302 中南大学学报 ( 医学版 ),2011,36(4) 脑卒中 (stroke) 是当今严重威胁人类生命健康的疾病之一, 湖南省长沙市脑卒中发病率高居中国第 2, 脑出血占脑卒中的 52.9% [1] 目前流行病学 [2] 研究表明 : 遗传基因在脑卒中发病中发挥了重要作用 活性氧 (react

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1 中南大学学报 ( 医学版 ) JCentSouthUniv(MedSci) 2011,36(4) 301 嗜中性粒细胞胞质因子 1 基因 C923T 多态性与长沙市汉族人群脑出血的相关性研究 黄晓松 1 2, 杨期东 (1. 湖南省脑科医院神经内科, 长沙 ;2. 中南大学湘雅医院神经内科, 长沙 ) [ 摘要 ] 目的 : 探讨嗜中性粒细胞胞质因子 1(NCF1) 基因第 10 外显子 C923T(Ala308Val) 多态性与湖南省长沙市汉族人群脑出血的关系 方法 : 采用 PCR 单链构象多态技术和 DNA 直接测序法检测湖南省长沙市汉族人群脑出血患者 110 例 10 个脑出血家系成员 110 例和健康对照者 100 名的 NCF1 基因第 10 外显子 C923T 多态性 ; 同时检测各组血脂水平 结果 : 湖南省长沙市汉族人群 NCF1 基因第 10 外显子 C923T 多态存在 CC,CT,TT3 种基因型, 脑出血组及其各亚型组 C923T(Ala308Val) 多态基因频率分布与对照组比较, 差异无统计学意义 (P>0.05); 脑出血家系组中患病组和未患病组及脑出血组的 C923T 多态分布与对照组比较, 差异无统计学意义 (P>0.05); 脑出血组中各基因型血脂水平与对照组比较, 差异无统计学意义 (P>0.05) 结论 : 湖南省长沙市汉族人群 NCF1 基因 C923T 多态性可能与脑出血的易患性无关 [ 关键词 ] 脑出血 ; 嗜中性粒细胞胞质因子 1; 基因多态性 ; 血脂 DOI: /j.isn Correlationbetweenneutrophilcytosolicfactor1geneC923T polymorphism andcerebralhemorrhageinthehaninchangsha HUANGXiaosong 1,YANGQidong 2 (1.DepartmentofNeurology,HunanBrainHospital,Changsha410007; 2.DepartmentofNeurology,XiangyaHospital,CentralSouthUniversity,Changsha410008,China) Abstract: Objective ToinvestigatetherelationbetweenC923T(Ala308Val)polymorphism inexon10ofneutrophilcytosolicfactor1(ncf1)geneandcerebralhemorhageinthehanin ChangshaandtoevaluatetheefectofC923T(Ala308Val)polymorphism onplasmalipidlevels. Methods ChangshaHanC923T(Ala308Val)polymorphisminNCF1genewasdeterminedbyPCR singlestrandconformationpolymorphismanalysisanddnasequencingin100healthycontrols,110 patientswithcerebralhemorhage,and10cerebralhemorhagepedigrees.thelevelofplasmalipid wasmeasuredbyroutinemethods.results Nosignificantdiferencewasfoundinfrequenciesof genotypesandalelesofc923t(ala308val)polymorphismamongthecontrols,cerebralhemorhage patientsandcerebralhemorhagepedigrees.theserum leveloftginthectgenotypeofcerebral hemorhagepatientsandcontrolstendedtowardhigherthanthatinccgenotype,butthetrenddid notreachsignificance(p>0.05).conclusion ThereseemsnocorelationbetweenC923T (Ala308Val)polymorphismandcerebralhemorhageinHanspeopleinHunanprovince. Keywords: cerebralhemorhage; neutrophilcytosolicfactor1; geneticpolymorphism; plas malipid 收稿日期 (Dateofreception) 作者简介 (Biography) 黄晓松, 博士, 副主任医师, 主要从事脑血管病及脑血管介入的基础与临床研究 通信作者 (Correspondingauthor) 杨期东,E mail:xyyqd@hotmail.com 基金项目 (Foundationitem) 湖南省卫生厅科研计划项目 (B ) ThisworkwassupportedbytheprojectofDepartmentof PublicHealthofHunanProvince,P.R.China(B ).

2 302 中南大学学报 ( 医学版 ),2011,36(4) 脑卒中 (stroke) 是当今严重威胁人类生命健康的疾病之一, 湖南省长沙市脑卒中发病率高居中国第 2, 脑出血占脑卒中的 52.9% [1] 目前流行病学 [2] 研究表明 : 遗传基因在脑卒中发病中发挥了重要作用 活性氧 (reactiveoxygenspecies,ros) 与高血压病 动脉粥样硬化形成和缺血性脑卒中等血管性疾病和糖尿病密切相关, 是血管性疾病的危险因素 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 [nicotinamide adeninedinu cleotide,nad(p)h] 氧化酶是中性粒细胞和血管系统中 ROS 的主要来源, 在缺血性损害和动脉粥样硬化形成中发挥重要作用 嗜中性粒细胞胞质因子 1 [3] (neutrophilcytosolicfactor1,ncf1) 是 Lomax 等于 1989 年克隆, 是 NAD(P)H 氧化酶系统的一个主要成分, 位于 7q11.23, 含有 11 个外显子, 其功能区有 PX 区 AIR 区 PRR 区和 2 个 SH 3 区等 5 个功能域 [4 8] 组成 目前研究表明 : 在 ROS 的产生过程中, NCF1 发挥了始动功能, 而 ROS 与高血压病和动脉粥样硬化形成等血管性疾病密切相关, 是血管性疾病的危险因素 [9] 可见,NCF1 与高血压病 动脉粥样硬化形成和缺血性脑卒中等血管性疾病和糖尿病密切相关 若编码 NAD(P)H 氧化酶亚单位的基因多态性或基因突变使 ROS 生成增加, 就可通过直接氧化作用和间接作为第二信使参与信号转导加速动脉粥样硬化形成 高血压病和糖尿病的发生与发展, 从而使其对脑卒中的易感性增加 NCF1 基因编码区第 10 外显子的 C923T(Ala308Val, 丙氨酸 166 缬氨酸 ) 多态性与 ROS 的产生密切相关 [2] 目前对该多态位点与脑出血关系的研究国内外尚未见报道 本研究探讨 NCF1 基因第 10 外显子 C923T (Ala308Val) 多态性与长沙市汉族人群脑出血的关系 1 对象与方法 1.1 研究对象 脑出血组无血缘关系的脑出血患者 110 例, 祖籍均为中国湖南省长沙市, 均为汉族, 为中南大学湘雅医院和湖南省脑科医院神经内科 2006 年 1 月至 2008 年 12 月住院和门诊病人 所有病例均符合 1995 年全国第 4 次脑血管疾病学术会议修订的诊断标准 [10], 经头颅 CT 或 MRI 确诊 不包括心源性 动脉炎 外伤 血液病 药物 肿瘤 脑血管畸形或动脉瘤等引起的脑出血 ; 排除患有严重肝肾疾病 甲状腺疾病 血液病和最近 3 个月服用雌激素患者, 近 2 周均未服 用降血脂药和抗凝药 其中男 59 例, 女 51 例, 年龄 28~82(58.13±14.22) 岁, 散发性脑出血组 (NFCH) 及有家族史的脑出血组 (FCH) 患者分别为 74 例和 36 例 ; 有高血压的脑出血组 (HBP+ CH) 及无高血压的脑出血组 ( 非 HBP+CH) 分别为 79 例和 31 例 ; 有糖尿病的脑出血组 (DM+CH) 及无糖尿病的脑出血组 ( 非 DM+CH) 分别为 9 例和 101 例 脑出血家系组脑出血家系定义为先证者一级亲属中至少有 1 人为脑出血患者 共收集以脑出血为主的家族聚集现象的家系 10 个, 家系基本分布在中国湖南省长沙市, 先证者为上述医院同期住院和门诊病人,10 个以脑出血为主的家系共包括成员 110 例, 祖籍均为中国湖南省长沙市, 均为汉族, 其中男 60 例, 女 50 例, 年龄 16~79(44.13±11.37) 岁, 脑出血患病者 74 例, 未患病者 36 例 正常对照组无血缘关系的正常健康人共 100 例, 祖籍均为中国湖南省长沙市, 均为汉族, 其中男 54 例, 女 46 例, 年龄 18~75(57.31±13.33) 岁, 为上述医院同期健康体检人员, 无脑卒中家族史, 无肝 肾 血液病 自身免疫性疾病和甲状腺病史 1.2 试剂 TaqDNA 聚合酶 (5U/μL),10mmol/LdNTPs (datp,dctp,dgtp,dttp),25 mmol/l MgCl 2, Marker 购自晶美生物公司 ; 引物购自上海英骏公司 ;10 PCR 缓冲液, 琼脂糖丙烯酰胺 (N,N 亚甲双丙烯酰胺 ),SDS, 蛋白酶 K 购自北京鼎国生物公司 ; 血清脂蛋白 a(lpa) 测定试剂盒,LPa 标准品购自解放军检测中心 ; 载脂蛋白 A(apoA), 载脂蛋白 B(apoB), 低密度脂蛋白胆固醇 (LDL ch) 及高密度脂蛋白胆固醇 (HDL ch) 试剂盒购自英国 Randox 公司 ; 甘油三酯 (TG) 试剂盒购自德国 Centronic GmbH 公司 1.3 方法 人基因组 DNA 样品的制备抽取外周静脉血 4mL, 肝素抗凝, 用常规酚 / 氯仿抽提法提取 DNA, 并在 4 冰箱保存备用 NCF1 基因型检测扩增 NCF1 基因第 10 外显子的引物经 Primer Premier5 软件设计, 并进行同源性分析 (BLAST) 确定其特异性高, 引物序列为 : 上游 5 CAAGGGTCCT TGTCGTGA 3 ; 下游 5 TCTACGGCTTGCCCTTCCT 3, 扩增片段 352bp 反应在 PE4800 型 PCR 仪 ( 美

3 嗜中性粒细胞胞质因子 1 基因 C923T 多态性与长沙市汉族人群脑出血的相关性研究 黄晓松, 等 303 国 PE 公司 ) 上进行, 反应条件为 :95 预变性 3 min,94 变性 45s,65.8 复性 30s,72 延伸 1 min,30 个循环后,72 充分延伸 10min 单链构象多态 (singlestrandconformationpoly morphism,sscp) 分析 : 取 4μLPCR 产物经 8% 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测产物, 如特异性好, 则将 PCR 产物加等量 2 变性载样液, 混合后 99 变性 10min, 然后立即置冰上 5min, 取 8μL 上样于含 5% 甘油的中性聚丙烯酰胺凝胶中,180V,4 电泳 12h, 电泳结束后采用银染法染色并拍照 选取中性聚丙烯酰胺凝胶电泳中有异常泳带的阳性样本进行正反向测序 测序结果在 Genbank 和单核苷酸多态性 (singlenucleotidepolymorphisms,snp) 数据库中进行比较分析 1.4 统计学处理所有资料在 Dbase 软件中建立数据库, 采用 SPSS13.0 统计软件进行分析 等位基因频率 = (2 纯合子 + 杂合子 )/(2 受检人数 ), 基因型频率和等位基因频率的比较用 χ 2 检验或校正方法 按 Hardy Weinberg 平衡法检验样本的群体代表性 组间血脂比较用 t 检验, 不同基因型亚组间血脂比较采用 ANOVA 方差分析及 LSD t 检验,P<0.05 为差异有统计学意义 2 结果 2.1 脑出血组和对照组的临床特点脑出血组中有高血压病史 糖尿病病史及冠心病史者的比例高于对照组 (P<0.01), 两者在年龄 性别构成 体质量指数 吸烟及饮酒史上差异无统计学意义 (P>0.05, 表 1) 表 1 脑出血组和对照组临床资料比较 (n=110) Tab.1 ClinicalcharacteristicsoftheCHgroupandcon trolgroup(n=110) 项目脑出血组对照组年龄 / 岁 58.1± ±13.3 性别 ( 男 / 女 ) 59/51 54/46 体质量指数 24.3± ±2.3 吸烟人数 /[No.(%)] 10(9.1) 7(7.0) 饮酒人数 /[No.(%)] 8(7.3) 6(6.0) 高血压病史 /[No.(%)] 79(71.8) 4(4.0) 糖尿病病史 /[No.(%)] 9(8.2) 2(2.0) 冠心病史 /[No.(%)] 19(17.3) 3(3.0) 与对照组比较, P< NCF1 基因第 10 外显子 C923T(Ala308Val) 多态性分析 PCR SSCP 分析显示 :NCF1 基因第 10 外显子有 3 种不同的电泳图谱, 经测序后证实为 C923T (Ala308Val), 分别为 CC(Ala/Ala),CT(Ala/Val), TT(Val/Val)3 种基因型 ( 图 1~3) 2.3 湖南省长沙市汉族人群的 NCF1 基因 C923T (Ala308Val) 多态分布脑出血组及对照组基因型及等位基因频率分布均符合 Hardy Weinberg 平衡检验 (P>0.05); 脑出血组及不同亚型组与对照组 C923T(Ala308Val) 多态基因频率分布比较, 差异无统计学意义 (P>0.05, 表 2); 脑出血家系组中患病组和未患病组及脑出血组的 C923T 多态分布与对照组比较, 差异无统计学意义 (P>0.05, 表 2) 脑出血组和对照组 NCF1 基因 C923T(Ala308Val) 多态对血脂 脂蛋白水平的影响, 各组间差异无统计学意义 (P>0.05, 表 3) 表 2 各组 NCF1 基因 10 号外显子 C923T(Ala308Val) 多态分布 Tab.2 GenotypeandalelefrequenciesofC923T(Ala308Val)NCF1genepolymorphismsindiferentgroups 组别 例数 基因型 [No.(%)] 等位基因频率 CC CT+TT C T 脑出血组 (90.9) 8+2(9.1) HBP+CH 组 79 72(91.1) 7(8.9) 非 HBP+CH 组 31 28(90.3) 3(9.7) DM+CH 组 9 8(88.9) 1(11.1) 非 DM+CH 组 (91.1) 10(8.9) 脑出血家系组 (90.9) 4+4(9.1) 患病组 74 69(93.2) 2+3(6.8) 未患病组 36 33(91.7) 2+1(13.9) 对照组 (91.0) 7+2(9.0)

4 304 中南大学学报 ( 医学版 ),2011,36(4) 图 1 C923T(Ala308Val)CC 基因型反向测序图 ( 箭头所指 ) Fig.1 MapofthereversesequenceofC923T(Ala308Val)CCgenotype(Arrowshows). 图 2 C923T(Ala308Val)CT 基因型反向测序图 ( 箭头所指 ) Fig.2 MapofthereversesequenceofC923T(Ala308Val)CTgenotype(Arrowshows). 图 3 C923T(Ala308Val)TT 基因型反向测序图 ( 箭头所指 ) Fig.3 MapofthereversesequenceofC923T(Ala308Val)TTgenotype(Arrowshows). 表 3 脑出血组和对照组 NCF1 基因 10 号外显子 C923T(Ala308Val) 多态不同等位基因对血脂和脂蛋白水平的影响 (x±s) Tab.3 EfectofthediferentgenotypesofC923T(Ala308Val)polymorphism onplasmalipidlevelsinthech group andthecontrolgroup(x±s) 组别 基因型 ( 例数 ) TC/ TG/ HDL ch/ LDL ch/ ApoA/ (g/l) ApoB100/ (g/l) LPa/ (g/l) 脑出血组 CC(100) 4.45± ± ± ± ± ± ±0.16 CT 或 TT(10) 4.53± ± ± ± ± ± ±0.18 合计 (110) 4.48± ± ± ± ± ± ±0.27 对照组 CC(91) 4.28± ± ± ± ± ± ±0.11 CT 或 TT(9) 4.28± ± ± ± ± ± ±0.14 合计 (100) 4.30± ± ± ± ± ± ±0.13

5 嗜中性粒细胞胞质因子 1 基因 C923T 多态性与长沙市汉族人群脑出血的相关性研究 黄晓松, 等 讨论 [11] Cai 等用敲除了血管平滑肌细胞 (vascular smoothmusclecel,vsmc) 和血管内皮细胞 (endothe lialcel,ec) 的 NCF1 基因缺失 (NCF1 / ) 大鼠, 分别用压力 血小板衍生生长因子 (platelet derivedgrowth factor,pdgf) 和血管紧张素 Ⅱ 诱导 ROS 的产生, 发现 ROS 的产生明显减小, 同样用抗 NCF1 抗体能抑制 VSMC 的超氧阴离子的产生, 说明 NCF1 是 NAD(P)H 氧化酶产生 ROS 的主要功能成分 [12] NCF1 在 ROS 产生过程中的功能与 PX 区和 2 个 SH 3 区密切相关, 而第 10 号外显子是编码 PX 区和 2 个 SH 3 区的外显子之一,C923T(Ala308Val) 多态是第 10 号外显子的一个多态位点 [13] 本研究发现: 在中国湖南省长沙市汉族正常人群 NCF1 基因 C923T(Ala308Val) 多态位点有 CC,CT,TT3 种基因型,C 等位基因频率为 0.945,T 等位基因频率为 目前, 此多态位点在不同人种的分布情况国内外尚未见报道 脑出血组与正常对照人群 C923T 多态的基因型和等位基因频率分布差异无统计学意义 (P>0.05) 将脑出血组根据脑出血亚型和合并的危险因素进行分类后再比较, 未发现某种类型的脑出血组与对照组差异有统计学意义 (P>0.05) 在脑出血家系组中, 患病组和未患病组的 C923T 多态分布与脑出血组 正常对照人群相比较, 差异无统计学意义 (P>0.05), 以上结果提示 NCF1 基因 C923T 多态可能与脑出血易患性无相关性 近年来的研究表明 : 血管壁的 ROS 能引起低密度脂蛋白 (LDL) 的氧化修饰, 产生氧化型低密度脂蛋白 (ox LDL),ox LDL 能导致泡沫细胞的形成和发展, 并能促进胆固醇在细胞内的聚集 [14] ; 过量的 ROS 在脂质过氧化过程中产生的 H 2 O 2 可直接损伤内皮细胞, 增加中性粒细胞的黏附性, 增加血小板聚集的敏感性, 引起动脉粥样硬化或促进损伤过程 可见,ROS 是高脂血症和动脉粥样硬化发生发展的主要诱因之一 [15] 血管壁的 ROS 的主要来源是 NAD(P)H 氧化酶系统, 因此,NAD(P)H 氧化酶 NCF1 与高脂血症和动脉粥样硬化发生发展密切相 [16] 关 Oliveira 等研究证实 NAD(P)H 氧化酶与血脂代谢密切相关 笔者分析长沙市汉族人群 NCF1 基因 C923T(Ala308Val) 多态位点不同基因型对血脂 脂蛋白水平的影响, 发现脑出血组和对照组差异无统计学意义 (P<0.05), 提示长沙市汉族人群 NCF1 基因 C923T(Ala308Val) 多态可能与血脂代谢 无关 产生上述结果的可能机制是 :NCF1 基因 10 号外显子 923 位点密码子突变 (C T), 发生非同义突变, 导致相应的 308 位氨基酸由丙氨酸置换为缬氨酸, 引起长沙市汉族人群脑出血患者 NCF1 分子结构发生改变, 但对 NAD(P)H 氧化酶的功能及 ROS 产生无影响 因此长沙市汉族人群 NCF1 基因 C923T 多态可能与脑出血及血脂代谢易患性无关 这也许与研究的长沙市汉族人群种群有关, 但也不排除与本研究的样本量不够大有关, 尚需进一步研究 参考文献 : [1] 杨期东, 周艳宏, 刘运海, 等. 长沙社区人群脑卒中患者发病的监测研究 [J]. 中华医学杂志,2003,83(4): YANGQidong,ZHOUYanhong,LIUYunhai,etal.Surveilance ofincidenceofcerebralhemorhageincommunitypopnlatiomin Changsha[J].NationalMedicalJournalofChina,2003,83 (4): [2] CatoAJ.GeneticaspectofthehemostaticsysteminCerebro vasculardisease[j].neurology,2001,57(6): [3] OguraK,YuzawaS,InagakiF,etal.Super molecularinterac tionofp47(phox):aregulatoryproteinofsuperoxide produ cingsystem inphagocytes[j].tanpakushitsukakusankoso, 2005,50(10Suppl): [4] RalfP,FrancisJ,StefaniB,etal.ThevascularNADPH oxi dasesubunitncf1isinvolvedinredox mediatedgeneexpres sion[j].freeradicalbiomed,2002,32(11): [5] HagenowK,GeldermanKA,HultqvistM,etal.Ncf1 asoci atedreducedoxidativeburstpromotesil 33R+ Tcel media tedadjuvant freearthritisinmice[j].jimmunol,2009,183 (2): [6] ReddyMK,LabhasetwarV.Nanoparticle mediateddeliveryof superoxidedismutasetothebrain:anefectivestrategytore duceischemia[j].fasebj,2009,23(5): [7] CastierY,BrandesRP,LesecheG,etal.p47phox dependent NADPH oxidaseregulatesflow induced vascularremodeling [J].CircRes,2005,97(6): [8] VanHemelrijckA,Hachimi IdrisiS,SareS,etal.Post is chaemicmildhypothermiainhibitsapoptosisinthepenumbral regionbyreducingneuronalnitricoxidesynthaseactivityand therebypreventingendothelin 1 inducedhydroxylradicalforma tion[j].eurjneurosci,2005,22(6): [9] 黄晓松, 杨期东, 郭田生, 等.p47phox 基因第 10 外显子多态性与脑卒中的关联及其对血脂的影响 [J]. 中华医学遗传学杂志,2007,24(5): HUANGXiaosong,YANGQidong,GUOTiansheng,etal.The relationofbetweentheexon10ofthep47phoxpolymorphism andstrokeandtheefectofthepolymorphism onplasmalipid [J].ChineseJournalofMedicalGenetics,2007,24(5):524

6 306 中南大学学报 ( 医学版 ),2011,36(4) 528. [10] 王新德. 各类脑血管病诊断要点 [J]. 中华神经科杂志, 1996,29(6): WANGXinde.Thehighlightdiagnosisofcerebrovasculardis ease[j].chinjneurol,1996,29(6): [11]CaiH,LiZ,DikalovS,etal.NAD(P)Hoxidase derivedhy drogenperoxidemediatesendothelialnitricoxideproductionin responsetoangiotensin I[J].JBiolChem,2002,277(50): [12] ShinHK,KimYK,KimKY,etal.Remnantlipoproteinpar ticlesinduceapoptosisinendothelialcelsbynad(p)h oxi dase mediatedproductionofsuperoxideandcytokinesvialec tin likeoxidizedlow densitylipoproteinreceptor 1activation: preventionbycilost azol[j].circulation,2004,109(8): [13]vandeVoseE,vanWengenA,vanGeelenJA,etal.Ano velmutationinncf1inanadultcgdpatientwithaliverab scesasfirstpresentation[j].jhum Genet,2009,54(6): [14]MyeungJK,Kyung SueSH,Young BaeCH,etal.Immuno histochemicalstudyofp47phoxandgp91phoxdistributionsin ratbrain[j].brainres,2005,1040: [15] NakanoT,MatsunagaS,NagataA,etal.NAD(P)H oxidase p22phoxgenec242tpolymorphism andlipoproteinoxidation [J].ClinChimActa,2003,335(1): [16] OliveiraHC,CosoRG,AlbericiLC,etal.Oxidativestres inatherosclerosispronemouseisduetolowantioxidantcapacity ofmitochondria[j].fasebj,2005,19(2): ( 本文编辑彭敏宁 ) 檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳檳 国际病理科学与临床杂志 征稿启事 国际病理科学与临床杂志 是由教育部 中南大学主办的国家级医学学术期刊 原刊名 国外医学 生理 病理科学与临床分册, 更名后, 本刊在保持特色, 致力于介绍国外医学研究领域的新动态 新技术 新经验的基础上, 加强了对国内研究成果和现状的报道 主要栏目有 : 研究论著 专家论坛 综述 重点实验室 成果报道等 本刊为 中国科技论文统计源期刊 ( 中国科技核心期刊 ) 中国学术期刊综合评价数据库来源期刊 第 2 届中国高校特色科技期刊 第 3 届中国高校优秀科技期刊, 2009 年获 全国高校科技期刊优秀编辑质量奖 已被美国 化学文摘 (CA) 等国内外多家重要数据库和检索系统收录 欢迎投稿, 特别欢迎并优先刊发高水平的研究论著 本刊具有学术水平高 指导性强 信息时效快等特点, 已实现 投稿 - 审稿 - 编辑 全程网上处理, 敬请登陆本刊网站投稿 查询 网址 :htp:// 通信地址 : 湖南省长沙市湘雅路 110 号湘雅医学院 50 号信箱邮政编码 : 编辑部电话 : , ; 传真 : E mail:gwyxxy@vip.163.com,gwyxxy@126.com

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