2013年度微生物检测能力验证结果报告

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1 能力验证 CNAS PT0011 微生物检测能力验证 结果报告 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 2013 年 12 月

2 组织机构 : 山东出入境检验检疫局科技处能力验证负责人 : 赖凡联系人 : 周澎联系电话 :(0532) 实施机构 : 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心负责人 : 梁成珠联系人 : 唐静联系地址 : 青岛市瞿塘峡路 70 号邮政编码 : 联系电话 :(0532) 传真 :( 0532) 技术专家 : 姜英辉 赵丽青 祝素珍 李正义统计专家 : 贾俊涛联系电话 :(0532)

3 目录 一 前言... 1 二 本次计划的特点 目的和意义 计划日程安排 测试项目和要求 参加实验室情况分析 样品制备和发放... 2 三 统计分析的设计及能力评价原则 定量检测项目 定性检测项目... 5 四 统计结果及能力评价... 5 五 技术分析和建议 参考文献 附件 A 实验室检验结果和评价 附件 B Z 值棒状图 附件 C 样品制备和均匀性 / 稳定性检验 C.1 样品制备 C.2 均匀性检验 C.3 稳定性检验 附件 D 相关文件 参试指导书... 93

4 一 前言 2013 年度微生物检测能力验证结果报告 2013 年山东局食品微生物检测能力验证 () 由山东出入 境检验检疫局检验检疫技术中心 (CNAS 认可的能力验证合格提供者,CNAS PT0011) 负责组织实施 本次能力验证计划依据 CNAS-CL03:2010 能力验证提供者认可准则 的 要求运作 本报告是对此次能力验证实施过程和结果的总结, 由 能力验证项目组负责起草, 山东出入境检验检疫局组织专家审核并批准发布 二 本次计划的特点 1 目的和意义 消费者应该有可信赖的安全食品 准确 可靠的检验结果是正确评价和保证 食品安全性的先决条件, 也是国际贸易上公平交易的有力科学依据 在食品安全监管体系当中, 检测工作至关重要 为了解和评价全省检验检疫 系统和出口食品备案企业微生物检测实验室的技术状况, 强化企业自检自控能 力, 提升企业日常监督考核的有效性, 特进行此次能力验证活动 2. 计划日程安排 本次计划具体日程安排见表 1 表 1 计划日程安排 序号 计划过程 日程安排 1 报名截止日期 样品分发日期 结果上报截止日期 报告编制 测试项目和要求 本次计划要求参加实验室按照日常检验程序和方法, 对参试项目菌落总数 大肠菌群 大肠杆菌进行定量检验, 其中大肠杆菌限定平板计数的方法, 大肠菌 群限定 MPN 法 对参试项目金黄色葡萄球菌 沙门氏菌 单核细胞增生李斯特 氏菌和副溶血性弧菌进行定性检验 4. 参加实验室情况分析 1

5 本次计划共有 430 家实验室报名参加, 最终有 426 家实验室参加了测试并反馈了结果 参加本次能力验证计划的实验室主要是涉及山东省省内出口食品备案企业 399 家和山东省辖区内出入境检验检疫系统 22 家 另外,9 家山东省外食品微生物检测实验室也报名参加此次能力验证计划 参试实验室分布状况见图 1. 2% 5% 山东省食品企业山东省外实验室山东省内检疫系统 93% 图 1 参试实验室分布状况 5. 样品制备和发放本次能力验证样品菌落总数 大肠菌群和大肠杆菌是添加了特定浓度标准菌株的乳粉冷冻干燥样品 金黄色葡萄球菌 沙门氏菌 单核细胞增生李斯特氏菌和副溶血性弧菌是添加了特定浓度标准菌株的鱼粉样品 报名参加菌落总数项目 大肠菌群项目或 (/ 和 ) 大肠杆菌项目的实验室获得 1 个样品, 样品标记为 PT A 测试样品设计了 2 个不同浓度, 即高浓度样品和低浓度样品 参试实验室随机获得其中的 1 个浓度样品 金黄色葡萄球菌项目 沙门氏菌项目 副溶血性弧菌项目和单核细胞增生李斯特氏菌项目分别制备了添加阳性菌株的阳性样品和添加干扰菌株的阴性样品 参试实验室获得金黄色葡萄球菌项目的 2 个样品, 样品标记分别为 PT B-1 和 PT B-2; 获得沙门氏菌项目的 2 个样品, 样品标记分别为 PT C-1 和 PT C-2; 获得副溶血性弧菌项目的 2 个样品, 样品标记分别为 PT D-1 和 PT D-2; 获得单核细胞增生李斯特氏菌项目的 2 个样品, 样品标记分别为 PT E-1 和 PT E-2 其中金黄色葡萄球菌项目 副溶血性弧菌项目和单核细胞增生李斯特氏菌项目的两个样品包括一个阳性样品和一个阴性样品, 而沙门氏菌项目的两个样品至少包括一个阳 2

6 性样品, 即两个阳性样品或一个阳性样品和一个阴性样品 样品均盛于玻璃西林瓶中, 并压制铝塑盖密封 样品瓶放于塑料袋中密封, 塑料袋和随样品寄送的说明书均标记有参试实验室的代码 样品放于专门定做的泡沫盒中, 盒中放置生物冰袋, 使样品处于温度较低的环境中, 通过快递寄送发放 样品均匀性 稳定性检验 ( 见附件 C) 测定结果表明, 样品的均匀性和稳定性符合 CNAS GL 能力验证样品均匀性和稳定性评价指南 的要求 6. 样品分配参加菌落总数项目的实验室共 376 家, 其中获得低浓度菌落总数样品的实验室有 192 个, 获得高浓度菌落总数样品的实验室有 184 个 ; 参加大肠菌群项目的实验室共 371 家, 其中获得低浓度大肠菌群样品的实验室有 190 个, 获得高浓度大肠菌群样品的实验室有 181 个 ; 参加大肠杆菌项目的实验室共 213 家, 其中获得低浓度大肠杆菌样品的实验室有 106 个, 获得高浓度大肠杆菌样品的实验室有 107 个 参加金黄色葡萄球菌项目的实验室共 235 家, 其中 PT B-1 是阳性样品的实验室有 107 家,PT B-2 是阳性样品的实验室有 128 家 ; 参加沙门氏菌项目的实验室共 230 家, 其中仅 PT C-1 是阳性样品的实验室有 61 家, 仅 PT C-2 是阳性样品的实验室有 45 家,PT C-1 与 PT C-2 都是阳性样品的实验室有 124 家 ; 参加副溶血性弧菌项目的实验室共 70 家, 其中 PT D-1 是阳性样品的实验室有 36 家,PT D-2 是阳性样品的实验室有 34 家 ; 参加单核细胞增生李斯特氏菌项目的实验室共 82 家, 其中 PT E-1 是阳性样品的实验室有 38 家,PT E-2 是阳性样品的实验室有 44 家 7. 保密性根据能力验证保密性要求, 本计划报名时每个参加实验室随机获得了唯一性代码和顺序号, 本报告中所涉及的实验室相关信息处均以实验室代码或顺序号表示 三 统计分析的设计及能力评价原则 1 定量检测项目 本次能力验证定量检测项目 ( 菌落总数 大肠菌群 大肠杆菌 ) 分发 1 个测 试样品 3

7 将实验室反馈的菌落总数 大肠菌群和大肠杆菌的结果转化成以 10 为底的 对数再用于统计计算 (1) 菌落总数和大肠杆菌项目 菌落总数和大肠杆菌项目采用稳健 (Robust) 技术处理, 即采用稳健统计的 中位值作为指定值, 标准化四分位距 (NIQR) 为变动性度量值 ( 目标标准偏差 ), 计算各参试实验室结果的 Z 比分数 (Z 值 ) 对不同项目不同浓度的反馈结果分别进行分析, 将反馈结果转化成对数值后 采用 Z 比分数进行判别 果, 即 : x - X Z= IQR x 是实验室反馈结果对数值,X 是中位值,IQR 是四分位间距 本次能力验证计划菌落总数和大肠杆菌项目以 Z 比分数评价实验室的结 Z 2 为满意结果 ; 2< Z <3 为有问题结果 ; Z 3 为不满意结果 (2) 大肠菌群项目 本次能力验证大肠菌群项目限定 MPN 法,MPN 结果不符合正态分布, 不 能采用稳健统计 根据 ISO/TS 食品和动物饲料微生物学实验室间比对 的能力验证的特殊要求和指导, 采用 3 管法的 MPN 结果对数值的目标标准偏 差接近 0.32 lg(mpn/g), 确定 Z 比分数的分母为 0.32, 而且由于 MPN 法引起的 实验室间变异大, 参试实验室的 Z 比分数的评价如下 : Z 3 为满意结果 ; 3< Z <5 为有问题结果 ; Z 5 为不满意结果 为了清晰表示各实验室参加能力验证计划的结果, 将 Z 值按大小顺序排列 作棒状图 ( 附件 B) 从该棒状图上, 每一个实验室很容易将其结果与其他参加 实验室进行比较, 了解其结果在本次计划中所处的水平 4

8 如果参试实验室报告的结果不是确切的数字 例如报告结果为 : 多不可计 检出 或 >1100MPN/g 等, 将直接判定为 不满意 结果 如果参试实验室不接收样品或者虽然接收了样品但没有报告结果, 也将直接判为 不满意 本次能力验证计划定量检测涉及的统计量有结果数 中位值 标准化四分位距 (NIQR) Z 比分数 稳健的变异系数 (CV) 最小值 最大值和极差等 各统计量的意义及相关计算方法参见 CNAS-GL02:2006 能力验证结果的统计处理和能力评价指南 2 定性检测项目本次能力验证金黄色葡萄球菌项目 沙门氏菌项目 副溶血性弧菌项目和单核细胞增生李斯特氏菌项目为定性检测项目, 每个项目分发 2 个测试样品, 需分别对这 2 个样品进行测试, 并上报结果 实验室 2 个检测结果均与样品已知结果 ( 阴性或阳性 ) 完全相符, 其结果评价为 满意, 否则为 不满意 四 统计结果及能力评价 本次能力验证共计有 437 家实验室报名, 有 7 家实验室 ( 实验室代码为 : ) 在样品发放前退出此次能力验证计划, 最终给 430 家实验室发放了样品, 有 426 家实验室报告了结果, 这 4 家未反馈结果的实验室 ( 实验室代码为 : ) 结果均统计为 不满意 本报告中的定量检测结果数值均为参试实验室报告结果的对数值, 单位为 lg(cfu/g) 或 lg(mpn/g) 每个参试项目的高浓度和低浓度分开统计 结果统计分析数据见附件 A 菌落总数项目参加实验室 376 家, 其中有 320 个 满意 结果 ( 占 85%), 34 个 不满意 结果 ( 占 9%),22 个 有问题 结果 ( 占 6%) 大肠菌群项目参加实验室 370 家, 其中有 228 个 满意 结果 ( 占 62%), 94 个 不满意 结果 ( 占 25%),48 个 有问题 结果 ( 占 13%) 大肠杆菌项目参加实验室 213 家, 其中有 162 个 满意 结果 ( 占 76%), 43 个 不满意 结果 ( 占 20%),8 个 有问题 结果 ( 占 4%) 金黄色葡萄球菌项目参加实验室 235 家, 其中有 182 个 满意 结果 ( 占 77%),53 个 不满意 结果 ( 占 23%) 5

9 沙门氏菌项目参加实验室 230 家, 其中有 146 个 满意 结果 ( 占 63%), 84 个 不满意 结果 ( 占 37%) 副溶血性弧菌项目参加实验室 70 家, 其中有 52 个 满意 结果 ( 占 74%), 18 个 不满意 结果 ( 占 26%) 单核细胞增生李斯特氏菌项目参加实验室 82 家, 其中有 62 个 满意 结果 ( 占 74%),20 个 不满意 结果 ( 占 26%) 表 1 菌落总数检验结果统计量 项目 菌落总数 大肠菌群 大肠杆菌 统计量 统计量 统计量 高浓度低浓度高浓度低浓度高浓度低浓度 结果数 中位值 (LOG10) 标准化四分位距 稳健 CV(%) 最小值 (LOG10) 最大值 (LOG10) 极差 (LOG10) 此次能力验证各参试实验室结果评价数量汇总表见表 2 和表 3 项目 满意 实验室数 表 2. 各评价结果实验室数量 ( 定量 ) 不满意 实验室数 有问题 实验室数 参加实验室 总数 满意结果 比例 (%) 菌落总数 大肠菌群 大肠杆菌 表 3. 各评价结果实验室数量 ( 定性 ) 检验项目 满意 实验室数 不满意 实验室数 参加实验室 总数 满意结果 比例 (%) 金黄色葡萄球菌 沙门氏菌 副溶血性弧菌 单核细胞增生李斯特氏菌

10 测试结果为 不满意 和 有问题 的实验室代码见表 4 表 4 测试结果不满意的实验室代码 测试项目菌落总数大肠菌群 反馈结果不满意和有问题实验室代码 不满意 有问题 不满意 有问题 大肠杆菌 不满意 有问题 金黄色葡萄球菌 不满意 ( 包括假阳性和假阴性 ) 假阳性假阴性

11 不满意 ( 包括假阳性和假阴性 ) 沙门氏菌副溶血性弧菌 假阳性 假阴性 不满意 ( 包括 假阳性 和假阴性 ) 假阳性 单核细胞增生李斯特氏菌 假阴性不满意 ( 包括假阳性和假阴性 ) 假阳性 假阴性 注 : 1) 假阴性 : 样品已知值为阳性, 实验室报告结果为阴性, 这种偏离为假阴性 2) 假阳性 : 样品已知值为阴性, 实验室报告结果为阳性, 这种偏离为假阳性 此次能力验证各参试实验室结果评价汇总表见表 5 8

12 表 5 能力验证结果评价汇总表 顺序号 实验室代码 菌落总数 大肠菌群 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 沙门氏菌 副溶血弧菌 单核细胞增生李斯特氏菌 满意 满意 满意 满意 不满意 不满意 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 - 满意 满意 满意 满意 不满意 不满意 - 满意 满意 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 有问题 有问题 满意 不满意 不满意 满意 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 - - 满意 - 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 有问题 有问题 不满意 不满意 不满意 有问题 - 有问题 满意 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 有问题 满意 满意 满意 - 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 不满意 满意 不满意 满意 不满意 不满意 不满意 不满意 满意 满意 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 不满意 满意 - 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 不满意 不满意 满意 满意 不满意 有问题 不满意 不满意 满意 不满意 满意 满意 满意 满意

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22 432 - 满意 满意 - 不满意 不满意 满意 满意 不满意 满意 满意 满意 有问题 有问题 注 : 表示实验室未报名参加相应检测项目 五 技术分析和建议 1 金黄色葡萄球菌本次计划共 53 家实验室金黄色葡萄球菌结果不满意, 有些实验室存在假阴性结果, 有些实验室存在假阳性结果, 或同时存在假阳性或假阴性结果 出现假阴性的可能原因为 : (1) 分离平板 BP 兔血浆凝固酶的质量影响可疑菌落的挑选 (2) 有的实验室采用全自动微生物鉴定仪进行鉴定的结果有错误 两个样品添加相同的菌株, 鉴定仪器给出了不同的结果 出现假阳性性的可能原因为 : 样品中添加的干扰菌一些特征和金黄色葡萄球菌相似, 将干扰菌误判为金黄色葡萄球菌 避免出现假阳性的结果, 建议 : (1) 检验过程认真仔细, 避免造成交叉污染 ; (2) 严格执行标准中的各项鉴定要求 2 沙门氏菌本次计划共 84 家实验室沙门氏菌结果不满意, 有些实验室其中 1 个样品存在假阴性结果, 有些实验室其中 1 个样品存在假阳性结果, 或同时存在假阳性或假阴性结果 出现假阴性的可能原因为 : (1) 检验人员的技术操作未严格执行标准的要求 样品中添加一定量的干扰菌, 添加的干扰菌的某些生化特征和沙门氏菌相似, 实验室在挑选的可疑菌较少时存在漏检现象 有的实验室直接挑取可疑菌落进行生化鉴定 未经纯化的可疑菌落有可能不是单菌落, 导致后续生化鉴定结果不准确 19

23 (2) 培养基试剂质量的影响 培养基和试剂的质量也影响到沙门氏菌的检验结果 根据我们对本次计划沙门氏菌样品制备过程中所采用的相关培养基和试剂进行分析表明, 在测试过程中应对培养基和试剂的质量进行控制, 尤其是沙门氏菌显色培养基和血清 为避免出现假阴性的结果, 建议 : (1) 对检验技术人员进行培训, 严格按照标准的要求进行检验 (2) 加强对培养基和试剂, 尤其是沙门氏菌血清的质量控制 建议同时使用不同生产商或不同批次的血清, 同时对血清进行质控 出现假阳性的原因为 : (1) 出现假阳性结果的实验室共有 50 家, 这 50 家实验室分发得到的样品都为一个沙门氏菌阳性和一个沙门氏菌阴性样品, 或者为两个沙门氏菌, 假阳性结果存在说明可能在操作中存在交叉污染的情况 (2) 样品中添加的干扰菌一些生化特征和沙门氏菌相似, 将干扰菌误判为沙门氏菌 避免出现假阳性的结果, 建议 : (1) 检验过程认真仔细, 避免造成交叉污染 ; (2) 严格执行标准中的各项鉴定要求 3. 副溶血性弧菌本次计划共 18 家实验室副溶血弧菌结果不满意, 有些实验室其中 1 个样品存在假阴性结果, 有些实验室其中 1 个样品存在假阳性结果, 或同时存在假阳性或假阴性结果 出现假阴性的可能原因 : (1) 分离平板 TCBS 的质量影响可疑菌落的挑选 (2) 有的实验室采用全自动微生物鉴定仪进行鉴定的结果有错误 两个样品添加相同的菌株, 鉴定仪器给出了不同的结果 为避免出现假阴性的结果, 建议 : (1) 对检验技术人员进行培训, 严格按照标准的要求进行检验 (2) 加强对培养基和试剂的质量控制 20

24 (3) 自动微生物鉴定仪的结果应作为辅助判断依据, 建议对微生物鉴定仪给出的结果, 特别是鉴定结果有多个可能性时, 更应该按照所参照的标准要求进行进一步的生化确认 4 单核细胞增生李斯特氏菌本次计划共 20 家实验室单核细胞增生李斯特氏菌结果不满意, 有些实验室其中 1 个样品存在假阴性结果, 有些实验室其中 1 个样品存在假阳性结果, 或同时存在假阳性或假阴性结果 出现假阴性的可能原因为 : (1) 李斯特显色平板的质量影响可疑菌落的挑选 (2) 有的实验室采用全自动微生物鉴定仪进行鉴定的结果有错误 两个样品添加相同的菌株, 鉴定仪器给出了不同的结果 出现假阳性的可能原因为 : 样品中添加的干扰菌一些生化特征和单核细胞增生李斯特氏菌相似, 将干扰菌误判为单核细胞增生李斯特氏菌 避免出现假阳性的结果, 建议 : (1) 检验过程认真仔细, 避免造成交叉污染 ; (2) 严格执行标准中的各项鉴定要求 参考文献 21

25 [1] CNAS-CL03:2010 能力验证提供者认可准则 [2] CNAS-RL02:2010 能力验证规则 [3] CNAS-AL07:2011 CNAS 能力验证领域和频次表 [4] CNAS GL 能力验证样品均匀性和稳定性评价指南 [5] CNAS-GL02:2006 能力验证结果的统计处理和能力评价指南 [6]CNAS-GL05:2011 测量不确定度要求的实施指南 [7]ISO 实验室间比对的能力验证使用的统计方法 [8]ISO/TS 食品和动物饲料微生物学实验室间比对的能力验证的特殊要求和指导 22

26 附件 A 实验室检验结果和评价 A.1 菌落总数项目 ( 低浓度 ) 获得低浓度菌落总数样品的 192 家参试实验室中有 189 家参试实验室按时报告了具体结果数值, 其中有 6 家实验室结果报告有误 ( 例如 : ,<10, <100 或 未检出 ), 最终 183 家实验室结果用于统计量的计算 这 6 家报告有误的实验室和 3 家未反馈结果的实验室的结果评价均为 不满意 图 A.1 低浓度菌落总数结果频率分布柱状图分布在数值较高一侧的结果与样品稳定性均值差异很大, 这部分结果很有可能参考了高浓度样品的结果, 怀疑是错误的离群值 重复采用 Grubbs 检验剔除离群值 (4.93,4.15,5.26,4,4.54,4.11) 之后, 样品呈近似正态分布 ( 图 A.1) 计算得到中位值为 1.92, 四分位间距为

27 表 A.1 低浓度菌落总数结果及 Z 值汇总表 顺序号 报名序号报告结果 (cfu/g) 菌落总数对数菌落总数 Z 值菌落总数评价 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 # 不满意 # 不满意 < 不满意 满意 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 24

28 # 不满意 满意 满意 满意 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 $ 有问题 满意 满意 $ 有问题 满意 $ 有问题 满意 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 满意 25

29 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 满意 < 不满意 满意 满意 不满意 满意 满意 满意 # 不满意 满意 满意 满意 不满意 满意 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 满意 # 不满意 满意 满意 # 不满意 满意 满意 满意 26

30 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 # 不满意 满意 # 不满意 # 不满意 满意 满意 满意 满意 # 不满意 满意 满意 27

31 满意 $ 有问题 满意 不满意 满意 满意 未检出 - - 不满意 满意 满意 < 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 # 不满意 < 不满意 $ 有问题 满意 不满意 # 不满意 # 不满意 满意 注 :2< Z <3 的结果用 $ 标出, Z 3 的结果用 # 标出 未反馈的结果和反馈有误结果的对数值和 Z 值均用 - 表示 A.2 菌落总数项目 ( 高浓度 ) 获得高浓度菌落总数样品的 184 家参试实验室中有 183 家参试实验室按时报告了具体结果数值, 这 183 家实验室结果用于统计量的计算,1 家未反馈结果的实验室的结果评价为 不满意 28

32 图 A.2 高浓度菌落总数结果频率分布柱状图 分布在数值较低和较高两侧的结果与样品稳定性均值差异很大, 这部分结果怀疑是错误的离群值 重复采用 Grubbs 检验剔除离群值 (2,6.36,6.16) 之后, 样品呈近似正态分布 ( 图 A.2) 计算得到中位值为 4.26, 四分位间距为 0.50 表 A.2 高浓度菌落总数结果及 Z 值汇总表 顺序号 报名序号报告结果 (cfu/g) 菌落总数对数菌落总数 Z 值菌落总数评价 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 $ 有问题 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 # 不满意 29

33 满意 满意 # 不满意 满意 满意 满意 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 30

34 满意 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 # 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 31

35 满意 $ 有问题 满意 # 不满意 满意 满意 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 # 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 32

36 满意 满意 # 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 # 不满意 满意 满意 满意 满意 # 不满意 # 不满意 满意 满意 满意 $ 有问题 满意 # 不满意 # 不满意 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 $ 有问题 注 :2< Z <3 的结果用 $ 标出, Z 3 的结果用 # 标出 未反馈的结果和反馈有误结果的对数值和 Z 值均用 - 表示 33

37 A.3 大肠菌群项目 ( 低浓度 ) 190 家参试实验室获得低浓度大肠菌群样品, 有 187 家按时报告了具体结果 数值, 其中有 23 家实验室报告结果有误 ( 例如 :<3,<30,>110,<0.3 或 检出 等 ), 不参加统计量的计算, 最终有 164 家结果用于统计量的计算 但是 3 家未反馈结 果的实验室和 23 家反馈结果有误的实验室结果评价均为 不满意 表 A.3 低浓度大肠菌群结果及 Z 值汇总表 顺序号 报名序号 报告结果 (MPN/g) 大肠菌群对数 大肠菌群 Z 值 大肠菌群评价 $ 有问题 < 不满意 满意 # 不满意 满意 $ 有问题 满意 <3 - - 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 $ 有问题 满意 满意 满意 < 不满意 满意 满意 < 不满意 # 不满意 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 满意 $ 有问题 # 不满意 满意 <3 - - 不满意 34

38 满意 $ 有问题 < 不满意 $ 有问题 < 不满意 满意 $ 有问题 $ 有问题 $ 有问题 满意 满意 满意 $ 有问题 $ 有问题 满意 满意 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 # 不满意 满意 满意 满意 # 不满意 满意 <3 - - 不满意 $ 有问题 # 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 $ 有问题 满意 满意 满意 $ 有问题 满意 满意 35

39 $ 有问题 $ 有问题 <3 - - 不满意 满意 满意 满意 /100g - - 不满意 # 不满意 满意 满意 满意 不满意 满意 满意 $ 有问题 满意 # 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 $ 有问题 满意 < 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 不满意 # 不满意 # 不满意 <3 - - 不满意 满意 $ 有问题 满意 # 不满意 36

40 <3 - - 不满意 满意 满意 满意 <3 - - 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 < 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 $ 有问题 满意 满意 $ 有问题 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 满意 满意 $ 有问题 满意 满意 满意 # 不满意 满意 满意 # 不满意 满意 满意 $ 有问题 $ 有问题 $ 有问题 <3 - - 不满意 37

41 满意 满意 # 不满意 $ 有问题 $ 有问题 < 不满意 $ 有问题 满意 检出 - - 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 <3 - - 不满意 <3 - - 不满意 大于 不满意 满意 不满意 不满意 # 不满意 满意 满意 满意 注 :3< Z <5 的结果用 $ 标出, Z 5 的结果用 # 标出 未反馈的结果和反馈有误结果的对数值和 Z 值均用 - 表示 A.4 大肠菌群项目 ( 高浓度 ) 181 家参试实验室获得高浓度大肠菌群样品, 有 180 家按时报告了具体结果数值, 其中有 43 家实验室报告结果有误 ( 例如 :<3, >1100,>110 等 ), 不参加统计量的计算, 最终有 136 家结果用于统计量的计算 但是 1 家未反馈结果的实验室和 43 家反馈结果有误的实验室结果评价均为 不满意 38

42 表 A.4 高浓度大肠菌群结果及 Z 值汇总表 顺序号 报名序号 报告结果 (MPN/g) 大肠菌群对数 大肠菌群 Z 值 大肠菌群评价 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 # 不满意 满意 满意 $ 有问题 > 不满意 满意 > 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 > 不满意 > 不满意 满意 > 不满意 满意 满意 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 满意 满意 39

43 满意 满意 > 不满意 > 不满意 满意 满意 满意 > 不满意 大于 不满意 满意 不满意 满意 大于 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 # 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 > 不满意 满意 > 不满意 满意 > 不满意 满意 > 不满意 $ 有问题 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 满意 满意 40

44 满意 满意 满意 > 不满意 满意 # 不满意 满意 $ 有问题 满意 $ 有问题 > 不满意 满意 $ 有问题 > 不满意 > 不满意 > 不满意 > 不满意 > 不满意 $ 有问题 > 不满意 满意 # 不满意 满意 小于 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 > 不满意 > 不满意 满意 $ 有问题 > 不满意 > 不满意 满意 满意 # 不满意 满意 满意 41

45 满意 > 不满意 $ 有问题 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 > 不满意 满意 满意 > 不满意 满意 满意 > 不满意 > 不满意 > 不满意 满意 满意 $ 有问题 $ 有问题 > 不满意 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 > 不满意 > 不满意 ( 稀释到千倍 ) - - 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 > 不满意 满意 > 不满意 # 不满意 $ 有问题 满意 大于 不满意 42

46 > 不满意 # 不满意 $ 有问题 大于 不满意 > 不满意 满意 满意 满意 # 不满意 # 不满意 满意 满意 $ 有问题 注 :3< Z <5 的结果用 $ 标出, Z 5 的结果用 # 标出 未反馈的结果和反馈有误结果的对数值和 Z 值均用 - 表示 A.5 大肠杆菌项目 ( 低浓度 ) 106 家参试实验室获得低浓度大肠杆菌样品, 有 105 家按时报告了具体结果数值, 其中有 23 家实验室报告结果有误 ( 例如 :<1,<10, <15 或 阴性 等 ), 不参加统计量的计算, 最终有 82 家结果用于统计量的计算 但是 1 家未反馈结果的实验室和 23 家反馈结果有误的实验室结果评价均为 不满意 图 A.3 低浓度大肠杆菌结果频率分布柱状图 43

47 从图 A.3 中看出, 样品结果呈近似正态分布 计算得到中位值为 1.36, 四分位间 距为 0.81 表 A.5 低浓度大肠杆菌结果及 Z 值汇总表 顺序号 报名序号 报告结果 (cfu/g) 大肠杆菌对数 大肠杆菌 Z 值 大肠杆菌评价 满意 $ 有问题 <1 - - 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 <1 - - 不满意 <1 - - 不满意 满意 满意 阳性 - - 不满意 < 不满意 <1 - - 不满意 满意 满意 满意 满意 <1 - - 不满意 不满意 <1 - - 不满意 满意 满意 <1 - - 不满意 <1 - - 不满意 <1 - - 不满意 满意 满意 满意 不满意 满意 满意 44

48 满意 满意 不满意 满意 满意 满意 < 不满意 满意 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 满意 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 $ 有问题 满意 满意 满意 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 <1 - - 不满意 满意 不满意 满意 满意 满意 满意 45

49 满意 满意 满意 满意 满意 不满意 满意 满意 满意 满意 <1 - - 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 $ 有问题 阴性 - - 不满意 满意 <1 - - 不满意 < 不满意 满意 满意 不满意 满意 注 :2< Z <3 的结果用 $ 标出, Z 3 的结果用 # 标出 未反馈的结果和反馈有误结果的对数值和 Z 值均用 - 表示 A.6 大肠杆菌项目 ( 高浓度 ) 107 家参试实验室获得高浓度大肠杆菌样品, 有 106 家按时报告了具体结果数值, 其中有 12 家实验室报告结果有误 ( 例如 :<1,<10, <15,0, 阴性 等 ), 不参加统计量的计算, 最终有 94 家结果用于统计量的计算 但是 1 家未反馈结果的实验室和 12 家反馈结果有误的实验室结果评价均为 不满意 46

50 图 A.4 高浓度大肠杆菌结果频率分布柱状图 分布在数值较低一侧的结果与样品稳定性均值差异很大, 这部分结果很有可 能参考了低浓度样品的结果, 怀疑是错误的离群值 重复采用 Grubbs 检验剔除 离群值 (1.85,1.36,1.97,1.48) 之后, 样品呈近似正态分布 ( 图 A.4) 计算得到中 位值为 3.99, 四分位间距为 0.58 表 A.6 高浓度大肠杆菌结果及 Z 值汇总表 顺序号 报名序号 报告结果 (cfu/g) 大肠杆菌对数 大肠杆菌 Z 值 大肠杆菌评价 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 <3 - - 不满意 $ 有问题 满意 满意 47

51 满意 满意 # 不满意 满意 阳性 - - 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 不满意 $ 有问题 $ 有问题 满意 满意 满意 满意 <1 - - 不满意 满意 满意 <1 - - 不满意 满意 满意 # 不满意 满意 # 不满意 满意 满意 满意 满意 # 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 48

52 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 阳性 - - 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 不满意 满意 满意 # 不满意 满意 满意 满意 满意 满意 满意 <1 - - 不满意 满意 满意 满意 # 不满意 满意 满意 满意 < 不满意 满意 49

53 满意 满意 检出 - - 不满意 不满意 < 不满意 >3 - - 不满意 满意 满意 满意 注 :2< Z <3 的结果用 $ 标出, Z 3 的结果用 # 标出 未反馈的结果和反馈有误结果的对数值和 Z 值均用 - 表示 A.6 金黄色葡萄球菌项目 共 235 家实验室参加, 不满意 的实验室为 53 家实验室 表 A.6 各参加实验室金黄色葡萄球菌检验结果 实验室 已知值 报告结果 金黄色葡萄球菌 代码 PTB-1 PTB-2 PTB-1 PTB-2 评价结果 5809 阴 阳 未检出 检出 满意 8653 阴 阳 未检出 检出 满意 533 阴 阳 检出 检出 不满意 646 阴 阳 未检出 检出 满意 998 阴 阳 未检出 检出 满意 467 阴 阳 未检出 检出 满意 651 阳 阴 检出 未检出 满意 430 阳 阴 检出 未检出 满意 605 阳 阴 检出 未检出 满意 931 阴 阳 检出 检出 不满意 383 阴 阳 未检出 检出 满意 833 阴 阳 未检出 检出 满意 373 阴 阳 未检出 检出 满意 385 阳 阴 检出 未检出 满意 508 阴 阳 未检出 检出 满意 977 阴 阳 未检出 检出 满意 782 阴 阳 未检出 检出 满意 736 阳 阴 检出 检出 不满意 426 阳 阴 检出 未检出 满意 769 阴 阳 检出 未检出 不满意 431 阴 阳 未检出 检出 满意 611 阴 阳 未检出 检出 满意 377 阳 阴 未检出 未检出 不满意 738 阳 阴 检出 检出 不满意 684 阳 阴 检出 未检出 满意 50

54 483 阳 阴 检出 未检出 满意 800 阴 阳 未检出 检出 满意 414 阳 阴 检出 未检出 满意 382 阴 阳 未检出 检出 满意 573 阴 阳 未检出 检出 满意 899 阴 阳 未检出 检出 满意 994 阴 阳 未检出 检出 满意 524 阴 阳 未检出 未检出 不满意 370 阴 阳 未检出 检出 满意 826 阴 阳 检出 检出 不满意 702 阴 阳 检出 未检出 不满意 673 阴 阳 未检出 检出 满意 404 阳 阴 检出 未检出 满意 346 阴 阳 未检出 检出 满意 340 阴 阳 未检出 检出 满意 434 阳 阴 检出 未检出 满意 875 阴 阳 未检出 检出 满意 379 阴 阳 未检出 检出 满意 405 阳 阴 检出 未检出 满意 452 阳 阴 检出 未检出 满意 676 阳 阴 检出 未检出 满意 332 阳 阴 检出 检出 不满意 730 阴 阳 未检出 检出 满意 988 阴 阳 未检出 检出 满意 465 阴 阳 未检出 检出 满意 664 阳 阴 检出 未检出 满意 1995 阴 阳 未检出 检出 满意 606 阳 阴 检出 未检出 满意 962 阴 阳 检出 检出 不满意 961 阴 阳 检出 检出 不满意 727 阳 阴 检出 检出 不满意 345 阴 阳 未检出 检出 满意 339 阴 阳 未检出 检出 满意 860 阴 阳 未检出 检出 满意 488 阳 阴 检出 检出 不满意 344 阴 阳 检出 检出 不满意 473 阳 阴 检出 未检出 满意 550 阴 阳 未检出 未检出 不满意 657 阴 阳 未检出 检出 满意 731 阴 阳 检出 检出 不满意 666 阳 阴 检出 未检出 满意 775 阴 阳 未检出 检出 满意 357 阴 阳 未检出 检出 满意 51

55 975 阳 阴 检出 未检出 满意 637 阳 阴 检出 未检出 满意 557 阴 阳 检出 检出 不满意 462 阳 阴 检出 未检出 满意 787 阳 阴 检出 检出 不满意 9361 阴 阳 未检出 未检出 不满意 7466 阳 阴 检出 未检出 满意 1959 阴 阳 未检出 检出 满意 3705 阳 阴 检出 未检出 满意 7701 阳 阴 未检出 检出 不满意 3529 阴 阳 未检出 检出 满意 2229 阳 阴 未检出 未检出 不满意 7435 阳 阴 检出 未检出 满意 3831 阳 阴 检出 未检出 满意 7479 阳 阴 检出 未检出 满意 8777 阳 阴 检出 未检出 满意 7520 阳 阴 检出 检出 不满意 4912 阳 阴 检出 未检出 满意 6838 阴 阳 未检出 检出 满意 6517 阴 阳 未检出 检出 满意 8728 阴 阳 未检出 检出 满意 9615 阴 阳 未检出 检出 满意 7153 阳 阴 检出 未检出 满意 2084 阴 阳 未检出 检出 满意 2048 阴 阳 未检出 检出 满意 7427 阴 阳 未检出 检出 满意 6049 阳 阴 检出 未检出 满意 7031 阴 阳 未检出 检出 满意 4144 阴 阳 未检出 检出 满意 4447 阴 阳 检出 检出 不满意 252 阴 阳 未检出 检出 满意 1283 阴 阳 未检出 检出 满意 1102 阳 阴 检出 未检出 满意 6896 阴 阳 未检出 检出 满意 6171 阳 阴 检出 未检出 满意 1270 阴 阳 未检出 检出 满意 7201 阴 阳 未检出 检出 满意 4176 阴 阳 检出 检出 不满意 2231 阳 阴 检出 未检出 满意 7555 阴 阳 未检出 检出 满意 7115 阳 阴 检出 未检出 满意 5214 阳 阴 检出 未检出 满意 7171 阳 阴 检出 未检出 满意 52

目录 附录 A 实验室结果统计汇总和评价... 1 附录 A1 菌落总数项目结果汇总和统计评价... 1 附录 A2 大肠菌群项目结果汇总和统计评价... 5 附录 A3 粪大肠菌群项目结果汇总和统计评价... 9 附录 A4 大肠杆菌项目结果汇总和统计评价 附录 A5 沙门氏菌项目结果

目录 附录 A 实验室结果统计汇总和评价... 1 附录 A1 菌落总数项目结果汇总和统计评价... 1 附录 A2 大肠菌群项目结果汇总和统计评价... 5 附录 A3 粪大肠菌群项目结果汇总和统计评价... 9 附录 A4 大肠杆菌项目结果汇总和统计评价 附录 A5 沙门氏菌项目结果 中国检验检疫科学研究院测试评价中心 CNAS PT0026 ACAS-PT030 食品微生物学能力验证计划 中期报告 2014 年 10 月 13 日 本报告是中国检科院测试评价中心 (ACAS) 组织的 ACAS-PT030 食品微生物能力验证计划的中期报告 该中期报告供实验室参考, 结果以最终的结果报告单和技术报告为准 本能力验证计划中定量检测项目按照 ISO13528 标准, 采用稳健统计技术,

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