Microsoft PowerPoint - WHO-June-9
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- 絺蹇 甘
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1 Quality concern in the development of an inactivated enterovirus 71 vaccine Qihan Li Institute of medical Biology, CAMS, PUMC.
2 EV71 infection outside the Asia Pacific region EV71 in Norway. EV71 in Colorado, U.S. Virus Research 123 (2007) Clinical Infectious Diseases 2007; 45:950 7
3 EV71 infection and its risk in China The number of cases of HFMD in China, The deaths cases of HFMD in China, EV71 and HFMD Lancet Infect Dis 2010; 10:778-90
4 Clinical and virological features of 14 children with enterovirus 71 (EV71)-associated neurological disease. Clinical and magnetic resonance imaging data indicated that immunopathology was a major factor in the pathogenesis of neurological disease in this outbreak. McMinn P et al. Clin Infect Dis. 2001;32:
5 Pathogenesis of EV71 infection? How does this virus infects human? What is the dynamic process of this viral infection? What is the relationship of viral infection and relative pathological change? What is the relationship of pathogenesis and immune response to viral infection?
6 The neonate rhesus model of EV71 infection Viremia Virus excretion
7 Viral antigen expression and Inflammatory response cerebrospinal fluid Peripheral blood Viral antigen expressed in various tissues
8 The gene profile of PBMC from infected neonate by EV71 Day 4 p.i. Day 7 p.i. Day 10 p.i. symbol foldchange symbol foldchange symbol foldchange MS4A MS4A MS4A IL17A IL17A IL17A XCL XCL XCL IL IL BPI BPI IL IL CD1A CD1A C8G C8G KIR3DL KIR3DL CA CA SNCA SNCA CCL CCL ERAF ERAF Day 7 p.i. TRIM CD300LF HLA-DRB IL6ST LY MB MSR PF4V PLA2G1B CCL CCL SELE BPGM C8A VPREB ULBP TM7SF SOCS Day 10 p.i. CXCL CLU CRHR CTSG ADSS DEFA ELANE ALAS
9 The gene profile of PBMC from infected neonate by EV71
10 Viral strains isolated from various areas in China C4 sub genotype 阜阳 昆明 合肥 中和试验鉴定 深圳
11 Establishment of strain for inactivated EV71 vaccine (human diploid cell) Strain cloning and its biologic characterization 血清中和抗体检测 疫苗免疫组感染对照组 FY-23K FY-23K-B FY-23K-C FY-23K-D FY-23K-G FY-23K-H 抗体效价 二免后 4 周 攻毒后 4 天 攻毒后 7 天 攻毒后 10 天 攻毒后 14 天 时间 ( 天 )
12 Study of immunogenicity of EV71 vaccine based upon viral structure The conformation characterization
13 Study of immunogenicity of EV71 vaccine based upon viral structure Two kind of virion presenting immunogenicity Page gel and Western blot: odd: the upper; even:the lower
14 ELISA quantitative technique for vaccine antigen Using checkerboard assay to determine the optimum concentration of capture antibodies, detecting antibodies and enzyme labeled antibody. Using the standard strain as reference antigen to draw standard curves. OD 值 含量 EV71 蛋白含量与 OD 值的反应曲线 biotin AB Labeled EV71 Ab EV71 antigen Coated EV71 Ab
15 The immune response induced by EV71 inactivated vaccine in rhesus Immunized animal Infectious control animal
16 Protective effect of EV inactivated vaccine in monkey 婴猴保护性实验体温分析 体温 ( ) 疫苗免疫组 1# 疫苗免疫组 2# 疫苗免疫组 16# 疫苗免疫组 6# 阴性对照组 时间 ( 天 ) 婴猴保护性实验体温分析 体温 ( ) 感染对照组 37# 感染对照组 3# 感染对照组 10# 感染对照组 13# 阴性对照组 时间 ( 天 ) 婴猴保护性实验淋巴结病毒载量检测 ( 感染对照组 ) 病毒拷贝数 cop ies/ 100mg 1.60E E E E E E E E E+00 婴猴保护性实验主要器官病毒载量检测 ( 感染对照组 ) 病毒拷贝数 c o p i e s / m g 5.00E E E E E E+00 颌下淋巴结肺门淋巴结腹股沟淋巴结 时间 ( 天 ) 时间 ( 天 ) 腋窝淋巴结肠系膜淋巴结 婴猴保护性实验淋巴结病毒载量检测 ( 疫苗免疫组 ) 病毒拷贝数 copies/100m g 心脏 肾脏 脾脏 肺脏 胰脏 膀胱 气管 支气管 胸肌 生殖器 肝脏 胆囊 胃 食管 空肠 回肠 升结肠 横结肠 降结肠 乙状结肠 直肠 十二指肠 1.60E E E E E E E E E+00 婴猴保护性实验主要器官病毒载量检测 ( 疫苗免疫组 ) 病毒拷贝数 c o p i e s / m g 5.00E E E E+03 颌下淋巴结肺门淋巴结 腹股沟淋巴结 时间 ( 天 ) 腋窝淋巴结肠系膜淋巴结 心脏 肾脏 脾脏 肺脏 胰脏 膀胱 气管 支气管 胸肌 生殖器 肝脏 胆囊 胃 食管 空肠 回肠 升结肠 横结肠 降结肠 乙状结肠 直肠 十二指肠 病毒拷贝数 c o p i e s / m g 病毒拷贝数 copies/100mg 婴猴保护性实验中枢神经系统病毒载量检测 ( 感染对照组 ) 6.00E E E E E E E+00 婴猴保护性实验中枢神经系统病毒载量检测 ( 疫苗免疫组 ) 6.00E E E E E E E+00 大脑 小脑 丘脑 延脑 中脑 桥脑 脊髓 时间 ( 天 ) 大脑 小脑 丘脑 延脑 中脑 桥脑 脊髓 时间 ( 天 ) 1.00E E 时间 ( 天 ) Viral loads detection of various organs of immunized animal at viral challenge 血清中和抗体检测 疫苗免疫组 感染对照组 抗体效价 二免后 4 周 攻毒后 4 天 攻毒后 7 天 攻毒后 10 天 攻毒后 14 天 时间 ( 天 )
17 Comparison of the pathological observation in immunized and control animals Immunized Control CNS tissue Immunized Control Lung tissue Immunized Control Trachea
18 Cytokines modulation in rhesus immunized by vaccine followed by virus challenge
19 The immune response induced by EV71 vaccine is not interfered with CA16 infection
20 The immune response induced by EV71 vaccine is not interfered with CA16 infection
21 Clinical trial of EV71 inactivated vaccine (human diploid cell) Effect: immunity; clinical protective efficacy Safety: advent; SAE. Clinicaltrials.gov, NCT Phase I:safety; Phase II:safety; immunogenicity; effective dose and immunization program Phase III:safety; effect and clinical protective efficacy.
22 Phase III Subjects: Children (6 71 month old) subjects; who distributed in 7 counties, Guilin, Guangxi, China, received vaccine and placebo Principle: random, double blind and placebo control Dose: 100U (320EU) Program: 0, 28 days
23 Process of phase III
24 Phase III protective efficacy
25 Safety observation servation Placebo Group N=6000 Number of cases Occurrence (%) Number of cases Occurrence (%) Solicited systemic adverse events within 7 days after each injection Total < Fever < Fever 3 grade Diarrhoea: overall Diarrhoea 3 grade Nausea/vomiting/anorexia Nausea/vomiting/anorexia 3 grade Irritability/Drowsiness/acratia Irritability/Drowsiness/acratia 3 grade Allergy Allergy 3 grade Solicited local adverse events within 7 days after each injection Total < Pain < Pain 3 grade Redness < Redness 3 grade Itching <0.004 Itching 3 grade Swelling < Swelling 3 grade Serious adverse events* Vaccination associated HFMD associated hospitalization < Overall < Unsolicited events within 28 days after each injection Unsolicited events within 28 days after each injection 3 grade
26 Levels of serum pro inflammatory cytokines were maintained normal in vaccinee
27 The dynamic profile of antibody levels in participant for 2 years Day post 1st immunization Day post 1st immunization Day post 1st immunization Day post 1st immunization Day post 1st immunization Day post 1st immunization Day post 1st immunization Day post 1st immunization Neutralization antibody N eu traliz ation antib od y N eu traliz ation antib od y Neutralization antibody Neutralization antibody Neutralization antibody Neutralization antibody Neutralization antibody Placebo Vaccine
28 Cross neutralization of serum from immunized individuals to different viral strains
29 Cost of treatment on HFMD rural residents urban residents mild case severe case mild case severe case Average Annual Income of rural residents Good news: 20,000 doses EV71 vaccine had been used in areas with population of million, incidences of HFMD and its severe case decreased 41% and 68% respectively Zheng-kai Gan, Hui Jin, Jing-xin Li,(2015) Disease burden of enterovirus 71 in rural central China: A community-based survey, Human Vaccines & Immunotherapeutics, 11:10,
30 Analysis of the protective effect among large populations Post-licensure clinical trials Establishment of the database system Safety analysis Post-licensure clinical trials of EV71 inactivated vaccine The protective effect of EV71 vaccine combined with other vaccines The consistency of three batches of vaccine Analysis of the protective effect on severe cases
31 This work was coordinated by many people, who were come from SFDC, NIFDC, Chinese CDC, Guanxi CDC, CAMS and Fudan university and etc.. I hope to express much thanks to WHO for its supporting during this work. I do want to express my thanks to my lab team!
32 Much thanks for your attention!
(Microsoft PowerPoint - \244\351\245\273\270\243\252\242_Chief round 20141022.ppt)
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