Fas/FasL对无血清培养猪卵泡颗粒细胞凋亡的作用
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1 动 物 学 研 究 2010,Jun. 31(3): CN /Q ISSN Zoological Research DOI: /SP.J 猪 分 离 卵 泡 体 外 培 养 过 程 中 Fas/FasL 对 颗 粒 细 胞 凋 亡 的 作 用 * 林 鹏 飞, 郝 元 斌, 郭 慧 利, 刘 红 林, 芮 荣 ( 南 京 农 业 大 学 动 物 医 学 院, 江 苏 南 京 ) 摘 要 : 从 猪 卵 巢 分 离 完 整 有 腔 卵 泡, 按 质 量 分 为 3 类 : 健 康 卵 泡 早 期 闭 锁 卵 泡 和 晚 期 闭 锁 卵 泡 猪 分 离 卵 泡 经 眼 观 检 查 后 再 行 石 蜡 切 片 和 HE 染 色, 形 态 学 研 究 表 明, 眼 观 检 查 对 于 健 康 卵 泡 的 判 定 准 确 率 为 92% 取 健 康 卵 泡 按 直 径 大 小 分 为 3 组 : 直 径 >5 mm 大 卵 泡 组 3~5 mm 中 卵 泡 组 和 <3 mm 小 卵 泡 组 卵 泡 培 养 8 16 和 24 h, 以 Annexin-V FITC/PI 双 染 流 式 细 胞 仪 检 测 壁 层 颗 粒 细 胞 凋 亡 情 况, 结 果 发 现 培 养 卵 泡 颗 粒 细 胞 的 总 凋 亡 率 ( 早 期 凋 亡 + 晚 期 凋 亡 ) 在 8 h 时 就 已 达 到 70% 以 上, 至 24 h 则 为 81.1%~94.6% 收 集 无 血 清 培 养 和 72 h 的 卵 泡 颗 粒 细 胞, 用 real time PCR SYBRgreen 法 检 测 各 组 卵 泡 颗 粒 细 胞 FasL 和 Fas mrna 相 对 表 达 量 各 级 卵 泡 颗 粒 细 胞 中 FasL mrna 水 平 随 培 养 时 间 显 著 增 加, 培 养 至 24 h 达 最 大 值 (P<0.05); 小 卵 泡 颗 粒 细 胞 FasL mrna 水 平 均 高 于 大 中 卵 泡 组 各 级 卵 泡 颗 粒 细 胞 Fas mrna 相 对 表 达 量 在 培 养 前 (0 h) 差 异 不 显 著,8 h 时 显 著 增 加, 48 h 达 最 大 值 该 实 验 表 明, 所 用 无 血 清 卵 泡 培 养 体 系 可 有 效 诱 导 卵 泡 颗 粒 细 胞 的 凋 亡, 细 胞 凋 亡 是 卵 泡 闭 锁 的 主 要 诱 因, 但 卵 泡 闭 锁 程 度 可 因 卵 泡 大 小 而 异, 小 卵 泡 似 乎 更 容 易 发 生 闭 锁 关 键 词 : 猪 ; 有 腔 卵 泡 ; 颗 粒 细 胞 ; 凋 亡 ;Fas/FasL 中 图 分 类 号 :Q ;Q952.4;Q245 文 献 标 志 码 :A 文 章 编 号 : (2010) Role of Fas/FasL on Apoptosis of Porcine Follicular Granulosa Cells Derived from Isolated Follicles During Culture in vitro LIN Peng-Fei, HAO Yuan-Bing, GUO Hui-Li, LIU Hong-Lin, RUI Rong * (College of Veterinary Medicine, Nanjing Agricultural University, Nanjing , China) Abstract: The whole antral follicles were isolated from porcine ovaries and classified as follows: healthy follicles (HF), early atretic follicles (EF) and progressed atretic follicles (PF). The isolated porcine follicles were used for routine histological section and HE staining after examination by eyesight. Morphological research shows that the accuracy rate of eyesight examination for HF is 92%. Healthy follicles were chosen for further experiment and divided into 3 groups: large follicles ( >5 mm), medium follicles (3 5 mm) and small follicles (<3 mm). All follicles were cultured for 8, 16 and 24 h, respectively and the apoptosis of of their granulosa cells were examined by Annexin V-FITC/PI double-labeling. It showed that the total apoptotic rate of granulosa cells derived from cultured follicles could reach over 70% at 8 h after culture and be 81.1% 94.6% at 24 h after culture. Granulosa cells from groups were collected at 0, 8, 16, 24, 48 and 72 h after culture without serum and used for the examination of expression of FasL and Fas mrna with real time PCR SYBRgreen method. The expression level of FasL mrna of granulosa cells from different size of follicles increased with culture time and reached the highest level at 24 h after culture (P<0.05). Expression level of FasL mrna of granulosa cells from small follicles was higher than those from large and medium follicles. There exists no difference for expression level of Fas mrna of granulosa cells among groups before culture but significantly increased at 8 h after culture and reached the highest level at 48 h after culture. It showed in the present experiment that the follicular culture system without serum used could effectively induce the apoptosis of follicular granulosa cells. Cell apoptosis is the main cause of follicular atresia, the degree of which varied with the size of follicles. Small follicles seemed to be easier atretic than medium and large follicles. Key words: Swine; Antral follicles; Granulosa cells; Apoptosis; Fas/FasL 收 稿 日 期 : ; 接 受 日 期 : 基 金 项 目 : 国 家 高 技 术 研 究 与 发 展 计 划 (2008AA101003); 国 家 基 础 研 究 发 展 规 划 973 项 目 (2007CB947403) * 通 讯 作 者 (Corresponding author),tel: , rrui@njau.edu.cn 第 一 作 者 简 介 : 林 鹏 飞 (1982-), 男, 内 蒙 古 乌 蒙 人, 南 京 农 业 大 学 博 士 研 究 生, 研 究 方 向 为 动 物 生 殖 生 物 学
2 3 期 林 鹏 飞 等 : 猪 分 离 卵 泡 体 外 培 养 过 程 中 Fas/FasL 对 颗 粒 细 胞 凋 亡 的 作 用 269 哺 乳 动 物 卵 巢 上 存 在 大 量 的 各 级 卵 泡, 卵 泡 生 长 过 程 中 仅 有 少 数 能 够 发 育 至 成 熟 排 卵, 绝 大 部 分 归 于 闭 锁 研 究 表 明, 颗 粒 细 胞 凋 亡 是 导 致 卵 泡 闭 锁 的 重 要 原 因 (Matsuda-minehata et al, 2006) 猪 卵 泡 颗 粒 细 胞 凋 亡 至 少 与 5 种 配 体 受 体 系 统 有 关 : 肿 瘤 坏 死 因 子 α(tumor necrosis factor alpha, TNFα) 和 TNF 受 体 系 统 ; 肿 瘤 坏 死 基 因 相 关 的 凋 亡 诱 导 配 体 (TRAIL) 和 TRAIL 受 体 系 统 ;Fas 配 体 受 体 系 统 ;APO-3 配 体 受 体 系 统 及 PFG-5 配 体 受 体 系 统 (Manabe et al, 2004) TNFα 的 不 同 作 用 是 通 过 特 殊 的 细 胞 表 面 受 体 TNFR-1 或 TNFR-2 来 实 现 的, TNFR-1-TRADD-FADD-caspase-8 信 号 转 导 通 路 能 引 起 细 胞 凋 亡, 而 TNFR-1-TRADD-RIP-TRAF-2 信 号 传 导 通 路 则 为 存 活 因 子 在 卵 泡 闭 锁 早 期, 颗 粒 细 胞 层 出 现 TNFR-2 强 烈 免 疫 染 色, 表 明 在 猪 卵 泡 闭 锁 过 程 中 TNFα 是 作 为 存 活 因 子 而 起 作 用 (Nakayama et al, 2003) 在 TRAIL 和 TRAIL 受 体 系 统 中, 已 发 现 的 受 体 包 括 DR-4 DR-5 和 DcR-1 DcR-1 只 表 达 于 猪 健 康 卵 泡 颗 粒 细 胞 中, 而 TRAIL DR-4 和 DR-5 在 闭 锁 卵 泡 颗 粒 细 胞 中 高 表 达, 说 明 TRAIL 及 其 受 体 DR-4 和 DR-5 与 猪 卵 泡 闭 锁 过 程 中 颗 粒 细 胞 凋 亡 的 诱 导 有 关,DcR-1 在 颗 粒 细 胞 凋 亡 过 程 中 起 抑 制 作 用 (Inoue et al, 2003) FasL 与 Fas 是 研 究 较 多 也 是 最 主 要 的 一 对 死 亡 配 体 - 受 体,Fas 也 称 Apo-l 或 CD95, 是 肿 瘤 坏 死 因 子 和 神 经 生 长 因 子 受 体 (TNF/NGF-R) 家 族 的 细 胞 表 面 分 子, 它 是 FasL 的 受 体 ;FasL 是 肿 瘤 坏 死 因 子 (TNF) 家 族 的 细 胞 表 面 分 子 Fas 和 FasL 在 人 类 大 鼠 小 鼠 牛 鸡 及 猪 的 卵 巢 上 都 有 表 达 (Quirk et al, 1995; Chen et al, 2005; Dharma et al, 2003; Porter et al, 2000; Bridgham & Johnson, 2001; Inoue et al, 2006), 但 mrna 和 蛋 白 表 达 存 在 种 属 特 异 性 (Nakayama et al, 2000), 因 此 作 用 机 理 在 不 同 种 类 动 物 间 也 有 差 异 当 缺 少 必 要 的 存 活 因 子 或 存 在 凋 亡 因 子 时,FasL 与 Fas 结 合, 导 致 Fas 胞 内 的 死 亡 域 形 成 三 聚 体 而 活 化, 并 引 起 与 之 结 合 FADD 构 象 改 变, 使 caspase-8 前 体 开 始 自 动 解 蛋 白 的 分 裂 和 激 活, 产 生 有 活 性 的 caspase-8, 从 而 激 发 一 系 列 下 游 的 caspase 级 联 反 应, 诱 发 细 胞 凋 亡 (Matsuda-minehata et al, 2006) 现 有 的 对 于 Fas/FasL 的 研 究 多 集 中 于 各 种 动 物 腔 前 卵 泡, 而 在 有 腔 卵 泡 体 外 培 养 过 程 中 颗 粒 细 胞 凋 亡 的 研 究 迄 今 鲜 见 报 道 本 实 验 拟 通 过 对 猪 卵 巢 完 整 卵 泡 的 分 离 培 养, 测 定 并 分 析 猪 不 同 发 育 阶 段 有 腔 卵 泡 在 不 同 培 养 时 间 的 颗 粒 细 胞 凋 亡 率 及 Fas 和 FasL mrna 的 表 达 量 变 化, 以 期 了 解 Fas/FasL 在 猪 有 腔 卵 泡 闭 锁 中 的 作 用, 为 进 一 步 了 解 猪 有 腔 卵 泡 闭 锁 的 机 理 提 供 实 验 资 料 1 材 料 与 方 法 实 验 所 用 各 项 试 剂 除 特 别 说 明 者 以 外, 均 为 SIGMA 产 品 1.1 卵 巢 来 源 猪 卵 巢 采 自 南 京 市 哈 慈 天 环 食 品 有 限 公 司 下 属 屠 宰 场, 卵 巢 置 于 37 无 菌 生 理 盐 水 ( 含 青 霉 素 链 霉 素 各 500 IU/mL) 中,2 h 内 送 达 实 验 室 1.2 完 整 有 腔 卵 泡 的 分 离 及 分 组 在 无 菌 条 件 下, 先 用 杜 氏 磷 酸 盐 缓 冲 液 (Dulbecco s phosphate buffered saline, PBS) 洗 卵 巢 2~3 次, 放 入 含 适 量 PBS 平 皿 中, 先 用 眼 科 剪 剪 去 卵 巢 周 围 多 余 组 织 及 系 膜, 再 沿 系 膜 缘 将 卵 巢 剪 开, 眼 科 镊 细 心 剥 离 有 腔 卵 泡, 尽 量 去 除 其 周 围 结 缔 组 织, 再 细 心 剥 离 完 整 卵 泡, 置 于 PBS 中 在 实 体 显 微 镜 下 肉 眼 观 察 卵 泡 形 态, 按 质 量 将 所 分 离 卵 泡 分 为 3 类 :(1) 健 康 卵 泡 卵 泡 壁 结 构 完 整 均 匀 紧 密, 略 呈 粉 红 色 或 黄 色, 毛 细 血 管 分 布 均 匀 色 泽 鲜 红, 卵 泡 液 清 亮, 一 般 可 见 到 卵 丘 (2) 早 期 闭 锁 卵 泡 卵 泡 壁 结 构 较 均 匀, 但 内 层 稍 呈 絮 状 化, 或 壁 上 有 少 量 暗 色 斑 块, 卵 泡 略 呈 灰 白 色, 血 管 较 少 或 血 管 较 粗 大 颜 色 变 淡, 卵 泡 液 稍 混 浊, 少 数 可 见 到 卵 丘,(3) 晚 期 闭 锁 卵 泡 卵 泡 壁 结 构 不 均 匀, 颜 色 灰 暗, 毛 细 血 管 较 少, 内 部 絮 状 化 严 重 或 可 见 到 卵 泡 内 部 有 暗 色 的 团 快 ; 卵 丘 一 般 不 可 见 (Alonso-Pozos et al, 2003; Jolly et al, 1997) 取 健 康 卵 泡 用 于 Fas 和 FasL mrna 检 测, 按 直 径 大 小 又 将 其 分 为 3 组 : 大 卵 泡 组 卵 泡 直 径 >5 mm 中 卵 泡 组 直 径 为 3~5 mm 小 卵 泡 组 直 径 <3 mm 1.3 卵 泡 切 片 制 作 与 HE 染 色 采 用 改 进 的 切 片 制 作 方 法 分 别 处 理 3 组 卵 泡, 用 Bouin 氏 固 定 液 ( 苦 味 酸 饱 和 水 溶 液 75 ml 40% 甲 醛 25 ml 冰 醋 酸 5 ml) 固 定 72 h; 水 洗 滤 纸 吸 干 后 进 行 梯 度 酒 精 脱 水 ( 依 次 为 30% 50% 酒 精 各 1 h,70% 酒 精 24 h,80% 2 次 95% 各 2 h,2 次 无 水 酒 精 各 1 h); 然 后 转 入 二 甲 苯 : 无 水 酒 精 (v/v 为 1 1) 混 合 液 中 1h, 二 甲 苯 Ⅰ 液 Ⅱ 液 各 30 min (Ⅰ 液 Ⅱ 液 均 为 100% 二 甲 苯 ), 至 组 织 透 明 为 止 经 透 明 处 理 样 本 依 次 放 入 预 先 融 化 的 石 蜡 : 二 甲 苯
3 270 动 物 学 研 究 31 卷 (v/v 为 1 1) 中 浸 30 min, 石 蜡 Ⅰ 浸 1 h, 石 蜡 Ⅱ 浸 1 h; 冷 却 后 的 蜡 块 经 修 整 后 采 用 常 规 方 法 切 片 ; 常 规 HE 染 色, 封 片 后 在 光 镜 下 观 察 1.4 完 整 卵 泡 的 培 养 大 中 小 3 组 健 康 卵 泡 先 用 PBS 洗 2 次 卵 泡 培 养 液 洗 1 次 卵 泡 培 养 液 为 无 血 清 TCM199 (GIBCO 产 品 ) 培 养 液, 用 24 孔 板 进 行 培 养, 每 孔 加 1.5 ml 培 养 液 并 放 入 1 个 卵 泡, 培 养 条 件 为 %CO 2 气 相 和 饱 和 湿 度 分 别 于 培 养 0( 对 照 ) 和 72 h, 用 眼 科 镊 轻 轻 撕 破 卵 泡, 去 除 卵 母 细 胞 卵 丘 复 合 体, 挤 压 并 翻 开 卵 泡 膜 轻 刮 卵 泡 壁 层 颗 粒 细 胞, 直 接 用 吸 管 吸 取 全 部 卵 泡 液 和 颗 粒 细 胞, 置 于 离 心 管 内 以 r/min 离 心 5 min, 收 集 颗 粒 细 胞 直 接 冻 存 于 70 用 作 凋 亡 分 析 1.5 Annexin V-FITC/PI 细 胞 凋 亡 检 测 经 上 述 方 法 培 养 8 16 和 24 h 的 大 中 小 卵 泡, 所 获 新 鲜 颗 粒 细 胞 按 BIPEC Bioreagent 凋 亡 试 剂 盒 产 品 说 明 书 所 述 步 骤 操 作, 细 胞 立 即 用 4 冰 箱 预 冷 的 PBS 液 离 心 洗 涤 2 次, 去 除 PBS; 再 用 PBS 调 整 细 胞 密 度 至 细 胞 /ml,1 ml 细 胞 中 加 入 400 µl Binding Buffer 悬 浮 细 胞 ; 加 入 5 µl Annexin V-FITC( 膜 联 蛋 白 V- 异 硫 氰 酸 荧 光 素 ), 蜗 旋 混 匀, 置 于 4 条 件 下 避 光 反 应 15 min; 添 加 10 µl PI( 碘 化 丙 啶 ), 于 4 条 件 下 避 光 反 应 5 min,1 h 内 进 行 流 式 细 胞 仪 (BD FACSCanto) 分 析 每 份 样 品 检 测 个 细 胞, 所 获 数 据 经 BD FACSDiva software 软 件 处 理 后, 换 算 为 细 胞 凋 亡 比 例 在 二 维 FCM 分 析 图 上, 细 胞 分 为 4 个 亚 群 : 左 下 象 限 为 AnnexinV-FITC - / PI - 活 细 胞 群, 右 下 象 限 为 AnnexinV-FITC + /PI - 早 期 凋 亡 细 胞 ; 右 上 象 限 显 示 AnnexinV-FITC + /PI + 细 胞 为 晚 期 凋 亡 与 坏 死 细 胞, 左 上 象 限 为 AnnexinV-FITC - / PI + 操 作 过 程 中 发 生 机 械 损 伤 的 细 胞 1.6 样 品 总 RNA 制 备 与 反 转 录 按 Trizol(Invitrogen 产 品 ) 试 剂 盒 提 供 的 说 明 书 略 加 改 进 后, 进 行 颗 粒 细 胞 总 RNA 抽 提 ; 生 物 分 光 光 度 计 (BioPhotometer 6131) 测 OD 值 及 总 RNA 浓 度,1.2% 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 结 合 凝 胶 成 像 (Tanon GIS2500) 检 测 RNA 完 整 性 各 取 检 测 合 格 的 上 述 RNA 样 品 0.5 µg, 用 ReverTra Ace qpcr RT Kit(TOYOBO 公 司 ) 在 TaKaRa PCR 扩 增 仪 上 合 成 cdna 第 一 链, 20 保 存 备 用 1.7 引 物 设 计 与 real time PCR 反 应 根 据 目 的 基 因 库 中 mrna 序 列 和 real time PCR 对 引 物 的 要 求, 利 用 软 件 Oligo 6 设 计 β-actin Fas 和 FasL 的 特 异 性 引 物, 引 物 由 上 海 英 俊 生 物 技 术 有 限 公 司 合 成 ( 表 1) 应 用 real time PCR Master Mix Kit(TOYOBO 公 司 ) 及 MJ Opticon 荧 光 定 量 PCR 仪 进 行 扩 增 反 应 体 系 包 含 SYBRgreen MIX 10 µl, 上 下 游 引 物 (10 µmol/l) 各 0.8 µl,cdna 模 板 2 µl, 加 Nuclease-free Water 补 足 体 积 至 20 µl 反 应 程 序 为 :95 30 s 预 变 性, 再 在 94 5 s 变 性,β-actin (57 ) FasL(58 ) Fas(59 )10 s 退 火,72 15 s 延 伸, 循 环 45 次, 反 应 结 束 后 执 行 熔 解 曲 线, 确 定 反 应 产 物 的 单 一 性 在 定 量 PCR 仪 上 记 录 每 个 样 本 的 Ct 值, 结 果 分 析 采 用 相 对 定 量 法, 以 2 - Ct 获 得 的 数 值 来 比 较 在 不 同 的 处 理 之 下, 相 对 于 内 参 β-actin 各 基 因 的 mrna 的 表 达 量 (Livak & Schmittgen, 2001) 1.8 数 据 统 计 分 析 每 个 样 本 设 置 3 次 重 复, 每 次 实 验 均 设 立 1 个 空 白 对 照 所 有 数 据 以 平 均 数 ± 标 准 差 ( x ± s) 表 示, 采 用 SPSS13.0 统 计 软 件 One-Way ANOVA LSD Tab. 1 表 1 Real time PCR 引 物 序 列 The primers sequence for the real time PCR 目 的 基 因 Target genes 基 因 序 列 号 GenBank accession No 引 物 序 列 Primer sequence 产 物 大 小 Product size(bp) β-actin SSU07786 AF: 5 -CTCGATCATGAAGTGCGACGT-3 AR: 5 -GTGATCTCCTTCTGCATCCTGTC Fas AJ AF: 5 - CGTGAGGGTCAATTCTGCTGT -3 AR: 5 - CTTGTCTGTGTAATCCTCCCCTTC FasL AY AF: 5 - CCACCACTCCTGCCATCAA -3 AR: 5 - CAGCCCCAATCCAACCA
4 3 期 林 鹏 飞 等 : 猪 分 离 卵 泡 体 外 培 养 过 程 中 Fas/FasL 对 颗 粒 细 胞 凋 亡 的 作 用 271 法 进 行 差 异 显 著 性 检 验,P <0.05 判 为 差 异 显 著 2 结 果 2.1 猪 卵 巢 卵 泡 的 分 离 与 质 量 判 定 在 显 微 镜 下 可 直 接 观 察 评 价 卵 泡 质 量, 但 判 定 结 果 的 准 确 性 则 往 往 与 实 验 人 员 的 经 验 有 关 为 验 证 本 实 验 对 猪 分 离 卵 泡 直 观 形 态 学 判 断 的 准 确 性, 按 质 量 所 分 的 3 组 卵 泡 经 石 蜡 切 片 和 HE 染 色 后 于 镜 下 观 察 各 阶 段 卵 泡 形 态 学 特 征 如 下 :(1) 健 康 卵 泡 的 卵 泡 壁 结 构 完 整 均 匀 紧 密, 略 呈 粉 红 色 或 少 数 见 黄 色, 毛 细 血 管 分 布 均 匀 色 泽 鲜 红, 卵 泡 液 清 亮, 一 般 可 见 到 卵 丘 HE 染 色 后, 健 康 卵 泡 壁 各 层 完 整 层 次 清 晰, 颗 粒 细 胞 体 积 较 大, 细 胞 浆 及 细 胞 核 染 色 均 匀, 核 位 于 细 胞 中 央, 颗 粒 细 胞 层 中 仅 有 少 量 凋 亡 细 胞, 卵 泡 腔 中 无 脱 落 的 颗 粒 细 胞 (2) 早 期 闭 锁 卵 泡 在 低 倍 镜 下 膜 细 胞 与 壁 层 颗 粒 细 胞 之 间 界 限 较 清 楚, 卵 泡 壁 外 层 完 整, 基 膜 部 分 退 化, 与 颗 粒 层 有 不 同 程 度 的 分 离, 颗 粒 层 细 胞 彼 此 结 合 松 散, 有 少 量 颗 粒 细 胞 脱 落 到 卵 泡 腔 中 ; 高 倍 镜 下 颗 粒 细 胞 核 膜 皱 缩, 出 现 染 色 质 凝 缩, 向 核 边 缘 聚 集, 部 分 可 见 凋 亡 细 胞 常 见 的 典 型 的 半 月 结 构, 胞 质 中 出 现 少 量 的 空 泡 (3) 晚 期 闭 锁 卵 泡 壁 外 层 完 整, 基 膜 退 化, 与 颗 粒 层 有 不 同 程 度 的 分 离, 颗 粒 层 细 胞 彼 此 结 合 变 松 散, 颗 粒 细 胞 部 分 或 全 部 脱 落 于 卵 泡 腔 中, 颗 粒 细 胞 的 细 胞 核 呈 深 染, 或 碎 裂 为 闭 锁 小 体 ( 图 1) 形 态 学 研 究 表 明, 眼 观 检 查 卵 泡 并 分 类 的 准 确 率 在 76%~92% 之 间 ( 表 2), 对 于 健 康 卵 泡 的 判 定 准 确 率 达 92% 依 据 这 一 结 果, 通 过 眼 观 检 查 选 择 健 康 卵 泡 用 于 后 面 的 实 验 图 1 猪 分 离 卵 泡 的 眼 观 形 态 与 组 织 学 特 征 Fig. 1 Morphological observation and histological feature of porcine isolated follicles H 和 h: 健 康 卵 泡 眼 观 形 态 与 HE 染 色, 400;E 和 e: 早 期 闭 锁 卵 泡 眼 观 形 态 与 HE 染 色, 400;P 和 p.: 晚 期 闭 锁 卵 泡 眼 观 形 态 与 HE 染 色, 400 H & h:morphological observation of healthy follicle and HE staining, 400; E & e: Morphological observation of early atretic follicle and HE staining, 400; P & p:morphological observation of progress atretic follicle and HE staining, 400. Tab.2 表 2 猪 不 同 质 量 卵 泡 眼 观 检 查 与 组 织 学 检 查 准 确 性 的 比 较 Comparison of the acuracy of classification by morphometric criteria with HE staining 眼 观 检 查 Classified by morphometric criteria HE 染 色 判 定 Classified by HE 准 确 率 Accuracy(%) 健 康 卵 泡 Healthy follicle 早 期 闭 锁 卵 泡 Early atretic follicle 晚 期 闭 锁 卵 泡 Progress atretic follicle 体 外 培 养 卵 泡 的 形 态 学 变 化 大 中 小 3 组 健 康 的 猪 分 离 卵 泡 培 养 16 h 后, 各 组 卵 泡 均 表 现 出 卵 泡 壁 结 构 完 整 紧 凑 无 脱 落 细 胞, 血 管 逐 渐 变 得 不 明 显, 各 组 卵 母 细 胞 都 包 被 3 层 以 上 卵 丘 / 颗 粒 细 胞 ; 中 小 卵 泡 组 卵 泡 液 轻 微 浑 浊, 整 个 卵 泡 变 得 不 透 明 培 养 24 h 的 各 组 卵 泡 结 构 完 整, 但 卵 泡 表 面 开 始 有 细 胞 脱 落, 卵 泡 液 浑 浊 培 养 48 h 后, 大 中 卵 泡 组 常 见 卵 泡 塌 陷 松
5 272 动 物 学 研 究 31 卷 弛 ; 小 卵 泡 的 卵 泡 壁 开 始 溶 解, 卵 泡 外 脱 落 细 胞 增 多 并 向 周 围 扩 散, 卵 泡 液 中 颗 粒 细 胞 散 在 分 布, 整 个 卵 泡 外 观 发 白, 卵 母 细 胞 只 包 被 1 2 层 卵 丘 细 胞, 且 卵 丘 细 胞 排 列 疏 松 卵 泡 壁 溶 解 严 重 的 小 卵 泡, 其 卵 母 细 胞 往 往 变 成 裸 卵 且 开 始 退 化 在 整 个 培 养 过 程 中, 卵 泡 体 积 未 发 生 明 显 变 化, 仅 前 24 h 略 有 缩 小, 可 能 是 新 鲜 有 腔 卵 泡 的 内 压 较 大, 培 养 初 期 卵 泡 液 渗 透 到 卵 泡 外 所 致 2.3 培 养 卵 泡 颗 粒 细 胞 凋 亡 率 的 变 化 分 离 卵 泡 培 养 h 分 别 取 颗 粒 细 胞 作 凋 亡 检 测, 结 果 列 如 表 3, 部 分 测 定 的 散 点 图 见 图 2 Tab. 3 表 3 猪 体 外 培 养 卵 泡 的 颗 粒 细 胞 Annexin V-FITC/PI 双 染 检 测 结 果 Results of Annexin V-FITC/PI double-labeling examination for granulosa cells derived from porcine antral follicles cultured in vitro 卵 泡 分 组 培 养 时 间 (h) 损 伤 细 胞 (%) 晚 期 凋 亡 与 坏 死 细 胞 (%) 早 期 凋 亡 细 胞 (%) 活 细 胞 (%) Group Culture time Damaged cells Progressed atretic and necrotic cells Early apoptotic cells Survival cells 大 卵 泡 Large f. 中 卵 泡 Medium f. 小 卵 泡 Small f ± ±1.34 b 22.75±3.04 a 28.40±1.41 a ± ±1.80 b 29.60±0.90 a 22.20±2.80 a ± ±2.83 b 32.90±4.10 b 18.50±1.13 b ± ±3.54 a 45.70±3.82 b 14.95±0.21 b ± ±1.75 b 41.70±2.10 b 15.80±4.11 b ± ±1.70 c 27.20±3.68 a 15.70±1.27 b ± ±2.05 a 53.50±2.69 c 9.30±0.28 bc ± ±1.25 b 40.20±2.70 b 11.55±3.95 bc ± ±5.23 c 35.00±5.66 a 5.20±0.140 c 同 列 数 据 上 标 不 同 字 母 表 示 差 异 显 著,P<0.05 Different superscripts within column indicate significant difference, P< 图 2 部 分 颗 粒 细 胞 Annexin V-FITC/PI 双 染 检 测 散 点 图 Fig. 2 Partial scatterplots of granulosa cells examined by Annexin V-FITC/PI double-labeling A B C 分 别 示 大 中 小 卵 泡 组 体 外 培 养 8 h 颗 粒 细 胞 散 点 图 Representative scatterplot of annexin V/PI double-labeling in large (A), medium (B), small (C) follicles when cultured for 8 h. 由 表 3 可 见, 大 中 小 卵 泡 培 养 8 h 后, 颗 粒 细 胞 均 已 出 现 大 量 凋 亡, 虽 然 大 卵 泡 中 活 细 胞 比 率 显 著 高 于 中 小 卵 泡 组 (P<0.05), 但 也 仅 有 28.4% 大 卵 泡 培 养 早 期 的 颗 粒 细 胞 凋 亡 率 明 显 低 于 中 小 卵 泡 组 (P<0.05), 晚 期 凋 亡 与 坏 死 细 胞 比 率 显 著 增 加 (P<0.05) 中 小 卵 泡 组 的 活 细 胞 和 晚 期 凋 亡 / 坏 死 细 胞 差 异 不 显 著 小 卵 泡 中 大 量 颗 粒 细 胞 处 于 早 期 凋 亡 状 态, 显 著 高 于 其 他 各 组 培 养 至 16 h 和 24 h 时, 大 卵 泡 组 活 细 胞 比 率 进 一 步 减 少, 早 期 凋 亡 细 胞 数 随 之 增 加, 而 晚 期 凋 亡 与 坏 死 细 胞 数 变 化 不 明 显 ; 中 卵 泡 组 培 养 后 的 活 细 胞 比 率 变 化 不 大, 但 早 期 凋 亡 细 胞 明 显 转 为 晚 期 凋 亡 与 坏 死 细 胞 (P<0.05) 小 卵 泡 组 培 养 16 h 活 细 胞 数 似 乎 略 有 增 加, 但 无 统 计 学 差 异 ; 培 养 24 h 时 则 显 著 下 降 (P<0.05), 大 量 早 期 凋 亡 细 胞 转 为 晚 期 凋 亡 与 坏 死 细 胞 (P<0.05) 本 实 验 表 明, 所 用 无 血 清 卵 泡 培 养 体 系 可 有 效 诱 导 卵 泡 颗 粒 细 胞 的 凋 亡 ; 在 此 培 养 过 程 中, 小 卵 泡 最 易 发 生 闭 锁, 而 大 卵 泡 明 显 较 中 小 卵 泡 组 表 现 出 高 的 抗 凋 亡 能 力 2.4 卵 泡 培 养 过 程 中 颗 粒 细 胞 FasL mrna 相 对 表 达 量 的 检 测 收 集 培 养 和 72 h 的 卵 泡 颗 粒
6 3 期 林 鹏 飞 等 : 猪 分 离 卵 泡 体 外 培 养 过 程 中 Fas/FasL 对 颗 粒 细 胞 凋 亡 的 作 用 273 细 胞, 用 real time PCR SYBRgreen 法 检 测 各 组 卵 泡 颗 粒 细 胞 FasL mrna 相 对 表 达 量 如 图 3 大 中 小 卵 泡 颗 粒 细 胞 FasL mrna 的 表 达, 随 培 养 时 间 发 生 的 整 体 变 化 趋 势 大 致 相 似 颗 粒 细 胞 中 FasL mrna 水 平 随 培 养 时 间 显 著 增 加, 健 康 卵 泡 (0 h) 的 FasL mrna 水 平 在 大 中 小 卵 泡 无 差 异, 培 养 至 24 h 均 显 著 增 高 (P<0.05) 在 培 养 过 程 中 的 每 个 时 间 点, 小 卵 泡 颗 粒 细 胞 FasL mrna 水 平 均 高 于 大 中 卵 泡 组, 以 培 养 16 h 时 的 增 加 最 为 显 著 (P <0.05), 培 养 至 24 h 达 最 大 值 2.5 卵 泡 培 养 过 程 中 颗 粒 细 胞 Fas mrna 的 表 达 培 养 前 (0 h) 的 各 级 卵 泡 颗 粒 细 胞 Fas mrna 相 对 表 达 量 差 异 不 显 著, 培 养 至 8 h 均 显 著 增 加,48 h 达 最 大 值,72 h 的 Fas mrna 相 对 表 达 量 虽 较 48 h 的 表 达 量 稍 有 下 降, 但 仍 显 著 高 于 0 h( 图 4) 培 养 0~72 h 的 每 个 时 间 点 内, 大 中 小 卵 泡 颗 粒 细 图 3 猪 大 中 小 有 腔 卵 泡 培 养 不 同 时 间 后 颗 粒 细 胞 FasL mrna 的 表 达 Fig. 3 Expression of FasL mrna in porcine granulosa cells derived from different size of antral follicles cultured in vitro 胞 的 Fas mrna 相 对 表 达 量 差 异 不 显 著 3 讨 论 无 血 清 培 养 可 诱 导 颗 粒 细 胞 和 其 它 类 型 细 胞 发 生 凋 亡 (Parborell et al, 2005; Guthrie et al, 1998), 是 用 于 研 究 生 殖 激 素 生 长 / 细 胞 因 子 等 作 用 凋 亡 通 路 的 理 想 模 型, 它 可 有 效 避 免 血 清 培 养 时 未 知 因 素 的 干 扰 本 实 验 结 果 显 示, 各 级 有 腔 卵 泡 中 壁 层 颗 粒 细 胞 的 凋 亡 率 在 培 养 8 h 即 可 大 幅 上 升, 培 养 24 h 颗 粒 细 胞 表 现 为 晚 期 凋 亡 与 坏 死 状 态 者 占 50% 以 上, 小 卵 泡 壁 层 颗 粒 细 胞 的 凋 亡 比 例 显 著 高 于 中 大 卵 泡 组 本 研 究 表 明, 所 用 无 血 清 培 养 体 系 可 诱 导 猪 各 级 有 腔 卵 泡 发 生 闭 锁, 颗 粒 细 胞 凋 亡 是 卵 泡 闭 锁 的 主 要 诱 因, 但 卵 泡 闭 锁 程 度 可 因 卵 泡 大 小 而 异 ; 卵 泡 大 小 不 同, 闭 锁 过 程 中 颗 粒 细 胞 死 亡 的 程 度 也 不 同, 小 卵 泡 似 乎 更 容 易 发 生 闭 锁 Fas 是 一 种 细 胞 膜 糖 蛋 白,FasL 是 Ⅱ 类 膜 蛋 白 Fas/FasL 直 接 参 与 了 细 胞 凋 亡 的 调 节, 在 各 种 动 物 的 健 康 或 闭 锁 卵 泡 颗 粒 细 胞 均 有 表 达, 并 在 闭 锁 卵 泡 高 表 达 健 康 卵 泡 的 Fas 定 位 在 胞 浆, 而 不 是 细 胞 膜, 多 以 非 活 性 状 态 存 在 ; 当 卵 泡 发 生 闭 锁 时,Fas 从 胞 浆 转 移 到 胞 膜, 与 FasL 结 合 引 发 颗 粒 细 胞 凋 亡 图 4 猪 大 中 小 卵 泡 培 养 不 同 时 间 后 颗 粒 细 胞 Fas mrna 的 表 达 Fig. 4 Expression of Fas mrna in porcine granulosa cells derived from different size of follicles cultured in vitro (Inoue et al, 2006) 在 本 实 验 中,Fas 和 FasL 在 猪 各 级 有 腔 卵 泡 壁 层 颗 粒 细 胞 均 有 表 达, 在 各 级 健 康 有 腔 卵 泡 的 表 达 无 差 异 ; 随 着 颗 粒 细 胞 凋 亡 率 的 上 升, 它 们 的 表 达 量 增 加, 显 示 出 Fas/FasL 系 统 对 各 级 有 腔 卵 泡 闭 锁 具 有 重 要 的 调 节 作 用, 可 被 去 除 血 清 等 所 激 活 完 整 卵 泡 内 微 环 境 对 于 维 持 颗 粒 细 胞 和 卵 母 细 胞 的 存 活 是 必 要 的 (Moor et al, 1998) 颗 粒 细 胞 间 通 过 缝 隙 连 接 相 互 作 用, 颗 粒 细 胞 与 卵 母 细 胞 间 也 通 过 透 明 带 以 微 绒 毛 相 互 联 系 卵 母 细 胞 与 颗 粒 细 胞 的 相 互 作 用, 对 于 决 定 卵 泡 命 运 起 着 重 要 的 作 用 (Diaz et al, 2007) Canipari et al(2000) 认 为, 卵 母 细 胞 成 熟 与 其 后 的 胚 胎 发 育 能 力 取 决 于 卵 泡 整 体 结 构 的 完 整 Maillet et al(2003) 分 离 兔 健 康 卵 泡 颗 粒 细 胞 进 行 培 养, 并 与 体 外 培 养 的 完 整 卵 泡 颗 粒 细 胞 凋 亡 情 况 进 行 对 比, 发 现 两 者 对 凋 亡 的 敏 感 性 不 同, 证 明 完 整 卵 泡 内 的 旁 分 泌 机 制 可 能 在 抑 制 颗 粒 细 胞 凋 亡 方 面 发 挥 了 作 用 Dharma et al(2003) 应 用 马 绒 毛 膜 促 性 腺 激 素 (ecg) 诱 导 小 鼠 卵 泡 闭 锁, 证 实 在 健 康 和 闭 锁 卵 泡 颗 粒 细 胞 中 均 有 Fas/FasL mrna 和 蛋 白 的 表 达, 但 在 健 康 卵 泡 卵 母 细 胞 中 未 检 测 到 上 述 凋 亡 基 因 的 表 达, 即 使 在 闭 锁 卵 泡 卵 母
7 274 动 物 学 研 究 31 卷 细 胞 也 只 检 测 到 Fas 的 表 达 ; 认 为 颗 粒 细 胞 的 FasL 可 与 卵 母 细 胞 的 Fas 相 结 合, 进 而 导 致 卵 泡 闭 锁 本 实 验 在 卵 泡 培 养 的 不 同 时 间 点 收 集 壁 层 颗 粒 细 胞 时 发 现, 卵 丘 卵 母 细 胞 复 合 体 (COC) 的 形 态 在 培 养 的 头 24 h, 几 乎 所 有 的 卵 母 细 胞 都 包 裹 3 层 以 上 的 颗 粒 细 胞, 而 培 养 16 h 时 卵 泡 液 即 变 得 不 透 明, 培 养 24 h 时 镜 下 可 见 卵 泡 壁 层 颗 粒 细 胞 不 再 成 片 连 接 呈 散 在 分 布 状 经 过 完 整 卵 泡 培 养 所 获 的 COC 在 进 行 卵 母 细 胞 成 熟 培 养 后, 均 未 获 得 成 熟 ( 待 发 表 资 料 ), 暗 示 本 实 验 所 用 卵 泡 培 养 体 系 在 诱 导 卵 泡 闭 锁 后, 可 能 对 卵 母 细 胞 继 续 发 育 造 成 了 障 碍 FasL mrna 在 卵 泡 培 养 至 24 h 达 最 高, 而 Fas mrna 在 卵 泡 培 养 至 48 h 达 最 高, 可 能 暗 示 着 配 体 对 其 受 体 的 诱 导 作 用 根 据 本 实 验 对 猪 的 培 养 卵 泡 的 观 察, 培 养 16 h 后 中 小 卵 泡 的 卵 泡 液 开 始 变 得 不 透 明, 培 养 至 24 h 各 组 卵 泡 均 表 现 为 不 透 明, 与 此 同 时 培 养 卵 泡 颗 粒 细 胞 的 总 凋 亡 率 ( 早 期 凋 亡 + 晚 期 参 考 文 献 : Alonso-Pozos I, Rosales-Torres AM, Ávalos-Rodrígueza A, Vergara-Onofre M, Rosado-García A Mechanism of granulosa cell death during follicular atresia depends on follicular size [J]. 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853 对实验性大鼠甲状腺肿的影响 * 田先翔,王瑞,泮剑英,吴勇,鲁云,郑国华 ( 湖北中医药大学药学院,武汉摇 430065) 摘摇 要摇 目的摇 研究对实验性大鼠甲状腺肿模型的影响及其作用机制 方法摇 将 SD 大鼠随机分为 6 组:,,低 中 高剂量组, 除外,其余各组大鼠连续灌服 丙基硫氧嘧啶(20 mg kg d ) 造模 低 中 高剂量组同时灌服水溶液,剂量分别为 4. 4, 8. 8,17.
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中 国 农 业 大 学 学 报 1999, 4(3): 109~113 Journal of China Agricultural University 小 鼠 桑 棍 胚 玻 璃 化 冷 冻 前 后 生 物 频 谱 处 理 对 体 外 发 青 的 影 晌 1 朱 士 恩 2 王 海 彦 曾 申 明 王 永 胜 张 忠 诚 ( 中 国 农 业 大 学 动 物 科 技 学 院 ) 周 林 陈 银 (
240 生 异 性 相 吸 的 异 性 效 应 [6] 虽 然, 心 理 学 基 础 研 [7-8] 究 已 经 证 实 存 在 异 性 相 吸 异 性 相 吸 是 否 存 在 于 名 字 认 知 识 别 尚 无 报 道 本 实 验 选 取 不 同 性 别 的 名 字 作 为 刺 激 材 料, 通
![240 生 异 性 相 吸 的 异 性 效 应 [6] 虽 然, 心 理 学 基 础 研 [7-8] 究 已 经 证 实 存 在 异 性 相 吸 异 性 相 吸 是 否 存 在 于 名 字 认 知 识 别 尚 无 报 道 本 实 验 选 取 不 同 性 别 的 名 字 作 为 刺 激 材 料, 通](/thumbs/42/22943812.jpg "240 生 异 性 相 吸 的 异 性 效 应 [6] 虽 然, 心 理 学 基 础 研 [7-8] 究 已 经 证 实 存 在 异 性 相 吸 异 性 相 吸 是 否 存 在 于 名 字 认 知 识 别 尚 无 报 道 本 实 验 选 取 不 同 性 别 的 名 字 作 为 刺 激 材 料, 通")
2011 年 Journal of Capital Medical University 4月 第2 期 Apr 2011 Vol 32 No 2 基础研究 doi: 10 3969 / j issn 1006-7795 2011 02 015 人脑识别不同性别名字反应时的差异研究 高迎霄 陈昭燃 * 张明霞 ( 首都医科大学神经生物系高级脑功能中心) 摘要 目的 探讨男女对不同性别名字认知加工速度是否存在差异
- 14 - Drug Evaluation Research 第 36 卷 第 1 期 2013 年 2 月 料 ), 山 西 皇 城 相 府 药 业 有 限 公 司, 批 号 20111003 ( 人 口 服 推 荐 剂 量 为 每 日 3 次, 每 次 4 粒, 成 人 体 质 量 按 60
Drug Evaluation Research 第 36 卷 第 1 期 2013 年 2 月 - 13 - 柴 青 消 癖 胶 囊 对 乳 腺 增 生 模 型 大 鼠 的 治 疗 作 用 研 究 * 刘 聪, 岳 永 花, 郝 旭 亮 山 西 省 中 医 药 研 究 院, 山 西 太 原 030012 摘 要 : 目 的 探 讨 柴 青 消 癖 胶 囊 对 乳 腺 增 生 模 型 大 鼠 的 治
1269 malondialdehyde (MDA) were significantly decreased, while oxygen partial pressure (PaO 2 ), ph value, superoxide dismutase (SOD) and glutathione
1268 维 生 素 A 联 合 牛 肺 表 面 活 性 物 质 治 疗 新 生 儿 呼 吸 窘 迫 综 合 征 的 临 床 研 究 朱 琼 1, 陈 小 利 2, 叶 华 2 1. 重 庆 市 合 川 区 妇 幼 保 健 计 划 生 育 服 务 中 心 儿 科, 重 庆 401520 2. 重 庆 市 合 川 区 妇 幼 保 健 计 划 生 育 服 务 中 心 内 儿 科, 重 庆 401520
金 鹏 等 体 育 锻 炼 缓 解 公 务 员 心 理 压 力 相 关 量 表 的 编 制 及 常 模 的 建 立 89 此, 本 文 从 探 索 性 研 究 入 手, 对 体 育 锻 炼 缓 解 公 务 员 心 理 压 力 展 开 研 究, 尝 试 编 制 一 个 基 于 本 土 化, 具 有 良
天津体育学院学报 研究报道 88~ 88 ~92 Short Comunications 体育锻炼缓解公务员心理压力相关量表的编制及常模的建立 金 摘要 鹏 1 刘 慧2 以体育锻炼促进心理健康理论为依据 在前期访谈和问卷调查的基础上 对体育锻炼缓解公务员心理压力问题进行了研究 结果表明 体育 锻炼缓解公务员心理压力量表 的结构由 4 个维度构成 可累计解释总方差的 58.319% 构成 4 个因子的题项分布合理
21 13 D / 2 10 ig ig 10 d 1. 0 g kg /2 2 β- 5 g kg g kg mg kg - 1 ig ig 24 h 5% 1 2% CMC-Na 2. 5 ml 30
21 13 1 2 1* 2 1. 430065 2. 445000 20 10 5 g kg - 1 5 mg kg - 1 ig 10 d ig HE 1 TFF1 TFF1 P < 0. 01 P < 0. 01 P < 0. 01 P < 0. 05 R285. 5 doi 10. 13422 /j. cnki. syfjx. 2015130100 A 1005-9903 2015 13-0100-05
<4D6963726F736F667420576F7264202D20B2CCA3BA4542B2A1B6BE52746120496747BFB9CCE5D3EBB1C7D1CAB0A9B7D6C6DAB5C4B9D8CFB52E646F63>
EB 病 毒 Rta/IgG 抗 体 与 鼻 咽 癌 分 期 的 关 系 蔡 永 林, 郑 裕 明, 成 积 儒, 李 军, 莫 永 坤, 钟 青 燕 ( 广 西 梧 州 市 红 十 字 会 医 院, 梧 州 市 肿 瘤 防 治 研 究 所, 广 西 梧 州 543002) 摘 要 : 目 的 探 讨 EB 病 毒 Rta/IgG 抗 体 与 鼻 咽 癌 临 床 分 期 的 关 系 方 法 用 酶
(Microsoft Word - 11-\261i\256m\253i.doc)
不 同 接 棒 方 法 對 國 小 學 童 大 隊 接 力 成 績 影 響 之 研 究 不 同 接 棒 方 法 對 國 小 學 童 大 隊 接 力 成 績 影 響 之 研 究 張 峻 詠 林 瑞 興 林 耀 豐 國 立 屏 東 教 育 大 學 摘 要 本 研 究 主 要 目 的 在 探 討 不 同 接 棒 方 法 對 國 小 學 童 大 隊 接 力 成 績 影 響 之 研 究, 以 高 雄 市 楠
13期
中 国 农 学 通 报,9():- Chinese Agricultural Science Bulletin 药 百 合 种 子 萌 发 及 染 色 体 倍 性 检 测 吴 昀, 马 怡 迪, 张 琳, 夏 宜 平 ( 浙 江 大 学 农 业 与 生 物 技 术 学 院 园 艺 系 / 农 业 部 园 艺 植 物 生 长 发 育 与 品 质 调 控 重 点 开 放 实 验 室, 杭 州 ) 摘 要
... (1)....(3)..(5)... (22) (22)......(22)... (22)... (23)....(33)... (33)....(34)....(47)....(51).....(52)......(61)......(62)
97017608 OO ... (1)....(3)..(5)... (22).......(22)......(22)... (22)... (23)....(33)... (33)....(34)....(47)....(51).....(52)......(61)......(62) C 2002 2 2003 12 146 64.27 110 36 Logistic 2003 12 2004
Microsoft Word - 201601a
06 年 月第 3 卷第 期 中国中医药信息杂志 47 实验研究 香砂六君子汤对脾胃虚弱型萎缩性胃炎大鼠胃排空功能 及胃蛋白酶活性和缺氧诱导因子-α表达的影响 段云燕 成映霞 3 王强 李兰珍 王庆胜 郑世铎 鲁鹏程 雷作汉 刘雪松 刘臻华.甘肃中医药大学 甘肃 兰州 73000.甘肃省中医方药挖掘与创新转化重点实验室 甘肃 兰州 73000 3.甘肃省中医院 甘肃 兰州 73000 摘要 目的 观察香砂六君子汤对脾胃虚弱型萎缩性胃炎
< F63756D656E D2D796E2DB9A4D7F72D31C6DABFAF2D31D6D0D2BDD2A9CFD6B4FABBAF2D C4EA2DB5DA34C6DAB8BDBCD32D30302DB7E2C3E6CDC6BDE941A3A D34A3A92E6D6469>
2013 绎 Vol.15 No.4 阴 元元 450002 Ki-6772 Wistar 6 5 mg kg -1 30 0.8 mg kg -1 7.5 15.0 22.5 g kg -1 1 30 Ki-67 TUNEL Ki-67 P
357 P <. 5. TCD findings revealed that the contralateral vertebral artery systolic blood flow velocities in patients with phase Ⅰ Ⅱ and Ⅲ steal groups
356 TCD 212 3 215 4 TCD 45 TCD 8 Ⅰ 21 Ⅱ 11 Ⅲ 5 4 45 6 2 Ⅰ 12 9 Ⅱ 3 7 1 Ⅲ 3 2 r =. 78 P
TGF-β AngⅡ B SD ~ 220g SPF. SCXK No SYXK ~ 25 40% ~ 70% OR37G-C
2017 7 43 4 Journal of Southwest Minzu University Natural Science Edition Jul. 2017 Vol. 43 No. 4 doi10. 11920 /xnmdzk. 2017. 04. 008 1 1 1 2 1 1 3 1. 610212 2. 6100413. 610031 AngⅡ TGF-β. SD 60 180 ~
< F63756D656E D2D796E2D31C6DABFAF2D31D6D0D2BDD2A9CFD6B4FABBAF2D C4EA2DB5DA36C6DA2DB7E2C3E6CDC6BDE9A3A D36A3A92E6D6469>
1. 530023 2. 530001 3. 530001 DCP 100 DCP 47 53 3 HOMA -IR HOMA - IR P
马 丽 媛, 等. 油 茶 皂 苷 体 外 诱 导 人 白 血 病 Jurkat 细 胞 凋 亡 及 其 可 能 机 制 1073 力 争 将 茶 油 作 为 食 用 油 的 主 流 品 种 [5] 茶 麸 系 油 茶 果 实 榨 除 茶 油 后 的 废 弃 残 渣, 药 用 名 为 茶 子 饼,
![马 丽 媛, 等. 油 茶 皂 苷 体 外 诱 导 人 白 血 病 Jurkat 细 胞 凋 亡 及 其 可 能 机 制 1073 力 争 将 茶 油 作 为 食 用 油 的 主 流 品 种 [5] 茶 麸 系 油 茶 果 实 榨 除 茶 油 后 的 废 弃 残 渣, 药 用 名 为 茶 子 饼,](/thumbs/42/22971098.jpg "马 丽 媛, 等. 油 茶 皂 苷 体 外 诱 导 人 白 血 病 Jurkat 细 胞 凋 亡 及 其 可 能 机 制 1073 力 争 将 茶 油 作 为 食 用 油 的 主 流 品 种 [5] 茶 麸 系 油 茶 果 实 榨 除 茶 油 后 的 废 弃 残 渣, 药 用 名 为 茶 子 饼,")
1072 基 础 研 究 Basic Research www.tumorsci.org 肿 瘤 2011 年 12 月 第 31 卷 第 12 期 TUMOR Vol. 31, December, 2011 DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2011.12. 004 Copyright 2011 by TUMOR 油 茶 皂 苷 体 外 诱 导 人 白 血 病 Jurkat
instillation therapy combined with Western medicine can reduce the levels of ALT, TBA, ALP, TBIL, DBIL and GGT, and improve the anti-cmv-igm negative
在 线 投 稿 : http://www.baishideng.com/wcjd/ch/index.aspx 帮 助 平 台 : http://www.wjgnet.com/esps/helpdesk.aspx DOI: 10.11569/wcjd.v23.i28.4568 世 界 华 人 消 化 杂 志 2015 年 10 月 8 日 ; 23(28): 4568-4573 ISSN 1009-3079
度 身 體 活 動 量 ; 芬 蘭 幼 兒 呈 現 中 度 身 體 活 動 量 之 比 例 高 於 臺 灣 幼 兒 (5) 幼 兒 在 投 入 度 方 面 亦 達 顯 著 差 異 (χ²=185.35, p <.001), 芬 蘭 與 臺 灣 幼 兒 多 半 表 現 出 中 度 投 入 與 高 度
臺 灣 與 芬 蘭 幼 兒 園 室 內 自 由 遊 戲 內 涵 之 探 討 林 昭 溶 毛 萬 儀 經 國 管 理 暨 健 康 學 院 幼 兒 保 育 系 副 教 授 joyce@ems.cku.edu.tw 吳 敏 而 國 家 教 育 研 究 院 研 究 員 rozwu@mail.naer.edu.tw wanyi@ems.cku.edu.tw 摘 要 自 由 遊 戲 被 視 為 是 幼 兒 的
优 雅 女 主 任 艺 高 人 胆 大 记 我 院 妇 科 主 任 主 任 医 师 金 海 红 筅 物 资 供 应 处 高 志 忠 画 面 1: 宫 颈 癌 子 宫 癌, 大 大 小 小 的 妇 科 肿 瘤, 行 宫 腔 镜 手 术 ; 空 旷 的 环 境, 泛 着 白 光 的 无 影 灯, 各 种
2015 5 期 优 雅 女 主 任 艺 高 人 胆 大 记 我 院 妇 科 主 任 主 任 医 师 金 海 红 筅 物 资 供 应 处 高 志 忠 画 面 1: 宫 颈 癌 子 宫 癌, 大 大 小 小 的 妇 科 肿 瘤, 行 宫 腔 镜 手 术 ; 空 旷 的 环 境, 泛 着 白 光 的 无 影 灯, 各 种 金 属 医 疗 器 械, 提 起 这 些 冰 冷 的 字 眼 一 定 会 令 人
115 的 大 量 废 弃 物 被 丢 弃 或 直 接 燃 烧 [3] 此 外, 海 南 省 文 昌 鸡 年 产 量 约 8 0 只, 鸡 粪 年 产 量 超 过 100 万 t 这 些 富 含 养 分 的 固 体 有 机 废 弃 物 不 进 行 处 理, 不 仅 会 极 大 浪 费 大 量 养 分
![115 的 大 量 废 弃 物 被 丢 弃 或 直 接 燃 烧 [3] 此 外, 海 南 省 文 昌 鸡 年 产 量 约 8 0 只, 鸡 粪 年 产 量 超 过 100 万 t 这 些 富 含 养 分 的 固 体 有 机 废 弃 物 不 进 行 处 理, 不 仅 会 极 大 浪 费 大 量 养 分](/thumbs/40/22009911.jpg "115 的 大 量 废 弃 物 被 丢 弃 或 直 接 燃 烧 [3] 此 外, 海 南 省 文 昌 鸡 年 产 量 约 8 0 只, 鸡 粪 年 产 量 超 过 100 万 t 这 些 富 含 养 分 的 固 体 有 机 废 弃 物 不 进 行 处 理, 不 仅 会 极 大 浪 费 大 量 养 分")
广东农业科学 16 43 6 114-118 Guangdong Agricultural Sciences doi 10.16768/j.issn.1004-874X.16.06.0 刘军 董存明 吕诗锦 等. 腐熟菌剂不同添加量对鸡粪椰糠高温堆肥的影响 [J]. 广东农业科学 16 43 6 114-118. 腐熟菌剂不同添加量对鸡粪 椰糠高温堆肥的影响 刘 军 董存明 吕诗锦 阮云泽 王蓓蓓
2014年1月A 1期 排版.FIT)
第 26 卷 第 15 期 中 国 现 代 医 学 杂 志 Vol. 26 No.15 2016 年 8 月 China Journal of Modern Medicine Aug. 2016 DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2016.15.022 文 章 编 号 : 1005-8982(2016)15-0114-05 声 检 查 对 产 前 出 血 病 因 诊 断 的
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密 级 : 公 开 学 号 :20101483 硕 士 学 位 论 文 祛 斑 玉 容 方 对 色 素 沉 着 小 鼠 血 酪 氨 酸 酶 及 皮 肤 形 态 的 影 响 研 究 生 王 茜 指 导 教 师 学 科 专 业 所 在 学 院 毕 业 时 间 孙 亦 农 中 医 康 复 学 第 二 临 床 医 学 院 2013 年 6 月 Freckle of Yurong side of pigmentation
32期
中 国 农 学 通 报 2014,30(32):38-42 Chinese Agricultural Science Bulletin 中 草 药 饲 料 添 加 剂 对 黄 鳝 性 激 素 含 量 的 影 响 1,2 1,2 1,2 2 赵 庆 凯, 丁 炜 东, 邴 旭 文, 王 建 新 ( 1 南 京 农 业 大 学 无 锡 渔 业 学 院, 江 苏 无 锡 214081; 2 中 国 水 产
Microsoft Word - 6403.doc
网 络 环 境 下 元 认 知 策 略 运 用 的 性 别 差 异 研 究 王 志 茹 ( 湖 北 大 学 外 国 语 学 院, 武 汉 430062) 摘 要 : 研 究 以 问 卷 的 形 式 对 参 加 网 络 英 语 课 程 学 习 的 520 名 大 学 生 的 元 认 知 策 略 使 用 中 的 性 别 差 异 进 行 调 查 研 究 采 用 独 立 样 本 T 检 验 对 性 别 差
2 3 4 5 22 22 23 25 35 38 39 45 46 1
97017626 O O 2 3 4 5 22 22 23 25 35 38 39 45 46 1 intrauterine insemination IUI 202 IUI a 24 IUI b 24 IUI c hcg 36 IUI d hcg 24 48 IUI 202 262 30 2 1 27 1 14.9% 11.5% a 122 151 13.9%, 11.3% b 42 46 2.38%,
从菜鸟到高手-手把手教你qPCR教程II
从 菜 鸟 到 高 手 - 手 把 手 教 你 qpcr 教 程 II --- 定 量 PCR 原 理 常 见 问 题 分 析 和 数 据 统 计 分 析 前 言 由 于 Real-time qpcr 的 众 多 优 点, 现 在 已 经 是 生 命 科 学 领 域 的 一 项 常 规 技 术 越 来 越 多 的 研 究 文 章 中 涉 及 RT-PCR 的 实 验, 也 基 本 上 被 real-time
by mild (22.7%). Inhaled corticosteroids, systemic corticosteroids, and antibiotics were applied to 94.8% (292 cases), 74.7% (230 cases), and 90.9% (2
论 著 临 床 研 究 doi: 0.7499/j.issn.008-8830.204.2.007 郑 州 市 城 区 儿 童 哮 喘 的 流 行 病 学 调 查 及 发 病 相 关 因 素 分 析 赵 坤 宋 桂 华 古 华 倩 2 刘 爽 3 张 岩 郭 彦 荣 (. 河 南 中 医 学 院 第 一 附 属 医 院 儿 科 医 院, 河 南 郑 州 450000; 2. 杭 州 市 余 杭 区
03 年 8 月 Vol.5 No.8 支 气 管 哮 喘 ( 简 称 哮 喘 ) 是 儿 童 时 期 最 常 见 的 慢 性 呼 吸 道 疾 病 之 一 近 年 来, 随 着 人 类 文 明 的 发 展 社 会 化 进 程 的 加 快 经 济 水 平 的 提 高 和 科 技 的 进 步, 环 境
03 年 8 月 Vol.5 No.8 DOI:0.7499/j.issn.008-8830.03.08.003 论 著 临 床 研 究 成 都 地 区 0~4 岁 城 乡 儿 童 哮 喘 流 行 病 学 调 查 对 比 分 析 李 敏 张 琼 时 维 娟 李 兰 李 艳 庞 英 姚 兵 蒋 虹 (. 四 川 省 医 学 科 学 院 / 四 川 省 人 民 医 院 儿 科, 四 川 成 都 6007;.
相 关 报 道 近 年 来 临 床 上 运 用 多 种 针 灸 疗 法 治 疗 肥 胖 及 其 引 起 的 并 发 症, 如 高 脂 血 症 糖 尿 病 高 血 压 及 痛 经 等, 均 获 得 满 意 疗 效. caused by sedentary lifestyle and genetic f
在 线 投 稿 : http://www.baishideng.com/wcjd/ch/index.aspx 帮 助 平 台 : http://www.wjgnet.com/esps/helpdesk.aspx DOI: 10.11569/wcjd.v24.i5.815 世 界 华 人 消 化 杂 志 2016 年 2 月 18 日 ; 24(5): 815-820 ISSN 1009-3079 (print)
绎 阴 元元 510515 Caco-2 Caco-2 P g kg - 1 decoction respectively 10 ml kg - 1 once a day for 10 weeks during making model. After 10 weeks according to the method of
19 7 LDL-C LDL-R 谢慧臣 1, 刘芬 1*, 田春漫 1, 向靖 2 2, 杨强 ( 1. 湖北民族学院医学院中西医结合教研室, 湖北恩施 445000; 2. 湖北民族学院医学院附属医院中西医结合科, 湖北恩施 445000) LDL LDL-R Wistar 60 7. 2 10-4 g kg - 1 0. 25 0. 5 1. 0 g kg - 1 10 1 10 10 LDL
< F63756D656E D2D796E2DB9A4D7F72D31C6DABFAF2D31D6D0D2BDD2A9CFD6B4FABBAF2D C4EA2DB5DA35C6DA2D30352D30322DBAFEC4CFBBF9B5D82DB8CEB2A12E6D6469>
/ 410007 HBV DCs DCs HBV PBMCs DCs DCs HLA-DR CD80 CD86 CD83 CD1 琢 DCs IFN- 琢 IL-4 HBV HBV DCs HLA-DR CD1 琢 CD83 CD80 CD86 P
标题
医 药 导 报 2016 年 8 月 第 35 卷 第 8 期 803 特 约 稿 鱼 腥 草 制 剂 上 市 后 安 全 性 再 评 价 吴 健 鸿 1 ꎬ 杨 晓 燕 2 ꎬ 柳 强 妮 2 ꎬ 尹 平 2 2 ꎬ 曾 繁 典 (1. 武 汉 药 品 医 疗 器 械 检 验 所 ꎬ 武 汉 430075ꎻ2. 华 中 科 技 大 学 同 济 医 学 院 ꎬ 武 汉 430030) 摘 要 目 的
% GIS / / Fig. 1 Characteristics of flood disaster variation in suburbs of Shang
20 6 2011 12 JOURNAL OF NATURAL DISASTERS Vol. 20 No. 6 Dec. 2011 1004-4574 2011 06-0094 - 05 200062 1949-1990 1949 1977 0. 8 0. 03345 0. 01243 30 100 P426. 616 A Risk analysis of flood disaster in Shanghai
助 剂 改 善 其 止 血 效 果 1 实 验 1.1 原 料 和 试 剂 家 蚕 蛹 经 过 提 取 蛹 油 蛋 白 质 后 剩 余 的 残 渣 ( 主 要 成 分 为 蛹 皮 ), 烘 干 除 杂 粉 碎 后 待 用 ; 壳 聚 糖 ( 成 都 市 科 龙 化 工 试 剂 厂 ), 脱 乙 酰
研 究 与 技 术 蚕 蛹 壳 聚 糖 复 合 止 血 材 料 的 制 备 及 凝 血 性 能 初 探 陈 超, 单 其 艳, 杨 铭, 蓝 广 芊, 吴 大 洋 ( 西 南 大 学 纺 织 服 装 学 院, 重 庆 400716) 摘 要 : 探 讨 以 蚕 蛹 壳 聚 糖 (CS) 和 明 胶 (GEL) 为 主 要 原 料 制 备 复 合 止 血 材 料 的 工 艺 及 凝 血 效 果 首 先
168 健 等 木醋对几种小浆果扦插繁殖的影响 第1期 the view of the comprehensive rooting quality, spraying wood vinegar can change rooting situation, and the optimal concent
第 31 卷 第 1 期 2013 年 3 月 经 济 林 研 究 Nonwood Forest Research Vol. 31 No.1 Mar. 2013 木醋对几种小浆果扦插繁殖的影响 健 1,2 杨国亭 1 刘德江 2 (1. 东北林业大学 生态研究中心 黑龙江 哈尔滨 150040 2. 佳木斯大学 生命科学学院 黑龙江 佳木斯 154007) 摘 要 为了解决小浆果扦插繁殖中生根率及成活率低等问题
1.1 对 象 选 取 2012 年 3 月 -2013 年 3 月 中 山 市 小 榄 人 民 医 院 儿 科 门 诊 收 治 的 146 例 手 足 口 病 患 儿 为 研 究 对 象, 其 中 男 87 例, 女 59, 年 龄 1.6-7.5 岁, 平 均 (3.4±1.2) 岁 根 据 就
家 庭 干 预 对 手 足 口 病 患 儿 综 合 状 态 的 影 响 宾 娟, 谭 翠 恩, 刘 佳 璐, 唐 佑 春 南 方 医 科 大 学 附 属 小 榄 医 院 传 染 科 广 东 广 州 528415 摘 要 目 的 : 探 讨 家 庭 干 预 对 手 足 口 病 患 儿 综 合 状 态 的 影 响 方 法 : 选 取 2012 年 3 月 -2013 年 3 月 146 例 手 足 口
学校代号 10199 学 号20092209134
学 校 代 号 10199 学 号 20092209134 硕 士 学 位 论 文 中 药 塌 渍 护 理 干 预 联 合 超 声 雾 化 对 小 儿 肺 炎 喘 嗽 的 临 床 观 察 研 究 Traditional Chinese medicine collapse stains nursing intervention to joint of ultrasonic atomizer infantile
食品 营养 检测 安全
中 国 农 学 通 报 05,(4):84-90 Chinese Agricultural Science Bulletin 蒲 公 英 - 夏 枯 草 - 野 菊 花 复 合 饮 料 的 研 制 蔡 建 秀, 顾 雅 青, 李 巧 红 ( 泉 州 师 范 学 院 化 学 与 生 命 科 学 学 院, 福 建 泉 州 6000) 摘 要 : 以 蒲 公 英 夏 枯 草 野 菊 花 为 原 料, 研
% 8. 48% 3 80 Alcalase Novozymes Alcalase 2. 4 L Bacillus licheniformis 2. 4 AU /g 1. 2 Hitachi S-4700 JEOL JEM-1200EX Olympus Bu
2011 33 6 1117-1121 http / /xuebao. jxau. edu. cn Acta Agriculturae Universitatis Jiangxiensis E - mail ndxb7775@ sina. com * 311400 Alcalase 2. 4 L TS225. 1 + 6 A 1000-2286 2011 06-1117 - 05 A Study on
mm ~
16 3 2011 6 Vol 16 No 3 JOURNAL OF HARBIN UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY Jun 2011 1 2 3 1 150040 2 150040 3 450052 1 3 4 > 1 ~ 3 > > U414 A 1007-2683 2011 03-0121- 06 Shrinkage Characteristics of
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R2 10315 20042008 2004 CLINICAL RESEARCH OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE THEORY & TREATMENT TO RELIEVE PAIN OF BREAST CANCER PATIENTS 2007 5 -----------------------------------------------------------------------------------------------
http / /www. psychjm. net. cn 2014 27 4 1 1. 2. 1 A 20100501 2mg /d 100422 2 5 ~ 10mg 1 ~ 2 /d 10 ~ 20mg /d 15. 69 ± 4. 21 mg /d B 1 20100501 3-4 3 ~
2014 27 4 http / /www. psychjm. net. cn 刘 云 蒋 光 明 孙 建 中 孙 亚 军 焦 小 雷 陈 金 山 3 CCMD - 3 165 3 A B C 2 PANSS PANSS - F = 896. 936 ~ 1484. 087 P < 0. 01 F = 6. 962 ~ 41. 495 P < 0. 01 F = 3. 455 P = 0. 034
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中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 15 期 214 年 8 月 2277 稳 心 颗 粒 治 疗 心 律 失 常 的 Meta 分 析 * 何 颖, 刘 莹, 邹 爱 英 天 津 中 医 药 大 学 第 二 附 属 医 院, 天 津 15 摘 要 : 利 用 Meta 分 析 法 评 价 稳 心 颗 粒 治 疗 心 律 失 常 的
1 ABSTRACT 3 5 13 14 14 15 15 16 17 18 18 18 18-21 28 33 34 46 47 53 54 2
: - S99017212 O O 1 1 ABSTRACT 3 5 13 14 14 15 15 16 17 18 18 18 18-21 28 33 34 46 47 53 54 2 - A L Aeq CNE 463 3-5 L Aeq L Aeq CNE WHO/ISH 1999 [49] 18.6kPa / 12.0kPa EpiInfo6.04 SPSS10.0 Logistic 10
文章
农 学 学 报 206,6():7-2 Journal of Agriculture www.caaj.org 县 域 经 济 主 观 评 估 指 标 体 系 与 满 意 度 评 估 研 究 以 烟 台 市 为 例 齐 萍 萍, 郭 晓 月, 于 立 云 2, 李 青 ( 中 国 农 业 大 学 烟 台 研 究 院, 山 东 烟 台 264670; 2 山 东 省 市 诸 由 观 镇 人 民 政 府,
- I -
2005 Experimental Study about the Effects of the Bone Cement leakage on the Intervertebral Disc in Vertebroplasty () 2005 4 - I - - II - Experimental Study about the Effects of the Bone Cement leakage
2015内镜杂志-WMD.FIT)
第 22 卷 第 6 期 中 国 内 镜 杂 志 Vol. 22 No.6 2016 年 6 月 China Journal of Endoscopy Jun. 2016 DOI: 10.3969/j.issn.1007-1989.2016.06.015 文 章 编 号 : 1007-1989(2016)06-0056-05 论 著 对 经 口 牵 引 辅 助 内 镜 黏 膜 下 剥 离 术 中 牵
蒋 哲等 基于 CVM 的有机农业认知程度和消费意愿研究 201 (P 0.000). On the basis of these results, enhancing publicity, pricing reasonably, focusing on high- income groups ar
中国农学通报 2016,32(5):200-204 Chinese Agricultural Science Bulletin 基于 CVM 的有机农业认知程度和消费意愿研究 以江西省居民为例 蒋 哲 1 朱 波 1 田 媛 1 梁 超 1 刘章勇 1 陈 阜 1,2 2 1 长江大学农学院 湖北荆州 434025 中国农业大学农学与生物技术学院 北京 100193 摘 要 为探讨参与者对有机农业的认知程度
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* 40 4 2016 7 Vol. 40 No. 4 July 2016 35 Population Research 2014 1 2016 2016 9101. 0 40 49. 6% 2017 ~ 2021 1719. 5 160 ~ 470 100872 Accumulated Couples and Extra Births under the Universal Tw o-child
畜牧 动物医学 蚕 蜂
中国农学通报 2015,31(20):181-185 Chinese Agricultural Science Bulletin 老河口市砂梨花期的物候特点分析 邓 环 1 马德栗 1 徐洪海 2 洪国平 1 2 武汉区域气候中心 武汉 430074 老河口气象局 湖北老河口 441800 1 摘 要 为掌握湖北省老河口市砂梨花期的物候规律 利用老河口市 20 年的砂梨裂蕾期 初花期 和盛花期 4
1 MCF-7 VEGF spss 20 5 ~ 6 h Cck-8 6 h r 2 = Cck-8 6 h 450 nm v Cck-8 v = h 450 nm 3 A = A - A A r 2 Cck -8 Mcf-7 1
42 1 Vol 42 No 1 2018 1 Journal of Jiangxi Normal University Natural Science Jan 2018 1000-5862 2018 01-0100-06 MCF-7 VEGF 1 2 1 1 1 1* 1 570228 2 70102 Mcf -7 Cck-8 TUNEL- DAPI Cck-8 Cck-8 TUNEL-DAPI
某制鞋厂苯接触者2014年在岗期间职业性健康检查结果分析*
深 圳 市 龙 华 新 区 低 浓 度 苯 职 业 危 害 现 况 分 析 陈 自 然, 凌 均 超, 朱 志 良, 林 孟 端, 武 学 成, 王 俊 雄 深 圳 市 龙 华 新 区 疾 病 预 防 控 制 中 心, 广 东 省 深 圳 市,518109 摘 要 : 目 的 了 解 深 圳 市 龙 华 新 区 企 业 使 用 低 浓 度 苯 的 职 业 危 害 现 状, 为 职 业 卫 生 的 监
SVM OA 1 SVM MLP Tab 1 1 Drug feature data quantization table
38 2 2010 4 Journal of Fuzhou University Natural Science Vol 38 No 2 Apr 2010 1000-2243 2010 02-0213 - 06 MLP SVM 1 1 2 1 350108 2 350108 MIP SVM OA MLP - SVM TP391 72 A Research of dialectical classification
2001,30(1):1-4
Subtropical Plant Science 2015,44(3): 188~192. 三 种 植 物 生 长 调 节 剂 对 楝 叶 吴 茱 萸 光 合 作 用 的 影 响 董 奇 妤 1, 张 亮 2, 张 亨 3, 王 婧 1, 陈 红 跃 (1. 华 南 农 业 大 学 林 学 与 风 景 园 林 学 院, 广 东 广 州 510642;2. 广 东 省 林 业 调 查 规 划 院,
米 诺 地 尔 酊 联 合 复 方 甘 草 酸 苷 治 疗 斑 秃 疗 效 评 价 及 对 血 清 TNF-α TGF-β1 和 IL-12 的 影 响 陈 玉 华 1039 Keywords group was significantly lower than the research group
1038 临 床 与 病 理 杂 志 J Clin Pathol Res 2015, 35(6) http://www.lcbl.net doi: 10.3978/j.issn.2095-6959.2015.06.032 View this article at: http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.2095-6959.2015.06.032 米 诺 地 尔 酊 联 合
The role of chronic inflammation in pathogenesis of cervical spondylosis. Supervisor: Prof. Cai Qinlin, Prof. Wang Shaobo. Graduate student: Wang Shen
79 102 HE 1 102 45 44.1% 45 37 LCA 32 KP-1 5 KP-1 2 3 MRI 1-2 3 MRI 4 1 The role of chronic inflammation in pathogenesis of cervical spondylosis. Supervisor: Prof. Cai Qinlin, Prof. Wang Shaobo. Graduate
5月15期
中 国 农 学 通 报 2012,28(15):106-111 Chinese Agricultural Science Bulletin 旱 地 小 麦 休 闲 期 不 同 耕 作 措 施 对 土 壤 水 分 蓄 纳 利 用 与 产 量 形 成 的 影 响 贺 立 恒, 高 志 强, 孙 敏, 李 青 ( 山 西 农 业 大 学 农 学 院, 山 西 太 谷 030801) 摘 要 : 为 了 提
: 307, [], [2],,,, [3] (Response Surface Methodology, RSA),,, [4,5] Design-Expert 6.0,,,, [6] VPJ33 ph 3,, ph, OD, Design-Expert 6.0 Box-Behnken, VPJ3
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微 生 物 学 通 报 FEB 20, 2008, 35(2) 306~30 Microbiology 2008 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@im.ac.cn 生 物 实 验 室 响 应 面 分 析 法 优 化 副 溶 血 性 弧 菌 生 长 条 件 刘 代 新 宁 喜 斌 * 张 继 伦 2 (. 200090) (2. 20202) 摘 要
405 急 性 心 肌 梗 死 是 临 床 较 为 常 见 的 心 血 管 疾 病, 病 情 危 急, 病 死 率 高 [1] 随 着 经 皮 冠 状 动 脉 介 入 治 疗 (percutaneous coronary intervention,pci) 技 术 在 急 性 心 肌 梗 死 急 诊
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404 冠 心 舒 通 胶 囊 预 防 急 性 心 肌 梗 死 PCI 术 后 再 狭 窄 的 临 床 研 究 李 静, 王 建 榜, 王 西 辉 西 安 医 学 院 第 二 附 属 医 院 心 内 科, 陕 西 西 安 710038 摘 要 : 目 的 研 究 冠 心 舒 通 胶 囊 预 防 急 性 心 肌 梗 死 经 皮 冠 状 动 脉 介 入 治 疗 (PCI) 术 后 再 狭 窄 的 临 床
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1001-5558 2015 03-0021-16 2010 C91 A 2014 5 2010 N. W. Journal of Ethnology 2015 3 86 2015.No.3 Total No.86 2010 2010 2181.58 882.99 40.47% 1298.59 59.53% 2013 2232.78 847.29 37.95% 1385.49 62.05% 1990
~ a 3 h NCEP ~ 24 3 ~ ~ 8 9 ~ km m ~ 500 m 500 ~ 800 m 800 ~ m a 200
31 1 2013 3 Journal of Arid Meteorology Vol. 31 No. 1 March 2013. J. 2013 31 1 62-69. doi 10. 11755 /j. issn. 1006-7639 2013-01 - 0062 211101 2000 ~ 2010 3 h 2. 5 2. 5 NCEP 2 5 ~ 7 02 11 05 ~ 08 2 ~ 8
1 GIS 95 Y = F y + (1 F) (1) 0 0 Y0 kg/hm 2 /day F y 0 y c kg/hm 2 /day [12] y m 20 kg/hm 2 /hour Y = cl cn ch G [ F( y ) T m yo + (2) (1 F)(
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24 1 Vol.24 No.1 94 2008 1 Transactions of the CSAE Jan. 2008 2008 1 100094 2 100035 3 100081 4 100081 5 100101 GIS ( ) 65.12 16.82 13.74 15.27 11.07 t/(hm 2 a) 10.93% 41.43% 46.93% 65.4%. Bi Jiye, Zhu
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中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 8 期 2013 年 4 月 989 养 阴 清 肺 糖 浆 指 纹 图 谱 研 究 1, 姜 姗 2, 冯 丽 君 2, 孔 慧 2, 曲 昌 海 2, 尹 兴 斌 2, 倪 健 1. 北 京 中 医 药 大 学 教 务 处, 北 京 100029 2. 北 京 中 医 药 大 学 中 药 学
1556 地 理 科 学 进 展 30 卷 他 关 于 农 村 住 房 结 构 与 抗 震 性 能 的 研 究, 则 多 是 从 工 程 抗 灾 的 角 度, 研 究 某 种 构 造 类 型 的 房 屋, 力 图 找 到 传 统 房 屋 的 结 构 失 误 和 新 建 房 屋 中 存 在 的 问 [
第 30 卷 第 12 期 2011 年 12 月 地 理 科 学 进 展 PROGRESS IN GEOGRAPHY Vol.30, No.12 Dec., 2012 中 国 农 村 地 区 住 房 结 构 的 区 域 差 异 及 其 影 响 因 素 1, 2, 李 方 一 3 1,, 高 晓 路 2 2, 王 英 杰 (1. 中 国 科 学 院 区 域 可 持 续 发 展 分 析 与 模 拟 重
电 话 随 访 对 初 产 妇 产 褥 期 母 乳 喂 养 行 为 及 意 向 的 影 响 The effect of telephone follow-up on breastfeeding behaviors and intentions of new mothers during the po
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28 2015 3 1 2 2011-2012 38 985 31 EXCEL 2005-2010 985 3 985 2011 2012 EXCEL 38 985 31 985 2011-2012 38 985 1. 38 985 90 20 70 1 2005-2010 2011-2012 13
36 3 Vol. 36 No.3 2 0 1 5 5 May 2 0 1 5 985 2011-2012 361005 2011-2012 985 985 985 2005-2012 985 985 G645 A 1001-4519 2015 03-0027 - 12 DOI 10. 14138 /j. 1001-4519. 2015. 03. 002712 2005-2010 985 2012
2000.11 2000.11 2000 11 Abstract: Background: The development of autoantibodies in the sera of patients with cancers has been described, but the mechanism is still not clear. Objective: The aim of this
甘蔗糖业2011年电子合订本
甘 蔗 糖 业 2011 年 第 6 期,2011 年 12 月 Sugarcane and Canesugar No. 6, Dec. 2011 低 钾 胁 迫 对 甘 蔗 不 同 品 系 生 长 和 光 合 特 性 的 影 响 李 奇 伟, 卢 颖 林, 周 文 灵, 陈 迪 文, 敖 俊 华, 黄 莹, 黄 振 瑞, 江 永 ( 广 州 甘 蔗 糖 业 研 究 所 广 东 省 甘 蔗 改 良
54 利 率 市 场 化 与 互 联 网 金 融 : 传 染 效 应 与 联 动 效 应 总 第 33 期 计 算 等, 实 现 资 源 配 置 与 优 化 的 全 新 金 融 发 展 模 式 与 金 融 创 新, 是 既 不 同 于 商 业 银 行 间 接 融 资 也 不 同 于 资 本 市 场
53 利 率 市 场 化 与 互 联 网 金 融 : 传 染 效 应 与 联 动 效 应 缪 海 斌 1 摘 要 : 本 文 分 析 了 在 不 同 情 形 的 利 率 市 场 化 背 景 下, 受 管 制 的 银 行 体 系 利 率 如 何 向 市 场 化 的 互 联 网 金 融 产 品 收 益 率 传 导 研 究 表 明, 在 完 全 利 率 市 场 化 背 景 下, 利 率 或 互 联 网 金
strated that cell clones were decreased with increase of the concentration of procyanidins. PI staining a- nalysis showed that cell cycle was a
32 2 Vol. 32 No. 2 2011 4 Journal of Jinan University Medicine Edition Apr. 2011 HepG2 1 1 2 1 1 1 1. 510632 2. 510080 HepG2 MTT WST-8 HepG2 PI Annexin V-FITC /PI Western blotting HepG2 - P < 0. 01 HepG2
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项 目 批 准 号 81273814 归 口 管 理 部 门 申 请 代 码 收 件 日 期 H2716 360145 y 国 家 自 然 科 学 基 金 委 员 会 资 助 项 目 计 划 书 资 助 类 别 : 面 上 项 目 亚 类 说 明 : 非 连 续 资 助 类 项 目 附 注 说 明 : 项 目 名 称 : 益 气 养 肺 法 拮 抗 bfgf 对 肺 癌 微 环 境 介 导 化 疗
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康 寧 學 報 11:1-20(2009) 1 數 位 學 習 於 護 理 技 術 課 程 之 運 用 與 評 值 * 李 惠 玲 ** 高 清 華 *** 呂 莉 婷 摘 要 背 景 : 網 路 科 技 在 教 育 的 使 用 已 成 為 一 種 有 利 的 教 學 輔 助 工 具 網 路 教 學 的 特 性, 在 使 學 習 可 不 分 時 間 與 空 間 不 同 進 度 把 握 即 時 性 資
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44 6 Vol.44, No.6 2013 11 OCEANOLOGIA ET LIMNOLOGIA SINICA Nov., 2013 (Argopecten irradians concentricus) * 1 1 2 2 (1. 524025; 2. 524022) 2011 10 2012 4 (Argopecten irradians concentricus),,,,,,,, (P
Technical Acoustics Vol.27, No.4 Aug., 2008,,, (, ) :,,,,,, : ; ; : TB535;U : A : (2008) Noise and vibr
8 8 Technical Acoustics Vol., No. Aug., 8,,, (, 8) :,,,,,, : ; ; : TB;U.+ 9 : A : -(8)--- Noise and vibration tests for fuel cell vehicel and noise sources identification SHEN Xiu-min, ZUO Shu-guang, CAI
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分 类 号 :R2 单 位 代 码 :10315 密 级 : 学 号 :20031044 2006 届 硕 士 研 究 生 毕 业 论 文 玄 麦 止 咳 颗 粒 对 阴 虚 风 燥 型 临 床 疗 效 和 气 道 阻 力 的 影 响 学 科 专 业 学 位 类 型 研 究 方 向 研 究 生 中 医 内 科 临 床 临 床 医 学 专 业 学 位 呼 吸 病 学 陈 昌 华 导 师 朱 佳 南 京
基 础 研 究 食 品 科 学 2011, Vol. 32, No. 07 17 白 球 蛋 白 醇 溶 蛋 白 和 碱 溶 蛋 白 等, 发 现 白 果 中 的 蛋 白 质 主 要 以 清 蛋 白 和 球 蛋 白 为 主, 其 中 白 果 清 蛋 白 具 有 抗 氧 化 和 延 缓 衰 老 等 作
16 李 莹 莹 1, 吴 彩 娥 1, *, 杨 剑 婷 2, 范 龚 健 1 (1. 南 京 林 业 大 学 森 林 资 源 与 环 境 学 院, 江 苏 南 京 210037;2. 安 徽 科 技 学 院 食 品 药 品 学 院, 安 徽 凤 阳 233100) 对 白 果 的 主 要 过 敏 蛋 白 进 行 鉴 定, 并 对 其 过 敏 原 性 进 行 分 析 以 SDS-PAGE 和 Western-Blotting
2015医学版第六期
第 4 卷 第 6 期 205 年 2 月 Journal of Lanzhou University(Medical Sciences) Vol.4 No.6 Dec. 205 文 章 编 号 :000-282 (205) 06-0054-05 金 昌 队 列 人 群 代 谢 综 合 征 率 及 组 分 分 析 彭 峥, 白 亚 娜, 王 凤 杰 2, 李 娟 生, 李 海 燕 2, 刘 燕 青,
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绎 阴 元元 / 100102 MCAT MCAO 84~333 mg kg -1 167 333 mg kg -1 MCAT 84 167 mg kg -1 MCAT 27% 37% 84~333 mg kg -1 MCAT 21%~ 32% MCAO LDH 10%~ 12% MDA 28%~38% SOD 15%~36% GSH 14%~36% doi: 10.3969/j.issn.1674-3849.2013.01.016
固本解郁法?治
81 J Chin Med 13(2): 81-88, 2002 固 本 解 鬱 法 論 治 中 風 後 抑 鬱 症 (poststroke depression) 對 照 研 究 劉 慶 憲 1,2 宋 永 建 3 1 浙 江 省 平 湖 市 中 醫 醫 院 神 經 內 科 浙 江, 平 湖, 中 國 2 上 海 第 二 醫 科 大 學 2002 屆 高 級 醫 師 班 3 上 海 第 二 醫 科
2 JCAM. June,2012,Vol. 28,NO. 6 膝 关 节 创 伤 性 滑 膜 炎 是 急 性 创 伤 或 慢 性 劳 损 所 致 的 关 节 滑 膜 的 无 菌 性 炎 症, 发 病 率 达 2% ~ 3% [1], 为 骨 伤 科 临 床 的 常 见 病 多 发 病 近 年 来
![2 JCAM. June,2012,Vol. 28,NO. 6 膝 关 节 创 伤 性 滑 膜 炎 是 急 性 创 伤 或 慢 性 劳 损 所 致 的 关 节 滑 膜 的 无 菌 性 炎 症, 发 病 率 达 2% ~ 3% [1], 为 骨 伤 科 临 床 的 常 见 病 多 发 病 近 年 来](/thumbs/42/22962570.jpg "2 JCAM. June,2012,Vol. 28,NO. 6 膝 关 节 创 伤 性 滑 膜 炎 是 急 性 创 伤 或 慢 性 劳 损 所 致 的 关 节 滑 膜 的 无 菌 性 炎 症, 发 病 率 达 2% ~ 3% [1], 为 骨 伤 科 临 床 的 常 见 病 多 发 病 近 年 来")
针 灸 临 床 杂 志 2012 年 第 28 卷 第 6 期 1 临 床 研 究 针 刀 治 疗 膝 关 节 创 伤 性 滑 膜 炎 的 临 床 研 究 向 伟 明 1, 丁 思 明 1, 张 秀 芬 2, 权 五 成 2, 唐 吉 莲 1, 杨 友 金 1, 黄 涣 强 1, 颜 勋 1, 曾 晓 宇 1, 朱 传 芳 1 1, 张 雄 ( 1. 重 庆 市 梁 平 县 第 二 人 民 医 院,
教 育 科 學 期 刊
彰 化 縣 偏 遠 地 區 國 中 學 生 數 學 學 習 態 度 及 其 影 響 因 素 之 研 究 * 吳 怡 儒 ** 蔡 文 榮 *** 李 林 滄 * 彰 化 縣 立 原 斗 國 民 中 學 數 學 教 師 ** 國 立 中 興 大 學 教 師 專 業 發 展 研 究 所 副 教 授 *** 國 立 中 興 大 學 應 用 數 學 研 究 所 教 授 摘 要 本 研 究 主 要 目 的 在
197 2 相 关 背 景 多 巴 胺 D 2 类 受 体 包 括 D 2 D 3 和 D 4 受 体 1975 年,Randrup 首 先 提 出, 多 巴 胺 可 能 参 与 抑 郁 症 的 发 病 后 来 Maj 等 通 过 一 系 列 的 实 验 证 明, 几 乎 所 有 的 长 期 抗 抑
196 未 来 药 物 新 型 多 巴 胺 D 2 类 受 体 部 分 激 动 剂 brexpiprazole 刘 长 鹰 1, 于 鹏 2, 李 祎 亮 1 1. 天 津 药 物 研 究 院 天 津 市 新 药 设 计 与 发 现 重 点 实 验 室, 天 津 300193 2. 天 津 药 物 研 究 院 医 药 信 息 中 心, 天 津 300193 摘 要 : 在 多 巴 胺 D 2 类 受
<453A5CCAB3C6B7BFC6D1A73131C4EA3134C6DA5C3134C6DA5C3032B7D6CEF6>
227 ELISA 刘 沙 洲 1,2, 桑 小 雪 1, 欧 阳 华 学 3, 雷 绍 荣 3, 白 林 含 1, * (1. 四 川 大 学 生 命 科 学 学 院, 四 川 成 都 610065;2. 成 都 市 食 品 药 品 检 测 中 心, 四 川 成 都 610045; 3. 四 川 省 农 业 科 学 院 分 析 测 试 中 心, 四 川 成 都 610066) 目 的 : 比 较
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30 3 Vol. 30, No. 3 2010 6 SC IENTIA METEOROLOGICA SIN ICA Jun., 2010,,,.., 2010, 30 ( 3) : 4072413. Zhang J ingying, Chen J inm in, L iu Yingjie, et al. Analysis of mechanism s of short2time rainfall
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: http://www.baishideng.com/wcjd/ch/index.aspx : http://www.wjgnet.com/esps/helpdesk.aspx DOI: 10.11569/wcjd.v23.i5.857 2015 2 18 ; 23(5): 857-861 ISSN 1009-3079 (print) ISSN 2219-2859 (online) 2015. CLINICAL
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Chinese Bulletin of Entomology 2010 47 3 460 ~ 466 檻檻 檻檻檻檻檻檻檻檻檻檻檻檻 * 450002 Parasitic effects on host Plutella xylostella testes by two endoparasitoids. HE Fan BAI Su-Fen LI Xin CHAO Yun-Fei College of