农药学学报 2018, 20(4): Chinese Journal of Pesticide Science 研究论文 DOI: /j.issn QuEChERS- 超高效

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1 农药学学报 18, (4): Chinese Journal of Pesticide Science 研究论文 DOI: /j.issn QuEChERS- 超高效液相色谱 -QDa 质谱法快速测定白菜与油菜中 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物残留王纯强 1,, 钱永忠, 章程辉,1, 邱静, (1. 海南大学食品学院, 海口 571;. 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所, 农业部农产品质量安全重点实验室, 北京 181) 摘要 : 基于 QuEChERS 方法, 采用乙腈提取目标物, 采用新型净化装置多功能针式过滤器净化, 以 CORTECS T3 色谱柱 (3. mm 15 mm,.7 μm) 进行液相分离, 通过超高效液相色谱 - QDa 质谱 (UPLC-QDa MS) 单离子扫描模式进行快速测定分析, 建立了白菜与油菜中 15 种氨基甲酸酯类农药及其代谢物残留的快速分析方法, 单个样品处理分析过程不超过 3 min 结果表明 : 在.1~.1 mg/l 范围内, 白菜与油菜中 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物的质量浓度与对应的峰面积间线性关系良好 (r >.99) 在.1~.mg/kg 添加水平下, 回收率处于 68%~ 1% 之间, 相对标准偏差均小于 15% (n = 3), 方法检出限范围 (LOD,S/N 3) 为.1~.4 mg/kg, 定量限 (LOQ,S/N 1 且回收率处于 6%~1% 之间 ) 处于.5~.1 mg/kg 之间该方法准确快速稳定, 适合基层实际检测需要关键词 : QuEChERS; 超高效液相色谱 - 质谱 ; 多功能针式过滤器 ; 油菜 ; 白菜 ; 氨基甲酸酯 ; 代谢物 ; 残留中图分类号 :S48.3;TQ45.63 文献标志码 :A 文章编号 :18-733(18) Residue determination of 15 carbamates and their metabolites in Chinese cabages and pakchoi by QuEChERS-ultra high performance liquid chromatography-qda mass spectrometry WANG Chunqiang 1,, QIAN Yongzhong, ZHANG Chenghui,1, QIU Jing, (1. College of Food Science and Technology, Hainan University, Haikou 571, China;. Institute of Quality Standard & Testing Technology for Agro-Products, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Key Laboratory of Agri-Food Quality and Safety, Ministry of Agriculture, Beijing 181, China) Abstract: A rapid method for the residue determination of 15 carbamates and their metabolites in Chinese cabage and pakchoi by ultra high performance liquid chromatography-qda mass spectrometry (UPLC-QDa MS) was established. Sample pretreatment was based on the QuEChERS method. The target substance was extracted with acetonitrile and purified with multi-functional needle filter (MFF). Column CORTECS T3 (3. mm 15 mm,.7 μm) was used in the chromatographic separation, and 收稿日期 :18-4-1; 录用日期 : 基金项目 : 中国农业科学院科技创新工程. 作者简介 : 王纯强, 男, 硕士研究生, @qq.com; 章程辉, 通信作者 (Author for correspondence), 男, 博士, 教授, 主要从事农药残留研究, zchlm@163.com; 邱静, 共同通信作者 (Co-author for correspondence), 男, 博士, 研究员, 主要从事农兽药残留分析与安全性评价研究, qiuj8@16.com

2 46 农药学学报 Vol. QDa mass spectrometry with single ion scan mode analysis was used to detect pesticides. The results showed that a good linear relationships (r >.99) in two matrices were obtained for 15 pesticides and their metabolites in the range of.1-.1 mg/l. The recoveries of the target compounds in two matrices were both 68%-1%, and the RSDs were both less than 15% (n = 3). The limits of detection (LOD, S/N 3) ranged from.1 to.4 mg/kg. The limits of quantitation (LOQ, S/N 1 and recovery in the range of 6%-1%) were.5-.1 mg/kg. These results indicated that the developed method was accurate, rapid and stable, and suitable for the detection requirements in the grass-roots unit. Keywords: QuEChERS; ultra performance liquid chromatography-mass spectrometry (UPLC-MS); multi-functional needle filter; Chinese cabbage; carbamates; pakchoi; metabolite; residue 氨基甲酸酯类农药是一类高效广谱型杀虫剂, 具有分解快残留期短代谢迅速的特性, 通过抑制昆虫神经传导物质乙酰胆碱酯酶的活性 [1-] 达到杀虫目的随着该类农药的大量使用, 导 [3-4] 致人畜中毒现象时有发生因此, 越来越多的国家和地区对氨基甲酸酯类农药在食品中的残留 [5] 都做了严格限量规定, 其分析检测也备受关注目前国内外对氨基甲酸酯类农药残留的检测 [6] 方法研究较多, 主要有酶抑制法气相色谱- 质 [7] 谱法高效液相色谱法 (HPLC) [8-1] 和液相色谱 - [11-13] 串联质谱法与 HPLC 方法相比, 超高效液相色谱 (UPLC) 有更高的柱效和更快的速度, 因此其峰容量分离效率灵敏度和分辨率显著提高, [14] 更适合分析较为复杂的体系 ACQUITY QDa 质谱检测器作为单级质谱, 无需柱后衍生, 检测前无需前调谐, 使用维护及体积与常规的紫外检测器一样, 操作简易快速高效, 为检测分析方法的开发与建立节约大量时间, 可满足基层单 [15] 位高效监督执法的检测需求常见蔬菜中氨基甲酸酯类农药及代谢物残留检测的样品前处理方法有固相微萃取 (SPME) 固相萃取 (SPE) 液相微萃取 (LPME) 和 QuEChERS 方法等其中, QuEChERS 方法前处理时间短, 可显著提高检测 [16-19] 效率据报道, 采用多塞过滤净化法 (multiplug filtration cleanup,m-pfc) 方法可进一步提高农药残留检测的效率该方法通过对 QuEChERS 方法进行改进, 将吸附剂装入注射器中, 通过多次抽吸完成净化, 净化液需再次通过微孔滤膜过 [-1] 滤后上机测定与 m-pfc 相比, 新型多功能针式过滤器 (multi-functional needle filter, MFF) 处理速度更快, 操作更为简易, 将净化和过滤步骤整合, 一次推注即可完成吸附净化与过膜步骤, 然后直接测定, 时间缩短至 1min 以内鉴于此, 本研究拟采用 MFF, 结合快速质谱 QDa 对 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物进行快速测定, 旨在建立一种同时快速测定多种氨基甲酸酯类农药的方法 1 材料与方法 1.1 仪器试剂与材料 UPLC-ACQUITY QDa 质谱检测器 ( 美国沃特世公司 ) ;ACADEEMIC 纯水仪 ( 美国密理博公司 ) ; ME8E 称量天平和 AL14 分析天平 ( 梅特勒 - 托利多仪器 ( 上海 ) 有限公司 );GENIUS 3 涡旋仪 ( 德国艾卡仪器设备有限公司 ) ;ST16R 冷冻高速离心机 ( 赛默飞世尔科技 ( 中国 ) 有限公司 ) ;QUICLEAR 多功能针式过滤器 (15 mg MgSO 4 5 mg PSA 5 mg C 18 5 mg GCB) 及净化管 (P-QuEChERS- AOAC 1 F-QuEChERS-AOAC 31 F- QuEChERS-AOAC 3 F-QuEChERS-AOAC 33) ( 天津阿尔塔科技有限公司 ) 15 种氨基甲酸酯农药及代谢物 : 霜霉威 (propamocarb) 涕灭威亚砜 (aldicarb-sulfoxide) 杀线威 (oxamyl) 涕灭威砜 (aldicarb-sulfone) 灭多威 (methomyl) 三羟基克百威 (carbofuran-3- hydroxy) 涕灭威 (aldicarb) 速灭威 (metolcarb) 抗蚜威 (pirimicarb) 残杀威 (propoxur) 克百威 (carbofuran) 甲萘威 (carbaryl) 异丙威 (isoprocarb) 仲丁威 (fenobucarb) 和灭虫威 (methiocarb), 纯度均超过 97%, 购自天津阿尔塔科技有限公司将各农药的标准储备液 (1 g/l) 用乙腈稀释, 配制成 1 mg/l 的混合标准溶液, 于 18 保存, 备用

3 No. 4 王纯强等 : QuEChERS- 超高效液相色谱 -QDa 质谱法快速测定白菜与油菜中 15 种氨基甲酸酯类农药甲醇 ( 质谱纯, 德国默克公司 ) ; 乙腈 ( 质谱纯, 赛默飞世尔科技 ( 中国 ) 有限公司 ) ; 甲酸 ( 质谱纯, 美国 SIGMA-ALDRICH 公司 ) ; 甲酸铵 ( 分析纯, 国药集团团化学试剂有限公司 ) ;P- QuEChERS-EN111 固相萃取提取盐包 (4 g MgSO 4 1 g NaCl 1 g 柠檬酸钠和.5 g 柠檬酸氢二钠 ) ( 天津阿尔塔科技有限公司 ) 白菜油菜样品均购于北京市场 1. 样品制备将白菜或油菜样品高速匀浆后, 称取 15 g ( 精确到.1 g) 于 5 ml 离心管中, 加入 15 ml 乙腈溶液, 漩涡提取 1 min, 加入固相萃取提取盐包, 剧烈振荡 1 min, 于 5 r/min 下离心 5 min; 取 1 ml 上清液, 以逐滴流出 ( 每秒滴左右 ) 的速率通过多功能针式过滤器于进样小瓶, 涡旋振荡 3 s, 待测 1.3 色谱和质谱检测条件色谱条件 Waters CORTECS T3 色谱柱 (3. mm 15 mm,.7 μm) ; 进样量 5 μl; 柱温 4 ; 流动相 A 相为 mmol/l 的甲酸铵水溶液 ( 含体积分数.1% 的甲酸 ),B 相为 mmol/l 的甲酸铵甲醇溶液 ( 含体积分数.1% 的甲酸 ) ; 流速为 1. ml/min; 梯度洗脱程序 :~1 min,5% B; 5~8 min,9% B;8~1 min,5% B 1.3. 质谱条件电喷雾电离模式 (ESI) ; 毛细管电压.5 kv; 离子源温度 1 ; 探针温度 6 ; 正离子扫描模式具体质谱参数见表基质效应基质效应通常由干扰或共同洗脱的基质部分影响电喷雾接口的离子化效率所致, 导致离子抑制或离子增强引起假阴性或假阳性或不精确的定量, 表现为离子增强或抑制作用干扰 [] 本文研究了 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物在白菜和油菜中的基质效应, 并按公式 (1) 进行量化评估, 当基质效应小于 ± % 时为弱基质效应, 而大于等于 ± % 时为强基质效应 [3] 强基质效应需采取补偿措施本研究中分别使用乙腈和基质空白溶液将 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物混合标准品配成 5 μg/l 进行基质效应的量化评估 ( ) Am M i = 1 1% (1) A c 式中,A m 表示基质溶液中农药的峰面积 ; A c 表示纯溶剂中农药的峰面积 ;M i 表示农药的基质效应表 1 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物的质谱条件参数 Table 1 Mass spectrometric parameters for the detection of 序号 No 标准溶液配制及标准曲线绘制分别取一定量 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物的标准品于 1 ml 容量瓶中, 用乙腈稀释, 配成质量浓度为 1 mg/l 的混合标准储备液试验时, 用基质空白溶液逐级稀释成质量浓度为和. mg/l 的基质匹配标准溶液, 按 1.3 节条件测定以目标组分的峰面积 (y) 对相应的质量浓度 (x) 绘制标准曲线结果与分析.1 色谱条件优化 15 carbamates and their metabolites 化合物 Compound 霜霉威 propamocarb 涕灭威亚砜 aldicarb-sulfoxide 保留时间 Retention time/min 选择离子 Selected ions, m/z 锥孔电压 Cone voltage/ V 杀线威 oxamyl 涕灭威砜 aldicarbsulfone 灭多威 methomyl 三羟基克百威 carbofuran-3-hydroxy 涕灭威 aldicarb 速灭威 metolcarb 抗蚜威 pirimicarb 残杀威 propoxur 克百威 carbofuran 甲萘威 carbaryl 异丙威 isoprocarb 仲丁威 fenobucarb 灭虫威 methiocarb 注 : 代谢物 Note: metabolite. 选用水和甲醇作为流动相时, 仲丁威出现 3 个色谱峰, 甲萘威跟灭虫威的信噪比小于 3, 霜霉威的保留时间重现性较差由于氨基甲酸酯类农药极性较强, 所以添加甲酸有助于峰的形成并有效提高检测灵敏度当以体积分数.1% 甲酸水溶液和.1% 甲酸甲醇溶液作为流动相时, 涕灭威砜的检测灵敏度低正离子模式下, 流动相中加入甲酸铵有利于分析物预形成 [M+H] + 和 [M+NH 4 ] +, 且能使保留时间更稳定峰形更好 [4] 因此, 在流动相中分别加入 mmol/l 甲酸铵进行梯度洗脱

46 农药学学报 Vol. 结果发现, 在流动相为.1% 甲酸水溶液 ( 含 mmol/ L 甲酸铵 ) 和.1% 甲酸甲醇溶液 ( 含 mmol/l 甲酸铵 ) 的情况下,15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物在 1 min 内全部出峰, 且灵敏度较好选用适用于极性较强化合物的 3 种色谱柱 Agilent XDB-C 18 (.1 mm 15 mm, 3.

质谱条件优化在正离子模式下, 对 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物的标准溶液 (5 μg/l) 进行全扫描, 从中筛选出灵敏度较好的离子作为监测离子, 以单离子扫描模式 (SIR) 找到监测离子的最佳锥孔电压, 优化后的结果见表 1 在此条件下,15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物均能进行有效的检测 ( 图 1) 强度 Intensity 1 6 1 7.5 5..5 1 3 4 5 6 4.

4 46 农药学学报 Vol. 结果发现, 在流动相为.1% 甲酸水溶液 ( 含 mmol/ L 甲酸铵 ) 和.1% 甲酸甲醇溶液 ( 含 mmol/l 甲酸铵 ) 的情况下,15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物在 1 min 内全部出峰, 且灵敏度较好选用适用于极性较强化合物的 3 种色谱柱 Agilent XDB-C 18 (.1 mm 15 mm, 3.5 μm) Ultra AQ C 18 (1 mm.1 mm, 3 μm) Waters CORTECS T3 (4.6 mm 15 mm,.7 μm) 对 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物进行分离发现在 UPLC 中, 色谱柱的粒径对 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物的分离有较大影响, 粒径越小, 分离效果越好, 因此选择 CORTCS T3 进行分析. 质谱条件优化在正离子模式下, 对 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物的标准溶液 (5 μg/l) 进行全扫描, 从中筛选出灵敏度较好的离子作为监测离子, 以单离子扫描模式 (SIR) 找到监测离子的最佳锥孔电压, 优化后的结果见表 1 在此条件下,15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物均能进行有效的检测 ( 图 1) 强度 Intensity 保留时间 Retention time/min 图中各色谱峰对应的序号和名称与表 1 中序号和名称一致 The number and names of peaks are identical to those in Table 1. 图 1 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物提取离子色谱图 Fig. 1 Extraction ion chromatogram of 15 carbamates and their metabolites.3 QuEChERS 方法的优化.3.1 提取溶剂的优化提取溶剂分别为乙腈和 1% 乙酸 - 乙腈混合溶液 ( 将体积分数为 1% 的乙酸溶于乙腈 ), 其他前处理步骤相同, 添加水平为.5 mg/kg,3 次重复, 回收率取平均值由图可知 : 采用体积分数为 1% 乙酸乙腈溶液 (RSDs < 7%, n = 3) 为提取溶剂时, 油菜中回收率在 8%~1% 之间的农药只有 7 种, 回收率小于 1% 的有 7 种, 且这 7 种农药产生了一定的基质增强效果以乙腈作为提取溶剂时 (RSDs < 1%,n = 3), 白菜及油菜中回收率处于 8%~ 1% 的农药分别为 1 种和 13 种, 提取回收效果相对较好因此, 选用乙腈作为油菜及白菜的提取溶剂.3. 净化方法的优化采用 QuEChERS 为净化方法, 以白菜与油菜作为基质, 选取 3 种多功能针式过滤器 ( 过滤器 1,15 mg MgSO 4 5 mg PSA; 过滤器,15 mg MgSO 4 5 mg PSA 5 mg C 18 ; 过滤器 3,15 mg MgSO 4 5 mg PSA 5 mg C 18 5 mg GCB) 与 1 种净化管 (3 mg MgSO 4 5 mg PSA 5 mg C 18 ), 添加水平为.5 mg/kg, 最后以白菜及油菜的回收率平均值进行对比多功能针式过滤器将净化和过滤膜步骤整合, 简化了吸附剂涡旋振荡净化, 离心移取上清液, 最后微孔滤膜过滤多个步骤, 极大地缩短了前处理时间, 整个净化过程不超过 1min, 操作简易高效由图 3 可以看出 : 采用多功能针式过滤器, 霜霉威的回收率均好于净化管使用多功能过滤器 1 ( 不含 C 18 ) 净化时,15 种农药在油菜中的回收率波动较大, 而在白菜中的回收率则较为稳定 ; 采用添加 C 18 的多功能针式过滤器在油菜中的回收率比较稳定 ; 添加了 5 mg 石墨化碳黑农药数量 Number of pesticides % 乙酸乙腈 Acetonitrile with 1% acetic acid 乙腈 Acetonitrile 8~1 >1 <8 回收率 Recovery/% 3 A 农药数量 Number of pesticides % 乙酸乙腈 B Acetonitrile with 1% acetic acid 乙腈 Acetonitrile 7 8~1 >1 <8 回收率 Recovery/% 图白菜 (A) 和油菜 (B) 中不同提取溶剂的 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物回收率分布 Fig. Distribution of 15 carbamates and their metabolites with different extractants in Chinese cabbage (A) and pakchoi (B)

5 No. 4 王纯强等 : QuEChERS- 超高效液相色谱 -QDa 质谱法快速测定白菜与油菜中 15 种氨基甲酸酯类农药 (GCB) 的多功能针式过滤器 3 对色素具有显著的吸附作用, 降低了油菜中的基质效应, 同时对 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物也无明显的吸附作用 [5] 因此, 选用多功能针式过滤器 3 1 A 霜霉威 propamocarb 杀线威 oxamyl 灭多威 methomyl 涕灭威 aldicarb 速灭威 metolcarb 抗蚜威 pirimicarb 残杀威 propoxur 克百威 carbofuran 甲萘威 carbaryl 回收率 Recovery/% 异丙威 isoprocarb 仲丁威 fenobucarb 灭虫威 methiocarb 14 1 B Recovery/% 霜霉威 propamocarb 涕灭威亚砜 aldicarb-sulfoxide 杀线威 oxamyl 涕灭威砜 aldicarb-sulfone 灭多威 methomyl 三羟基克百威 carbofuran-3-hydroxy 涕灭威 aldicarb 速灭威 metolcarb 抗蚜威 pirimicarb 残杀威 propoxur 克百威 carbofuran 甲萘威 carbaryl 异丙威 isoprocarb 仲丁威 fenobucarb 灭虫威 methiocarb 涕灭威亚砜 aldicarb-sulfoxide 涕灭威砜 aldicarb-sulfone 三羟基克百威 carbofuran-3-hydroxy 净化管 Cleanup tube 多功能针式过滤器 1 MFF-1 多功能针式过滤器 MFF- 图 3 白菜 (A) 和油菜 (B) 中多功能针式过滤器的回收率比较多功能针式过滤器 3 MFF-3 Fig. 3 Comparison of the recoveries of different multi-function filters in Chinese cabbage (A) and pakchoi (B).4 基质效应结果见图 4, 油菜中的 11 种农药以及白菜中的 8 种农药的基质效应均大于 %, 属于强基质效应为降低基质效应, 常用的方法有基质匹配标准曲线法降低进样量采用性质相近或稳定 [6-7] 同位素内标法等其中, 基质匹配标准曲线法操作简便廉价且效果良好, 因此本研究采用该方法降低基质效应.5 方法学评价.5.1 方法的线性范围和灵敏度结果 ( 表 ) 表明 : 在.1~.1mg/L 范围内,15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物的质量浓度与对应的峰面积间线性关系良好,r 均大于.99, 方法的检出限 (LOD) 为.1~.4 mg/kg, 定量限 (LOQ) 为.5~.1 mg/kg 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物在国内外的最大残留限量均大于.1 mg/kg, 该方法的定量限均小于或等于.1 mg/kg, 符合农药残留限量要求.5. 方法的准确度和精密度在白菜和油菜中分别添加 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物混合标准溶液, 添加水平分别为.1.5 和. mg/kg, 每个水平 3 次重复, 回收率采用基质匹配校正曲线进行计算

6 464 农药学学报 Vol 油菜 Packhoi 白菜 Chinese cabbage 4 M i /% 4 霜霉威 propamocarb 涕灭威亚砜 aldicarb-sulfoxide 杀线威 oxamyl 涕灭威砜 aldicarb-sulfone 灭多威 methomyl 三羟基克百威 carbofuran-3-hydroxy 涕灭威 aldicarb 速灭威 metolcarb 抗蚜威 pirimicarb 残杀威 propoxur 克百威 carbofuran 甲萘威 carbaryl 异丙威 isoprocarb 仲丁威 fenobucarb 灭虫威 methiocarb 图 4 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物在白菜及油菜中的基质效应 Fig. 4 Matrix effects of 15 carbamates and their metabolites in Chinese cabbage and pakchoi 表白菜和油菜中 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物的线性方程检出限定量限 ( 线性范围 :.1~.1mg/L) Table Linear equations, LODs and LOQs of 15 carbamates and their metabolites in Chinese cabbage and pakchoi 农药 Pesticide 基质 Matrix (Linear range:.1-.1 mg/l) 线性方程 Linear equation 相关系数 r 检出限 LOD/(mg/kg) 定量限 LOQ/(mg/kg) 霜霉威 propamocarb 油菜 Pakchoi y = 49 1x 白菜 Chinese cabbage y = 56 36x 残杀威 propoxur 油菜 Pakchoi y = 47 95x 白菜 Chinese cabbage y = x 克百威 carbofuran 油菜 Pakchoi y = 97 5x 白菜 Chinese cabbage y = x 甲萘威 carbaryl 油菜 Pakchoi y = 83 79x 白菜 Chinese cabbage y = x 异丙威 isoprocarb 油菜 Pakchoi y = 3 77x 白菜 Chinese cabbage y = 8 88x 仲丁威 fenobucarb 油菜 Pakchoi y = x 白菜 Chinese cabbage y = 4 11x 灭虫威 methiocarb 油菜 Pakchoi y = x 白菜 Chinese cabbage y = 3 41x 涕灭威亚砜 aldicarb-sulfoxide 油菜 Pakchoi y = x 白菜 Chinese cabbage y = x 涕灭威砜 aldicarb-sulfone 油菜 Pakchoi y = x 白菜 Chinese cabbage y = x 杀线威 oxamyl 油菜 Pakchoi y = 755x 白菜 Chinese cabbage y = 4 68x 灭多威 methomyl 油菜 Pakchoi y = 5 598x 三羟基克百威 carbofuran-3- hydroxy 白菜 Chinese cabbage y = 3 878x 油菜 Pakchoi y = x 白菜 Chinese cabbage y = x 抗蚜威 pirimicarb 油菜 Pakchoi y = 87 76x 白菜 Chinese cabbage y = x

7 No. 4 王纯强等 : QuEChERS- 超高效液相色谱 -QDa 质谱法快速测定白菜与油菜中 15 种氨基甲酸酯类农药农药 Pesticide 基质 Matrix 续表 Table (Continued) 线性方程 Linear equation 相关系数 r 检出限 LOD/(mg/kg) 定量限 LOQ/(mg/kg) 涕灭威 aldicarb 油菜 Pakchoi y = 1 46x 白菜 Chinese cabbage y = 16 76x 速灭威 metolcarb 油菜 Pakchoi y = 4 479x 注 : 代谢物 Note: metabolite. 白菜 Chinese cabbage y = 74x 结果 ( 表 3) 表明 : 在.1~.mg/kg 添加水平下,15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物在油菜中的回收率为 68%~1%,RSD 为.%~1% (n = 3) ; 在白菜中的回收率为 71%~1%,RSD 为.3%~ 农药 Pesticide 表 3 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物在白菜和油菜的添加回收率及相对标准偏差 Table 3 Recoveries and RSDs of 15 carbamates and their metabolites in Chinese cabbage and pakchoi 基质 Matrix 回收率 Recovery/% 相对标准偏差 RSD/%.1 mg/kg.5 mg/kg. mg/kg.1 mg/kg.5 mg/kg. mg/kg 霜霉威 propamocarb 油菜 Pakchoi 白菜 Chinese cabbage 残杀威 propoxur 油菜 Pakchoi 白菜 Chinese cabbage 克百威 carbofuran 油菜 Pakchoi 白菜 Chinese cabbage 甲萘威 carbaryl 油菜 Pakchoi 白菜 Chinese cabbage 异丙威 isoprocarb 油菜 Pakchoi 白菜 Chinese cabbage 仲丁威 fenobucarb 油菜 Pakchoi 白菜 Chinese cabbage 灭虫威 methiocarb 油菜 Pakchoi 白菜 Chinese cabbage 涕灭威亚砜 aldicarb-sulfoxide 油菜 Pakchoi 白菜 Chinese cabbage 涕灭威砜 aldicarb-sulfone 油菜 Pakchoi 白菜 Chinese cabbage 杀线威 oxamyl 油菜 Pakchoi 白菜 Chinese cabbage 灭多威 methomyl 油菜 Pakchoi 白菜 Chinese cabbage 三羟基克百威 carbofuran-3-hydroxy 油菜 Pakchoi 白菜 Chinese cabbage 抗蚜威 pirimicarb 油菜 Pakchoi 白菜 Chinese cabbage 涕灭威 aldicarb 油菜 Pakchoi 白菜 Chinese cabbage 速灭威 metolcarb 油菜 Pakchoi 注 : 代谢物 Note: metabolite. 白菜 Chinese cabbage

8 466 农药学学报 Vol. [8] 15% (n = 3), 其各项指标符合农药残留分析要求证明此样品前处理方法及 UPLC-QDa 快速质谱检测方法快速高效准确, 适用于白菜及油菜中 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物的同时测定, 可以满足基层单位快速检测的需求.6 实样测定对随机购自北京某市场不同时间段的 5 个批次的白菜和油菜按上述方法进行处理和检测果发现, 在 1 个批次的白菜及油菜中检出霜霉威 (.1 1~.1 4 mg/kg) 和三羟基克百威 (.1 mg/kg) 三羟基克百威属于克百威的代谢物, 但本次抽样并未检测出克百威, 表明实际样品中的克百威已降解成三羟基克百威检出量均低于 MRL 值, 证明开发的方法可行有效 3 结论以白菜和油菜中 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物为研究对象, 采用 UPLC-ACQUITY-QDa 方法进行快速检测, 并对 QuEChERS 前处理方法进行了优化对比了不同提取溶剂对目标物的提取效率, 发现在油菜中以 1% 乙酸乙腈溶液作为提取溶剂时, 具有一定的基质增强效应, 而以乙腈作为提取溶剂时, 基质效应相对较小此外, 通过比较不同吸附剂对白菜及油菜的吸附效果, 发现 C 18 能有效提高目标物的回收率,GCB 对油菜中的色素具有显著的净化效果, 且对 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物无明显吸附作用因此, 最终选用 QUICLEAR 多功能针式过滤器 3 对白菜及油菜样品进行净化, 将净化过程缩短至 1min 以内该方法从前处理到仪器测定操作简易, 单个样品的处理时间优化至 3 min 以内, 实现了对白菜和油菜中 15 种氨基甲酸酯类农药及代谢物残留快速有效的检测参考文献 (Reference): [ 1 ] MACHEMER L H, PICKEL M. Carbamate insecticides[j]. Toxicology, 1994, 91(1): [ ] FUKUTO T R. Mechanism of action of organophosphorus and carbamate insecticides[j]. Environ Health Perspect, 199, 87: [ 3 ] JARDIM A N O, BRITO A P, VAN DONKERSGOED G, et al. Dietary cumulative acute risk assessment of organophosphorus, carbamates and pyrethroids insecticides for the Brazilian [ 4 ] [ 5 ] [ 6 ] [ 7 ] [ 8 ] [ 9 ] [1] [11] [1] [13] [14] [15] population[j]. Food Chem Toxicol, 18, 11: 张帆, 黄志强, 张莹, 等. 高效液相色谱 - 串联质谱法测定食品中种氨基甲酸酯类农药残留 [J]. 色谱, 1, 8(4): ZHANG F, HUANG Z Q, ZHANG Y, et al. Determination of carbamate pesticide residues in food by high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry[j]. Chin J Chromatogr, 1, 8(4): 宋稳成, 单炜力, 叶纪明, 等. 国内外农药最大残留限量标准现状与发展趋势 [J]. 农药学学报, 9, 11(4): SONG W C, SHAN W L, YE J M, et al. Present situation and development trend of MRLs for pesticides in and outside China[J]. Chin J Pestic Sci, 9, 11(4): 罗辉泰, 黄晓兰, 吴惠勤, 等. 基于酶抑制原理的电喷雾质谱法快速筛查蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留 [J]. 分析化学, 14, 4(11): LUO H T, HUANG X L, WU H Q, et al. Rapid screening of carbamates pesticide residues in vegetables by electrospray ionization mass spectrometry based on principle of enzyme inhibition[j]. Chin J Anal Chem, 14, 4(11): NÓBREGA I C C, PEREIRA G E, SILVA M, et al. Improved sample preparation for GC-MS-SIM analysis of ethyl carbamate in wine[j]. Food Chem, 15, 177: 3-8. 马纪伟, 闫冬良. HPLC 法测定鱼片猕猴桃中氨基甲酸酯类农药残留量 [J]. 安徽农业科学, 8, 36(6): MA J W, YAN D L. Simultaneous determination of carbamate pesticides in Actinidia deliciosa (A. Chev.) by HPLC[J]. J Anhui Agric Sci, 8, 36(6): MADRERA R R, VALLES B S. Determination of ethyl carbamate in cider spirits by HPLC-FLD[J]. Food Control, 9, (): DE RESENDE MACHADO A M, DAS GRAÇAS CARDOSO M, SACZK A A, et al. Determination of ethyl carbamate in cachaça produced from copper stills by HPLC[J]. Food Chem, 13, 138(-3): DA COSTA MORAIS E H, COLLINS C H, JARDIM I C S F. Pesticide determination in sweet peppers using QuEChERS and LC- MS/MS[J]. Food Chem, 18, 49: MILIADIS G, TSIANTAS P, SIRAGAKIS G. Problems encountered in LC-MS/MS analysis for the determination of pesticide residues in food[j]. J Hell Vet Med Soc, 17, 68(4): JALLOW M F A, AWADH D G, ALBAHO M S, et al. Monitoring of pesticide residues in commonly used fruits and vegetables in kuwait[j]. Int J Environ Res Public Health, 17, 14(8): 833. 罗成江, 陈慧华, 林仙军, 等. UPLC 和 HPLC 法检测猪肉中磺胺类药物残留的比较 [J]. 中国兽药杂志, 1, 46(4): 5-8. LUO C J, CHEN H H, LIN X J, et al. Comparison of UPLC for sulfonamides residues analysis in pork[j]. Chin J Vet Drug, 1, 46(4): 5-8. SPAGGIARI D, MEHL F, DESFONTAINE V, et al. Comparison of liquid chromatography and supercritical fluid chromatography

9 No. 4 王纯强等 : QuEChERS- 超高效液相色谱 -QDa 质谱法快速测定白菜与油菜中 15 种氨基甲酸酯类农药 coupled to compact single quadrupole mass spectrometer for targeted in vitro metabolism assay[j]. J Chromatogr A, 14, 1371: [16] 吴延灿, 戚传勇, 操海群, 等. QuEChERS- 超高效液相色谱 - 串联质谱法测定香菇中 56 种农药残留 [J]. 农药学学报, 18, (1): WU Y C, QI C Y, CAO H Q, et al. Determination of 56 pesticides in Lentinus edodes using QuEChERS-ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry[j]. Chin J Pestic Sci, 18, (1): [17] WILKOWSKA A, BIZIUK M. Determination of pesticide residues in food matrices using the QuEChERS methodology[j]. Food Chem, 11, 15(3): [18] NANTIA E A, MORENO-GONZÁLEZ D, MANFO F P T, et al. QuEChERS-based method for the determination of carbamate residues in aromatic herbs by UHPLC-MS/MS[J]. Food Chem, 17, 16: [19] MORENO-GONZÁLEZ D, HAMED A M, GARCÍA-CAMPAÑA A M, et al. Evaluation of hydrophilic interaction liquid chromatographytandem mass spectrometry and extraction with molecularly imprinted polymers for determination of aminoglycosides in milk and milkbased functional foods[j]. Talanta, 17, 171: [] HAN Y T, SONG L, LIU S W, et al. Simultaneous determination of 14 pesticide residues in Chinese liquor and liquor-making raw materials (sorghum and rice hull) by rapid multi-plug filtration cleanup and gas chromatography-tandem mass spectrometry[j]. Food Chem, 18, 41: [1] QIN Y H, ZHANG J R, ZHANG Y, et al. Automated multi-plug filtration cleanup for liquid chromatographic-tandem mass spectrometric pesticide multi-residue analysis in representative crop commodities[j]. J Chromatogr A, 16, 146: [] KWON H, LEHOTAY S J, GEIS-ASTEGGIANTE L. Variability of matrix effects in liquid and gas chromatography-mass spectrometry analysis of pesticide residues after QuEChERS sample preparation of different food crops[j]. J Chromatogr A, 1, 17: [3] 李蓉, 储大可, 张朋杰, 等. QuEChERS/HPLC-MS/MS 法测定黄瓜菜心葡萄香蕉中 17 种农药残留 [J]. 分析测试学报, [4] [5] [6] [7] [8] 15, 34(5): LI R, CHU D K, ZHANG P J, et al. Determination of 17 pesticide residues in cucumber, flowering cabbage, grape and banana by QuEChERS method coupled with high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry[j]. J Instrum Anal, 15, 34(5): 达晶, 王钢力, 曹进, 等. QuEChERS- 液相色谱 - 串联质谱法测定植物性食品中 3 种氨基甲酸酯类农药残留 [J]. 色谱, 15, 33(8): DA J, WANG G L, CAO J, et al. Determination of 3 carbamate pesticide residues in vegetative foods by QuEChERS-liquid chromatography-tandem mass spectrometry[j]. Chin J Chromatogr, 15, 33(8): 周剑, 王敏, 杨梦瑞. 液相色谱质谱分析中的基质效应研究 [J]. 农产品质量与安全, 18(1): ZHOU J, WANG M, YANG M R. Matrix effect in liquid chromatography-mass spectrometry analysis[j]. Qual Saf Agroproducts, 18(1): 汪传炳, 黄秀根, 樊晓青, 等. 微量叠加定量法校准蔬菜农药残留色谱分析中的基质效应 [J]. 上海农业学报, 13, 9(4): WANG C B, HUANG X G, FAN X Q, et al. Calibration of the matrix effects in vegetable pesticide residue gas chromatographic analysis by a quantitative micro addition method[j]. Acta Agriculturae Shanghai, 13, 9(4): 黄宝勇, 欧阳喜辉, 潘灿平. 色谱法测定农产品中农药残留时的基质效应 [J]. 农药学学报, 5, 7(4): HUANG B Y, OUYANG X H, PAN C P. Matrix effects in the analysis of pesticide residue in agro-products by chromatographic methods[j]. Chin J Pestic Sci, 5, 7(4): 食品安全国家标准食品中农药最大残留限量 : GB [S]. 北京 : 中国标准出版社, 17. National food safety standard. Maximum residue limits for pesticides in food: GB [S]. Beijing: Standards Press of China, 17. ( 责任编辑 : 曲来娥 )

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DOI /j.issn Food Research And Development UPLC-MS/MS 5 0. 118 217 5 38 1 DOI 1.3969/j.issn.5-6521.217.1.28 Food Research And Development 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1. 731 2. 731 - UPLC-MS/MS 5. 1 mol/l ProElut PXC 5 % - Thermo Hypersil Gold mm 2.1 mm 1.9 μm ESI