研发与工艺 碱具有重要的意义 大孔吸附树脂具有比表面积大 吸附容量大 选择性好 前处理简便 使用周期长 且不溶于酸碱及有 [1-11] 机溶剂等优点, 尤其在分离纯化生物碱类化合物 [1-13] 的应用中取得了很好的效果 但目前尚未见有大孔吸附树脂分离纯化川芎总生物碱的研究报道 本研 柠檬酸缓冲液和

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1 DOI:1.399/j.issn 食品研究与开发 Food Research And Development 17 年 月第 3 卷第 11 期 5 大孔吸附树脂纯化富集川芎总生物碱的工艺 1, 蒲忠慧, 王力 1, 高宇 1, 张潇 1 1,* 1,* 3, 彭成, 熊亮, 李文兵 (1. 成都中医药大学药学院, 教育部中药材标准化重点实验室, 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地, 四川成都 11137;. 绵阳师范学院生命科学与技术学院, 四川绵阳 1;3. 四川新绿色药业科技发展股份有限公司, 四川彭州 131) 摘要 : 以盐酸川芎嗪为对照品, 采用酸性染料比色法测定川芎总生物碱含量 以吸附率和解吸率为指标, 比较 7 种不同型号大孔吸附树脂的静态吸附与解吸附能力, 考察动态吸附与洗脱参数, 筛选最佳大孔吸附树脂纯化富集川芎总生物碱的工艺条件 结果表明 AB- 型大孔树脂对川芎总生物碱的吸附与解吸性能最好, 静态吸附率为 75.1 %, 解吸率为 1.5 %, 静态吸附和解吸时间分别为 1 h 和 h 其动态富集工艺条件为: 最佳上样液 ph 为., 上样质量浓度为.79 9 mg/ml, 上样量为 BV, 用 13 BV 去离子水除杂后, 再用 1 BV 体积分数 5 % 的乙醇进行洗脱 经 AB- 大孔树脂纯化富集后, 川芎总生物碱纯度提高了.3 倍, 回收率为 %(RSD=1. %,n=3) 关键词 : 川芎 ; 总生物碱 ; 大孔吸附树脂 ; 纯化富集 Purification and Enrichment of Total Alkaloids from Ligusticum chuanxiong Hort. by Macroporous Resin PU Zhong-hui 1,, WANG Li 1, GAO Yu 1, ZHANG Xiao 1, PENG Cheng 1,*, XIONG Liang 1,*, LI Wen-bing 3 (1. Pharmacy College, Chengdu University of TCM, The Ministry of Education Key Laboratory of Standardization of Chinese Herbal Medicine, State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 11137, Sichuan, China;. College of Life Science and Technology, Mianyang Normal University, Mianyang 1, Sichuan, China; 3. Sichuan Neo-Green Pharmaceutical Technology Development Co., Ltd., Pengzhou 131, Sichuan, China) Abstract: The content of the total alkaloids was measured by acid dye colorimetry with ligustrazine hydrochloride as reference substance. Taking the adsorption and desorption rates as index, the best macroporous resin was screened out from seven resins by static adsorption method, elution parameters were optimized by dynamic adsorption method. Results showed that AB- was considered the best purification and enrichment potency for total alkaloids from L. chuanxiong Hort. The static absorbtion ratio was 75.1 % and desorption ratio was 1.5 %. Optimal purification process conditions were as follows: the concentration of sample solution.799 mg/ml with ph as.,maximum sample volume BV, washed by 13 BV purified water and 1 BV 5 % ethanol. The purity of total alkaloids was.3 times higher than before enrichment, the average recovery rate was % in 3 validation tests(rsd =1. %, n=3). Key words: Ligusticum chuanxiong Hort.; total alkaloids; macroporous resin; purification and enrichment 川芎始载于 神农本草经, 为常用君药, 是伞形科藁本属植物川芎 (Ligusticum chuanxiong Hort.) 的干燥 基金项目 : 四川省科技支撑计划 (15SZ31); 科技基础性工作专项计划 (15FY1115-1) 作者简介 : 蒲忠慧 (19 ), 女 ( 汉 ), 讲师, 在读博士, 从事中药药效物质基础研究 * 通信作者 : 彭成, 研究员, 博士生导师, 从事中药药效与毒理研究 ; 熊亮, 副研究员, 硕士生导师, 从事天然药物化学成分及药效物质基础研究 根茎, 主要分布于四川都江堰 彭州 新都等地, 为川产 [1-3] 道地药材 其味辛 微苦 性温, 归肝 胆 心包经, 具有活血行气 祛风止痛的功效, 可泡酒喝, 也可泡茶喝, 或者炖鸡煨肉食用 在饮食及人群方面, 适宜于患有 [] 月经不调, 经闭痛经, 产后瘀痛等病症的人群 ; 还可以用于风寒头痛 风热头痛 偏头痛 血管神经性头痛等 [5] [] 症的人群 ; 以及有着各种瘀血阻滞之病症的人群 川芎总生物碱作为一个有效成分群, 在治疗心脑血管 [7-9] 疾病方面的疗效显著 因此, 分离纯化川芎总生物

2 研发与工艺 碱具有重要的意义 大孔吸附树脂具有比表面积大 吸附容量大 选择性好 前处理简便 使用周期长 且不溶于酸碱及有 [1-11] 机溶剂等优点, 尤其在分离纯化生物碱类化合物 [1-13] 的应用中取得了很好的效果 但目前尚未见有大孔吸附树脂分离纯化川芎总生物碱的研究报道 本研 柠檬酸缓冲液和 7. ml 溴甲酚绿溶液 随后以 1 7 ml 氯仿萃取 3 次, 收集合并氯仿层, 用氯仿定容至 5 ml, 加入 1. g 无水硫酸钠, 摇匀, 除水 3 min 后, 以不加盐酸川芎嗪同法萃取制得空白对照, 在 17 nm 波长下测定吸光度 以吸光度为纵坐标, 以盐酸川芎嗪的浓度 (μg/ml) 为横坐标绘制标准曲线 究在前期提取工艺基础上, 以富集川芎总生物碱量为目的, 采用静态吸附分离法筛选最佳型号的大孔吸附 1.3. 总生物碱的含量测定精密称取一定量的川芎粉末, 按照前期研究优选 树脂, 动态吸附分离法优化纯化工艺条件, 为进一步研究川芎总生物碱提取物的制备提供科学方法, 也为川芎相关新药的开发利用提供参考 的提取工艺 : 即加入 15 倍量 % 乙醇 1 加热回流提取.5 h, 将所得药液过滤合并浓缩蒸干 残渣加 1 mol/l 的盐酸 ml 溶解, 滤过, 滤液用浓氨水调 ph 1 材料与方法 值为 9~1 后, 用氯仿萃取至无色, 合并氯仿萃取液, 浓缩蒸干, 得总生物碱粗品, 加氯仿溶解定容 精密吸 1.1 材料与试剂川芎饮片 : 由四川新绿色药业科技发展股份有限 取 1 ml 生物碱粗品溶液, 按照 项下方法操作, 以不加样品同法萃取制得空白溶液 在 17 nm 波长下 公司提供, 经成都中医药大学药学院李敏老师鉴定为 测定其吸光度, 根据回归方程计算总生物碱含量 伞形科多年生草本植物川芎 Ligusticum chuanxiong 大孔树脂静态吸附性能的考察 Hort. 的根茎 现存于成都中医药大学中药资源系统研 静态吸附与静态解吸 究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地, 标本号 :LC 盐酸川芎嗪对照品 : 中国食品药品检定研究院提供, 批号 , 含量为 3.9 %; 所用其它试剂均为市售分析纯 大孔吸附树脂 :ADS-5 ADS-7 ( 天津浩聚树脂科技有限公司 );HPD-1 HPD-5 HPD-( 河北沧州宝恩化工有限公司 );AB- D11( 安徽三星树脂科技有限公司 ) 参照文献 [15] 对 7 种大孔树脂 (ADS-5 ADS-7 D11 AB- HPD-1 HPD-5 HPD-) 进行预处 [1] 理, 采用静态吸附与解吸法筛选纯化川芎生物碱的树脂类型 具体操作如下 : 静态吸附与解吸 : 分别准确称取 7 种预处理好的大孔树脂 3 份, 每份各 1. g, 置于 5 ml 的具塞磨口三角瓶中, 然后分别加入总生物碱质量浓度为.39 mg/ml 的川芎水溶液 35 ml, 于恒温振荡器 5 振摇吸附 h, 充分吸附后抽滤, 滤液浓缩干后 1. 仪器与设备 Analytikjena SPECORD/ 型紫外可见分光光度 氯仿定容至 5 ml 取上述吸附已达饱和并冲洗滤干的树脂, 加入 35 ml 95 % 的乙醇溶液, 然后于恒温振荡 计 石英比色皿 : 德国耶拿分析仪器股份公司 ; FAB 型电子天平 : 上海越平科学仪器有限公司 ; AUWD 电子分析天平 :SHIMADZU CORPORA- TION;HX- 型高速中药粉碎机 : 浙江省永康市溪岸五金药具厂 ;SHZC-3 型卧式恒温振荡器 : 成都瑞昌仪器制造有限公司 ;PHS-5 酸度计 : 成都世纪方舟科技有限公司 器上 5 振荡 h, 充分解吸后再抽滤, 滤液浓缩干后氯仿定容至 5 ml 分别吸取 1. ml 上述供试品溶液, 按 项下方法测定吸光度, 计算各种树脂对川芎生物碱的比吸附量与吸附率 比解吸量与解吸率, 计算公式如下 比吸附量 =(C V -C M V M )/W; 吸附率 /% =(C V - C M V M )/C V 1; 比解吸量 =C E V E /W; 解吸率 /%=C E V E / 1.3 方法 (C V -C M V M ) 标准曲线的绘制 [1] 采用酸性染料比色法测定川芎总生物碱含量 式中 :C 为上样液中总生物碱的质量浓度,mg/ ml;v 为上样液的体积,mL;C M 为吸附残液中总生物 精密称取盐酸川芎嗪对照品 1.19 mg ( 含量 3.9 %), 加氯仿溶解并定容至 1 ml, 制得对照品储备液 (1. 7 mg/ml) 分别精密吸取盐酸川芎嗪对照品储 碱的质量浓度,mg/mL;V M 为吸附残液体积,mL;C E 为乙醇洗脱液中总生物碱的质量浓度,mg/mL;V E 为乙醇洗脱液体积,mL;W 为树脂质量,g 备液 ml, 置于 个 ml 分 静态吸附动力学考察 液漏斗中, 分别加入含. ml ph 3. 的磷酸氢二钠 - 精密称取预处理的 AB- 型树脂.5 g, 置于

3 5 ml 磨口锥形瓶中, 精密加入总生物碱质量浓度为 mg/ml 的川芎水溶液 5 ml, 于恒温振荡器 5 下振摇, 平行 3 次, 分别在 1 1 h 时吸取上清液 3. ml, 浓缩蒸干 同时将吸附 h 后的树脂用蒸馏水冲洗后抽干, 加入 95 % 乙醇 5 ml 进行解吸,5 下振摇, 平行 3 次, 分别在 1 1 h 时吸取上清液 3. ml, 浓缩蒸干, 上述残渣分别加氯仿溶解按 项下方法测定上清液中残留总生物碱含量 1.3. AB- 大孔树脂动态吸附与洗脱条件的考察 上样液 ph 值对川芎总生物碱富集的影响准确量取 5 份预处理好的 AB - 型大孔树脂 1 ml, 湿法装于径高比为 1 的玻璃柱中 ( 直径.5 cm 高 5 cm), 平行 3 份, 用 1 mol/l NaOH 和 1 mol/l HCl 酸度计调节 ph 值后, 分别加入 ph 值为 ( 原液 ) 9 11 的川芎总生物碱水溶液 5 ml 进行充分吸附 1 h 后将多余吸附残液放出, 先用蒸馏水洗至流出液无色, 水洗液与吸附残液合并, 氯仿定容至 5. ml 容量瓶中, 精密吸取. ml 测定吸光度, 并计算吸附率 上样液浓度对川芎总生物碱富集的影响准确量取 份预处理好的 AB- 型大孔树脂 1 ml, 置于玻璃柱中, 平行 3 份, 分别精密加入 ph 9 的含川芎总生物碱质量浓度为 mg/ml 水溶液, 于充分吸附 1 h 后将多余吸附残液放出, 用蒸馏水洗脱至流出液无色, 水洗液与吸附残液合并, 氯仿定容至 5. ml 容量瓶中, 精密吸取. ml 测定吸光度, 并计算吸附率 上样量对川芎总生物碱富集的影响准确量取预处理好的 AB- 型大孔树脂 1 ml, 置于玻璃柱中, 平行 3 份, 精密吸取 ph 9 的川芎生物碱质量浓度为.79 9 mg/ml 水溶液, 以 BV/h 的流速通过树脂进行动态吸附, 用试管收集过柱液, 每 1 BV (1 ml) 收集 1 份, 每管分别精密吸取.5 ml, 测定川芎总生物碱的含量 水洗用量对川芎总生物碱富集的影响准确量取预处理好的 AB- 型大孔树脂 1 ml, 置于玻璃柱中, 平行 3 份, 精密吸取 ph 9 的川芎生物碱质量浓度为.79 9 mg/ml 水溶液 7 ml 于树脂中进行吸附, 待充分吸附后加入去离子水, 以 BV/h 的流速洗脱, 流出液每 1 BV 收集 1 份, 测定川芎总生物碱的质量 乙醇洗脱浓度对川芎总生物碱富集的影响准确量取 5 份预处理好的 AB- 型大孔树脂 1 ml, 置于玻璃柱中, 平行 3 份, 分别加入 ph 9 的川芎生物碱提取液, 按上样量与树脂体积比 1 3(g/mL) 进行动态吸附, 吸附完成后, 用 13 BV 去离子水洗除去杂质, 分别用体积分数 35 % 55 % 75 % 5 % 95 % 的乙醇溶液进行动态解吸附, 将洗脱液浓缩蒸干, 氯仿定容至 5. ml 容量瓶中, 精密吸取.1 ml 测定测定总生物碱的含量 乙醇洗脱用量对川芎总生物碱富集的影响准确量取预处理好的 AB- 型大孔树脂 1 ml, 置于玻璃柱中, 平行 3 份, 精密吸取 ph 9 的川芎生物碱质量浓度为.79 9 mg/ml 水溶液 7 ml 于树脂中进行吸附, 待充分吸附 1 h 后加入先用 13 BV 去离子去杂质, 再加入 75 % 乙醇, 以 BV/h 的流速收集洗脱液, 每 1 BV 收集 1 份, 测定总生物碱的含量 正交试验结合单因素试验结果, 选取上样液 ph 值 (A) 上样液浓度 (B) 乙醇洗脱浓度(C) 上样量(D) 为影响因素, 设计四因素三水平正交试验 L(3 9 ), 如表 1 所示 根据正交设计方案 ( 表 ), 以川芎总生物碱含量为考察指标, 确定大孔树脂纯化川芎总生物碱的最佳工艺条件 Table 1 水平 1.3. 验证试验按照正交试验优选的最佳纯化工艺条件进行验证, 试验平行 3 次 结果与分析 表 1 正交试验因素水平表 The factors and levels of orthogonal experiment A 上样液 ph 值 B 上样液浓度 /(mg/ml) 因素 C 乙醇洗脱浓度 /% 川芎总生物碱的标准曲线以盐酸川芎嗪的浓度 (μg/ml) 为横坐标, 以吸光度为纵坐标, 绘制标准曲线, 得回归方程 Y=.17 X-.9 7, 相关系数 R =.99 结果表明, 盐酸川芎嗪在浓度.9 μg/ml~.9 μg/ml 范围内与吸光度呈良好的线性关系. 树脂极性对川芎总生物碱分离效果的影响 D 上样量 / BV 本试验选用非极性的 ADS-5 D11 HPD-1 型 弱极性的 AB - 型以及极性的 ADS -7 HPD -5 HPD- 型 7 种大孔吸附树脂, 定性地考察树脂极性

4 对川芎总生物碱分离效果的影响 结果见图 1 Fig.1 指标 /(mg/g) 指标 /% ADS-5 ADS-7 D11 AB- HPD-1 树脂型号 比吸附量比解吸量 HPD-5 HPD- A. 不同型号树脂比吸附量与比解吸量对比 ADS-5 ADS-7 D11 AB- HPD-1 HPD-5 HPD- 树脂型号 由图 1 可知,7 种大孔吸附树脂的比吸附量按大小依次为 AB->HPD-5 >HPD->ADS-5>D11> ADS-7>HPD-1; 解吸率依次为 AB->HPD-> HPD-1>ADS-5>D11>HPD-5>ADS-7 由于弱极性的 AB- 大孔树脂对川芎生物碱吸附解吸性能最好, 因此选择 AB- 型树脂纯化川芎总生物碱.3 AB- 树脂静态吸附动力学考察结果以比吸附量和比解吸量 (mg/g) 对时间 t(h) 作图, 得到 AB- 型大孔吸附树脂的静态吸附和解吸动力学曲线见图 比吸附量 /(mg/g) 图 1 吸附率解吸率 B. 不同型号树脂吸附率与解吸率对比 树脂型号对川芎总生物碱富集的影响 Effects of macroporous resin types on the purification of total alkaloids from L. chuanxiong Hort 时间 /h A. 静态吸附动力学曲线 Fig. 图 比解吸量 /(mg/g) 时间 /h B. 静态解吸动力学曲线 AB- 型大孔吸附树脂的静态吸附和解吸动力学曲线 由图 可知,AB- 型大孔吸附树脂静态吸附过程中的比吸附量在 h 后增加缓慢,1 h 后基本达到平衡, 而在静态解吸过程中的比解吸量在 h 后基本达到平衡 因此, 选择静态吸附时间为 1 h, 解吸时间为 h. 上样液 ph 值对川芎总生物碱富集的影响上样液 ph 值对川芎总生物碱富集的影响见图 3 Fig.3 Kinetic curve of static adsorption and desorption for AB- macroporous resin 吸附率 /% 图 ph 值 上样液 ph 值对川芎总生物碱富集的影响 结果表明,pH 值为 3 5 7( 原液 ) 9 11 时, 吸附率分别为 5.13 % 7. % 79.1 % %(n = 3) 可见, 上样液 ph 值在 3~9 之间时, 随着 ph 值的升高, 树脂对样品中总生物碱的吸附量增加 ; 当 ph 值超过 9 时, 树脂对总生物碱的吸附量降低 因此, 选择 ph 值 9 为样液的最佳上样 ph 值 研发与工艺 Effects of sample ph on the purification of total alkaloids from L. chuanxiong Hort..5 上样液浓度对川芎总生物碱富集的影响上样液浓度对川芎总生物碱富集的影响见图 由图 可得, 当上样浓度为 mg/ml 时, 吸附率分别为.5 % 7. % % %.7 % (n=3) 当上样液质量浓度低于 3.5 mg/ml 时, 吸附率随上样浓度增大而上升, 当上样液质量浓度达到.79 9 mg/ml 时, 再增加浓度 ( mg/ml) 对吸附

5 吸附率 /% 上样液浓度 /(mg/ml) 水洗体积 /BV Fig. 图 上样液浓度对川芎总生物碱富集的影响 Effects of sample concentration on the purification of total alkaloids from L. chuanxiong Hort. Fig. 图 水洗用量对川芎总生物碱富集的影响 Effects of the quantity of elution water on the purification of total alkaloids from L. chuanxiong Hort. 率没有显著影响 综合考虑, 最终选用质量浓度为.79 9 mg/ml. 上样量对川芎总生物碱富集的影响上样量对川芎总生物碱富集的影响 ( 泄露曲线 ) 结果见图 5 总生物碱含量 /(mg/ml) Fig 上样体积 /BV 图 5 上样量对川芎总生物碱富集的影响 Effects of sample volume on the purification of total alkaloids from L. chuanxiong Hort. 由图 5 可见, 当上样体积达到 7 BV 时, 树脂柱中总生物碱成分呈现完全泄露, 大孔树脂对样品液中总生物碱吸附饱和 故确定最佳上样量为 7 BV, 相当于 1 ml 树脂上样 7 ml 总生物碱质量浓度为.79 9 mg/ml 的川芎提取液, 即最佳上样量与树脂体积比约为 1 3(g/mL).7 水洗用量对川芎总生物碱富集的影响水洗用量对川芎总生物碱富集的影响见图 由图 可知, 随着水洗用量的增加, 流出液中的总生物碱逐渐减少, 当水洗用量为 13 BV 时, 流出液中的总生物碱已经很少 因此, 确定最佳的水洗用量为 13BV. 乙醇洗脱浓度对川芎总生物碱富集的影响乙醇洗脱浓度对川芎总生物碱富集的影响见图 7 由图 7 可见, 当乙醇洗脱浓度低于 75 % 时, 随着乙醇浓度的增大, 树脂上解吸附下来的总生物碱含量随之升高, 当乙醇浓度达到 5 % 时, 树脂上解吸附下来 图 乙醇浓度 /% 乙醇洗脱浓度对川芎总生物碱富集的影响 Fig.7 Effects of the concentration of elution ethanol on the purification of total alkaloids from L. chuanxiong Hort. 的总生物碱含量反而降低, 以洗脱浓度为 75 % 的乙醇解吸效果最好 因此, 确定乙醇最佳洗脱浓度为 75 %.9 乙醇洗脱量对川芎总生物碱富集的影响乙醇洗脱量对川芎总生物碱富集的影响见图 Fig. 图 乙醇洗脱用量 /BV 乙醇洗脱用量对川芎总生物碱富集的影响 Effects of the quantity of elution ethanolon the purification of total alkaloids from L. chuanxiong Hort. 结果表明, 随着乙醇洗脱用量的增加, 样品中总生物碱逐渐被洗脱下来, 当洗脱剂用量为 1 BV 时, 洗脱液中的总生物碱已基本洗脱完全 因此, 确定乙醇最佳洗脱用量为 1 BV.1 正交试验结果与分析根据正交设计方案, 按 项下方法于 17 nm

6 处测定 9 份试验样品总生物碱含量 正交试验结果及方差分析见表 表 3 Table 试验号 A 上样液 ph 值 B 上样液浓度 由表 中 R 值可以看出, 影响川芎总生物碱含量的的因素主次顺序依次为 A>B>C>D, 即上样液 ph 值对生物碱含量的影响最大, 其次为上样液浓度, 乙醇洗脱浓度和上样量 由表 3 方差分析可知, 因素 A 的影响显著 (P<.1), 因素 B 和 C 的影响均不显著 (P>.1), 因素 D 因离均差平方和最小作为误差估计项, 影响最小 因此, 最终确定大孔树脂纯化川芎总生物碱最佳工艺条件为 A 1 B C 3 D 3 即上样液 ph, 上样浓度.79 9 mg/ml, 乙醇洗脱浓度 5 %, 上样量 BV 作为实施方案加以验证 C 乙醇洗脱浓度 D 上样量 k k k R 主次顺序 A>B>C>D 优水平 A 1 B C 3 D 3 Table 3 9 表 正交试验 L 9(3 ) 方案及结果 The results and scheme of L 9(3 )orthogonal experiment 来源平方和 S 自由度 f 均方和 S/f F P A <.1 B >.1 C >.1 D( 误差 ) 注 :F.1(,)=9. 表 3 正交试验方差分析表 The table of variance analysis of orthogonal experiment.11 验证试验按照优选的最佳纯化工艺条件进行验证 : 即量取已处理好的 AB- 大孔树脂 3 ml 湿法装柱, 精密吸取 ph 的总生物碱质量浓度为.79 9 mg/ml 的川芎水溶液 BV 上样, 吸附 1 h 后, 先用 13 BV 去离子水除杂后, 再用 1 BV 体积分数 5 % 的乙醇进行洗脱, 收集洗脱液, 蒸干, 称取一定量氯仿定容至 5 ml 分别精密吸取.1 ml, 按 项下方法于 17 nm 处测定试验样品中川芎总生物碱的含量 (mg/g) 另外, 分别精密吸取未经 AB- 大孔树脂纯化的原提取液 5 ml, 以及纯化后重新溶解的溶液 5 ml, 放置于蒸发皿烘干至恒重, 称定重量, 计算浸膏中总生物碱含有量 (mg/g) 试验重复 3 次, 结果见表 表 由表 可知, 经 AB- 大孔树脂纯化川芎总生物碱后, 所得浸膏中总生物碱的含有量由 5.3 mg/g 提高到 137. mg/g, 纯化后纯度提高了.3 倍, 回收率为 %(RSD=1. %,n=3) 可见 AB- 大孔吸附树脂可作为一种良好的纯化川芎总生物碱的树脂使用 3 结论 本试验首次采用静态吸附分离法优选了 AB- 大孔吸附树脂为纯化川芎总生物碱的最佳型号树脂 正交试验优化了动态富集最佳工艺条件 : 上样液 ph 值为., 上样质量浓度为.79 9 mg/ml, 上样量为 BV, 用 13 BV 去离子水除杂后, 再用 1 BV 体积分数 5 % 的乙醇进行洗脱 川芎总生物碱经 AB- 大孔树脂纯化后, 所得浸膏中总生物碱的含量由 5.3 mg/g 提高到 137. mg/g, 纯化后纯度提高了.3 倍, 回收率为 %(RSD=1. %,n=3) 该工艺简单可行, 纯化富集效果较好, 对大生产有一定指导作用 参考文献 : AB- 大孔树脂纯化川芎总生物碱的验证试验 (n=3) Table Verification tests for the purification of total alkaloids from L. chuanxiong Hort. by macroporous resin(n=3) 试验号 提取物中含量 / 纯化后含量 / (mg/ml) (mg/ml) 回收率 / % 浸膏中含量 / (mg/g) 研发与工艺 纯化后含量 /(mg/g) 纯化率 / 倍 平均值 [1] 陈闽军, 吴永江, 范骁晖, 等. 色谱指纹图谱分析技术用于鉴别中药川芎产地 [J]. 中国中药杂志, 3, (7): -1 [] Yan R, Li S L, Chung H S, et al. Simultaneous quantification of 1 bioactive components of Ligusticum chuanxiong Hort. by high-performance liquid chromatography[j]. J Pharm Biomed Anal, 5, 37 (1): 7-95 [3] 孙立磊, 王帅, 包永睿, 等. 多波长覆盖融合指纹图谱评价不同 产地川芎药材差异性 [J]. 中国实验方剂学杂志, 1, (5): 75-79

7 食品研究与开发 Food Research And Development 17 年 月第 3 卷第 11 期 91 DOI:1.399/j.issn 山药粉咀嚼片的研制及其稳定性考察 方娟, 陈淑红, 许有瑞 *, 张可锋, 林家逊, 段小群 ( 桂林医学院药学院, 广西桂林 51) 摘要 : 采用粉末直接压片工艺, 运用正交试验设计优选山药粉咀嚼片的处方, 并考察其稳定性 结果表明最佳处方组成为山药粉 微晶纤维素 硬脂酸镁 罗汉果甜苷 = , 所制备的咀嚼片硬度与脆碎度均符合药典要求 稳定性试验结果表明温度和光照对该咀嚼片的稳定性无明显影响, 而湿度对其影响较大, 故在生产 包装 储运过程中应注意防水 防潮 关键词 : 山药粉 ; 咀嚼片 ; 稳定性 Preparation and Stability of Yam Powder Chewable Tablet FANG Juan, CHEN Shu-hong, XU You-rui *, ZHANG Ke-feng, LIN Jia-xun, DUAN Xiao-qun (College of Pharmacy, Guilin Medical University, Guilin 51, Guangxi, China) Abstract: The technique of direct powder compression and orthogonal design were employed to optimize the formulation of yam powder chewable tablet, and the stability was also investigated. The results shown that the optimal formulation of yam powder chewable tablet was as follows: yam powder microcrystalline magnesium stearate mogroside= , and the hardness and breakage were met the demand. In addition, because humidity had distinct influence on stability of the chewable tablet, while temperature and light had no influence, it is important to keep away from moisture and water in the process of producing, packaging, storage and transportation. Key words: yam powder; chewable tablet; stability 基金项目 : 大学生创新创业训练计划项目 (15119); 桂林医学院高层次人才科研启动项目 (KY11); 广西高校科研项目 (YB1) 作者简介 : 方娟 (1993 ), 女 ( 壮 ), 本科, 研究方向 : 药学专业 ( 临床药学方向 ) * 通信作者 : 许有瑞 (19 ), 男 ( 汉 ), 讲师, 博士, 研究方向 : 中药活性成分的研究与开发 [] 张斯杰, 郭建博, 王晓莉, 等. 川芎 - 香附提取物对原发性痛经模型动物的作用 [J]. 沈阳药科大学学报, 13, 3(5):33-37 大学学报, 5, 1():13-13 [11] 贾振宝, 陈文伟, 关荣发, 等. 大孔吸附树脂纯化红茶黄素的研 [5] 赵永烈, 王谦, 王良叶, 等. 川芎治疗头痛各家谈 [J]. 中医药学报, 1():97-11 究 [J]. 中草药, 1, 1(7): [1] 徐东峰, 李斌. 大孔吸附树脂在分离纯化生物碱中的应用 [J]. 江 [] 张晓琳, 徐金娣, 朱玲英, 等. 中药川芎研究新进展 [J]. 中药材, 1, 35(1): 西中医药, 13,(1): 53-5 [13] 孙越, 曹喜红, 潘艳丽. 大孔吸附树脂在中药研究中的应用 [J]. 中 [7] 王立英, 曲娴, 刘絮, 等. 川芎生物碱对大鼠血清中 SOD 活性 NO NOS MDA 含量的影响 [J]. 中国老年学杂志,, (): 医药信息,,19():3 [1] 李路扬, 龙娓芳, 万定荣, 等. 5 种小檗属药用植物总生物碱及小檗碱的含量测定 [J]. 中国实验方剂学杂志, 1, (17): 91 [] 高健, 曲晓峰, 刘洋. 川芎生物碱对脑缺血再灌注大鼠 SOD MDA 神经功能及脑梗死容积的影响 [J]. 中国老年学杂志, 9, 9(1): - [15] 王小芳, 张喜民, 邓月婷, 等. 大孔树脂分离纯化松潘乌头总生物碱研究 [J]. 中成药, 1, 3(): - [1] 孙政华, 郭玫, 邵晶, 等. 大孔吸附树脂纯化富集五脉绿绒蒿总 [9] 崔新颖, 刘惠民. 川芎生物碱对抗异丙肾上腺素诱发的急性心肌缺血试验研究 [J]. 中国地方病防治杂志,, (1): 1 生物碱 [J]. 中成药, 1, 3(1): 77-3 [1] 何伟, 李伟. 大孔树脂在中药成分分离中的应用 [J]. 南京中医药 收稿日期 :1--

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