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拾羊
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1 Vol. 34 高等学校化学学报 No 年 12 月摇摇摇摇摇摇 CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES 摇摇摇摇摇摇 2699 ~ 2703 摇摇 doi: / cjcu 神经递质类相关物质的毛细管电泳分离及实际尿液的检测应用杨娇美 1, 任摇杰 2, 刘慧青 1, 王永乐 1 1, 徐中其 (1. 东华大学化学化工与生物工程学院, 上海 ; 2. 上海体育学院运动科学学院, 上海 ) 摘要摇建立了单胺类神经递质 (5 鄄羟色胺多巴胺和肾上腺素 ) 神经递质类代谢产物 ( 高香草酸 5 鄄羟吲哚乙酸和香草扁桃酸 ) 及神经递质类前体 ( 精氨酸和酪氨酸 ) 混合物的毛细管电泳 ( CE) 分离方法. 利用标准试剂混合样考察了缓冲体系的组成 ph 值及添加剂对分离的影响, 并探讨了尿液中基体成分如肌酸酐尿酸和乙酰乙酸对分离的干扰. 在 Na 2 鄄 NaOH 缓冲体系 ( ph = 9 郾 90) 及紫外 ( UV) 检测 ( 波长 200 nm) 条件下对 8 种神经递质类相关物质的分析获得了良好的定量线性关系, 检出限 ( LOD) 为 0 郾 04 ~ 0 郾 60 滋 mol / L, 迁移时间和峰面积的相对标准偏差 (RSD, n = 5) 范围分别为 0 郾 09%~ 0 郾 48% 和 0 郾 47%~ 3 郾 34%. 利用该方法对实际尿液中的精氨酸和香草扁桃酸进行了定性和定量分析, 其定量结果分别为 (95 郾 8 依 3 郾 8) 和 (44 郾 6 依 3 郾 5) 滋 mol / L, 加标回收率为 96 郾 65% ~ 104 郾 5%. 关键词摇毛细管电泳 ; 神经递质 ; 尿液 ; 代谢产物中图分类号摇 O 摇摇摇摇文献标志码摇 A 在哺乳动物和人类的外周和中枢神经系统中, 不同种类和浓度水平的神经递质对神经兴奋性升高和降低起着不同作用, 如当存在某种来自于心理反应和环境压力的刺激时, 会促使血液中儿茶酚胺浓度水平增加, 导致向身体各个部位传递一种战或逃反映冶 [1]. 神经递质类相关物质 ( 包括其代谢产物和前体 ) 能在一定程度上反映生物体内神经递质的浓度变化和相互调节作用, 因此在神经生物学疾病诊断和新药开发等领域对神经递质的分析检测成为首要任务之一, 以此了解神经功能失调疾病的发病机理并采取相应的药物治疗 [2]. 鉴于神经递质类相关物质的合成储存及释放位置的特征, 通常通过动物实验来检测鼠脑脊髓和血浆中此类物质的浓度 [3,4], 为人类神经疾病的治疗提供理论参考依据. 尿液作为人体代谢产物的最终排出途径, 采样简便且神经递质类代谢物丰富, 与脑脊髓或血浆分析相比具有明显优势 [5,6]. 目前, 高效液相色谱鄄电化学检测 ( HPLC 鄄 ECD) 是报道最多的神经递质类相关物质的分析方法, 它将 HPLC 的高分离性能和 ECD 的高灵敏度相结合, 可实现对生物样品中痕量该类物质的分离和检测 [3,7]. 特别是各种修饰电极的研制和应用使 ECD 方法具有更高的灵敏度选择性及稳定性 [8]. 与 HPLC 相比, 毛细管电泳 (CE) 的优势在于样品的前处理简单消耗量小 (nl 级别 ), 更少的试剂消耗更快的分离速度和更高的分离性能, 因此利用 CE 对神经递质进行分离具有一定的优势. CE 的劣势在于较低的检测灵敏度, 为了解决此问题, 可采用高灵敏的监测方法, 例如电化学检 [9 ~ 测 11] [5,6,12,13] [14] 化学发光和激光诱导荧光等方法 ; 或采用电泳 stacking 技术, 即通常所说的柱内预浓缩来改善灵敏度 [15,16]. 如果将二者结合, 对神经递质检测的检出限 (LOD) 则可达到 mol / L [11]. 本文基于 CE 技术建立了同时分离 8 种神经递质类相关物质 ( 含 3 种单胺类神经递质 3 种神经递质的代谢产物和 2 种神经递质的前体 ) 的方法, 该方法分离种类多, 无需化学发光的衍生过程, 可在只配备紫外检测器的商用仪器上实现. 同时研究了尿液中 3 种基体成分 ( 肌酸酐尿酸和乙酰乙酸 ) 对分收稿日期 : 2013 鄄 08 鄄 29. 基金项目 : 上海市科委创新行动计划冶部分地方院校能力建设专项 ( 批准号 : ) 和中央高校基本科研业务费专项 ( 批准号 : 2012D10514) 资助. 联系人简介 : 任摇杰, 男, 博士, 副教授, 主要从事体育运动科学研究. E 鄄 mail: renjie@ sus. edu. cn 徐中其, 男, 博士, 副教授, 主要从事毛细管电泳分离技术研究. E 鄄 mail:chemxzq@ dhu. edu. cn

2 2700 高等学校化学学报摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇 Vol. 34 摇离的影响, 获得的 LOD 可满足尿液中痕量物质的测定. 采用本文方法对实际尿液中的神经递质类相关物质进行了定性和定量分析, 结果表明该方法具有便捷灵敏和实用性. 1 摇实验部分 1. 1 摇仪器与试剂 P / ACE TX MDQ 毛细管电泳仪 ( 美国贝克曼库尔特公司 ), 配备二极管阵列检测器 ( PDA), 可检测波长范围 190 ~ 600 nm, 数据处理使用自带 32 Karat 软件 ; 非涂层石英毛细管 (60 cm 伊 75 滋 m i. d., 有效长度 50 cm) 购于永年锐沛色谱器件公司 ; 超纯水由 Milli 鄄 Q 纯水机 ( 德国默克密理博公司 ) 制得. 标准样品 5 鄄羟色胺 (5 鄄 HT) 多巴胺 ( DA) 肾上腺素 ( EP) 高香草酸 ( HVA) 5 鄄羟吲哚乙酸 (5 鄄 HIAA) 香草扁桃酸 (VMA) 精氨酸 (Arg) 酪氨酸 (Tyr) 肌酸酐 (Cr) 和乙酰乙酸 (AcAcOH) 均为分析纯, 购自 Sigma 鄄 Aldrich 公司 ; 尿酸 (UA, 分析纯 ) 购于上海国药试剂公司. 由于 UA, Tyr 和 EP 在水中的溶解性差, 因此将 UA 溶解在浓氨水溶液, Tyr 和 EP 溶解在 1 郾 0 mol / L HCl 溶液中制得储备液, 其余标样的储备液用超纯水溶解后制得. 将储备液保存于 4 益冰箱中, 每次使用前用超纯水稀释到所需的浓度. 四硼酸钠 (Na 2 10H 2 O) 和 NaOH 分别购于 Sigma 鄄 Aldrich 和上海凌峰化学试剂, 最终优化的 CE 背景缓冲液 (BGE) 为 12 郾 5 mmol / L Na 2 (ph = 9 郾 90, 由 0 郾 1 mol / L NaOH 调节配制 ) 摇实际尿样采集与保存提供实际尿样的志愿者为上海体育学院的男性中长跑运动员 (18 岁, 体重约 60 kg, 身高约 172 cm), 身体健康, 无急慢性病史. 在自然状态下取晨尿的中间尿段 ( 即每次排尿时最开始的 10 ~ 20 ml 舍弃, 收集随后的中间尿段, 约 15 ml), 立即离心 8 min( 转速 r / min) 除去悬浮物, 取其上清液加入 2 滴甲醛防腐, 然后将上清液等分 3 份后于 -20 益冷冻保存, 进行 CE 分析前常温解冻即可摇 CE 操作条件实验开始时将新毛细管依次用 0 郾 1 mol / L NaOH, 超纯水和 BGE 分别冲洗 20, 2 和 10 min, 连续分析过程中毛细管只用超纯水和 BGE 分别冲洗 2 和 3 min 即可. 采用约 3 郾 45 kpa 的压力进样 20 s, 分离电压为 +25 kv, PDA 检测波长为 200 nm. 2 摇结果与讨论 2. 1 摇 CE 分离缓冲体系的优化摇缓冲体系的选择摇简单稳定的缓冲体系在 CE 分离过程中起重要作用, 对于神经递质类相关物质的 CE 分离报道最多的缓冲体系是磷酸和四硼酸钠体系. 本实验先期研究了 8 种神经递质类相关物质和 3 种尿液基体成分在柠檬酸鄄柠檬酸钠体系磷酸盐体系 Tris 鄄 HCl 体系以及 Na 2 鄄 NaOH 体系中的分离情况. 结果表明, Na 2 鄄 NaOH 缓冲体系对 11 种混合物的分离明显优于其它 3 种缓冲体系, 因此选择四硼酸钠体系进一步优化 ph 和添加剂等条件摇体系 ph 的优化摇电渗流 (EOF) 和神经递质类相关物质的离子状态均受 ph 的影响, 因此考察了不同 ph 条件下混合物的分离情况, 图 1 示出了四硼酸钠体系 ph 分别为 9 郾 60, 9 郾 90 和 10 郾 10 时混合物分离的电泳图. 图 1 谱线 a 是以小段水柱作为样品来考察离子电迁移后的样品空白区带 (SVZ) 对部分峰形的影响 (BGE 为 Na 2 鄄 NaOH, ph = 9 郾 90), SVZ 被 EOF 带着以同等速度向检测器移动. 由图 1 可见, 在 3 郾 0 ~ 4 郾 0 min 之间峰形及基线受到 SVZ 的影响, 如 Arg, Cr 和 DA 3 种物质. EOF 受 ph 的影响一般具有 S 形状, 但对于 Na 2 鄄 NaOH 缓冲体系, 在 ph>9 郾 3 后会出现 EOF 随 ph 的升高而降低的反常现象 [17]. 由于各目标待测物的分子中存在羟基氨基或羧基等易受 ph 影响的官能团, 因此在不同 ph 条件下的电负性会发生变化, 如儿茶酚胺类物质在酸性 ( 低 ph) 条件下带正电, 而在 ph>9 郾 0 时带负电, 两种情况都可进行 CE 分离 [18,19]. 根据各分析物的 pka 值可知, 在 ph>9 郾 5 的条件下, 除 5 鄄 HT 和 Arg 为正离子在 EOF 之前出峰外, 其余物质都呈负电性. 在 ph = 9 郾 60 ~ 10 郾 10 时目标物出峰的顺序不发生变化. 图 1 结果表明, ph = 9 郾 90 是该缓冲体系下合适的 ph 值. 采用标准加入法对 11 种物质进行了定性分析, 各物质相应的出峰位置如图 1 谱线 c 所示, 可见在 7 郾 0 min 内即可完成分

3 摇 No. 12 摇杨娇美等 : 神经递质类相关物质的毛细管电泳分离及实际尿液的检测应用 2701 离. Arg 与 Cr 出峰位置相邻, 故尿液中大量的 Cr 可能会影响 Arg 的准确定量. UA 和 VMA 在该 BGE 中出峰位置也接近, AcAcOH 迁移时间最长, 对所选择的神经递质类目标组分无干扰摇 BGE 中添加剂的选择摇基于抑制 EOF 和提高分离度的考虑, 尝试在 BGE 中添加羟丙基纤维素 (HPC) 和十二烷基磺酸钠 (SDS). 在 12 郾 5 mmol / L Na 2 鄄 NaOH(pH = 9 郾 90) 中考察了 0 郾 1% 和 1 郾 0% ( 质量分数 )HPC 的影响, 发现 1 郾 0% HPC 虽然可以抑制 EOF 速度 ( 约为 12% ), 但通过 UV 吸收曲线可知加入 1 郾 0% HPC 后的 BGE 在 200 nm 处有较大吸收峰, 与未添加 HPC 相比, 样品峰的吸收明显减弱, 且添加 HPC 后 BGE 黏度增大, 所以最终未在缓冲体系中添加 HPC. 添加 SDS 后发现, 对 5 鄄 HT 及 DA 两种物质的 UV 吸收和出峰时间影响较大, 但对其它组分未见影响, 分离度改善的效果也不明 Fig. 1 摇 Electropherograms of 11 mixtures at different BGE ph a. Water as sample plug; b. ph = 9 郾 60; c. ph = 9 郾 90; d. ph = 10 郾 10 郾 BGE was 12 郾 5 mmol / L Na 2, ph was adjusted by 0 郾 1 mol / L NaOH. Concentrations of 5 鄄 HT, Arg, Cr, DA, EP, Tyr, 5 鄄 HIAA, HVA, VMA, UA and AcAcOH were 10 郾 0, 50 郾 0, 120 郾 0, 10 郾 0, 5 郾 0, 20 郾 0, 8 郾 0, 2 郾 0, 5 郾 0, 1 郾 5, 100 郾 0 滋 mol / L, respective 鄄 ly. Detection wavelength: 200 nm; injection: ca. 3 郾 45 kpa at 20 s; separation voltage: +25 kv. 显, 鉴于对 BGE 简单化考虑, 最终也未在该缓冲体系中添加 SDS 摇方法重现性检出限及线性范围在 CE 分析中, 出峰时间和峰面积影响物质的正确定性和定量, 因此考察了分析的日内精密度, 从连续 5 次分离的结果 ( 表 1) 来看, 8 种组分的出峰时间和峰面积 RSD 的范围分别为 0 郾 09%~ 0 郾 48% 和 0 郾 47%~ 3 郾 34%, 日内重现性良好. 对于日间精密度, 则受毛细管差异及 BGE 配制影响更大, 但所得时间和峰面积的 RSD 仍小于 5 郾 0%, 从而不影响定性和定量分析. Table 1 摇 Analysis of repeatability, LOD and linearity under the optimal CE conditions RSD(% )(n = 5) Analyte Concentration range / ( 滋 mol L -1 ) R 2 Time Area LOD / ( 滋 mol L -1 ) 5 鄄 HT 0 郾郾郾 12 0 郾 47 0 郾 23 Arg 摇 0 郾郾 0 0 郾郾 11 1 郾 22 0 郾 60 DA 1 郾 2 30 郾 0 0 郾郾 34 3 郾 34 0 郾 59 EP 1 郾 5 10 郾 0 0 郾郾 09 2 郾 63 0 郾 36 Tyr 0 郾郾 0 0 郾郾 48 0 郾 78 0 郾 16 5 鄄 HIAA 0 郾 5 70 郾 0 0 郾郾 23 1 郾 61 0 郾 24 HVA 0 郾郾 0 0 郾郾 09 3 郾 23 0 郾 04 VMA 0 郾 3 80 郾 0 0 郾郾 19 2 郾 05 0 郾 12 摇摇由于神经递质类相关物质在尿液中处于痕量水平, 所以灵敏度决定了方法对实际尿液分析的可适用性. 图 2 是 11 种标样混合物在 sub 滋 mol / L 浓度下的分离情况. 当样品浓度较低时, 受 SVZ 影响的物质的峰形和分离状况不佳, 会影响实际尿样中相关物质的定性和定量, 如 DA 出峰受 SVZ 影响导致峰面积的计算受干扰. 本实验中 8 种神经递质类相关物质的单一标样在该 CE 分离检测条件下的 LOD (S / N = 3) 范围为 0 郾 04 ~ 0 郾 60 滋 mol / L( 见表 1). 摇摇根据文献 [20] 报道的尿液中正常水平神经递质类相关物质的最大浓度, 如 5 鄄 HIAA 和 VMA 分别小于 50 和 45 滋 mol / L, 本文分别考察了各神经递质类物质单一标样和 8 种混合物标样两种情况下的线 Fig. 2 摇 Electropherogram of 11 mixtures at low concentrations Concentrations of 5 鄄 HT, Arg, Cr, DA, EP, Tyr, 5 鄄 HIAA, HVA, VMA, UA, AcAcOH were 0 郾 8, 4 郾 0, 75 郾 0, 1 郾 2, 1 郾 2, 1 郾 6, 0 郾 6, 0 郾 16, 0 郾 4, 0 郾 64, 1 郾 2 滋 mol / L, respectively. BGE, electrophore 鄄 tic and detection conditions were the same as those in Fig. 1.

4 2702 高等学校化学学报摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇 Vol. 34 摇性相关性. 表 1 示出了各单一标样在所考察的浓度范围内的线性关系, 可见线性相关系数 R 2 优异. 8 种混合标准溶液在相同浓度水平下的线性相关系数 R 2 虽然略低于各单一标样, 但均大于 0 郾 99, 表明混合样品在此浓度范围内仍可以被准确定量摇实际尿液中代谢组分的定性和定量分析人体每天新陈代谢的产物都会经肾脏后通过尿液排出体外, 所以对尿液中代谢产物的定性和定量研究可用于探究人体的健康状况以及作为早期疾病的诊断. 将本文方法应用于实际尿样中神经递质类相关物质的分离分析, 尿样的来源和处理见 1 郾 2 节, 将尿样自然解冻后用超纯水稀释后直接进样. 为了避免毛细管壁对尿液组分的吸附而影响后续分析, 在每次实际尿样分析之间需用 0 郾 1 mol / L NaOH 超纯水和 BGE 进行充分冲洗以保证毛细管壁基本处于相同的状态. 在此条件下, 每个样品测定 3 次, 以保证出峰时间和峰面积的 RSD<3%. 图 3 为采集的实际尿样稀释 5 倍后的电泳图, 与图 2 相比, 出峰时间的差异可能是实际尿液中高浓度的无机盐和其它基体成分的影响所致. 由图 3 可见, CE 较高的分离能力使谱图出峰比较复杂, 要想对尿液中的每一个组分进行鉴定是非常繁琐艰巨的工作. 在尿液代谢组学研究中, 通常针对特定的疾病来探寻尿液中的特征物质. 实验中对该尿液的部分组分采用标准加入法进行定性分析, 如图 3 中所示的 Arg, Cr, VMA 和 UA. 此外, 对尿液中的 Arg 和 VMA 采用标准曲线法进行了定量, 该尿液样品中 Arg 和 VMA 的定量结果为 (95 郾 8 依 3 郾 8) 滋 mol / L 和 (44 郾 6 依 3 郾 5) 滋 mol / L( n = 3 ). 通过在稀释 5 倍的实际尿样中添加不同浓度的 Arg 和 VMA, 得到了该 2 种目标物的加标回收率 ( 见表 2). 选择 Arg 和 VMA 进行定量分析是因为它们作为神经递质类前体和神经递质代谢产物与运动员的疲劳状态和程度息息相关, 希望通过在分子水平上监控尿液中的此类神经递质相关物质, 提供另外的可能途径, 从而更加科学和直接地评判运动员的疲劳程度, 后续尿液中 Arg 和 VMA 浓度与运动员疲劳程度的相关性研究正在继续. Fig. 3 摇 Electropherograms of the diluted urine sample(a) and spiked with Arg(B) and VMA(C) (B) a. Original urine, b. spiked with 60 滋 mol / L Arg, c. spiked with 120 滋 mol / L Arg; (C) a. original urine, b. spiked with 20 滋 mol / L VMA, c. spiked with 40 滋 mol / L VMA. The used BGE, electrophoretic and detection conditions were the same as those in Fig. 1. Table 2 摇 Recovery of 5 鄄 fold diluted urine sample spiked with Arg and VMA Analyte Background concentration / ( 滋 mol L -1 ) Added / ( 滋 mol L -1 ) Detected / ( 滋 mol L -1 ) Recovery(% ) Arg 19 郾郾郾郾 5 45 郾郾郾 1 30 郾郾郾 1 VMA 8 郾郾郾郾 8 40 郾郾郾郾郾郾 9 摇摇综上所述, 本文建立了检测单胺类神经递质神经递质类前体和代谢产物的 CE 分析方法, 研究了 BGE 组成 ph 及添加剂等因素对 11 种标样混合物分离的影响. 在优化条件下考察了方法的重现性线性范围和检出限, 结果表明该 CE 方法能够满足定性和定量分析的要求, UV 检测下目标物的 LOD 为 0 郾 04 ~ 0 郾 60 滋 mol / L. 采用该方法分析了实际尿样, 对其中部分组分进行了定性分析, 特别是对神经递质前体 Arg 和神经递质代谢产物 VMA 进行了定量分析. 通过本研究, 希望将来能够实现在分子水平上检测尿液中的代谢成分, 并且应用于体育运动科学.

5 摇 No. 12 摇杨娇美等 : 神经递质类相关物质的毛细管电泳分离及实际尿液的检测应用 2703 参摇考摇文摇献 [ 1 ] 摇 Lee J., Harley V. R., BioEssays, 2012, 34(6), [ 2 ] 摇 Lu Z. Y., Zhao H., Wang T., Chen J., Zhang Q. J., Jin H., Li W. T., J. Tradit. Chin. Med., 2011, 52(14), ( 陆征宇, 赵虹, 汪涛, 陈洁, 张琦君, 金环, 李文婷. 中医杂志, 2011, 52(14), ) [ 3 ] 摇 Lin L., Yu L., Lin R. P., Li X. Y., Yang S. L., Li X. K., Chin. J. Anal. Chem., 2011, 39(7), ( 林丽, 余莉, 林瑞泼, 李雪燕, 杨树林, 李校堃. 分析化学, 2011, 39(7), ) [ 4 ] 摇 Yoshitake T., Fujino K., Kehr J., Ishida J., Nohta H., Yamaguchi M., Anal. Biochem., 2003, 312(2), [ 5 ] 摇 Xu X. D., Zhang H. Y., Shi H. M., Ma C. L., Cong B., Kang W. J., Anal. Biochem., 2012, 427(1), [ 6 ] 摇 Liu Y. M., Wang C. Q., Mu H. B., Cao J. T., Zheng Y. L., Electrophoresis, 2007, 28(12), [ 7 ] 摇 Lin L., Yang X. F., Li Y., Qiu P. H., Cao X. N., Jin L. T., Chin. J. Anal. Chem., 2005, 33(5), ( 林丽, 杨小凤, 李永, 仇佩虹, 曹旭妮, 金利通. 分析化学, 2005, 33(5), ) [ 8 ] 摇 Yang L. J., Peng T. Z., Chem. J. Chinese Universities, 2001, 22(2), ( 杨丽菊, 彭图治. 高等学校化学学报, 2001, 22 (2), ) [ 9 ] 摇 Sun J. Y., Xu X. Y., Yu H., You T. Y., Chem. Res. Chinese Universities, 2012, 28(3), [10] 摇 Zhou X. G., Sun J. Y., Zhu D. R., Yuan B. Q., You T. Y., Chem. Res. Chinese Universities, 2008, 24(2), [11] 摇 Weng Q. F., Xu G. W., Yuan K. L., Tang P., J. Chromatogr. B, 2006, 835(1 / 2), [12] 摇 Tsai H. C., Whang C. W., Electrophoresis, 1999, 20(12), [13] 摇 Hu Y. G., Li X. X., Pang Z. T., J. Chromatogr. A, 2005, 1091(1 / 2), [14] 摇 Rom 佗 n D. A., Carretero A. S., Blanco C. C., Guti 佴 rrez A. F., Biomed. Chromatogr., 2004, 18(7), [15] 摇 Huang H., Chen Z. J., Yan X. M., J. Sep. Sci., 2012, 35(3), [16] 摇 Tseng W. L., Chen S. M., Hsu C. Y., Hsieh M. M., Anal. Chim. Acta, 2008, 613(1), [17] 摇 Vindevogel J., Sandra P., J. Chromatogr., 1991, 541(1), [18] 摇 Zhu R., Kok W. T., Anal. Chem., 1997, 69(19), [19] 摇 Chang H. T., Yeung E. S., Anal. Chem., 1995, 67(6), [20] 摇 Paquette D. M., Sing R., Banks P. R., Waldron K. C., J. Chromatogr. B Biomed. Sci. Appl., 1998, 714(1), Separation and Detection of Neurotransmitter 鄄 related Substances in Urine Sample by Capillary Electrophoresis YANG Jiao 鄄 Mei 1, REN Jie 2*, LIU Hui 鄄 Qing 1, WANG Yong 鄄 Le 1, XU Zhong 鄄 Qi 1* (1. College of Chemistry, Chemical Engineering and Biotechnology, Donghua University, Shanghai , China; 2. School of Kinesiology, Shanghai University of Sport, Shanghai , China) Abstract 摇 Capillary electrophoresis(ce) method was developed to separate the mixture of monoamine neuro 鄄 transmitters(serotonin, dopamine, epinephrine), neurotransmitter metabolites(homovanillic acid, 5 鄄 hydroxyl indole acetic acid, vanilmandelic acid) and neurotransmitter precursors( arginine, tyrosine). The composi 鄄 tions, ph and concentration of background electrolyte( BGE) were optimized to separate the standard samples, meanwhile, the possible interferences by matrix components in urine as creatinine, uric acid and acetoacetic acid were investigated. Good quantitative linearity was obtained at the BGE of Na 2 鄄 NaOH(pH = 9 郾 90) and ultraviolet(uv) detection(200 nm) for eight neurotransmitter 鄄 related substances, which owned the limit of detection(lod) in a range of 0 郾 04 7 郾 00 滋 mol / L. Relative standard deviation(rsd)(n = 5) of migration time and peak area were 0 郾 09% 0 郾 48% and 0 郾 47% 3 郾 34%, respectively. Eventually, the developed CE method was applied for the qualitative and quantitative analysis of arginine ( Arg) and vanilmandelic acid (VMA) in urine sample. Their concentrations were respectively at (95 郾 8 依 3 郾 8) 滋 mol / L and (44 郾 6 依 3 郾 5) 滋 mol / L with the recovery at a range of 96 郾 65% 104 郾 5%. Keywords 摇 Capillary electrophoresis; Neurotransmitter; Urine; Metabolite (Ed. : P, H, N, K)

说明为了反映教运行的基本状态, 为校和院制定相关政策和进行教建设与改革提供据依据, 校从程资源 ( 开类别开量规模 ) 教师结构程考核等维度, 对 2015 年春季期教运行基

说明为了反映教运行的基本状态, 为校和院制定相关政策和进行教建设与改革提供据依据, 校从程资源 ( 开类别开量规模 ) 教师结构程考核等维度, 对 2015 年春季期教运行基内部资料东北师范大教运行基本状态据报告 2015 年春季期教务处 2015 年 10 月 27 日说明为了反映教运行的基本状态, 为校和院制定相关政策和进行教建设与改革提供据依据, 校从程资源 ( 开类别开量规模 ) 教师结构程考核等维度,