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璇分唐
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1 430 临床论著外周血中性粒细胞表面 CD64 对白血病患者细菌感染的诊断价值摘要目的探究外周血中性粒细胞表面 CD64 对白血病患者细菌感染的诊断效果方法选取 2013 年 1 月至 2014 年 1 月本院收治的 30 例白血病合并细菌感染者 (A 组 ) 30 例白血病非细菌感染者 (B 组 ) 和 30 例健康体检志愿者 ( 健康对照组 ) 的临床资料采用免疫比浊法检测每组患者的 C- 反应蛋白 (CRP) 和降钙素原 (PCT) 水平, 采用流式细胞术检测 CD4/CD8 和 CD64 的表达, 采用电阻抗法检测中性粒细胞百分比 (NEU%) 结果 A 组患者的 CRP PCT NEU% 分别为 3.27 (0.14~4.41)ng/ml 2.4(1.7~3.1)ng/ml 和 89(80~90)% B 组患者的 CRP PCT NEU% 分别为 0.10(0.10~0.10)ng/ml 0.4(0.2~0.6)ng/ml 和 70(68~75)% 健康对照组的 CRP PCT NEU% 分别为 0.06(0.04~0.08)ng/ml 0.2(0.1~0.5)ng/ml 和 62(50~70)% 健康对照组和白血病非细菌感染组患者的 CRP PCT 和 NEU% 均低于白血病合并细菌感染组患者, 其中 A 组和 B 组 CRP PCT 和 NEU% 水平差异具有统计学意义 (P = ,LSD-t = ); A 组和 C 组 CRP PCT 和 NEU% 水平差异具有统计学意义 (P = ,LSD-t = ) A 组患者的 CD64 指数表达和 CD4/CD8 指数分别为 (95.52 ± 0.31) 和 (0.64 ± 0.03); B 组患者的 CD64 指数表达和 CD4/CD8 分别为 (38.33 ± 0.22) 和 (0.97 ± 0.12);C 组患者的 CD64 指数表达和 CD4/CD8 分别为 (5.11 ± 0. 43) 和 (1.64 ± 0.23), 健康对照组和白血病非细菌感染组患者的 CD64 表达均低于白血病合并细菌感染组患者, 健康对照组和白血病非细菌感染组患者的 CD4/CD8 均高于白血病合并细菌感染组患者, 差异统计学具有意义 (χ 2 = P = 0.035) PCT 的敏感度和特异度分别为 67.0% 和 89.0%,CRP 的敏感度和特异度分别为 85.0% 和 76.0%,CD64 的敏感度和特异度分别为 71.0% 和 90.0%,NEU% 的敏感度和特异度分别为 58.0% 和 86.0% 结论 CD64 诊断白血病合并细菌感染有良好的特异度, 对白血病合并细菌感染的早期诊断有重要的诊断价值关键词外周血中性粒细胞 ;CD64; 白血病 ; 细菌感染 Diagnosis effect of CD64 on the surface of peripheral blood neutrophil in bacterial infection of patients with leukemia Yang Zhifeng 1, Li Yan 1, Li Huijuan 1, Nie Haiying 2. 1 Hematology Department, 2 Medical Gastroenterology, The First Hospital of Handan City, Handan , China Corresponding author: Yang Zhifeng, yangzhifeng004@126.com Abstract Objective To explore the diagnosis results of peripheral blood neutrophil CD64 on the surface of a bacterial infection in patients with leukemia. Methods The clinical data of 30 cases of leukemia complicated with bacterial infection (A group), 30 patients with non-bacterial infection of leukemia (B group) and 30 cases of healthy volunteers (healthy control group) were selected in our hospital from January 2013 to January 2014 by immune turbidity detection of patients in each group of C-reactive protein (CRP) and calcitonin peptide (PCT) level by flow cytometry and CD4/CD8 and CD64 expression and the resistance impedance method was applied detect neutrophils (NEU%). Results The levels of CRP, PCT and NEU% of patients in A group of were 3.27 ( ) ng/ml, 2.4 ( ) ng/ml and 89 (80-90)%, respectively. The levels of CRP, PCT and NEU% of patients in B group were were 0.10 ( ) ng/ml, 0.4 ( ) ng/ml and70 (68-75)%, respectively. The levels of CRP, PCT and NEU% of patients in healthy control group were 0.06 ( ) ng/ml, 0.2 ( ) ng/ml and 62 (50-70)%, respectively. The levels of CRP, PCT and NEU% in DOI: /cma.j.issn 作者单位 : 邯郸市, 邯郸市第一医院血液内科 1 2 消化内科通讯作者 : 杨志峰, yangzhifeng004@126.com

2 431 healthy control group and leukemia non-bacterial infection group were all significantly lower than those of patients of leukemia complicated with bacterial infection. The levels of CRP, PCT and NEU% of patients in A group and B group were compared with significant differences (P = 0.024, 0.021, 0.029; LSD-t = 8.390, 8.511, 8.153). The levels of CRP, PCT and NEU% of patients in A group and C group were compared with significant differences (P = 0.037, 0.033, 0.039; LSD-t = 7.315, 7.672, 7.123). The expression of CD64 index and CD4/CD8 index in A group were (95.52 ± 0.31) and (0.64 ± 0.03), respectively; the CD64 index and CD4/CD8 expression in the B group were (38.33 ± 0.22) and (0.97 ± 0.12), respectively; the CD64 index and CD4/CD8 expression in the C group were (5.11 ± 0.43) and (1.64 ± 0.23), healthy control group and patients with non leukemia CD64 expression in bacterial infection group were lower than those of patients with leukemia complicated with bacterial infection group, healthy control group and non leukemia CD4/CD8 in bacterial infection group were significantly higher than that of patients of leukemia complicated with bacterial infection group (χ 2 = 2.274, P = 0.035). The sensitivity and specificity of PCT detection were 67% and 89%, the sensitivity and specificity of CRP detecting were 85% and 76%, the sensitivity and specificity of CD64 detecting were 71% and 90%, the sensitivity and specificity of NEU% detecting were 58% and 86.0%, respectively. Conclusions The diagnosis of leukemia CD64 to bacterial infection was specific for early diagnosis of leukemia with bacterial infection, with important diagnostic value. Key words Peripheral blood neutrophils; CD64; Leukemia; Bacterial infection 人类造血系统常见的恶性肿瘤疾病为白血病白血病患者的免疫功能较正常人显著降低, 因此, 白血病患者不能有效的抵抗细菌的侵入, 感染的发生率较高, 白血病患者死亡的主要原因为细菌感染 [1] 因此对于白血病患者是否合并细菌感染需要进行及时有效的诊断才能对其进行治疗和预防目前, 临床上常用的诊断细菌感染的金标准为血培养, 并对患者的中性粒细胞百分比 (neutrophilicgranulocyte,neu%) C- 反应蛋白 (C-reactive protein,crp) 和降钙素原 (procalcitonin,pct) 进行检测, 结合血培养结果对患者进行早期诊断, 但是这些检测项目具有一定的局限性近年来临床上也使用 CD64 定量分析对白血病合并细菌感染进行早期诊断 [2-3] 本文对外周血中性粒细胞表面 CD64 对白血病患者细菌感染的诊断效果进行了探究, 现报道如下资料与方法一一般资料选取 2013 年 1 月至 2014 年 1 月本院接收治疗的 30 例白血病合并细菌感染者为 A 组 30 例白血病非细菌感染者为 B 组和 30 例健康体检志愿者为健康对照组 A 组中男性 18 例, 女性 12 例年龄为 25~69 岁, 平均年龄为 (41.1 ± 3.1) 岁体重为 49~83 kg, 平均体重为 (63.1 ± 2.6)kg B 组中男性 17 例, 女性 13 例年龄为 26~69 岁, 平均年龄为 (42.3 ± 2.9) 岁体重为 49~82 kg, 平均体重为 (61.6 ± 3.0)kg 健康对照组中男性 16 例, 女性 14 例年龄为 25~68 岁, 平均年龄为 (40.3 ± 3.2) 岁体重为 50~83 kg, 平均体重为 (64.6 ± 2.7)kg 三组患者的性别年龄体重差异均无统计学意义 (P 均 > 0.05), 具有可比性纳入标准 : 所有患者均为未经过治疗的初诊患者已经签署知情书并自愿参加本项研究者排除标准 : 不符合上述纳入标准者合并严重的心肺肾肝功能障碍者经诊断为严重的精神疾病患者二方法 1. 采用流式细胞术检测外周血中性粒细胞 CD64 的表达, 流式仪购自 BD 公司, 型号为 BDFACSAria Ⅱ, 操作过程严格按照说明书进行抽取患者 50 ml 全血并分别加入异硫氰酸荧光素和 CD54FITC, 孵育 15 min 后加入溶血剂 1 ml 孵育 10 min r/min 离心 20 min, 使用 PBS 悬浮细胞后离心 5 min 然后加入 500 µl 的 PBS 并进行检测使用中性粒细胞 CD64/ 淋巴细胞 CD64 表示中性粒细胞 CD64 值 2. 采用流式细胞术检测 CD4/CD8, 试剂购自 BD 公司, 抽取患者 50 ml 全血并加入 5 µl 混合抗体孵育 15 min, 然后加入 450 µl 溶血剂 10 min 后进行检测 3. 采用免疫比浊法检测 C- 反应蛋白 (CRP) 和降钙素原 (PCT), 采用电阻抗法检测中性粒细胞百分比 (NEU%) 三统计学处理运用 SPSS 18.0 软件分别进行观测资料的统计分析其中的计数资料部分, 三组患者的 CRP PCT NEU% 中性粒细胞 CD64 表达和淋巴细胞 CD4/CD8 比较为整体 + 分割 χ 2 检验检验水准设定为 α = 0.05, 以 P < 0.05 为差异具有统计学意义

3 432 结果一各组患者的 CRP PCT 和 NEU% 水平健康对照组和白血病非细菌感染组患者的 CRP PCT 和 NEU% 水平均低于白血病合并细菌感染组患者, 差异具有统计学意义 (P 均 < 0.05), 详见表 1 二各组患者的中性粒细胞 CD64 表达和淋巴细胞 CD4/CD8 健康对照组和白血病非细菌感染组患者的 CD64 表达均低于白血病合并细菌感染组患者, 健康对照组和白血病非细菌感染组患者的 CD4/CD8 比值均高于白血病合并细菌感染组患者, 差异统计学具有意义 (P 均 < 0.05), 详见表 2 三各个指标对检测早期合并细菌感染的敏感度和特异度比较 PCT 对早期感染指标诊断的准确性优于 NEU% 和 CRP, 且 CD64 的敏感度和特异度均高于 PCT, 因此,CD64 可能为诊断早期合并细菌感染的新指标, 详见表 3 讨论研究证实, 对白血病患者是否合并细菌感染的早期诊断十分重要 [4-5], 但是临床上目前对细菌感染的常规诊断通常是指对 PCT 血常规 CRP 等表 1 各组患者的 CRP PCT 和 NEU% 水平 [ 中位数 ( 最小值 ~ 最大值 )] 组别例数 PCT(ng/ml) CRP(ng/ml) NEU(%) A 组 (0.14~4.41) 2.4(1.7~3.1) 89(80~90) B 组 (0.10~0.10) 0.4(0.2~0.6) 70(68~75) 健康对照组 (0.04~0.08) 0.2(0.1~0.5) 62(50~70) 整体分析 F 值 P 值精细比较,P LSD-t 值 (A vs B) LSD-t 值 (A vs C) LSD-t 值 (B vs C) P 值 (A vs B) P 值 (A vs C) P 值 (B vs C) 表 2 各组患者的中性粒细胞 CD64 表达和淋巴细胞 CD4/CD8( x ± s) 组别例数 CD64 表达指数 CD4/CD8 比值 A 组 ± ± 0.03 B 组 ± ± 0.12 健康对照组 ± ± 0.23 整体分析 F 值 P 值精细比较,P LSD-t 值 (A vs B) LSD-t 值 (A vs C) LSD-t 值 (B vs C) P 值 (A vs B) P 值 (A vs C) P 值 (B vs C)

4 433 水平进行检测, 但是由于这些指标的特异度和敏感度均有一定限度 [6-7], 检测结果容易出现假阳性或假阴性, 因而 PCT 血常规 CRP 等指标并非诊断白血病患者是否合并细菌感染的最佳指标 [8-9] 同时, 临床常用的血培养诊断是诊断 s 白血病患者是否合并细菌感染的金指标, 但是由于血培养病原菌分离的过程复杂且费时, 血培养诊断需要约 3 d 才会得出结果, 不能达到对细菌感染进行早期诊断的目的 [10-11] 有研究指出,CD54 对感染性疾病具有有效的早期诊断价值,CD54 能够有效的识别免疫球蛋白, 且对 IgG 单体有较高的亲和力, 能够连接细胞免疫和介导体液免疫 [12-13] 同时随着临床中广泛使用流式细胞仪进行检测, 对外周血中性粒细胞 CD64 的表达在临床诊断和治疗细菌性感染中也得到广泛的使用 [14] 目前在肺部感染和新生儿败血症等感染性疾病中 CD64 表达水平有显著升高, 近年来, 应用流式细胞仪检测外周血中性粒细胞表面 CD64 分子的表达在诊断细菌感染中作用颇受关注 [15-16], 但在白血病感染诊断中却研究比较少因此, 本文对外周血中性粒细胞表面 CD64 对白血病患者细菌感染的诊断效果进行探究白血病患者的免疫防御系统主要包括非特异性免疫和特异性免疫, 其中特异性免疫是机体与抗原反应接触后形成的, 主要由 B 淋巴细胞 T 淋巴细胞补体和 NK 细胞等组成 [17-18], 其中 T 淋巴细胞为最主要的特异性免疫细胞, 而判断患者机体的免疫系统是否稳定主要是对患者的 CD4/CD8 进行检测 [19-20] 本研究结果显示, 健康对照组的 CRP PCT NEU% 分别为 0.06(0.04~0.08)ng/ ml 0.2(0.1~0.5)ng/ml 和 62(50~70)%, 即健康对照组和白血病非细菌感染组患者的 CRP PCT 和 NEU% 均低于白血病合并细菌感染组患者, 其中 A 组和 B 组 CRP PCT 和 NEU% 水平比较,A 组和 C 组 CRP PCT 和 NEU% 水平比较, 差异均具有统计学意义同时, 本研究结果显示 A 组患者的 CD64 表 3 各个指标对检测早期合并细菌感染的敏感度和特异度指标敏感度 (%) 特异度 (%) PCT CRP CD NEU% 指数表达和 CD4/CD8 指数分别为 (95.52 ± 0.31) 和 (0.64 ± 0.03);B 组患者的 CD64 指数表达和 CD4/ CD8 分别为 (38.33 ± 0.22) 和 (0.97 ± 0.12);C 组患者的 CD64 指数表达和 CD4/CD8 分别为 (5.11 ± 0. 43) 和 (1.64 ± 0.23), 此结果说明健康对照组和白血病非细菌感染组患者的 CD64 表达均低于白血病合并细菌感染组患者, 健康对照组和白血病非细菌感染组患者的 CD4/CD8 比值均高于白血病合并细菌感染组患者, 差异统计学具有意义是由于 CD4 和 CD8 细胞的主要作用为清除细菌和病毒, 但白血病患者长期反复的病毒感染和慢性炎症会使患者体内的 CD4 和 CD8 细胞减少, 进而降低患者的细胞免疫功能 [21-22] 本研究结果显示,PCT 对早期感染指标诊断的准确性优于 NEU% 和 CRP CRP 为急性时相反应蛋白, 是广泛应用的判断感染的指标之一, 但 CRP 是一种非特异性炎症指标, 不仅在细菌感染时升高, 在急性心肌梗死创伤外科手术肿瘤浸润等时也增加且 CD64 的敏感度和特异度均高于 PCT, 因此,CD64 可能为诊断早期合并细菌感染的新指标这是由于虽然人体内的 NEU% 在患者发生败血症全身炎症性反应急性出血创伤妊娠和运动等时均会升高 [23], 但是其特异度和敏感度均低于 PCT, 而 CD64 在机体受到感染后的 4~6 h 内均会升高, 且其特异度和敏感度分别为 90.0% 和 71.0%, 均高于 PCT, 即中性粒细胞 CD64 的表达可以更灵敏特异地诊断感染或者脓毒血症, 从而指导治疗方案,CD64 对于诊断白血病患者早期合并细菌感染有十分重要的临床价值 [24-25] 综上所述,CD64 诊断白血病合并细菌感染有良好的特异度, 对白血病合并细菌感染的早期诊断有重要的诊断价值参考文献 1 Hoang VT, Zepeda-Moreno A, Ho AD, et al. Identification of leukemia stem cells in acute myeloid leukemia and their clinical relevance[j]. J Biotechnolo,2013,7(6): 陆米则, 夏珺, 程枫, 等. 白血病粒细胞缺乏期肺侵袭性真菌感染患者的病原学分析 [J]. 中华医院感染学杂志,2014,24(6): 肖喜春, 司金春, 陈淑霞, 等. 老年急性髓系白血病患者化疗期间医院感染的危险因素及防治 [J/CD]. 中华实验和临床感染病杂志 : 电子版,2014,8(5): 窦君清, 邢渊, 张蓉芳. 小檗碱对肥胖患者血清 C- 反应蛋白的影响 [J]. 实用药物与临床 2013,15(3): Coelho LM, Salluh J, Soares M, et al. Patterns of C-reactive protein ratio response in severe community-acquired pneumonia: a cohort

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357 P <. 5. TCD findings revealed that the contralateral vertebral artery systolic blood flow velocities in patients with phase Ⅰ Ⅱ and Ⅲ steal groups

357 P <. 5. TCD findings revealed that the contralateral vertebral artery systolic blood flow velocities in patients with phase Ⅰ Ⅱ and Ⅲ steal groups 356 TCD 212 3 215 4 TCD 45 TCD 8 Ⅰ 21 Ⅱ 11 Ⅲ 5 4 45 6 2 Ⅰ 12 9 Ⅱ 3 7 1 Ⅲ 3 2 r =. 78 P