临床与病理杂志 J Clin Pathol Res 2017, 37(10) doi: /j.issn View this article at:
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- 杉莉 邹
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1 临床与病理杂志 J Cli athol Res 2017, 37(10) doi: /j.iss View this article at: 乳腺癌中 EZH2,MM-2 和 MM-9 蛋白表达及其临床意义 嵇晓辉, 闫琛, 刘红伟, 杨金花 ( 郑州人民医院病理科, 郑州 ) [ 摘要 ] 目的 : 探讨组蛋白甲基转移酶 (ehacer of zeste homolog 2,EZH2),MM-2 和 MM-9 在乳腺癌组织中的表达, 并分析三者的表达与乳腺癌临床病理特征的关系 方法 : 采用免疫组织化学 S 法检测 147 例乳腺癌 58 例正常乳腺组织和 58 例乳腺良性肿瘤组织中 EZH2, MM-2 和 MM-9 蛋白表达, 分析三者间的关系 并将三者的表达与乳腺癌的临床病理特征进行相关性分析 结果 :EZH2,MM-2 和 MM-9 蛋白在乳腺癌组织中的表达显著高于正常乳腺组织及乳腺良性肿瘤组织 ( 均 <0.001) EZH2,MM-2 和 MM-9 蛋白表达与乳腺癌患者年龄 绝经状态 肿瘤直径及组织学分类均无关, 而与患者淋巴结转移有关 (<0.001) 结论:EZH2,MM-2 和 MM-9 可能与乳腺癌的发生发展密切相关, 三者联合检测可为乳腺癌的诊疗分析研究提供新的参考指标 [ 关键词 ] 乳腺癌 ; 组蛋白甲基转移酶 ;MM-2;MM-9 Expressio of EZH2, MM-2 ad MM-9 i breast cacer ad their cliical sigificace JI Xiaohui, YAN Che, LIU Hogwei, YANG Jihua (Departmet of athology, eople s Hospital of Zhegzhou, Zhegzhou , Chia) Abstract Keywords Objective: To explore the expressio of ehacer of zeste homolog 2 (EZH2), MM-2 ad MM-9 i breast cacer ad to aalyze their relatioship with the cliical pathologic characteristics. Methods: The expressio of EZH2, MM-2 ad MM-9 protei were detected by S immuohistochemical method i 147 breast cacer tissues, 58 ormal breast tissues ad 58 beig breast tumor tissues, ad the relatioship amog the three groups were aalysed. The correlatio of the EZH2, MM-2 ad MM-9 protei expressio with the cliicopathological features were also aalyzed. Results: ositive itesity of EZH2, MM-2 ad MM-9 i breast cacer were sigificatly higher tha that i ormal breast tissues ad beig breast tumor (<0.001). I breast cacer the expressio of EZH2, MM-2 ad MM-9 were ot correlated with patiet age, meopausal status, the tumor size ad histological types, but were correlated with the lymph ode metastasis (<0.001). Coclusio: EZH2, MM- 2 ad MM-9 may be closely related to the pathogeesis ad progressio of breast cacer. The joit detectio of the 3 idictors of EZH2, MM-2 ad MM-9 i huma breast cacer tissue may cotribute to cacer diagosis ad treatmet, ad provide a referece to the study of breast cacer. breast cacer; ehacer of zeste homolog 2; MM-2; MM-9 收稿日期 (Date of receptio): 通信作者 (Correspodig author): 杨金花, @163.com
2 2068 临床与病理杂志, 2017, 37(10) 乳腺癌是严重威胁女性健康的恶性肿瘤, 其发病率和病死率逐年上升 组蛋白甲基转移酶 (ehacer of zeste homolog 2,EZH2) 定位于人类染 色体 7q35.7q36 上, 是 cg 基因家族的重要成员之 一 [1] [2-4] 研究发现 :EZH2 在多种肿瘤中高表达, 具有促进细胞增殖 肿瘤细胞扩散的恶性表现 MMs 是一组锌离子依赖性内肽酶, 其中 MM-2 和 MM-9 在癌症侵袭转移中发挥重要作用 [5-7] 本 研究采用免疫组织化学 S 法检测 EZH2,MM-2 和 MM-9 在乳腺癌组织中的表达, 并分析三者与乳 腺癌临床病理特征的关系, 探讨三者对乳腺癌发 生 发展的影响 制片后, 进行抗原修复, 一抗 37 孵育 2 h, 二抗 37 孵育 20~30 mi,dab 显色 5~10 mi,bs 代替一抗作为阴性对照 1.3 结果判断 EZH2 蛋白以细胞核 MM-2,MM-9 蛋白以胞质出现清晰的棕黄色颗粒为阳性, 每张选取 5 个高倍视野 计分标准如下 :1) 按细胞阳性率计分, 阳性细胞数 <5% 为 0 分,6%~25% 为 1 分,26%~50% 为 2 分,51%~75% 为 3 分,>75% 为 4 分 2) 按细胞染色强度计分, 细胞未染色为 0 分, 淡黄色为 1 分, 棕黄色为 2 分, 棕褐色为 3 分 两项得分相乘 >2 分为阳性 1 材料与方法 1.1 材料收集郑州人民医院病理科 2015 年 6 月至 2016 年 12 月存档的活检标本, 包括 147 例乳腺癌 58 例正常乳腺组织和 58 例乳腺良性肿瘤, 所有标本经病理科确诊, 患者均无远处转移, 术前均未行放射 化学治疗 本研究已获郑州人民医院医学伦理委员会批准 1.2 方法兔抗人 EZH2 多克隆抗体和鼠抗人 MM-2, MM-9 单克隆抗体 ( 即用型 ) 二抗及 DAB 均购自福州迈新公司 免疫组织化学采用 S 法, 常规石蜡 1.4 统计学处理 应用 SSS 17.0 软件进行统计学分析 各组间 表达采用 检验, 相关性采用 earso 相关性分析 <0.05 为差异有统计学意义 2 结果 2.1 EZH2,MM-2 和 MM-9 在正常乳腺组织 乳腺良性肿瘤及乳腺癌组织中的表达 EZH2,MM-2 和 MM-9 在乳腺癌组织中的表 达均高于正常乳腺组织和乳腺良性肿瘤组织, 差 异有统计学意义 (<0.001); 三者在正常乳腺组织 和乳腺良性肿瘤组织中的表达差异无统计学意义 (>0.05, 表 1, 图 1~3) 表 1 EZH2,MM-2 和 MM-9 在正常乳腺组织 乳腺良性肿瘤和乳腺癌组织中的表达 Table 1 Expressio of EZH2, MM-2, ad MM-9 i ormal breast tissues, beig breast tumor, ad breast cacer tissues 组别 正常乳腺组织 (34.5) (37.9) (29.3) 乳腺良性肿瘤 (44.8) * 29 (50.0) * 24 (41.4) * 乳腺癌组织 (69.3) <0.001** 110 (74.8) <0.001** 87 (59.2) <0.001** 与乳腺良性肿瘤比较,*<0.05; 与正常乳腺组织比较,**<0.001 Compared with beig breast cacer, *<0.05; compared with the ormal tissue, **<0.001.
3 乳腺癌中 EZH2,MM-2 和 MM-9 蛋白表达及其临床意义嵇晓辉, 等 2069 图 1 EZH2 在乳腺癌细胞核中的表达 (S, 400) Figure 1 Expressio of EZH2 protei i breast cacer cell ucleus (S, 400) 图 3 MM-9 在乳腺癌细胞质中的表达 (S, 400) Figure 3 Expressio of MM-9 protei i breast cacer cytoplasm (S, 400) 2.2 EZH2,MM-2,MM-9 表达与乳腺癌临床病理特征的关系 EZH2,MM-2,MM-9 在乳腺癌伴淋巴结转移原发灶中的表达高于不伴有淋巴结转移的原发灶, 差异有统计学意义 (<0.001) EZH2,MM-2, MM-9 与患者年龄 绝经状态 肿瘤直径 组织学类型 TNM 分期均无关 (>0.05, 表 2) 图 2 MM-2 在乳腺癌细胞质中的表达 (S, 400) Figure 2 Expressio of MM-2 protei i breast cacer cytoplasm (S, 400) 2.3 EZH2 与 MM-2 及 MM-9 表达的相关性经 earso 相关性分析,147 例乳腺癌中 EZH2 蛋白表达和 MM-2 蛋白表达呈显著正相关 (<0.001, 表 3),EZH2 蛋白表达和 MM-9 蛋白表达呈显著正相关 (<0.001, 表 3) 表 2 EZH2,MM-2 和 MM-9 表达与乳腺癌临床病理特征的关系 (=147) Table 2 Expressio of EZH2, MM-2, ad MM-9 protei i breast cacer tissues ad their relatioship with the cliical pathologic characteristics (=147) 临床病理 参数 年龄 / 岁 (67.9) 60 (76.9) 47 (60.2) > (71.0) 50 (72.4) 40 (57.8) 绝经状态 否 ( (77.3) 45 (60.0) 是 (69.4) 52 (72.2) 42 (58.3)
4 2070 临床与病理杂志, 2017, 37(10) 续表 2 临床病理 参数 肿瘤直径 /cm (64.0) 35 (70.0) 27 (54.0) > (72.2) 75 (77.3) 60 (61.9) 淋巴结转移 < < <0.001 无 (56.3) 58 (66.7) 37 (42.5) 有 (88.3) 52 (86.7) 50 (83.3) 组织学类型 ILC (51.4) 25 (71.4) 16 (45.7) IDC I (67.9) 20 (71.4) 16 (57.1) II (80.0) 41 (82.0) 35 (70.0) III~IV (73.5) 24 (70.6) 20 (58.8) 表 3 乳腺癌组织中 EZH2 蛋白表达与 MM-2 及 MM-9 蛋白表达的关系 Table 3 Relatioship of the expressio of EZH2 ad MM-2, MM-9 protei i breast cacer tissues EZH2 MM-2 MM < < 讨论 EZH2 是人们近来发现的与肿瘤发生密切相关 的基因之一, 它对于干细胞表型的维持是必不可 [8] 少的 既往研究发现 :EZH2 通过对核小体组蛋 白进行甲基化修饰来抑制抑癌基因转录而发挥功 [9] 能, 其高表达提示预后不良 近年来研究发现 : EZH2 可通过下调下游 caszl,clu 等抑癌基因表达 促进神经母细胞瘤增殖 通过乳腺癌中 EZH2 与 [10] 53 蛋白表达相关性研究证实 EZH2 与乳腺癌患 者预后明显相关 本试验显示 : 与正常乳腺组织 及乳腺良性肿瘤组织相比,EZH2 在乳腺癌组织内 呈高表达 ; 同时本次实验中 60 例乳腺癌伴淋巴结 转移患者, 其中 EZH2 阳性者 53 例 (8.3%), 明显高 于无淋巴结转移者 因此,EZH2 的表达与乳腺癌 淋巴结转移有重要影响 作为 MMs 家族的重要成员,MM-2 及 MM-9 主要通过降解基底膜的 Ⅳ 型胶原成分 促进血管 生成和调节细胞黏附, 在乳腺癌从原位癌发展为浸润性癌的过程中起重要作用 [11] 此外, 通过研究发现乳腺癌组织中 MM-2 和 MM-9 均有过度表达, 并与癌转移密切相关 本研究中 60 例乳腺癌伴淋巴结转移患者中 MM-2,MM-9 的阳性率分别为 86.7% 和 83.3%, 明显高于无淋巴结转移者, 说明 MM-2,MM-9 是乳腺癌侵袭转移过程中的重要因子, 且随着肿瘤进展和淋巴结转移其阳性表达越高 综上所述,EZH2,MM-2 及 MM-9 在人乳腺癌组织中过表达, 且与乳腺癌伴有淋巴结转移者呈正相关 ; 三者的高表达可能提示三者与乳腺癌转移关系密切, 三者联合检测可作为乳腺癌恶性程度和判断预后的重要指标 此外, 本研究显示在 EZH2 表达阳性的病例中 MM-2 及 MM-9 的表达阳性率相应升高, 提示 EZH2 在乳腺癌中的表达可能与 MM-2 及 MM-9 有相似的调节通路, 其机制有待进一步研究
5 乳腺癌中 EZH2,MM-2 和 MM-9 蛋白表达及其临床意义嵇晓辉, 等 2071 参考文献 1. Bae WK, Heighause L. Caoical ad o-caoical roles of the histoe methyltrasferase EZH2 i mammary developmet ad cacer[ J]. Mol Cell Edocriol, 2014, 382(1): Wa L, Li X, She H, et al. Quatitative aalysis of EZH2 expressio ad its correlatios with lug cacer patiets cliical pathological characteristics[ J]. Cli Trasl Ocol, 2013, 15(2): Chag CJ, Yag JY, Xia W, et al. EZH2 promotes expasio of breast tumor iitiatig cells through activatio of RAF1-beta-catei sigalig[ J]. Cacer Cell, 2011, 19(1): Geg J, Li X, Zhou Z, et al. EZH2 promotes tumor progressio via regulatig VEGF-A/AKT sigalig i o-small cell lug cacer[ J]. Cacer Lett, 2015, 359(2): Qi Y, Liu XJ, Li L, et al. MM-2/9-orieted combiatios ehace atitumor efficacy of EGFR/HER2-targetig fusio proteis ad gemcitabie[ J]. Ocol Rep, 2014, 32(1): Lotfi A, Mohammadi G, Tavassoli A, et al. Serum levels of MM9 ad MM2 i patiets with oral squamous cell carcioma[ J]. Asia ac J Cacer rev, 2015, 16(4): Jaafar H, Sharif SE, Murtey MD. atter of collage fibers ad localizatio of matrix metalloproteiase 2 ad 9 durig breast cacer ivasio[ J]. Tumori, 2014, 100(5): e204-e Boros J, Aroult N, Stroobat V, et al. olycomb repressive complex 2 ad H3K27me3 cooperate with H3K9 methylatio to maitai heterochromati protei 1αat chromati[ J]. Mol Cell Biol, 2014, 34(19): Wag C, Liu Z, Woo CW, et al. EZH2 mediates epigeetic silecig of euroblastoma suppressor gees CASZl, CLU, RUNX3, ad NGFR[ J]. Cacer Res, 2012, 72(1): 汪小霞, 孟刚, 李丽, 等. 乳腺癌中 EZH2 和 53 蛋白表达及其临床意义 [ J]. 临床与实验病理学杂志, 2015, 31(3): WANG Xiaoxia, MENG Gag, LI Li, et al. Expressio of EZH2 ad 53 i breast cacer ad their cliical sigificace[ J]. Chiese Joural of Cliical ad Experimetal athology, 2015, 31(3): uzovic V, Brcic I, Raogajec I, et al. rogostic values of ETS-1, MM-2 ad MM-9 expressio ad co-expressio i breast cacer patiets[ J]. Neoplasma, 2014, 61(4): 本文引用 : 嵇晓辉, 闫琛, 刘红伟, 杨金花. 乳腺癌中 EZH2, MM-2 和 MM-9 蛋白表达及其临床意义 [ J]. 临床与病理杂志, 2017, 37(10): doi: /j.iss Cite this article as: JI Xiaohui, YAN Che, LIU Hogwei, YANG Jihua. Expressio of EZH2, MM-2 ad MM-9 i breast cacer ad their cliical sigificace[ J]. Joural of Cliical ad athological Research, 2017, 37(10): doi: /j.iss
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