目录实验一苯佐卡因 (Benzocaine) 的合成... 1 实验二阿司匹林 (Aspirin) 的合成... 7 实验三扑炎痛 (Benorylate) 的合成实验四大黄素的提取与鉴定实验五芦丁的提取纯化与鉴定实验六盐酸小檗碱的提取分离与鉴

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麦牛湛
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1 沈阳化工大学 SHENYANG UNIVERSITY OF CHEMICAL TECHTOLOGY 制药工程专业实验指导书制药工程教研室 2009 年 5 月

2 目录实验一苯佐卡因 (Benzocaine) 的合成... 1 实验二阿司匹林 (Aspirin) 的合成... 7 实验三扑炎痛 (Benorylate) 的合成实验四大黄素的提取与鉴定实验五芦丁的提取纯化与鉴定实验六盐酸小檗碱的提取分离与鉴定实验七混悬剂的制备及稳定剂的选择方法... 22

3 实验一苯佐卡因 (Benzocaine) 的合成苯佐卡因是局部麻醉用药, 外用为撒布剂, 用于手术后创伤止痛, 溃疡痛, 一般性止痛实验目的 : 通过苯佐卡因的合成, 了解药物合成的基本过程, 掌握氧化酯化还原反应的原理及基本操作化学结构式 : COOC 2 H 5 NH 2 化学名为 : 对氨基苯甲酸乙酯 (Ethyl-4-amino-benzoate) 合成路线 : CH 3 COOH + Na 2 Cr 2 O 7 + 4H 2 SO 4 + Na 2 SO 4 +Cr 2 (SO 4 ) 3 +5H 2 O NO 2 COOH NO 2 COOC 2 H 5 H 2 SO4 + C 2 H 5 OH + H 2 O NO 2 NO 2 COOC 2 H 5 NO 2 Fe+H 2 O CH 3 COOH COOC 2 H 5 NH 2 + Fe 3 O 4 性状 : 白色结晶性粉末, 味微苦而麻 ; 熔点 ; 易溶于乙醇, 微溶于水 1

4 实验步骤 : 1. 氧化 ( 对 - 硝基苯甲酸的制备 ) [ 反应式 ] CH 3 COOH + Na 2 Cr 2 O 7 + 4H 2 SO 4 + Na 2 SO 4 +Cr 2 (SO 4 ) 3 +5H 2 O NO 2 NO 2 [ 试剂 ] 对 - 硝基甲苯 8.0g Na 2 Cr 2 O 7.2H 2 O 23.6g 浓硫酸 32ml 5% 硫酸 35ml 5% NaOH 溶液 70ml 15% 硫酸 60ml 活性炭 O.5g [ 操作 ] 在装有搅拌温度计回流冷凝器的 250ml 三颈瓶中先后加入 23.6g 重铬酸钠 (Na 2Cr 2O 7 2H 20) 及 50ml 水, 开动搅拌, 待重铬酸钠溶解后, 加入对硝基甲苯 8g, 使混合物成悬浮液后, 由漏斗慢慢滴加 32ml 的浓硫酸 [ 注 1] 保持轻微沸腾约 1.5 小时 [ 注 2] 冷却至室温, 将反应液倾入 80ml 冷水中, 抽滤, 并用 45ml 水分三次洗涤, 将粗制的对 - 硝基苯甲酸置于圆底瓶中, 加入 35ml 5% 的硫酸在沸水浴上加热 10 分钟 [ 注 3] 冷却过滤, 将滤饼溶于温热 ( 大约 50 左右 ) 的 70ml 5% 氢氧化钠溶液中, 加入活性炭 O.5g 脱色 (5-10 分钟 ), 温热至 50 左右振摇 5 分钟后, 于 45 下趁热过滤 [ 注 4], 在搅拌下将滤液慢慢倾入 60ml 15% 的硫酸中得浅黄色沉淀 [ 注 5] 用冷水洗涤, 抽干并干燥的本品, 计算收率 m.p [ 注 6] [ 注意事项 ] 1. 滴加浓硫酸时, 溶液温度迅速升高且颜色逐渐变深注意控制滴加速度 2. 注意控制温度温度过高, 对硝基甲苯逸出, 或在冷凝器中结晶出来, 影响反应的进行 2

5 3. 此步是为了溶解铬盐 4. 此步是为了除去未作用的对硝基甲苯此时, 对硝基甲酸成钠盐溶于水中 5. 硫酸不能反加于滤液中, 这样会使生成的沉淀包含滤液, 而影响产物纯度 6. 可用水, 酒精或醋酸重结晶, 熔点可达 239 [ 思考题 ] 精制的对硝基苯甲酸可能含有哪些杂质, 如何除去? 2. 酯化 :( 对硝基苯甲酸乙酯的制备 ) [ 反应式 ] COOH COOC 2 H 5 H 2 SO4 + C 2 H 5 OH + H 2 O NO 2 NO 2 [ 试剂 ] 对 - 硝基苯甲酸 ( 自制 ) 乙醇 ( 无水 ) 浓硫酸碳酸钠溶液 (5%) 6g 24ml 2ml 约 10ml [ 操作 ] 在干燥的 250ml 圆底瓶中依次加入对 - 硝基苯甲酸 6g, 乙醇 24ml, 逐渐加入浓硫酸 2ml, 装上附有氯化钙干燥管的回流冷凝器, 加热回流 80 分钟, 稍冷, 在搅拌下趁热将反应液倒入 100ml 水中, 则析出白色沉淀, 抽滤, 水洗滤饼, 然后将滤饼转移到烧杯中, 加 5% 的 Na 2 CO 3 溶液, 搅拌除去未反应的对 - 硝基苯甲酸, 抽滤, 水先干燥得产品, 计算收率 m.p.56 [ 思考题 ] 1. 酯化反应有何特点? 一般怎样促使反应进行完全? 2. 本反应中的浓硫酸的作用是什么? 3. 还原 ( 对氨基苯甲酸乙酯的制备 ) 3

6 [ 反应式 ] COOC 2 H 5 NO 2 Fe+H 2 O CH 3 COOH COOC 2 H 5 NH 2 + Fe 3 O 4 A 法 : [ 试剂 ] 对硝基苯甲酸乙酯 ( 自制 ) 6g 铁粉 8.6g 冰醋酸碳酸钠溶液 (10%) 2.5ml 35ml 95% 乙醇 35ml 5% 乙醇适量 [ 操作 ] 在装有搅拌回流冷凝器的 250ml 三颈瓶中, 加入 35ml 水,2.5ml 冰醋酸和已处理过的铁粉 8.6g, 开动搅拌, 加热至反应 5 分钟, 稍冷, 加入 6g 对 - 硝基苯甲酸乙酯和 95% 的乙醇 35ml, 在激烈搅拌下回流反应 90 分钟稍冷, 在搅拌下, 分次加入 35ml 温热的 10% 碳酸钠溶液, 并随加随搅拌, 趁热迅速抽滤, 滤液冷却后则析出产品, 抽滤, 产品用稀乙醇洗涤, 干燥称重 [ 思考题 ] 1. 反应中为什么用冰醋酸而不用盐酸? 2. 反应中加入 95% 乙醇是起溶剂作用的, 用它有什么益处? 3. 产品的分离原理是什么? B 法 : [ 试剂 ] 对硝基苯甲酸乙酯 ( 自制 ) 5g 4

7 铁粉 4.3g 氯化铵 0.7g 碳酸钠溶液 (10%) 氯仿 35ml 40ml 5% 盐酸 90 ml 40% 氢氧化钠适量 [ 操作 ] 在装有搅拌和球形冷凝器的的三颈瓶中, 加入水 25ml, 氯化铵 0.7g, 铁粉 4.3g, 直火加热至微沸, 活化 5 分钟稍冷, 慢慢加入对硝基苯甲酸乙酯 5g, 充分激烈搅拌, 回流反应 70 分钟待反应液冷至 40 左右, 加入少量的碳酸钠饱和溶液调至 ph=7-8, 加入 30ml 氯仿, 搅拌 3-5 分钟, 抽滤 ; 用 10ml 氯仿洗三颈瓶机滤渣, 抽滤, 合并滤液, 倾入 100ml 分液漏斗中, 静止分层, 弃去水层, 氯仿层用 5% 盐酸 90ml 分三次萃取, 合并萃取液 ( 氯仿回收 ), 用 40% 氢氧化钠调至 ph=8 析出结晶, 抽滤, 得苯佐卡因粗品, 计算收率 C 法 : [ 反应式 ]: COOC 2 H 5 Zn EtOH COOC 2 H 5 NO 2 NH 2 [ 试剂 ]: 锌粉 18.5g,( 0.28mol), 对硝基苯甲酸乙酯 1.83g(0.01mol), 结晶氯化钙 0.8g,95% 乙醇 40ml, 乙醚, 食盐, 石油醚, 无水硫酸镁 [ 操作 ]: 在 250ml 的圆底烧瓶中加入 0.8g 氯化钙和 10ml 水, 氯化钙溶解后加入 40ml95% 乙醇 1.83g 对硝基苯甲酸乙酯和 18.5g 锌粉, 装上回流冷凝管, 在不时振荡下, 加热回流 2.5-3h 后, 冷却到室温, 滤去未反应的锌粉蒸去乙醇, 水相再用 40ml 乙醚分两次提取, 合并有机相, 用无水硫酸镁干燥后蒸去乙醚, 直到残留液体积为 8-12ml 时停止 5

8 蒸馏把残留液倒入盛有 15ml 石油醚的锥形瓶中结晶过滤, 干燥后称重, 约 1.2g, 粗品可用乙醚 - 石油醚重结晶, 熔点精制 [ 试剂 ] 50% 乙醇适量活性碳适量将粗品置于装有球形冷凝器的 100mL 圆底瓶中, 加入倍 (ml/g)50% 乙醇, 在水浴上加热溶解稍冷, 加活性碳脱色 ( 活性碳用量视粗品颜色而定 ), 加热回流 20 分钟, 趁热抽滤 ( 布氏漏斗抽滤瓶应预热 ) 将滤液趁热转移至烧杯中, 自然冷却, 待结晶完全析出后, 抽滤, 用少量 50% 乙醇洗涤两次, 压干, 干燥, 测熔点, 计算收率注释 1. 氧化反应一步在用 5% 氢氧化钠处理滤渣时, 温度应保持在 50 左右, 若温度过低, 对硝基苯甲酸钠会析出而被滤去 2. 酯化反应须在无水条件下进行, 如有水进入反应系统中, 收率将降低无水操作的要点是 : 原料干燥无水 : 所用仪器量具干燥无水 ; 反应期间避免水进入反应瓶 3. 对硝基苯甲酸乙酯及少量未反应的对硝基苯甲酸均溶于乙醇, 但均不溶于水反应完毕, 将反应液倾入水中, 乙醇的浓度降低, 对硝基苯甲酸乙酯及对硝基苯甲酸便会析出这种分离产物的方法称为稀释法 4. 还原反应中, 因铁粉比重大, 沉于瓶底, 必须将其搅拌起来, 才能使反应顺利进行, 故充分激烈搅拌是铁酸还原反应的重要因素 A 法中所用的铁粉需预处理, 方法为 : 称取铁粉 10g 置于烧杯中, 加入 2% 盐酸 25mL, 在石棉网上加热至微沸, 抽滤, 水洗至 ph=5-6, 烘干, 备用 6

9 实验二阿司匹林 (Aspirin) 的合成阿司匹林为解热镇痛药, 用于治疗伤风感冒发烧神经痛关节痛及风湿病等近年来, 又证明它具有抑制血小板凝聚的作用, 其治疗范围又进一步扩大到预防血栓的形成, 治疗心血管疾患 [ 实验目的 ] 通过阿司匹林的合成, 掌握酯化反应和重结晶的原理及基本操作, 掌握磁力搅拌的使用方法 [ 化学结构式 ] O OC CH 3 COOH [ 化学名 ] 2- 乙酰氧基苯甲酸 [ 性状 ] 白色针状或板状结晶, 熔点 135~140, 易溶于乙醇, 可溶于氯仿乙醚, 微溶于水 [ 合成路线 ] O OH + (CH 3 CO) 2 O COOH H 2 SO 4 OCCH 3 + COOH CH 3 COOH 实验部分一酯化 [ 合成路线 ] 7

10 O OH + (CH 3 CO) 2 O COOH H 2 SO 4 OCCH 3 + COOH CH 3 COOH [ 试剂 ] 水杨酸 : 10g 醋酐 : 14ml 浓硫酸 : 5 滴水 : 150ml 10% 乙醇 : 适量 [ 操作 ] 在装有搅拌子干燥管和球形冷凝器的 100ml 的三颈瓶中, 依次加入水杨酸 10g, 醋酐 14ml, 浓硫酸 5 滴开启搅拌, 置油浴加热, 待温度升至 70 时, 维持在此温度反应 30 分钟停止搅拌, 稍冷, 将反应液倾入 150ml 冷水中, 继续搅拌, 至阿司匹林全部析出抽滤, 用少量稀乙醇洗涤, 压干, 得粗品注释酯化反应以酸酐为酰化剂需要无水操作, 反应仪器提前干燥二精制 [ 试剂 ] 阿司匹林 : 乙醇 : 活性碳 : 热水 : 粗品 30ml 适量 75ml 8

11 稀乙醇 : 适量 [ 操作 ] 将所得粗品置于附有球形冷凝器的 100ml 的圆底烧瓶中, 加入 30ml 乙醇, 于水浴上加热至阿司匹林全部溶解, 稍冷, 加入活性碳回流脱色 10 分钟, 趁热抽滤将滤液慢慢倾入 75ml 热水中, 自然冷却至室温, 析出白色结晶待结晶析出完全后, 抽滤, 用少量稀乙醇洗涤, 压干, 置红外灯下干燥 ( 干燥时温度不超过 60 ), 测熔点, 计算收率 9

12 实验三扑炎痛 (Benorylate) 的合成扑炎痛为一种新型解热镇痛抗炎药, 是阿司匹林和扑热息痛经拼合原理制成, 它既保留了原药的解热镇痛功能, 又减小了原药的毒副作用, 并有协同作用适用于急慢性风湿关节炎, 风湿痛, 感冒发烧, 头痛及神经痛 [ 实验目的 ] 通过乙酰水杨酰氯的制备, 了解氯化试剂选择及操作中的注意事项 ; 通过本实验了解拼合原理在化学结构修饰方面的应用及 Schotten-Baumann 酯化的反应原理 [ 化学结构式 ] O OC CH 3 O C O NHC CH 3 O [ 化学名 ]2- 乙酰氧基苯甲酸 - 乙酰胺基苯酯 [ 性状 ] 白色结晶性粉末, 无臭无味熔点 174~178, 不溶于水, 微溶于乙醇, 溶于氯仿丙酮 [ 合成路线 ] O O OC CH 3 + SOCl 2 N OC CH 3 COOH COCl + HCl + SO 2 OH NaOH ONa NHCOCH 3 NHCOCH 3 10

13 O OC CH 3 + ONa O OC CH 3 COCl COO NHCOCH 3 NHCOCH 3 实验部分一乙酰水杨酰氯的制备 [ 合成路线 ] O O OC CH 3 + SOCl 2 N OC CH 3 COOH COCl + HCl + SO 2 [ 试剂 ] 吡啶 : 阿司匹林 : 氯化亚砜 : 无水丙酮 : 2 滴 10g 5.5ml 10ml [ 操作 ] 在干燥的 100ml 圆底烧瓶中, 依次加入吡啶 2 滴, 阿司匹林 10g, 氯化亚砜 5.5ml, 迅速安上球形冷凝器 ( 顶端附有氯化钙干燥管, 干燥管连有导气管, 导气管另一端通到装有水的烧杯中 ) 置油浴上慢慢加热至 70 ( 约分钟 ), 维持油浴温度在 70±2 反应 70 分钟, 冷却, 加入无水丙酮 10ml, 将反应液倾入干燥的 100ml 滴液漏斗中, 混均, 密闭备用二扑炎痛的制备 [ 合成路线 ] 11

14 OH ONa NaOH NHCOCH 3 NHCOCH 3 O OC CH 3 + ONa O OC CH 3 COCl COO NHCOCH 3 NHCOCH 3 [ 试剂 ] 扑热息痛 : 水 : 10g 50ml 氢氧化钠溶液 :(3.6g 氢氧化钠加水 20ml 配成 ) 乙酰水杨酰氯丙酮溶液 : 上次实验制备氢氧化钠溶液 :( 用于调 ph) [ 操作 ] 在装有搅拌子及温度计的 250ml 的三颈瓶中, 加入扑热息痛 10g, 水 50ml 冰水浴冷至 10 左右, 在搅拌下滴加氢氧化钠溶液 (3.6g 氢氧化钠加水 20ml 配成, 用滴管滴加 ) 滴加完毕, 在 8-12 之间, 在强烈的搅拌下, 慢慢滴加上次实验制得的乙酰水杨酰氯丙酮溶液 ( 在 20 分钟左右滴完 ) 滴加完毕, 调至 ph 10, 控制温度在 8-12 之间继续搅拌反应 60 分钟, 抽滤, 水洗至中性, 得粗品, 计算收率 [ 注释 ] 1. 二氯亚砜是由羧酸制备酰氯最常用的氯化试剂, 不仅价格便宜而且沸点低, 生成的副产物均为挥发性气体, 故所得酰氯产品易于纯化 2. 二氯亚砜遇水可分解为二氧化硫和氯化氢, 因此所用仪器均需干燥 ; 加 12

15 热时不能用水浴 3. 反应用的阿司匹林需在 60 干燥 4 小时 4. 吡啶作催化剂, 用量不宜过多, 否则影响产品质量 5. 制得的酰氯不应久置 6. 扑炎痛制备采用 Schotten-Baumann 方法酯化, 即乙酰水杨酰氯和对乙酰氨基酚钠缩合酯化 7. 由于扑热息痛酚羟基与苯环共轭, 加之苯环上又有吸电子的乙酰氨基, 因此酚羟基上的电子云密度较低, 亲核反应性较弱 ; 成盐后酚羟基氧原子电子云密度增高, 有利于亲核反应 ; 此外, 酚钠成酯, 还可以避免生成氯化氢, 使生成的酯键水解三精制 [ 试剂 ] 扑炎痛粗品 :5g 95% 乙醇 :50ml 活性碳 : 适量 95% 乙醇 : 适量 [ 操作 ] 取粗品 5g 置于装有球形冷凝器的 100ml 圆底瓶中, 加入 10 倍量的 (w/v) 95% 乙醇, 在水浴上加热溶解稍冷, 加入活性碳脱色 ( 活性碳用量视粗品的颜色而定 ), 加热回流 30 分钟, 趁热抽滤 ( 布氏漏斗抽滤瓶应预热 ) 将滤液趁热转移到烧杯中, 自然冷却, 待结晶完全析出后, 抽滤, 压干 ; 用少量乙醇洗涤两次 ( 母液回收 ) 压干, 干燥, 测熔点, 计算收率 13

16 实验四大黄素的提取与鉴定 1. 目的要求 1.1 掌握利用硅胶柱层析分离提取大黄素的原理与方法 1.2 掌握大黄素的鉴定方法 2. 基本原理大黄为蓼科植物掌叶大黄, 药用大黄, 唐古特大黄的干燥根茎, 具有泄热通肠, 凉血解毒, 逐瘀通经的功效. 大黄中所含的羟基蒽醌类化合物很多, 游离的化合物有大黄酸, 大黄素, 大黄酚等等. 蓼科植物虎杖中含有较高含量的大黄素, 此外, 还含有单宁类, 黄酮类成分大黄素 : 分子式 C15H10O5, 相对分子质量 , 橙红色针晶 ( 冰醋酸 ), m.p.255~256. 几乎不溶于水, 能溶于乙醇, 碳酸钠, 氨水溶液. 溶于氢氧化钾呈樱红色. 溶解度 (g/100ml): 乙醚 0.14, 氯仿 0.071, 苯 0.041, 四氯化碳 0.01(25 ). 3. 实验仪器与试剂 3.1 仪器仪器名称数目回流冷凝管 1 水浴锅 1 铁架台 1 分液漏斗 1 圆底烧瓶 1 烧杯 (250ml) 5 玻璃棒 2 抽虑装置 1 紫外灯 1 层析缸 1 14

17 容量瓶 10ml 1 量筒 100ml 1000ml 各 1 硅胶板, 毛细管, 滤纸,PH 试纸少许 3.2 试样与试剂大黄粉,20% 硫酸, 苯, 冰醋酸,5% 碳酸氢钠,5% 碳酸钠, 稀盐酸, 环己烷 : 丙酮 (7:3), 苯 : 乙酸乙酯 (7:3) 4. 实验内容步骤从大黄中提取制备大黄素取大黄粗粉 30g,20% 硫酸 10ml 预浸泡过夜, 再用苯加热回流提取 2 次, 每次用 150ml 提取 0.5h, 合并苯提取液, 用 5% 碳酸氢钠水溶液从苯提取液中萃取大黄酸 3 次, 每次 60ml, 合并萃取液, 碱液酸化至 PH 为 3, 静置 0.5h, 沉淀完全抽滤水洗后再用冰醋酸重结晶, 得黄色细针状结晶 ( 大黄酸 ) 苯提取液用 5% 碳酸钠水溶液萃取大黄素 3 次, 每次 60ml 碱液酸化至 PH 为 3, 静置 0.5h, 沉淀完全抽滤水洗后再用苯重结晶得橙色针状结晶 ( 大黄素 ) 苯提取液继续可用于萃取分离芦荟大黄素大黄酚和大黄素甲醚 5. 薄层层析鉴别大黄素薄层板 : 硅胶 CMC 板展开剂 : 环己烷 : 丙酮 (7:3),Rf=0.31; 苯 : 乙酸乙酯 (7:3) 显色 :365nm 紫外光思考实验中是如何用 PH 梯度法来提取分离大黄素的? 15

18 实验五芦丁的提取纯化与鉴定 1. 实验目的与要求 1.1 学习和掌握提取与精制芦丁的操作方法 1.2 掌握黄酮类化合物的鉴定方法 2. 实验原理芦丁又称芸香苷, 广泛存在于植物界, 尤其以槐米和荞麦叶片中含量较高, 可作为提取制备芦丁的原材料本实验以槐米为原料提取芦丁, 槐米系豆科植物槐树的花蕾, 两千年前即入中药用, 有凉血止血, 清肝泻火的功效槐米中芦丁含量高达 16%~25% 芦丁属黄酮类化合物, 结构中含有多个酚羟基, 呈酸性, 苷元为槲皮素, 糖基为芸香糖芦丁 (C27H30O16), 为浅黄色细小针状晶体 ( 水 ),m.p. 176~178, 214~215 发泡分解, 溶于热水, 甲醇, 乙醇 (1:60~1:650), 微溶于乙酸乙酯, 丙酮, 不溶于苯, 氯仿, 石油醚等槲皮素 (C15H10O7) 二水合物为黄色针状结晶,95~97 脱水,m.p.314 ( 分解 ), 可溶于沸乙醇 (1:23), 无水乙醇 (1;29), 乙酸乙酯, 丙酮等, 不溶于石油醚, 水芦丁可溶于碱液呈黄色, 酸化后又析出, 故可用碱提酸沉法得到芦丁粗品然后利用芦丁在冷水中不溶 (1:10000), 在热水中微溶 (1:200) 的溶解度差精制, 可获得纯度高的微细针状结晶, 最后予以鉴定在分析中草药制剂中黄酮类化合物含量时常以芦丁做标准品 3. 仪器与试剂 16

19 3.1 仪器仪器名称数目研钵 1 烧杯 500ml 4 漏斗 1 玻璃棒 2 抽虑装置 1 紫外灯 1 层析缸 1 硅胶板, 毛细管, 滤纸,PH 试纸少许酒精灯, 铁架台, 石棉网各 1 量筒 100ml 1000ml 各 1 试管 10ml 3 分析天平试剂槐米, 硼砂, 石灰乳,10% 盐酸, 乙醇,1% 三氯化铁乙醇溶液,1% 氢氧化钠溶液,2% 三氯化铝醇溶液, 浓盐酸, 镁粉,2% 醋酸铅溶液, 4. 实验内容与步骤 4.1 芦丁提取取槐米 10g, 在研钵中稍加研碎后, 至 500ml 烧杯中, 加入 250ml 水, 加热搅拌下加入石灰乳, 保持 ph8~9. 热至 80 左右时加入硼砂 0.2g, 搅拌下加热至微沸 20min, 稍置, 倒出上清液过滤对残渣再用 200ml 水提取一次弃去残渣, 合并滤液用 10% 盐酸调 ph 为 4~5, 用玻璃棒摩擦烧杯壁, 使有晶体析出, 过滤, 用少量冷蒸馏水洗 2~3 次, 抽干即得芦丁粗品 4.2 精制取粗品 2g 转入烧杯中, 加 350ml 左右蒸馏水, 加热至沸, 使之刚好完全溶解 ( 若没有完全溶解继续添加适量蒸馏水 ), 趁热过滤, 静置过夜 ( 或用玻璃棒摩擦烧杯壁 ), 使结晶析出抽滤, 用少量冷水洗两次, 在 70~80 17

20 干燥结晶, 即得纯品, 称重计算收率 5. 芦丁的定性反应取约 0.2g 芦丁粗品, 溶于 3ml 乙醇中得到芦丁溶液 5.1 薄层点滴反应用毛细管点芦丁溶液于硅胶板, 分别用下列试剂进行点滴反应, 观察颜色变化, 同时在紫外灯下观察荧光变化 1% 三氯化铁乙醇溶液,1% 氢氧化钠溶液,2% 三氯化铝醇溶液 5.2 盐酸 - 镁粉反应吸取 0.5ml 芦丁溶液置于试管中, 加两滴浓盐酸, 再加入镁粉少许观察颜色变化 5.3 醋酸铅反应吸取 0.5ml 芦丁溶液置于试管中, 加两滴 2% 醋酸铅溶液, 观察变化 18

21 实验六盐酸小檗碱的提取分离与鉴定 1. 实验目的与要求 1.1 学习生物碱的初步提取分离方法 1.2 掌握利用柱层析分离纯化, 薄层层析鉴定药用植物成分的方法 2. 基本原理生物碱是植物中含氮的有机化合物, 大多有明显的生物活性, 是许多中草药的活性成分小檗碱又名黄连素, 是由芸香科植物黄连和黄檗中最先提取出来的小檗碱是一种季铵碱, 其游离碱为黄色针状晶体,m.p.145 ( 乙醚 ), 微溶于水, 能溶于热水和乙醇, 难溶于苯, 丙酮, 氯仿, 几乎不溶于石油醚小檗碱与苯, 丙酮, 氯仿在碱性条件下均能形成加合物小檗碱盐酸盐难溶于冷水, 易溶于热水 ; 硫酸盐易溶于水溶解度分别为 : 小檗碱 :1: 20( 冷水 ),1:100( 冷乙醇 ); 盐酸盐,1:500( 冷水 ); 硫酸盐 :1: 30( 冷水 ), 利用这些特性可提取盐酸小檗碱 3. 仪器与试剂 3.1 仪器仪器名称数目烧杯 500ml 4 量筒 1000ml 1 试管 10ml 2 漏斗 1 脱脂棉少许玻璃棒 2 抽虑装置 1 紫外灯 1 层析缸 1 分析天平 1 19

22 铁架台 1 硅胶板, 毛细管, 滤纸,PH 试纸少许 3.2 试剂与样品黄连根粉,0.5% 硫酸, 脱脂棉, 石灰乳, 氯化钠,10% 盐酸, 浓盐酸, 滤纸, 硅胶, 氯仿 : 氨 : 甲醇 (30:1:8), 氯仿 : 乙醇 :0.1mol*L-1 盐酸 (1:1:1, 下层 ) 4. 实验内容与步骤 4.1 小檗碱粗品的制备取黄连的根粗粉 ( 过 20 目筛 )20g, 置于 500ml 烧杯中, 加入 8 倍量 0.5% 硫酸水溶液使之浸没药面, 浸泡 30min, 用脱脂棉过滤滤液加石灰乳中和多余硫酸, 调 PH 为 12, 静置 15min, 滤除沉淀, 滤液用 10% 盐酸调 PH 至 2~3, 再向滤液中按 10%(w/v) 量加入氯化钠, 搅拌使完全溶解后, 继续搅拌至溶液出现浑浊现象为止, 静置 30min, 滤除沉淀并用少量水洗涤至中性, 抽干,50 以下真空干燥, 即为盐酸小檗碱粗品 4.2 盐酸小檗碱精制取所得粗品 ( 未干燥 ) 放入 20 倍量沸水中, 搅拌溶解后, 继续加热数分钟, 趁热过滤滤液加一滴浓盐酸, 静置 30min, 滤取结晶, 用蒸馏水洗数次, 抽干,50 以下真空干燥, 即为精制盐酸小檗碱 5. 盐酸小檗碱的鉴定 5.1 纸层析鉴定样品 : 精制盐酸小檗碱醇溶液标准品 : 盐酸小檗碱醇溶液展开剂 : 氯仿 : 乙醇 :0.1mol*L-1 盐酸 (1:1:1, 下层 ) 显色方法 : 自然光或紫外光下观察, 计算 Rf 并对各点归属做出判断 20

23 5.2 硅胶薄层层析鉴定样品 : 精制盐酸小檗碱醇溶液标准品 : 盐酸小檗碱醇溶液展开剂 : 氯仿 : 氨 : 甲醇 (30:1:8) 显色方法 : 自然光或紫外光下观察, 计算 Rf 并对各点归属做出判断 6. 实验思考在提取过程中为什么用稀硫酸浸提而不用稀盐酸? 21

24 实验七混悬剂的制备及稳定剂的选择方法一实验目的 1. 掌握混悬剂的一般制备方法 2. 掌握沉降容积比的概念并熟悉测定方法 3. 熟悉根据药物的性质选用适宜的稳定剂, 用以制备稳定混悬剂的方法二实验指导混悬剂 ( 又称混悬液, 悬浊液 ) 系指难溶性固体药物以微粒 (>0.5μm) 形式分散在液体分散介质中形成的分散体系一个优良的混悬剂应具有下列特征 : 其药物微粒细小, 粒径分布范围窄, 在液体分散介质中能均匀分散, 微粒沉降速度慢, 沉降微粒不结块, 沉降物再分散性好混悬剂的沉降速度与多种因素有关, 可用 Stoke 定律表示 : V 2 2r ( 1 2 ) g 9 式中 V- 沉降速度,r- 粒子半径,ρ 1 - 粒子密度,ρ 2 - 介质密度,η- 混悬剂的粘度,g- 重力加速度混悬剂微粒的沉降速度与微粒半径混悬剂粘度的关系最大通常用减小微粒半径, 并加入助悬剂如天然高分子化合物半合成纤维素衍生物等, 以增加介质粘度来降低微粒的沉降速度混悬剂中微粒分散度高, 具有较大的表面自由能, 故体系属于热力学不稳定系统微粒有聚集的趋势, 可加入表面活性剂等用以降低固液之间介 22

25 面张力, 使体系稳定表面活性剂又可作润湿剂, 改善疏水性药物的润湿性从而克服疏水微粒 ( 质轻 ) 因吸附空气而造成上浮现象向混悬液中加入絮凝剂, 使微粒的 ζ 电位降低至一定值, 微粒间发生絮凝, 形成网状疏松的聚集体其特点是沉降速度快, 沉降物体积大, 沉降物易再分散, 其物理稳定性好, 此种混悬剂称絮凝混悬剂向混悬剂中加入反絮凝剂, 使其 ζ 电位增大, 减少微粒间的聚集, 沉降速度慢, 沉降物体积小, 沉降物结块, 不宜再分散, 其物理稳定性差, 此种混悬剂称反絮凝混悬剂但这种混悬剂由于微粒小, 混悬液流动性好, 易于倾倒, 是适于在短时间内应用的混悬剂混悬剂的配制方法有分散法与凝聚法分散法 : 将固体药物粉碎成微粒, 再根据主药性质混悬于分散介质中, 加入适宜的稳定剂亲水性药物先干研至一定细度, 再加液研磨 ( 通常一份固体药物, 加 0.4~0.6 份液体为宜 ); 疏水性药物则先用润湿剂或高分子溶液研磨, 使药物颗粒润湿, 最后加分散介质稀释至总量凝聚法 : 将离子或分子状态的药物借助物理或化学方法凝聚成微粒, 再混悬于分散介质中形成混悬剂混悬剂成品的标签上应注明用时摇匀为安全起见, 剧毒药不应制成混悬剂三实验内容与操作 ( 一 ) 亲水性药物混悬剂的制备及沉降容积比的测定 1. 处方表 1 氧化锌混悬剂各处方处方号氧化锌 (g)

26 2. 操作 50% 甘油 (ml) 6.0 羧甲基纤维素 0.1 钠 (g) 西黄蓍胶 (g) 0.1 蒸馏水加至 (ml) (1) 处方 1 2 的配制 : 称取氧化锌细粉 ( 过 120 目筛 ), 置乳钵中, 分别加 0.3ml 蒸馏水或甘油研成糊状, 再各加少量蒸馏水或余下甘油研磨均匀, 最后加蒸馏水稀释并转移至 10ml 刻度试管中, 加蒸馏水至刻度 (2) 处方 3 的配制 : 称取甲基纤维素 0.1g, 加入蒸馏水研成溶液后, 加入氧化锌细粉, 研成糊状, 再加蒸馏水研匀, 稀释并转移至 10ml 刻度试管中, 加蒸馏水至刻度 (3) 处方 4 配制 : 称取西黄蓍胶 0.1g, 置乳钵中, 加乙醇几滴润湿均匀, 加少量蒸馏水研成胶浆, 加入氧化锌细粉, 以下操作同处方 3 配制 (4) 沉降容积比测定 : 将上述 4 个装混悬液的试管, 塞住管口, 同时振摇相同次数 ( 或时间 ) 后放置, 分别记录 min 沉降物的高度 (ml), 计算沉降容积比, 结果填入表 3 根据表 3 数据, 绘制各处方的沉降曲线 ( 加甘油做助悬剂, 会出现两个沉降面, 为是因为甘油对小粒子的助悬效果好, 而对大粒子助悬效果差造成的, 观察时应同时记录两个沉降体积 ) 3. 操作注意 (1) 各处方配制时, 加液量研磨时间及研磨用力应尽可能一致 (2) 用于测定沉降容积比的试管, 直径应一致 (3) 由于甘油为低分子助悬剂, 助悬效果不很理想, 研时力度时间应 24

27 保持一致, 否不易观察 (4) 各处方在定量转移时要完全 ( 二 ) 絮凝剂对混悬剂再分散性的影响 1. 处方 (1) 碱式硝酸铋 1.0g 蒸馏水适量共制成 10ml 操作 (2) 碱式硝酸铋 1.0g 1% 枸橼酸钠溶液 1.0ml 蒸馏水适量共制成 10ml (1) 取碱式硝酸铋 2.0g 置乳钵中, 加 0.5ml 蒸馏水研磨, 加蒸馏水分次转移至 10ml 试管中, 摇匀, 分成 2 等份, 一份加水至 10ml, 为处方 (1); 另一份蒸馏水至 9ml, 再加 1% 枸橼酸钠溶液 1.0ml 两试管振摇后放置 2h (2) 首先观察试管中沉降物状态, 然后再将试管上下翻转, 观察沉降物再分散状况 2. 操作注意用上下翻转试管的方式振摇沉降物, 两管用力要一致, 用力不要过大, 切勿横向用力振摇 ( 三 ) 疏水性药物混悬剂的制备, 比较几种润湿剂的作用 1. 处方硫磺洗剂的处方组成见表 2 表 2 硫磺洗剂处方组成处方号精制硫磺 (g) 乙醇 (ml) % 甘油 (ml)

28 2. 操作软皂液 (ml) 1 聚山梨酯 (g) 蒸馏水加至 (ml) 称取精制硫磺置乳钵中, 各处方分别按加液研磨法依次加入少量蒸馏水乙醇甘油软皂液或聚山梨酯 -80( 加少量蒸馏水 ) 研磨, 再向各处方中缓缓加入蒸馏水至全量振摇, 观察硫磺微粒的混悬状态, 记录 3. 操作注意 (1) 为保证结果观察准确, 硫磺称量要准确 (2) 转移要完全 ( 四 ) 凝聚法制备硫磺洗剂取 4% 盐酸 (W/V) 与 20% 硫代硫酸钠 (W/V) 溶液各 5ml, 置 10ml 具塞试管中, 振摇, 观察硫磺存在的状态, 记录 ( 二 ) 实验结果和讨论 1. 将沉降容积比测定结果填入表 3 表 3 沉降容积比与时间的关系时间 (min) 处方号 H u H u /H 0 H u H u /H 0 H u H u /H 0 H u H u /H 注 :H 0 为混悬液的高度 ;H u 为沉降物的高度 1. 根据表 3 数据, 以 H u /H 0 ( 沉降容积比 ) 为纵坐标, 时间为横坐标, 26

29 绘制各处方沉降曲线, 比较几种助悬剂的助悬能力 2. 记录碱式硝酸铋混悬剂 2h 沉降物状态及再分散翻转次数, 沉降物的状态 3. 记录硫磺洗剂各处方的混悬情况, 讨论不同润湿剂的稳定作用 4. 记录分散法与凝聚法制备硫磺洗剂的混悬情况, 讨论不同制备方法对制剂稳定性及分散状况的影响 ( 三 ) 思考题 1. 解释氧化锌混悬剂与硫磺洗剂在处方及工艺上的差异? 2. 将下述处方制成稳定混悬剂, 应选择何种稳定剂简述处方中各成分作用及制备工艺处方氧化锌 6.0 g 液体酚 1.0 ml 甘油 2.0 ml 石灰水适量共制成 100ml 3. 分散法与凝聚法制备的混悬剂在质量上和稳定性上有何差异? 27

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目录 实验一 苯佐卡因 (Benzocaine) 的合成... 1 实验二 阿司匹林 (Aspirin) 的合成... 7 实验三 扑炎痛 (Benorylate) 的合成 实验四 大黄素的提取与鉴定 实验五 芦丁的提取纯化与鉴定 实验六 盐酸小檗碱的提取分离与鉴

目录实验一苯佐卡因 (Benzocaine) 的合成... 1 实验二阿司匹林 (Aspirin) 的合成... 7 实验三扑炎痛 (Benorylate) 的合成实验四大黄素的提取与鉴定实验五芦丁的提取纯化与鉴定实验六盐酸小檗碱的提取分离与鉴