Microsoft Word - IF和ICC.doc
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- 茜椰 谈
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1 免疫荧光 (Immunofluorescence, IF) 原理 免疫荧光技术是在免疫学 生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术 它是根据抗原抗体反应的原理, 先将已知的抗原或抗体标记上荧光 基团, 再用这种荧光抗体 ( 或抗原 ) 作为探针检查细胞或组织内的相应抗原 ( 或抗体 ) 利用荧光显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织, 从而确定抗原或 抗体的性质和定位, 以及利用定量技术 ( 比如流式细胞仪 ) 测定含量 紫外光激发荧光物质放射荧光示意图 免疫荧光实验的主要步骤包括细胞片制备 固定及通透 ( 或称为透化 ) 封闭 抗体孵育及荧光检测等 细胞片制备 ( 通俗的说法是细胞爬片 ) 是免 疫荧光实验的第一步, 细胞片的质量对实验的成败至关重要, 原因很简单, 如果发生细胞掉片, 一切都无从谈起 这一步关键的是玻片 (Slides or Coverslips) 的处理以及细胞的活力, 有人根据成功经验总结出许多有益的细节或小窍门, 非常值得借鉴 固定和通透步骤最重要的是根据所研究抗原的性质选择适当的 固定方法, 合适的固定剂和固定程序对于获得好的实验结果是非常重要的 免疫荧光中的封闭和抗体孵育与其它方法 ( 如 ELISA 或 Western Blot) 中的相同 步骤是类似的, 最重要的区别在于免疫荧光实验中要用到荧光抗体, 因此必须谨记避光操作, 此外抗体浓度的选择可能更加关键 最后需要注意的是, 标记 好荧光的细胞片应尽早观察, 或者用封片剂封片后在 4 或 -20 避光保存, 以免因标记蛋白解离或荧光减弱而影响实验结果 由于操作步骤比较多, 同时在分析结果时无法像 WB 那样可以根据分子量的大小区分非特异性识别, 所以要得到一个完美的免疫荧光实验结果, 除了 需要高质量的抗体, 以及对实验条件进行反复优化外, 还必须设立严谨的实验对照 总之, 免疫荧光实验从细胞样品处理 固定 封闭 抗体孵育到最后的 封片及观察拍照, 每步都非常关键, 需要严格控制实验流程中每个步骤的质量, 才能最终达到你的实验目的 基本实验步骤 : (1) 细胞准备 对单层生长细胞, 在传代培养时, 将细胞接种到预先放置有处理过的盖玻片的培养皿中, 待细胞接近长成单层后取出盖玻片,PBS 洗两次 ; 对悬浮生长细胞, 取对数生长细胞, 用 PBS 离心洗涤 (1000rpm,5min)2 次, 用细胞离心甩片机制备细胞片或直接制备细胞涂片 (2) 固定 根据需要选择适当的固定剂固定细胞 固定完毕后的细胞可置于含叠氮纳的 PBS 中 4 保存 3 个月 PBS 洗涤 3 5 min (3) 通透 使用交联剂 ( 如多聚甲醛 ) 固定后的细胞, 一般需要在加入抗体孵育前, 对细胞进行通透处理, 以保证抗体能够到达抗原部位 选择通透剂应 充分考虑抗原蛋白的性质 通透的时间一般在 5-15min 通透后用 PBS 洗涤 3 5 min
2 (4) 封闭 使用封闭液对细胞进行封闭, 时间一般为 30min (5) 一抗结合 室温孵育 1h 或者 4 过夜 PBST 漂洗 3 次, 每次冲洗 5min (6) 二抗结合 间接免疫荧光需要使用二抗 室温避光孵育 1h PBST 漂洗 3 次, 每次冲洗 5min 后, 再用蒸馏水漂洗一次 (7) 封片及检测 滴加封片剂一滴, 封片, 荧光显微镜检查 ( 一 ) 细胞准备 用于免疫荧光实验的细胞可以是直接生长在盖玻片上的贴壁细胞, 也可以是经过离心后涂片的悬浮细胞或者是将取自体内的组织细胞悬液离心后涂 片 贴壁良好的细胞一般在培养时直接放入 coverslips 让细胞生长在其上即可, 尽量避免使用贴壁性能不好的细胞进行免疫荧光实验, 以免后续的漂洗操作 引起细胞脱落 少数实验需要使用这类细胞或者悬浮细胞进行免疫荧光观察, 建议使用细胞离心甩片机制备细胞片或直接制备细胞涂片 ( 二 ) 固定和通透 除研究细胞表面抗原或不稳定抗原可不固定外, 一般均应固定 固定的目的有三 : 1 防止细胞从玻片上脱落 ; 2 除去防碍抗原 - 抗体结合的类脂 ; 3 使标本易于保存 标本的固定原则是 : 1 不能损伤细胞内的抗原 ; 2 不能凝集蛋白质 ; 3 应保持细胞和亚细胞结构 ; 4 固定后应保持通透性, 以保证抗体自由进入所有细胞与亚细胞组分与抗原结合 常用的固定剂有多种, 应根据所研究抗原的性质和所使用的抗体特性选择适当的固定剂 通常固定方法可以分为两类 : 有机溶剂和交联剂 有机溶剂 如甲醇和丙酮等可去除类脂并使细胞脱水, 同时将细胞结构蛋白沉淀 交联剂如多聚甲醛通常通过自由氨基酸基团形成分子间桥连, 从而产生一种抗原相互 连接的网络结构 交联剂比有机溶剂更易于保持细胞的结构, 但因为交联阻碍抗体结合, 可能会降低一些细胞组分的抗原性, 因此需要增加一个通透步骤以 使抗体能够进入标本 两种固定方法都可能使蛋白抗原变性, 因此使用变性蛋白作为抗原生产的抗体在免疫荧光中可能更为有效 最常用的固定剂有多聚甲醛和甲醇, 少数情况也使用乙醇, 丙酮及戊二醛等进行固定 通常, 细胞结构抗原 病毒及一些酶类抗原使用丙酮 乙醇及 高浓度的甲醛固定可获得较好的结果, 而细胞膜相关组分抗原一般以多聚甲醛固定 细胞器和细胞颗粒内的抗原一般也用多聚甲醛固定, 并需要进行通透以 使抗体能达到抗原表位
3 通透步骤只在检测细胞内抗原表位的时候才需要, 因为抗体需要进入细胞内部去检测蛋白 但是, 如果待检测的是跨膜蛋白, 且其抗原表位处于胞质 内区域, 则同样需要对细胞进行通透 相反, 如果所检测的抗原表位位于膜蛋白的胞外段, 则不需要进行通透 丙酮本身具有通透作用, 因此用丙酮作为固 定剂时是不需要通透的 甲醇同样具有通透作用, 但有些场合并不适合用甲醇, 因为一些表位对甲醇非常敏感 常用的通透剂是去垢剂, 如 Triton,NP-40, 以及 Tween 20, Saponin, Digitonin 和 Leucoperm 等 Triton 和 NP-40 属于烈性去垢剂, 可部分溶解细胞核膜, 因此非常适合核抗原检测 但应该注意的 是, 如果在高浓度下使用或者作用时间过长, 它们将破坏蛋白, 从而影响实验结果 Triton X-100 是最常用的通透剂, 但是它将破坏细胞膜, 因此不适用于 细胞膜相关抗原 后面一组去垢剂要温和得多, 它们可以在细胞质膜上形成足够大的孔隙以允许抗体通过, 但是不会溶解细胞质膜 适于胞质抗原或者质膜 上靠近胞质一面的抗原, 也适于可溶性的核抗原 一般的操作程序是先固定后通透, 但针对有些水不溶性的目的抗原的检测宜先通透再固定, 这样做的原因主要是可以通过通透去除许多水溶性的蛋白, 从而大大减少了免疫荧光的背景和非特异性信号 固定后以冷 PBS 液漂洗, 最后以蒸馏水冲洗, 防止自发性荧光 ( 三 ) 封闭 封闭的目的是为了减少抗体的非特异性结合, 最常用的封闭剂为 1% BSA, PBS ph 7.5, 其他可选择的封闭剂还有 1% gelatin, 1%bovine 或与二抗 种属相同的血清 (3-10%) 等 ( 四 ) 抗体孵育 直接免疫荧光法中的一抗和间接免疫荧光法中的二抗都是荧光抗体, 因此在这些抗体孵育的时候必须注意避光 此外, 为保证结合质量和防止干燥, 抗体孵育应尽量在湿盒中进行 ( 五 ) 封片及荧光观察 标记好荧光的细胞片原则上可以直接进行观察, 特别是有时候封片不当反而使得前功尽弃 但在绝大多数情况下, 为了保存结果, 以便进一步观察 照像 统计分析等, 需作封片处理 常规的方法是采用甘油或中性树脂封片, 为了增强封片的效果, 往往需要在封片时添加特殊的抗荧光淬灭剂 ( 六 ) 标本保存 由于荧光色素和蛋白质分子的稳定性都是相对的, 因此随着保存时间的延长, 在各种条件影响下, 标记蛋白可能变性解离, 失去其应有的亮度和特异 性 因此给标本的保存带来一定的困难, 所以在标本进行荧光染色之后应立即观察 由于性能良好的抗荧光淬灭剂的出现, 荧光标记的标本可以在低温 (4 或 -20 ) 下保存相当长的时间 在某些情形下, 考虑到实验的成本及实验条件, 也可以采取权宜的办法, 比如固定标本片后低温保存, 在需要时再进行荧 光标记, 即随用随染 免疫细胞 ( 组织 ) 化学实验中如何选择固定剂?
4 固定剂主要有两类 : 一类是有机溶剂, 如甲醇 乙醇 丙酮等 它们通过强烈脱水变性蛋白, 同时它们也能够溶解脂类物质, 因此产生通 透效应 另一类为交联剂, 如甲醛 多聚甲醛 戊二醛等, 它们导致细胞内分子相互连接成网状结构, 从而维持在原位上 这两类固定剂各有优 缺点, 交联剂比有机溶剂更易于保持细胞的结构, 但交联可能会破坏一些细胞组分的抗原性 同时交联剂固定的细胞需要通透处理, 才能让抗体 穿越膜结构与胞内抗原结合 醇类固定的优势在于蛋白变性完全, 对抗原的保存性好, 能充分暴露出抗原 醇类固定的细胞不需要再通透 在免疫细胞 ( 组织 ) 化学实验中选择哪种固定方法, 先要考虑所检测抗原在细胞中的定位, 通常膜组分的蛋白需要用多聚甲醛固定 其他蛋 白往往凭经验选择固定剂, 可以试用两种方法, 然后选择较好的一种 免疫荧光, 免疫细胞化学和免疫组织化学实验如何设置对照? 设立对照的目的在于证明和肯定阳性结果的特异性, 排除非特异性疑问, 同时对照的设立也有助于判断实验中出现的问题 (1) 阴性对照 阴性对照可以了解背景荧光和非特异性染色, 当待检标本呈阳性结果时, 阴性对照就更加重要, 用以排除假阳性 较理想的阴性对照 检测遗传背景相同但仅仅不表达所研究抗原的细胞, 例如把某个蛋白已敲除的细胞或动物组织样品 但这样的标本不一定存在或很难找到, 常见 的阴性对照也可以是针对一抗的 PBS 对照或来自同一种属动物的血清对照 (2) 阳性对照 用已知抗原阳性的切片与待检标本同时进行免疫细胞化学染色, 这种阳性对照可验证 Protocol, 排除实验过程中出现的差错 另一种阳性对照可 以是在细胞内过表达所研究的抗原 同时也可以在这个抗原上接上商业化的表达标签, 如 Flag, Myc, His tag 等 什么是免疫荧光双标记, 怎么进行荧光双标实验? 免疫荧光双标记 (Double Immunofluorescence) 是用两种不同荧光染料标记的抗体同时检测两种抗原 标记这两种抗体的荧光素具有不 同的颜色 ( 激发和发射波长不同 ), 通过荧光显微镜可以在同一细胞上分别观察到两种抗原, 并可通过图像处理软件将它们同时呈现在一张图片 上 由于在同一个样本使用两种染料, 为此就要求每一种检测试剂仅能识别一种抗原 主要有两种方法能够达到这一目的 最确定的方法就是 直接标记一抗, 如其中一种标记 FITC, 另一种标记 Texas 红, 一般会有满意的结果 第二种方法是应用两套种属特异性的检测试剂 在进行这类 进行荧光双标前, 最好先验证单标对特定组织或细胞是有效的 在操作上与单标方法并无不同, 但两种一抗必须来源于不同种属的动物, 且两种 二抗不能存在交叉反应 应该选择什么样的抗体进行免疫荧光及免疫细胞 ( 组织 ) 化学实验? 如果使用商业化的抗体, 在使用之前要仔细阅读公司关于抗体的说明, 该抗体是否能用来做免疫荧光或免疫细胞 ( 组织 ) 化学实验 对于 自己生产的抗体, 在生产抗体时选用的免疫原对获得高质量的试验结果非常重要
5 其次, 就是单抗和多抗的选择问题 这方面基本上遵循着通用的原则, 多抗的优点是来源动物种属多, 亲和力高, 反应性广, 可以识别抗 原的多种亚型, 缺点是特异性相对较差, 有时容易带来假阳性结果, 且抗体质量存在批次差异 ; 单抗的最大优点是特异性好, 质量稳定, 但缺点 是动物来源受限 ( 绝大多数是小鼠 ), 灵敏度较低, 而且价格较高 单抗对固定的容忍度不如多抗, 因为它们识别的位点比较单一, 更容易受到 破坏 免疫荧光实验中用于标记抗体的荧光素有哪些, 在选择上有什么考虑? 以下列举几种常用的荧光素, 更多的荧光素可以从相关网站上找到 : 1. FITC(Fluorescein) Excitation 495nm,Emission 525nm, 黄绿色荧光 ; 2. Rhodamine (TRITC) Excitation 552nm,Emission 570nm, 橙红色荧光 ; 3. R-Phycoerythrin (PE) Excitation 488nm,Emission 578nm, 橙红色荧光 ; 4. Texas Red Excitation 596nm,Emission 620nm, 红色荧光 选择荧光素主要考虑以下几点 : 1 高消光系数 (extinction coefficient) 和光子产量 (Quantum yield), 这意味着光捕获能力强和效率高 ; 2 光稳定性较好 ; 3 与常见光源和滤光器匹配性较好 ; 4 不干扰抗体反映 ; 5 水溶性以及 ph 稳定性 此外, 还需要考虑到是否有毒性以及荧光素的颜色是否与背景颜色反差大对比鲜明等 免疫酶标细胞 ( 组织 ) 化学中有哪些显色液, 它们的各自特性是什么? 免疫酶标细胞化学中, 由于抗原 - 抗体反应所形成的复合物本身无色, 无法直接观察, 因而需借助于某些化学基团的呈色作用, 使其得以显 示, 以利于在显微镜下观察 常用的显色液有 : 1.DAB(Diaminobenzidine;3,3- 二氨基苯联胺 ) 显色液 DAB 显色液主要用于免疫过氧化物酶法 ( 如酶标法 PAP 法等 ), 是广泛应用的电子供体之一, 较敏感, 切片可脱水透明, 半永久保存, 且其终产物具嗜饿性, 既可直接在光镜下观察, 也可经 OsO4 处理后, 增加反应产物的电子密度, 适于电镜下确定抗原存在的部位 但有几点需 注意 :DAB 溶解要完全, 否则未溶解的颗粒沉积于标本上影响观察 ;DAB 浓度不易过高, 否则显色液呈棕色, 增加背景染色, 另外 DAB 有致癌 作用, 应尽量减少吸入和接触次数, 最好将 DAB 制成 10 倍贮存液, 分装于 -20 保存, 应用时稀释 过滤 操作时应戴手套, 尽量避免与皮肤接 触, 用后及时彻底冲洗, 接触 DAB 的实验用品最好经洗液浸泡 24h 后使用 2.CN(4-Cl-1-Naphthol,4- 氯 -1- 萘酚 ) 显色液 4-Cl-1- 萘酚的终产物显示蓝色 由于酒精可溶解 4-Cl-1- 萘酚显色的组织标本, 勿用酒精脱水 与 DAB 比较,CN 敏感性略差, 但因其终 产物较局限, 很少弥散, 光镜观察较为适合
6 3.AEC(3-amino-9-ethyl-carbozole, 3- 氨基 -9- 乙基卡唑 ) 显色液 该显色液作用后, 阳性部分呈深红色, 加以苏木精或亮绿等作为背景染色, 则效果更佳 由于终产物溶于酒精和水, 故需用甘油封固 AEC 染色后的颜色比 DAB 好看, 但是灵敏度比 DAB 低, 而且保存时间短, 易褪色 4.TMB 显色液 TMB 即四甲基联苯胺 (Tetrabenzidine) 是一种脂溶性较强的基团, 因此容易进入细胞与细胞器中的 HRP 反应, 且由于这种高度的脂溶 性, 使其易形成多聚体, 在 HRP 活性部位产生粗大的 深蓝色沉淀物, 这使得 TMB 成为组化实验中的一种很好的发色团 同时反应产物的沉淀, 使得 HRP 的活性部位更加暴露, 利于酶氧化反应进行 TMB 的反应产物为深蓝色, 利于光镜观察, 且反应产物越聚越大, 常超出单个细胞器的 范围 ( 而 DAB 则被限制在其内 ), 故 TMB 反应的检测阈较低 由于上述优点, 目前 TMB 常用于光镜及超微结构水平的 HRP 及 HRP-WGA 神经 投射的研究 需要注意的是 :TMB 显色液中的 A 液和 B 液应在 2h 内新鲜配制 另外,TMB 是一种较强的皮肤刺激剂, 并有致癌的潜在可能, 故 使用时应带手套及在通风条件下操作 5.BCIP/NBT 显色液 是碱性磷酸酶的显色底物 BCIP 即 5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 - 磷酸盐 (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-phosphate) NBT 即四唑氮蓝 (Nitro-Blue-Tetrazolium),MW=818, 为深蓝色无定形微溶物质 当二者存在时, 在碱性磷酸酶 (Alkaline phosphatase, AP) 作用下,NBT 被还 原形成显微镜下可见的蓝色或紫色沉淀 有没有办法增强 IF/ICC/IHC 中的特异性染色, 减少非特异性染色? 为了获得高质量的结果, 在免疫染色中应特别注意增强特异性染色, 减少或消除非特异性染色 在各种免疫染色中都必须注意以下几个问 题 : 1. 增强特异性染色的方法 (1) 蛋白酶消化法 : 其作用是暴露抗原, 增加细胞和组织的通透性, 以便抗体与抗原最大限度的结合, 增强特异性染色和避免非特异性染色 这种方法已广泛用于各种免疫细胞化学染色, 常用的蛋白酶有胰蛋白酶 胃蛋白酶以及链霉蛋白酶 (pronase) 等, 也可用 3mol/L 尿素处理 切片, 达到酶消化的目的 酶消化的时间和温度因各种抗原对消化的敏感性不同, 应根据酶的活性通过预试验确定, 消化的时间还与组织固定 的时间有关, 一般是陈旧固定组织所需时间长, 以 37 为宜, 消化时间短的组织可在室温中进行 消化处理时间过长能损伤组织, 易使切片 脱落, 应使用切片粘附剂, 消化时间尽量缩短 (2) 合适的抗体稀释度 : 抗体的浓度是免疫染色的关键, 如果抗体浓度过高, 抗体分子远远多于抗原决定簇, 可导致抗体结合减少, 产生阴 性结果 此阴性结果并不一定缺少抗原, 而是由于抗体过量 这种现象类似于凝集反应中的前带效应 (Prozone effect) 因此, 必须使用一 系列稀释或作 棋盘式效价滴定 检测抗体的合适稀释度, 以得到最大强度的特异性染色和最弱的背景染色 抗体稀释度应根据 : 1 抗体效价, 溶液中特异性抗体浓度越高, 工作稀释度越高 ; 2 一般讲, 应用的抗体稀释度越大, 温育时间越长 ;
7 3 抗体中非特异性蛋白含量, 只有高稀释度时才能防止非特异性背景染色 ; 4 稀释用缓冲液的种类 标本的固定和处理过程等也可影响稀释度 所以合适的稀释度应根据自己的情况测定 抗体的稀释主要是指第 一抗体, 因为第一抗体中特异性抗体合适的尝试是关键, 应用高稀释度第一抗体仅显示主亲和力的特异性染色反应, 可减少或消除 其中交叉抗体反应 (3) 温育时间 : 大部分抗体温育时间为 30-60min, 必要时可 4 过夜 ( 约 18h) 温育的温度常用 37, 也可在室温中进行, 对抗原抗体 反应强的以室温为佳 37 可增强抗原抗体反应, 适用于多数抗体染色, 但应注意在湿盒中进行, 防止切片干燥而导致失败 (4) 多层染色法 : 对弱的抗原可用间接法 ( 双层 ) PAP 和 ABC 法 ( 三层 ) 四或五层 PAP 法或 ABC 法, 或 PAP 和 ABC 联合染色法等, 可以很大程度的提高敏感性, 获得良好结果 (5) 显色增敏剂的应用, 如在过氧化物酶底物中加入氯化镍, 可提高显色敏感度 4 倍 2. 减少或消除非特异性染色的方法 组织中非抗原抗体反应出现的阳性染色称为非特异性背景染色, 最常见的原因是蛋白吸附于高电荷的胶原和结缔组织成分上 最有效方法 是在用第一抗体前加制备第二抗体动物之非免疫血清 (1:5-1:20) 封闭组织上带电荷基团而除去与第一抗体非特异性结合 必要时可加入 2%-5% 牛血清白蛋白, 可进一步减少非特异性染色 作用时间为 10-20min 也可用除制备第一抗体以外的其它动物血清 ( 非免疫的 ) 有明显溶血的血 清不能用, 以免产生非特异性染色 免疫荧光染色时, 可用 0.01% 伊文氏兰 (PBS 溶液 ) 稀释荧光抗体, 对消除背景的非特异性荧光染色有很好 的效果 当然使用特异性高 效价高的第一抗体是最重要的条件 洗涤用的缓冲液中加入 0.85%~1%NaCl 成为高盐溶液, 充分洗涤切片, 能有效 的减少非特异性结合而减少背景染色 如何判断免疫细胞 ( 组织 ) 化学实验的结果? 对免疫细胞化学结果的判断应持科学的慎重态度, 要准确判断阳性和阴性, 排除假阳性和假阴性结果, 必须严格对照实验 染色结果呈阴 性并非都是抗原不表达, 要考虑是否与组织中的抗原受到破坏有关 ; 对新发现的阳性结果, 除有对照试验结果之外, 应进行多次重复实验, 要求 用几种方法进行验证, 如用 PAP 法阳性, 可再用 ABC 法验证 必须学会判断特异性染色和非特异性染色, 对初学者更为重要, 否则会得出不科学的结论 特异性染色与非特异性染色的鉴别点主要在于 特异性反应产物常分布于特定的部位, 如胞浆内, 也有分布在细胞核和细胞表面的, 即具有结构性 特异性染色表现为在同一切片上呈现不同程 度的阳性染色结果 非特异性染色表现为无一定的分布规律, 常为某一部位成片的均匀着色, 细胞和周围的结缔组织均无区别的着色, 或结缔组 织呈现很强的染色 非特异性染色常出现在干燥切片的边缘, 有刀痕或组织折叠的部位 在过大的组织块, 中心固定不良也会导致非特异性染色 有时可见非特异性染色和特异性染色同时存在, 由于过强的非特异性染色背景不但影响对特异性染色结果的观察和记录, 而且令人对其特异性结 果产生怀疑 阳性细胞具有如下的染色特征 :(1) 阳性结果应定位在细胞中相应的部位, 比如在细胞膜表达的抗原阳性结果应定位在细胞膜上, 在其 他部位的阳性反应均为非特异性染色 不当的抗原修复会导致抗原在组织细胞中定位的改变 根据所检测抗原的不同, 抗原分别定位在 :1 细胞
8 膜, 如 LCA 和 UCHL1 等 ;2 细胞质, 如 Keratin 和 Lysozyme 等 ;3 细胞核, 如 PCNA 和 ER 等 大部分抗原定位于细胞质 ( 胞浆 ), 可见于 整个胞浆或部分胞浆 (2) 阳性细胞分布可分为烟性和弥漫性 (3) 由于细胞内含抗原量的不同, 所以染色强度不一 如果细胞之间染色强度 相同, 常提示其反应为非特异性 (4) 阳性细胞染色定位于细胞, 且与阴性细胞相互交杂分布 ; 而非特异性染色常不限于单个细胞, 而是累及一 片细胞 (5) 切片边缘 刀痕或皱折区域, 坏死或挤压的细胞区, 胶原结缔组织等, 常表现为相同的阳性染色强度, 但绝大多数是非特异性染色, 不能用于判断阳性 Troubleshooting the IF, ICC/ IHC 免疫荧光 问题可能的原因解决方法 目标蛋白在细胞中没有表达 制备细胞裂解液, 用 Western Blotting 验证目标蛋白在细胞中有表达 表达目标蛋白的细胞过少 标本中使用更多的细胞, 试用其他瞬时转染方法, 或者使用稳定转染 细胞系 细胞通透性差 增加通透剂作用的时间或者浓度, 或改用其他的通透剂 信号弱或无信号, 染色细胞 过少 染色前的固定步骤破坏了抗原表位 通透使抗原丢失 改用其他固定方法 减少通透剂作用的时间或强度 抗体不识别 换用其他抗体 一抗稀释度过大 同一样品按最佳的二抗用量作一抗稀释曲线, 以确定最佳的一抗稀释 比例 二抗选择错误 使用正确的二抗 一抗质量不高 使用特异性高, 效价高的一抗 一抗浓度太高 同一样品按最佳的二抗用量作一抗稀释曲线, 以确定最佳的一抗稀释 比例 背景过高 二抗浓度太高 同一样品按最佳的一抗用量作二抗稀释曲线, 以确定最佳的二抗稀释 比例 封闭不完全 使用二抗来源动物的非免疫血清进行封闭 ; 改善封闭条件 封闭液 BSA 中含 IgG 使用高纯度 (IgG free) 的 BSA 洗涤不充分 充分洗涤 细胞片被风干 在任何时候都不要让细胞片干燥 ; 使用湿盒 细胞呈扁平状或像撞击坑 使用了甲醇固定 甲醇可破坏细胞膜, 因此不能很好保持细胞形态 改用甲醛或戊二醛 等其他固定剂
9 细胞有自发荧光 使用了戊二醛固定 材料本身 ( 如石蜡 ) 有自发荧光 在固定后荧光染色前进行荧光淬灭, 如使用 NaIO 4,NaBH 4, 甘氨酸 等, 染色前检查自发荧光 细胞模糊, 封片剂明亮 因洗涤不充分导致背景太亮 二抗结合太弱 充分洗涤 确保抗体牢固结合, 确保固定良好 整个细胞片都出现荧光亮点 二抗浓度过高 二抗发生沉淀 降低二抗浓度 过滤或离心荧光标记二抗 免疫细胞 ( 组织 ) 化学 问题可能原因解决方法 染色弱或者没有染 色 组织不表达待测抗原或者表达水平太低 切片时选错蜡块和选错切片 参照阳性对照片确定为真阴性结果 用 HE 染色验证 漏加试剂或者试剂使用顺序错误 重复实验, 确保每一步均正确 试剂孵育时间不充分 确保试剂孵育了足够的时间 抗体不正确, 或检测系统和一抗不匹配 选择正确的一抗和匹配的二抗 底物和酶不匹配 选用匹配的底物 抗体浓度太低 通过抗体稀释曲线决定最佳浓度 色原 / 底物溶液失效 将一滴标记有酶的抗体加入到制备好的底物溶液中, 如果底物发生预期的颜色变 化, 则可排除底物的因素 否则需更换新的酶标抗体或底物 抗体储存不当, 导致失效 根据抗体说明书进行适当的保存 一抗失效 ( 过了有效期 ) 换用新的一抗 二抗失效换用新的抗体 ( 能否成功与其它一抗配合?) 冲洗液和反应试剂不匹配 检查溶液的 ph 值很重要, 与过氧化物酶底物匹配的溶液中不应含有叠氮钠 脱石腊不充分 延长脱腊时间或者换用新的二甲苯 组织固定不充分或者不当 ( 如温度过高 ) 增加固定时间或者改用不同的固定方法 组织固定过度 减少固定时间或 4 固定 若已固定过度, 则需使用正确的或者推荐的抗原修复
10 方法 抗原修复方式不当 采用合适的抗原修复方式 细胞内抗原未使用穿孔剂 洗液中加入 0.05%Triton-100, 有助于抗体渗透入细胞内, 也可降解内源性 Fc 受体 复染剂 脱水 透明和封片剂和所使用的色原不匹 配 选择正确的试剂 ( 荧光素染色封片要选用水溶性封片剂, 藻胆素蛋白染剂不能用 含甘油的封片剂 AEC, AP Red/Fast Red, INF 和其它水溶性染料不能用二甲苯 有机溶剂透明 ) 清洗不充分 选择适当的清洗液, 严格按操作步骤进行 组织含有内源性的酶, 如 HRP/AP 在加入一抗之前使用新鲜配制的 3% 的 H 2 O 2 - 甲醇封闭内源性 HRP 活性, 使用左 旋咪唑 (levamisole) 溶液阻断内源性 AP 活性 或者换用葡萄糖氧化酶系统 组织含有内源性生物素 ( 尤其肾脏 肝和脾 ) 在加入一抗之前, 血清封闭之后使用 avidin/biotin 阻断试剂 或者避免使用 biotin-avidin 系统或改用 IF 方法 染色背景高 一抗的非特异性结合或者抗体浓度过高 增加一抗的稀释度, 或选用特异性更好, 纯度和效价更高的抗体 二抗和组织非特异性结合 使用与二抗动物的正常血清 ( 一般是 3-10%) 封闭, 必要时可以将血清浓度加大 ; 或者用其它无关蛋白, 如牛血清白蛋白或 5% 脱脂奶粉替代血清进行抗原封闭 组织抗原弥散 染色结构不清, 主要见于冰冻切片固定不及时造成 切片后应立即固定 使用小鼠来源的二抗检测小鼠组织 在加一抗之前使用 MouseOnMouse 封闭试剂 切片干透 保持在高湿环境中, 避免干透 一抗或者二抗浓度过高 降低抗体浓度, 通过抗体稀释曲线确定最佳浓度 孵育时间过长 减少孵育时间 染色过度 孵育温度太高 降低孵育温度, 在 4 过夜或者 小时或者室温 底物孵育时间过长 减少孵育时间 干片 染色过程中避免出现干片现象
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一 H-E 技 术 操 作 规 范 1. 及 时 固 定 组 织 : 免 疫 组 化 的 病 理 制 片 技 术 的 规 范 应 采 用 10%~20% 甲 醛 液 (10% 甲 醛 液 即 用 浓 甲 醛 液 1 份 加 蒸 馏 水 9 份 稀 释 ) 固 定 组 织, 因 甲 醛 易 氧 化 成 甲 酸, 因 此 多 会 偏 酸 性, 最 理 想 的 是 配 成 中 性 甲 醛 液 巨 大 组
大 学 化 学 第 卷 第 期 年 月 微 囊化技 术 在 生 物 医 学 中的 应 用 俞 耀 庭 陈 长 治 南 开 大学分 子 生物研 究 所 本 文 概 述 了微囊 固 定化技术基 本 应 用 原 理 摘要 的生 物 血液 相溶性 及 通透 性能 胞 在治 疗 肾 衰 肝 衰 及 清除 人体 内 中毒药物 般 性介 绍 微 囊 人 工 细 胞 的 一 般制 备方 法 各种 膜 材 料 对 人
第 期 甘金华等 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 材料与方法 试剂及溶液
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 甘金华 邓薇 李进平 艾晓辉 中国水产科学研究院长江水产研究所 湖北荆州 武汉纺织大学环境与城建学院 湖北武汉 采用改进的碳二亚胺两步法将强力霉素半抗原与载体蛋白 连接制备强力霉素 牛血清白蛋白 人工免疫抗原 并用同样方法将强力霉素与载体蛋白 连接制备人强力霉素 卵清白蛋白 人工包被抗原 经紫外扫描分析和动物免疫试验证实 强力霉素人工抗原合成成功
生命科学研究 房 蓓 武泰存 王景安 以玉米沈单 号为材料 用溶液培养的方法研究了缺锌 低锌和正常供锌对玉米生长发育的影响 进一步明确了一定量低锌比缺锌对玉米的伤害更大 并对其 同工酶谱及蛋白质表达进行了分析 结果表明 一定浓度的低锌培养使玉米生长受抑及受害最重 且地上部分比地下部分更敏感 低锌和缺锌处理时 种同工酶的酶谱和蛋白表达与正常供锌时均有明显的差异 尤其在一定量低锌浓度时 有些同工酶的表达增强或被特异性诱导
第六章 按摩与保健 ２０５ 图 ６唱 １７ 常用穴位示意图 三 选穴原则 穴位按摩是针对穴位进行点 按 揉 推等多种手法的刺激 引起局部出现 酸 麻 胀 痛或温热感觉 一般每天按摩 １ ２ 次 每次可选用 ３ ６ 个 对 穴 位交替进行按摩 同时 穴位的选择应根据人体的体质和病情 从全身的穴位中 选出一些对某种病症有效的穴位 也称配穴 才能达到应有的治疗效果 一 一般规律 虽然全身的穴位很多 每个穴位的主治功能又有不同
方 展 强 等 罗 非 鱼 脑垂 体结 构 研 究 期 结 腺 垂体 前 叶 的 超 微 结构 果 脑 垂 体 的般 结 构 性成熟 的 尼 罗 非 卿 脑 垂 体 呈 鸡 心 形 实 心 腺 体 图 版 和 腺 垂体 两 部分 构 成 和 脑垂体 细胞 维 叶 形 成 树 根 状 结构 分布 到
方 展 强 等 罗 非 鱼 脑垂 体结 构 研 究 期 结 腺 垂体 前 叶 的 超 微 结构 果 脑 垂 体 的般 结 构 性成熟 的 尼 罗 非 卿 脑 垂 体 呈 鸡 心 形 实 心 腺 体 图 版 和 腺 垂体 两 部分 构 成 和 脑垂体 细胞 维 叶 形 成 树 根 状 结构 分布 到 腺 垂 体各 腺 垂 体 由前 叶 由神 经 垂 体 神经 垂 体 由 不 同 类 型 的神 经 分
工程项目进度管理 西北工业大学管理学院 黄柯鑫博士 甘特图 A B C D E F G 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 甘特图的优点 : 直观明了 ( 图形化概要 ); 简单易懂 ( 易于理解 ); 应用广泛 ( 技术通用 ) 甘特图的缺点 : 不能清晰表示活动间的逻辑关系 WBS 责任分配矩阵 ( 负责〇审批
煤 炭 学 报 仪器与药品 黏土矿物的提纯 黏土样品的制备 红外光谱 分析 射线衍射 分析 射线光电子能谱 分析
张明青 刘炯天 单爱琴 刘汉湖 为了深刻认识煤泥水中 同黏土矿物颗粒之间的相互作用 笔者用 溶液在不同 值条件下分别同高岭土和蒙脱土作用 测定黏土作用前后的 射线衍射 红外光谱和 射线光电子能谱 实验证实了在 溶液中 在黏土表面以静电形式吸附 在 溶液中 以 沉淀和静电形式吸附 此外 在 以上的溶液中还可能存在一 羟基络合吸附形式 提出了 沉淀吸附和一羟基络合吸附的吸附过程模式 黏土颗粒表面的 沉淀使颗粒间形成的非选择性
免疫组化的定义和分类 1 定义 用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性 定位或定 量研究的技术称为免疫组织化学 (IHC) 或者免疫细胞化学 (ICC) 免疫组化具有特异性强 灵敏度高 定位准确等 特点 2 分类 1) 按标记物质的种类, 如荧光染料
免疫组化 (Immunohistochemistry) 实验指南 免疫组化的定义和分类 几种常见免疫组化方法简介 免疫组化的实验步骤剖析 酶免疫组化主要步骤剖析 免疫荧光方法中主要步骤剖析 免疫组化常见问题解答 1 免疫组化的定义和分类 1 定义 用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性 定位或定 量研究的技术称为免疫组织化学 (IHC) 或者免疫细胞化学
赵世嘏 高乃云 楚文海 微曝气工艺是在常规 基础上发展起来的 试验表明在紫外光强 投加量为 三氯乙酸 初始浓度约为 的情况下 后该工艺对 的去除达到 以上 工艺效果受 光强 投加量 初 始浓度和 的影响 其他条件一定时 随着 光强和 投加量的增大 去除率增加 然而 投加量超过 后 去除效果增加缓慢 对不同初始浓度 时去除率最 高 而后浓度增加 去除率下降 中性或弱酸性 条件下更有利于降解 消毒副产物
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实现政治问责的三条道路 马 骏 建立一个对人民负责的政府是现代国家治理的核心问题 实现这一目标 需要解决两个最基本的问题 谁来使用权力 如何使用权力 选举制度是解决前一问题相对较好的制度 而预算制度是解决第二个问题最好的制度 通过历史比较分析 可以总结出三条实现政治问责的道路 世纪的欧洲道路 从建国到进步时代改革的美国道路以及雏形初现的中国道路 这意味着 西方经验并不是唯一的实现政治问责的道路 相对于西方经验来说
福建农业学报 材料与方法 试验菌株 引物 主要仪器 主要试剂 细菌培养 模板的制备 反应条件 扩增产物的检测 特异性试验 敏感性试验 分离菌株检测 产物的克隆及序列测定 结果与分析
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wh2008 版主 免疫组化经历介绍 我是 2006.08 进入丁香园论坛, 当时主要是查找文献来的 ( 从低分区 - 高分区 - 骨干战友求助区, 我查到了很多自己急需的文献 ) 后来经过一段时间的浏览和学习, 发现丁香园论坛还是一个以实验技术交流为主的地方, 正好在本课题组建立免疫组化试验方法, 于是在论坛内学习 请教, 并结合实践操作, 我经历了初级 查找资料和摸索方法 ; 中级 问题求助和不断总结
食 品 与 生 物 技 术 学 报 第 卷 列入我国 的植物多酚黄酮抗氧剂 防治高血脂和心血管疾病
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 植物多酚黄酮抗氧化剂与人体健康 尤新 中国食品添加剂和配料生产应用工业协会 北京 主要综述了对植物多酚黄酮类物质的生物活性和安全性 其内容包括 茶多酚 甘草黄酮 竹叶黄酮 大豆异黄酮以及从各种鲜果提取物的功能成分 如葡萄提取物 杨梅提取物 橄榄提取 物 乌饭树果提取物等 介绍了植物多酚黄酮的国际市场信息及相关的研究机构和生产单位 多酚 黄酮 健康 食 品 与
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陈鹭真 王文卿 林 鹏 模拟正规半日潮淹水的条件下 不同淹水时间对秋茄 幼苗生长的影响 应用沙和土两种培养基质 制备盐度为 的人工海水栽培幼苗培养时间为 不淹水 和长时间淹水 对秋茄幼苗的生长有一定的抑制作用 而短时间淹水 淹水 对 幼苗生长有所促进 较长时间的淹水可促进贮气根的数量增加和长度的增长 在当前培养条件下 秋茄幼苗生长的最佳淹水时间是每个潮水循环淹水 处理的沙培秋茄幼苗总生物量和成熟叶面积最大
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张海峰 姚先国 张俊森 借鉴 的有效教育概念 本文利用 年间的中国省级面板数据估计了平均教育年限 教育数量 和平均师生比率 教育质量 对地区 劳动生产率的影响 本文的实证分析结果表明 以师生比率衡量的教育质量对劳动生产 率有显著且稳健的正效应 在均值处师生比率每上升一个标准差 有助于提高地区劳动生产率约 教育数量对劳动生产率的影响大小部分取决于教育质量的高低 教育质量越高教育数量对劳动生产率的促进效应越大
李俊新 崔 敏 刘艳春 姚艳君 周广芬 孙 宝 河北科技大学理学院 河北石家庄 滦南县职业教育中心基础部 河北滦南 在物理化学实验的基础上 对一级反应的 种不同数据处理模型进行比较和分析 通过对 实验数据处理模型进行系统的比较 来改善传统实验数据处理中存在的一些问题 从而简化数据处 理 减小作图工作量与作图误差 提升实验水平 提高数据处理结果的准确性 一级反应 数据处理模型 过氧化氢 图 过氧化氢分解实验装置图
(Microsoft Word - \316\304\265\265 1)
酶联免疫吸附试验 (enzyme linked immunosorbent assay,elisa) 的基本原理 方法类型及反应原理 试剂制备试剂制备和临床意义 酶免疫技术是三大经典标记免疫技术之一, 是以酶标记抗体或抗原为主要试剂的一种标记免疫分析技术 随着相关新技术的不断问世, 如杂交瘤单克隆抗体技术 ( 使各种对抗原决定簇高度特异的单克隆抗体可以在体外批量生产 ) 生物素- 亲和素放大系统的应用以及与化学发光和电化学发光技术的偶联等,
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骨 有 明 訊 肌 動 蛋 白 絲 與 細 胞 形 態 關 係 之 研 究 科 別 : 生 物 科 第 48 屆 科 學 展 覽 北 二 區 佳 作 作 者 : 呂 苹 瑋 范 競 勻 指 導 老 師 : 陳 季 瑄 老 師 壹 摘 要 本 研 究 以 人 類 的 子 宮 頸 癌 細 胞 (HeLa cell) 為 細 胞 骨 架 的 觀 察 對 象, 經 過 培 養 與 繼 代, 利 用 免 疫
第 林浩 然 等 期 多 巴 胺 拮抗 物 诱 导 排 卵 效 应 的 研究 增强 材 料 和 方 法 士 选 腹 部 圆 而 松 软 的 雌鱼 体长 来 自 本 系 实 验 鱼场 周 左右 的 驯 养 合 饵料 部 分购 于 附 近 农 贸 市 场 试 验 在 泥 鳅 的 繁 殖季 节 克 士 试
第 卷 第 水 生 生 物 学 报 期 月 年 毛 多 巴 胺拮 抗 物 增 强 丘 脑下部 促 黄 体 素释 放 激 素 类似 物 诱 导大 鳞 副 泥 鳅 排卵 效 应 的 研 究 林浩然 彭 纯 林鸿平 中山 大 学 生 物 系 提 在注 射低 剂 量 导 的 排卵 效应 的 的 同 时注 射 多 巴 胺 拮抗 物 能促 进 脑 垂 体 释 放活 动 细 胞 的 合 成和 分 泌 而注 射 多
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Zebra 技术白皮书 零售业中的可跟踪性 降低 介质成本, 实现最佳价值 概要 简介 我想要的商品在哪里呢? 物品级标签带来了巨大优势 全面的库存管理 100% 2 Zebra (EAS)/ 实际结果 2009 1 27% 21% 53 2 209 提升顾客体验, 提高销售业绩 3 150 100 RF 1. : Bloomingdale 2009 2. 3. ABI Research 2009
境 环 滤 废渣粒 度小 孔 隙率 大 吸 水性 强 化 学 卷 弓 对 液 相 重 金 属 离 子 有 相 当 强 的 吸持 能 力 因 此 试验反 映的往 往是废 渣 中释放 出来 的重 金 属在 固液两 相 重 新分 配 达 到平 衡 后 的情 况 难 于 客 观 反 映废 渣 金 属 的 释
!! # 境 环 滤 废渣粒 度小 孔 隙率 大 吸 水性 强 化 学 卷 弓 对 液 相 重 金 属 离 子 有 相 当 强 的 吸持 能 力 因 此 试验反 映的往 往是废 渣 中释放 出来 的重 金 属在 固液两 相 重 新分 配 达 到平 衡 后 的情 况 难 于 客 观 反 映废 渣 金 属 的 释 放 规 律 的淋 滤 作 用 本 方 法 采 用 动 态 的模 式 管装 废 渣 摊 以不同
中 草 药
中 草 药 致 谢 李 沛 赵 继 敏 郑 智 敏 江 亚 楠 等 病 理 生 理 学 教 研 室 老 师 在 实 验 中 给 予 的 指 导 和 帮 助 狄 建 彬 顾 振 纶 赵 笑 东 钱 培 刚 蒋 小 岗 郭 次 仪 中 草 药 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 8 期 10 年 8 月 1324 LDL C 非常明显升高 (
免疫组织化学的概念：
免疫组织化学的概念 : 免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理, 通过化学反应使标记抗体的显色剂 ( 荧光 素 酶 金属离子 同位素 ) 显色来确定组织细胞内抗原 ( 多肽和蛋白质 ), 对其进行定位 定性及定量的研究, 称为免疫组织化学 免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体 免疫组化实验所用的组织和细胞标本有哪些? 实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类, 前者包括石蜡切片 ( 病理大片和组织芯片
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片 要求小王等同学对这些文物用两种不同的标准进行分类 说出分类标准和结果 其所考查的目标实则是呼应了一般学习能力中的 整理信息 的要求 即从图片材料 中提取历史信息 对所获材料进行归类 开卷的第三题以 古代少数民族问题 为材料主题 体现交往与融合在文明发展 历程中的地位与作用 以探究性学习为主线 集中考查学生在开展探究性活动中对文 献 实物 口传等不同种类史料 材料 的运用水平 包括对有关史实的再现
中国社会科学 年第 期,,. % 1,,,. %,. % 2,, %, ;,,,, 3,,,, 4 ( ) ( ) ( ) (),, %, 5,,,,,,,,, 1 :,, ://.. / / - / /., 2 :,, 3 :, 4,,, 5 ( ),,, ( ),, ( ), ( ), ( );
近年来农民工的经济状况和社会态度 李培林李炜 : 改革开放 年来, 农民工作为中国产业工人的组成部分, 成为支撑中国经济持续快速增长的重要力量 基于 年和 年 中国社会状况综合调查 的数据, 对近年来 特别是在国际金融危机背景下农民工的经济状况和社会态度进行分析, 结果显示, 年数据反映出农民工在收入水平较低 劳动强度较高的情况下, 却保持着较为积极的社会态度 ; 近两年的新变化是, 农民工的收入水平和社会保障水平都有了显著的提高,
第 期 丘志力等 从传世及出土翡翠玉器看我国清代翡翠玉料的使用
第 卷 第 期 年 月 宝石和宝石学杂志 丘志力 吴 沫 谷娴子 杨 萍 李榴芬 根据最新发现的广州海关清代同治 光绪年间玉石的进口记录以及其它翡翠资源开发的资料 通 过分析中国主流博物馆清代传世及出土的翡翠玉器 国际著名拍卖公司专场拍卖的清代翡翠玉器以及云南 等九省 市出土的清代翡翠玉器 统计分析了中国清代翡翠玉器的来源与材质特征 指出该时期进入中国市场 的翡翠玉料数量可能相当巨大 广州是翡翠玉料最重要的进关口岸之一
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º º º º º º º º º º º º º º º AS "Jaunpils Pienotava" 奶酪 "KURZEMES" "JAUNPILS ZELTA" 半硬质成熟奶酪 口感酸甜 呈半硬质 均匀浓稠 它是一种半硬质含脂肪的成熟型奶酪 带有香甜的奶油味和巴氏杀菌乳的芳香 干酪孔眼分布不规则 奶酪呈淡黄色 呈半硬质 均匀浓稠 干酪孔眼分布不规则 呈淡黄色 为公司独家生产的一种奶酪 固态脂肪含量
Method
PfNPC 5% O 10% AB 4, RPMI 5% CO 2 37 5 100% 30 sec 10% Giemsa 15 mins 100x oil-immersion lens parasitemia parasitemia 10 15% Parasitemia multiple invasion 4 Panel A B C parasitemia parasitemia 2% *Parasitemia
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ZEBRA 技术白皮书 条码编码 101 相关知识介绍 引言 20 70 数据 80 20 90 (JIT) AIAG EIA HIBCC HAZMAT 条码的优势提高数据准确性 99% 85% / / 提升效率 / 2 Zebra Technologies 保持一致性 ID 改进库存和资产管理 成本 / 效益分析 ID ID ID (ERP) RFID Zebra Technologies 3 ID
ELISA手册完稿2011.doc
概述...1 ELISA 的种类及原理...1 直接 ELISA...2 间接 ELISA...3 夹心 ELISA...4 竞争抑制 ELISA...7 ELISA 实验的操作...10 将抗原或抗体吸附到固相载体上...10 封闭...12 加入待检样品以及后续试剂...12 温育...12 洗涤去掉游离未结合的反应物...13 加入酶检测底物...13 结果的判读...13 ELISA 实验常用试剂详解...13
福建农业学报 材料与方法 毒株 主要仪器 主要试剂 引物设计 的培养 反应条件的建立 荧光定量 检测临床样本 结果与分析
福建农业学报 林 甦 朱春华 陈 珍 刘斌琼 施少华 江 斌 蔡国漳 林 羽 黄 瑜 甦 男 硕士 助理研究员 主要从事病毒学和动物传染病学研究 福建农业学报 材料与方法 毒株 主要仪器 主要试剂 引物设计 的培养 反应条件的建立 荧光定量 检测临床样本 结果与分析 林 甦等 鸡 亚型白血病病毒荧光定量 检测方法的建立 福建农业学报 讨 论 林 甦等 鸡 亚型白血病病毒荧光定量 检测方法的建立 责任编辑
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件内酸 胺 酶 抑制剂 的 研 究 进 展 胡 宗礼 朱铃 英 第 二 军 医 大 学 基 础 部药 理 教研 室 当 今 在 国 内 外 临 床 细 菌 的 耐 药性 普 遍 上海 困 扰着 医 生 与 患 者 对 感染 性疾 病 特 别是 危 重 感 染构成 威 肋 内酞 胺类 抗生 素 甲 氧 苯青 霉素 金 葡 菌 尤 其是 耐 产生 耐 药性 的 重 要机 制 之 卜 内 酞胺 酶 抑 制
机 械 工 程 材 料 大连理工大学三束材料改性国家重点实验室 材料科学与工程学院 辽宁大连 对铝热焊接不同预热时间 下 钢轨焊缝的显微组织 力学 性能和断裂机制等进行了研究 结果表明 在上述预热工艺下铝热焊缝处的组织均为铁素体和珠光体 焊缝中心处的硬度最低 缩短预热时间硬度值稍有提高 随着离开焊缝中心距离的增加硬度 值提高 热影响区靠近焊缝处硬度较大 向母材一侧逐渐降低 焊缝处轨头部位的抗拉强度最高
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安全救护教学设计 一 教学导入 教学过程设计 二 学情了解 三 学习新课 1. 指压止血法
创伤救护 教学意义 教学目标 1 2 3 4 教学重点与难点 教学方法 教学时数 4 教师课前准备 1 2 PPT 学生课前准备 1 2 11 安全救护教学设计 一 教学导入 教学过程设计 二 学情了解 三 学习新课 1. 指压止血法 1 2 3 4 1.5 12 3 13 安全救护教学设计 14 2. 加压包扎止血法 1 1/3 2/3 15 安全救护教学设计 2 3cm 3 3. 止血带止血法
2015 大學校院招收大陸地區學生聯合招生委員會 71005 臺南市永康區南臺街 1 號 E-mail:rusen@mail.stust.edu.tw WEB:http://rusen.stust.edu.tw TEL:+886-6-2435163 FAX:+886-6-2435165 2 0 1 5 年 0 5 月 2 0 日 2015... 2... 3... 4... 6... 6... 7....
第2章 抗原抗体反应.doc
安徽理工大学医学院 School of Medicine 教案首页 第次课授课时间年月日教案完成时间 : 年月日 课程名称免疫学检验年级专业 层次医学检验 ( 本科 ) 教师许礼发 专业技术 职 务 授课方式 ( 大 小 ) 大学时 3 授课题目 ( 章 节 ) 第二章抗原抗体反应 基本教材或主要参考书王兰兰主编 临床免疫学与免疫学检验 ( 第三版 ) 教学目的和要求 : 了解 : 抗原抗体反应的基本类型
燃烧器电子控制系统 目录 2
聚焦 REC27 燃烧器电子控制系统 燃烧器电子控制系统 目录 2 REC27 燃烧器电子控制系统 2 概述 燃烧器电子控制系统 2 2 2 2 2 A B1 B2 C D E 22 2 2 系统图示 2 2 2 2 2 2 主要特征及优点 燃烧器电子控制系统 2 2 集成控制 2 2 节能 安全运行 运行模式 远程锁定复位 可根据需求提供特殊机型 无接合间隙及机械迟滞 简单的试运行及燃烧器设定 2
长 安 大 学 硕 士 学 位 论 文 基 于 数 据 仓 库 和 数 据 挖 掘 的 行 为 分 析 研 究 姓 名 : 杨 雅 薇 申 请 学 位 级 别 : 硕 士 专 业 : 计 算 机 软 件 与 理 论 指 导 教 师 : 张 卫 钢 20100530 长安大学硕士学位论文 ３ １ ３系统架构设计 行为分析数据仓库的应用模型由四部分组成 如图３ ３所示
三国时期墓葬特征述论 韩国河 朱 津 三国时期墓葬制度是从 汉制向 晋制的转变过渡时期 这一时期墓葬形制同东汉时期相比有较大的改变 突出表现在曹魏和东吴地区 随葬器物组合方面基本沿用东汉晚期 但又 出现了一些新器型 此外各区域间的墓葬文化表现出频繁交流的特点 综合以上诸要素可知 晋制 的形成主要源自于中原地区的曹魏墓葬 种类亦被中原地区所接纳 成为西晋墓中典型的器物组合 三国 汉制 薄葬 晋制 突出表现在墓葬形制和葬俗方面
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免疫沉淀 (Immunoprecipitation, IP) 原理 IP 是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的 protein A/G" 特异性地结合到抗体 ( 免疫球蛋白 ) 的 FC 片段的现象开发出来的方法 目 前多用 protein A/G 预先结合在 argarose beads 上, 使之与含有抗原的溶液及抗体反应后,beads 上的 prorein A/G 就能达到吸附抗原的目的
RM500 CAT / ECM RM300 2
CAT 路面再生机/稳定土拌和机 再生和稳定 RM500 CAT / ECM RM300 2 Cat RM500 RM300 3 4 75 mm 3" HMA 125 mm 5" HMA 75 mm 3" HMA 5 提高土壤承重能力 土壤稳定是指以机械或化学方式改进土壤承重特性的过程 粘性和半粘性原 土壤中掺入了煤灰 波特兰水泥和石灰等添加剂 以提高路基的抗压强度或 降低其可塑性 使用正确的添加剂进行稳定
关于罗斯福时代新政 宪法革命 的几点浅见 韩 铁 美国宪法的若干重要法理原则及其运用在富兰克林 罗斯福总统任内 发生了巨大变化 史称新政 宪法革命 不过 这种变化并不是在所谓 年最高法院的 及时转向 中一锤定音的 最高法院在正当程序 商业权 公众福利条款上的态度及其变化充分说明 新政宪法革命无论是从当时还是其后的发展来看都有它的连续性 局限性和复杂性 只有认识到了这一点 我们对新政宪法革命乃至于整个新政的历史评价才会比较准确
材料與方法
µ µ µ κ 17 18 19 20 µ µ µ 21 H 2 DCF-DA H 2 O 2 H 2 DCF-DA 酶 esterase H 2 DCF-DA deacetylation H 2 DCF H 2 DCF H 2 DCF DCF H 2 DCF DCF Bae et al., 1997; Vanden et al., 1997; Atlante et al., 1997; Wang
国际政治科学 ¹ º ¹ º
印度学者对中国的安全认知 司乐如 一轨 外交和 二轨 外交都是国际关系研究中值得重视的内容 前者有助于说明两国在政府外交层面的表现 对后者的研究则有助于了解在外交现象背后起作用的观念因素 本文的研究试图把社会心理学中的一些核心概念融入国际关系的研究之中 并在此基础上探讨印度学者对中国的安全认知 本文通过提供关于 认知 的更为精确的概念和理论框架 并通过术语统计和定性的案例分析 深入印度专家的视角 深化人们对中印安全互动的了解
科 学 出 版 社 职 教 技 术 出 版 中 心 www.aboo 科 学 出 版 社 职 教 技 术 出 版 中 心 www.aboo 科 学 出 版 社 职 教 技 术 出 版 中 心 www.aboo 科 学 出 版 社 职 教 技 术 出 版 中 心 www.aboo 科 学 出 版 社 职 教 技 术 出 版 中 心 www.aboo 科 学 出 版 社 职 教 技 术 出 版
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研究问题 自主学习中心 研究对象 研究方法 自主学习中心参与度以及学生对其认可度
自主学习环境下的学习策略研究 谈言玲 张荣根 严 华 学习策略的使用一般可视作学习者自主学习能力强弱的标志 本研究采用问卷和访谈结合的方式调查了自主学习环境下学习策略的使用情况 结果显示 自主学习中心参与度和认可度不高 大多数学 生能有效运用一定的认知策略 但元认知策略和社交策略运用程度偏低 学习策略 自主学习 本文为江苏省教育科学 十一五 规划 项目课题成果之一 课题号 同时感谢匿名审稿专家提供的宝贵修改意见
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天 津体育 学 院 学 报 卷第 第 运 动生 理 期 月 年 武 术 长 拳 训 练 前 后 血 液有 形成分 的 变 化! 苏振 萍! 摘要 通过 对 长拳 运 动 员 血液有形 成分变 化的 测 试 和 分析 证 明 长 拳运 动 员 训 练 前 后 血 红 蛋 白含量无变 化 运 动 后 白细 胞 明显 增 加 嗜中性粒 细 胞百分 比 偏 低 淋 巴 细 胞 百分 比 偏 高 武术 关 锐词
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/ / 河北师范大学学报 // / /... 人本与物本 翻译 与 语义谱系分析比较 牛云平, 杨秀敏 (., ;., ) : 翻译 与 的语义谱系有着根本不同之处 : 前者的本义是语官及其解释活动, 具有明显的人文特征 ; 后者的本义则是物体搬移行为, 具有明显的物化特征 两词的语义谱系不同, 决定了各自理论发展形态有别, 证明了中西翻译学自然而然地有着不同的研究重心和研究取向 因此, 中国学人强求与西人苟同乃是不智之举,
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Microsoft Word - 九月月刊.docx
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Microsoft Word - Cy.SE 系列说明书-2016
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证 明
Elisa 的原理及操作 注意事项 一 ELISA 基础知识 ELISA 是一种免疫测定 免疫测定 (immunoassay,ia) 是应用免疫学技术测定标本的方 法 在临床检验中主要通过抗原抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质 1. 抗原抗原是能在机体中引起特异性免疫应答的物质 抗原进入机体后, 可刺激机体产生抗体和引起细胞免疫 在免疫测定中, 抗原是指能与抗体结合的物质 能在机体中引起抗体产生的抗原多为分子量大于
(Microsoft Word - ELISA\265\304\324\255\300\355\274\260\262\331\327\367.doc)
Elisa 的原理及操作 注意事项 一 ELISA 基础知识 ELISA 是一种免疫测定 免疫测定 (immunoassay,ia) 是应用免疫学技术测定标本的方法 在临床检验中主要通过抗原抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质 1. 抗原抗原是能在机体中引起特异性免疫应答的物质 抗原进入机体后, 可刺激机体产生抗体和引起细胞免疫 在免疫测定中, 抗原是指能与抗体结合的物质 能在机体中引起抗体产生的抗原多为分子量大于
CD20检测试剂盒（免疫组化）说明书
波形蛋白抗体试剂 ( 免疫组织化学法 ) 说明书 说明书编号 :40019a 产品编号 :Kit-0019 产品名称 通用名称 : 波形蛋白抗体试剂 ( 免疫组织化学法 ) 英文名称 :Vimentin(V9) 包装规格 3ml/ 瓶 6ml/ 瓶 预期用途 检测 本抗体试剂用于福尔马林固定 石蜡包埋的人体组织切片, 细胞中波形蛋白抗原的定性 本抗体试剂用以辅助平滑肌瘤 平滑肌肉瘤 纤维瘤 纤维肉瘤
李集临 徐香玲 大豆的电离辐射诱发突变 １ Ｍ１ 茎扁化 叶片畸形 ２ Ｍ２ 弱株矮生型 ３ Ｍ 无主茎类型 斗 Ｍｚ 典型矮生型 Ｍｅ 茎扁化 主茎分裂为２ 一个结实 一个完全不孕 ６ Ｍ 主茎不孕 侧枝结实 ７ Ｍ２ 十胜长叶 中出现的多分枝 两侧分枝 株形收敛 分枝少类型及不孕株 Ｂ Ｍ２ 短果校 长花序突变单株 图版 Ｉ 李集临 徐香玲 大豆的电离辐射诱发突变 ９ 对照 减数分裂中期 Ｘ１
抗战时期沦陷区的电影检查 #
汪朝光 抗战时期 日本扶植的沦陷区伪政权实行了不同形式的电影检查 从沦陷初期各地各自为政的电影检查 到沦陷中后期分别集中于汪伪 华北和东北三个伪政权统治地域内的统一电影检查 从汪伪政权表面上沿袭国民政府的电影检查制度 到华北伪政权另行自己的电影检查 再到东北伪政权基本上照搬日本电影检查制度 但万变不离其宗 沦陷区电影检查的实质是为日本侵略中国服务的 是为了禁止可能出现的反映中国人民的反抗意识 独立精神和民族感情的影片
一 登录 crm Mobile 系统 : 输入 ShijiCare 用户名和密码, 登录系统, 如图所示 : 第 2 页共 32 页
第 1 页共 32 页 crm Mobile V1.0 for IOS 用户手册 一 登录 crm Mobile 系统 : 输入 ShijiCare 用户名和密码, 登录系统, 如图所示 : 第 2 页共 32 页 二 crm Mobile 界面介绍 : 第 3 页共 32 页 三 新建 (New) 功能使用说明 1 选择产品 第 4 页共 32 页 2 填写问题的简要描述和详细描述 第 5 页共
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., 卢学峰 陈桂琛 彭敏 刘光秀 沈永平 (, ) (, ) 本文研究了乌鲁木齐河上游大西沟地区的种子植物区系特征 调查表明, 该地区现有种子植物 种, 隶属 属, 科 种子植物科的组成以世界分布型 科为主 ; 属的组成以北温带分布型为主 ; 种的组成以温带亚洲分布为主 区系成分的分析结果说明, 该地区植物区系是东天山植物区系的组成部分, 具有典型的北温 带植物区系特征 该地区植物区系具有山地植物区系和垂直变化的特点,
上海现代设计集团建筑协同设计平台研究与应用
邓雪原 苏 昶 孙 朋 王国俭 上海交通大学土木工程系 上海 上海现代建筑设计 集团 有限公司 上海 本文首先分析了建筑 协同设计发展过程中存在的问题 指出建筑 协同设计的发展需要经过二维协同设计向三维协同设计的过渡 接着对适合于大型建筑设计企业的建筑 协同设计平台的关键问题进行了阐述 通过上海现代建筑设计集团一个实际工程项目 详细描述了建筑工程协同设计的方法与过程 然后对建筑协同设计的标准统一 工种协同等特点和高效沟通及超大项目的应用优势进行了讨论
A4
实验方案大全 2013-2014 Discover more at abcam.cn 目录 欢迎来到 Abcam 关于我们........................................1 不仅仅是抗体.....................................1 信息全面........................................1 Abreviews.......................................2
证券代码：600847 证券简称：万里股份 公告编号：临2013-21
证 券 代 码 :601028 证 券 简 称 : 玉 龙 股 份 公 告 编 号 :2014-039 江 苏 玉 龙 钢 管 股 份 有 限 公 司 非 公 开 发 行 股 票 发 行 结 果 暨 股 本 变 动 公 告 本 公 司 董 事 会 及 全 体 董 事 保 证 本 公 告 内 容 不 存 在 任 何 虚 假 记 载 误 导 性 陈 述 或 者 重 大 遗 漏, 并 对 其 内 容 的
浙 江大 学 学 报 农业与生命科学版 ５０ ０ 第３６卷 Ａ 烟草 ＢＹ ２ 细胞原生质体 Ｂ 烟草 ＢＹ ２ 细胞原生质体活力染色结果 Ｃ 蚕豆叶肉细胞原生质体 Ｄ 蚕豆叶肉细胞原 生质体活力染色结果 ｂａｒ ２５ μ ｍ Ｅ 烟草 ＢＹ ２ 细胞原生质体中微丝骨架的分布 Ｆ 图 Ｅ 在透射光下的成像 Ｇ 蚕豆叶肉 细胞原生质体中微丝骨架的分布 Ｈ 图 Ｇ 在透射光下的成像 ｂａｒ １０ μ ｍ
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欧洲研究 年第 期
论中欧伙伴关系中的不对称性与对称性 周 弘 在自然界和人类社会中都充满了不对称性和对称性的复杂关系 其中潜藏着挑战 也蕴涵着动力和机遇 这种现象同样存在于中欧关系之中 中欧关系中的不对称性表现在经济社会 政治制度和历史文化等三个主要方面 在这些不对称性中同时又包含着对称性 并孕育着发展中欧伙伴关系的机遇 中欧双方需要相互理解对方的 方式 寻求对称性与互补性 创造共赢局面 推动合作伙伴关系的继续发展
Microsoft Word - 永政发〔2016〕48号.doc
永 政 发 2016 48 号 各 功 能 区 管 委 会, 各 镇 ( 街 道 ) 人 民 政 府 ( 办 事 处 ), 县 政 府 直 属 各 单 位 : 县 教 育 局 制 定 的 2016 年 永 嘉 县 初 中 毕 业 升 学 考 试 与 高 中 招 生 实 施 方 案 已 经 县 人 民 政 府 同 意, 现 批 转 给 你 们, 请 认 真 贯 彻 实 施 永 嘉 县 人 民 政 府
) E:A) 肾脏病与透析肾移植杂志!第 $" 卷!第 D 期!$"&& 年 Q 月! m o c t. d n c nj. www 志 杂 植 移 肾 析 透 与 图 A;静脉用免疫球蛋白$ B CB?% 的作用机制 "K# 7)$巨噬细胞*<96 X,, $自然杀伤细胞*gV * 02, / 6
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记 忆 155 期 北 京 大 学 文 革 专 辑 (9) 目 录 专 稿 章 铎 从 高 云 鹏 的 遭 遇, 看 迟 群 之 流 的 专 制 附 : 高 云 鹏 给 胡 宗 式 章 铎 的 信 (2015 年 11 月 19 日 ) 评 论 马 云 龙 王 复 兴 抢 救 记 忆 : 一 个 北
记 忆 155 期 北 京 大 学 文 革 专 辑 (9) 目 录 专 稿 章 铎 从 高 云 鹏 的 遭 遇, 看 迟 群 之 流 的 专 制 附 : 高 云 鹏 给 胡 宗 式 章 铎 的 信 (2015 年 11 月 19 日 ) 评 论 马 云 龙 王 复 兴 抢 救 记 忆 : 一 个 北 大 学 生 的 文 革 回 忆 录 序 扬 子 浪 洗 涤 我 们 被 污 损 的 灵 魂 读 抢
硕士论文正文
1905 1945...3...4...11...23...41...54...66...73 1945 1949...81...117...127...132...176...184 1905 1945 1905 1910 1920 1922 1941 1945 1920 1944 1915 1939 25 1922 1933 40 1939 30 30 20 1932 30 1944 1945
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不 会 忘 记, 历 史 不 会 忘 记, 当 一 个 古 老 神 州 正 以 崭 新 的 姿 态 昂 首 屹 立 于 世 界 东 方 的 时 候, 当 世 界 把 延 伸 的 广 角 镜 瞄 准 这 片 神 奇 土 地 的 时 候, 中 国 人 民 已 深 深 感 到, 现 在 所 拥 有 的,
共 和 国 十 大 将 军 传 粟 裕 中 国 十 大 将 军 01 粟 裕 前 言 任 何 一 场 伟 大 的 革 命, 无 一 不 是 波 澜 壮 阔, 大 潮 叠 起 伴 随 和 影 响 着 这 些 革 命 的, 是 一 代 又 一 代 伟 大 的 革 命 家 对 于 二 十 世 纪 整 个 中 华 民 族 来 说, 革 命 一 词 总 是 蕴 涵 着 正 义 和 进 步, 圣 洁 和 光 荣
第一章
台南市立大內國民中學母語教學檔案 兒童文學 台灣兒童歌謠 壹 前言 我國的童謠 始於列子之康衢之謠 堯乃微服遊於康衢 兒童曰 立我烝民 莫匪爾極 不識不知 順序之則 後漢書 獻帝初 京師童謠曰 千里草 何青青 十日卜 不得生 前者歌頌帝堯德政 之廣被 後者諷刺董卓之虐政 人民將身受其殃 皆係含有政治作用的 歌謠 今日所說童謠 爾雅曾說 徒歌謂之謠 所謂徒歌即是隨口吟 唱 不加伴奏 也無固定旋律 隨興之所至啍唱
标题
三 风 云 人 物 27 三 风 云 人 物 武 进 人 杰 地 灵, 历 代 名 人 辈 出 千 年 悠 悠, 无 数 志 士 仁 人 名 贤 巨 贾 荟 萃 于 此, 给 这 片 土 地 带 来 了 富 庶 和 文 明, 留 下 了 数 不 尽 的 动 人 故 事, 在 武 进 历 史 的 演 进 中 刻 上 深 深 的 烙 印 1 延 陵 君 子 季 札 春 秋 末 期 的 季 札 被 武 进
第 二 章 鉴 证 业 务 的 定 义 和 目 标 第 五 条 鉴 证 业 务 是 指 注 册 会 计 师 对 鉴 证 对 象 信 息 提 出 结 论, 以 增 强 除 责 任 方 之 外 的 预 期 使 用 者 对 鉴 证 对 象 信 息 信 任 程 度 的 业 务 鉴 证 对 象 信 息 是 按
中 国 注 册 会 计 师 鉴 证 业 务 基 本 准 则 第 一 章 总 则 第 一 条 为 了 规 范 注 册 会 计 师 执 行 鉴 证 业 务, 明 确 鉴 证 业 务 的 目 标 和 要 素, 确 定 中 国 注 册 会 计 师 审 计 准 则 中 国 注 册 会 计 师 审 阅 准 则 中 国 注 册 会 计 师 其 他 鉴 证 业 务 准 则 ( 分 别 简 称 审 计 准 则 审 阅
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媒 摘 体 自 采 粮 访 该 做 和 不 农 该 组 做 织 的 媒 事 体 情 关 系 处 编 制 的 一 份 该 做 和 不 该 做 的 事 情 清 单 积 简 单 极 地 主 回 动 当 媒 体 打 来 应 电 质 话 询 并 不 确 保 每 次 都 能 传 递 你 的 关 键 信 息 通 过 下 列 问 是 您 题 哪 贵 个 确 保 单 姓? 你 位 的 能? 完 全 明 白 你 在 同
A 单 位 负 责 人 B 会 计 机 构 负 责 人 C 会 计 主 管 人 员 D 会 计 人 员 多 选 题 : 1. 单 位 伪 造 变 造 会 计 凭 证 会 计 账 簿, 编 制 虚 假 财 务 会 计 报 告 的, 县 级 以 上 人 民 政 府 财 政 部 可 以 依 法 行 使 的
(6.13 考 生 原 题 ) 原 始 资 料 请 勿 外 泄, 违 者 必 究! 单 选 题 : 1. 下 列 税 种 中, 不 属 于 行 为 税 的 是 ( ) A 车 船 使 用 牌 照 税 B 耕 地 占 用 税 C 城 市 维 护 建 设 税 D 车 辆 购 置 税 2. 根 据 人 民 币 银 行 结 算 账 户 管 理 办 法 的 规 定, 非 经 营 性 的 存 款 人 违 反 规
第六篇守势
克 劳 塞 维 慈 战 争 论 纲 要 1/31 第 六 篇 守 势 第 六 篇 守 势 守 势 的 本 质 1 守 势 的 概 念 2 守 势 的 价 值 3 守 势 价 值 的 变 迁 4 守 势 所 附 带 的 一 般 性 质 战 略 守 势 (A) 守 势 会 战 1 战 略 守 势 的 性 质 2 战 略 守 势 的 特 别 手 段 3 守 势 的 抵 抗 种 类 a 要 塞 b 防 御
1152 1221 1195 1217 12 1 5 9 5000 90 2 10 6 1226 1255 1260 5 1301 1273 1275 1281 1956 1303 1358 1333 1352 13 43 3 20 2 6 3 7 10 1349 11 1522 1508 1522 30 1601 1645 1628 9 20 1655 1644 800 1652 3 5 5 7
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中 国 太 平 洋 人 寿 保 险 股 份 有 限 公 司 世 纪 行 人 身 意 外 伤 害 保 险 (C 款 ) 条 款 太 平 洋 人 寿 [2013] 意 外 伤 害 保 险 062 号 阅 读 指 引 本... 阅 读 指 引 有 助 于 理 解 条 款, 对 本 合 同 内 容 的 解 释 以 条 款 为 准 您 拥 有 的 重 要 权 益 本 合 同 提 供 的 保 障 在 保 险 责
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突触素抗体试剂 ( 免疫组织化学法 ) 说明书 说明书编号 :40022a 产品编号 :Kit-0022 产品名称 通用名称 : 突触素抗体试剂 ( 免疫组织化学法 ) 英文名称 :Synaptophysin(SP11) 包装规格 3ml/ 瓶 6ml/ 瓶 预期用途 测 本抗体试剂用于福尔马林固定 石蜡包埋的人体组织切片, 细胞中突触素抗原的定性检 本抗体试剂用以辅助类癌 小细胞癌的诊断 阳性细胞中抗原定位为细胞质
GB 15973—1995麻风病诊断标准及处理原则
炭 疽 诊 断 标 准 及 处 理 原 则 前 言 GB 17015 1997 炭 疽 (Anthrax) 是 由 炭 疽 芽 孢 杆 菌 (Bacillus anthracis) 引 起 的 一 种 人 与 动 物 共 患 传 染 病, 主 要 存 在 于 食 草 动 物 和 牲 畜 群 落 之 中, 并 能 造 成 环 境 的 广 泛 污 染 由 于 炭 疽 芽 孢 具 有 对 外 界 环 境
PureSCM enhances competitive advantage with an integrated approach to IT service level management
ఱઓ߅ ښ PureSCM 使用集成的 IT 服 务级别管理方法增强竞争 优势 行业 IT 服务 公司 PureSCM 员工 40 收入 400 万美元 ఱઓ ቲጓǖIT 服务 ǖpurescm Ꮛ ǖ40 ၃ ǖ400 万美元 ጓᇗ PureSCM 是一家服务级别 管理专业公司和软件开发 公司 办事处设在加拿 大 美国和哥伦比亚 ᄞᐵ 为了帮助客户解决他们的 业务挑战 PureSCM 需要 提供集成的
穆迎春 王 芳 董双林 董少帅 朱长波 研究了盐度波动幅度对中国明对虾稚虾 蜕皮和生长的影响 实验 在水族箱内进行 实验对虾的初始体重为 投喂人工配合饲料 实验结果表 明 不同盐度波动幅度对中国明对虾稚虾的蜕皮周期有显著的影响 其中 能明 显抑制对虾的蜕皮 则能促进对虾的蜕皮 前者较后者蜕皮周期延长 不同盐度波动幅度对中国明对虾的特定生长率有显著影响 其中 和 两组对虾的特定生长率最 大 分别大于
上海浦~1
上 海 浦 发 银 行 参 与 高 等 职 业 教 育 人 才 培 养 年 度 报 告 ( ) 一 校 企 合 作 概 况 ( 一 ) 企 业 简 介 上 海 浦 东 发 展 银 行 股 份 有 限 公 司 ( 以 下 简 称 : 浦 发 银 行 ) 是 1992 年 8 月 28 日 经 中 国 人 民 银 行 批 准 设 立 1993 年 1 月 9 日 开 业 1999 年 在 上 海 证 券
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爱默生 Emerson 说过 自信是成功的第一秘诀 自信既不是孤芳自赏 得意忘形 也不是自以为是和盲目乐观 而是激励自我奋发进取的一种心理素质 是以高昂的斗志 充沛的精力迎接挑战的一种乐观情绪 演讲者能够建立起强大的气场 正是源于内心强烈的自信 演讲给许多人留下的印象往往不是巨大的精神享受, 而是惶恐和错乱 虽然在演讲中, 任何人对下一秒将要发生的事情都无从得知, 但恐惧并不会帮助我们做好准备,
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第二十四章免疫诊断免疫学检测技术已广泛应用于医学和生物学领域的研究 在临床医学中, 免疫学检测可用于免疫相关疾病的诊断 发病机制的研究, 病情监测与疗效评价等 如传染病 免疫缺陷病 自身免疫病 肿瘤 移植排斥反应 超敏反应等 随着免疫学理论的进展和相关技术的发展, 检测技术也不断发展和更新, 新方法层出不穷 本章仅介绍免疫诊断常用技术的原理 基本步骤及其应用 第一节抗原或抗体的检测一 抗原抗体反应的原理抗原与抗体发生结合反应的物质基础是抗原的抗原决定基与抗体的抗原结合部位之间的结构互补性,
图 21-1 衣 原 体 的 发 育 周 期 1. EB 吸 附 2. EB 被 吞 入 3. 8h 后 发 育 成 RB 4. 24h,RB 增 殖 5. 30h,RB 分 化 成 EB, 包 涵 体 形 成 6. 48h, 细 胞 破 裂, 释 放 EB 1. 原 体 (elementary b
第 21 章 衣 原 体 衣 原 体 (Chlamydia) 是 一 类 严 格 在 真 核 细 胞 内 寄 生, 有 独 特 的 发 育 周 期, 能 通 过 细 菌 滤 器 的 原 核 细 胞 型 微 生 物 衣 原 体 的 共 同 特 性 :1 革 兰 阴 性, 圆 形 或 椭 圆 形 体, 大 小 为 0.2~0.5μm;2 具 有 细 胞 壁, 与 革 兰 阴 性 菌 相 似 ;3 严 格
9. 条 件 的 摸 索 10. 方 法 的 介 绍 11. 结 果 分 析 一 原 理 1975 年,Southern 建 立 了 将 DNA 转 移 到 硝 酸 纤 维 素 膜 (NC 膜 ) 上, 并 利 用 DNA-RNA 杂 交 检 测 特 定 的 DNA 片 段 的 方 法, 称 为 S
Western Blot 详 解 ( 原 理 分 类 试 剂 步 骤 及 问 题 解 答 ) Western 免 疫 印 迹 (Western Blot) 是 将 蛋 白 质 转 移 到 膜 上, 然 后 利 用 抗 体 进 行 检 测 对 已 知 表 达 蛋 白, 可 用 相 应 抗 体 作 为 一 抗 进 行 检 测, 对 新 基 因 的 表 达 产 物, 可 通 过 融 合 部 分 的 抗 体
说 明
畜 禽 产 品 员 国 家 职 业 标 准 1. 职 业 概 况 1.1 职 业 名 称 畜 禽 产 品 员 1.2 职 业 定 义 从 事 畜 禽 及 畜 禽 产 品 测 试 的 人 员 1.3 职 业 等 级 本 职 业 共 设 五 个 等 级, 分 别 为 : 初 级 ( 国 家 职 业 资 格 五 级 ) 中 级 ( 国 家 职 业 资 格 四 级 ) 高 级 ( 国 家 职 业 资 格 三
第 期 黄 元 东 等 水 平 条 件 下 管 内 加 丝 的 脉 冲 热 管 性 能 测 试 及 分 析,+* 引 言 脉 冲 热 管 自 (!#$. 在 '' 年 提 出 来 后 得 到 迅 速 发 展 作 为 一 种 新 型 热 管 技 术 具 有 结 构 简 单 成 本 低 廉 和 性 能
第 卷 第 期 化 工 学 报 年 月! "!#$ 研 究 论 文 水 平 条 件 下 管 内 加 丝 的 脉 冲 热 管 性 能 测 试 及 分 析 黄 元 东 徐 进 良 岑 继 文 付 健 刘 培 中 国 科 学 院 广 州 能 源 研 究 所 广 东 广 州 % 中 国 科 学 院 研 究 生 院 北 京 ' 华 北 电 力 大 学 可 再 生 能 源 学 院 北 京 摘 要 传 统 脉 冲