胞 处 于 分 裂 增 殖 状 态, 从 而 引 起 肿 瘤 的 发 生 针 对 这 些 靶 点 设 计 相 关 药 物 阻 断 或 者 活 化 Notch 信 号, 对 Notch 相 关 疾 病 的 治 疗 提 供 实 验 依 据 4.Wnt 信 号 转 导 通 路 Wnt 信 号 转 导 通 路, 既 可 影 响 基 因 表 达, 又 可 影 响 细 胞 迁 徙 信 号 通 路 Wnt 信 号 转 导 通 路 参 与 早 期 胚 胎 期 乳 腺 发 展 Wnt 信 号 转 导 通 路 异 常 激 活 时 导 致 乳 腺 癌 发 生, 并 促 进 细 胞 增 殖 侵 袭 转 移 抵 抗 凋 亡 该 通 路 还 与 肿 瘤 细 胞 化 疗 耐 药 性 有 关 导 致 Wnt 信 号 转 导 通 路 异 常 激 活 的 关 键 是 β- 连 环 蛋 白 和 APC- 轴 蛋 白 -GSK-3β 多 蛋 白 复 合 体 β- 连 环 蛋 白 降 解 障 碍, 使 细 胞 浆 内 游 离 的 β- 连 环 蛋 白 聚 集 并 进 入 细 胞 核, 经 与 Wnt 信 号 转 导 通 路 特 异 性 转 录 因 子 TCF/LEF 结 合, 激 活 下 游 靶 基 因 cyclind1 c-myc 等 表 达, 导 致 肿 瘤 发 生 对 细 胞 信 号 转 导 通 路 的 研 究, 有 助 于 阐 明 乳 腺 癌 发 病 机 制, 有 助 于 开 发 高 选 择 性 分 子 靶 向 药 物, 有 助 于 联 合 化 疗 放 疗, 显 著 提 高 疗 效 33

34 ( 四 ) 乳 腺 癌 干 细 胞 肿 瘤 组 织 及 肿 瘤 细 胞 株 中 的 细 胞 存 在 着 等 级 性, 即 存 在 着 不 同 分 化 阶 段 的 细 胞 不 同 分 化 阶 段 的 细 胞 在 性 质 及 功 能 上 存 在 着 诸 多 差 异 有 部 分 肿 瘤 细 胞 充 当 干 细 胞 的 角 色, 在 启 动 肿 瘤 形 成 和 维 持 肿 瘤 生 长 中 起 决 定 性 作 用, 被 命 名 为 肿 瘤 干 细 胞 (cancer stem cells,csc) 研 究 早 期 乳 腺 癌 骨 髓 转 移 患 者 的 骨 髓 标 本 发 现, 肿 瘤 微 小 转 移 灶 中 肿 瘤 干 细 胞 所 占 比 例 很 高 这 说 明 乳 腺 癌 干 细 胞 与 肿 瘤 转 移 相 关 Wnt Notch Hedgehog 等 信 号 转 导 通 路, 参 与 了 正 常 干 细 胞 和 肿 瘤 干 细 胞 的 自 我 更 新 过 程, 对 许 多 肿 瘤 ( 如 乳 腺 癌 ) 的 发 生 发 展 复 发 转 移 及 其 耐 药 起 着 重 要 作 用 与 分 化 的 细 胞 相 比, 肿 瘤 干 细 胞 对 化 疗 等 抗 肿 瘤 治 疗 具 有 更 高 的 抵 抗 能 力 化 疗 时, 肿 瘤 干 细 胞 高 表 达 ABCG2 等 ABC 转 运 体, 能 将 化 疗 药 泵 出, 表 现 出 强 抵 抗 性 分 化 的 细 胞, 用 化 疗 药 基 本 上 都 能 杀 死 ; 肿 瘤 干 细 胞, 哪 怕 有 小 部 分 在 化 疗 后 存 活 下 来, 日 后 也 可 能 成 为 复 发 根 源 上 述 研 究 大 多 还 只 是 停 留 在 体 外 实 验 阶 段, 有 待 体 内 实 验 进 一 步 证 实 传 统 抗 肿 瘤 药 物 筛 选, 通 过 测 量 肿 瘤 体 积 缩 小 程 度 来 评 价 备 选 药 物 的 疗 效, 而 不 考 虑 备 选 药 物 是 否 作 用 于 肿 瘤 干 细 胞 这 样 筛 选 出 来 的 抗 肿 瘤 药 物, 很 可 能 无 法 从 根 本 上 抑 制 肿 瘤 再 发 生 临 床 试 验 发 现, 接 受 过 化 疗 的 乳 腺 癌 患 者, 其 34

35 病 灶 中 肿 瘤 干 细 胞 标 志 物 CD44+/CD24-/low 细 胞 比 例 显 著 上 升 因 此 可 以 考 虑 把 肿 瘤 干 细 胞 标 志 物 列 为 肿 瘤 药 物 疗 效 的 评 估 对 象 针 对 乳 腺 癌 干 细 胞 进 行 靶 向 治 疗, 需 要 确 定 一 套 乳 腺 癌 干 细 胞 特 异 性 筛 选 方 法, 需 要 探 索 乳 腺 癌 干 细 胞 细 胞 周 期 调 控 及 损 伤 应 答 的 信 号 调 控 通 路, 需 要 完 善 乳 腺 癌 干 细 胞 功 能 检 测 及 诱 导 乳 腺 癌 干 细 胞 定 向 分 化 的 方 法 ( 五 ) 乳 腺 癌 药 物 靶 点 乳 腺 癌 分 子 靶 向 治 疗 是 指, 在 细 胞 分 子 水 平 上, 针 对 与 乳 腺 癌 发 生 发 展 和 复 发 转 移 有 关 的 靶 向 分 子, 设 计 治 疗 药 物, 该 药 物 进 入 体 内 以 后, 选 择 性 地 与 特 定 的 靶 向 分 子 作 用, 致 肿 瘤 细 胞 特 异 性 死 亡, 而 不 殃 及 肿 瘤 周 围 正 常 组 织 细 胞 靶 向 治 疗 药 物, 或 干 扰 肿 瘤 细 胞 分 裂 ( 增 殖 ) 和 传 播, 或 靶 向 作 用 于 参 与 细 胞 信 号 转 导 通 路 的 蛋 白, 或 阻 断 肿 瘤 细 胞 的 生 长 和 分 裂 失 控 信 号, 或 直 接 诱 导 细 胞 凋 亡 导 致 肿 瘤 细 胞 死 亡, 或 间 接 通 过 刺 激 免 疫 系 统 识 别 和 消 灭 肿 瘤 细 胞 和 / 或 向 肿 瘤 细 胞 直 接 递 送 有 毒 物 质 乳 腺 癌 治 疗 靶 点 如 下 ( 见 表 2-4) 1. 雌 激 素 受 体 (ER) 雌 激 素 受 体 (ER) 是 激 素 调 节 转 录 因 子 它 在 女 性 生 殖 组 织 生 长 分 化 及 肿 瘤 发 生 发 展 及 预 后 过 程 中 起 着 重 要 的 作 用 雌 激 素 与 受 体 结 合 后, 发 生 构 象 变 化, 形 成 同 源 二 聚 体, 35

36 与 DNA 上 的 雌 激 素 依 赖 序 列 结 合, 激 活 雌 激 素 靶 向 基 因 的 转 录 翻 译, 合 成 蛋 白 质, 促 进 细 胞 的 分 裂 繁 殖 和 生 长 2. 表 皮 生 长 因 子 受 体 -2(Her-2) 近 三 分 之 一 的 乳 腺 癌 患 者,Her-2 基 因 过 度 表 达 过 度 表 达 的 Her-2 蛋 白, 在 细 胞 表 面 聚 合 而 活 化, 并 不 依 赖 配 体 Her-2 蛋 白 激 活 后, 通 过 信 号 传 导 途 径 及 诱 导 TNF-α 抗 性 等, 致 细 胞 恶 性 转 化 Her-2 基 因 扩 增, 已 成 为 临 床 医 学 上 评 估 乳 腺 癌 恶 性 程 度 乳 腺 癌 术 后 复 发 及 预 后 风 险 的 重 要 指 标 3. 表 皮 生 长 因 子 受 体 (EGFR) 在 许 多 上 皮 来 源 的 肿 瘤 细 胞, 如 乳 腺 癌 细 胞 非 小 细 胞 性 肺 癌 细 胞 和 结 肠 癌 细 胞 中,EGFR 过 度 表 达 这 提 示 EGFR 可 作 为 抗 肿 瘤 治 疗 的 靶 点 EGFR 靶 向 治 疗 药 物 有 两 类 : 一 种 是 针 对 EGFR 胞 内 部 分 的 小 分 子 酪 氨 酸 激 酶 抑 制 剂, 如 吉 非 替 尼 和 厄 洛 替 尼 ; 另 一 种 是 针 对 EGFR 胞 外 部 分 的 单 克 隆 抗 体, 如 西 妥 昔 单 抗 4. 血 管 内 皮 生 长 因 子 (VEGF) VEGF 与 血 管 内 皮 细 胞 上 的 对 应 受 体 结 合, 促 进 新 生 血 管 生 成 VEGF 在 乳 腺 癌 的 发 生 发 展 及 预 后 方 面 起 重 要 作 用 5.mTOR 信 号 通 路 mtor 信 号 通 路 调 控 细 胞 生 长 与 增 殖 该 通 路 将 从 营 养 分 子 能 量 状 态 以 及 生 长 因 子 传 来 的 信 号 整 合 在 一 起, 调 控 大 量 的 生 命 过 程, 包 括 自 我 吞 噬 核 糖 体 生 物 组 合 和 代 谢 等 36

37 6.Bcl-2 原 癌 基 因 Bcl-2, 是 控 制 线 粒 体 致 凋 亡 因 子 释 放 的 主 要 调 节 因 子, 对 乳 腺 癌 发 生 过 程 中 细 胞 凋 亡 调 控 起 着 重 要 作 用 它 在 肿 瘤 中 过 度 表 达, 可 使 肿 瘤 细 胞 对 细 胞 毒 药 物 产 生 耐 药 性 它 还 可 以 作 为 一 个 预 兆 因 子, 对 乳 腺 癌 早 期 诊 断 及 治 疗 中 有 一 定 作 用 7. 环 氧 化 酶 -2(COX-2) 在 乳 腺 癌 中 可 测 到 COX-2 高 表 达 COX-2 高 表 达 可 能 与 Her-2 过 度 表 达 有 关 COX-2 是 合 成 前 列 腺 素 (PG) 的 重 要 酶 COX-2 异 常 表 达 导 致 PG 合 成 增 加, 进 而 刺 激 细 胞 增 殖 及 介 导 免 疫 抑 制 8. 蛋 白 激 酶 C(PKC) PKC(ProteinkinaseC) 是 一 类 磷 脂 依 赖 的 丝 氨 酸 / 苏 氨 酸 酶 其 家 族 的 PKC-α 与 肿 瘤 的 侵 袭 性 有 关, 并 可 调 节 细 胞 对 细 胞 毒 性 药 物 的 敏 感 性 ;PKC-α 在 一 些 乳 腺 癌 细 胞 中 过 度 表 达, 可 引 起 细 胞 增 殖 及 促 进 无 胸 腺 小 鼠 移 植 后 的 肿 瘤 发 生 9. 胰 岛 素 样 生 长 因 子 -1(IGF-1) 及 其 受 体 乳 腺 癌 患 者 血 清 IGF-1 水 平 比 正 常 人 的 高 血 清 IGF-1 水 平 与 绝 经 前 女 性 发 生 乳 腺 癌 的 机 率 正 相 关, 但 与 绝 经 后 女 性 乳 腺 癌 发 生 无 相 关 性 IGF 家 族 包 括 生 长 因 子 (IGF-1 和 IGF-2) 细 胞 表 面 受 体 (IGF-1R 和 IGF-2R) IGF 结 合 蛋 白 (IGFBPs) 以 及 IGFBP 相 关 37

38 蛋 白 IGFs 是 多 种 细 胞 的 有 丝 分 裂 原, 能 刺 激 细 胞 的 DNA 合 成, 促 进 细 胞 从 细 胞 周 期 的 G1 期 进 入 S 期, 同 时 它 们 还 能 通 过 阻 止 细 胞 凋 亡 过 程 来 促 进 细 胞 的 繁 殖 和 增 生 在 乳 腺 癌 中, 雌 激 素 对 IGF-1R 有 正 相 调 控 作 用, 而 且 雌 激 素 受 体 状 态 和 IGF-1R 状 态 呈 正 相 关, 两 者 常 共 同 表 达 雌 激 素 可 调 节 IGF-1 和 IGF-1R 表 达, 影 响 IGF-1 信 号 传 导 ; IGF-1 与 IGF-1R 结 合 后, 通 过 影 响 细 胞 内 的 蛋 白 合 成 翻 译 过 程 反 过 来 影 响 雌 激 素 受 体 表 达, 从 而 影 响 雌 激 素 作 用 靶 向 攻 击 IGF 及 其 受 体 能 为 治 疗 乳 腺 癌 提 供 新 的 手 段, 包 括 降 低 IGF 配 体 和 使 之 失 效 下 调 和 拮 抗 IGF-1R 诱 导 的 信 号 通 路 表 2-4 已 有 乳 腺 癌 药 物 靶 点 及 代 表 药 物 药 物 靶 点 药 物 类 型 代 表 药 物 选 择 性 雌 激 素 受 体 调 节 剂 (SERMs) 他 莫 昔 芬 (TAM) 氟 维 司 群 雌 激 素 受 体 (ER) 芳 香 化 酶 抑 制 剂 来 曲 唑 阿 那 曲 唑 依 西 美 坦 孕 激 素 类 甲 地 孕 酮 甲 羟 孕 酮 促 性 腺 激 素 释 放 激 素 (GnRH) 类 似 物 戈 舍 瑞 林 赫 赛 汀 表 皮 生 长 因 子 受 体 -2 抗 Her-2 药 物 曲 妥 珠 单 抗 (Her-2) 拉 帕 替 尼 表 皮 生 长 因 子 受 体 吉 非 替 尼 抗 EGFR 药 物 (EGFR) 厄 洛 替 尼 38

39 西 妥 昔 单 抗 血 管 内 皮 生 长 因 子 贝 伐 单 抗 抗 VEGF 药 (VEGF) 沙 利 度 胺 mtor 信 号 通 路 mtor 抑 制 剂 依 维 莫 司 Bcl-2 抗 Bcl2 药 奥 利 默 森 纳 环 氧 化 酶 -2(COX-2) 靶 向 COX-2 类 药 西 乐 葆 蛋 白 激 酶 C(PKC) 靶 向 蛋 白 激 酶 C 类 药 LY 胰 岛 素 样 生 长 因 子 -1(IGF-1) 及 其 受 体 N/A N/A 二 国 内 外 乳 腺 癌 分 子 机 制 及 药 物 靶 点 研 究 趋 势 ( 一 ) 乳 腺 癌 发 生 与 转 移 机 理 研 究 研 究 至 今 已 发 现 与 乳 腺 癌 相 关 的 多 种 因 子 和 因 素 可 是 仍 未 确 认 足 以 成 为 乳 腺 癌 直 接 病 因 的 单 一 或 复 合 因 素 侵 袭 和 转 移 扩 散 是 乳 腺 癌 和 其 他 恶 性 肿 瘤 恶 化 的 关 键, 也 是 导 致 患 者 死 亡 的 重 要 原 因 ; 然 而 对 乳 腺 癌 侵 袭 和 转 移 机 制 依 然 知 之 甚 少 深 入 了 解 乳 腺 癌 发 生 发 展 及 转 移 的 分 子 与 细 胞 机 理, 为 乳 腺 癌 药 物 研 发 治 疗 预 防 和 诊 断 监 测 手 段 提 供 科 学 依 据 和 新 靶 标, 具 有 极 为 重 要 的 意 义, 是 当 今 研 究 的 重 点 之 一 ( 二 ) 乳 腺 癌 药 物 作 用 与 耐 药 机 制 研 究 内 分 泌 治 疗 虽 已 成 为 乳 腺 癌 综 合 治 疗 的 重 要 策 略 采 用 他 莫 昔 芬 (tamoxifen,tam) 初 始 治 疗 后, 有 50% 的 雌 激 素 受 体 (ER) 阳 性 患 者 对 内 分 泌 治 疗 无 反 应 39

40 另 外, 临 床 实 践 中, 多 药 耐 药 性 (multi-drug resistance, MDR 指 肿 瘤 细 胞 对 一 种 化 疗 药 物 产 生 耐 药 现 象 后 会 对 其 他 结 构 细 胞 靶 点 和 作 用 机 制 迥 然 不 同 的 化 疗 药 物 产 生 交 叉 耐 药 ) 往 往 导 致 乳 腺 癌 化 疗 失 败 针 对 乳 腺 癌 药 物 作 用 机 制 耐 药 性 和 多 药 耐 药 性 以 及 复 发 等 的 分 子 机 制 的 研 究, 对 于 指 导 临 床 用 药 和 发 展 新 的 乳 腺 癌 治 疗 方 法 具 有 非 常 重 要 的 意 义 ( 三 ) 新 的 乳 腺 癌 药 物 靶 点 研 究 随 着 对 乳 腺 癌 致 病 机 理 的 深 入 研 究, 更 多 的 潜 在 药 物 治 疗 靶 点 正 在 被 鉴 定 ( 见 表 2-5) 表 2-5 目 前 研 究 中 的 乳 腺 癌 药 物 靶 点 Bag1 和 Bag1L SATB1 Ret Lemur 酪 氨 酸 激 酶 3(LMTK3) BRCA 炎 症 调 控 分 子 CUEDC2 PTPN12 新 的 药 物 靶 点 甲 羟 戊 酸 代 谢 途 径 与 Hippo 信 号 通 路 Wnt/β- 连 环 蛋 白 信 号 通 路 细 胞 自 噬 通 路 表 观 遗 传 调 控 靶 点 40

41 1.Bag1 和 Bag1L 美 国 Kudoh 等 报 告, 体 内 外 研 究 显 示,Bag1 和 Bag1L 蛋 白 对 于 人 乳 腺 癌 细 胞 的 生 长 及 存 活 有 调 节 作 用, 干 预 Bag1 或 Bag1L 功 能 有 可 能 成 为 治 疗 乳 腺 癌 的 有 效 方 法 2.SATB1 核 基 质 结 合 区 结 合 蛋 白 质 1(special AT-rich sequence binding protein1,satb1) 是 又 一 个 潜 在 的 乳 腺 癌 治 疗 靶 点 研 究 发 现,SATB1 能 够 改 变 乳 腺 癌 细 胞 中 1000 多 种 基 因 的 表 达 水 平 通 过 转 变 DNA 空 间 布 局,SATB1 改 变 环 绕 在 一 些 基 因 组 片 段 周 围 的 蛋 白, 从 而 有 效 地 启 动 或 关 闭 一 些 基 因 乳 腺 癌 细 胞 中 SATB1 的 表 达 越 丰 富, 乳 腺 癌 细 胞 的 侵 袭 性 就 越 强 3.Ret Ret( 一 种 受 体 酪 氨 酸 激 酶 ) 也 是 乳 腺 癌 的 潜 在 治 疗 靶 点 Ret 高 水 平 表 达 在 人 类 乳 腺 肿 瘤 细 胞 表 面 在 前 期 乳 腺 癌 小 鼠 模 型 实 验 中, 特 殊 类 型 的 Ret 激 酶 抑 制 剂 可 有 效 阻 断 癌 症 的 扩 散 和 降 低 肺 部 可 转 移 恶 性 肿 瘤 的 数 量 4.LMTK3 Lemur 酪 氨 酸 激 酶 3(LMTK3) 是 一 个 有 助 治 疗 乳 腺 癌 的 新 靶 点 乳 腺 癌 患 者 肿 瘤 组 织 内 LMTK3 水 平 较 高 的, 某 些 常 规 药 物 的 疗 效 就 较 弱, 患 者 寿 命 就 更 短 而 因 天 然 基 因 变 异 导 致 这 种 蛋 白 质 水 平 较 低 的 患 者, 往 往 能 够 活 得 更 久 动 物 实 41

42 验 显 示, 阻 断 LMTK3 的 活 性 可 以 增 强 现 有 药 物 的 作 用, 使 肿 瘤 显 著 缩 小 5.CUEDC2 我 国 科 学 家 发 现, 炎 症 调 控 分 子 CUE domain containing protein-2(cuedc2) 在 乳 腺 癌 细 胞 中 过 量 表 达 导 致 患 者 对 内 分 泌 治 疗 产 生 耐 药 6.BRCA 基 因 雌 激 素 受 体 ER 孕 激 素 受 体 PR 和 表 皮 生 长 因 子 受 体 Her-2 均 为 阴 性 ( 简 称 三 阴 性 ) 的 乳 腺 癌 患 者, 对 放 射 治 疗 和 化 疗 均 不 敏 感, 是 预 后 最 差 的 一 类 与 其 他 亚 型 的 乳 腺 癌 相 比 较, 三 阴 性 乳 腺 癌 患 者 中 BRCA 基 因 功 能 缺 失 的 比 例 较 大 BRCA 基 因 有 可 能 是 三 阴 性 乳 腺 癌 的 治 疗 靶 标 7.PTPN12 基 因 抑 癌 基 因 PTPN12, 可 能 是 三 阴 性 乳 腺 癌 治 疗 靶 点 研 究 表 明, 多 种 三 阴 性 乳 腺 癌 细 胞 系 有 PTPN12 功 能 缺 失 性 基 因 突 变 60% 的 三 阴 性 乳 腺 癌 患 者 临 床 标 本 病 理 切 片 中,PTPN12 蛋 白 表 达 低 下 PTPN12 表 达 水 平 降 低 导 致 正 常 细 胞 恶 性 生 长,PTPN12 过 量 表 达 则 可 抑 制 恶 性 细 胞 生 长 8.EMT 有 研 究 显 示, 上 皮 间 质 转 化 ( epithelial mesenchymal transitions,emt) 是 乳 腺 癌 细 胞 发 生 转 移 的 42

43 关 键 步 骤, 而 肿 瘤 相 关 巨 噬 细 胞 也 对 肿 瘤 转 移 有 重 要 调 控 作 用 发 生 上 皮 间 质 转 化 的 乳 腺 癌 细 胞 通 过 分 泌 细 胞 因 子 GM-CSF 以 及 大 量 肿 瘤 代 谢 产 物 乳 酸, 共 同 激 活 巨 噬 细 胞, 使 得 原 本 应 杀 灭 肿 瘤 的 巨 噬 细 胞 反 而 变 成 肿 瘤 生 长 的 帮 凶 通 过 降 低 细 胞 因 子 GM-CSF 或 趋 化 因 子 CCL18 的 功 能, 能 够 抑 制 乳 腺 癌 细 胞 转 移 该 研 究 对 乳 腺 癌 新 型 靶 向 药 物 提 供 了 实 验 依 据, 尤 其 是 对 内 分 泌 治 疗 和 Her2 靶 向 治 疗 均 不 敏 感 的 三 阴 乳 腺 癌 的 治 疗 提 供 了 新 靶 点 9. 甲 羟 戊 酸 代 谢 途 径 与 Hippo 信 号 通 路 最 近 的 研 究 表 明, 甲 羟 戊 酸 代 谢 途 径 与 Hippo 信 号 通 路 交 互 作 用, 通 过 共 转 录 因 子 YAP 调 节 癌 基 因 RHAMM 的 转 录 来 控 制 乳 腺 癌 细 胞 的 迁 移 和 侵 袭, 揭 示 了 乳 腺 癌 转 移 调 控 新 的 信 号 通 路 和 分 子 机 制, 为 乳 腺 癌 的 治 疗 提 供 了 新 靶 点 10.Wnt/β- 连 环 蛋 白 信 号 通 路 越 来 越 多 的 证 据 表 明,Wnt/β- 连 环 蛋 白 信 号 通 路 不 仅 在 胚 胎 发 育 调 控 中 起 到 至 关 重 要 的 作 用, 而 且 与 多 种 人 类 肿 瘤 如 乳 腺 癌 结 直 肠 癌 前 列 腺 癌 的 发 生 发 展 密 切 相 关, 特 别 是 在 三 阴 性 乳 腺 癌 中,β- 连 环 蛋 白 的 异 常 表 达 与 预 后 不 良 密 切 相 关, 可 以 作 为 其 独 立 的 预 后 因 子, 提 示 抑 制 Wnt/β- 连 环 蛋 白 信 号 通 路 可 能 是 乳 腺 癌 的 潜 在 治 疗 靶 点, 目 前 已 成 为 国 际 前 沿 的 一 个 研 究 热 点 43

44 11. 细 胞 自 噬 通 路 有 研 究 表 明, 肿 瘤 细 胞 利 用 自 噬 可 以 抵 抗 各 种 化 疗 药 物 因 此, 在 肿 瘤 治 疗 过 程 中, 抑 制 自 噬 成 为 一 种 治 疗 肿 瘤 的 策 略 研 究 发 现 与 自 噬 相 关 的 基 因 (Autophagy-relatedgene; Atg) 多 种 Atg 蛋 白 控 制 自 噬 小 体 的 形 成 目 前 已 经 在 酵 母 中 鉴 定 出 了 35 个 Atg 蛋 白, 其 中 Atg 和 18 被 认 为 是 核 心 Atg 蛋 白 这 些 Atg 蛋 白 又 组 成 了 一 些 复 合 物, 来 精 细 的 调 控 自 噬 小 体 形 成 的 整 个 过 程 在 这 些 Atg 蛋 白 中, 有 一 些 是 蛋 白 激 酶 如 Atg1( 哺 乳 动 物 中 称 为 ULK1) 目 前 还 没 有 针 对 ULK1 及 其 他 Atg 蛋 白 的 抑 制 剂 因 此 ULK1 及 其 他 的 Atg 蛋 白 可 以 作 为 新 药 研 发 的 靶 点 针 对 这 些 Atg 蛋 白 的 小 分 子 化 合 物 或 sirna 都 可 以 作 为 抗 细 胞 自 噬 的 新 药 研 发 的 方 向 基 于 生 物 可 降 解 材 料 如 PLGA 等 制 备 的 纳 米 粒 子, 作 为 药 物 载 体 被 广 泛 的 研 究 PLGA 纳 米 粒 子 可 以 诱 导 细 胞 自 噬, 并 通 过 自 噬 小 体 运 输 到 溶 酶 体 降 解 抑 制 细 胞 自 噬 一 方 面 可 以 阻 止 自 噬 对 纳 米 粒 子 的 吞 噬 降 解, 维 持 纳 米 粒 子 在 细 胞 质 里 释 放 药 物 同 时, 抑 制 自 噬 也 可 以 阻 止 肿 瘤 细 胞 对 化 疗 药 物 的 抗 性 因 此, 纳 米 载 药 系 统 与 细 胞 自 噬 抑 制 剂 联 合 使 用, 可 以 提 高 纳 米 药 物 的 治 疗 效 果 44

45 12. 表 观 遗 传 学 调 控 研 究 发 现, 表 观 遗 传 学 调 控 对 于 乳 腺 癌 的 发 病 机 制 标 记 物 检 测 药 物 治 疗 等 方 面 起 着 重 要 的 作 用 已 取 得 的 代 表 性 进 展 包 括 : (1)DNA 甲 基 化 及 相 关 酶 活 性 异 常 与 乳 腺 癌 发 病 密 切 相 关 Sadeg 和 Phuong 等 发 现 PTEN 异 常 甲 基 化 在 乳 腺 癌 细 胞 中 占 有 较 高 比 例, 而 PTEN 的 甲 基 化 异 常 与 乳 腺 癌 的 临 床 分 期 肿 瘤 细 胞 的 耐 药 性 等 等 都 有 高 度 相 关 性 BRCA1 是 细 胞 分 裂 G/M 期 的 关 键 调 控 因 子,Barekati 发 现 BRCA1 在 乳 腺 癌 中 出 现 高 甲 基 化 的 趋 势, 而 这 一 甲 基 化 现 象 与 乳 腺 癌 的 预 后 和 肿 瘤 转 移 有 相 关 性 Liu 等 人 的 研 究 则 发 现 TIMP3 基 因 的 高 甲 基 化 与 乳 腺 癌 的 分 期 淋 巴 结 转 移 等 过 程 关 系 密 切 (2) 组 蛋 白 的 多 种 修 饰 在 细 胞 周 期 中 起 到 关 键 的 作 用, 其 功 能 的 失 调 也 是 导 致 癌 症 发 生 的 重 要 原 因 Hou 等 发 现 赖 氨 酸 特 异 性 脱 甲 基 酶 (KDM5A) 通 过 改 变 组 蛋 白 H3K4 的 甲 基 化 状 态 影 响 乳 腺 癌 细 胞 的 增 殖, 与 乳 腺 癌 的 耐 药 性 也 有 关 联 Shi 等 发 现 组 蛋 白 脱 甲 基 酶 JMJD2B 也 有 相 应 的 功 能 而 Gong 在 乳 腺 癌 组 织 和 细 胞 中 发 现 AuroraA 可 以 增 加 组 蛋 白 H3 的 乙 酰 化 水 平, 从 而 达 到 抑 制 肿 瘤 细 胞 增 殖 的 作 用 EZH2 可 以 通 过 使 组 蛋 白 H3K27 甲 基 化 导 致 基 因 沉 默, 因 此 EZH2 的 高 表 达 是 乳 腺 癌 肿 瘤 细 胞 进 展 和 转 移 的 关 键 因 素 45

46 (3) 非 编 码 RNA(miRNA) 实 验 证 实,Micro-9 在 复 发 的 乳 腺 癌 细 胞 中 过 表 达, 可 以 作 为 乳 腺 癌 预 后 的 标 志 物 Yu 等 人 发 现 mirnalet-7 通 过 H-RAS 调 控 乳 腺 癌 干 细 胞 的 自 我 更 新 其 他 非 编 码 RNA 的 研 究 也 发 现 mirna 对 于 乳 腺 癌 的 耐 药 性 和 预 后 都 有 重 要 的 影 响 综 上 所 述, 表 观 遗 传 学 研 究 在 乳 腺 癌 的 发 生 发 展 化 疗 过 程 和 预 后 等 方 面 都 有 重 要 进 展 英 国 剑 桥 大 学 的 NessaCarey 在 近 期 发 表 在 MedChemComm 上 的 综 述 文 章 所 指 出 : 表 观 遗 传 调 控 是 正 在 兴 起 的 非 常 有 前 景 的 新 的 药 物 靶 标, 因 为 表 观 遗 传 调 控 癌 细 胞 以 及 一 些 人 类 慢 性 疾 病, 为 药 物 研 发 提 供 了 新 的 契 机 第 三 节 国 内 外 新 药 研 发 现 状 及 发 展 趋 势 乳 腺 癌 化 疗 药 物 从 上 世 纪 70 年 代 以 非 蒽 环 类 为 主 的 环 磷 酰 胺 甲 氨 蝶 呤 等 为 开 端, 到 80 年 代 含 蒽 环 类 药 物 阿 霉 素 表 阿 霉 素 等, 直 至 90 年 代 紫 杉 醇 多 西 紫 杉 醇 的 问 世, 已 证 实 有 效 的 化 疗 药 物 不 下 二 十 余 种 其 中 有 效 率 可 达 50% 左 右 的 药 物 有 阿 霉 素 类 ( 阿 霉 素 表 阿 霉 素 比 柔 阿 霉 素 ) 紫 杉 醇 类 ( 紫 杉 醇 泰 素 泰 素 帝 紫 素 ) 诺 维 本 等 有 效 率 在 20~50% 的 中 度 有 效 药 物 有 顺 铂 环 磷 酰 胺 氟 脲 嘧 啶 甲 氨 喋 呤 丝 裂 霉 素 塞 替 派 长 春 新 碱 等 另 外 还 有 可 进 入 脑 部 治 疗 脑 转 移 的 卡 氮 芥 环 己 亚 硝 脲 等 研 究 证 明, 合 理 选 用 数 种 药 物 联 合 化 疗 的 效 果 明 显 优 于 单 一 药 物 治 疗, 目 46

47 前 国 内 外 公 认 疗 效 较 高 的 方 案 有 CAF( 阿 霉 素 类 环 磷 酰 胺 氟 脲 嘧 啶 ) 方 案,CMF( 甲 氨 喋 呤 环 磷 酰 胺 氟 脲 嘧 啶 ) 方 案 等 乳 腺 癌 内 分 泌 治 疗 药 物 他 莫 昔 芬 ( 三 苯 氧 胺,TAM) 是 乳 腺 癌 内 分 泌 治 疗 里 程 碑 式 药 物 TAM 进 入 靶 细 胞 内, 与 雌 激 素 竞 争 雌 激 素 受 体 (ER), 降 低 ER 含 量, 抑 制 激 素 依 赖 性 癌 细 胞 的 生 长 ; 另 外,TAM 还 能 抑 制 卵 巢 合 成 雌 二 醇, 使 血 中 雌 二 醇 浓 度 下 降, 达 到 化 学 去 势 芳 香 化 酶 抑 制 剂, 如 来 曲 唑 阿 那 曲 唑 及 依 西 美 坦 等, 对 复 发 性 和 转 移 性 乳 腺 癌 疗 效 优 于 三 苯 氧 胺, 成 为 绝 经 后 乳 腺 癌 患 者 治 疗 的 首 选 药 物 在 乳 腺 癌 术 后 辅 助 治 疗 领 域, 芳 香 化 酶 抑 制 剂 也 取 得 显 著 的 成 效 以 戈 舍 瑞 林 为 代 表 的 促 黄 体 激 素 激 动 剂 类 药 物, 也 对 绝 经 前 及 绝 经 期 乳 腺 癌 晚 期 转 移 性 乳 腺 癌 有 效 但 ER 阳 性 的 晚 期 乳 腺 癌 患 者 中 近 30% 的 对 内 分 泌 治 疗 原 发 性 耐 药, 余 者 也 会 出 现 获 得 性 耐 药 因 此, 内 分 泌 耐 药 是 乳 腺 癌 临 床 治 疗 亟 待 解 决 的 一 大 难 题 其 他 乳 腺 癌 新 型 药 物 及 新 型 制 剂 如 抗 体 药 物 小 分 子 靶 向 药 物 细 胞 免 疫 治 疗 等 ( 见 图 2-3) 47

48 图 2-3 乳 腺 癌 药 物 治 疗 发 展 一 国 内 外 抗 体 / 重 组 蛋 白 药 物 研 发 现 状 与 发 展 趋 势 新 型 治 疗 药 物 单 克 隆 抗 体, 可 准 确 杀 死 肿 瘤 细 胞, 而 对 正 常 细 胞 却 无 影 响, 被 誉 为 肿 瘤 治 疗 绿 色 疗 法 用 于 治 疗 乳 腺 癌 的 单 克 隆 抗 体 有 : 重 组 抗 Her-2 人 源 化 单 克 隆 抗 体 抗 体 与 细 胞 毒 素 的 偶 联 药 物 (ADC) 重 组 抗 程 序 死 亡 因 子 受 体 1(PD-1), 以 及 重 组 抗 程 序 死 亡 因 子 配 体 1 (PD-L1) 单 克 隆 抗 体 ( 一 ) 乳 腺 癌 抗 体 药 物 发 展 状 况 单 克 隆 抗 体 是 生 物 医 药 的 重 要 组 成 部 分 继 重 组 蛋 白 后, 单 克 隆 抗 体 引 领 了 第 二 次 生 物 医 药 产 品 浪 潮 国 外 已 开 发 了 乳 腺 癌 Her-2 PD-1/PD-L1 药 物 靶 点, 获 得 多 项 乳 腺 癌 药 物 专 利 ( 如 Her-2 抗 体 结 构 和 制 剂 技 术,ADC 药 物 的 小 分 子 结 构 和 偶 联 技 术,PD-1 和 PD-L1 抗 体 结 构 等 ), 拥 有 全 人 源 抗 体 药 物 筛 选 平 台, 以 及 大 规 模 动 物 细 胞 培 养 48

49 纯 化 和 质 量 分 析 技 术, 反 应 器 规 模 最 大 为 15000L, 抗 体 表 达 水 平 在 2g/L 以 上 与 发 达 国 家 相 比, 我 国 单 抗 药 物 研 发 及 产 业 化 才 刚 起 步 已 经 建 立 了 涵 盖 HEK293 CHO Vero 杂 交 瘤 及 BHK 等 工 程 细 胞 的 大 规 模 批 次 流 加 灌 流 培 养 工 艺, 突 破 了 系 列 动 物 细 胞 高 效 表 达 载 体 的 构 建 与 优 化 技 术 高 通 量 细 胞 培 养 筛 选 系 统 系 列 无 血 清 培 养 基 等 多 项 主 要 生 产 关 键 技 术, 初 步 实 现 了 抗 体 药 物 从 基 础 研 究 到 产 业 化 生 产 的 跨 越 ( 见 表 2-6) 1. 国 外 相 关 技 术 产 品 研 发 现 状 (1) 抗 体 Her-2 单 克 隆 抗 体 罗 氏 公 司 的 赫 赛 汀 于 1998 年 经 美 国 FDA 批 准 上 市 印 度 百 康 (Biocon) 与 迈 兰 (Mylan) 合 作, 于 2013 年 11 月 推 出 全 球 首 个 赫 赛 汀 仿 制 药 临 床 研 究 发 现,25%~30% 的 乳 腺 癌 患 者 Her-2 过 度 表 达 Her-2 蛋 白 的 人 源 性 单 克 隆 抗 体, 通 过 以 下 途 径 抑 制 Her-2 过 度 表 达 的 乳 腺 癌 细 胞 生 长 : 与 Her-2 特 异 性 结 合, 阻 断 配 体 接 到 的 细 胞 信 号 传 递, 影 响 上 皮 细 胞 生 长 ; 提 高 免 疫 细 胞 攻 击 和 杀 伤 肿 瘤 细 胞 的 能 力 ; 降 低 血 管 内 皮 生 长 因 子 的 生 成, 抑 制 肿 瘤 内 血 管 组 织 的 生 长 (2) 抗 体 和 细 胞 毒 素 偶 联 药 物 2013 年 2 月 美 国 食 品 和 药 物 管 理 局 (FDA) 批 准 罗 氏 公 司 开 发 的 Trastuzumabemtansine( 缩 写 T-DM1, 商 品 名 49

50 KadcylaTM) 上 市 T-DM1 是 一 种 抗 体 - 药 物 耦 联 物 (ADC), 由 赫 赛 汀 与 一 种 化 疗 药 物 组 成, 用 于 Her-2 阳 性 乳 腺 癌 治 疗 T-DM1 治 疗 肿 瘤 的 机 制, 是 通 过 抗 体 药 物 的 靶 向 作 用, 与 受 体 特 异 性 结 合, 将 毒 素 内 吞 入 肿 瘤 细 胞, 杀 死 肿 瘤 细 胞 国 外 批 准 上 市 的 抗 Her-2 靶 点 抗 体 - 药 物 耦 联 物 (ADC) 有 : Mylotarg Adcetris 和 Kadcyla 其 中 Kadcyla 于 2013 年 分 别 在 美 国 和 欧 洲 获 批 用 于 Her-2 阳 性 的 转 移 性 或 晚 期 乳 腺 癌 的 二 线 治 疗 (3) 抗 程 序 死 亡 因 子 1(PD-1)/ 程 序 死 亡 因 子 配 体 1(PD-L1) 单 克 隆 抗 体 肿 瘤 细 胞 具 有 逃 避 免 疫 应 答 的 神 奇 能 力, 解 决 这 个 问 题 是 一 项 世 界 性 难 题 对 此, 科 学 家 正 在 想 方 设 法 激 活 T 细 胞 的 抗 肿 瘤 活 性, 并 保 持 其 发 现 和 攻 击 癌 细 胞 的 能 力 办 法 之 一 是 免 疫 检 查 点 (PD-1/PD-L1 也 称 免 疫 检 查 点 ) 靶 向 抑 制, 即 抑 制 正 常 情 况 下 可 减 弱 免 疫 应 答 的 受 体, 以 增 强 免 疫 反 应 这 个 理 论 被 science 评 为 2013 年 10 大 科 技 成 就 之 一 全 球 首 个 PD-1 抗 体, 于 2014 年 7 月 在 日 本 上 市 施 贵 宝 默 克 辉 瑞 阿 斯 利 康 罗 氏 等 跨 国 制 药 公 司 都 参 与 到 了 PD-1/PD-L1 单 抗 的 研 发, 在 研 的 十 几 项 PD-1/PD-L1 单 抗 中, 有 2-3 个 已 完 成 临 床 研 究 50

51 在 治 疗 乳 腺 癌 晚 期 黑 素 瘤 非 小 细 胞 肺 癌 肾 癌 和 非 霍 奇 金 淋 巴 瘤 等 方 面,PD-1/PD-L1 单 抗 的 临 床 疗 效, 尤 其 是 疗 效 的 维 持 上, 具 有 巨 大 的 优 势 和 潜 力 2. 国 内 相 关 技 术 产 品 研 发 现 状 国 内 已 有 公 司 开 发 Her-2 抗 体 仿 制 药 物, 如 中 信 国 健 齐 鲁 制 药 等 有 企 业 引 进 专 利 技 术 开 发 ADC 药 物, 也 有 企 业 自 行 开 发 ADC 药 物, 如 浙 江 医 药 恒 瑞 制 药 等 主 要 研 发 内 容 是 筛 选 新 的 毒 素 药 物 新 的 连 接 子 技 术 或 在 氨 基 酸 系 列 中 插 入 容 易 连 接 的 非 天 然 氨 基 酸 技 术 等 针 对 PD-1 和 PD-L1 抗 癌 靶 点 的 开 发 项 目, 一 般 都 处 于 早 期 发 现 阶 段, 如 百 济 神 州 信 达 生 物 制 药 药 明 康 德 及 张 江 生 物 等 表 2-6 乳 腺 癌 抗 体 药 物 产 业 发 展 情 况 抗 体 技 术 国 外 现 状 国 内 现 状 国 内 代 表 企 业 Her-2 抗 体 1998 赫 赛 汀 上 市 2014 其 中 信 国 健 仿 制 药 进 入 临 床 首 仿 药 上 市 齐 鲁 制 药 ADC 药 物 抗 HER2 靶 点 的 上 市 专 利 引 进 或 自 行 浙 江 医 药 ADC 产 品 有 3 个 开 发 恒 瑞 制 药 首 个 PD1 抗 体 于 2014 年 百 济 神 州 在 日 本 上 市 美 国 研 发 中 研 究 单 位 多, 但 PD-1 信 达 生 物 制 药 的 PD-1/PD-L1 单 抗 有 13 多 处 于 早 期 研 发 和 PD-L1 药 明 康 德 个, 有 2~3 个 产 品 已 经 完 阶 段 张 江 生 物 成 临 床 研 究 51

52 ( 二 ) 抗 体 技 术 开 发 主 流 方 向 乳 腺 癌 治 疗, 从 Her-2 抗 体 到 TDM1, 再 从 TDM1 到 PD-1 抗 体, 趋 势 是 向 靶 向 和 免 疫 治 疗 发 展 这 也 是 未 来 肿 瘤 治 疗 的 一 个 发 展 趋 势 在 抗 体 技 术 方 面, 发 展 趋 势 是 采 用 人 源 化 和 全 人 源 抗 体 如 此 可 以 克 服 人 抗 鼠 的 免 疫 反 应 在 生 产 技 术 上 方 面, 主 流 技 术 是 CHO 细 胞 大 规 模 培 养 技 术 ( 见 表 2-7) 表 2-7 乳 腺 癌 抗 体 药 物 技 术 发 展 情 况 发 展 现 状 发 展 趋 势 抗 体 靶 点 Her-2 PD-1/ PD-L1 新 的 抗 体 靶 点 抗 体 技 术 部 分 企 业 已 拥 有 人 源 化 和 全 人 源 抗 体 技 术 平 台 人 源 化 和 全 人 源 抗 体 生 产 工 艺 技 术 反 应 器 规 模 逐 步 提 高 CHO 细 胞 大 规 模 培 养 技 术 二 国 内 外 新 型 肿 瘤 疫 苗 发 展 现 状 及 趋 势 自 1891 年 William Coley 首 次 采 用 细 菌 提 取 物 (Coley 毒 素 ) 激 发 整 体 免 疫 能 力 治 疗 恶 性 肿 瘤 以 来, 全 球 各 种 肿 瘤 疫 苗 的 研 究 呈 阶 梯 状 上 升 态 势 在 我 国, 肿 瘤 疫 苗 研 发 亦 成 为 近 年 来 的 热 点 传 统 疫 苗, 利 用 抗 原 刺 激 机 体 产 生 特 异 性 体 液 抗 体, 难 于 启 动 细 胞 免 疫 而 新 型 肿 瘤 疫 苗, 利 用 肿 瘤 细 胞 或 肿 瘤 抗 原 物 质, 诱 导 机 体 52

53 特 异 性 细 胞 免 疫 反 应 和 体 液 免 疫 反 应, 抑 制 肿 瘤 细 胞 生 长 扩 散 和 复 发 ( 一 ) 新 型 肿 瘤 疫 苗 的 发 展 现 状 1. 肿 瘤 疫 苗 的 研 发 状 态 对 Thomson Reuters Pharma 数 据 库 检 索 发 现, 已 上 市 的 14 种 肿 瘤 疫 苗, 主 要 用 于 治 疗 黑 色 素 瘤 宫 颈 癌 膀 胱 癌 非 小 细 胞 肺 癌 肾 癌 前 列 腺 癌 和 结 肠 癌 ; 还 有 的 肿 瘤 疫 苗 处 于 基 础 研 发 或 Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ 期 临 床 研 究 阶 段, 研 发 总 量 排 名 前 10 位 的 肿 瘤 疫 苗 及 研 发 机 构 ( 见 表 ) 表 2-8 研 发 总 量 排 名 前 10 位 的 肿 瘤 疫 苗 及 研 发 状 态 名 称 基 础 临 床 研 究 上 市 其 他 研 发 I 期 II 期 III 期 黑 色 素 疫 苗 乳 腺 癌 疫 苗 前 列 腺 疫 苗 肺 癌 疫 苗 大 肠 癌 疫 苗 卵 巢 癌 疫 苗 胰 腺 癌 疫 苗 宫 颈 癌 疫 苗 白 血 病 疫 苗 结 肠 肿 瘤 疫 苗 脑 肿 瘤 疫 苗 表 2-9 肿 瘤 疫 苗 研 发 总 量 排 前 10 位 的 机 构 排 名 公 司 国 别 疫 苗 数 量 1 葛 兰 素 史 克 英 国 60 2 赛 诺 菲 巴 斯 德 法 国 53 3 Biomay 公 司 奥 地 利 31 53

54 4 默 克 制 药 公 司 德 国 31 5 Cytos 生 物 技 术 公 司 瑞 士 27 6 美 国 国 家 过 敏 和 传 染 病 研 究 所 美 国 26 7 国 家 卫 生 研 究 院 美 国 24 8 Chiron 公 司 美 国 23 9 Vical 公 司 美 国 Therion 生 物 制 品 公 司 英 国 肿 瘤 疫 苗 相 关 专 利 登 记 情 况 自 20 世 纪 90 年 代 以 来, 随 着 分 子 生 物 学 免 疫 学 和 生 物 技 术 的 发 展, 抗 原 加 工 和 提 呈 机 制 主 要 组 织 相 容 性 复 合 物 及 细 胞 因 子 网 络 等 相 继 被 发 现, 肿 瘤 疫 苗 研 发 迈 入 了 快 速 发 展 阶 段 自 2000 年 以 来, 肿 瘤 疫 苗 相 关 专 利 登 记 量 呈 快 速 上 升 趋 势 美 国 中 国 和 日 本 三 国 肿 瘤 疫 苗 相 关 专 利 登 记 量 占 全 球 总 登 记 量 的 46.9% 其 中 美 国 占 36.66%; 上 市 的 14 个 肿 瘤 疫 苗 中, 由 美 国 公 司 研 发 就 有 7 项 我 国 的 专 利 申 请 量 仅 次 于 美 国, 领 先 于 日 本 等 国 家 现 有 的 肿 瘤 疫 苗, 包 括 抗 原 / 佐 剂 疫 苗 全 细 胞 肿 瘤 疫 苗 树 突 细 胞 疫 苗 病 毒 载 体 和 DNA 疫 苗 个 体 基 因 型 抗 体 根 据 国 际 专 利 分 类 (International Patent Classification, IPC), 肿 瘤 疫 苗 专 利 主 要 集 中 在 A61K( 医 用 牙 科 用 或 梳 妆 用 的 配 制 品 ),C12N( 微 生 物 或 者 酶, 其 组 合 物, 繁 殖 保 藏 或 维 持 微 生 物, 变 异 或 遗 传 工 程, 培 养 基 ) C07H( 糖 类, 其 衍 生 物, 核 苷, 核 苷 酸, 核 酸 ) C12Q( 包 含 酶 或 微 生 物 54

55 的 测 定 方 法 其 所 用 的 组 合 物 或 试 纸, 这 种 组 合 物 的 制 备 方 法 ) 三 个 类 别 中 也 有 较 多 研 究 其 中,A61K-039/00 占 48.88%, A61K-048/00 占 30.40%, 其 余 6 个 分 类 号 所 占 15%( 图 1) 图 2-4. 肿 瘤 疫 苗 专 利 数 量 排 名 前 8 为 的 IPC 分 类 3. 肿 瘤 疫 苗 靶 点 肿 瘤 疫 苗 或 肿 瘤 免 疫 治 疗 的 靶 点 有 :ErbB2 酪 氨 酸 激 酶 受 体 表 皮 生 长 因 子 (EGF) 受 体 B 淋 巴 细 胞 抗 原 CD20 Toll 样 受 体 CD66e 粘 蛋 白 1(Mucin 1) 等 具 体 如 Her-2 (erbb2,her-2/neu) 癌 胚 抗 原 (CEA) 粒 细 胞 巨 噬 细 胞 击 落 刺 激 因 子 (GM-CSF) Mucin 1(CD227 抗 原 ) 白 介 素 2 (IL-2) 等 ( 图 2) 55

56 图 2-5. 肿 瘤 免 疫 治 疗 排 名 前 10 位 的 靶 点 4. 上 市 的 肿 瘤 疫 苗 上 市 的 肿 瘤 疫 苗 有 14 种 主 要 集 中 于 黑 色 素 瘤 宫 颈 癌 膀 胱 癌 非 小 细 胞 肺 癌 肾 癌 前 列 腺 癌 和 结 肠 癌 等 除 Gardasil Cervarix 两 种 外, 其 余 12 种 均 为 治 疗 性 疫 苗 表 2-10 已 上 市 的 肿 瘤 疫 苗 疫 苗 名 称 上 市 研 发 公 司 应 用 疾 病 靶 点 时 间 M-Vax 2005 Avax Technologies ( 美 ) 黑 色 素 瘤 实 体 瘤 Hybricell 2005 Genoa( 巴 西 ) 肾 癌 黑 色 素 瘤 Melacine 2001 Corixa( 美 ) 黑 色 素 瘤 Yervoy 2011 Bristol-Myers Squibb 黑 色 素 瘤 CTL Zelboraf 2011 Plexxikon( 日 ) 黑 色 素 瘤 甲 状 protein-4 腺 瘤 结 直 肠 肿 瘤 实 体 瘤 F Hoffmann-La Roche 宫 颈 癌 肛 门 肿 Raf B 蛋 白 激 56

57 ( 瑞 士 ) 瘤 酶 Gardasil 2006 Merck( 美 ) Cervarix 2007 GSK( 英 ) 宫 颈 癌 HPV L1 壳 蛋 白 Provenge 2010 Dendreon( 美 ) 前 列 腺 癌 前 列 腺 酸 性 磷 酸 酶 OncoVax 2002 Intracel( 美 ) 结 肠 癌 肾 癌 黑 色 素 瘤 CimaVax EGF 2008 Centro de Immunologica Molecular( 古 巴 ) 非 小 细 胞 肺 癌 疫 苗 ImmuCyst 2003 Sanofi Pasteur( 法 ) 膀 胱 癌 肝 癌 Nippon Kayaku( 日 ) PACIS 2001 Shire BioChem( 英 ) 膀 胱 癌 CreaVax-RCC 2007 CreaGene( 韩 ) 肾 癌 疫 苗 Oncophage 2010 Agenus( 美 ) 胃 癌 肾 癌 肉 瘤 肺 癌 结 直 肠 肿 瘤 胰 腺 癌 等 EGF 受 体 Endoplasmin ( 二 ) 肿 瘤 疫 苗 研 发 的 趋 势 自 发 现 树 突 状 细 胞 ( dendritic cell,dc) 以 来, 免 疫 细 胞 治 疗 被 认 为 是 有 望 治 愈 肿 瘤 的 新 技 术 作 为 免 疫 治 疗 的 一 个 重 要 方 向, 研 发 应 用 于 临 床 的 个 性 化 肿 瘤 疫 苗, 已 成 为 当 前 的 热 点 起 先, 人 们 主 要 尝 试 以 肿 瘤 特 异 性 抗 原 (TSA) 或 肿 瘤 相 关 抗 原 (TAA) 的 肿 瘤 细 胞 片 段 或 碎 片 为 焦 点 进 行 肿 瘤 疫 苗 的 研 发 但 这 种 方 法 仍 存 在 如 下 弊 端 : (1) 难 以 寻 找 特 异 性 强 的 TSA 和 TAA; (2) 难 以 进 行 有 效 性 评 价 ; (3) 难 以 确 定 最 大 耐 受 剂 量 ; (4) 缺 乏 合 适 临 床 III 期 试 验 的 临 床 终 点 ; 57

58 (5) 如 何 克 服 肿 瘤 的 免 疫 逃 避 ; (6) 晚 期 患 者 免 疫 功 能 低 下 个 体 差 异 大 前 期 治 疗 带 来 的 免 疫 抑 制 问 题 免 疫 应 答 起 效 慢 ; (7) 长 期 安 全 等 问 题 后 来, 研 究 人 员 致 力 于 调 查 个 体 对 癌 症 产 生 的 免 疫 反 应, 定 制 个 体 化 治 疗 的 途 经 伴 随 着 这 一 转 变, 个 体 化 癌 症 疫 苗 的 出 现, 成 为 当 前 的 主 流 最 为 突 出 的 是 以 PD-1 为 代 表 的 检 查 点 阻 滞 疗 法 检 查 点 是 一 类 免 疫 抑 制 性 分 子, 它 们 的 生 理 学 功 能 是 调 节 免 疫 反 应 的 强 度 和 广 度, 从 而 避 免 正 常 组 织 的 损 伤 和 破 坏 某 些 T 细 胞 上 的 PD-1 受 体 与 信 号 蛋 白 PD-L1 结 合 时, 这 些 细 胞 就 进 入 冬 眠 肿 瘤 细 胞 通 常 表 达 PD-L1, 使 周 围 的 T 细 胞 变 成 无 能 的 效 应 细 胞, 产 生 免 疫 逃 逸 一 些 阻 断 PD-1 或 PD-L1 的 药 物 能 够 解 放 这 些 T 细 胞, 重 激 活 免 疫 系 统 对 抗 肿 瘤 在 某 些 罹 患 晚 期 癌 症 且 其 他 疗 法 无 效 的 患 者 身 上, 这 些 设 想 得 到 了 证 实, 即 患 者 产 生 了 持 久 的 免 疫 激 活 反 应 伦 敦 大 学 玛 丽 女 王 学 院 肿 瘤 学 家 Thomas Powles 团 队, 就 是 将 目 光 聚 焦 到 肿 瘤 周 围 的 免 疫 细 胞 PD-1, 才 在 膀 胱 癌 治 疗 研 究 上 取 得 重 大 突 破 他 们 对 68 位 晚 期 膀 胱 癌 患 者 ( 即 对 其 他 标 准 治 疗 如 放 化 疗 均 无 效 的 ) 施 以 MPDL3280A 药 物 治 疗 这 种 药 物 可 阻 断 PD-L1 蛋 白 对 这 些 患 者 进 行 PD-L1 蛋 58

59 白 检 测, 大 约 30% 的 具 有 PD-L1 阳 性 肿 瘤 治 疗 6 周 后, 发 现 43% 的 PD-L1 阳 性 患 者 肿 瘤 缩 小 12 周 后 随 访, 这 一 比 例 上 升 到 52% 其 中 有 2 名 患 者 (7%), 经 放 射 成 像 再 未 发 现 任 何 癌 迹 象 对 PD-L1 阴 性 患 者, 甚 至 也 有 11% 的 对 此 治 疗 做 出 了 积 极 的 响 应 对 PD-L1 阳 性 的 肿 瘤 患 者,PD-1 抗 体 药 物 具 有 高 治 愈 率 但 PD-L1 肿 瘤 阳 性 率 仅 占 20-30% 如 何 推 广 PD-1 抗 体 药 物 的 应 用 范 围, 是 个 急 需 解 决 的 问 题 对 此, 一 些 研 究 者 将 目 光 投 向 了 一 些 有 利 的 突 变 基 因 他 们 发 现,T 细 胞 能 识 别 的 一 些 仅 存 在 于 肿 瘤 细 胞 之 中 的 突 变 蛋 白 序 利 用 计 算 机 模 拟 细 胞 培 养 和 动 物 模 型, 确 定 哪 些 蛋 白 最 有 可 能 被 T 细 胞 识 别 和 攻 击 再 将 这 些 蛋 白 质 的 部 分 整 合 到 疫 苗 中, 重 新 激 活 机 体 杀 伤 肿 瘤 在 动 物 实 验 中, 这 种 疫 苗 治 愈 了 近 90% 罹 患 一 种 晚 期 肌 肉 癌 症 的 小 鼠 研 究 人 员 正 在 致 力 于 利 用 这 些 疫 苗 来 对 抗 乳 腺 癌 脑 癌 肺 癌 和 头 颈 部 癌 症 Chen S. 团 队 和 Soares 团 队 在 探 讨 PD-1 的 联 合 anti-4-1bb 或 CTLA-4 治 疗 白 血 病 和 膀 胱 癌 联 合 时, 还 发 现 它 们 可 不 同 程 度 的 提 高 特 异 性 T 细 胞 肿 瘤 杀 伤 力, 从 而 抑 制 肿 瘤 的 生 长 和 复 发 综 上 所 述, 免 疫 检 查 点 阻 滞 法 和 肿 瘤 疫 苗 靶 向 药 或 抗 体 等 组 合 疗 法 是 肿 瘤 免 疫 治 疗 的 发 展 趋 势 三 国 内 外 小 分 子 靶 向 药 物 研 发 现 状 及 发 展 趋 势 59

60 乳 腺 癌 分 子 靶 向 治 疗, 通 过 对 细 胞 增 殖 细 胞 凋 亡 信 号 传 导 通 路 和 新 生 血 管 形 成 等 多 个 靶 点 作 用 于 肿 瘤 细 胞, 特 异 性 较 强 毒 副 反 应 较 小, 受 到 越 来 越 多 的 关 注 ( 一 ) 乳 腺 癌 小 分 子 靶 向 药 研 发 现 状 基 于 不 同 作 用 靶 标, 乳 腺 癌 靶 向 性 治 疗 药 物 有 以 下 几 类 ( 见 表 2-11) 1. 选 择 性 雌 激 素 受 体 调 节 剂 (SERMs) 雌 性 激 素 及 雌 性 激 素 受 体 是 部 分 乳 腺 癌 发 生 发 展 过 程 的 重 要 调 控 因 子 雌 性 激 素 及 雌 性 激 素 受 体 的 结 合 不 仅 促 进 下 游 靶 基 因 的 转 录, 同 时 也 激 活 表 皮 生 长 因 子 受 体 (EGFR) 相 关 的 信 号 通 路 如 PI3K/Akt 通 路 等, 抑 制 癌 细 胞 凋 亡, 促 进 癌 细 胞 的 增 殖 过 程 选 择 性 雌 激 素 受 体 调 节 剂 (SERMs) 通 过 竞 争 性 与 雌 激 素 受 体 结 合, 使 胞 内 雌 激 素 受 体 被 耗 竭, 阻 止 活 性 雌 激 素 - 雌 激 素 受 体 复 合 物 生 成, 抑 制 雌 激 素 促 增 殖 的 活 性, 使 肿 瘤 细 胞 阻 滞 于 G0/G1 期, 进 而 抑 制 雌 激 素 依 赖 性 的 乳 腺 癌 生 长 第 一 代 选 择 性 雌 激 素 受 体 调 节 剂 -- 他 莫 昔 芬 (tamoxifen), 是 乳 腺 癌 内 分 泌 治 疗 的 代 表 性 药 物 和 一 线 药 物 然 而, 他 莫 昔 芬 的 活 性 具 有 组 织 依 赖 性 在 乳 腺 中, 他 莫 昔 芬 具 有 抗 雌 激 素 效 应 ; 在 其 他 组 织 如 子 宫 中, 他 莫 昔 芬 则 具 有 雌 激 素 原 活 性 因 此, 采 用 他 莫 昔 芬 治 疗 乳 腺 癌 时, 可 能 引 发 子 宫 癌 60

61 新 型 的 SERMs 有 阿 里 斯 康 的 氟 维 司 群 (Fulvestrant) 该 药 用 于 治 疗 激 素 受 体 阳 性 转 移 性 乳 腺 癌 患 者 为 已 接 受 抗 雌 激 素 药 物 ( 如 他 莫 昔 芬 ) 但 病 情 仍 趋 恶 化 的 绝 经 后 妇 女 2. 芳 香 化 酶 抑 制 剂 (AIs) 芳 香 化 酶 是 雌 激 素 合 成 所 必 需 的 活 性 酶 芳 香 化 酶 抑 制 剂 通 过 抑 制 芳 香 化 酶 的 活 性, 阻 断 卵 巢 以 外 的 组 织 雄 烯 二 酮 与 睾 酮 经 芳 香 化 作 用 转 化 成 雌 激 素, 达 到 抑 制 乳 腺 癌 细 胞 生 长 治 疗 肿 瘤 的 目 的 芳 香 化 酶 抑 制 剂 可 分 为 非 甾 类 和 甾 体 类 两 类 非 甾 类 芳 香 化 酶 抑 制 剂 此 类 药 物 通 过 与 亚 铁 血 红 素 中 的 铁 离 子 结 合, 同 内 源 性 底 物 竞 争 芳 香 化 酶 的 活 性 位 点, 可 逆 性 地 抑 制 芳 香 化 酶 的 活 性 代 表 药 物 有 : 第 一 代 的 氨 鲁 米 特 ( Aminoglutethimidum,AG, 由 于 特 异 性 差 与 明 显 的 毒 性, 已 被 淘 汰 ) 第 二 代 的 组 胺 衍 生 物 法 屈 唑 (Fadrozole), 以 及 新 一 代 的 具 有 高 度 选 择 性 三 吡 咯 衍 生 物 阿 那 曲 唑 (Anastrozole) 来 曲 唑 (Letrozole) 和 伏 氯 唑 (Vorozole) 甾 体 类 芳 香 化 酶 抑 制 剂 这 类 药 物 与 芳 香 化 酶 内 源 性 作 用 底 物 雄 烯 二 酮 和 睾 酮 结 构 相 似, 以 共 价 键 形 式 与 其 不 可 逆 结 合, 引 起 永 久 性 的 酶 灭 活, 从 而 抑 制 雌 激 素 的 合 成 代 表 性 药 物 有 兰 他 隆 (Lentaron) 及 依 西 美 坦 (Exemestane) 61

62 3. 表 皮 生 长 因 子 受 体 靶 向 药 物 (EGFR) 表 皮 生 长 因 子 受 体 (Epidermalgrowthfactorreceptor, EGFR) 是 一 类 由 Cerb1/EGFR 基 因 编 码 的 Src 家 族 跨 膜 受 体 酪 氨 酸 激 酶 EGFR 是 G- 蛋 白 细 胞 因 子 受 体 整 合 素 等 多 个 信 号 通 路 的 交 汇 点, 介 导 细 胞 的 生 长 增 殖 分 化 粘 附 以 及 移 动 等 多 个 生 命 过 程, 异 常 活 化 的 EGFR 通 路 则 诱 导 细 胞 凋 亡 抑 制 和 促 进 细 胞 增 殖 过 程, 是 肿 瘤 发 生 发 展 的 重 要 机 制 乳 腺 癌 患 者 中, 约 有 20% 的 过 表 达 人 表 皮 生 长 因 子 受 体 2 (Humanepidermalgrowthfactorreceptor2,HER2), 和 癌 症 的 疾 病 发 展 和 较 差 的 预 后 直 接 相 关 EGFR/HER2 的 活 化 过 程 ( 主 要 通 过 配 体 诱 导 的 EGFR/HER2 二 聚 化 以 及 胞 内 的 激 酶 结 构 域 的 自 磷 酸 化 过 程 ), 也 是 目 前 针 对 EGFR/HER2 靶 向 药 物 研 究 的 重 要 靶 标 如 胞 外 EGFR 配 体 结 合 域 单 克 隆 抗 体 阻 断 与 胞 内 激 酶 域 ATP 竞 争 性 小 分 子 抑 制 剂 拮 抗 两 种 方 式 抗 体 药 物 : 代 表 性 药 物 有 罗 氏 ( 基 因 泰 克 ) 的 曲 妥 珠 单 抗 ( 赫 赛 汀,Herceptin) 及 帕 妥 珠 单 抗 (Pertuzumab) 曲 妥 珠 单 抗 是 罗 氏 ( 基 因 泰 克 ) 上 市 的 第 一 个 治 疗 乳 腺 癌 的 人 源 化 单 克 隆 抗 体, 也 是 肿 瘤 靶 向 治 疗 史 上 的 里 程 碑 式 药 物 然 而 临 床 耐 药 性 是 HER2 抗 体 靶 向 治 疗 所 面 临 的 重 大 挑 战 T-DM1 是 罗 氏 ( 基 因 泰 克 ) 又 一 个 HER2 靶 向 的 创 新 型 抗 体 药 62

63 物 T-DM1 是 由 靶 向 HER2 的 曲 妥 单 抗 和 细 胞 毒 素 美 登 素 衍 生 物 DM1 偶 联 而 成, 具 有 高 度 靶 向 性 及 抗 肿 瘤 活 性 抗 体 - 药 物 偶 联 剂 (ADCs) 是 成 为 单 克 隆 抗 体 药 物, 尤 其 是 肿 瘤 治 疗 用 单 抗 的 研 究 热 点 与 发 展 方 向 目 前,ADCs 药 物 开 发 的 核 心 技 术 掌 握 在 少 数 国 外 公 司 手 中 如 : 美 国 的 SeattleGenetics 公 司 和 Immunogen 公 司 两 公 司 所 开 发 的 ADC 药 物 所 偶 联 的 化 学 药 物 有 所 不 同 : Genetics 公 司 在 研 的 ADCs 药 物 多 使 用 微 管 蛋 白 聚 合 酶 抑 制 剂 MMAE MMAF 等 ; 而 Immunogen 公 司 在 研 的 ADCs 药 物 多 使 用 微 管 蛋 白 解 聚 剂 美 登 素 DM1 DM4 等 由 于 ADCs 药 物 研 发 线 不 断 充 实, 近 年 不 断 有 新 产 品 陆 续 上 市, 国 际 制 药 界 对 于 ADCs 药 物 的 开 发 热 情 持 续 高 涨 众 多 制 药 巨 头 不 惜 斥 巨 资 从 上 述 公 司 引 进 技 术 近 年, 辉 瑞 雅 培 从 SeattleGenetics 公 司, 礼 来 诺 华 从 ImmunoGen 公 司, 默 克 从 Ambrx 公 司 分 别 引 进 ADCs 药 物 开 发 技 术 我 国 浙 江 医 药 集 团 也 从 Ambrx 公 司 引 进 技 术, 共 同 开 发 靶 点 为 HER2 的 ADCs 药 物 小 分 子 药 物 : 目 前 有 多 个 靶 向 EGFR/HER2 的 酪 氨 酸 激 酶 小 分 子 抑 制 剂 处 于 临 床 测 试 阶 段 EGFR/HER2 胞 内 的 激 酶 结 构 域 是 介 导 EGFR/HER2 信 号 通 路 的 重 要 组 成 部 分, 针 对 EGFR/HER2 激 酶 结 构 域 发 展 ATP 竞 争 性 小 分 子 抑 制 剂 是 乳 腺 癌 靶 向 药 物 研 究 的 重 点 领 域 代 表 性 的 药 物 有 拉 帕 替 尼 (Lapatinib) 与 阿 法 替 尼 (Afatinib), 以 及 进 入 临 床 后 期 63

64 的 来 那 替 尼 (Neratinib) 其 中 拉 帕 替 尼 (Lapatinib) 是 可 逆 的 EGFR/HER2 双 靶 向 酪 氨 酸 激 酶 小 分 子 抑 制 剂, 而 阿 法 替 尼 (Afatinib) 与 来 那 替 尼 (Neratinib) 均 是 不 可 逆 的 多 靶 向 酪 氨 酸 激 酶 小 分 子 抑 制 剂, 同 时 靶 向 多 个 ErbB 家 族 成 员 ( 如 EGFR,HER2,ErbB3 及 ErbB4), 能 较 有 效 地 中 断 下 游 信 息 传 导 临 床 研 究 数 据 表 明, 用 于 治 疗 HER2 阳 性 乳 腺 癌 时, 来 那 替 尼 (Neratinib) 疗 效 优 于 罗 氏 (Roche) 乳 腺 癌 药 物 赫 赛 汀 (Herceptin) neratinib+ 化 疗 治 疗 组, 有 39% 的 患 者 取 得 了 病 理 学 完 全 缓 解 (pcr); 赫 赛 汀 + 化 疗 治 疗 组 为 23% 4.PI3K/Akt/mTOR 信 号 通 路 靶 向 药 物 PI3K/Akt/mTOR 信 号 通 路 是 表 皮 生 长 因 子 受 体 (EGFR) 下 游 关 键 通 路 之 一, 与 癌 细 胞 的 增 殖 存 活 移 动 新 生 血 管 形 成 凋 亡 抑 制 以 及 癌 细 胞 转 移 密 切 相 关 编 码 持 续 活 化 的 PI3K 突 变 体 (PI3KCA) 的 基 因 是 乳 腺 癌 中 最 常 见 的 突 变 基 因, 此 外 PI3K/Akt/mTOR 信 号 通 路 的 活 化 也 促 进 雌 激 素 受 体 的 活 性, 导 致 内 分 泌 疗 法 的 耐 药 性 其 中 诺 华 的 广 谱 PI3K 小 分 子 抑 制 剂 Buparlisib(BKM120) 处 于 临 床 II/III 期 诺 华 的 另 一 个 PI3K/Akt/mTOR 信 号 通 路 的 小 分 子 抑 制 剂 依 维 莫 司 (Afinitor,everolimus) 则 是 首 个 被 批 准 用 于 激 素 受 体 阳 性 乳 腺 癌 的 mtor 小 分 子 抑 制 剂 此 外, 辉 瑞 公 司 的 mtor 小 分 子 抑 制 剂 temsirolimus 及 默 克 公 司 的 ridaforolimus 64

65 针 对 乳 腺 癌 治 疗 也 都 进 入 临 床 II 期 验 证, 但 疗 效 需 要 进 一 步 的 确 证 5. 细 胞 周 期 蛋 白 激 酶 靶 向 药 物 细 胞 周 期 失 控 是 癌 症 的 一 个 标 志 性 特 征,CDK4/6 在 许 多 癌 症 中 均 过 度 活 跃, 导 致 细 胞 增 殖 失 控 CDK4/6 是 细 胞 周 期 的 关 键 调 节 因 子, 能 够 触 发 细 胞 周 期 从 生 长 期 (G1 期 ) 向 DNA 复 制 期 (S1 期 ) 转 变 在 雌 激 素 受 体 阳 性 (ER+) 乳 腺 癌 中,CDK4/6 的 过 度 活 跃 非 常 频 繁, 而 CDK4/6 是 ER 信 号 的 关 键 下 游 靶 标 临 床 前 数 据 表 明,CDK4/6 和 ER 信 号 双 重 抑 制 具 有 协 同 作 用, 并 能 够 抑 制 G1 期 ER+ 乳 腺 癌 细 胞 的 生 长 另 外 的 临 床 前 研 究 数 据 表 明,CDK4/6 和 PI3K 信 号 的 双 重 抑 制 对 耐 药 性 的 PI3K 突 变 体 (PI3KCA) 具 有 显 著 的 抑 制 效 果 以 辉 瑞 礼 来 和 诺 华 三 家 公 司 为 代 表 的 新 药 Palbociclib LY 和 LEE011 引 发 广 泛 关 注 辉 瑞 公 司 的 Palbociclib 联 合 曲 唑 (letrozole) 用 于 既 往 未 接 受 过 系 统 治 疗 以 控 制 晚 期 病 情 的 绝 经 后 女 性 雌 激 素 受 体 阳 性 (ER+) 人 表 皮 生 长 因 子 受 体 2 阴 性 (HER2-) 局 部 晚 期 或 转 移 性 乳 腺 癌 的 治 疗 II 期 临 床 数 据 表 明, 与 标 准 治 疗 药 物 曲 唑 (letrozole) 治 疗 组 相 比,Palbociclib+ 曲 唑 联 合 用 药 组 疾 病 无 进 展 生 存 期 (PFS) 取 得 了 统 计 学 意 义 的 显 著 延 长 (20.2 个 月 vs10.2 个 月,p=0.0004), 达 到 了 研 究 的 主 要 终 点 FDA 已 于 2013 年 4 月 授 予 Palbociclib 突 破 性 疗 法, 用 65

66 于 ER+/HER2- 晚 期 乳 腺 癌 的 一 线 治 疗 业 界 预 测, 如 果 获 批, 辉 瑞 的 Palbociclib 的 年 销 售 峰 值 将 突 破 30 亿 美 元, 将 成 为 全 球 重 磅 药 物 6.DNA 修 复 通 路 靶 向 药 物 DNA 修 复 通 路 靶 向 药 物 PARP1 抑 制 剂 联 合 化 疗 药 物, 能 显 著 提 高 三 阴 性 乳 腺 癌 病 人 的 中 位 无 进 展 生 存 期 与 总 生 存 期 目 前 有 多 个 PARP 抑 制 剂 进 行 乳 腺 癌 治 疗 的 临 床 试 验 多 聚 腺 苷 酸 二 磷 酸 核 糖 聚 合 酶 (PARPs) 在 细 胞 DNA 损 伤 修 复 中 起 着 关 键 作 用 PARP 识 别 并 结 合 断 裂 的 DNA 链, 然 后 募 集 烟 酰 胺 腺 嘌 呤 二 核 苷 酸 (NAD) 依 赖 的 ADP 核 糖 单 位 组 蛋 白 以 及 各 种 DNA 修 复 相 关 酶, 通 过 一 系 列 的 催 化 调 节 反 应, 完 成 DNA 修 复 过 程 其 中 PARP1 是 单 链 DNA 损 伤 修 复 最 为 关 键 的 蛋 白 在 正 常 细 胞 中 还 存 在 另 一 个 由 与 乳 腺 癌 易 感 基 因 BRCA1 和 BRCA2 所 介 导 的 DNA 修 复 通 路 单 一 DNA 修 复 通 路 被 阻 断 对 细 胞 生 长 没 有 显 著 的 影 响 然 而 在 部 分 乳 腺 癌 中 BRCA 基 因 发 生 突 变 而 导 致 功 能 缺 陷, 因 此 对 PARP1 抑 制 剂 尤 其 敏 感 临 床 数 据 表 明,PARP1 抑 制 剂 联 合 化 疗 药 物 吉 西 他 宾 (Gemcitabine) 能 显 著 提 高 三 阴 性 乳 腺 癌 病 人 的 中 位 无 进 展 生 存 期 与 总 生 存 期 目 前 有 多 个 PARP 抑 制 剂 进 行 乳 腺 癌 治 疗 的 临 床 试 验, 其 中 包 括 阿 斯 利 康 的 olaparib 艾 伯 维 的 veliparib BioMarin 的 BMN-673 ClovisOncology 的 rucaparib 和 66

67 Tesaro 的 niraparib 等 5 个 PARP 抑 制 剂 我 国 百 济 神 州 的 PARP 抑 制 剂 BGB-290 正 在 进 行 1 期 临 床 实 验 招 募, 该 项 目 是 与 德 国 默 克 雪 兰 诺 进 行 合 作 7. 有 丝 分 裂 蛋 白 激 酶 靶 向 药 物 细 胞 周 期 失 控 是 癌 症 的 一 个 标 志 性 特 征, 调 控 细 胞 有 丝 分 裂 的 保 罗 样 蛋 白 激 酶 1(PLK1) 和 4(PLK4) 在 许 多 癌 症 中 均 过 度 活 跃, 导 致 细 胞 增 殖 失 控 临 床 前 研 究 数 据 表 明,PLK4 的 特 异 性 抑 制 剂 CFI 在 各 种 临 床 前 肿 瘤 模 型 中 显 示 出 显 著 的 抗 肿 瘤 活 性, 尤 其 对 PTEN 缺 失 的 基 底 或 三 阴 乳 腺 癌 具 有 很 高 的 特 异 性, 该 结 果 被 认 为 是 当 今 治 疗 乳 腺 癌 的 重 要 发 现 此 外, 临 床 前 研 究 数 据 表 明,PLK1 的 特 异 性 小 分 子 抑 制 剂 BI-2536 与 其 他 化 疗 药 物 联 合 用 药 可 以 显 著 抑 制 三 阴 乳 腺 癌 的 生 长 保 罗 样 蛋 白 激 酶 PLK1 特 异 性 抑 制 剂 volasertib(bi-6727) 针 对 固 体 瘤 的 治 疗 处 于 临 床 I 期, 临 床 测 试 数 据 显 示 其 中 一 例 乳 腺 癌 病 人 获 得 完 全 缓 解 (completeresponse,cr) 8.6- 磷 酸 果 糖 2- 激 酶 (PFKFB3) 靶 向 药 物 6- 磷 酸 果 糖 2- 激 酶 抑 制 剂 阻 断 癌 细 胞 糖 酵 解 研 究 表 明 6- 磷 酸 果 糖 2- 激 酶 (PFKFB3) 是 雌 激 素 受 体 或 孕 激 素 受 体 下 游 的 基 因 产 物, 荷 尔 蒙 激 活 激 素 受 体 后 促 进 67

68 PFKFB3 的 表 达, 从 而 促 进 癌 细 胞 的 糖 酵 解 过 程, 为 癌 细 胞 的 生 长 及 增 殖 提 供 物 质 准 备 临 床 前 研 究 数 据 显 示 PFKFB3 抑 制 剂 与 雌 激 素 拮 抗 剂 联 合 可 显 著 抑 制 乳 腺 癌 的 生 长 目 前 PFKFB3 的 小 分 子 抑 制 剂 PFK-158 针 对 乳 腺 癌 正 进 入 临 床 I 期 试 验, 其 他 大 多 数 PFKFB3 的 小 分 子 抑 制 剂 都 处 于 临 床 前 研 究 阶 段 9. 表 观 遗 传 调 控 靶 向 药 物 在 乳 腺 癌 发 生 发 展 过 程 中, 雌 激 素 受 体 (ER) 与 组 蛋 白 去 乙 酰 化 酶 (HDAC) 通 路 在 基 因 调 控 的 多 个 层 面 进 行 交 互, 包 括 雌 激 素 受 体 的 表 达 及 活 性 p21waf1/cip1 蛋 白 的 表 达, 以 及 细 胞 增 殖 等 临 床 前 研 究 数 据 表 明,HDAC 抑 制 剂 能 够 逆 转 雌 激 素 受 体 阳 性 乳 腺 癌 的 获 得 性 荷 尔 蒙 耐 药 性 II 期 临 床 数 据 显 示 HDAC 抑 制 剂 Vorinostat 与 他 莫 昔 芬 (tamoxifen) 联 合 用 药 显 著 提 高 雌 激 素 受 体 阳 性 乳 腺 癌 病 人 的 响 应 此 外, 另 一 临 床 II 期 试 验 显 示 HDAC 抑 制 剂 Entinostat 与 芳 香 化 酶 抑 制 剂 依 西 美 坦 (Exemestane) 联 合 用 药, 能 显 著 提 高 ER+ 乳 腺 癌 病 人, 尤 其 是 内 分 泌 治 疗 耐 药 的 ER+ 乳 腺 癌 病 人 的 中 位 无 进 展 生 存 期 和 总 生 存 期, 而 该 联 合 用 药 策 略 被 FDA 授 予 突 破 性 疗 法 国 内 亿 腾 医 药 通 过 Syndax 制 药 获 得 有 关 Entinostat 的 授 权, 将 在 中 国 地 区 参 与 该 药 物 于 全 球 多 中 心 III 期 临 床 试 68

69 验, 并 获 得 Entinostat 在 中 国 及 其 他 多 个 国 家 和 地 区 的 商 品 化 的 权 利, 开 拓 国 内 一 级 新 药 研 发 之 路 深 圳 微 芯 开 发 上 市 的 HDAC 抑 制 剂 西 达 本 胺 针 对 新 适 应 症 乳 腺 癌 的 临 床 研 究, 已 完 成 I 期 临 床 试 验, 将 直 接 进 入 III 期 临 床 试 验 由 于 西 达 本 胺 与 Entinostat 都 是 作 用 于 第 I 大 类 HDAC 亚 型, 用 药 安 全 性 较 理 想, 有 希 望 获 得 突 破 表 2-11 乳 腺 癌 小 分 子 靶 向 药 主 要 类 别 及 研 究 现 状 药 物 类 别 研 究 现 状 代 表 药 物 选 择 性 雌 激 素 受 体 调 节 剂 (SERMs) 开 发 新 一 代 不 具 有 雌 激 素 原 活 性 的 选 择 性 雌 激 素 受 体 调 节 剂 他 莫 昔 芬 氟 维 司 群 来 曲 唑 芳 香 化 酶 抑 制 剂 (AIs) 高 特 异 性 的 药 物 为 主 要 研 发 方 向 阿 那 曲 唑 依 西 美 坦 有 多 个 靶 向 EGFR/HER2 的 酪 氨 酸 拉 帕 替 尼 表 皮 生 长 因 子 受 体 激 酶 小 分 子 抑 制 阿 法 替 尼 靶 向 药 物 剂 处 于 临 床 测 试 阶 段, 是 乳 腺 癌 药 那 替 尼 物 研 究 最 为 活 跃 的 领 域 PI3K/Akt/mTOR 信 号 PI3K 激 酶 的 小 分 子 抑 制 剂 应 用 于 通 路 靶 向 药 物 乳 腺 癌 治 疗 均 处 于 临 床 测 试 的 前 期 依 维 莫 司 FDA 已 于 2013 年 4 月 授 予 Palbociclib 细 胞 周 期 蛋 白 激 酶 palbociclib 突 破 性 疗 法, 用 于 LY 靶 向 药 物 ER+/HER2- 晚 期 乳 腺 癌 的 一 线 治 疗 LEE011 有 多 个 PARP 抑 制 剂 进 行 乳 腺 癌 治 Olaparib DNA 修 复 通 路 疗 的 临 床 试 验 veliparib 靶 向 药 物 我 国 百 济 神 州 的 BGB-290 正 在 进 行 1 期 临 床 实 验 保 罗 样 蛋 白 激 酶 PLK1 和 PLK4 小 有 丝 分 裂 蛋 白 激 酶 分 子 抑 制 剂 针 对 乳 腺 癌 的 研 究 大 多 靶 向 药 物 处 于 临 床 前 及 临 床 测 试 阶 段, 是 我 volasertib(bi-6727) 69

70 6- 磷 酸 果 糖 2- 激 酶 (PFKFB3) 靶 向 药 物 表 观 遗 传 调 控 靶 向 药 物 国 在 此 领 域 能 够 追 赶 及 突 破 的 可 能 方 向 大 多 数 PFKFB3 的 小 分 子 抑 制 剂 都 处 于 临 床 前 研 究 阶 段 联 合 用 药 策 略 被 FDA 授 予 突 破 性 疗 法 深 圳 微 芯 的 HDAC 抑 制 剂 西 达 本 胺 完 成 I 期 临 床 PFK-158 Entinostat 西 达 本 胺 ( 二 ) 乳 腺 癌 小 分 子 靶 向 药 研 发 趋 势 研 发 此 类 药 物 的 方 向, 是 要 解 决 抗 激 素 受 体 药 的 耐 药 性 如 乳 腺 癌 内 分 泌 治 疗 中 的 主 导 性 药 物 -- 选 择 性 雌 激 素 受 体 调 节 剂 (SERMs) 与 芳 香 化 酶 抑 制 剂 (AIs), 该 药 也 是 雌 激 素 (Estrogen) 孕 激 素 (Progesterone) 受 体 阳 性 乳 腺 癌 患 者 治 疗 的 首 选 药 物, 该 药 物 在 临 床 治 疗 过 程 中 产 生 的 新 的 和 获 得 性 耐 药 是 重 要 的 临 床 问 题 乳 腺 癌 内 分 泌 治 疗 耐 药 是 一 个 复 杂 的 问 题 初 步 探 索 的 耐 药 性 机 制 包 括 : 不 依 赖 配 体 的 雌 激 素 受 体 激 活, 雌 激 素 受 体 和 EGFR HER2 或 IGFR 的 相 互 作 用, 雌 激 素 受 体 辅 助 调 节 因 子 的 改 变 和 下 游 通 路 的 改 变, 例 如 MAPK/ERK 和 PI3K/Akt 通 路 的 持 续 活 化 等 目 前 诸 多 治 疗 药 物 主 要 针 对 雌 激 素 (ER) 孕 激 素 (PR) 受 体 阳 性 乳 腺 癌, 以 及 人 表 皮 生 长 因 子 受 体 2(HER-2) 高 表 达 乳 腺 癌 70

71 而 三 阴 性 乳 腺 癌 (TNBC), 尤 其 是 乳 腺 癌 易 感 基 因 BRCA 缺 陷 的 三 阴 性 乳 腺 癌 (TNBC), 是 以 不 表 达 雌 激 素 受 体 (ER) 孕 激 素 受 体 (PR) 及 人 表 皮 生 长 子 因 子 2 受 体 (HER2) 为 特 征 的 乳 腺 癌 由 于 三 阴 性 乳 腺 癌 (TNBC) 特 殊 的 生 物 学 活 性 能 力 极 差 的 预 后, 这 类 癌 症 对 内 分 泌 疗 法 或 曲 妥 珠 单 抗 治 疗 无 显 著 响 应 三 阴 性 乳 腺 癌 (TNBC) 治 疗 新 药 物 是 乳 腺 癌 药 物 研 发 的 热 点 之 一 已 有 研 究 结 果 揭 示 了 多 个 三 阴 性 乳 腺 癌 (TNBC) 可 能 的 生 物 学 靶 标, 如 UBASH3B 基 因 编 码 的 蛋 白 酪 氨 酸 磷 酸 酶 内 质 网 跨 膜 蛋 白 IRE1 的 底 物 XBP1 保 罗 样 蛋 白 激 酶 PLK1 和 PLK4 等 表 观 遗 传 学 在 小 分 子 靶 向 药 方 面 的 应 用 : 一 是 DNA 甲 基 化 调 控 ; 二 是 组 蛋 白 翻 译 后 修 饰 在 肿 瘤 发 生 发 展 和 治 疗 中 的 作 用 机 制, 以 及 相 应 的 小 分 子 药 物 研 究 ; 三 是 非 编 码 RNA 相 关 研 究 第 一 个 方 向 研 究 相 对 成 熟, 多 个 药 物 分 子 具 有 明 确 的 作 用 机 理, 国 际 大 制 药 公 司 拥 有 专 利 和 绝 对 的 研 发 优 势 ; 在 第 二 个 方 向, 研 究 基 础 最 好, 有 望 取 得 突 破 ; 第 三 个 研 究 方 向 属 于 新 兴 领 域, 不 确 定 性 较 大 小 分 子 靶 向 药 研 发 面 临 的 问 题, 一 是 耐 药 性 的 出 现, 二 是 肿 瘤 通 常 有 一 条 以 上 的 激 酶 通 路 被 激 活, 信 号 通 路 存 在 交 叉 和 代 偿 多 靶 点 小 分 子 药 有 可 能 解 决 这 些 问 题 现 处 于 临 床 研 究 的 小 分 子 靶 向 药 物 : 71

72 Afatinib Afatinib 是 一 种 双 靶 点 不 可 逆 的 EGFR/HER-2 酪 氨 酸 激 酶 抑 制 剂, 由 勃 林 格 殷 格 翰 公 司 研 发 Ⅱ 期 临 床 研 究 初 步 显 示 Afatinib 在 EGFR 突 变 的 非 小 细 胞 肺 癌 和 HER-2 阳 性 乳 腺 癌 中 的 临 床 活 性, 在 既 往 对 曲 妥 珠 单 抗 治 疗 无 效 的 HER-2 过 表 达 的 转 移 性 乳 腺 癌 患 者 中 亦 显 示 出 临 床 疗 效 而 同 类 产 品 拉 帕 替 尼 ( 江 苏 豪 森 药 业 自 主 研 制 的 原 创 抗 肿 瘤 新 药 ), 则 属 于 一 种 EGFR/HER-2 的 双 靶 点 可 逆 性 抑 制 剂, 目 前 作 为 HER-2 阳 性 转 移 性 乳 腺 癌 的 二 线 靶 向 治 疗 药 物 已 经 上 市, 联 合 化 疗 用 于 曲 妥 珠 单 抗 治 疗 后 进 展 的 HER-2 阳 性 转 移 性 乳 腺 癌 作 为 不 可 逆 的 EGFR/HER-2 酪 氨 酸 激 酶 抑 制 剂,Afatinib 可 能 在 克 服 曲 妥 珠 单 抗 耐 药 性 方 面 更 具 优 势 对 Afatinib, 目 前 正 在 开 展 国 际 多 中 心 III 期 临 床 研 究, 以 评 估 Afatinib 联 合 化 疗 在 曲 妥 珠 单 抗 治 疗 失 败 后 的 转 移 性 HER-2 过 表 达 乳 腺 癌 中 的 疗 效 依 维 莫 司 (Afinitor) 该 药 物 是 首 个 被 批 准 用 于 激 素 受 体 阳 性 乳 腺 癌 的 mtor 抑 制 剂, 由 诺 华 公 司 研 发 基 础 研 究 显 示,PI3K/Akt/mTOR 通 路 的 过 度 活 化 与 内 分 泌 耐 药 高 度 相 关 PI3K/Akt/mTOR 通 路 介 导 数 个 重 要 的 细 胞 过 程 如 细 胞 生 长 增 殖 和 生 存, 而 mtor 是 PI3K 通 路 中 的 一 种 信 号 传 导 激 酶, 是 诸 多 信 号 通 路 的 关 键 性 下 游 信 号 分 子, 涉 及 到 ER EGFR HER2 等 肿 瘤 关 键 信 号 通 路, 因 而 抑 制 mtor 活 性 可 能 为 减 少 或 逆 转 内 分 泌 治 疗 耐 药 开 拓 出 新 的 思 路 和 途 径 临 床 前 研 究 72

73 显 示,mTOR 抑 制 剂 可 能 恢 复 肿 瘤 细 胞 对 内 分 泌 治 疗 的 敏 感 性, 且 其 与 激 素 抑 制 剂 联 合 使 用 时 作 用 尤 为 明 显 2012 年 7 月, FDA 批 准 依 维 莫 司 (Afinitor) 适 应 证 扩 大 至 治 疗 激 素 受 体 阳 性 HER2 阴 性 晚 期 乳 腺 癌 绝 经 后 女 性 患 者 此 次 获 准 可 与 依 西 美 坦 联 合 用 于 来 曲 唑 或 阿 那 曲 唑 治 疗 后 复 发 或 出 现 疾 病 进 展 的 上 述 女 性 患 者 西 帕 替 尼 作 为 小 分 子 多 靶 点 酪 氨 酸 激 酶 抑 制 剂, 西 帕 替 尼 抑 制 表 皮 生 长 因 子 受 体 (ErbB1/EGFR) 和 人 表 皮 因 子 受 体 2(ErbB2/HER-2), 与 拉 帕 替 尼 类 似 临 床 前 药 效 研 究 发 现, 对 多 种 高 表 达 EGFR HER-2 的 人 肿 瘤 细 胞 系 及 人 肿 瘤 裸 小 鼠 移 植 模 型, 托 西 酸 西 帕 替 尼 有 明 显 疗 效 ; 而 临 床 前 毒 理 学 研 究 结 果 显 示, 与 拉 帕 替 尼 相 比, 它 的 肝 脏 毒 性 和 皮 肤 毒 性 更 小 耐 受 性 更 好 目 前 正 在 开 展 西 帕 替 尼 I 期 临 床 研 究, 主 要 研 究 该 药 在 晚 期 乳 腺 癌 治 疗 中 的 耐 受 性 和 药 代 动 力 学 特 征 艾 力 替 尼 上 海 艾 力 斯 医 药 科 技 有 限 公 司 研 制 的 甲 苯 磺 酸 艾 力 替 尼, 属 于 EGFR/ErbB2/ErbB4 三 重 酪 氨 酸 激 酶 不 可 逆 抑 制 剂 临 床 前 的 试 验 结 果 显 示, 该 药 有 很 强 的 抗 肿 瘤 活 性 作 用, 对 第 一 代 替 尼 耐 药 的 T790M 细 胞 生 长 具 有 抑 制 作 用 该 药 I 期 临 床 试 验 共 入 选 71 名 晚 期 恶 性 实 体 瘤 患 者 已 完 成 的 I 期 临 床 试 验 结 果 证 实, 连 续 口 服 甲 苯 磺 酸 艾 力 替 尼 片 73

74 剂 具 有 良 好 的 安 全 性 和 耐 受 性, 在 预 期 肿 瘤 人 群 中 观 察 到 疗 效 Palbociclib Palbociclib 是 一 种 口 服 靶 向 性 制 剂, 能 够 选 择 性 抑 制 细 胞 周 期 蛋 白 依 赖 性 激 酶 4 和 6(CDK4/6), 恢 复 细 胞 周 期 控 制, 阻 断 肿 瘤 细 胞 增 殖 已 完 成 的 Palbociclib 的 临 床 II 期 研 究, 在 绝 经 后 女 性 雌 激 素 受 体 阳 性 (ER+) 人 表 皮 生 长 因 子 受 体 2 阴 性 (HER2-) 局 部 晚 期 或 转 移 性 乳 腺 癌 患 者 中 开 展 研 究 表 明, 与 标 准 治 疗 药 物 来 曲 唑 (letrozole) 治 疗 组 相 比,Palbociclib+letrozole 联 合 用 药 组 的 疾 病 无 进 展 生 存 期 (PFS) 取 得 了 统 计 学 意 义 的 显 著 延 长 (20.2 个 月 vs10.2 个 月,p=0.0004) 联 合 用 药 组 平 均 总 生 存 期 为 37.5 个 月,letrozole 治 疗 组 为 33.3 个 月, 无 统 计 学 显 著 差 异, 后 续 将 开 展 完 整 的 OS 分 析 联 合 用 药 组 耐 受 性 和 安 全 性 良 好 2013 年 4 月, 美 国 FDA 授 予 palbociclib 治 疗 晚 期 或 转 移 性 ER+/HER2- 乳 腺 癌 的 突 破 性 疗 法 认 定 国 内 由 中 国 医 学 科 学 院 徐 兵 河 教 授 牵 头 的 Palbociclib 临 床 III 期 试 验, 将 有 20 多 家 医 疗 单 位 参 与 HDAC 抑 制 剂 研 究 显 示, 异 质 性 肿 瘤 组 织 中 对 常 规 化 疗 药 物 或 靶 向 药 物 不 敏 感 的 细 胞 或 耐 药 细 胞,HDAC 抑 制 剂 能 够 诱 导 其 凋 亡, 进 而 延 缓 肿 瘤 的 复 发, 逆 转 其 耐 药 性 乳 腺 癌 治 疗 的 耐 药 机 制 尚 不 十 分 清 楚, 但 HDAC 抑 制 剂 可 调 节 乳 腺 癌 细 胞 中 的 ER-α 和 芳 香 酶 的 表 达 抑 制 EGFR/Her-2 生 长 因 74

75 子 通 路 活 性 等, 从 而 提 高 内 分 泌 治 疗 的 敏 感 性 HDAC 抑 制 剂 与 内 分 泌 药 物 联 合 治 疗 既 往 内 分 泌 治 疗 进 展 的 晚 期 或 转 移 性 乳 腺 癌 的 II 期 临 床 试 验 显 示 出 比 内 分 泌 单 药 治 疗 更 多 的 临 床 获 益 这 提 示 HDAC 抑 制 剂 与 内 分 泌 药 物 联 合 治 疗 可 能 会 给 乳 腺 癌 患 者 带 来 更 多 的 潜 在 获 益 四 国 内 外 免 疫 细 胞 治 疗 现 状 及 发 展 趋 势 对 乳 腺 癌 早 诊 断 早 治 疗 至 关 重 要 在 我 国, 乳 腺 癌 患 者 中 能 够 早 诊 断 早 治 疗 的 只 有 20-30%, 余 者 即 大 部 分 发 现 患 病 时 已 经 错 过 了 最 佳 治 疗 时 期 近 年 来, 肿 瘤 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 取 得 革 命 性 突 破 常 规 肿 瘤 治 疗 方 法 -- 手 术 治 疗 放 射 治 疗 及 化 学 治 疗, 对 中 晚 期 肿 瘤 患 者 疗 效 有 限 ; 由 于 不 能 完 全 清 除 肿 瘤 细 胞, 因 此 复 发 率 转 移 率 居 高 不 下 免 疫 细 胞 治 疗 通 过 回 输 肿 瘤 特 异 性 的 免 疫 细 胞 对 肿 瘤 细 胞 进 行 靶 向 杀 灭, 清 除 残 留 肿 瘤 细 胞 目 前, 治 疗 癌 症 除 手 术 和 放 疗 等 局 部 治 疗 技 术 外, 还 可 以 进 行 全 身 性 治 疗 2010 年, 美 国 FDA 批 准 治 疗 前 列 腺 癌 的 DC 疫 苗 Provenge (sipuleucel-t) 上 市, 德 国 又 批 准 治 疗 脑 胶 质 瘤 的 DC 疫 苗 进 入 临 床 应 用 ;2010 年 后,CAR-T 技 术 成 为 了 全 球 最 受 瞩 目 的 肿 瘤 免 疫 技 术 2012 年 Science 杂 志 将 " 肿 瘤 免 疫 疗 法 " 视 为 最 值 得 关 注 的 六 大 科 学 领 域 之 一 ; 同 年 新 英 格 兰 医 学 在 肿 瘤 研 究 200 年 的 文 章 中 明 确 指 出, 肿 瘤 免 疫 治 疗 已 经 成 为 继 75

76 手 术 放 疗 化 疗 三 种 常 规 治 疗 方 法 之 外 的 第 四 种 治 疗 方 式 2013 年, Science 杂 志 再 次 将 " 肿 瘤 免 疫 疗 法 " 列 为 当 年 十 大 科 学 突 破 的 首 位 ( 一 ) 乳 腺 癌 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 现 状 1. 乳 腺 癌 相 关 肿 瘤 抗 原 的 识 别 在 恶 性 肿 瘤 患 者 体 内, 一 些 特 异 蛋 白 质, 在 正 常 细 胞 中 缺 乏 表 达 或 表 达 极 低, 在 恶 性 肿 瘤 细 胞 中 却 表 达 或 表 达 明 显, 此 类 蛋 白 质 称 为 肿 瘤 抗 原 (TA) 和 肿 瘤 相 关 抗 原 (TAA) 和 其 它 肿 瘤 相 比, 对 乳 腺 癌 相 关 肿 瘤 抗 原 研 究 得 比 较 透 彻 已 鉴 定 出 HER-2 BRCA1 BRCA2 等 肿 瘤 基 因 和 乳 腺 癌 发 生 发 展 密 切 相 关 2. 乳 腺 癌 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 (1) 非 靶 向 性 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 从 患 者 身 上 取 得 免 疫 细 胞, 经 体 外 扩 增 激 活 后, 回 输 到 患 者 体 内, 提 升 患 者 的 免 疫 功 能, 以 达 到 抗 肿 瘤 效 应, 也 称 为 继 承 性 免 疫 治 疗 如 过 继 性 细 胞 免 疫 治 疗 (ACI) 中 CIK NK NKT γδt 等 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 (2) 以 DC 为 媒 介 驱 动 的 靶 向 性 治 疗 技 术 树 突 状 细 胞 (DC), 是 人 体 内 功 能 最 为 强 大 的 专 职 抗 原 递 呈 细 胞, 是 机 体 特 异 性 免 疫 反 应 的 启 动 者 DC 治 疗 性 疫 苗, 是 目 前 研 究 最 为 广 泛 的 肿 瘤 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 该 技 术 从 病 人 体 内 提 取 出 DC 前 体 细 胞, 在 体 外 诱 76

77 导 分 化 成 DC 细 胞, 用 肿 瘤 抗 原 对 其 进 行 负 载 后 回 输 到 患 者 体 内, 通 过 DC 细 胞 肿 瘤 抗 原 信 息 递 呈, 诱 导 处 于 静 息 期 的 T 细 胞 克 隆 扩 增, 并 分 化 成 能 够 特 异 性 识 别 和 杀 伤 肿 瘤 细 胞 的 效 应 性 T 淋 巴 细 胞 (CTL) 由 于 目 标 明 确,CTL 对 正 常 细 胞 没 有 攻 击 作 用 体 外 扩 增 并 经 抗 原 负 载 的 DC 细 胞, 可 以 与 同 样 体 外 培 养 的 T 细 胞 前 体 细 胞 混 合, 经 一 周 左 右 时 间, 诱 导 培 养 出 CTL 细 胞, 直 接 过 继 回 输 体 内 当 恶 性 肿 瘤 患 者 免 疫 功 能 极 其 紊 乱 低 下 甚 至 缺 乏 时, 在 放 疗 化 疗 治 疗 期 间 或 治 疗 后 的 短 期 内, 由 于 无 法 通 过 主 动 免 疫 诱 导 出 足 量 有 效 的 CTL, 可 以 采 取 这 种 细 胞 治 疗 方 法, 使 患 者 重 新 恢 复 细 胞 免 疫 功 能, 短 时 间 内 发 挥 特 异 性 肿 瘤 防 治 功 效 (3) 双 特 异 性 抗 体 直 接 修 饰 免 疫 效 应 细 胞 的 治 疗 技 术 双 特 异 性 抗 体 (BiAbs), 是 含 有 2 种 特 异 性 抗 原 结 合 位 点 的 人 工 抗 体 它 能 在 靶 细 胞 和 免 疫 效 应 细 胞 之 间 架 起 桥 梁, 激 发 具 有 导 向 性 的 免 疫 反 应, 是 基 因 工 程 抗 体 的 一 种 大 多 数 研 究 者 采 用 直 接 输 注 BiAbs 的 方 法 进 行 治 疗 但 采 用 外 周 血 中 活 化 的 或 新 鲜 未 活 化 的 T 细 胞 进 行 体 外 BiAbs 加 载, 然 后 再 回 输 体 内 具 有 更 多 的 优 点 体 外 培 养 的 T 细 胞 加 载 BiAbs, 对 比 游 离 状 态 的 BiAbs 回 输, 使 用 的 BiAbs 药 物 剂 量 更 低, 副 作 用 更 少, 可 以 避 免 游 离 BiAbs 回 输 时 常 发 77

78 生 的 细 胞 因 子 风 暴 问 题 相 比 以 DC 为 媒 介 驱 动 的 靶 向 性 乳 腺 癌 治 疗 技 术, 这 种 BiAbs 直 接 修 饰 免 疫 效 应 细 胞 的 治 疗 技 术 直 接 赋 予 免 疫 效 应 细 胞 靶 向 性, 无 需 经 过 DC 细 胞 的 递 呈 作 用 传 递, 也 不 受 MHC 限 制 性 的 影 响 (4) 基 因 工 程 方 法 直 接 修 饰 免 疫 效 应 细 胞 的 治 疗 技 术 采 用 基 因 工 程 的 方 法 使 T 细 胞 表 达 TCR(T 细 胞 受 体 ) 或 者 表 达 CAR( 嵌 合 抗 原 受 体 ) 以 及 串 联 一 些 免 疫 激 活 信 号 分 子, 如 CD28,CD134,CD137,CD3ζ 等 TCR 需 要 MHC 匹 配 才 能 激 活 T 细 胞, 因 为 TCR 只 能 识 别 由 MHC 递 呈 的 短 肽 而 CAR 则 不 需 要 抗 原 与 CAR 直 接 结 合 就 能 够 激 活 串 联 表 达 的 免 疫 激 活 分 子 嵌 合 抗 原 受 体 (CAR) 是 单 链 抗 体 的 可 变 区 和 T 细 胞 信 号 分 子 的 融 合 蛋 白, 它 使 T 细 胞 可 以 通 过 非 MHC 限 制 性 的 方 式 识 别 特 异 性 抗 原, 发 挥 杀 伤 作 用 2010 年 后, 由 一 种 基 于 嵌 合 性 抗 原 受 体 转 化 的 T 淋 巴 细 胞 (CAR-T) 技 术, 使 用 B 细 胞 表 面 标 志 CD19 作 为 靶 标, 临 床 治 疗 急 性 和 慢 性 B 淋 巴 细 胞 白 血 病 取 得 了 惊 人 的 效 果, 客 观 响 应 率 高 达 86% 这 使 得 CAR-T 技 术 成 为 了 全 球 最 受 瞩 目 的 肿 瘤 免 疫 技 术 综 上, 免 疫 细 胞 治 疗 技 术, 正 由 非 靶 向 性 治 疗 技 术 向 靶 向 性 治 疗 技 术 的 过 渡 靶 向 性 细 胞 治 疗 技 术, 也 正 由 多 次 一 过 性 短 期 治 疗 技 术 向 有 限 次 数 的 长 期 细 胞 治 疗 技 术 过 渡 78

79 表 2-12 常 见 乳 腺 癌 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 技 术 发 展 现 状 与 趋 势 LAK 淋 巴 细 胞 因 子 诱 导 的 杀 伤 细 胞 临 床 治 疗 无 疗 效 CIK 细 胞 因 子 诱 导 的 杀 伤 性 细 胞 2000 年 之 后, 在 美 国 已 被 淘 汰 TIL 肿 瘤 侵 润 淋 巴 细 胞 细 胞 获 取 的 问 题 限 制 了 TIL 的 应 用 CTL 抗 原 特 异 性 的 细 胞 毒 性 T 淋 巴 细 胞 国 内 外 大 都 处 于 研 究 中, 有 少 许 应 用 CAR-T 嵌 合 抗 原 受 体 T 细 胞 国 外 研 究, 国 内 跟 随 3. 国 内 外 免 疫 细 胞 治 疗 产 业 化 现 状 近 年 来, 针 对 恶 性 肿 瘤 的 免 疫 和 细 胞 治 疗 的 研 究 应 用 进 展 迅 速, 其 有 效 性 和 安 全 性 获 得 充 分 肯 定 在 我 国, 非 靶 向 性 肿 瘤 细 胞 免 疫 治 疗 日 益 普 及, 如 细 胞 因 子 诱 导 的 杀 伤 细 胞 (CIK) 技 术 已 广 泛 应 用 于 全 国 各 医 院 但 在 美 国 等 发 达 国 家,CIK 技 术 已 不 再 应 用 于 临 床 靶 向 性 免 疫 治 疗 技 术 ( 如 DC 治 疗 ) 较 非 靶 向 性 细 胞 免 疫 治 疗 技 术 虽 有 明 显 的 优 势 但 在 临 床 上, 该 技 术 治 疗 效 果 依 然 不 佳 主 要 原 因 是 肿 瘤 患 者 体 内 免 疫 功 能 紊 乱, 甚 至 处 于 抑 制 状 态,DC 刺 激 淋 巴 细 胞 的 细 胞 因 子 表 达 低 下 或 缺 乏, 难 以 在 体 内 刺 激 出 有 效 的 特 异 性 T 淋 巴 细 胞 应 答 为 了 克 服 DC 细 胞 直 接 回 输 患 者 体 内 所 存 在 的 缺 陷, 解 决 方 案 之 一 是 将 DC 细 胞 脱 离 患 者 体 内 免 疫 抑 制 的 环 境, 在 体 外 与 患 者 自 身 的 T 细 胞 充 分 混 合, 培 养 刺 激 出 特 异 性 CTL 再 回 输 给 患 者 国 内 已 有 医 疗 机 构 将 经 过 多 种 肿 瘤 相 关 抗 原 79

80 加 载 的 DC 细 胞 与 T 细 胞 混 合 培 养, 在 患 者 体 外 刺 激 出 针 对 多 个 肿 瘤 靶 点 的 多 克 隆 的 CTL 后 回 输 给 患 者 国 外, 最 引 人 注 目 的 就 是 BiAbs 技 术 和 以 CAR-T 为 主 的 基 因 修 饰 技 术 而 且 在 追 求 免 疫 细 胞 治 疗 有 效 性 的 同 时, 更 注 重 疗 效 持 久 性 的 维 持 和 改 进, 更 注 重 有 效 控 制 毒 副 作 用 国 内 的 免 疫 细 胞 治 疗 产 业, 囿 于 政 策 法 规 支 持 乏 力 临 床 试 验 基 地 局 限 对 免 疫 及 细 胞 治 疗 新 方 法 理 解 不 到 位 等 因 素 影 响, 总 体 上 看, 前 进 速 度 还 有 待 大 幅 度 提 高, 应 用 领 域 也 有 待 大 幅 度 拓 展 ( 二 ) 肿 瘤 免 疫 细 胞 治 疗 发 展 趋 势 主 要 发 展 趋 势 : 1. 开 发 病 毒 载 体 向 免 疫 细 胞 传 递 靶 向 性 的 新 技 术 目 前, 病 毒 载 体 应 用 于 细 胞 免 疫 技 术 治 疗 肿 瘤 疾 病 已 进 入 了 临 床 应 用 阶 段 其 特 点 是 转 染 效 率 高, 在 宿 主 细 胞 可 以 稳 定 表 达 以 及 其 表 达 的 抗 原 更 接 近 于 自 然, 可 规 模 化 标 准 化 制 备 或 生 产, 便 于 临 床 使 用 其 中 最 安 全 的 病 毒 载 体 是 腺 相 关 病 毒 2. 开 发 多 种 肿 瘤 抗 原 联 合 负 载 的 新 技 术 以 往 诱 导 体 内 产 生 肿 瘤 免 疫 的 技 术, 一 般 都 采 用 单 一 抗 原 负 载 DC, 其 效 果 并 不 理 想 新 的 趋 势 是 向 多 种 抗 原 联 合 加 载 发 展 多 种 抗 原 的 联 合 应 用, 可 以 诱 导 体 内 产 生 针 对 肿 瘤 细 胞 的 多 个 克 隆 的 特 异 性 80

81 CTL, 不 仅 能 够 增 强 对 肿 瘤 细 胞 的 杀 伤 力 度, 还 可 以 降 低 肿 瘤 细 胞 免 疫 逃 避 的 可 能 目 前, 一 个 采 用 了 10 种 肿 瘤 相 关 抗 原 治 疗 肾 癌 的 多 肽 疫 苗 (Vaccine IMA901), 已 经 进 入 III 期 临 床 试 验 此 外, DC 负 载 的 方 式 可 选 用 肿 瘤 裂 解 物 DNA/mRNA 遗 传 物 质 蛋 白 提 取 物 抗 原 表 位 肽 等 多 种 形 式, 负 载 的 手 段 也 可 采 取 脂 质 体 电 脉 冲 病 毒 载 体 直 接 冲 击 等 多 种 方 法, 佐 剂 也 常 常 用 来 增 强 负 载 效 率 3. 开 发 抗 体 修 饰 免 疫 细 胞 的 新 技 术 通 过 体 外 培 养 活 化 足 够 数 量 的 免 疫 细 胞, 体 外 预 先 以 BiAbs 孵 育 免 疫 细 胞 培 养 物, 使 抗 体 的 一 端 能 先 行 识 别 和 结 合 效 应 细 胞 表 面 的 抗 原 ( 如 CD3 或 CD28), 再 回 输 体 内 治 疗, 靶 向 性 的 免 疫 细 胞 将 识 别 和 结 合 肿 瘤 细 胞 上 的 某 个 靶 向 抗 原 ( 如 HER-2 EpCAM 等 ), 发 挥 特 异 性 肿 瘤 杀 伤 功 效 在 BiAbs 新 技 术 的 不 断 改 进 中, 采 用 保 留 BiAbs 中 一 个 Fc 段 的 三 功 能 双 特 异 性 抗 体 ( 增 加 了 FcR 介 导 的 ADCC 作 用 ) 将 可 能 是 未 来 的 发 展 方 向, 这 种 以 细 胞 工 程 方 法 获 得 的 三 功 能 抗 体 有 望 进 一 步 增 强 肿 瘤 的 杀 伤 效 果 此 外, 免 疫 细 胞 和 其 相 应 抗 体 部 分 的 选 择, 将 不 再 简 单 地 局 限 于 T 细 胞 一 种 细 胞 (CD3+), NK 细 胞 (CD16+) Mφ( 巨 噬 / 单 核 ) 细 胞 (CD56+) NKT 细 胞 等 都 将 被 进 一 步 比 较 探 讨 作 为 免 疫 效 应 细 胞 的 有 效 性 和 优 越 性 肿 瘤 细 胞 表 面 识 别 和 结 合 的 抗 原 选 择 也 更 加 多 样 化, 81

82 针 对 不 同 类 型 的 乳 腺 癌 类 型, 选 择 的 肿 瘤 抗 体 也 会 相 应 地 进 行 改 变 4. 开 发 基 因 修 饰 免 疫 细 胞 的 新 技 术 早 期 T 细 胞 免 疫 治 疗 回 输 大 量 的 效 应 性 T 细 胞, 由 于 本 质 上 的 非 复 制 性, 这 些 细 胞 不 能 在 患 者 体 内 扩 增, 并 获 得 足 以 根 除 进 展 性 肿 瘤 的 效 靶 比 基 因 修 饰 的 工 程 化 T 细 胞 试 验 表 明 : 回 输 的 T 细 胞 大 部 分 能 够 在 宿 主 体 内 扩 增, 而 不 是 只 在 体 外 细 胞 培 养 基 中 扩 增, 因 而 输 注 少 量 细 胞 就 可 能 起 足 够 作 用 以 CAR 遗 传 性 修 饰 T 细 胞, 对 于 细 胞 表 面 分 子 来 说 是 特 异 的, 能 够 克 服 MHC 限 制 性 的 TCR 识 别, 避 免 肿 瘤 通 过 抗 原 递 呈 或 人 类 白 细 胞 抗 原 表 达 缺 陷 引 起 肿 瘤 逃 逸 ; 另 外, 赋 予 受 体 T 细 胞 新 的 抗 原 反 应 性, 通 过 插 入 基 因 可 以 改 善 转 导 的 T 细 胞 效 能 这 类 基 因, 包 括 编 码 共 刺 激 因 子, 防 止 凋 亡 重 塑 肿 瘤 微 环 境 和 诱 导 稳 态 性 增 殖 的 基 因, 以 及 编 码 化 学 因 子 受 体 能 够 促 进 T 细 胞 归 巢 的 CARs 等 CARs-T 技 术 按 发 展 可 分 为 4 代 第 一 代 CARs 编 码 抗 体 基 础 的 外 部 受 体 结 构 和 编 码 信 号 转 导 模 块, 包 括 免 疫 受 体 酪 氨 酸 基 础 的 活 化 基 序, 例 如 TCRζ 或 FcRγ 等 的 胞 内 区 ; 第 二 代 CARs 还 包 括 一 个 共 刺 激 信 号 区, 例 如 CD28 或 4-1BB; 第 三 代 CARs 包 括 3 个 或 更 多 的 胞 浆 区 最 新 的 第 四 代 CARs 82

83 的 目 标 是 能 够 合 理 地 操 控 其 开 关 功 能, 避 免 治 疗 过 程 中 强 烈 的 副 作 用 预 计 未 来 10 年, 免 疫 治 疗 技 术 在 转 移 性 乳 腺 癌 的 治 疗 中 将 发 挥 更 大 作 用, 在 乳 腺 癌 的 复 发 预 防 中 也 将 发 挥 更 重 要 的 作 用 五 国 内 外 新 型 制 剂 技 术 现 状 与 发 展 趋 势 临 床 上, 抗 肿 瘤 制 剂 大 多 是 注 射 剂 粉 剂 和 片 剂 为 了 延 长 抗 肿 瘤 制 剂 的 循 环 时 间, 提 高 制 剂 的 稳 定 性 药 效 及 靶 向 性 减 少 制 剂 的 毒 副 作 用, 有 必 要 开 发 新 型 制 剂 及 针 对 肿 瘤 的 靶 向 试 剂, 如 新 型 脂 质 体 纳 米 微 球 乳 剂 等 ( 见 表 2-13) 表 2-13 乳 腺 癌 新 型 制 剂 现 状 及 趋 势 乳 腺 癌 制 剂 现 状 发 展 趋 势 少 数 纳 米 靶 向 药 上 市 解 决 纳 米 药 物 成 药 性 及 毒 性 问 题 大 部 分 静 脉 注 射, 少 量 口 服 难 溶 性 药 物 的 二 次 开 发 ( 一 ) 乳 腺 癌 新 型 制 剂 研 发 状 况 乳 腺 癌 治 疗 药 物 剂 型 以 静 脉 注 射 给 药 方 式 为 主 如 紫 杉 醇 注 射 剂 多 西 他 塞 注 射 剂 环 磷 酰 胺 注 射 剂 吡 柔 比 星 注 射 剂 等 一 般 以 最 大 耐 受 剂 量 静 脉 给 药, 疗 效 快, 副 作 用 也 大 乳 腺 癌 治 疗 口 服 制 剂 也 是 不 可 缺 少 的 给 药 方 式 如 环 磷 酰 胺 片, 卡 培 他 滨 片 阿 那 曲 唑 片 枸 橼 酸 他 莫 昔 芬 片 替 吉 奥 胶 囊 等 口 服 制 剂 一 般 疗 效 慢, 毒 副 作 用 相 对 较 小 83

84 以 药 物 传 递 系 统 (DDS) 新 技 术 开 发 的 新 型 制 剂 有 紫 杉 醇 白 蛋 白 ( 纳 米 ) 注 射 剂 紫 杉 醇 胶 束 注 射 剂 盐 酸 阿 霉 素 脂 质 体 注 射 剂 醋 酸 亮 丙 瑞 林 缓 释 ( 微 球 皮 下 植 入 ) 注 射 剂 和 戈 舍 瑞 林 缓 释 ( 微 球 皮 下 植 入 ) 注 射 剂 分 别 于 2005 年 和 2014 年 作 为 乳 腺 癌 的 治 疗 药 获 得 批 准 抗 癌 化 疗 药 物 一 般 毒 性 大 且 难 溶, 治 疗 的 安 全 性 有 效 性 和 顺 应 性 很 有 限 ; 杀 死 癌 细 胞 的 同 时 杀 死 正 常 细 胞, 使 免 疫 功 能 下 降 因 此 减 毒 增 效 的 靶 向 制 剂 备 受 关 注 乳 腺 癌 一 线 治 疗 药 物 紫 杉 醇 抗 癌 活 性 很 强 但 该 药 在 人 体 内 极 难 溶, 使 用 乙 醇 和 聚 氧 乙 烯 蓖 麻 油 (1:1) 增 溶, 可 能 带 来 较 强 的 过 敏 反 应 神 经 毒 性 心 脏 毒 性 肾 脏 毒 性 等 为 了 增 效 减 毒, 美 国 于 2005 年 批 准 紫 杉 醇 白 蛋 白 ( 纳 米 ) 注 射 剂 上 市 ; 但 使 用 中 发 现 有 些 病 人 会 出 现 免 疫 反 应 或 多 药 耐 药 性 紫 杉 醇 胶 束 注 射 剂 于 2007 年 在 韩 国 上 市 ; 临 床 实 验 表 明 紫 杉 醇 胶 束 注 射 剂 毒 副 作 用 小, 具 有 一 定 靶 向 性 耐 受 剂 量 高 等 优 点 在 抗 癌 靶 向 制 剂 开 发 中, 纳 米 载 药 系 统 成 为 世 人 注 目 的 研 究 领 域 根 据 载 体 材 料 不 同 可 制 备 脂 质 体 固 体 脂 质 纳 米 粒, 纳 米 乳 胶 束 微 囊 等, 用 不 同 材 料 修 饰 后, 可 使 其 具 有 长 循 环 性 靶 向 性 缓 释 性 生 物 粘 附 性 通 透 性 物 理 响 应 性 等, 可 以 克 服 现 有 药 物 制 剂 体 内 代 谢 快 作 用 时 间 短 稳 定 性 差 不 良 反 应 大 等 缺 点 84

85 最 早 应 用 于 药 物 载 体 是 脂 质 体 自 1965 英 国 Bangham 发 现 脂 质 体 后,1971 年 Gregoriadis 和 Rymen 首 次 报 道 将 脂 质 体 作 为 药 物 载 体 上 世 纪 70 年 代 末, 我 国 药 剂 学 教 授 顾 学 裘 成 功 制 备 了 5- 氟 尿 嘧 啶 多 相 脂 质 体, 并 应 用 于 临 床 1995 年, 首 个 长 循 环 脂 质 体 抗 癌 药 聚 乙 二 醇 化 的 盐 酸 阿 霉 素 脂 质 体 (Doxil/Caelyx) 问 世 据 欧 洲 科 技 瞭 望 统 计, 到 2006 年 已 有 24 种 基 于 脂 质 体 聚 合 物 白 蛋 白 和 纳 米 晶 体 4 大 类 纳 米 制 剂 被 批 准 应 用 于 临 床, 实 现 销 售 总 额 超 过 54 亿 美 元 如 美 国 先 灵 葆 雅 公 司 生 产 的 Doxil/Caelyx( 盐 酸 阿 霉 素 脂 质 体 ) 可 用 于 治 疗 乳 腺 癌 卵 巢 癌 和 卡 博 西 肉 瘤 ; 美 国 阿 斯 利 康 公 司 制 造 的 Abraxane ( 紫 杉 醇 白 蛋 白 纳 米 粒 ) 用 于 治 疗 晚 期 乳 腺 癌 2009 年 上 海 复 旦 张 江 生 物 医 药 股 份 有 限 公 司 自 主 创 新 的 中 国 首 个 PEG 多 柔 比 星 ( 盐 酸 阿 霉 素 ) 脂 质 体 ( 里 葆 多 ) 上 市 2012 年 3 月, 石 药 集 团 自 主 开 发 的 抗 肿 瘤 药 物 盐 酸 多 柔 比 星 ( 盐 酸 阿 霉 素 ) 脂 质 体 注 射 液 ( 多 美 素 ) 上 市 ( 二 ) 乳 腺 癌 新 型 制 剂 发 展 趋 势 1. 纳 米 制 剂 为 了 抢 占 纳 米 医 学 与 纳 米 生 物 技 术 的 制 高 点, 各 国 政 府 纷 纷 斥 巨 资 推 进 纳 米 医 学 的 研 究 和 开 发 85

86 2004 年, 美 国 宣 布 启 动 肿 瘤 纳 米 技 术, 成 立 了 肿 瘤 纳 米 技 术 联 合 会, 美 国 国 家 卫 生 研 究 院 (NIH) 出 资 在 美 国 建 立 了 8 个 纳 米 中 心, 专 门 从 事 纳 米 医 学 研 究 在 我 国, 由 科 技 部 等 五 部 委 联 合 制 定 了 国 家 纳 米 科 技 发 展 纲 要 ( ) 国 家 十 五 863 计 划 生 物 工 程 技 术 下 开 设 了 的 纳 米 生 物 技 术 专 题, 国 家 自 然 科 学 基 金 委 员 会 安 排 了 纳 米 面 上 项 目 和 重 大 项 目 等 纳 米 药 物 的 主 动 靶 向 性 研 究 虽 然 已 取 得 一 定 成 绩, 但 成 药 性 研 究 还 未 取 得 足 够 成 效, 纳 米 药 物 的 毒 性 研 究 也 不 够 充 分 2. 口 服 药 物 二 次 开 发 针 对 采 用 大 剂 量 杀 死 癌 细 胞 的 疗 法, 芬 兰 科 学 家 提 出, 可 以 给 以 小 剂 量 多 次 给 药 的 方 式, 抑 制 癌 细 胞 的 生 长, 直 到 杀 灭 为 止 根 据 这 个 理 念, 可 以 二 次 开 发 抗 肿 瘤 药 物 的 口 服 制 剂 以 替 代 抗 肿 瘤 针 剂, 减 少 药 物 对 病 人 的 毒 性 作 用 这 对 术 后 患 者 的 保 护 性 治 疗 尤 其 有 意 义 如 紫 杉 醇 口 服 制 剂 等 针 剂 型 抗 癌 药 物 静 脉 注 射 到 人 体 后, 起 初 的 血 药 浓 度 很 高, 能 致 人 中 毒, 经 快 速 排 泄 代 谢, 药 物 浓 度 处 于 治 疗 床 作 用 的 时 间 较 短 而 口 服 型 抗 癌 药 物 在 胃 肠 道 内 边 释 放 边 被 吸 收, 血 药 浓 度 很 难 达 到 针 剂 型 那 么 高 的 初 始 浓 度 ; 如 果 口 服 剂 型 如 果 设 计 的 巧 妙, 能 够 使 血 药 浓 度 在 治 疗 床 范 围 内 保 持 较 长 时 间 86

87 3. 成 药 性 研 究 成 药 性 研 究 分 化 学 成 药 性 研 究 和 生 物 成 药 性 研 究 化 学 成 药 性 是 对 新 化 合 物 的 理 化 ( 或 称 物 化 ) 性 质 进 行 快 速 的 普 查, 以 筛 除 具 有 明 显 理 化 缺 陷 的 化 合 物 生 物 成 药 性 研 究 是 对 新 化 合 物 的 药 代 和 毒 理 进 行 研 究, 以 筛 除 药 代 和 毒 理 性 质 较 差 的 化 合 物 成 药 性 研 究 是 新 药 研 发 中 的 一 个 必 要 环 节 发 现 和 确 定 高 质 量 先 导 物 是 新 药 研 发 的 关 键, 因 为 先 导 物 的 优 劣 和 优 化 准 则 决 定 了 候 选 药 物 的 质 量 高 低 在 跨 国 制 药 公 司, 只 有 通 过 成 药 性 研 究 的 化 合 物 才 能 定 为 候 选 药 物, 进 入 开 发 阶 段 国 内 新 药 开 发 进 行 成 药 性 研 究 的 还 不 多, 即 使 有 一 些, 也 仅 进 行 生 物 成 药 性 研 究, 对 化 学 成 药 性 研 究 的 极 少 我 国 新 药 研 发 的 主 要 是 me-too 或 me-better 类 药, 应 该 更 注 重 成 药 性 研 究 4. 难 溶 药 制 剂 靶 向 药 物 大 都 是 疏 水 性 的, 即 在 水 中 难 溶 目 前 国 际 上 约 75% 的 候 选 药 物 都 是 难 溶 这 类 难 溶 药 物 在 人 体 内 是 很 难 与 靶 点 结 合, 或 穿 过 细 胞 膜 进 入 细 胞 内 一 方 面 在 成 药 性 研 究 时, 要 尽 量 优 化 候 选 药 物 的 溶 解 度 ; 另 一 方 面, 也 可 以 通 过 制 剂 技 术 来 解 决 难 溶 性 问 题, 即 通 过 制 剂 技 术 以 提 高 药 物 的 表 观 溶 解 度 87

88 难 溶 药 制 剂 技 术 相 比 于 常 规 的 制 剂 技 术 有 相 当 的 挑 战 性, 目 前 国 内 此 类 技 术 的 成 熟 度 较 低, 应 用 还 很 有 限 据 了 解, 目 前 多 个 国 内 自 主 开 发 的 新 药 都 有 饭 后 服 药 的 生 物 利 用 度 明 显 高 于 空 腹 服 药 时 的 生 物 利 用 度 这 说 明 这 些 产 品 的 制 剂 开 发 还 有 优 化 的 空 间 5. 缓 释 制 剂 对 于 那 些 代 谢 快 的 药 物, 可 以 通 过 缓 释 制 剂 技 术, 延 长 药 物 的 吸 收, 以 提 高 病 人 服 药 的 依 从 性 缓 释 制 剂 技 术 相 对 比 较 成 熟, 然 而 国 内 的 新 药 研 发 公 司 往 往 忽 视 这 些 制 剂 技 术 的 应 用 如 国 内 第 一 个 上 市 的 具 有 自 主 知 识 产 权 的 替 尼 类 药 埃 克 替 尼 ( 浙 江 贝 达 所 开 发 ) 需 要 一 天 服 用 三 次, 而 国 外 类 似 的 替 尼 类 产 品 都 是 一 天 服 用 一 次 上 述 这 些 案 例 说 明 国 内 在 新 药 开 发 中, 比 较 重 视 新 结 构 候 选 药 物 的 发 现, 而 对 制 剂 技 术 的 应 用 往 往 重 视 不 够, 对 这 些 产 品 未 来 走 向 国 际 化 将 会 有 困 难 88

89 第 三 章 深 圳 乳 腺 癌 技 术 研 发 状 况 我 市 乳 腺 癌 技 术 研 发 存 在 的 主 要 问 题 : 一 人 才 缺 乏 我 市 缺 乏 能 够 将 乳 腺 癌 的 机 理 研 究 靶 点 发 现 产 品 开 发 临 床 转 化 全 链 条 贯 穿 起 来 的 领 军 人 才 二 缺 乏 集 聚 效 应 研 发 乳 腺 癌 药 物 的 单 位 少, 难 以 形 成 完 整 的 产 业 链 条 及 产 业 规 模 三 产 业 链 脱 节 严 重 技 术 创 新 有 活 力 的 院 校 和 科 研 院 所 与 新 技 术 需 求 方 如 企 业 医 院 等 产 学 研 用 之 间 不 能 实 现 有 效 结 合 第 一 节 深 圳 乳 腺 癌 早 期 诊 断 研 发 状 况 一 深 圳 早 期 诊 断 发 展 对 比 分 析 表 3-1 深 圳 早 期 诊 断 研 究 同 国 内 外 相 应 研 究 对 比 分 析 国 内 外 发 展 深 圳 发 展 水 平 深 圳 代 表 单 位 情 况 产 业 基 础 国 际 乳 腺 癌 早 筛 早 检 实 现 产 业 化 在 我 国 分 子 诊 断 领 域 领 先, 但 乳 腺 癌 早 期 诊 断 尚 未 实 现 产 业 化 科 研 院 所 : 清 华 大 学 研 究 生 院 医 院 : 深 圳 市 第 二 人 民 医 院 企 业 : 华 大 基 因 另 外 深 圳 亚 能 生 物 奥 萨 医 药 疾 控 中 心 等 在 分 子 诊 断 领 域 已 有 一 定 基 础 华 大 基 因 高 通 量 测 序 平 台 及 核 心 技 术 及 平 台 基 于 多 组 学 乳 腺 癌 分 子 标 志 物 筛 查 及 分 子 分 型 ; 乳 腺 癌 无 创 监 测 相 关 技 术 处 于 国 际 领 先 水 平, 但 在 乳 腺 癌 筛 查 应 用 方 面 还 没 开 展 CellSearch 合 作 平 台 深 圳 华 因 康 高 通 量 测 序 平 台 清 华 大 学 研 究 生 院 微 流 控 芯 片 技 术 及 基 于 适 配 体 特 异 探 针 的 乳 腺 癌 分 子 诊 断 技 术 深 圳 市 第 二 人 民 医 院 乳 腺 疾 病 诊 疗 中 心 89

90 华 大 基 因 开 展 了 乳 腺 癌 基 因 检 测 筛 查 研 究, 已 初 步 揭 示 基 因 改 变 对 乳 腺 癌 早 期 诊 断 及 预 后 有 一 定 的 意 义 在 乳 腺 癌 无 创 病 情 监 控 及 预 后 方 面, 国 内 已 有 解 放 军 307 医 院 复 旦 大 学 附 属 肿 瘤 医 院 等 多 家 医 院 安 装 了 CellSearch 平 台, 进 行 循 环 肿 瘤 细 胞 分 析 检 测 我 市 还 未 有 医 疗 机 构 开 展 此 类 检 测 及 研 究 二 深 圳 乳 腺 癌 早 期 诊 断 研 发 面 临 的 挑 战 ( 一 ) 技 术 方 面 的 挑 战 多 基 因 分 析 技 术, 依 然 存 在 待 解 决 的 技 术 障 碍 比 如 对 70 基 因 分 析 技 术 的 研 究 结 果 依 然 存 在 分 歧 另 外,21 基 因 RS 技 术 的 中 一 个 悬 而 未 决 的 问 题 是 判 断 需 要 接 受 化 疗 的 RS 评 分 的 标 准 问 题 再 有, 这 些 分 析 技 术 仅 从 RNA 单 一 层 面 进 行 评 估, 尽 管 已 有 研 究 表 明 在 DNA 层 面 也 存 在 可 以 用 于 预 后 的 分 子 标 记 物 循 环 肿 瘤 细 胞 (CTC) 技 术, 检 测 灵 敏 度 仍 是 挑 战 CTC 技 术 的 难 点 是 血 液 中 的 CTC 极 其 微 量 大 约 每 10 亿 个 正 常 血 细 胞 中 才 会 发 现 1 个 CTC, 要 想 有 效 地 收 集 这 些 细 胞 需 要 极 其 敏 感 的 检 测 手 段 另 外, 作 为 从 原 发 灶 中 脱 落 的 肿 瘤 细 胞,CTC 的 基 因 组 信 息 反 映 了 实 体 瘤 的 遗 传 信 息 的 改 变,CTC 的 分 子 标 记 对 预 后 判 断 疗 效 评 价 有 重 要 作 用 因 而 需 要 搭 建 CTC 全 基 因 组 扩 增 技 术 平 台 90

91 ( 二 ) 市 场 方 面 的 挑 战 作 为 新 兴 的 细 分 领 域, 我 国 分 子 诊 断 行 业 在 相 关 审 批 政 策 检 验 标 准 方 面 还 不 够 完 善, 而 在 分 子 诊 断 新 产 品 或 新 技 术 的 开 发 过 程 中, 国 内 企 业 仍 需 承 担 一 定 的 政 策 风 险 而 医 疗 保 险 和 报 销 障 碍 知 识 产 权 的 保 护 力 度 不 足 全 球 对 分 子 诊 断 审 查 批 准 与 监 管 滞 后 等 问 题, 也 给 分 子 诊 断 的 发 展 套 上 了 一 副 枷 锁 第 二 节 深 圳 分 子 机 制 及 新 药 靶 标 研 发 状 况 一 深 圳 乳 腺 癌 基 础 研 究 情 况 作 为 一 个 新 兴 城 市, 深 圳 缺 少 专 门 从 事 乳 腺 癌 研 究 的 科 研 机 构 和 研 究 平 台, 系 统 的 成 规 模 的 研 究 成 果 并 不 显 著 近 年 来, 市 政 府 一 方 面 十 分 重 视 人 才 引 进, 另 一 方 面 正 在 逐 步 加 大 对 科 研 的 扶 持 力 度 表 3-2 深 圳 市 乳 腺 癌 基 础 研 究 现 状 研 究 机 构 及 团 队 中 丹 乳 腺 癌 研 究 中 心 深 圳 大 学 肿 瘤 研 究 中 心 深 圳 市 基 因 与 抗 体 治 疗 重 点 实 验 室 研 究 方 向 以 新 一 代 测 序 技 术 为 基 础 的 全 基 因 组 策 略, 研 究 乳 腺 癌 发 病 机 制 肿 瘤 干 细 胞 研 究 乳 腺 癌 的 发 病 机 制 和 治 疗 等 方 面 进 行 基 础 和 应 用 研 究 乳 腺 癌 转 移 调 控 新 的 信 号 通 路 和 分 子 机 制, 通 过 共 转 录 因 子 YAP 调 节 癌 基 因 RHAMM 的 转 录 来 控 制 乳 腺 癌 细 胞 的 迁 移 和 侵 袭 91

92 南 方 科 技 大 学 生 物 系 朱 宝 亭 团 队 北 京 大 学 深 圳 研 究 生 院 化 学 生 物 学 与 生 物 技 术 学 院 张 慧 教 授 团 队 关 于 甾 体 激 素 及 其 内 源 性 衍 生 物 在 乳 腺 癌 中 的 作 用 及 其 作 用 机 理, 尤 其 是 这 些 内 源 性 化 合 物 在 乳 腺 癌 预 防 和 治 疗 中 的 作 用 开 发 小 分 子 化 合 物 靶 向 组 蛋 白 去 甲 基 化 酶 来 抑 制 乳 腺 癌 肿 瘤 干 细 胞 中 丹 乳 腺 癌 研 究 中 心 该 中 心 由 丹 麦 乳 腺 癌 协 作 组 与 华 大 基 因 研 究 院 合 作 成 立 借 助 丹 麦 方 面 在 乳 腺 癌 研 究 方 面 的 经 验 和 华 大 基 因 在 大 规 模 基 因 组 转 录 组 测 序 方 面 的 优 势, 该 中 心 将 深 入 研 究 乳 腺 癌 发 病 机 制, 鉴 定 开 发 并 临 床 验 证 新 的 早 期 诊 断 生 物 标 记, 改 进 乳 腺 癌 的 预 测 预 防 和 治 疗 方 法 等 深 圳 大 学 肿 瘤 研 究 中 心 深 圳 大 学 肿 瘤 研 究 中 心 于 2013 年 成 立, 美 国 科 学 院 院 士 DennisA.Carson 教 授 担 任 中 心 主 任, 并 筹 建 肿 瘤 干 细 胞 研 究 团 队 中 心 将 对 乳 腺 癌 的 发 病 机 制 和 治 疗 等 进 行 基 础 研 究 和 应 用 开 发 中 心 吕 德 生 教 授 团 队 主 要 研 究 雌 激 素 相 关 受 体 在 乳 腺 癌 致 病 中 的 作 用, 并 将 进 一 步 研 发 小 分 子 化 合 物 抑 制 Wnt 信 号 通 路, 靶 向 攻 击 乳 腺 癌 肿 瘤 干 细 胞 深 圳 市 基 因 与 抗 体 治 疗 重 点 实 验 室 深 圳 市 基 因 与 抗 体 治 疗 重 点 实 验 室, 隶 属 于 清 华 大 学 深 圳 研 究 生 院, 黄 来 强 教 授 任 主 任 黄 来 强 教 授 领 导 的 团 队 致 力 于 乳 腺 癌 发 病 机 制 靶 点 发 现 及 基 因 与 抗 体 治 疗 等 方 面 的 92

93 研 究 最 近 该 团 队 发 现, 甲 羟 戊 酸 代 谢 途 径 与 Hippo 癌 信 号 通 路 交 互 作 用, 通 过 共 转 录 因 子 YAP 调 节 癌 基 因 RHAMM 的 转 录 来 控 制 乳 腺 癌 细 胞 的 迁 移 和 侵 袭, 揭 示 了 乳 腺 癌 转 移 调 控 新 的 信 号 通 路 和 分 子 机 制, 为 乳 腺 癌 的 治 疗 提 供 了 新 靶 点 南 方 科 技 大 学 生 物 系 朱 宝 亭 团 队 朱 教 授 在 乳 腺 癌 预 防 和 治 疗 方 面 进 行 了 大 量 研 究 特 别 是 在 甾 体 激 素 及 其 内 源 性 衍 生 物 在 乳 腺 癌 中 的 作 用 有 重 要 发 现 因 为 内 源 性 雌 激 素 衍 生 物 在 体 内 毒 性 低, 它 们 在 乳 腺 癌 预 防 和 治 疗 中 具 有 广 阔 的 前 景 北 京 大 学 深 圳 研 究 生 院 化 学 生 物 学 与 生 物 技 术 学 院 张 慧 教 授 团 队 张 慧 教 授 团 队 主 要 研 究 开 发 小 分 子 化 合 物 靶 向 组 蛋 白 去 甲 基 化 酶 来 抑 制 乳 腺 癌 肿 瘤 干 细 胞 治 疗 乳 腺 癌 二 深 圳 乳 腺 癌 基 础 研 究 面 临 的 挑 战 深 圳 市 偏 重 应 用 研 究, 对 基 础 研 究 和 应 用 基 础 研 究 重 视 相 对 不 足 深 圳 市 要 想 在 乳 腺 癌 相 关 产 业 上 获 得 持 续 强 劲 的 发 展, 就 必 须 加 强 对 乳 腺 癌 基 础 研 究 的 投 入 第 三 节 深 圳 乳 腺 癌 新 药 研 发 状 况 一 深 圳 乳 腺 癌 抗 体 / 重 组 蛋 白 药 物 研 发 状 况 ( 一 ) 深 圳 乳 腺 癌 抗 体 药 物 总 体 发 展 对 比 分 析 至 今, 我 国 抗 体 药 物 研 究 形 成 了 北 京 上 海 为 核 心 的 研 究 和 产 业 化 基 地 93

94 北 京 有 军 事 医 学 科 学 院 中 科 院 遗 传 所 医 科 院 肿 瘤 所 预 防 医 学 科 学 院 病 毒 所 和 北 京 义 庄 国 家 863 抗 体 工 程 基 地 等 研 究 院 所, 还 有 北 京 百 泰 ( 上 市 产 品 尼 妥 珠 单 抗 ) 神 州 细 胞 (CD20 抗 体 进 入 临 床, 并 有 多 个 抗 体 在 研 发 ) 奥 达 国 际 生 物 ( 抗 体 药 物 研 发 CRO 公 司, 反 应 器 规 模 1000L) 天 广 实 ( 浙 江 海 正 药 物 的 抗 体 药 物 研 发 平 台 ) 等 企 业, 主 要 在 抗 体 上 游 及 中 游 技 术 方 面 ( 如 抗 体 的 基 因 克 隆 人 源 化 改 造 高 效 表 达 以 及 噬 菌 体 抗 体 库 技 术 ) 建 立 了 多 个 平 台, 取 得 了 较 大 的 进 展 ; 另 有 协 和 肿 瘤 医 院 等 国 内 最 先 进 的 乳 腺 癌 临 床 试 验 基 地 上 海 有 上 海 药 明 康 德 ( 抗 体 药 物 研 发 CRO 公 司, 正 在 研 发 HER2 抗 体 ADC 药 物 PD-1/PD-L1 抗 体, 反 应 器 规 模 1000L) 上 海 生 命 科 学 院 第 二 军 医 大 学 肿 瘤 研 究 所 中 信 国 健 ( 上 市 产 品 益 赛 普,HER2 抗 体 已 经 完 成 临 床 试 验, 建 设 有 抗 体 药 物 国 家 工 程 研 究 中 心 ) 张 江 生 物 ( 抗 体 药 物 与 靶 向 治 疗 国 家 重 点 实 验 室 ) 正 在 研 发 仿 制 和 创 新 的 PD-1 抗 体 上 海 赛 金 ( 上 市 产 品 强 克 ) 等, 在 抗 体 的 靶 点 发 现 药 物 研 发 和 产 业 化 开 发 方 面 形 成 了 较 大 的 合 力, 在 乳 腺 癌 药 物 研 发 和 临 床 应 用 方 面 已 经 走 在 国 内 的 最 前 沿 深 圳 市 还 没 有 乳 腺 癌 抗 体 药 物 研 发 成 功 上 市 中 科 院 深 圳 先 进 院 在 进 行 药 物 靶 点 发 现 和 抗 体 研 发, 深 圳 万 乐 药 业 有 限 公 司 投 资 建 设 了 抗 体 药 物 的 小 试 中 试 基 地 深 圳 已 经 具 94

95 备 乳 腺 癌 抗 体 药 物 产 学 研 基 础, 正 在 进 行 HER2 抗 体 PD-1 抗 体 的 研 发 ( 见 表 3-3) 表 3-3 深 圳 乳 腺 癌 抗 体 药 物 发 展 情 况 产 业 基 础 核 心 技 术 与 平 台 国 内 外 发 展 情 况 深 圳 发 展 水 平 深 圳 代 表 单 位 目 前 深 圳 市 还 没 科 研 院 校 : 有 上 市 乳 腺 癌 治 中 科 院 深 圳 先 进 院 疗 用 抗 体 药 物 产 我 国 抗 体 药 物 研 究 清 华 大 学 研 究 生 院 品, 在 抗 体 药 物 发 领 域 初 步 形 成 了 北 抗 体 室 展 方 面 落 后 于 上 京 上 海 为 核 心 的 研 企 业 : 海 北 京 苏 州 和 究 和 产 业 化 基 地 深 圳 万 乐 药 业 成 都, 但 由 于 国 内 深 圳 容 瑞 药 业 抗 体 产 业 刚 起 步, 差 距 不 大 深 圳 在 本 领 域 的 药 物 结 构 ADC 偶 联 技 术 平 台 规 模 不 中 科 院 深 圳 先 进 院 技 术 等 主 要 为 美 国 够 大, 缺 少 抗 体 药 纯 人 源 单 抗 药 物 技 公 司 拥 有, 国 内 还 缺 物 的 动 物 试 验 抗 术 平 台 乏 相 关 核 心 技 术, 基 体 表 征 技 术 研 究 深 圳 万 乐 药 业 有 限 本 处 在 模 仿 和 在 模 平 台, 很 多 研 究 还 公 司 抗 体 药 物 小 仿 中 创 新 的 阶 段 需 要 委 托 上 海 北 试 中 试 研 究 基 地 京 完 成 1. 核 心 技 术 中 科 院 深 圳 先 进 院 拥 有 人 源 化 抗 体 筛 选 技 术 平 台, 万 乐 药 业 拥 有 小 试 中 试 工 艺 和 质 量 分 析 技 术 等 但 在 药 物 结 构 ADC 偶 联 技 术 等 主 要 为 美 国 公 司 拥 有, 深 圳 基 本 处 在 模 仿 和 在 模 仿 中 创 新 的 阶 段 95

96 2. 研 究 队 伍 中 科 院 先 进 院 陆 续 引 进 了 国 外 的 抗 体 药 物 研 发 团 队, 有 国 家 千 人 计 划 人 才, 有 海 归 博 士, 主 要 进 行 抗 体 药 物 靶 点 发 现 作 用 机 理 和 药 物 开 发 研 究 深 圳 万 乐 药 业 有 限 公 司 抗 体 中 心 有 一 批 硕 士 博 士 研 发 人 员, 可 以 进 行 抗 体 药 物 工 艺 研 究 质 量 研 究 和 临 床 应 用 研 究 总 体 来 说, 深 圳 市 在 本 领 域 的 研 发 能 力 还 不 高 3. 研 究 成 果 中 科 院 深 圳 先 进 院 获 得 了 一 些 抗 体 候 选 物 深 圳 万 乐 药 业 有 限 公 司 已 经 申 报 了 HER2 抗 体 临 床 试 验 注 册 申 请, 已 经 开 始 PD-1 抗 体 的 早 期 研 发,ADC 药 物 的 技 术 路 径 和 产 品 调 研 工 作 已 经 启 动 但 深 圳 市 在 本 领 域 的 研 究 成 果 还 太 少 4. 研 发 平 台 中 科 院 深 圳 先 进 院 搭 建 具 有 完 全 自 主 知 识 产 权 的 纯 人 源 单 抗 药 物 技 术 平 台 深 圳 万 乐 药 业 有 限 公 司 建 立 了 国 内 先 进 水 平 的 1000 平 方 米 的 抗 体 药 物 小 试 中 试 研 究 基 地, 有 200L 生 物 反 应 器 和 一 系 列 进 口 设 备 仪 器, 可 以 进 行 抗 体 药 物 的 研 发 和 产 业 化 研 究 但 深 圳 在 本 领 域 的 技 术 平 台 规 模 不 够 大, 缺 少 抗 体 药 物 的 动 物 试 验 抗 体 表 征 技 术 研 究 平 台, 很 多 研 究 还 需 要 委 托 上 海 北 京 来 完 成 96

97 ( 二 ) 深 圳 乳 腺 癌 抗 体 药 发 展 的 挑 战 1. 基 础 研 究 水 平 较 低 乳 腺 癌 抗 体 治 疗 药 物 开 发, 须 进 行 乳 腺 癌 发 病 机 理 凋 亡 途 径 药 物 靶 点 物 作 用 机 制 等 基 础 研 究 深 圳 在 这 些 方 面 没 有 足 够 的 成 果 积 累 2. 产 业 化 技 术 较 低 国 内 动 物 细 胞 培 养 规 模 普 遍 在 2000L 以 下, 在 国 外 单 克 隆 抗 体 药 物 生 产 一 般 都 使 用 2000~10000L, 甚 至 15000L 发 酵 罐 生 产 主 要 原 因 是 动 物 细 胞 培 养 技 术 非 常 复 杂, 成 本 巨 大, 很 多 单 位 没 有 足 够 资 本 进 行 产 业 化 开 发 和 提 高 产 业 化 技 术 水 平 二 深 圳 小 分 子 靶 向 药 物 研 发 状 况 ( 一 ) 深 圳 小 分 子 靶 向 药 总 体 的 发 展 对 比 分 析 国 内 研 发 乳 腺 癌 小 分 子 靶 向 治 疗 药 物 的 企 业 或 科 研 单 位, 主 要 集 中 在 上 海 江 苏 等 地 ; 药 物 靶 标 主 要 针 对 EGFR/HER2; 研 发 大 多 处 于 临 床 I/II 期 阶 段 如 江 苏 豪 森 药 业 的 西 帕 替 尼, 江 苏 恒 瑞 医 药 的 吡 咯 替 尼, 上 海 艾 力 斯 的 艾 力 替 尼, 上 海 药 物 所 的 德 立 替 尼, 齐 鲁 制 药 的 赛 拉 替 尼, 峡 江 和 美 的 Hemay022 等 深 圳 研 发 乳 腺 癌 小 分 子 靶 向 治 疗 药 物 的 企 业 或 科 研 单 位 较 少, 进 入 临 床 研 究 的 只 有 深 圳 微 芯 生 物 科 技 有 限 责 任 公 司 自 主 研 发 的 亚 型 选 择 性 HDAC 抑 制 剂 西 达 本 胺 ( 见 表 3-4) 97

98 表 3-4 深 圳 乳 腺 癌 小 分 子 靶 向 药 物 研 发 情 况 实 验 室 阶 段 临 床 阶 段 研 究 单 位 小 分 子 药 类 型 国 内 外 对 比 BTK 蛋 白 激 酶, 保 罗 样 蛋 白 激 酶 北 京 大 学 深 圳 研 究 生 院 PLK1 和 PLK4 等 与 国 际 同 类 药 物 创 新 药 物 研 究 中 心 靶 标 上 有 原 创 性 的 处 于 同 一 水 平 发 现 及 自 主 知 识 产 权 的 活 性 化 合 物 发 现 一 系 列 组 蛋 白 北 京 大 学 深 圳 研 究 生 院 去 甲 基 化 酶 抑 制 剂 与 国 际 同 类 药 物 的 化 学 基 因 组 学 实 验 室 组 蛋 白 去 乙 酰 化 酶 处 于 同 一 水 平 抑 制 北 京 大 学 深 圳 研 究 生 院 研 发 了 Her 家 族 共 化 学 基 因 组 学 重 点 实 验 价 不 可 逆 抑 制 剂 和 注 重 差 异 化 的 室 和 深 圳 睿 熙 生 物 科 技 新 系 列 的 CDK4/6 me-better 有 限 公 司 抑 制 剂 深 圳 微 芯 生 物 科 技 有 限 HDAC 抑 制 剂 西 达 与 国 际 同 类 药 物 责 任 公 司 本 胺 II/III 期 临 床 处 于 同 一 水 平 实 验 室 研 究 方 面 : 北 京 大 学 深 圳 研 究 生 院 创 新 药 物 研 究 中 心, 致 力 于 靶 向 激 酶 的 抗 肿 瘤 药 物 研 究, 特 别 在 BTK 蛋 白 激 酶 保 罗 样 蛋 白 激 酶 PLK1 和 PLK4 等 靶 标 上, 有 原 创 性 的 研 发 成 果 北 京 大 学 深 圳 研 究 生 院 的 化 学 基 因 组 学 实 验 室, 致 力 于 组 蛋 白 的 调 控 研 究, 发 现 多 个 天 然 产 物 具 有 组 蛋 白 去 乙 酰 化 酶 抑 制 的 功 能, 并 成 功 获 得 天 然 产 物 的 结 构 类 似 物, 在 特 定 的 肿 瘤 细 胞 活 性 测 试 中 达 到 pm 浓 度 级 别 在 组 蛋 白 去 甲 基 化 酶 抑 制 剂 开 发 方 面, 该 实 验 室 通 过 CBB 系 列 化 合 物, 确 认 98

99 LSD1 和 组 蛋 白 H3K4 甲 基 化 在 具 有 干 性 的 肿 瘤 细 胞 表 观 遗 传 学 分 化 中 具 有 重 要 的 作 用 北 京 大 学 深 圳 研 究 生 院 化 学 基 因 组 学 重 点 实 验 室 和 深 圳 睿 熙 生 物 科 技 有 限 公 司 利 用 研 制 共 价 激 酶 药 物 的 丰 富 经 验, 研 制 了 新 系 列 的 Her 家 族 激 酶 共 价 抑 制 剂, 通 过 化 学 结 构 骨 架 的 不 同, 差 异 化 发 展 与 国 内 外 已 批 准 药 物 不 同 的 Her 家 族 激 酶 药 物, 已 经 获 得 高 活 性 先 导 化 合 物, 正 在 进 行 后 期 的 临 床 前 试 验 针 对 细 胞 周 期 激 酶 CDK4/6, 深 圳 睿 熙 生 物 科 技 有 限 公 司 已 经 发 展 了 基 于 me-better 策 略 的 新 型 抑 制 剂, 并 积 极 发 展 与 其 他 乳 腺 癌 药 物 的 联 合 治 疗 研 究 新 药 临 床 研 究 方 面 : 深 圳 微 芯 生 物 科 技 有 限 责 任 公 司, 在 表 观 遗 传 学 靶 标 HDAC 的 抑 制 剂 研 究 方 面 已 取 得 良 好 的 成 果, 经 CFDA 批 准, 即 将 开 展 西 达 本 胺 联 合 第 三 代 芳 香 化 酶 抑 制 剂 依 西 美 坦 (Exemestane) 治 疗 ER 阳 性 复 发 或 转 移 性 乳 腺 癌 患 者 的 III 期 临 床 试 验 研 究 ( 二 ) 深 圳 乳 腺 癌 小 分 子 靶 向 药 研 发 与 上 海 北 京 等 地 相 比, 我 市 乳 腺 癌 靶 向 药 物 研 发 企 业 和 科 研 机 构 数 少, 在 研 项 目 大 多 处 于 临 床 前 研 究 阶 段 从 长 远 考 虑, 深 圳 市 应 重 点 支 持 乳 腺 癌 原 创 性 研 发, 如 乳 腺 癌 发 生 发 展 信 号 通 路 关 键 调 控 靶 标, 靶 向 性 创 新 药 物 开 发 特 别 是 针 对 乳 腺 癌 靶 向 治 疗 作 用 机 制 明 确 疗 效 和 安 99

100 全 性 综 合 指 标 优 良, 并 有 巨 大 市 场 潜 力 的 靶 标 以 me-better 的 方 式 进 行 研 发, 争 取 在 短 时 间 内 形 成 具 有 自 主 知 识 产 权 的 候 选 产 品 肿 瘤 是 高 度 异 质 性 的 疾 病, 基 于 单 一 靶 标 单 一 通 路 的 用 药 方 法 往 往 难 以 有 效 根 治, 即 便 是 新 型 的 分 子 靶 向 治 疗 也 面 临 挑 战, 如 临 床 有 效 率 低 ( 仅 10% 左 右 ), 易 产 生 耐 药 ( 半 年 至 一 年 左 右 ), 毒 副 作 用 难 预 测 ( 重 要 死 因 之 一 ) 根 据 生 物 标 志 物 (Biomarker) 开 展 新 药 研 发 和 个 体 化 治 疗 则 大 有 可 为 1. 促 进 个 体 化 治 疗 分 子 靶 向 抗 肿 瘤 药 物 靶 点, 包 括 :BCR-ABL EGFR 血 管 内 皮 生 长 因 子 (VEGFR) 间 变 性 淋 巴 瘤 激 酶 (ALK) 等 个 体 化 治 疗 药 物, 吉 非 替 尼 (Iressa) 是 的 一 个 成 功 的 案 例 对 非 小 细 胞 肺 癌, 使 用 细 胞 毒 药 物 治 疗 的 有 效 率 不 到 5%; 后 来 发 现 EGFR 突 变 是 该 肿 瘤 的 敏 感 标 志 物, 采 用 靶 向 药 物 吉 非 替 尼 治 疗, 其 有 效 率 提 高 到 70%~80% 类 似 的, 还 有 治 疗 肠 癌 的 西 妥 昔 单 抗 (Erbitux) 对 K-ras 基 因 野 生 型 患 者, 西 妥 昔 单 抗 的 疗 效 好 ; 而 对 K-ras 基 因 突 变 型 患 者, 西 妥 昔 单 抗 的 疗 效 不 佳, 甚 至 使 病 情 加 重 2009 年, 美 国 临 床 肿 瘤 学 会 (ASCO) 报 告, 通 过 K-ras 基 因 筛 查 后 应 用 西 妥 昔 单 抗 治 疗, 仅 2008 年 就 使 美 国 节 约 了 601 亿 美 元, 并 把 晚 期 患 者 的 平 均 生 存 期 延 长 了 11.5 个 月 100

101 2. 加 速 新 药 研 发 靶 向 ALK 治 疗 非 小 细 胞 肺 癌 的 克 唑 替 尼 (Crizotinib), 从 发 现 到 申 请 上 市 仅 用 了 3 年 时 间, 提 示 生 物 标 志 物 对 加 速 药 物 研 发 的 重 要 性 棘 皮 动 物 微 管 相 关 蛋 白 4 与 ALK 的 融 合 基 因 (EML4-ALK) 是 非 小 细 胞 肺 癌 的 标 志 物 非 小 细 胞 肺 癌 中,ALK 阳 性 率 约 占 3%~7%, 每 年 患 者 约 4 万 例 自 融 合 基 因 EML4-ALK 发 现 以 来, 辉 瑞 公 司 加 速 了 靶 向 ALK 抑 制 剂 克 唑 替 尼 (Crizotinib) 的 临 床 研 究 其 82 例 ALK 阳 性 患 者 的 Ⅱ 期 临 床 数 据 显 示, 总 有 效 率 达 到 57%,6 个 月 无 进 展 生 存 率 达 72% 2011 年 8 月, 美 国 食 品 药 品 管 理 局 (FDA) 批 准 Crizotinib 上 市, 作 为 EML4-ALK 阳 性 非 小 细 胞 肺 癌 患 者 的 一 线 治 疗 药 物 克 唑 替 尼 (Crizotinib) 开 发 成 功, 除 了 对 临 床 治 疗 的 巨 大 贡 献 外, 还 革 新 了 药 物 临 床 研 究 模 式, 即 临 床 试 验 只 在 ALK 阳 性 患 者 群 体 中 进 行 没 有 生 物 标 志 物, 就 没 有 药 物 将 成 为 药 物 研 发 的 趋 势 2011 年 8 月, 美 国 FDA 出 台 新 规 要 求, 申 请 新 药 临 床 研 究 时, 须 同 步 提 交 选 择 敏 感 患 者 的 分 子 诊 断 试 剂 盒 ; 美 国 FDA 正 在 审 批 的 候 选 药 物 中,25% 附 有 个 体 化 药 物 特 征 的 生 物 标 志 物 乳 腺 癌 药 物 治 疗 具 有 明 显 的 个 体 化 治 疗 特 征, 是 精 准 医 疗 的 先 行 者 尽 管 如 此, 原 发 和 继 发 的 耐 药 使 乳 腺 癌 药 物 的 101

102 临 床 疗 效 满 足 不 了 治 疗 需 求 因 此, 开 发 更 多 具 有 个 体 化 生 物 标 志 物 特 征 的 治 疗 药 物, 是 乳 腺 癌 药 物 研 发 所 面 临 的 主 要 挑 战 三 深 圳 肿 瘤 免 疫 细 胞 治 疗 研 发 状 况 ( 一 ) 深 圳 免 疫 细 胞 治 疗 总 体 的 发 展 对 比 分 析 深 圳 市 鼓 励 创 新 的 政 策 及 宽 容 失 败 的 氛 围, 吸 引 了 众 多 免 疫 细 胞 治 疗 方 面 的 人 才, 促 进 了 免 疫 细 胞 治 疗 新 技 术 新 产 品 的 不 断 开 发, 推 动 了 免 疫 细 胞 治 疗 企 业 的 健 康 快 速 发 展 深 圳 在 免 疫 细 胞 治 疗 领 域 可 谓 是 人 才 济 济, 研 究 队 伍 实 力 雄 厚 如 CAR-T 治 疗 的 领 军 人 才 Carl June 千 人 计 划 人 才 王 荣 富 教 授 等 这 些 领 军 人 才 和 众 多 免 疫 细 胞 治 疗 领 域 的 研 发 骨 干, 推 动 着 深 圳 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 的 开 发 人 才 和 技 术 的 汇 聚 为 深 圳 市 免 疫 和 细 胞 治 疗 领 域 的 产 业 集 群 形 成 创 造 了 良 好 的 条 件 深 圳 市 已 有 几 十 家 从 事 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 研 发 的 企 业 或 机 构 代 表 企 业 有 中 美 康 士 合 一 康 益 世 康 宁 源 正 等 总 体 来 看, 深 圳 发 展 免 疫 细 胞 治 疗 技 术, 着 有 人 才 创 新 环 境 等 方 面 的 优 势, 也 存 在 着 一 些 不 足 和 挑 战 特 别 是 国 内 各 地 医 疗 政 策 支 持 力 度 不 一, 使 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 的 推 广 受 到 限 制 表 3-5 深 圳 乳 腺 癌 免 疫 细 胞 治 疗 发 展 情 况 深 圳 市 发 展 情 况 代 表 单 位 102

103 学 校 : 中 科 院 深 圳 先 进 院 深 圳 大 学 产 业 基 础 核 心 技 术 及 平 台 医 院 : 深 圳 市 第 一 人 民 医 院 深 圳 市 第 二 人 民 医 院 产 业 链 条 较 完 整, 科 研 创 深 圳 市 第 三 人 民 医 院 新 实 力 较 强, 多 家 有 基 础 的 临 床 单 位, 企 业 较 多 但 企 业 : 规 模 都 比 较 小, 技 术 更 新 源 正 细 胞 快, 部 分 企 业 面 临 技 术 革 益 世 康 宁 新 的 压 力 北 科 生 物 深 圳 市 茵 冠 生 物 科 技 有 限 公 司 深 圳 市 赛 百 诺 基 因 有 限 公 司 深 圳 市 康 尔 诺 生 物 技 术 有 限 公 司 深 圳 市 博 泰 生 物 医 学 科 技 发 展 有 限 公 司 深 圳 市 合 一 康 生 物 科 技 有 限 公 司 深 圳 市 博 圣 康 生 物 科 技 有 限 公 司 源 正 细 胞 多 靶 点 抗 原 肽 DC-CTL 技 术 益 世 康 宁 AAVCTL 技 术 第 二 人 民 医 院 深 圳 大 学 中 科 院 深 圳 先 进 院 CAR-T 技 术 北 科 生 物 BiAbs 修 饰 免 疫 细 胞 等 ( 二 ) 深 圳 免 疫 细 胞 治 疗 领 域 的 发 展 挑 战 深 圳 免 疫 细 胞 治 疗 领 域 的 基 础 较 好, 技 术 研 发 既 存 在 着 机 遇, 也 面 临 着 挑 战 103

104 1. 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 的 升 级 换 代 急 需 开 发 出 针 对 性 更 强 靶 向 性 更 精 确 的 乳 腺 癌 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 如 以 HER-2 或 BRCA1,BRCA2 突 变 位 点 为 靶 点 的 DC DC/CTL 技 术 BiAbs 修 饰 或 基 因 修 饰 的 T 细 胞 技 术 2. 开 展 细 胞 治 疗 技 术 / 产 品 的 询 证 医 学 研 究 在 我 国, 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 进 入 临 床 应 用 并 不 要 求 有 严 格 的 前 瞻 性 随 机 对 照 临 床 研 究, 一 些 回 溯 性 研 究 也 难 于 说 服 医 院 或 医 生 在 临 床 治 疗 上 积 极 采 用 因 此, 应 鼓 励 开 展 细 胞 治 疗 技 术 / 产 品 的 前 瞻 性 临 床 研 究, 获 取 详 实 的 循 证 医 学 资 料, 严 格 规 范 相 关 技 术 / 产 品 临 床 应 用 3. 建 立 规 范 标 准 的 细 胞 制 备 质 量 管 理 体 系 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 的 健 康 发 展, 离 不 开 科 学 规 范 的 质 量 管 理 体 系 的 建 立 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 具 有 以 下 几 个 方 面 的 原 因, 使 免 疫 细 胞 制 备 标 准 化 具 有 更 大 难 度 : 一 是 免 疫 细 胞 制 备 的 主 要 原 材 料 - 细 胞 来 自 不 同 的 个 体 ; 二 是 自 体 免 疫 细 胞 治 疗 自 取 自 用, 无 法 批 量 生 产 ; 三 是 免 疫 细 胞 制 备 完 成 后 通 常 需 要 及 时 回 输 四 深 圳 新 型 制 剂 及 技 术 研 发 状 况 ( 一 ) 深 圳 乳 腺 癌 新 型 制 剂 总 体 的 发 展 对 比 分 析 在 纳 米 技 术 研 究 方 面, 先 进 院 和 清 华 深 圳 研 究 生 院 在 国 内 处 于 领 先 地 位 万 乐 药 业 在 靶 向 制 剂 上 已 有 新 突 破, 有 望 104

105 实 现 产 业 化 在 缓 释 技 术 方 向, 翰 宇 药 业 健 元 的 研 究 实 力 较 为 雄 厚 致 君 在 药 物 树 脂 制 剂 方 面 实 力 雄 厚 深 圳 市 的 省 市 级 重 点 实 验 室 已 成 功 构 建 乳 腺 癌 细 胞 靶 向 的 纳 米 载 药 平 台, 整 合 癌 症 化 疗 与 光 热 治 疗 的 纳 米 鸡 尾 酒 药 物, 纳 米 多 烯 紫 杉 醇 制 剂 以 及 肿 瘤 细 胞 单 分 子 检 测 手 段 等, 并 成 功 用 于 乳 腺 癌 的 治 疗 与 早 期 诊 断 万 乐 药 业 研 发 的 紫 杉 醇 胶 束 已 进 入 二 期 临 床, 多 西 他 塞 脂 质 纳 米 粒 冻 干 粉 已 申 报 临 床, 有 望 填 补 深 圳 市 纳 米 抗 癌 药 物 的 空 白 ( 见 表 3-6) ( 二 ) 深 圳 乳 腺 癌 产 业 在 发 展 该 领 域 的 挑 战 目 前 新 型 制 剂 研 究 有 待 进 一 步 加 强 的 几 个 方 面 :(1) 实 验 室 规 模 制 备 工 艺 的 产 业 化 前 景 ;(2) 这 些 诊 断 与 治 疗 为 一 体 的 纳 米 粒 在 体 内 过 程 如 何? 即 成 药 性 如 何? 即 进 行 纳 米 产 品 的 药 代 动 力 学 评 价 有 效 性 评 价 ;(3) 纳 米 粒 在 体 内 的 安 全 性 评 价 ( 聚 集 堵 塞 等 ) 等 这 些 基 础 研 究 需 要 政 府 资 助 和 企 业 医 院 的 配 合 表 3-6 深 圳 乳 腺 癌 新 型 制 剂 发 展 情 况 核 心 技 术 及 平 台 代 表 单 位 已 有 成 果 整 合 癌 症 化 疗 与 光 纳 米 技 术 先 进 技 术 研 究 院 热 治 疗 的 纳 米 鸡 尾 清 华 大 学 研 究 生 院 酒 药 物, 纳 米 多 烯 紫 杉 醇 制 剂 制 剂 工 程 中 心 纳 米 技 术 深 圳 万 乐 药 业 紫 杉 醇 胶 束 已 进 入 二 期 临 床, 多 西 他 塞 105

106 缓 释 技 术 药 物 树 脂 制 剂 传 统 制 剂 的 新 改 良 难 溶 药 增 溶 技 术 新 骨 架 释 药 吸 收 技 术 翰 宇 药 业 健 元 药 业 致 君 药 业 深 圳 天 道 医 药 有 限 公 司 深 圳 市 华 力 康 科 技 有 限 公 司 深 圳 市 嘉 轩 生 物 医 药 科 技 有 限 公 司 深 圳 信 立 泰 药 业 深 圳 君 圣 泰 生 物 技 术 有 限 公 司 深 圳 市 国 源 药 业 有 限 公 司 华 润 三 九 医 药 股 份 有 限 公 司 脂 质 纳 米 粒 冻 干 粉 已 申 报 临 床 106

107 第 四 章 深 圳 乳 腺 癌 技 术 研 发 指 引 根 据 国 内 外 乳 腺 癌 技 术 发 展 现 状 及 发 展 趋 势, 结 合 深 圳 乳 腺 癌 技 术 整 体 发 展 情 况, 深 圳 乳 腺 癌 技 术 研 发 总 体 战 略 如 下 按 照 国 家 中 长 期 科 学 和 技 术 发 展 规 划 纲 要 ( ) 加 快 把 生 物 产 业 培 育 成 为 高 技 术 领 域 的 支 柱 产 业 和 国 家 的 战 略 性 新 兴 产 业 的 战 略 目 标, 以 科 学 发 展 观 为 指 导, 以 市 场 为 导 向, 以 产 业 化 为 核 心, 通 过 自 主 创 新, 形 成 乳 腺 癌 技 术 创 新 源 头 和 研 发 量 产 基 地, 提 升 乳 腺 癌 技 术 核 心 竞 争 力, 实 现 乳 腺 癌 技 术 和 系 列 产 品 的 产 业 化 和 商 业 化, 最 终 形 成 具 有 国 际 竞 争 力 的 乳 腺 癌 战 略 性 新 兴 产 业 在 以 上 战 略 指 引 下, 初 步 拟 定 未 来 三 年 深 圳 乳 腺 癌 相 关 研 发 的 目 标 以 及 技 术 攻 关 方 向 第 一 节 深 圳 高 危 人 群 早 期 诊 断 研 发 指 引 一 发 展 战 略 与 国 际 技 术 同 步, 开 展 乳 腺 癌 高 危 人 群 早 筛 早 检 技 术 和 产 品 研 发 分 三 步 骤 用 一 到 两 年 时 间, 支 持 基 因 研 究 与 乳 腺 癌 临 床 医 疗 的 合 作, 建 立 乳 腺 癌 风 险 基 因 突 变 和 个 体 化 医 疗 分 子 分 型 数 据 库, 以 及 乳 腺 癌 基 因 检 测 核 心 分 析 算 法, 达 到 国 际 先 进 水 平 ; 使 用 两 到 三 年 时 间, 通 过 推 动 社 会 资 源 的 整 合, 107

108 形 成 以 政 府 为 主 导, 医 院 及 基 因 研 究 机 构 合 作, 多 种 社 会 组 织 联 动 的 产 业 模 式, 使 深 圳 市 乳 腺 癌 相 关 产 业 达 国 际 先 进 水 平 ; 使 用 3-5 年 的 时 间, 建 立 符 合 中 国 国 情 的 乳 腺 癌 防 治 综 合 平 台 和 乳 腺 癌 个 体 化 医 疗 网 络 平 台, 并 在 深 圳 市 范 围 内 形 成 引 领 全 国 的 乳 腺 癌 早 筛 早 检 应 用 示 范 二 发 展 目 标 ( 一 ) 构 建 乳 腺 癌 大 数 据 平 台 1. 构 建 开 放 的 深 圳 市 乳 腺 癌 高 危 人 群 数 据 库 目 前, 国 内 缺 乏 基 于 大 规 模 的 中 国 乳 腺 癌 高 危 人 群 基 因 组 学 数 据 库 欧 美 国 家 乳 腺 癌 风 险 基 因 数 据 库, 所 包 含 的 信 息 基 本 源 于 高 加 索 以 及 犹 太 系 人 群, 其 中 亚 洲 人 群 的 数 据 所 占 比 例 非 常 低 因 此, 需 要 开 展 大 规 模 人 群 的 乳 腺 癌 风 险 基 因 研 究, 并 形 成 深 圳 市 乳 腺 癌 高 危 人 群 数 据 库, 为 我 市 乃 至 全 国 乳 腺 癌 基 因 组 学 研 究 提 供 支 撑 2. 构 建 乳 腺 癌 多 组 学 变 异 数 据 库 基 于 大 数 据 的 乳 腺 癌 早 期 诊 断 产 业 化 发 展, 需 要 建 立 一 套 标 准 的 乳 腺 癌 多 组 学 变 异 数 据 库, 为 临 床 实 践 提 供 准 确 的 指 导, 包 括 DNA RNA 蛋 白 代 谢 组 等 多 维 度 多 组 学 内 容 通 过 对 这 些 信 息 的 研 发 及 整 合, 最 终 将 形 成 涵 盖 多 组 学 变 异 数 据 库, 为 乳 腺 癌 多 组 学 基 线 的 绘 制 提 供 基 础, 进 一 步 为 基 于 此 基 线 的 分 子 分 型 及 早 期 监 控 提 供 理 论 及 实 践 依 据 108

109 ( 二 ) 开 发 乳 腺 癌 早 期 检 测 技 术 并 形 成 行 业 规 范 1. 实 现 乳 腺 癌 精 准 分 子 分 型 检 测 技 术 通 过 大 数 据 的 积 累 及 相 应 专 利 和 资 质 的 申 请, 建 立 乳 腺 癌 精 准 分 子 分 型 高 通 量 分 析 平 台 2. 实 现 乳 腺 癌 非 侵 入 性 诊 断 监 控 技 术 通 过 血 液 游 离 标 记 物 的 捕 获 及 测 序 技 术, 建 立 乳 腺 癌 非 侵 入 性 诊 断 及 监 控 高 通 量 分 析 平 台 3. 建 立 乳 腺 癌 高 通 量 基 因 测 序 质 量 管 理 体 系 和 检 测 性 能 标 准 通 过 细 胞 改 造 培 养 以 及 DNA 处 理 技 术, 构 建 乳 腺 癌 高 通 量 基 因 测 序 参 考 品, 并 使 用 金 标 准 流 程 对 参 考 品 的 质 量 进 行 质 控, 建 立 高 通 量 基 因 测 序 质 量 管 理 体 系 ( 三 ) 建 立 产 业 联 动 机 制 通 过 政 府 部 门 医 疗 机 构 以 及 基 因 诊 断 单 位 的 全 力 合 作 与 协 调, 在 深 圳 市 范 围 内 开 展 乳 腺 癌 早 期 检 测 监 测 应 用 示 范, 形 成 我 国 乳 腺 癌 早 期 检 测 产 业 规 范 ( 四 ) 建 立 深 圳 市 乳 腺 癌 发 生 模 型 建 立 基 于 乳 腺 癌 早 期 诊 断 标 准 技 术 平 台 乳 腺 癌 大 数 据 平 台 以 及 乳 腺 癌 防 治 一 体 化 网 络 互 动 平 台 的 产 业 联 动 机 制 及 乳 腺 癌 早 期 诊 断 城 市 模 型 三 核 心 技 术 开 发 方 向 109

110 ( 一 ) 深 圳 市 乳 腺 癌 流 行 病 学 调 查 研 究 据 统 计, 深 圳 市 乳 腺 癌 平 均 发 病 年 龄 早 于 国 内 其 他 城 市, 且 近 年 来 的 发 病 率 呈 直 线 上 升 趋 势 深 圳 市 各 级 医 院 及 肿 瘤 防 治 中 心 等 应 共 同 协 作, 开 展 我 市 乳 腺 癌 患 者 的 流 行 病 学 调 查 工 作, 形 成 深 圳 市 乳 腺 癌 流 行 病 学 数 据 信 息 库, 为 有 效 预 防 乳 腺 癌 提 供 依 据 及 指 导 110

111 ( 二 ) 乳 腺 癌 高 危 人 群 筛 查 技 术 开 发 1. 中 国 人 群 乳 腺 癌 易 感 基 因 模 型 的 确 定 2. 基 因 目 标 区 域 捕 获 + 高 通 量 测 序 技 术 实 验 平 台 的 搭 建 3. 用 于 基 于 大 规 模 人 群 的 乳 腺 癌 风 险 基 因 突 变 筛 查 中, 实 现 高 通 量 高 准 确 性 全 面 性 检 测 分 析 4. 建 立 基 于 高 通 量 测 序 平 台 的 标 准 数 据 分 析 流 程 及 突 变 解 读 流 程 5. 开 发 用 于 BRCA1/2 基 因 快 速 检 测 的 技 术 方 法 及 耗 材 体 系 ( 三 ) 乳 腺 癌 精 确 分 子 分 型 标 记 物 发 现 1. 具 有 国 际 先 进 水 平 的 乳 腺 癌 相 关 基 因 目 标 区 域 捕 获 及 测 序 平 台 的 搭 建 2. 乳 腺 癌 多 组 学 基 因 检 测 的 高 通 量 测 序 数 据 分 析 流 程 及 突 变 解 读 流 程 的 建 立 3. 用 于 精 确 分 子 分 型 特 别 是 LuminalB 型 精 确 分 型 的 乳 腺 癌 个 体 化 基 因 检 测 核 心 算 法 的 建 立 4. 乳 腺 癌 多 组 学 基 因 检 测 数 据 库 及 精 确 分 子 分 型 特 别 是 LuminalB 型 精 确 分 型 模 型 的 建 立 5. 基 于 精 确 分 子 分 型 的 乳 腺 癌 个 体 化 基 因 检 测 试 剂 盒 的 开 发 ( 四 ) 乳 腺 癌 早 期 检 测 及 监 控 技 术 111

112 1. 高 分 辨 率 的 非 侵 入 早 期 肿 瘤 标 记 物 多 组 学 的 含 量 快 速 检 测 技 术 2. 高 精 度 非 侵 入 早 期 肿 瘤 标 记 物 多 组 学 遗 传 物 质 快 速 检 测 技 术 3. 非 侵 入 早 期 肿 瘤 标 记 物 多 组 学 数 据 库 的 构 建 及 基 线 绘 制 4. 非 侵 入 早 期 肿 瘤 标 记 物 检 测 试 剂 盒 开 发 5. 乳 腺 癌 高 通 量 基 因 测 序 质 量 管 理 体 系 和 检 测 性 能 标 准 的 建 立 ( 五 ) 数 据 库 预 测 和 评 估 模 型 检 测 系 统 和 软 件 公 共 平 台 1. 深 圳 市 乳 腺 癌 高 危 人 群 数 据 库 2. 中 国 人 群 乳 腺 癌 多 组 学 基 因 检 测 数 据 库 3. 中 国 人 群 乳 腺 癌 易 感 基 因 风 险 预 测 模 型 和 风 险 评 估 工 具 4. 中 国 人 群 乳 腺 癌 精 确 分 子 分 型 模 型 5. 基 于 精 确 分 子 分 型 模 型 的 早 期 检 测 结 果 评 估 工 具 6. 乳 腺 癌 基 因 检 测 技 术 硬 件 服 务 平 台 7. 乳 腺 癌 基 因 检 测 数 据 分 析 服 务 软 件 8. 循 环 肿 瘤 细 胞 自 动 化 检 测 系 统 和 配 套 软 件 9. 深 圳 市 乳 腺 癌 综 合 防 治 网 络 平 台 四 发 展 成 果 112

113 拥 有 CFDA 认 证 资 质 的 检 测 服 务 和 检 测 试 剂 盒 和 医 疗 器 械 以 及 专 利 申 请 和 文 章 发 表 包 括 : 乳 腺 癌 易 感 基 因 检 测 服 务 乳 腺 癌 易 感 基 因 检 测 试 剂 盒 乳 腺 癌 精 确 分 子 分 型 基 因 检 测 服 务 乳 腺 癌 精 确 分 子 分 型 基 因 检 测 试 剂 盒 基 于 循 环 肿 瘤 细 胞 捕 获 的 乳 腺 癌 早 期 检 测 及 监 控 服 务 第 二 节 深 圳 分 子 机 制 及 新 药 靶 标 研 发 指 引 一 发 展 战 略 开 展 乳 腺 癌 的 分 子 机 制 及 新 药 靶 标 研 究, 产 生 一 系 列 具 有 国 际 影 响 和 自 主 知 识 产 权 的 创 新 研 究 成 果 二 发 展 目 标 产 生 乳 腺 癌 分 子 机 制 及 新 药 靶 标 研 究 成 果, 并 据 此 研 发 乳 腺 癌 的 诊 断 预 防 和 治 疗, 产 生 有 重 要 影 响 的 技 术 和 产 品 三 核 心 技 术 开 发 方 向 近 3-5 年 着 力 突 破 的 核 心 技 术 攻 关 方 向 有 : 1. 乳 腺 癌 新 颖 靶 向 分 子 的 发 现 与 鉴 定 2. 乳 腺 癌 相 关 的 重 要 信 号 通 路 的 研 究 3. 乳 腺 癌 相 关 的 重 要 基 因 及 其 蛋 白 的 研 究 4. 乳 腺 癌 相 关 的 重 要 细 胞 过 程 的 研 究 5. 乳 腺 癌 相 关 的 肿 瘤 干 细 胞 研 究 6. 乳 腺 癌 耐 药 机 制 及 评 估 指 标 研 究 113

114 7. 实 验 室 至 临 床 的 转 化 医 学 研 究 8. 新 型 乳 腺 癌 靶 向 药 物 与 免 疫 治 疗 的 协 同 基 础 研 究 9. 乳 腺 癌 相 关 的 重 要 能 量 代 谢 相 关 分 子 的 调 控 网 络 及 干 预 策 略 研 究 四 发 展 成 果 ( 一 ) 新 的 早 期 诊 断 和 预 后 生 物 标 记 分 子 利 用 深 圳 在 大 规 模 基 因 组 转 录 组 测 序 方 面 的 优 势, 发 现 乳 腺 癌 及 乳 腺 癌 干 细 胞 特 有 的 生 物 标 记 分 子, 开 发 新 的 早 期 诊 断 和 预 后 方 法 ( 二 ) 新 的 治 疗 靶 点 研 究 乳 腺 癌 发 病 的 分 子 机 理 研 究, 发 现 新 的 治 疗 靶 点, 并 发 展 相 应 的 靶 向 治 疗 方 法 ( 三 ) 新 的 致 病 耐 药 转 移 和 复 发 机 理 研 究 乳 腺 癌 致 病 耐 药 转 移 和 复 发 机 理, 为 发 展 新 的 乳 腺 癌 治 疗 方 法 提 供 理 论 依 据 ( 四 ) 潜 在 肿 瘤 生 物 标 志 物 的 发 现 ( 五 ) 提 交 相 应 的 专 利 申 请 和 文 章 发 表 第 三 节 深 圳 新 药 研 发 指 引 一 抗 体 / 重 组 蛋 白 药 物 / 疫 苗 发 展 指 引 ( 一 ) 发 展 战 略 开 发 乳 腺 癌 的 生 物 技 术 药 物 ( 抗 体 和 重 组 蛋 白 药 物 ) 抓 住 国 家 和 深 圳 市 促 进 生 物 产 业 发 展 的 机 遇, 突 破 治 疗 乳 腺 114

115 癌 的 抗 体 和 重 组 蛋 白 药 物 核 心 技 术 和 产 品, 填 补 技 术 和 产 品 空 白, 提 升 地 方 创 新 能 力 和 乳 腺 癌 治 疗 用 抗 体 和 重 组 蛋 白 药 物 的 研 发 能 力 ; 吸 引 培 养 乳 腺 癌 抗 体 药 物 和 重 组 蛋 白 研 发 人 才 ; 解 决 产 业 化 技 术 瓶 颈, 带 动 行 业 发 展 ; 集 聚 深 圳 市 抗 体 和 重 组 蛋 白 药 物 靶 点 发 现 药 物 研 发 和 临 床 研 究 资 源, 促 进 乳 腺 癌 产 业 链 的 发 展 和 成 熟 ( 二 ) 发 展 目 标 1. 建 成 国 内 领 先 的 乳 腺 癌 抗 体 和 重 组 蛋 白 药 物 / 疫 苗 研 发 和 产 业 化 产 业 链 学 习 并 借 鉴 国 内 外 先 进 经 验, 将 药 物 靶 点 发 现 药 物 研 发 和 药 物 产 业 化 技 术 无 缝 对 接, 建 成 国 内 领 先 水 平 的 具 有 高 效 成 果 转 化 能 力 的 研 究 和 产 业 化 基 地 促 使 深 圳 生 物 医 药 产 业 结 构 优 化 升 级, 更 快 更 强 地 支 撑 深 圳 生 物 医 药 行 业 的 迅 速 发 展, 成 为 医 药 产 业 的 催 化 剂 和 推 动 力, 形 成 深 圳 制 药 企 业 参 与 国 际 市 场 角 逐 的 核 心 竞 争 力, 为 深 圳 生 物 医 药 产 业 的 健 康 发 展 做 出 贡 献 2. 形 成 产 学 研 医 集 聚 效 应, 提 升 深 圳 市 的 抗 体 药 物 研 发 和 产 业 化 水 平 本 项 计 划 将 为 单 抗 药 药 物 技 术 的 创 新 研 发 和 产 业 化 注 入 新 的 活 力, 通 过 不 断 的 自 主 创 新 与 产 学 研 合 作, 提 升 创 新 实 力, 形 成 自 主 知 识 产 权, 填 补 国 内 技 术 空 白 的 技 术 和 产 品, 产 生 示 范 和 集 聚 效 应, 从 而 引 领 和 推 动 深 圳 生 物 医 药 行 业 技 115

116 术 及 产 业 共 同 发 展, 使 深 圳 生 物 制 药 行 业 赶 超 国 际 先 进 水 平 经 过 5 年 左 右 的 研 发, 力 争 有 2 个 左 右 抗 体 产 品 进 入 市 场, 造 福 患 者, 并 形 成 乳 腺 癌 抗 体 药 物 研 发 的 产 品 梯 队, 使 更 多 更 好 的 产 品 进 入 市 场, 形 成 社 会 和 经 济 效 益 ( 三 ) 核 心 技 术 攻 关 方 向 国 内 的 抗 体 / 重 组 蛋 白 药 物 技 术 正 在 快 速 发 展 之 中, 在 药 物 靶 点 发 现 药 物 研 发 和 临 床 研 究 方 面 跟 国 外 存 在 很 大 差 距, 为 突 破 药 物 研 发 和 临 床 应 用 的 瓶 颈, 抗 体 / 重 组 蛋 白 药 物 研 发 需 要 攻 关 的 核 心 技 术 方 向 为 : 1. 抗 体 / 重 组 蛋 白 药 物 筛 选 平 台 技 术 2. 稳 定 高 产 细 胞 株 构 建 和 克 隆 技 术 3. 哺 乳 动 物 细 胞 流 加 培 养 工 艺 放 大 技 术 4. 大 规 模 抗 体 / 重 组 蛋 白 高 效 纯 化 技 术 5. 新 型 ( 高 浓 度 ) 抗 体 / 重 组 蛋 白 制 剂 技 术 6. 抗 体 / 重 组 蛋 白 蛋 白 质 量 研 究 与 分 析 检 测 技 术 7. 蛋 白 类 药 物 的 新 型 给 药 系 统 ( 装 置 ) 8. 新 型 高 效 乳 腺 癌 疫 苗 的 关 键 技 术 ( 四 ) 发 展 成 果 成 果 和 考 核 指 标 包 括 : 抗 体 / 重 组 蛋 白 / 疫 苗 药 物 临 床 申 报 开 展 临 床 试 验 获 得 生 产 批 件 专 利 申 请 文 章 发 表 二 小 分 子 靶 向 药 物 发 展 指 引 116

117 ( 一 ) 发 展 战 略 根 据 国 际 乳 腺 癌 药 物 治 疗 前 沿 进 展, 促 进 和 提 高 原 创 性 小 分 子 靶 向 药 物 研 发 能 力, 形 成 具 有 竞 争 力 的 产 学 研 医 创 新 药 物 研 发 和 生 产 体 系 基 于 我 市 药 企 在 小 分 子 靶 向 药 物 研 发 方 面 的 背 景 和 实 际 情 况, 以 产 学 研 政 联 合 的 方 式, 对 国 际 乳 腺 癌 靶 向 治 疗 领 域 作 用 机 制 明 确 疗 效 和 安 全 性 综 合 指 标 优 良, 有 巨 大 市 场 潜 力 的 靶 标 以 me-better 的 方 式 进 行 研 发, 形 成 一 批 具 有 自 主 知 识 产 权 的 候 选 产 品 基 于 我 市 高 校 及 科 研 院 所 在 乳 腺 癌 药 物 靶 标 及 小 分 子 药 物 源 头 创 新 方 面 的 研 究 基 础 及 平 台 优 势, 针 对 乳 腺 癌 尤 其 是 缺 乏 明 确 药 物 靶 标 的 三 阴 乳 腺 癌 展 开 生 物 学 靶 标 及 靶 向 性 药 物 的 探 索 型 研 究, 为 我 市 乃 至 我 国 在 该 领 域 的 发 展 起 到 引 领 作 用, 也 为 我 市 药 企 在 乳 腺 癌 领 域 的 持 续 发 展 奠 定 基 础 ( 二 ) 发 展 目 标 形 成 一 批 具 有 自 主 知 识 产 权 的 不 同 研 发 阶 段 的 化 学 新 药 产 品 或 候 选 药 物 ( 三 ) 核 心 技 术 攻 关 方 向 目 前 国 际 乳 腺 癌 靶 向 治 疗 领 域 作 用 机 制 明 确 疗 效 优 于 传 统 治 疗 方 法 安 全 性 可 控, 有 巨 大 市 场 潜 力 的 药 物 作 用 靶 标 主 要 有 HER2 CDK4/6 mtor 等 三 个 针 对 HER2 靶 标 国 内 已 有 多 家 药 企 在 开 发 me-too me-better 的 产 品, 同 质 化 较 117

118 严 重 而 针 对 CDK4/6 mtor 靶 标 的 药 物 近 两 年 刚 获 FDA 批 准 或 尚 未 上 市, 可 以 成 为 我 市 药 企 研 发 me-better 药 物 的 核 心 技 术 攻 关 方 向 从 我 市 在 乳 腺 癌 治 疗 领 域 的 长 远 竞 争 力 考 虑, 基 于 我 市 高 校 及 科 研 院 所 的 研 究 基 础, 应 着 重 针 对 乳 腺 癌 的 创 新 药 物 靶 标 进 行 验 证 以 及 相 关 靶 向 性 小 分 子 药 物 的 研 究 充 分 考 虑 到 创 新 性 及 竞 争 力, 拟 定 的 核 心 技 术 攻 关 方 向 应 包 括 以 下 几 个 方 面 : 1. 靶 向 蛋 白 激 酶 的 小 分 子 抑 制 剂 多 个 蛋 白 激 酶 信 号 通 路 在 乳 腺 癌 发 生 发 展 中 起 关 键 作 用, 其 中 包 括 PI3K/mTOR CDK4/6 以 及 PLK1/4 等 蛋 白 激 酶 针 对 这 些 靶 标 的 小 分 子 抑 制 剂 在 临 床 前 研 究 中 对 乳 腺 癌 均 有 显 著 的 抑 制 效 果 目 前 针 对 这 些 激 酶 的 小 分 子 抑 制 剂 被 批 准 上 市 还 相 对 较 少, 只 有 一 个 mtor 的 抑 制 剂 依 维 莫 司 (Afinitor,everolimus) 被 批 准 用 于 激 素 受 体 阳 性 乳 腺 癌, 其 他 大 多 处 于 临 床 前 或 临 床 试 验 阶 段 其 中 CDK4/6 的 乳 腺 癌 新 药 成 为 全 球 药 企 新 的 竞 争 焦 点 CDK4/6 蛋 白 激 酶 的 小 分 子 抑 制 剂 在 临 床 试 验 中 的 卓 越 表 现 使 得 该 类 型 药 物 可 能 成 为 抗 癌 药 物 领 域 的 重 磅 炸 弹 药 物 此 外 PLK1/PLK4 的 小 分 子 抑 制 剂 针 对 乳 腺 癌 干 细 胞 以 及 三 阴 乳 腺 癌 在 临 床 前 研 究 中 也 体 现 出 显 著 的 抑 制 效 果 因 此 针 对 这 些 靶 标 进 行 小 分 子 抑 制 剂 的 研 究 有 望 取 得 突 破, 取 得 国 际 先 进 水 平 118

119 2. 靶 向 肿 瘤 代 谢 的 小 分 子 抑 制 剂 肿 瘤 细 胞 与 正 常 细 胞 在 代 谢 方 面 有 显 著 的 差 异, 尤 其 是 肿 瘤 细 胞 高 度 依 赖 糖 酵 解 和 谷 氨 酰 胺 代 谢 途 径, 因 此 针 对 肿 瘤 代 谢 研 究 靶 向 性 药 物 是 乳 腺 癌 药 物 研 究 的 新 方 向 研 究 显 示 多 个 代 谢 通 路 相 关 蛋 白 在 乳 腺 癌 呈 高 表 达 状 态, 其 中 包 括 PDK PKM2 GLS1 以 及 6- 磷 酸 果 糖 2- 激 酶 (PFKFB3) 等 临 床 前 研 究 数 据 显 示 PFKFB3 抑 制 剂 与 雌 激 素 拮 抗 剂 联 合 可 显 著 抑 制 乳 腺 癌 的 生 长 目 前 国 际 上 只 有 一 个 PFKFB3 的 小 分 子 抑 制 剂 PFK-158 针 对 乳 腺 癌 正 进 入 临 床 I 期 试 验, 其 他 大 多 数 PFKFB3 的 小 分 子 抑 制 剂 都 处 于 临 床 前 研 究 阶 段 我 市 相 关 高 校 及 科 研 院 所 在 此 靶 标 上 有 原 创 性 的 发 现 及 积 累, 极 具 竞 争 力 针 对 肿 瘤 代 谢 途 径 的 小 分 子 药 物 的 研 究 有 望 在 短 时 间 内 获 得 突 破, 并 取 得 国 际 领 先 水 平 的 成 果 3. 靶 向 表 观 遗 传 调 控 的 小 分 子 药 物 在 乳 腺 癌 发 生 发 展 过 程 中, 表 观 遗 传 学 调 控 起 到 关 键 的 作 用 雌 激 素 受 体 (ER) 与 组 蛋 白 去 乙 酰 化 酶 (HDAC) 及 组 蛋 白 去 甲 基 化 酶 (LSD1) 通 路 在 基 因 调 控 的 多 个 层 面 进 行 交 互, 包 括 雌 激 素 受 体 的 表 达 及 活 性 p21waf1/cip1 蛋 白 的 表 达, 以 及 细 胞 增 殖 等 临 床 前 研 究 数 据 表 明 HDAC 抑 制 剂 或 LSD1 抑 制 剂 能 够 逆 转 雌 激 素 受 体 阳 性 乳 腺 癌 的 获 得 性 荷 尔 蒙 耐 药 性 此 外,LSD1 对 维 系 乳 腺 癌 肿 瘤 干 细 胞 有 关 键 的 作 用 目 前 深 圳 微 芯 生 物 科 技 有 限 责 任 公 司 原 创 性 的 HDAC 抑 119

120 制 剂 西 达 本 胺 针 对 乳 腺 癌 的 I 期 临 床 试 验 已 经 结 束, 并 获 得 CFDA 临 床 II/III 期 的 批 文, 在 国 内 处 于 领 先 位 置 因 此 针 对 表 观 遗 传 学 调 控 的 靶 标 开 展 靶 向 性 药 物 的 研 究 有 望 获 得 突 破 4. 靶 向 肿 瘤 干 细 胞 信 号 通 路 的 小 分 子 抑 制 剂 5. 临 床 至 实 验 室 的 转 化 医 学 研 究 6. 难 溶 性 药 物 长 效 剂 型 和 复 方 制 剂 的 开 发 研 究 7. 具 有 靶 向 协 同 免 疫 记 忆 作 用 的 小 分 子 抑 制 剂 ( 四 ) 发 展 成 果 完 成 临 床 申 报 开 展 临 床 试 验 获 得 生 产 批 件 专 利 申 请 文 章 发 表 三 免 疫 细 胞 治 疗 发 展 指 引 深 圳 市 在 免 疫 细 胞 治 疗 方 面, 无 论 在 创 新 资 源 还 是 产 业 资 源 方 面 都 处 于 国 际 前 列, 发 展 免 疫 细 胞 治 疗 作 为 未 来 产 业 是 一 个 趋 势, 但 目 前 存 在 一 些 问 题 : (1) 标 准 化 问 题 : 技 术 的 良 莠 不 齐 和 生 产 的 无 序 性, 由 于 缺 乏 临 床 循 证 学 数 据, 监 管 措 施 迟 迟 没 有 出 台, 免 疫 细 胞 治 疗 目 前 在 国 内 属 于 无 监 管 状 态, 比 如 已 经 被 欧 美 证 明 无 效 的 CIK 免 疫 疗 法 仍 在 国 内 广 泛 应 用 有 些 企 业 存 在 重 技 术 轻 质 量 的 问 题, 缺 乏 质 量 控 制 管 理 理 念 及 管 理 人 员, 制 备 的 细 胞 质 量 千 差 万 别, 在 技 术 人 员 物 料 设 备 物 流 质 量 控 制 等 方 面 存 在 明 显 的 缺 陷 120

121 (2)CAR-T 技 术 等 新 技 术 药 证 的 取 得 以 及 安 全 性 问 题, 目 前 相 关 技 术 在 欧 美 处 于 待 审 批 状 态 (3) 另 外 在 适 应 症 方 面,CAR-T 主 要 针 对 淋 巴 瘤 和 血 液 病, 而 目 前 对 于 乳 腺 癌 等 实 体 瘤 的 应 用 还 等 待 技 术 突 破 深 圳 市 在 相 关 方 面 可 以 提 前 布 局, 包 括 以 下 几 点 : (1) 支 持 针 对 乳 腺 癌 的 自 然 靶 向 性 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 的 发 展, 如 多 抗 原 加 载 的 TLR-DC-CTL DC/CTL DC 和 TIL 等 (2) 支 持 细 胞 治 疗 乳 腺 癌 的 前 瞻 性 临 床 研 究, 获 取 循 证 医 学 依 据 的 研 究 (3) 支 持 发 展 CAR-T 平 台 技 术, 探 索 CAR-T 治 疗 乳 腺 癌 的 技 术 可 行 性 (4) 细 胞 治 疗 所 需 的 生 产 平 台 标 准 化 建 设 和 质 量 管 理 体 系 建 设 (5) 政 府 推 动 建 立 权 威 独 立 的 第 三 方 细 胞 质 量 鉴 定 机 构 (6) 建 议 深 圳 牵 头 推 动 国 家 颁 布 法 律 法 规 和 资 质 审 核 的 标 准, 组 织 到 国 外 有 经 验 的 机 构 调 研 考 察 和 进 修 学 习 ( 一 ) 发 展 战 略 开 发 乳 腺 癌 的 免 疫 细 胞 技 术 和 产 品, 形 成 产 学 研 医 产 业 链 和 聚 集 效 应 以 乳 腺 癌 治 疗 为 重 点 突 破 口, 支 持 应 用 于 乳 腺 癌 治 疗 领 域 的 免 疫 和 细 胞 治 疗 技 术 / 产 品 的 研 究 开 发 转 化 和 应 用, 推 动 深 圳 免 疫 和 细 胞 治 疗 技 术 / 产 品 的 更 新 升 级 和 发 展 提 高, 加 速 深 圳 免 疫 和 细 胞 治 疗 领 域 的 产 业 化 进 程, 121

122 鼓 励 深 圳 免 疫 和 细 胞 治 疗 领 域 科 研 院 所 高 新 技 术 企 业 等 的 分 工 合 作 和 良 性 竞 争, 促 进 深 圳 免 疫 和 细 胞 治 疗 相 关 的 产 业 集 群 形 成, 满 足 乳 腺 癌 患 者 迫 切 的 临 床 防 治 需 求, 助 力 深 圳 社 会 经 济 发 展 进 程 ( 二 ) 发 展 目 标 发 展 与 国 际 同 步 的 免 疫 细 胞 技 术 和 产 品, 形 成 深 圳 市 产 学 研 医 在 免 疫 细 胞 治 疗 领 域 的 行 业 规 范 (1) 推 动 支 持 深 圳 免 疫 和 细 胞 治 疗 领 域 发 展 的 制 度 法 规 出 台, 为 深 圳 免 疫 和 细 胞 治 疗 领 域 的 创 新 发 展 和 先 行 先 试 提 供 政 策 和 资 金 支 持 (2) 研 究 开 发 和 / 或 引 进 吸 收 针 对 乳 腺 癌 的 2-3 项 免 疫 细 胞 治 疗 新 技 术 新 产 品, 重 点 支 持 具 有 自 主 知 识 产 权 的 新 技 术 和 新 产 品 (3) 组 建 产 学 研 战 略 联 盟 和 / 或 校 企 联 合 研 发 中 心 ( 基 地 孵 化 器 等 ), 建 立 企 业 牵 头 组 织 高 等 院 校 和 科 研 院 所 共 同 参 与 的 创 新 体 系 (4) 继 续 吸 引 和 培 育 具 有 良 好 素 质 的 多 学 科 和 跨 学 科 研 究 人 员, 推 进 深 圳 免 疫 和 细 胞 治 疗 领 域 形 成 具 有 技 术 创 新 能 力 和 产 业 转 化 能 力 的 研 发 和 管 理 人 才 梯 队 (5) 在 深 圳 市 或 本 地 区 推 行 集 约 化 规 模 化 规 范 化 细 胞 生 产 和 质 量 控 制 新 型 平 台 的 建 立 和 应 用, 实 现 产 品 质 量 的 可 靠 保 障, 促 进 行 业 技 术 的 更 新 升 级 122

123 (6) 鼓 励 企 业 开 展 针 对 乳 腺 癌 的 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 的 临 床 研 究, 重 点 支 持 1-2 项 大 规 模 多 中 心 前 瞻 性 随 机 对 照 的 临 床 试 验, 获 取 较 充 分 的 询 证 医 学 证 据, 形 成 具 有 国 际 竞 争 力 的 战 略 性 新 兴 产 业 ( 三 ) 核 心 技 术 攻 关 方 向 抗 乳 腺 癌 的 细 胞 免 疫 治 疗 核 心 技 术 攻 关 以 靶 向 性 细 胞 免 疫 治 疗 技 术 为 主 攻 方 向, 以 卫 计 委 第 三 类 医 疗 技 术 管 理 办 法 / 国 家 cfda 规 定 的 生 物 医 药 标 准 为 依 据 研 发 乳 腺 癌 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 / 产 品, 重 点 包 括 : (1) 多 靶 点 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 (2) 抗 体 修 饰 的 靶 向 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 (3) 基 因 修 饰 的 靶 向 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 (4) 启 动 免 疫 识 别 技 术 具 体 内 容 包 括 : 1. 免 疫 细 胞 治 疗 的 机 理 研 究 靶 向 性 细 胞 免 疫 治 疗 机 理 已 基 本 明 确, 但 涉 及 具 体 的 抗 乳 腺 癌 靶 向 性 细 胞 免 疫 治 疗 技 术 的 原 理 或 机 理 需 要 进 一 步 深 入 研 究, 包 括 TIL DC CTL CART CTLA-4 PD-1 以 及 PDL-1 记 忆 性 T 细 胞 治 疗 技 术, 需 要 提 供 更 为 完 整 的 基 础 性 研 究 和 转 化 研 究 的 科 学 数 据, 为 临 床 实 践 提 供 依 据 和 指 导 123

124 2. 免 疫 细 胞 治 疗 乳 腺 癌 的 新 靶 点 的 研 究 (1) 应 用 已 经 明 确 的 可 用 于 抗 乳 腺 癌 的 细 胞 免 疫 治 疗 的 靶 抗 原, 需 借 鉴 国 内 外 的 研 发 和 应 用 经 验, 避 免 重 复 已 经 成 熟 的 研 究 结 果, 同 时 需 重 点 关 注 国 内 外 知 识 产 权 保 护 问 题 (2) 国 内 外 已 经 发 现, 尚 未 应 用 于 抗 乳 腺 癌 的 细 胞 免 疫 治 疗 的 新 靶 抗 原, 重 点 研 究 其 特 异 性 分 布 性 和 可 诱 导 细 胞 免 疫 反 应 的 科 学 依 据, 同 时 注 意 国 内 外 知 识 产 权 保 护 问 题 (3) 新 发 现 的 肿 瘤 抗 原 (TSA) 和 肿 瘤 相 关 抗 原 (TAA), 重 点 提 供 特 异 性 分 布 性 和 可 诱 导 细 胞 免 疫 反 应 的 科 学 依 据, 鼓 励 申 报 全 新 的 知 识 产 权 3. 乳 腺 癌 免 疫 细 胞 治 疗 抑 制 性 因 素 研 究 肿 瘤 可 诱 导 机 体 产 生 免 疫 耐 受, 从 而 抵 御 抗 肿 瘤 的 免 疫 效 应, 并 导 致 肿 瘤 免 疫 逃 逸 肿 瘤 相 关 的 抑 制 性 细 胞 主 要 包 括 CD4+CD25+FOXP3+ 的 Treg 细 胞, 髓 性 前 体 抑 制 细 胞 (MDSC) 和 肿 瘤 相 关 的 巨 噬 细 胞 (TAM) 等 ; 抑 制 性 免 疫 检 查 点 因 素 主 要 包 括 CTLA-4 PD-1 PD-L1 等 控 制 肿 瘤 抑 制 性 细 胞, 尤 其 是 Treg 细 胞, 可 以 研 制 开 发 新 型 体 外 诱 导 培 养 体 系, 不 增 加 免 疫 细 胞 培 养 物 中 Treg 细 胞 的 比 例 和 / 或 绝 对 数 量, 或 是 联 合 应 用 消 除 体 内 外 免 疫 壁 垒 的 方 法 和 药 物, 都 会 增 加 免 疫 细 胞 治 疗 效 果 124

125 4. 抗 乳 腺 癌 治 疗 的 记 忆 性 T 细 胞 操 控 技 术 的 研 发 研 究 记 忆 性 T 细 胞 的 鉴 定 分 离 扩 增 作 用 机 理 生 物 学 行 为 和 特 征 半 衰 期 等, 为 开 发 真 正 的 具 有 治 疗 或 预 防 作 用 的 肿 瘤 细 胞 疫 苗 提 供 科 学 数 据 5. 针 对 乳 腺 癌 干 细 胞 的 靶 向 性 免 疫 细 胞 治 疗 的 研 发 大 量 科 学 证 据 表 明 乳 腺 癌 干 细 胞 是 目 前 临 床 应 用 的 乳 腺 癌 治 疗 手 段 失 败 和 肿 瘤 复 发 甚 至 转 移 的 主 要 原 因, 因 此 如 何 有 效 控 制 和 杀 灭 乳 腺 癌 干 细 胞 是 目 前 亟 待 解 决 的 问 题, 主 要 研 发 方 向 包 括 : (1) 乳 腺 癌 干 细 胞 的 鉴 别 和 确 定 (2) 乳 腺 癌 干 细 胞 靶 抗 原 的 选 择 和 确 定 (3) 针 对 乳 腺 癌 干 细 胞 的 靶 向 性 细 胞 免 疫 治 疗 技 术 平 台 的 建 立 6. 适 应 乳 腺 癌 类 型 特 点 的 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 研 究 (1) 各 临 床 分 期 的 乳 腺 癌 : 免 疫 细 胞 治 疗 方 法 异 同 点 研 究 (2)Her-2/neu 阳 性 乳 腺 癌 : 针 对 HER-2 的 不 同 靶 向 性 免 疫 细 胞 治 疗 方 法 选 择 (3) 三 阴 乳 腺 癌 : 新 靶 点 和 适 合 的 免 疫 细 胞 治 疗 方 法 筛 选 研 究 (4) 联 合 手 术 化 疗 或 / 和 放 疗 的 乳 腺 癌 : 联 合 应 用 的 免 疫 细 胞 治 疗 方 法 研 究 125

126 7. 抗 三 阴 乳 腺 癌 的 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 平 台 的 建 立 和 优 化 Her-2/neo 抗 原 雌 激 素 受 体 (ER) 和 孕 激 素 受 体 (PR) 均 为 阴 性 的 乳 腺 癌, 俗 称 为 三 阴 该 类 乳 腺 癌 的 特 点 为 肿 瘤 生 长 迅 速, 复 发 率 高, 转 移 快, 死 亡 率 高, 传 统 的 内 分 泌 治 疗 无 效, 化 疗 效 果 极 差, 用 于 乳 腺 癌 的 单 克 隆 抗 体 治 疗 无 效 而 且, 近 年 来, 该 类 乳 腺 癌 患 者 的 发 病 率 升 高 趋 势 明 显, 并 呈 年 轻 化 的 特 点 免 疫 细 胞 治 疗 具 有 一 定 疗 效, 因 此 建 立 和 优 化 针 对 三 阴 乳 腺 癌 的 免 疫 细 胞 治 疗 具 有 重 大 意 义 主 要 研 发 方 向 包 括 : (1) 三 阴 乳 腺 癌 靶 抗 原 的 选 择 和 确 定 ; (2) 针 对 三 阴 乳 腺 癌 的 靶 向 性 细 胞 免 疫 治 疗 技 术 平 台 的 建 立 ; (3) 免 疫 细 胞 治 疗 三 阴 乳 腺 癌 的 前 瞻 性 临 床 研 究 8. 抗 乳 腺 癌 细 胞 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 / 产 品 的 优 化 和 联 合 应 用 目 前 国 内 外 已 发 展 多 种 细 胞 免 疫 治 疗 技 术 用 于 临 床 实 践, 针 对 乳 腺 癌 的 细 胞 免 治 疗 技 术 有 其 自 身 特 点, 不 能 完 全 照 搬 照 抄 其 它 肿 瘤 的 细 胞 治 疗 技 术 和 方 法, 必 须 对 抗 乳 腺 癌 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 进 行 优 化 和 组 合 应 用, 主 要 目 标 是 提 高 免 疫 效 应 细 胞 的 质 量, 调 整 患 者 的 免 疫 功 能, 最 大 限 度 杀 伤 乳 126

127 腺 癌 细 胞, 探 索 出 适 合 乳 腺 癌 治 疗 的 最 佳 方 法 和 方 案, 造 福 广 大 乳 腺 癌 患 者 9. 开 展 针 对 乳 腺 癌 的 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 的 前 瞻 性 临 床 研 究 按 照 国 际 国 内 正 规 的 临 床 试 验 标 准, 与 深 圳 市 和 / 或 国 内 具 有 资 质 的 医 院 合 作 开 展 研 究 性 临 床 试 验 项 目, 采 用 单 臂 或 双 臂 随 机 盲 法 以 及 多 中 心 临 床 试 验 设 计 方 法, 获 取 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 在 临 床 实 践 中 的 科 学 数 据, 主 要 包 括 治 疗 的 总 体 反 应 率 无 进 展 生 存 期 无 疾 病 生 存 期 生 活 质 量 指 标 等 多 方 面 客 观 的 疗 效 证 据, 为 大 规 模 推 广 治 疗 乳 腺 癌 的 免 疫 细 胞 技 术 / 产 品 提 供 参 考, 为 向 国 家 相 关 机 构 申 报 国 家 级 临 床 试 验 奠 定 基 础 10. 研 究 开 发 和 / 或 引 进 转 化 具 有 自 主 知 识 产 权 的 新 一 代 抗 乳 腺 癌 的 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 / 产 品 (1) 在 借 鉴 国 内 外 的 研 究 和 应 用 成 果 的 基 础 上, 研 制 具 有 自 主 知 识 产 权 的 抗 乳 腺 癌 的 靶 向 性 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 和 产 品 (2) 引 进 转 化 具 有 知 识 产 权 的 新 一 代 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 / 产 品, 尤 其 是 能 够 维 持 免 疫 细 胞 治 疗 长 期 功 效, 能 增 强 记 忆 性 免 疫 细 胞 功 能, 对 调 节 性 T 细 胞 比 例 和 / 或 绝 对 数 量 无 增 加 127

128 作 用 的 新 型 免 疫 及 细 胞 治 疗 技 术 / 产 品, 实 现 国 内 外 免 疫 细 胞 技 术 的 同 步 发 展 ( 四 ) 发 展 成 果 预 期 的 考 核 指 标 包 括 : 开 展 临 床 试 验 获 得 临 床 应 用 批 件 专 利 申 请 文 章 发 表 深 圳 免 疫 细 胞 治 疗 的 未 来 发 展 成 果 主 要 体 现 在 五 个 一 的 实 现 : 1. 一 支 免 疫 及 细 胞 治 疗 领 域 的 人 才 梯 队 形 成 伴 随 着 深 圳 免 疫 及 细 胞 治 疗 领 域 的 快 速 发 展, 将 吸 引 更 多 的 免 疫 及 细 胞 治 疗 领 域 的 专 业 技 术 人 才 来 深 发 展 充 分 发 挥 行 业 内 领 军 人 物 的 带 头 指 导 作 用, 发 挥 骨 干 青 年 人 才 的 专 业 技 术 优 势 和 实 干 精 神, 培 养 以 研 究 生 大 学 生 为 主 体 的 后 辈 力 量, 将 在 深 圳 打 造 出 一 个 多 学 科 背 景, 精 力 充 沛, 视 野 开 阔 的 免 疫 生 物 专 业 人 才 梯 队, 有 力 地 参 与 国 内 外 的 竞 争 2. 一 个 免 疫 及 细 胞 治 疗 领 域 的 产 学 研 联 盟 成 立 免 疫 及 细 胞 治 疗 技 术 / 产 品 的 开 发 转 化 应 用 要 求 建 立 企 业 牵 头 组 织 高 等 院 校 和 科 研 院 所 医 院 共 同 参 与 的 创 新 体 系, 要 求 成 立 产 学 研 战 略 联 盟 ( 基 地 孵 化 器 等 ) 合 力 推 动 免 疫 及 细 胞 治 疗 领 域 的 快 速 发 展 128

129 3. 一 个 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 / 产 品 群 形 成 在 抗 肿 瘤 免 疫 细 胞 治 疗 发 挥 主 要 作 用 的 细 胞 产 品 群, 分 别 包 括 DC CTL( 含 CD8+T 细 胞 ) TIL 以 及 NK 细 胞 等 (1) 确 定 进 行 一 次 治 疗 所 需 要 的 肿 瘤 患 者 的 外 周 血 量 PBMC 数 量 以 及 PBMC 中 单 核 细 胞 和 淋 巴 细 胞 数 量 的 最 低 和 最 高 标 准, 并 提 供 标 准 的 科 学 证 据 (2) 为 使 抗 肿 瘤 细 胞 免 疫 治 疗 发 挥 作 用, 确 定 每 次 治 疗 的 剂 量, 即 效 应 细 胞 的 数 量, 包 括 最 低 和 最 高 剂 量, 并 提 供 相 应 的 科 学 证 据 4. 细 胞 免 疫 治 疗 技 术 的 相 关 产 品 群 细 胞 免 疫 治 疗 的 相 关 产 品 群 主 要 是 指 用 于 靶 向 性 细 胞 免 疫 治 疗 的 抗 原 和 抗 体 等 (1)DC 细 胞 治 疗 及 其 以 DC 为 基 础 的 CTL 治 疗 技 术 的 产 品 : A. 蛋 白 抗 原 蛋 白 抗 原 是 指 肿 瘤 抗 原 (TA) 或 肿 瘤 相 关 抗 原 (TAA) 其 来 源 细 胞 免 疫 原 性 转 染 效 率 在 细 胞 中 的 半 衰 期 诱 导 细 胞 免 疫 反 应 的 能 力 以 及 能 否 诱 导 产 生 与 治 疗 无 关 的 免 疫 反 应, 甚 至 是 不 利 的 反 应 都 应 深 入 研 究, 并 提 供 研 究 数 据 加 以 证 明 建 立 产 业 化 的 工 艺 和 技 术 的 方 法 和 标 准 B. 寡 肽 和 多 肽 类 抗 原 同 蛋 白 抗 原 的 研 发 方 向, 此 外 还 应 阐 明 肽 类 抗 原 与 MHCI 类 分 子 的 关 系 129

130 C. 抗 原 mrna 包 括 TA 和 TAA 的 mrna. 攻 关 方 向 与 上 述 A 和 B 相 同, 此 外, 还 应 阐 明 细 胞 外 的 半 衰 期 以 及 外 源 性 基 因 是 否 进 入 人 体 的 科 学 证 据 D. 病 毒 载 体 携 带 的 抗 原 基 因 包 括 TA 和 TAA 基 因 所 用 病 毒 载 体 包 括 腺 病 毒 (Ad) 腺 相 关 病 毒 (AAV) 逆 转 录 病 毒 慢 病 毒 以 及 疱 疹 病 毒 等 攻 关 方 向 与 上 述 相 同, 此 外 还 应 研 发 证 明 产 品 中 是 否 存 在 野 生 型 病 毒 如 何 防 止 野 生 型 病 毒 污 染 基 因 是 否 进 入 人 体 以 及 致 病 性 病 毒 载 体 (AAV 除 外, 应 其 是 非 致 病 性 病 毒 ) 是 否 存 在 潜 在 性 危 险, 并 提 供 相 应 的 科 学 证 据 (2) 基 因 修 饰 的 肿 瘤 特 异 性 T 细 胞 产 品 : 主 攻 方 向 和 内 容 与 D 相 同 (3) 抗 体 修 饰 的 T 细 胞 产 品 : 不 按 照 第 三 类 医 疗 技 术 标 准, 而 应 按 照 国 家 cfda 规 定 的 生 物 医 药 标 准 进 行 研 发 5. 一 个 抗 乳 腺 癌 免 疫 及 细 胞 治 疗 技 术 / 产 品 信 息 共 享 平 台 建 立 以 免 疫 及 细 胞 治 疗 技 术 / 产 品 信 息 共 享 平 台 为 依 托, 可 以 分 享 抗 乳 腺 癌 细 胞 免 疫 治 疗 的 相 关 信 息 和 进 展, 例 如 : (1) 靶 向 性 抗 原 和 抗 体 免 疫 知 识 (2) 免 疫 及 细 胞 治 疗 技 术 / 产 品 临 床 应 用 具 体 知 识 (3) 免 疫 及 细 胞 治 疗 技 术 / 产 品 质 量 控 制 标 准 130

131 分 享 不 涉 及 知 识 产 权 保 护 的 非 关 键 性 免 疫 基 础 知 识 和 应 用 细 节 的 信 息 有 助 于 加 快 深 圳 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 / 产 品 的 研 发 进 程 6. 一 个 新 兴 优 势 产 业 初 具 发 展 规 模 在 深 圳 免 疫 和 细 胞 治 疗 领 域 内 的 人 才 信 息 技 术 产 品 产 业 建 设 等 方 面 显 现 的 发 展 优 势, 必 将 促 进 深 圳 整 个 免 疫 细 胞 治 疗 产 业 的 做 大 做 强 初 具 规 模 的 这 个 新 兴 生 物 医 药 产 业, 符 合 深 圳 的 整 体 发 展 规 划, 不 仅 给 人 们 的 生 活 带 来 福 祉, 也 将 获 得 良 好 的 社 会 经 济 效 益 131

132 第 五 章 乳 腺 癌 技 术 路 线 图 实 施 路 径 一 高 危 人 群 早 期 诊 断 年 发 展 战 略 与 国 际 技 术 同 步, 开 展 乳 腺 癌 高 危 人 群 早 筛 早 检 技 术 和 产 品 研 究 发 展 目 标 建 立 乳 腺 癌 大 数 据 平 台 开 发 乳 腺 癌 早 期 检 测 技 术 并 形 成 行 业 规 范 建 立 产 学 研 医 联 动 机 制 建 立 深 圳 市 乳 腺 癌 发 生 模 型 技 术 开 发 深 圳 市 乳 腺 癌 流 行 病 学 调 查 研 究 乳 腺 癌 高 危 人 群 筛 查 技 术 开 发 乳 腺 癌 精 确 分 子 分 型 标 记 物 研 究 乳 腺 癌 早 期 检 测 及 监 控 技 术 研 究 乳 腺 癌 数 据 库, 预 测 和 评 估 模 型, 质 量 管 理 体 系 和 检 测 性 能 标 准, 检 测 系 统 和 软 件, 公 共 平 台 预 期 成 果 ( 考 核 指 标 ) 获 得 CFDA 认 证 资 质 的 检 测 服 务 检 测 试 剂 盒 和 医 疗 器 械, 以 及 专 利 申 请 和 文 章 发 表 132

133 二 分 子 机 制 及 新 药 靶 标 研 究 年 发 展 战 略 开 展 乳 腺 癌 的 分 子 机 制 及 新 药 靶 标 研 究, 产 生 一 系 列 具 有 国 际 影 响 和 自 主 知 识 产 权 的 创 新 研 究 成 果 发 展 目 标 产 生 乳 腺 癌 分 子 机 制 及 新 药 靶 标 研 究 成 果, 并 据 此 研 发 乳 腺 癌 的 诊 断 预 防 和 治 疗 产 生 重 要 影 响 的 技 术 和 产 品 技 术 开 发 乳 腺 癌 新 颖 靶 向 分 子 的 发 现 与 鉴 定 乳 腺 癌 相 关 的 重 要 信 号 通 路 的 研 究 乳 腺 癌 相 关 的 重 要 基 因 及 其 蛋 白 的 研 究 乳 腺 癌 相 关 的 重 要 细 胞 过 程 的 研 究 乳 腺 癌 相 关 的 肿 瘤 干 细 胞 研 究 乳 腺 癌 耐 药 机 制 及 评 估 指 标 研 究 乳 腺 癌 相 关 的 重 要 能 量 代 谢 相 关 分 子 的 调 控 网 络 及 干 预 策 略 研 究 实 验 室 至 临 床 的 转 化 医 学 研 究 预 期 成 果 ( 考 核 指 标 ) 新 的 早 期 诊 断 和 预 后 生 物 标 记 分 子 新 的 治 疗 靶 点 新 的 致 病 耐 药 转 移 和 复 发 机 理 潜 在 肿 瘤 生 物 标 志 物 的 发 现 提 交 相 应 的 专 利 申 请 和 文 章 发 表 133

134 三 新 药 研 发 ( 一 ) 抗 体 / 重 组 蛋 白 药 物 / 疫 苗 年 发 展 战 略 开 发 乳 腺 癌 的 生 物 技 术 药 物 ( 抗 体 和 重 组 蛋 白 药 物 / 疫 苗 ) 发 展 目 标 建 成 国 内 领 先 的 乳 腺 癌 抗 体 / 重 组 蛋 白 药 物 研 发 和 产 业 化 产 业 链 形 成 产 学 研 医 集 聚 效 应, 提 升 深 圳 市 的 抗 体 / 重 组 蛋 白 药 物 / 疫 苗 研 发 和 产 业 化 水 平 技 术 开 发 抗 体 / 重 组 蛋 白 药 物 筛 选 平 台 技 术 稳 定 高 产 细 胞 株 构 建 和 克 隆 技 术 哺 乳 动 物 细 胞 流 加 培 养 工 艺 放 大 技 术 大 规 模 抗 体 / 重 组 蛋 白 高 效 纯 化 技 术 新 型 ( 高 浓 度 ) 抗 体 / 重 组 蛋 白 制 剂 技 术 抗 体 / 重 组 蛋 白 蛋 白 质 量 研 究 与 分 析 检 测 技 术 蛋 白 类 药 物 的 新 型 给 药 系 统 ( 装 置 ) 自 体 抗 原 免 疫 修 饰 超 级 抗 原 平 台 技 术 抗 体 耦 联 药 物 技 术 预 期 成 果 ( 考 核 指 标 ) 完 成 临 床 申 报 开 展 临 床 试 验 获 得 生 产 批 件 专 利 申 请 文 章 发 表 134