1360 水产学报 39 卷与少, 直接影响着该品种是否适宜在生产上推广使用 [12] 在以往的坛紫菜育种中, 选育性状主要集中在叶状体的生长速度成熟期藻体厚度和色素蛋白含量等, 而壳孢子放散量没有被列为新品系选育的主要目标性状, 导致一些坛紫菜新品种 ( 系 ) 在生产上大规模使用时遇到一定

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莲求支
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1 第 39 卷第 9 期 2015 年 9 月水产学报 JOURNALOFFISHERIESOFCHINA Vol.39,No.9 Sept.,2015 文章编号 : (2015) DOI: /jfc 坛紫菜杂交重组品系的选育与特性分析丁洪昌 1 1,2, 严兴洪 (1. 上海海洋大学水产与生命学院, 上海 ; 2. 上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室, 上海 ) 摘要 : 坛紫菜杂交重组品系 (HR 6) 具有叶状体生长前期生长较快, 色素蛋白含量高, 但成熟较早, 生长期短, 丝状体的壳孢子放散量较少等特性 ; 坛紫菜另一个杂交重组品系 (HR 5) 具有叶状体生长前期生长较慢, 色素蛋白含量高, 但成熟晚, 生长期较长, 丝状体的壳孢子放散量多等特性为改善 HR 6 品系叶状体成熟较早, 壳孢子放散量较少的弱点, 本文以 HR 6 品系为父本,HR 5 品系为母本进行种内杂交, 从杂合丝状体产生的 F 1 叶状体中选育出综合性状更加优良的品系 (WD 7) 在叶状体的快速生长前期( 日龄 30~45d), 父本品系的绝对生长率为 6 68cm/d, 母本品系为 3 63cm/d,WD 7 品系为 6 67cm/d; 在叶状体的快速生长中后期 ( 日龄 46~60d), 父本品系的绝对生长率降至 5 15cm/d, 母本品系则升至 7 27cm/d, 而 WD 7 品系则高达 11 54cm/d 父本品系的叶状体成熟最早, 培养 35d 左右, 大部分个体已成熟 ;WD 7 品系遗传了母本品系成熟较晚的优点, 日龄 55d 之后, 大部分个体才出现成熟日龄 35d 的叶状体平均厚度,WD 7 品系为 29 87μm, 分别比父母本品系增加了 10% 和 16%, 藻体的韧性明显增强 WD 7 品系的壳孢子放散总量为万个 / 壳, 分别是父母本品系的 1 17 倍和 0 57 倍上述结果证实,WD 7 品系不仅遗传了父本品系叶状体生长前期生长较快的特性, 同时又遗传了母本品系叶状体成熟晚生长期长中后期生长快的优点, 壳孢子放散量也比父本品系有所增加, 该品系有望被培育成适宜大规模栽培的新品种关键词 : 坛紫菜 ; 叶状体 ; 种内杂交 ; 重组品系 ; 绝对生长率中图分类号 :S968.4 文献标志码 :A 紫菜味道鲜美, 营养丰富, 具有抗衰老 [1] 降 [2] 血脂等功效目前我国大规模人工栽培的紫菜主要有坛紫菜 (Pyropiahaitanensis) 和条斑紫菜 (Pyropiayezoensis) 其中坛紫菜被广泛栽培在福建浙江和广东沿海, 其年产量占全国紫菜年产量的 75% 左右 [3] 上世纪六十年代, 随着坛紫菜的基本生物学生活史全人工采苗和人工栽培技术等研究取得成功 [4], 该紫菜的人工栽培业得以建立和发展经过 50 多年栽培使用的坛紫菜野生种, 其种质出现了较严重的退化, 在产量品质和抗逆性等方面均有所下降所以, 培育出适宜大规模栽培的新品种对坛紫菜产业的可持续发展具有重要价值近十多年来, 坛紫菜的品种改良工作取得了一定进展, 利用诱变育种和杂交育种等技术选育出了一些优质高产的坛紫菜新品种 ( 系 ) [5-8] 在坛紫菜生产中, 叶状体的生长速度和成熟期长短均是影响紫菜产量的重要因素, 而叶状体的光合色素与色素蛋白含量则会影响紫菜的品质 [9-11], 栽培品种贝壳丝状体的壳孢子放散量多收稿日期 : 修回日期 : 资助项目 : 国家八六三高科技研究发展计划 (2012AA10A411); 国家自然科学基金 ( ); 国家海洋局公益专项 ( , ); 国家农业科技成果转化资金项目 (2013GB2C220537); 农业部公益性专项 ( ); 上海市科委重点科技攻关项目 ( ); 上海高校水产学一流学科建设项目 ; 福建省科技重大专项 (2011NZ0001-1); 福建省省长专项基金 (2014S ) 通信作者 : 严兴洪,E mail:xhyan@shou.edu.cn

2 1360 水产学报 39 卷与少, 直接影响着该品种是否适宜在生产上推广使用 [12] 在以往的坛紫菜育种中, 选育性状主要集中在叶状体的生长速度成熟期藻体厚度和色素蛋白含量等, 而壳孢子放散量没有被列为新品系选育的主要目标性状, 导致一些坛紫菜新品种 ( 系 ) 在生产上大规模使用时遇到一定的难度 [12] 所以培育出产量和品质优良, 同时壳孢子放散量又多的坛紫菜新品种对增产增收和大规模推广十分重要藻类杂交育种是以基因型不同的品系进行交配产生具有一定优势的杂交种, 再经过反复选育获得新品种的方法 [13], 其优势是可以有目的地将双亲的优良性状重组到杂交子代中吴宏肖 [14] 等通过种间杂交选出 4 个坛紫菜杂交重组品系, 其中的 HR 6 品系具有叶状体生长前期生长较快, 色素蛋白含量高, 但成熟较早, 生长期短, 丝状体的壳孢子放散量较少等特性 ; 坛紫菜的另一个杂交重组品系 (HR 5) 具有叶状体生长前期生长较慢, 色素蛋白含量高, 但成熟晚, 生长期较长, 丝状体的壳孢子放散量多等特性本研究是以 HR 6 品系为父本,HR 5 品系为母本, 通过品系间的杂交, 选育出具有父母本品系各自优势的新品系, 最终将其培育成适合大规模推广使用的新品种 1 材料和方法 1 1 亲本品系本实验所用的父本品系 (HR 6) 和母本品系 (HR 5) 均是通过印度产紫菜 (Pr WT01, 父本 ) 和坛紫菜诱变品系 (Ph HMC5, 母本 ) 杂交获得的重组选育品系 [14] 2 个品系均以自由丝状体的形式被保存于实验室内 [15] 壳孢子采苗与叶状体的培养方法参考相关研究 [16] 1 2 杂交实验当父母本品系的叶状体接近成熟时, 分别选取梢部长约 2cm 的藻体, 按 1 1 比例进行混合培养培养约 3d, 当母本叶片上出现红色的果孢子囊后, 移去父本叶片, 保留母本叶片继续培养待果孢子囊充分成熟后, 将母本叶片阴干处理 2~3 h 后, 放入含 50mL 培养液的培养皿 (Φ =9cm) 中静置培养, 数日后, 释放的果孢子发育成丝状体, 随后把单个丝状体挑出培养于试管中待丝状体长到一定大小的藻落后, 将其粉碎接种到文蛤壳上面, 之后培养成贝壳丝状体, 贝壳丝状体的培养方法与条件参考相关研究 [16] 1 3 杂合丝状体的 F 1 叶状体的培养待杂合丝状体成熟后, 放散出大量的壳孢子, 把收集到的壳孢子培养成叶状体, 具体方法参考相关研究 [16] 1 4 优良品系的分离培养杂合丝状体的 F 1 叶状体约 60d, 从出现的颜色嵌合体中挑选出 5 个具有一定生长优势的色块藻体, 利用海螺酶将它们分别酶解, 分离出单离体细胞进行体外再生培养 [17] 培养数周后, 分别从体细胞再生体中选取生长最快的叶状体, 进行单株培养当再生叶状体成熟时, 利用叶状体的单性生殖最终获得纯合的自由丝状体 ( 品系 ) [18] 通过对比 5 个选育品系与亲本品系的叶状体形态颜色生长速度藻体韧性成熟期等性状, 从中筛选出综合性状最优的品系 1 5 叶状体生长的测定当壳孢子苗生长至 30d 时, 随机挑选出每个品系的 20 棵苗进行培养, 每隔 5 天分别用直尺 (No 6240, 得力公司 ) 和电子天平 (BS124S, 赛多利斯公司 ) 测量一次它们的长度和鲜重绝对生长率采用公式 K 1 =(L - L 0 )/t 计算 ; 特定生长率采用公式 K 2 =(LnN - LnN 0 )/t 计算 [19] 式中,L(cm) N(cm) 均为某次测量的叶状体长度, L 0 (cm) N 0 (cm) 为前一次测量的叶状体的长度, t(d) 为培养时间 1 6 叶状体活体吸收光谱和色素含量的测定各品系的 F 1 叶状体生长至 35d 时, 用紫外分光光度计 (UV 2600, 岛津公司 ) 分别测量它们的活体吸收光谱叶绿素 a(chlorophyla, Chl.a) 藻红蛋白 (phycoerythrin,pe) 和藻蓝蛋白 (phycocyanin,pc) 的含量活体吸收光谱和 Chl.a 含量的测定方法参考相关研究 [15],PE 和 PC 的测定方法同高洪峰 [20], 总藻胆蛋白含量为 PE 与 PC 之和 1 7 叶状体厚度的测定各品系的 F 1 叶状体生长至 35d 时, 分别测量它们的基部中部和梢部的厚度将叶状体平铺在塑料板上, 用双面刀片 (74 C,FLYING EAGLE) 进行徒手切片, 用光学显微镜 (Nikon 90i, 尼康公司 ) 测量各部位的厚度, 每个部位测量 30 个样品, 取其平均值为该部位的平均厚度

3 9 期丁洪昌, 等 : 坛紫菜杂交重组品系的选育与特性分析壳孢子放散量的测定待各品系的贝壳丝状体成熟后, 每个品系各取 1 个贝壳置于含 50mL 培养液的塑料杯中进行充气培养, 培养条件 : 温度 (23±1), 光照密度 50 μmolphotons/(m 2 s), 明暗周期 10L:14D 每个品系设置 3 个平行组每日 13:00 把壳孢子水倒入培养皿 (Φ =9cm) 中, 静置 24h 后, 待壳孢子附着后再进行计数, 壳孢子数的统计方法同候同玉 [21] 当壳孢子开始放散后连续 20d 统计壳孢子日放散量, 每个品系取 3 个贝壳的平均数, 得出单个贝壳的壳孢子日放散量和壳孢子放散总量 1 9 数据统计分析实验数据用 Excel2010 进行常规计算后, 用 SPSS18 0 软件进行独立样本 T 检验统计值用平均值 ± 标准差 (mean±sd) 描述, 统计结果 P<0 05 时认为存在显著差异,P<0 01 时认为存在极显著差异活体吸收光谱曲线用 Origin 9 0 软件制作 2 结果 2 1 杂交结果父母本叶片混合培养 3d 左右, 在显微镜下可观察到母本叶片上出现较多的红色果胞子囊, 单独再培养母本叶片 4~6d, 果胞子囊逐渐成熟, 阴干后的叶片在培养皿中静置培养 2~3d, 就释放出一定数量的果孢子, 后者迅速萌发并长成杂合丝状体藻落 ( 图版 -1~6) 2 2 优良品系的筛选由杂合丝状体的壳孢子长成的 F 1 叶状体, 90% 以上的个体为颜色嵌合体, 不同的色块呈直线型排列, 极少数为单色叶状体培养至 60d 时, 从 5 个嵌合体中筛选出 5 个颜色好生长快的色块藻体, 然后利用海螺酶将它们分别酶解, 分离出单离体细胞进行体外再生培养培养 6~7 周后, 分别从体细胞再生体中选取生长最快的叶状体, 进行单株培养再培养数周后, 分别通过单性生殖获得纯合的自由丝状体 ( 品系 ) 通过对比 5 个选育品系与亲本品系的叶状体形态颜色生长速度藻体韧性成熟期等性状, 最终选育出综合性状最优的品系, 取名为 WD 7 品系 2 3 优良品系 F 1 叶状体的生长 WD 7 品系的 F 1 叶状体呈细长型, 藻体颜色较一致, 呈红褐色 ( 图版 -7~9), 藻体厚度适中, 韧性好, 具有较稀疏的边缘刺在叶状体快速生长前期 ( 日龄 30~45d),WD 7 品系的平均体长与父本品系较接近, 但远大于母本品系 ; 在叶状体快速生长的中后期 ( 日龄 45~60 d), 父本品系的生长速度明显变缓, 母本和 WD 7 品系仍保持快速生长 ( 图 1) 日龄 60d 时, 叶状体的平均体长, 其父本品系为 cm, 母本品系为 cm, 而 WD 7 品系高达 cm, 分别是父母本品系的 1 45 倍和 1 72 倍图 1 坛紫菜亲本品系 (HR 6,HR 5) 和种内杂交重组优良品系 (WD 7) 的 F 1 叶状体生长曲线 Fig 1 GrowthcurvesofF 1 gametophyticblades oftheparentalstrains(hr 6,HR 5)andthe improvedstrain(wd 7)bygeneticrecombinant ofintraspecifichybridizationinpyropiahaitanensis 3 个品系的叶状体绝对生长率均呈先升后降的趋势 ( 表 1) 父本品系的最大绝对生长率出现较早, 苗龄 36~40d 的绝对生长率达到最大值, 为 7 83cm/d, 随后逐渐降低 ; 母本品系的绝对生长率生长前期较低, 苗龄 51~55d 时达到最大值, 为 8 80cm/d;WD 7 品系的绝对生长率, 在生长前期与父本品系较接近, 苗龄 51~55d 时达到最大值, 为 13 31cm/d, 明显比父母本品系高但是,WD 7 品系的相对生长率介于父母本品系之间当日龄为 30~50d 时,WD 7 品系叶状体的平均单棵鲜重与父本品系接近, 但 50d 之后,WD 7 品系叶状体的平均单棵鲜重的增长明显比父本品系快 ( 图 2) 在整个培养期间, 母本品系叶状体的平均单棵鲜重增长一直较慢日龄为 60d 的叶状体,WD 7 品系的平均单棵鲜重为 2 24g, 分别是父母本品系的 1 37 倍和 2 80 倍

4 1362 水产学报 39 卷表 1 坛紫菜亲本品系 (HR 6,HR 5) 和种内杂交重组优良品系 (WD 7) 的 F 1 叶状体生长率 Tab.1 GrowthratesofF 1 gametophyticbladesoftheparentalstrains(hr 6,HR 5)andtheimproved strain(wd 7)bygeneticrecombinantofintraspecifichybridizationinP.haitanensis 培养天数 /d culturedays 绝对生长率 /(cm/d) absolutegrowthrate HR 6 HR 5 WD 7 特定生长率 /(% /d) specificgrowthrate HR 6 HR 5 WD 7 31~ (1 13 a,4 65 b ) (1 31 c,1 39 d ) 36~ (0 81,1 81) (0 89,0 59) 41~ (1 11,1 33) (1 21,0 60) 46~ (1 77,1 66) (1 73,0 89) 51~ (2 43,1 51) (1 99,0 84) 56~ (2 78,1 61) (2 01,0 93) 注 :a&c 为优良品系 (WD 7) 与父本品系 (HR 6) 的生长率比值 ;b d 为优良品系 (WD 7) 与母本品系 (HR 5) 的生长率比值 Notes:a cwastheratioofthegrowthratesofwd 7andHR 6;b&dwastheratioofthegrowthratesofWD 7andHR 5 父本品系高, 而 WD 7 品系的 5 个吸收峰的峰值均比父母本品系低图 2 坛紫菜亲本品系 (HR 6,HR 5) 和种内杂交重组优良品系 (WD 7) 的 F 1 叶状体平均单棵鲜重 Fig.2 ThewetweightperF 1 gametophyticblade oftheparentalstrains(hr 6,HR 5)andtheimproved strain(wd 7)bygeneticrecombinantofintraspecific hybridizationinp.haitanensis 父本品系的叶状体成熟较早, 日龄 26~30d 的叶状体就出现了成熟, 成熟的高峰出现在 36~ 40d, 培养至 40d 时, 成熟个体的百分率已达 83%; 母本品系和 WD 7 品系的成熟均较晚, 培养 46~50d 的叶状体才出现成熟, 成熟高峰出现在 51~60d, 培养至 60d 时, 成熟个体的百分率分别达 97% 和 80%( 图 3) 2 4 叶状体的活体吸收光谱与主要色素蛋白含量在 350~750nm 波长范围内,3 个品系叶状体的活体吸收光谱均存在 5 个明显的吸收峰 ( 图 4) 第个吸收峰的峰值, 父母本品系间相差无几, 但第 2 和第 3 个吸收峰的峰值却是母本品系高于父本品系, 暗示母本品系的 PE 含量比图 3 坛紫菜亲本品系 (HR 6,HR 5) 和种内杂交重组优良品系 (WD 7) 的 F 1 叶状体成熟个体百分率 Fig.3 PercentagesofthematureF 1 bladesofthe parentalstrains(hr 6,HR 5)andtheimproved strain(wd 7)bygeneticrecombinantof intraspecifichybridizationinp.haitanensis 日龄为 35d 的叶状体,WD 7 品系的叶绿素 a 含量为 7 62mg/g, 分别比父母本品系降低了 29% 和 24%, 同时,WD 7 品系的总藻胆蛋白含量为 77 40mg/g, 分别比父母本品系降低了 23% 和 35%( 图 5) 2 5 叶状体的厚度在 3 个品系的 F 1 叶状体中, 不同部位的藻体厚度不同, 但均呈越靠近藻体的梢部厚度越薄的趋势 ( 表 2) 父母本品系的平均厚度分别为 25 73μm 和 27 09μm,WD 7 品系比父母本品系都厚, 平均厚度为 29 87μm, 它的叶状体韧性也明显增加

5 9 期丁洪昌, 等 : 坛紫菜杂交重组品系的选育与特性分析 1363 图 4 培养 35d 的坛紫菜亲本品系 (HR 6,HR 5) 和种内杂交重组优良品系 (WD 7) 的 F 1 叶状体活体吸收光谱 Fig.4 InvivoabsorptionspectraofF 1 gametophytic bladesoftheparentalstrains(hr 6,HR 5) andtheimprovedstrain(wd 7)bygenetic recombinantofintraspecifichybridizationin P.haitanensisafterbeingculturedfor35days 图 5 培养 35d 的坛紫菜亲本品系 (HR 6,HR 5) 和种内杂交重组优良品系 (WD 7) 的 F 1 叶状体 Chl.a PE 和 PC 含量表示差异极显著 (P<0 01,t-test), 下同 Fig.5 ContentsofChl.a,PE,PC inthef 1 gametophytic bladesoftheparentalstrains(hr 6,HR 5) andtheimprovedstrain(wd 7)bygenetic recombinantofintraspecifichybridizationin P.haitanensisafterbeingculturedfor35days highlysignificantdiference(p<0 01,t test),thesameas thefolowing 表 2 培养 35d 的坛紫菜亲本品系 (HR 6,HR 5) 和种内杂交重组优良品系 (WD 7) 的 F 1 叶状体不同部位的厚度 Tab.2 ThicknessofdiferentpartsofF 1 gametophyticbladesoftheparentalstrains(hr 6,HR 5)andthe improvedstrain(wd 7)bygeneticrecombinantofintraspecifichybridizationinP.haitanensis afterbeingculturedfor35days 品系 strains 藻体各部位的平均厚度 /μm thicknessofdiferentpartsoftheblades 梢部 apical 中部 middle 基部 basal 平均厚度 /μm meanthicknes HR ± ± ± HR ± ± ± WD ± ± ± 壳孢子放散量在壳孢子开始放散后的 20d 内,3 个品系的贝壳丝状体均出现了 3 个较大的放散高峰, 且它们均出现在第 11 天之前 ( 图 6) 壳孢子放散的第一个高峰, 父本品系出现在第 3 天, 放散量为万个 / 贝壳, 母本品系出现在第 2 天, 放散量为万个 / 贝壳,WD 7 品系出现在第 3 天, 放散量为万个 / 贝壳父母本品系和 WD 7 品系的壳孢子放散总量分别为和万个 / 贝壳而头 6 天的壳孢子合计数,WD 7 品系为万个 / 贝壳, 分别是父母本品系的 2 08 倍和 0 50 倍, 差异性极显著 (P< 0 01) 图 6 坛紫菜亲本品系 (HR 6,HR 5) 和种内杂交重组优良品系 (WD 7) 的贝壳丝状体连续 20d 壳孢子放散量 Fig 6 Numbersofthereleasedconchosporesofthe parentalstrains(hr 6,HR 5)andtheimprovedstrain (WD 7)producedbygeneticrecombinantof intraspecifichybridizationinp.haitanensisduring20days ofconchospore releasing

6 1364 水产学报 39 卷 3 讨论紫菜杂交育种主要利用杂交重组优势, 即性状差异较大的个体间进行交配产生的杂交子代在生长生化特性等方面优于亲本 [14] 本实验通过紫菜不同品系间的种内杂交选育出来的 WD 7 品系, 它的一些优良性状分别遗传自父本和母本品系如叶状体生长前期生长较快藻体韧性好的特性与父本品系相似 ; 而叶状体成熟晚, 生长期长, 生长期的中后期生长快等性状又与母本品系几乎一致, 尤其是中后期的生长速度还明显快于母本品系此外, 丝状体壳孢子放散量的性状在父本的基础上得到了改善, 但它的 3 种主要光合色素含量比父母本品系均降低, 没有表现出杂交重组优势坛紫菜一般可收割数次, 收获的菜俗称头水二水三水四水菜等, 菜的口感和品质, 一般随着收割次数的增加而变差 [22] 其中头水紫菜一般在叶状体日龄 35~45d 时采收, 菜的价格最高, 因此, 头水紫菜的产量和品质对一年的收成影响比较大 WD 7 品系的叶状体在生长前期具有与父本品系相似的快速生长优势, 培养至 50d 时, 两个品系的叶状体平均鲜重几乎一致, 但父本品系的叶状体由于成熟较早, 成熟后的生长速度和鲜菜品质明显下降所以,WD 7 品系在生长与品质方面比父本品系具有优势紫菜品质的好坏主要取决于 3 种主要光合色素 (Chl.a PE 和 PC) 含量的高低 [9-11] 至今大规模人工栽培所使用的野生型坛紫菜种, 其室内培养的叶状体的藻胆蛋白含量为 46mg/g [12], 而本实验选育的 WD 7 品系的藻胆蛋白含量却高达 77mg/g, 具有更好的品质 WD 7 品系的色素和色素蛋白总含量虽然比父母本品系低, 但它的叶状体颜色更接近野生型的颜色, 生长更快, 三种色素间的含量比似乎更有利于生长 [23] 父母本品系的色素和色素蛋白含量虽然比 WD 7 品系高, 但海区中试结果证明, 由于其藻红蛋白含量过高, 藻体太红, 加工成紫菜的颜色并不被好评 ( 未发表的研究结果 ) 紫菜叶状体的厚度也是影响紫菜品质的重要因素之一, 藻体太厚, 不利于机械化紫菜加工 [12], 且口感较硬 ; 藻体太薄, 则不适合在风浪较大的海区栽培 WD 7 品系的叶状体平均厚度为 29 87μm, 比父母本品系均厚, 增加了藻体的韧性和抗风浪能力此外, 它的藻体又不像野生型坛紫菜种那么厚 [12], 仍便于机械化加工紫菜贝壳丝状体的壳孢子放散总量以及放散高峰出现时间的早晚会直接影响到生产上采苗工作能否顺利进行生产上对紫菜壳孢子人工采苗要求壳孢子放散高峰出现早放散集中 [24], 而且每个贝壳需要有 10 万以上的壳孢子日放量时才能稳定有效地进行生产性附苗 [25] WD 7 品系的壳孢子放散总量虽比母本品系少, 但比父本品系有较大幅度的提高, 尤其是该品系的放散高峰出现时间早, 壳孢子放散集中, 第 3 天的日放散量就超过了 50 万个, 远优于父本品系, 完全能满足生产上的需求综上所述,WD 7 品系具有生长快生长期长品质好壳孢子放散量较多等优良特性, 有望被培育成适宜生产应用的新品种参考文献 : [1] ZhouH P,Chen Q H.Antiageing efectof the polysaccharidefrom PorphyrayezoensisUeda[J]. JournalofChinaPharmaceuticalUniversity,1989,20 (4): [ 周慧萍, 陈琼华. 紫菜多糖抗衰老作用的实验研究. 中国药科大学学报,1989,20 (4): ] [2] ZhouH P, Chen Q H. Anticoagulative and antilipemicefectofpolysaccharidefrom Porphyra yezoensisueda[j].journalofchinapharmaceutical University,1990,21(6): [ 周慧萍, 陈琼华. 紫菜多糖的抗凝血和降血脂作用. 中国药科大学学报,1990,21(6): ] [3] MaJH,CaiS Q.Cultivation and processing of Porphyra yezoensis[m].beijing:science Press, 1996:1-58.[ 马家海, 蔡守清. 条斑紫菜的栽培与加工. 北京 : 科学出版社,1996:1-58.] [4] FujianFisheriesBureau. Artificial cultivation of Porphyrahaitanensis[M].Fuzhou:Fujian People PublishingHouse,1979:1-101.[ 福建水产局. 坛紫菜人工养殖. 福州 : 福建人民出版社,1979: ] [5] ChenCS,LiangY,XuY,etal.Selectivebreeding andcomparisonofeconomictraitsofthenew thin thalusstrainporphyrahaitanensis[j].progressin FisherySciences,2009,30(2): [ 陈昌生, 梁艳, 徐燕, 等. 坛紫菜薄叶新品系选育及经济性状的比较. 渔业科学进展.2009,30(2): ]

7 9 期丁洪昌, 等 : 坛紫菜杂交重组品系的选育与特性分析 1365 [6] LiangY,XuY,ChenC S,etal.Researchonthe maineconomictraitsofthenewstrainofhighquality Porphyra haitanensis [J].Progress in Fishery Sciences,2009,30(4): [ 梁艳, 徐燕, 陈昌生, 等. 坛紫菜优质新品系 (Q-1) 主要经济性状的研究. 渔业科学进展.2009,30(4): ] [7] YanX H,MaSY.Selectionofahigh-temperature resistant strain of Porphyra haitanensis (Rhodophyta)[J].JournalofFisheriesofChina, 2007,31(1): [ 严兴洪, 马少玉. 坛紫菜抗高温品系的筛选. 水产学报,2007,31 (1): ] [8] YanX H,Lv F,Liu C J,etal.Selection and characterizationofahigh-temperaturetolerantstrain ofporphyrahaitanensischangetzheng(bangiales, Rhodophyta)[J].JournalofApplied Phycology, 2010,22(4): [9] SaitohM,ArakiS,SakuraiT,etal.Variationsin contentsofphotosyntheticpigments,totalnitrogen, totalfreeaminoacidsandfreesugarsindriedlavers obtainedatdiferentculturegroundsandharvesting times[j].buletin of the Japanese Society of ScientificFisheries,1975,41(3): [10] JiangH X,TangX R.Progressinbreedingofred algae[j].marinesciences,2003,27(6): [ 姜红霞, 汤晓荣. 红藻育种研究进展. 海洋科学, 2003,27(6):25-30.] [11] ArugaY.Color and the pigments of Porphyra yezoensis[j].iden,1980,34(9):8-13. [12] WangCQ, Yan X H, Huang L B, et al. Characterizationofan improved strain (SF 2) of Porphyrahaitanensis(Bangiales,Rhodophyta) and itspilotcultivationinmariculturefarm[j].journal offisheriesofchina,2011,35(11): [ 王长青, 严兴洪, 黄林彬, 等. 坛紫菜优良品系申福 2 号的特性分析与海区中试. 水产学报,2011, 35(11): ] [13] HePM, Qin S, Yan X J, et al. Seaweed biotechnology and its application[m ].Beijing: ChemicalIndustryPress,2007:86-98.[ 何培明, 秦松, 严小军, 等. 海藻生物技术及其应用. 北京 : 化学工业出版社,2007:86-98.] [14] WuH X, Yan X H, et al. Selection and characterizationofanimprovedstrainproducedby genetic recombinant of interspecific hybridization betweenpyropiahaitanensisandpyropiaradi[j]. JournalofFisheriesofChina,2014,38(8): [ 吴宏肖, 严兴洪, 等. 坛紫菜与 Pyropiaradi 种间杂交重组优良品系的选育与特性分析. 水产学报,2014,38(8): ] [15] YanX H, Aruga Y. Induction of pigmentation mutantsbytreatmentofmonosporegermlingswith MNNG in Porphyra yezoensis Ueda (Bangiales, Rhodophyta)[J].Algae,1997,12(1): [16] LiangZQ.Primarystudyongeneticsandbreeding ofporphyra haitanenis [D].Shanghai:Shanghai FisheriesUniversity,2004:10-22.[ 梁志强. 坛紫菜遗传育种的初步研究. 上海 : 上海水产大学,2004: ] [17] YanX H,WangSJ.Studiesonthedevelopmentand diferentiation of somatic celin Porphyra spp. (Rhodophyta)[J].MarineSciences,1990,2(3): [18] YanX H,LiangZJ,SongW Q,etal.Inductionand isolation of artificial pigmentation mutants in PorphyrahaitanensisChangetZheng(Bangiales, Rhodophyta)[J].JournalofFisheriesofChina, 2005,29(2): [ 严兴洪, 梁志强, 宋武林, 等. 坛紫菜人工色素突变体的诱变与分离. 水产学报,2005,29(2): ] [19] SteinJR.Handbook of phycologyical methods: Culturemethodsand growth measurements[m]. London: Cambridge University Press, 1973: [20] GaoH F. The variation in the contents of phycobiliproteins from Porphyra haitanensis colectedindiferentgrowingstages[j].oceanologia etlimnologiasinica,1993,24(6): [ 高洪峰. 不同生长期坛紫菜中藻胆蛋白的含量变化. 海洋与湖沼,1993,24(6): ] [21] HouTY.Selectionandcharacterizationofthenew strains of Porphyra haitanensis Chang etzheng (Bangiales,Rhodophyta)[D].Shanghai:Shanghai OceanUniversity,2012:6-19.[ 侯同玉. 坛紫菜新品系的选育与特性分析. 上海 : 上海海洋大学, 2012:6-19.] [22] YingM M,ShiW Z,PanF.Analysisofnutritional componentsin diferentharvesttime ofporphyra haitanensis [J].Zhejiang AgriculturalSciences, 2009,21(6): [ 应苗苗, 施文正, 潘峰. 紫菜不同收割期营养成分的分析. 浙江农业科学, 2009,21(6): ] [23] FujitaY,MigitaS.Photosyntheticpigmentsofthe diferentcolortypesofporphyrayezoensisuedaand P.tenera Kjelman[R].Nagasaki:Faculty of FisheriesNagasakiUniversity,1984,56:7-13.[ 藤

8 1366 水产学报 39 卷田雄二, 右田清治. 养殖ノリ色彩? 型の光合成色素. 长崎 : 长崎大学水产学部,1984,56:7-13.] [24] Ecologicaland Taxonomic Laboratory of Algae, lnstitute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences.ArtificialacltivationofPorphyrayezoensis [M].Beijing:SciencePress,1978: [ 中国科学院海洋研究所藻类实验室生态组, 藻类分类形态组. 条斑紫菜的人工养殖. 北京 : 科学出版社, 1978: ] [25] ZengCK,WangSJ,LiuS J.Seaweedcultivation [M].Shanghai:ShanghaiScienceand Technology Press,1984: [ 曾呈奎, 王素娟, 刘思俭. 海藻栽培学. 上海 : 上海科学技术出版社,1984: ] Selectionandcharacterizationofanimprovedstrainbyhybridization recombinantinpyropiahaitanensis DING Hongchang 1,YAN Xinghong 1,2 (1.ColegeofFisheriesandLifeSciences,ShanghaiOceanUniversity,Shanghai ,China; 2.KeyLaboratoryofExplorationandUtilizationofAquaticGeneticResources,ShanghaiOceanUniversity, MinistryofEducation,Shanghai ,China) Abstract:Inthiscrossing-experiment,themaleparentalstrain (HR 6) ofpyropia haitanensiswas characterizedbyfastergrowthspeedinearlygrowingstage,highercontentsofphotosyntheticpigments,but earlymaturityandshortergrowthperiodingametophyticbladesphase,andlow productionofconchospores inconchocelisphase.thefemaleparentalstrain(hr 5)ofPyropiahaitanensiswascharacterizedbylower growthspeedinearlygrowingstage,highercontentsofphotosyntheticpigments,latermaturityandlonger growthperiodingametophyticbladesphase,andhighproductionofconchosporesinconchocelisphase.from thef 1 color sectoredbladesproducedbytheheterozygousconchocelies,animprovedstrain(wd 7)with betercomprehensivepropertiesthantheparentalstrainswasisolated.duringtheearlygrowthperiod(30-45days)oftheblades,theabsolutegrowthrateofthemaleandfemaleparentalstrainswas6 68and3 63 cm/d,respectively,whilethatofwd 7strainwas6 67cm/d;Duringthemiddlegrowingstage(46-60 days)oftheblades,theabsolutegrowthrateofthemaleandfemaleparentalstrainswas5 15and7 27cm/ d,respectively,whilethatofwd 7strainwas11 54cm/d.Themaleparentalstrainmaturedearlier,and mostofthe35-day-oldbladesmatured.whilethewd 7strainmaturedlaterwhichwassimilartothe femaleparentalstrain,alargenumberofbladesmaturedafterbeingculturedfor55days.themeanthicknes ofthe35-day-oldbladesofwd 7strainwas29 87μm,increasingby10% and16% incontrastwiththat ofthemaleandthefemaleparentalstrains,respectively.thetotalnumberofconchosporesreleasedfrom WD 7strainwas ,whichwas1 17-foldand0 57-foldofthatofitsmaleandfemaleparental strains,respectively.theaboveresultsconfirmedthatwd 7straininheritedtheexcelentcharacteristicsof fastergrowingspeedinearlygrowingstagefrom themaleparentalstrain,meanwhileinheritedtheexcelent characteristicoflatematurity,longgrowthperiod,fastergrowthspeedinthemiddlegrowingstageandhigh productionofconchosporesfrom thefemaleparentalstrain,andmayoferanalternativeforthepyropia industry. Keywords: Pyropia haitanensis; gametophytic blade; intraspecific hybridization; recombinantstrain; absolutegrowthrate Correspondingauthor:YAN Xinghong.E mail:xhyan@shou.edu.cn

９期１３６７丁洪昌等坛紫菜杂交重组品系的选育与特性分析图版坛紫菜亲本品系ＨＲ６ＨＲ５和杂交重组优良品系ＷＤ７的Ｆ１叶状体形态与生长１３父本品系ＨＲ６的Ｆ１叶状体４６母本品系ＨＲ５的Ｆ１叶状体７９优良品系ＷＤ７的Ｆ１的叶状体１４７培养３５ｄ２５８培养４５ｄ３６９培养５５ｄ图中标尺均代表

9 ９期１３６７丁洪昌等坛紫菜杂交重组品系的选育与特性分析图版坛紫菜亲本品系ＨＲ６ＨＲ５和杂交重组优良品系ＷＤ７的Ｆ１叶状体形态与生长１３父本品系ＨＲ６的Ｆ１叶状体４６母本品系ＨＲ５的Ｆ１叶状体７９优良品系ＷＤ７的Ｆ１的叶状体１４７培养３５ｄ２５８培养４５ｄ３６９培养５５ｄ图中标尺均代表５ｃｍＰｌＭｏｐｈｏｌｏｇｙｎｄｇｏｗｈｏｆｆ１ｇｍｏｐｈｙｃｂｌｄｓｏｆｐｎｌｓｎｓＨＲ６ＨＲ５ｎｄｈｍｐｏｖｄｓｎＷＤ７ｐｏｄｕｃｄｂｙｃｏｍｂｎｎｈｙｂｄｚｏｎｎｐｈｎｎｓｓ１３ＴｈＦ１ｇｍｏｐｈｙｃｂｌｄｓｏｆｈｍｌｐｎｌｓｎＨＲ６４６ＴｈＦ１ｇｍｏｐｈｙｃｂｌｄｓｏｆｈｆｍｌｐｎｌｓｎＨＲ５７９ＴｈＦ１ｇｍｏｐｈｙｃｂｌｄｓｏｆｈｍｐｏｖｄｓｎＷＤ７Ｔｈｂｌｄｓｎ１４７ｗｃｕｌｕｄｆｏ３５ｄｙｓＴｈｂｌｄｓｎ２５８ｗｃｕｌｕｄｆｏ４５ｄｙｓＴｈｂｌｄｓｎ３６９ｗｃｕｌｕｄｆｏ５５ｄｙｓＳｃｌｂｎｌｌｆｇｕｓ５ｃｍｈｐｗｗｗｓｃｘｕｂｏｃｎ

1 期安全红, 等 : 印度产紫菜 Pyropiachauhani 单孢子放散规律的研究 39 功本文对 P.chauhani 野生型品系 (PC WT) 的叶状体单孢子放散规律进行了较系统的研究, 并对 PC Y1 品系是否真不放散单孢子也作了进一步的验证 1 材料与方法 1.1 实验材料 P.

1 期安全红, 等 : 印度产紫菜 Pyropiachauhani 单孢子放散规律的研究 39 功本文对 P.chauhani 野生型品系 (PC WT) 的叶状体单孢子放散规律进行了较系统的研究, 并对 PC Y1 品系是否真不放散单孢子也作了进一步的验证 1 材料与方法 1.1 实验材料 P. 文章编号 :1674 5566(2017)01 0038 10 DOI:10.12024/jsou.20160501763 印度产紫菜 Pyropiachauhani 单孢子放散规律的研究 1 1 1,2 安全红, 丁洪昌, 严兴洪 (1. 上海海洋大学水产与生命学院, 上海 201306;2. 上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室, 上海 201306) 摘要 : 为了探究紫菜单孢子的放散规律,