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1 1040 论著原发性高血压患者胆红素及氧化应激水平与颈动脉粥样硬化的关系叶张章 1, 吴敏 1 1, 梁毓源摘要目的探讨原发性高血压 (EH) 患者胆红素及氧化应激表达, 及其与颈动脉粥样硬化的关系方法连续入选 2015 年 3 月 ~2016 年 12 月于琼海市人民医院心血管内科治疗的 EH 患者 187 例, 根据彩色多普勒超声检查颈动脉内膜中层厚度 (IMT) 将患者分为 EH 患者 ( 对照组,n=97) 和 EH 合并动脉粥样硬化患者 ( 研究组,n=90) 检测患者血清中胆红素水平, 包括总胆红素 (TBIL) 直接胆红素 (DBIL) 和间接胆红素 (IBIL) 水平, 另外检测血清中氧化应激水平, 包括同型半胱氨酸 (HCY) 超氧化物歧化酶 (SOD) 丙二醛 (MDA) 一氧化氮 (NO) 及氧化型低密度脂蛋白 (OX-LDL) 水平对比分析两组患者胆红素水平及氧化应激因子水平, 同时分析不同动脉粥样硬化程度患者的各检测因子水平及相关性, 另外分析各检测因素的相关性结果两组患者年龄性别构成比体质指数 (BMI) 病程等比较, 差异均无统计学意义 (P>0.05) 与对照组相比, 研究组患者 TBIL DBIL IBIL SOD 和 NO 水平均明显下降, 而 HCY MDA 及 OX- LDL 水平均显著升高, 且差异均具有统计学意义 (P 均 <0.05) 随着动脉粥样硬化程度的升高, 各组患者检测因子水平之间的差异均具有统计学意义 (P<0.05), 与内膜增厚组相比, 内膜斑块形成组和内膜狭窄组患者的 TBIL DBIL IBIL SOD 及 NO 水平明显下降, 而 HCY MDA 及 OX- LDL 水平显著升高 ; 与内膜斑块形成组相比, 内膜狭窄组患者的 TBIL DBIL IBIL SOD 及 NO 水平明显下降, 而 HCY MDA 及 OX- LDL 水平显著升高, 且差异均具有统计学意义 (P 均 <0.05) 相关性分析结果显示,IMT 值与 TBIL DBIL IBIL SOD 和 NO 水平呈负相关, 而 HCY MDA 及 OX- LDL 水平呈正相关 (P<0.05) 同时, 各检测指标存在密切的相关性,TBIL DBIL IBIL SOD 和 NO 水平与 HCY MDA 及 OX- LDL 水平之间呈负相关,TBIL DBIL IBIL SOD 和 NO 水平之间呈正相关,HCY MDA 及 OX- LDL 水平之间呈正相关 (P 均 <0.05) 结论原发性高血压患者合并动脉粥样硬化的发生和发展, 与血清胆红素水平及氧化应激反应密切相关, 血清胆红素水平与氧化应激因子水平显著相关关键词原发性高血压 ; 胆红素 ; 氧化应激 ; 颈动脉粥样硬化中图分类号 R544.1 文献标志码 A 文章编号 (2017) The relationship among bilirubin, oxidative stress of patients with essential hypertension and carotid artery atherosclerosis Ye Zhangzhang *, Wu Min, Liang Yuyuan. Qionghai People's Hospital, Qionghai , China. * Department of Cardiovascular Medicine, [Abstract] Objective To explore the expression of bilirubin and oxidative stress of patients with essential hypertension (EH) and its relationship with carotid atherosclerosis. Method According to the color doppler ultrasound carotid intima-media thickness (IMT), 187 patients with EH from March 2015 to December 2016 were divided into control group (patients with EH, n=97) and research group (patients with EH merger with atherosclerosis, n=90). The levels of oxidative stress in serum were measured, including total bilirubin (TBIL), direct bilirubin (DBIL) and indirect bilirubin (IBIL). In addition, the levels of homocysteine (HCY), superoxide dismutase (SOD), malondialdehyde (MDA), nitric oxide (NO) and oxidized low density lipoprotein (OX-LDL) in serum were measured. The levels of BIL and oxidative stress factors of two groups of patients were compared, at the same time, the levels and relevance of the degree of atherosclerosis and various detection factors were analyzed. Additionally, the correlation among detection factors were analyzed. Results The levels of TBIL, DBIL, IBIL, SOD and NO of patients in research group were significantly lower than those in control group, while levels of HCY, MDA and OX- LDL were significantly higher than those in control group, and the differences were statistically significant (P<0.05). With the increase of the degree of atherosclerosis, the differences of levels of detection factors were statistically significant (P<0.05). The levels of TBIL, DBIL, IBIL, SOD and NO in intimal plaque formation group and narrow group were lower than those in intimal thickening group (P<0.05). The levels of HCY, MDA and OX-LDL were significantly higher than those in intimal thickening group (P<0.05). The levels of TBIL, DBIL, IBIL, SOD and NO in narrow group were significantly higher than those in intimal plaque formation group, while the levels of HCY, MDA and OX-LDL were significantly higher than those in lining plaque formation group, and the differences were 基金项目 : 海南省 2014 年度普通医学科研项目 (14A210213) 作者单位 : 琼海, 琼海市人民医院心血管内科 doi: /j.issn

2 1041 statistically significant (P<0.05). IMT value was negatively correlated with and the levels of TBIL, DBIL, IBIL, SOD and NO (P<0.05), positively correlated with the levels of HCY, MDA and OX-LDL (P<0.05). There were negative correlations among the levels of TBIL, DBIL, IBIL, SOD, NO, HCY, MDA and OX-LDL (P<0.05); There were positive correlations among the levels of TBIL, DBIL, IBIL, SOD and NO (P<0.05); There were positive correlations among the levels of HCY, MDA and OX-LDL (P<0.05). Conclusions The occurrence and development of EH patients combined with atherosclerosis is closely related to the level of BIL and oxidative stress. The level of serum BIL is significantly related to the levels of oxidative stress factors. [Key words] Essential hypertension; Bilirubin; Oxidative stress; Carotid artery atherosclerosis 原发性高血压 (EH) 是由于血压长期维持在高水平容易导致心室壁肥厚心肌舒张功能下降及动脉粥样硬化等, 同时 EH 也会造成一系列心脑血管疾病, 发病率高, 给患者的生活质量造成重要影响 [1,2] 临床上 EH 与动脉粥样硬化联系密切, 两者互为影响 [3] 动脉粥样硬化多是由高血压及机体代谢紊乱所致 [4], 血液中的脂质逐渐在血管壁上沉积, 形成斑块和管腔狭窄等, 危险因素包括血管内皮组织的损伤及功能障碍, 其严重程度与多种因素有关 [5,6] 近来研究证实 [5], 胆红素 (BIL) 水平与 EH 患者动脉粥样硬化的发生情况密切相关, 低水平的胆红素能够导致动脉粥样硬化的发生, 胆红素在体内有较强的抗氧化能力, 清除氧自由基, 保护内皮细胞, 从而防止动脉粥样硬化的发生另外, 动脉粥样硬化的发生发展与氧化应激密切相关, 可以用于反应机体的氧化应激状态 [7] 国内对于胆红素和氧化应激的研究较多 [2,6,7], 但并未进行深入研究, 本研究通过观察 EH 患者胆红素和氧化应激状态与动脉粥样硬化的关系, 旨在为治疗 EH 患者合并动脉粥样硬化提供治疗方案, 现报告如下 : 1 资料与方法 1.1 研究对象与分组连续入选 2015 年 3 月 ~2016 年 12 月于琼海市人民医院心血管内科治疗的 EH 患者 187 例, 其中男性 113 例, 女性 74 例, 年龄 50~68 岁, 平均 (57.43±4.96) 岁所有患者的诊断均参考 2010 年中国高血压指南诊断标准 [8], 纳入标准 :1 年龄不低于 50 岁 ;2 患者临床资料完整且依从性高 ;3 患者同意并签订知情同意书排除标准 :1 继发性高血压患者 ;2 合并患有痛风肝胆疾病及肾功能衰竭患者 ;3 合并患有血液系统及风湿免疫系统疾病患者 ;4 精神意识障碍患者所有研究过程均符合我院医学伦理委员会的相关规定根据彩色多普勒超声检查颈动脉内膜中层厚度 (IMT) 将患者分为对照组 97 例 ( 0.9 mm), 研究组 90 例 (>0.9 mm), 其中对于研究组进一步细分为内膜增厚组 (0.9 mm <IMT 1.2 mm)39 例, 内膜斑块形成组 (1.2 mm IMT<1.4 mm)38 例和内膜狭窄组 (IMT 1.4 mm)20 例 1.2 方法治疗方法所有患者入院后, 根据患者的临床症状采用对症治疗一般治疗和药物治疗等对症治疗主要包括对基础疾病的治疗, 改善基础疾病导致的症状 ; 一般治疗 : 保证患者每日能量的摄入量等 ; 药物治疗 : 利尿剂 ( 双氢克尿塞安体舒通呋塞米等 ); 血管紧张素转换酶抑制剂 ( 依那普利等 ); 正性肌力药 ( 地高辛 );β 受体阻滞剂 ( 美托洛尔等 ); 扩血管药物 ( 硝酸酯类药物 ) 颈动脉 IMT 值检测患者处于安静状态, 在恒温检查室中, 由同一位医生进行操作, 采用飞利浦 HD11 彩色多普勒超声检查仪, 探头频率设置为 8~10 MHz, 取患者仰卧位, 伸展颈部, 使得其充分暴露, 头部向检查对侧偏向, 从颈动脉开始, 沿着血管走向纵向检查及横切面检查, 对频谱特征进行分析胆红素水平检测所有患者均于入院 24 h 内空腹抽取静脉血 4 ml, 置于未涂有肝素钠的采血管中, 以 4000 r/min 速度离心 10 min, 分离上清液, 即得血清取一部分血清采用矾酸氧化法检测血清中总胆红素 (TBIL) 直接胆红素 (DBIL) 间接胆红素 (IBIL) 的水平血清氧化应激因子检测使用罗氏 C8000 全自动生化分析仪, 采用循环酶法检测血清中同型半胱氨酸 (HCY) 的水平, 采用比色法检测血清中超氧化物歧化酶 (SOD) 的水平, 采用 TBA 法检测血清中丙二醛 (MDA) 的水平另外分别应用硝酸还原酶法和酶联免疫吸附测定法检测血清中一氧化氮 (NO) 和氧化型低密度脂蛋白 (OX- LDL) 的水平, 试剂盒由南京建成生物工程研究所提供 1.3 统计学方法所有数据均采用 SPSS 19.0 统计学软件分析, 计量资料采用均数 ± 标准差 ( x ±s) 表示, 两组间均数的比较采用 t 检验, 多组间差异比较采用单因素方差分析 ; 计数资料采用例数 ( 构成比 ) 表示, 组间比较采用 χ 2 检验 ; 各检测因子与动脉硬化程度的关系和各检测因子水平的关系分别采用 Spearman 和 Pearson 相关性分析 P<0.05 为差异有统计学意义

3 结果 2.1 一般资料比较两组患者年龄性别构成比例体质指数 (BMI) 病程比较, 差异均无统计学意义 (P 均 >0.05), 表两组患者 BIL 水平及氧化应激水平的比较与对照组相比, 研究组患者 TBIL DBIL IBIL SOD 和 NO 水平均明显下降, 而 HCY MDA 及 OX- 表 1 两组患者一般临床资料的比较项目对照组 (n=97) 研究组 (n=90) P 值年龄 ( 岁 ) 57.51± ± 男性 (n,%) 57(58.8) 56(62.2) 体质指数 (kg/m 2 ) 22.11± ± 病程 ( 年 ) 3.29± ± 舒张压 (mmhg) 96.23± ± 收缩压 (mmhg) ± ± 合并糖尿病 (n,%) 10(10.31) 9(10.00) 指标表 2 两组患者 BIL 水平及氧化应激水平的比较 ( x ±s) 对照组研究组 (n=97 例 ) (n=90 例 ) BIL(μmol/L) TBIL 13.15± ± <0.001 DBIL 4.71± ± IBIL 8.63± ± <0.001 HCY(mmol/L) 10.83± ± <0.001 SOD(U/mL) ± ± <0.001 MDA(nmol/L) 4.69± ± <0.001 NO(μmol/L) 84.21± ± <0.001 OX- LDL(μg/dL) 30.14± ± <0.001 t 值 P 值注 :BIL: 胆红素 ;TBIL: 总胆红素 ;DBIL: 直接胆红素 ;IBIL: 间接胆红素 ;HCY: 同型半胱氨酸 ;SOD: 超氧化物歧化酶 ; MDA: 丙二醛 ;NO: 一氧化氮 ;OX- LDL: 氧化型低密度脂蛋白 LDL 水平均显著升高, 且差异均具有统计学意义 (P 均 <0.05), 表不同动脉粥样硬化程度组间 BIL 水平及氧化应激水平的比较随着动脉粥样硬化程度的升高, 三组患者各检测因子水平之间的差异均具有统计学意义 (P<0.05) 与内膜增厚组相比, 内膜斑块形成组和内膜狭窄组患者的 TBIL DBIL IBIL SOD 及 NO 水平明显下降, 而 HCY MDA 及 OX- LDL 水平显著升高 ; 与内膜斑块形成组相比, 内膜狭窄组患者的 TBIL DBIL IBIL SOD 及 NO 水平明显下降, 而 HCY MDA 及 OX- LDL 水平显著升高, 且差异均具有统计学意义 (P 均 <0.05), 表 BIL 水平及氧化应激水平与 IMT 值的相关性应用 Spearman 相关性分析, 结果显示,187 例患者 IMT 值与 TBIL DBIL IBIL SOD 和 NO 水平呈负相关, 而 HCY MDA 及 OX- LDL 水平呈正相关 (P 均 <0.05), 表分析各检测因子水平之间的相关性采用 Pearson 相关性分析, 结果表明, 各检测指标存在密切的相关性,TBIL DBIL IBIL SOD 和 NO 水平与 HCY MDA 及 OX- LDL 水平之间呈负相关, TBIL DBIL IBIL SOD 和 NO 水平之间呈正相关,HCY MDA 及 OX- LDL 水平之间呈正相关 (P 均 <0.05), 表 5 3 讨论表 3 不同动脉粥样硬化程度组间 BIL 水平及氧化应激水平的比较指标内膜增厚组 (n=39 例 ) 内膜斑块形成组 (n=38 例 ) 内膜狭窄组 (n=20 例 ) F 值 P 值 BIL(μmol/L) TBIL 12.01± ±2.95 a 8.33±2.06 ab <0.001 DBIL 4.31± ±0.71 a 3.75±0.68 ab IBIL 7.16± ±1.04 a 6.01±0.86 ab HCY(mmol/L) 13.26± ±3.59 a 15.47±4.02 ab SOD(U/mL) ± ±15.36 a 94.02±12.17 ab <0.001 MDA(nmol/L) 6.37± ±2.24 a 9.41±2.86 ab <0.001 NO(μmol/L) 73.07± ±14.86 a 58.33±10.09 ab <0.001 OX- LDL(μg/dL) 35.06± ±8.14 a 50.29±9.36 ab <0.001 注 :BIL: 胆红素 ;TBIL: 总胆红素 ;DBIL: 直接胆红素 ;IBIL: 间接胆红素 ;HCY: 同型半胱氨酸 ;SOD: 超氧化物歧化酶 ;MDA: 丙二醛 ;NO: 一氧化氮 ;OX- LDL: 氧化型低密度脂蛋白 ; 与内膜增厚组相比, a P<0.05; 与内膜斑块形成组相比, b P<0.05 表 4 BIL 水平及氧化应激水平与 IMT 值的相关性指标 IMT 值 r 值 P 值 TBIL DBIL IBIL HCY SOD MDA NO OX- LDL 注 :TBIL: 总胆红素 ;DBIL: 直接胆红素 ;IBIL: 间接胆红素 ; HCY: 同型半胱氨酸 ;SOD: 超氧化物歧化酶 ;MDA: 丙二醛 ; NO: 一氧化氮 ;OX-LDL: 氧化型低密度脂蛋白近年来, 随着我国人民饮食结构的变化, 心血管疾病的发病率和病死率逐年升高, 随着医学技术的发展, 对于心血管疾病的发展进行了深入研究 [9] EH 是启动动脉粥样硬化的因素之一, 而颈动脉 IMT 可作为颈动脉粥样硬化的早期表现 [10] 高血压患者的搏动性血流速度加快, 血管出现痉挛而发生缺血缺氧, 从而加重对血管内皮组织的损伤, 最终加速动脉粥样硬化的发展 [11] 动脉粥样硬化是导致心脑血管疾病发生的病理基础, 对于机体全身的动脉系统产生影响, 从而导致出现心脑血管疾病, 同时颈动脉最易出现动脉粥样硬

4 1043 表 5 分析各检测因子水平之间的相关性指标 TBIL DBIL IBIL SOD NO HCY MDA OX- LDL TBIL DBIL IBIL SOD NO HCY MDA OX-LDL 注 :TBIL: 总胆红素 ;DBIL: 直接胆红素 ;IBIL: 间接胆红素 ;SOD: 超氧化物歧化酶 ;NO: 一氧化氮 ;HCY: 同型半胱氨酸 ;MDA: 丙二醛 ;OX-LDL: 氧化型低密度脂蛋白化, 其特征表现为颈动脉粥样硬化斑块的形成由于颈动脉的位置特点有利于超声检查, 从而对动脉粥样硬化进行评价 [12,13], 动脉粥样硬化的发展变化会加速动脉血管弹性下降, 加重 EH, 形成恶性循环 [11], 因此尽早防治动脉粥样硬化对于降低 EH 患者发生心血管事件的发生具有重要意义经过单因素和多因素分析发现,BIL 与动脉病变之间存在负相关, 血清 BIL 水平每降低 50%, 动脉发生病变的几率升高 47%, 高血糖和高血脂作为影响 EH 的独立危险因素, 国内的研究较多, 但血清中胆红素水平与心血管疾病的联系并未进行深入研究 [5] 另外氧化应激也是导致动脉粥样硬化形成的重要因素之一, 参与斑块的形成发展和破裂全过程 [14] BIL 是由肝微粒体氧化酶分解亚铁血红素形成的终产物, 同时根据与血红蛋白的结合状态又可以分为 DBIL 和 IBIL,BIL 来源于过氧化氢酶细胞色素及肌红蛋白等含叶琳的化合物分解得到的, 正常机体每日大约产生 300 mg 的 BIL, 其抗氧化的作用是维生素 E 的 20 倍, 能够避免氧自由基的损伤作用 BIL 不仅是一种四吡咯色素, 而且作为一种具有抗氧化性的内源性生物还原剂, 经过代谢后与血清蛋白结合在一起, 辅以肝胆红素葡萄糖醛酸转移酶的作用, 形成酯化 BIL [5] BIL 能够有效清除氧自由基, 降低氧自由基对于血管内皮造成的损伤, 从而保护内皮细胞, 延缓动脉粥样硬化的过程 [15] 另外可提高胆固醇的溶解性, 使其从胆汁中排泄, 最近 BIL 越来越受到人们的关注, 等摩尔浓度的 BIL 能够有效抑制低密度脂蛋白被氧化的程度 [12] 本研究中研究组患者血清中 TBIL DBIL 和 IBIL 水平均明显低于对照组 (P<0.05), 同时随着动脉粥样硬化程度的升高, 三组患者的 BIL 水平明显降低 (P <0.05), 同时 IMT 值与 TBIL DBIL 和 IBIL 水平呈负相关 (P<0.05), 另外, 三种 BIL 类型之间存在正相关 (P<0.05), 结果表明 BIL 对于 EH 患者合并出现动脉粥样硬化的发生和发展具有重要意义出现上述现象的原因分析如下 [5,10,12],BIL 作为抗氧化剂, 降低通过氧自由基介导的脂质损害, 发挥保护因子的功效, 加速胆固醇经过胆汁排泄的速度 ; 同时 BIL 可能通过影响抑制血管平滑肌细胞增殖的信号转导通路而发挥抵抗动脉粥样硬化的作用 ; 另外 BIL 还可以下调人体纤维细胞内蛋白激酶的活性, 从而影响导致血管壁发生动脉粥样硬化的进程氧化应激的失衡对于 EH 患者发生动脉粥样硬化的发生与发展同样具有重要意义, 其中多种因子能够表明机体的氧化应激状态 [6] 研究中对氧化应激相关因子水平进行研究发现, 与对照组相比, 研究组患者 SOD 和 NO 水平均明显下降 (P<0.05), 而 HCY MDA 及 OX- LDL 均显著升高 (P<0.05), 同时在对不同严重程度动脉粥样硬化患者分析过程中, 结果表明, 随着动脉粥样硬化程度的升高, 三组患者血清中各氧化应激因子水平之间的差异具有统计学意义 (P <0.05), 在相关性分析结果中,IMT 值与 SOD 和 NO 水平呈负相关 (P<0.05), 而 HCY MDA 及 OX- LDL 水平呈正相关 (P<0.05), 并且各种氧化应激因子之间存在相关性, 这些结果都表明氧化应激反应在 EH 患者合并发生动脉粥样硬化的过程中具有重要作用这主要是研究中选择的氧化应激反应中的各个因子水平的升高或下降均会打破氧化应激反应的平衡状态, 加重血管内皮组织的损伤, 加速胆固醇的聚集速度, 同时在炎症因子的协同作用下, 共同参与动脉粥样硬化的形成与发展 [16,17] 在对各检测因子进行 Pearson 相关性分析中, 各检测因子之间均存在相关性, 但是具体的原因尚未明确, 需要进一步的研究综上所述,EH 患者合并动脉粥样硬化的发生和发展与 BIL 和氧化应激水平存在密切联系, 而且可以用于动脉粥样硬化恶化程度的诊断, 为临床上诊断预防和治疗 EH 合并动脉粥样硬化提供理论基础参考文献 [1] Onal EM,Sag AA,Sal O,et al. Erythropoietin mediates brain-vascularkidney crosstalk and may be a treatment target for pulmonary and resistant essential hypertension[j]. Clin Exp Hypertens,2017,39(3):

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357 P <. 5. TCD findings revealed that the contralateral vertebral artery systolic blood flow velocities in patients with phase Ⅰ Ⅱ and Ⅲ steal groups

357 P <. 5. TCD findings revealed that the contralateral vertebral artery systolic blood flow velocities in patients with phase Ⅰ Ⅱ and Ⅲ steal groups 356 TCD 212 3 215 4 TCD 45 TCD 8 Ⅰ 21 Ⅱ 11 Ⅲ 5 4 45 6 2 Ⅰ 12 9 Ⅱ 3 7 1 Ⅲ 3 2 r =. 78 P