1 1.2 fused silica ph 2 silanol group (plane flow) von Smoluchowski (1) ν eo = µ eo Ε = εε0ζε η (1) 2

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1 Tiselius[1] Tiselius Hjerten [2] 3mm (Capillary Zone Elecrophoresis CZE) 1974 Virtamen[3] 200~500um 1981 Jorgenson Lukacs[4-5] 75µm 1984 Terabe[6] (Micellar Electrokinetic Capillary Chromaqtography MEKC) (HPLC) 1

2 1 1.2 fused silica ph 2 silanol group (plane flow) von Smoluchowski (1) ν eo = µ eo Ε = εε0ζε η (1) 2

3 ν eo (velocity of electroosmotic flow) µ eo (mobility of electroosmotic flow) E (electric field strength) ε (dielectric constant of medium) ε 0 (electrical permittivity of free space) ζ (zeta potential) η (viscosity of medium) 2 (2) ν = L T eff = ( µ e + µ eo )E = µ eff E = µ eff V L (2) ν (velocity of an analyte) L eff (effective length of a capillary tube) T (migration time of an analyte) µ e (electrophoretic mobility of an analyte) µ eff (effective mobility of an analyte) V (applied voltage) L (full length of tube) E 3

4 1.3 (capillary zone electrophoresis, CZE) (Capillary Gel Electrophoresis CGE) (Capillary Isotachophoresis CITP) (Micellar Electrokinetic Chromaqtography MEKC) (capillary zone electrophoresis CZE) (capillary zone electrophoresis CZE) 4

5 1.3.2 (Micellar Electrokinetic Chromaqtography MEKC) 1984 Terabe[6-7] (critical micelle concentration CMC) [53] (UV-VIS diode array) nl 3mm 50~100µm 5

6 2.1 (On-line preconcentration) UV (off-line) (liquid-liquid extraction) (solid-phase extraction) (solid-phase microextraction) (sample stacking) 1979 Mikkers[8] 1989 Lauer Chien Burgi [9-11] Terabe 6

7 MEKC (concentration efficiency) 2.2 ( outlet ) ( inlet ) V=IR (3) V (voltage) I (current) R (resistance) 7

8 2.2.2 ph ph ph 10.5 ph 6.0 ph 10.5 ph 6.0 ph ph

9 (Field-amplified sample stacking FASS) (Large-volume sample stacking LVSS) (ph Junction) (sweeping-mekc) FASS LVSS ph Junction sweeping-mekc (Field-amplified sample stacking FASS) ( 2.2.1) ( 4(a) ) 9

10 ( 4(b) ) ( 4(c) ) 300 [12] 1000 [13] 1000 [14] (Large-volume sample stacking LVSS) 50% ( 2.2.4) ( 5(a) ) ( 5(b) ) 95% ( 5(c) ) ( 5(d) ) 95% 120 [15] 400 [16] 10

11 200 [17] (ph Junction) ph ( 2.2.2) : 6(a) ph 6(b) ph 10.0 ph 6.0 ph 6.0 ph 10.0 ph [18] 300 [19] 1200 [20] (sweeping-mekc) 11

12 1. (Sweeping with nonionic micelles) 2. (Sweeping with cationic micelles) 3. (Sweeping with anionic micelles) 4. (Anion-Selective Exhaustive Injection-Sweeping-Micellar Electrokinetic Chromatography ) 5. (Cation-Selective Exhaustive Injection-Sweeping-Micellar Electrokinetic Chromatography ) 6. (Large-volume sample stacking -Sweeping- Micellar Electrokinetic Chromatography) Terabe [23] 7 l sweep I sweep =d(a c )-d(mc c ) (4) a c a a mc c mc a a a mc c mc c d(mc c ) ac d(a c ) Va(MEKC) a c d(mc c )=V mc t sweep (5) V mc =V ep (mc)+v EOF (6) d(a c )=V a (MEKC)t sweep (7) Va(MEKC)=V ep *(a)+v eof (8) V mc V ep (mc) 12

13 V ep *(a) a t sweep a a mc c V ep (mc)=µ ep (mc)e (9) V ep *(a)= k/(1+k) µ ep (mc)e (10) t sweep =l inj /(V eof -V mc ) (11) V EOF =µ EOF E (12) µ ep (mc) E k (capacity factor) (a mc /a free ) µ EOF I sweep = I inj [1/(1+k)] (13) I inj I sweep I inj (Sweeping with nonionic micelles) 13

14 ( 2.2.3) ( 8(a) ) ( 8(b) ) ( 8(c) ) 150 [21] 100 [22] (Sweeping with cationic micelles) ( 2.2.3) ( 9(a) 14

15 ) ( 9(b) ) ( 9(c) ) 250 [24] 130 [25] 67 [26] (Sweeping with anionic micelles) ( 2.2.3) ph 3 ( 10(a) ) ( 10(b) ) 15

16 ( 10(c) ) 170 [27] 250 [28] 200 [29] (Anion-Selective Exhaustive Injection-Sweeping-Micellar Electrokinetic Chromatography ASEI-sweeping-MEKC) ph ( ) ( 11(a) ) ( 11(b) ) ph ( 11(c) ) ( 11(d) ph ( 11(e) ) ( 11(f) ) 16

17 1000 [30] [31] (Cation-Selective Exhaustive Injection-Sweeping-Micellar Electrokinetic Chromatography CSEI-sweeping-MEKC) ( ) ( 12(a) ) ( 12(b) ) ( 12(c) ) ( 12(d) ) ph ( 12(e) ) [32] [33] 17

18 (Large-volume sample stacking-sweeping-micellar Electrokinetic Chromatography LVSS-sweeping-MEKC) 1000 (Inlet ) ( ) ph ( 13(a) ) ( 13(b) ) 90% ( ) ( 13(c) ) ph ( 13(d) ) ph ( 13(e) 18

19 3.1 [34-35] (GC) (HPLC) ppm [34-38] ppm [39-41] ppb

20 3.2 UV ppb ppt (SDS) SDS SDS ph SDS SDS (disodium hydrogen phosphate Na 2 HPO 4 ) (Sodium hydroxide NaOH) Fluka(Buchs Switzerland) (Sodium dodecyl 20

21 sulfate SDS) (Methyl p-hydroxybenzoate) (Ethyl p-hydroxybenzoate) (Propyl p-hydroxybenzoate) (Butyl p-hydroxybenzoate) Sigma(St. Louis MO USA) (Isopropyl p-hydroxybenzoate) (Isobutyl p-hydroxybenzoate) Tokyo Chemical Industry(Tokyo Japan) (Citric acid) (Methanol) Merck (Darmstadt Germany) 14 Milli-Q (Millipore Bedford MA USA) 0.22 µm 18.2 mω (Beckman Instrument Fullerton CA USA) P/ACE MDQ - (UV-VIS diode array) P/ACE MDQ 50 µm cm 50 cm 0.5 cm kv (0.5 p.s.i.) 210 nm / (75:25, v/v) 1 mg/ml 4 / 21

22 (SDS) µm 360 µm 60 cm 50 cm 0.5 cm MDQ 1N HCl 1N NaOH kv 210 nm 25 1N NaOH 5 1N NaOH 15 1N NaOH

23 (capacity factor, k) (SDS) k 15 SDS 10% 30% 30% SDS (SDS) ph SDS (k) (14) SDS k 23

24 k = K (V S /V M ) (14) k (capacity factor) K ( partition coefficient) V S ( ) V M 16 30% SDS 80 mm 100 mm 120 mm 150 mm SDS SDS 150 mm SDS ph SDS SDS 150 mm SDS SDS 150 mm ph ph ph 17 ( ) ( ) ph ph

25 ph O 2 H + H 2 OH - ph ph ph Zeta 18 ph mm SDS 30% 15 mm 25 mm 50 mm 75 mm 75 mm 25 mm 25 mm 75 mm mm

26 (SDS) SDS SDS Terabe [42] 19 ph mm SDS 30% 25 mm 15 mm 25 mm 50 mm 75 mm 100 mm 75 mm SDS 100 mm SDS 75 mm

27 SDS SDS (stacking efficiency SE)[31] (SE height ) SE height = H stack H x C C stack (15) H stack H C stack C 27

28 % 17.6 ppb ppb 20.6 ppb (SDS) MEKC ph 2.6 / SDS SDS SDS 28

29 ( inlet ) SDS SDS SDS SDS ph mm / 30% 150 mm SDS -25 kv 0.5 psi 240 ph mm / ( SDS) 28.4 ppb 29

30 4.1 phenolic acids (flavonoids [43-44] ( phenolic acids depsides) (caffeic acid) ferulic acid (chlorogenic acid) [44-48] 30 [44,46] [47-48] ppm ppm [49] ppb (caffeic acid) ferulic acid (chlorogenic acid) p-coumaric acid (p-hydroxybenzoic acid) vanillic acid (sinapic acid) (syringic acid) 30

31 ppb 4.2 ASEI-sweeping-MEKC ph (LVSS-sweeping-MEKC) ph 90% 1000 (LVSS-sweeping-MEKC) (ASEI-sweeping-MEKC) 31

32 (chlorogenic acid) (disodium hydrogen phosphate Na 2 HPO 4 ) (Sodium hydroxide NaOH) Fluka(Buchs Switzerland) (Sodium dodecyl sulfate SDS) (caffeic acid) ferulic acid p-coumaric acid (p-hydroxybenzoic acid) vanillic acid (sinapic acid) (syringic acid) Sigma(St. Louis MO USA) (citric acid) (Methanol) Merck (Darmstadt Germany) 22 Milli-Q (Millipore Bedford MA USA) 0.22 µm 18.2 mω (Beckman Instrument Fullerton CA USA) P/ACE MDQ - (UV-VIS diode array) P/ACE MDQ 50 µm cm 50 cm 0.5 cm kv (5 p.s.i.) -20 kv 210 nm 32

33 4.3.3 / (75:25, v/v) 1 mg/ml 4 (SDS) µm 360 µm 60 cm 50 cm 0.5 cm MDQ 1N HCl 1N NaOH kv 90% -30 kv 210 nm 25 1N NaOH 10 1N NaOH 15 1N NaOH 15 33

34 kv -7 µa (-7.82µA) 90% 5.1 min -30 kv 24 4 min 6 min 5.1 min SDS (SDS) SDS ( ) ( ) SDS SDS (k) 25 34

35 SDS 120 mm 150 mm 180 mm (14) SDS k sinapic acid ferulic acid p-coumaric acid chlorogenic acid caffeic acid syringic acid vanillic acid p-hydroxybenzoic acid SDS ph SDS SDS 180 mm SDS SDS 180 mm ph ph ph ph ph 26 ( ) ( ) ph ph 2.6 ph 3.0 ph 2.6 ph ph SDS ph

36 4.4.4 Zeta ( ) ( ) SDS SDS 27 ph mm 15 mm 25 mm 50 mm 75 mm 15 mm 75 mm SDS SDS ph SDS 15 mm 36

37 4.4.5 SDS ( ) 28 ph mm SDS 15 mm 15 mm 25 mm 50 mm 3.8 min 5.1 min 9.8 min ( ) 15 mm 25 mm 50 mm 25 mm 50 mm mm (LVSS- sweeping-mekc) (ASEI-sweeping-MEKC) 37

38 LVSS sweeping-mekc ASEI-sweeping-MEKC LVSS-sweeping-MEKC 29 0% 15% 30% LVSS-sweeping-MEKC ASEI-sweeping-MEKC 0% 100% ASEI-sweeping-MEKC LVSS-sweeping-MEKC 30 0 ppm 1 ppm 2 ppm LVSS-sweeping-MEKC ASEI-sweeping-MEKC 0 ppm 100% 38

39 ASEI-sweeping-MEKC LVSS-sweeping-MEKC 10% LVSS-sweeping-MEKC LVSS-sweeping-MEKC LVSS-sweeping-MEKC ~ ppb 31 LVSS-sweeping-MEKC Sweeping 40~80 32 LVSS-sweeping-MEKC ASEI-sweeping-MEKC ASEI-sweeping-MEKC LVSS-sweeping-MEKC 2~3 ASEI-sweeping-MEKC LVSS-sweeping-MEKC 39

40 LVSS-sweeping-MEKC ASEI-sweeping-MEKC 3 4 LVSS-sweeping-MEKC 1.95% ASEI-sweeping-MEKC 2.89% ASEI-sweeping-MEKC LVSS-sweeping-MEKC LVSS-sweeping-MEKC 3.7 ppb 5000 ~8000 ASEI-sweeping-MEKC 0.91 ppb ASEI-sweeping-MEKC LVSS-sweeping-MEKC 4.5 (SDS) (LVSS-sweeping-MEKC) 5000~8000 ph

41 90% SDS SDS SDS SDS 25 mm (LVSS -sweeping-mekc) (ASEI-sweeping-MEKC) ASEI-sweeping-MEKC LVSS-sweeping-MEKC ppt LVSS-sweeping-MEKC 5000~8000 ph mm / 5 psi 7 min -20 kv 5.1 min ph mm / 150 mm SDS -30 kv 3.7 ppb ASEI-sweeping-MEKC : ph mm / 150 mm SDS ph mm / -30 kv -20 kv 18 min 0.91 ppb 41

42 ( ) LVSS ph ( ) ( ) SDS SDS 42

43 SDS SDS SDS ( ) (SDS) SDS SDS ( ) ( ) 43

44 SDS SDS ( ) ph 44

45 1. A. Tiselius, Trans. Faraday. Soc. 33 (1937) S. Hjerten, Chromatogr. Rev. 9 (1967) R. Virtanen, Acta polytech. Scand. 1 (1974) J. W. Jorgenson and K. D. Lukacs, Anal. Chem. 53 (1981) J. W. Jorgenson and K. D. Lukacs, J. Chromatogr. 218 (1981) S. Terabe, K. Otsuka, T. Ando, K. Ichikawa and A. Tsuchiya, Anal. Chem. 56 (1984) S. Terabe, K. Otsuka, T. Ando, Anal. Chem. 57 (1985) F. E. P. Moring, J. C. Colburn, P. D. Grossman, H. H. Lauer, LC-GC Intl. 3 (1990) R. L. Chien, D. S. Burgi, Anal. Chem. 64 (1992) 489A. 10. R. L. Chien, D. S. Burgi, Anal. Chem. 63 (1991) R. L. Chien, D. S. Burgi, Anal. Biochem. 202 (1992) S. Liu, Q. Li, X. Chen, Z. Hu, Electrophoresis 23 (2002) S. Morales, R. Cela, Electrophoresis 23 (2002) G. Manetto, F. Tagliaro, F. Crivellente, V. L. Pascali, M. Marigo, Electrophoresis 21 (2000) H. Y. Huang, C. W. Chiu, S. L. Sue, C. F. Cheng, J. Chromatogr. A 995 (2003) Z. Zhu, L. Zhang, A. Marimuthu, Z. Yang, Electrophoresis 24 (2003) Z. Zhu, L. Zhang, A. Marimuthu, Z. Yang, Electrophoresis 23 (2002) P. B. McKibbin, S. Terabe, The Chemical Record 6(2002) J. B. Kim, Y. Okamoto, S. Terabe, J. Chromatogr. A 1018 (2003) B. M. Philip, K. Otsuka, and S. Terabe, Anal. Chem. 74 ( 2002) M. J. Markuszewski, P. B. McKibbin, S. Terabe, K. Matsuda, T. 45

46 Nishioka, J. Chromatogr. A 989 (2003) M. N. Monton, J. P. Quirino, K. Otsuka, S. Terabe J. Chromatogr. A 939 (2001) J. P. Quirino, J. B. Kim, S. Terabe J. Chromatogr. A 965 (2002) J. B. Kim, J. P. Quirino, K. Otsuka, S. Terabe J. Chromatogr. A 916 (2001) J. B. Kim, K. Otsuka, S. Terabe J. Chromatogr. A 916 (2001) J. B. Kim, K. Otsuka, S, Terabe J. Chromatogr. A 979 (2002) R. B. Taylor, R. G. Reid, A. S. Low, J. Chromatogr. A 916 (2001) A. Gavenda, J. Sevcik, J. Psotova, Petr. Bednar, Electrophoresis 22 (2001) C. Fang, J. T. Liu, C. H. Lin, Electrophoresis 24 (2003) J. B. Kim, K. Otsuka, S, Terabe, J. Chromatogr. A 932 (2001) L. Zhu, C. Tu, H. K. Lee Anal. Chem. 74 (2002) K. Isoo, S. Terabe Anal. Chem. 75 (2003) J. P. Quirino, S. Terabe Anal. Chem. 72 (2000) G. Burini, P. Damiani, J. Chromatogr. 543 (1991) A. Montano, A. H. Sanchez, L. Rejano, Analyst 120 (1995) G. Burini, J. Chromatogr. A 664 (1994) H. Terada, Y. Sakabe, J. Chromatogr. 346 (1985) B. H. Chen, S. C. Fu, Chromatographia 41 (1995) D. Kaniansky, M. Masar, V. Madajova, J. Marak, J. Chromatogr. A 677 (1994) C. O. Thompson, V. C. Trenerry, B. Kemmery, J. Chromatogr. A 694 (1995) C. O. Thompson, V. C. Trenerry, B. Kemmery, J. Chromatogr. A

47 (1995) J. P. Quirino, J. B. Kim, S. Terabe, J. Chromatogr. A 965 (2002) M. T. Huang, T. Ferraro, C. T. Ho, American Chemical Society, Washington, DC, 1994, p S. Shahrzad, I. Bitsch, J. Chromatogr. A 741 (1996) B. S. Dhingra, A. Davis, J. Chromatogr. 447 (1988) S. N. Onyeneho, N. S. Hettiarachchy, J. Agric. Food Chem. 40 (1992) G. P. Cartoni, F. Coccioli, L. Pontelli, J. Chromatogr. 537 (1991) F. Buiarelli, G. Cartoni, F. Coccioli, Z. Levetsovitiu, J. Chromatogr. A 685 (1995) G. Cartoni, F. Coccioli, R. Jasionowska, J. Chromatogr. A 709 (1995) J. Vindevogel, P. Sandra, Introduction of Micellar Electrokinetic Chromatography (1997). 51. D. M. Osbourn, D. J. Weiss, C. E. Lunte, Electrophoresis 21(2000) W. H. Ding, C. H. Liu, J. Chromatogr. A 929(2001) J. P. Quirino, J. B. Kim, S. Terabe, J. Chromatogr. A 965(2002) M. G. Khaledi, J. Chromatogr. A 780(1997) J. P. Quirino, S. Terabe, Science 282(1998)

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