中 国 肺 癌 杂 志 年 月 第 1 卷 第 期 Chi J Lug Cacer, A pril 1, Vol.1, No. 31 This study was supported by the grat from Shaghai Sciece (to Baohui HAN)(No.6
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- 空米 方
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1 3 1年月第1卷第期 Chi J Lug Cacer, April 1, Vol.1, No. 临 床 研 究 DOI: /j.iss 晚期非小细胞肺癌RRM1蛋白表达 与吉西他滨联合顺铂化疗疗效的关系 高志强 韩宝惠 沈洁 顾爱琴 钟华 摘要 背景与目的 核糖核苷酸还原酶M1 riboucleotide reductase M1, RRM1 的表达水平与肿瘤细胞对 吉西他滨耐药密切相关 本研究旨在探讨晚期非小细胞肺癌 o-small cell lug cacer, NSCLC 中RRM1蛋白的表 达水平与吉西他滨联合顺铂 GP方案 化疗疗效的关系 方法 应用免疫组织化学染色法检测75例晚期NSCLC组 织中的RRM1蛋白表达 75例患者均接受GP化疗方案 回顾调查患者的一般特征 治疗反应 疗效评价及生存时 间 组间差异采用卡方检验 采用Kapla-Meier法进行生存分析 结果 RRM1蛋白表达阳性率为38.7 与患者的性 别 年龄 吸烟状态 临床分期及组织病理学类型无明显相关性 P>.5 RRM1蛋白高表达组的化疗有效率 31.1 低于低表达组 1.3 有统计学意义 P=.5 RRM1高表达组的1年生存率 27.6 低于低表达 组 58.7 有统计学意义 P=.9 RRM1蛋白高表达组的中位生存期 1.7个月 低于低表达组 13.3 个月 但无统计学差异 P=. RRM1蛋白高表达组的疾病进展时间 3.1个月 低于低表达组 5.11个 月 差异有统计学意义 P=.2 结论 晚期NSCLC患者组织中RRM1蛋白的表达水平与GP方案化疗的疗效及 预后密切相关 关键词 肺肿瘤 RRM1 蛋白表达 疗效 预后 中图分类号 R73.2 Relatios betwee RRM1 Protei Expressio Levels ad Effects of Gemcitabie ad Cisplati Chemotherapy i Advaced No-small Cell Lug Cacer Patiets Zhiqiag GAO, Baohui HAN, Jie SHEN, Aiqi GU, Hua ZHONG Departmet of Pulmoary Medcie, Chest Hospital Affiliated to Shaghai Jiao Tog Uiversity, Shaghai 23, Chia Correspodig author: Baohui HAN, xkyyha@gmail.com; Hua ZHONG, eddiedog8@hotmail.com Abstract Backgroud ad objective It has bee prove that riboucleotide reductase M1 (RRM1) expressio level was closely related to gemcitabie drug-resistace to tumor cells. The aim of this study is to explore the relatios betwee RRM1 protei expressio levels ad effects of gemcitabie ad cisplati chemotherapy i advaced o-small cell lug cacer (NSCLC) patiets. Methods The expressios of RRM1 i 75 advaced NSCLC tissues were qualitatively detected by immuohistochemical methods. Sevety-five patiets had received gemcitabie ad cisplati (GP) chemotherapy regime. Geeral characteristics of patiets, respose to treatmet, efficacy evaluatio ad survival time were retrospectively ivestigated. Differeces betwee the groups were statistically aalysed by chi-square test. Survival differeces were aalysed by temporal ispectio ad Kapla-Meier survival curves. Results RRM1 protei expressio rate was RRM1 protei expressio had o obvious relatioship with geder, age, smokig status, ad the cliical stages ad histopathological types (P>.5). Respose rate i RRM1 protei high expressio groups (31.3) was remarkably lower tha that i low expressio groups (1.3), the differece was statistically sigificat (P=.5). 1-year survival rate i RRM1 protei high expressio groups (27.6) was remarkably lower tha that i low expressio group (58.7), the differece was statistically sigificat (P=.9). No sigificat differet of media survival was observed betwee RMM1 protei high expressio group ad low expressio group (P>.). Time to progressio i RRM1 protei high expressio groups (3.1 moths) was remarkably lower tha that i low expressio group (5.11 moths), the differece was statistically sigificat (P=.2). Coclusio RRM1 protei expressio levels are closely related to effects of gemcitabie ad cisplati chemotherapy ad progosis of advaced NSCLC patiets. Key words Lug eoplasms; RRM1; Protei expressio; Curative effect; Progosis 本研究受上海市科学技术委员会科技发展基金项目 No.6DZ1951 资助及上海市科学技术委员会学科带头人计划项目 No.9XD135 资助 作者单位 23 上海 上海交通大学附属胸科医院肺内科 高志强 韩宝惠 沈洁 顾爱琴 钟华 通讯作者 韩宝惠 xkyyha@ gmail.com 钟华 eddiedog8@hotmail.com
2 中 国 肺 癌 杂 志 年 月 第 1 卷 第 期 Chi J Lug Cacer, A pril 1, Vol.1, No. 31 This study was supported by the grat from Shaghai Sciece (to Baohui HAN)(No.6DZ1951) ad Techology Research Program (to Baohui HAN)(No.9XD135). 肺 癌 是 全 球 发 病 率 和 病 死 率 最 高 的 肿 瘤, 其 中 约 8 为 非 小 细 胞 肺 癌 (o-small cell lug cacer, NSCLC) 因 缺 乏 有 效 的 早 期 诊 断 手 段, 初 诊 时 约 75 的 患 者 已 失 去 了 手 术 时 机, 晚 期 NSCLC 目 前 仍 以 联 合 化 疗 为 主, 但 5 年 生 存 率 不 到 15 [1] 影 响 NSCLC 患 者 化 疗 疗 效 及 生 存 的 主 要 原 因 是 肿 瘤 细 胞 对 抗 癌 药 的 抗 药 性 核 糖 核 苷 酸 还 原 酶 M1(riboucleotide reductase M1, RRM1) 是 最 近 被 广 泛 关 注 的 一 个 基 因,RRM1 的 表 达 水 平 与 肿 瘤 细 胞 对 吉 西 他 滨 耐 药 密 切 相 关 [2] 通 过 对 RRM1 表 达 的 检 测, 能 否 预 测 不 同 人 群 对 吉 西 他 滨 的 敏 感 程 度 以 制 定 个 体 化 化 疗 方 案 提 高 药 物 治 疗 的 有 效 率, 这 些 都 成 为 人 们 感 兴 趣 和 研 究 的 主 要 目 标 然 而, 近 几 年 国 内 的 相 关 研 究 均 未 得 到 理 想 的 试 验 结 果 在 国 内 外 研 究 的 基 础 上, 本 研 究 探 讨 了 RRM1 蛋 白 的 表 达 水 平 与 吉 西 他 滨 联 合 顺 铂 (GP 方 案 ) 治 疗 晚 期 NSCLC 疗 效 的 关 系 1 材 料 与 方 法 1.1 研 究 对 象 以 26 年 8 月 -29 年 5 月 上 海 市 胸 科 医 院 收 治 的 既 往 未 接 受 过 化 疗 无 法 手 术 切 除 的 75 例 晚 期 (IIIb 期 -IV 期 )NSCLC 患 者 为 研 究 对 象,75 例 患 者 均 经 支 气 管 镜 下 活 检 (58 例 ) 或 穿 刺 活 检 (17 例 ) 获 得 病 理 学 诊 断 其 中 男 性 5 例, 女 性 例 ; 年 龄 35 岁 -73 岁, 中 位 年 龄 6 岁 ; 肺 鳞 癌 例, 肺 腺 癌 9 例, 其 他 类 型 5 例 全 部 患 者 均 具 有 可 测 量 的 肿 瘤 病 灶, 参 照 国 际 抗 癌 联 盟 1997 年 TNM 分 期,IIIb 期 3 例,IV 期 1 例 吸 烟 者 7 例, 不 吸 烟 者 28 例 75 例 患 者 均 接 受 GP 方 案 ( 吉 西 他 滨 1, mg/ m 2 d1,d 8+ 顺 铂 75 mg/m 2 d1, 每 28 天 为 1 周 期 ) 末 次 随 访 时 间 为 年 9 月 3 日 1.2 主 要 试 剂 鼠 抗 人 RRM1 单 克 隆 抗 体 购 自 Sata Cruz 生 物 工 程 公 司, 免 疫 组 织 化 学 试 剂 盒 购 自 华 美 生 物 工 程 公 司 1.3 实 验 方 法 收 集 75 例 NSCLC 纤 支 镜 或 肺 穿 刺 活 检 标 本, 用 微 波 行 抗 原 修 复 15 mi, 鼠 抗 人 RRM1 单 克 隆 抗 体 (1:1) o C 过 夜, 磷 酸 盐 缓 冲 液 (PBS, ph7.2) 清 洗 后 加 Ati-Rabbit Evisio HRP 二 抗 37 o C 放 置 3 mi,pbs 清 洗 后 DAB 显 色, 苏 木 精 对 比 染 色, 然 后 水 洗 蓝 化 脱 水 中 性 树 胶 封 片 以 Lecia QWi Plus 软 件 对 组 织 芯 片 结 果 进 行 分 析,RRM1 主 要 为 胞 浆 染 色, 胞 浆 中 出 现 棕 黄 色 颗 粒 且 面 积 占 分 析 区 域 总 面 积 比 5 为 RRM1(+) 表 达 即 高 表 达,<5 为 RRMl(-) 即 低 表 达 [3] 由 病 理 科 两 位 医 师 ( 其 中 一 位 为 主 任 医 师 ) 在 不 知 道 临 床 资 料 的 情 况 下 对 标 本 染 色 结 果 进 行 判 断 1. 疗 效 评 价 标 准 按 世 界 卫 生 组 织 与 国 际 抗 癌 联 盟 标 准 判 定 为 完 全 缓 解 (complete respose, CR) 部 分 缓 解 (partial respose, PR) 轻 度 缓 解 (miimal respose, MR) 疾 病 稳 定 (stable disease, SD) 与 疾 病 进 展 (progressive disease, PD) 近 期 客 观 有 效 为 CR+PR+MR, 受 益 为 CR+PR+MR+SD, 有 效 者 应 1 个 月 后 再 检 查 确 认 疾 病 进 展 时 间 (time to progress, TTP) 为 自 治 疗 开 始 至 肿 瘤 病 灶 出 现 进 展 的 时 间 生 存 期 为 治 疗 开 始 至 死 亡 或 失 访 的 时 间 行 为 状 态 采 用 东 部 肿 瘤 协 作 组 的 体 能 状 态 评 分 (Easter Cooperative Ocology Group Performace Status Scale, ECOG-PS) 1.5 统 计 学 分 析 采 用 SPSS 13. 软 件 进 行 数 据 分 析 组 间 差 异 采 用 卡 方 检 验 生 存 分 析 采 用 Kapla-Meier 法, 生 存 率 的 比 较 采 用 Log-rak 检 验,P<.5 为 差 异 有 统 计 学 意 义 2 结 果 2.1 RRM1 蛋 白 在 晚 期 NSCLC 组 织 中 的 表 达 及 其 与 临 床 特 征 之 间 关 系 75 例 初 治 晚 期 NSCLC 患 者 的 病 理 标 本 中, RRM1 蛋 白 表 达 阳 性 率 为 38.7, 与 患 者 的 性 别 年 龄 吸 烟 状 态 临 床 分 期 及 组 织 病 理 学 类 型 无 明 显 相 关 性 (P>.5)( 图 1, 表 1) 2. 2 R R M 1 蛋 白 表 达 与 化 疗 疗 效 及 生 存 期 之 间 的 关 系 RRM1 蛋 白 高 表 达 组 的 化 疗 有 效 率 (31.1) 低 于 低 表 达 组 (1.3), 差 异 有 统 计 学 意 义 (χ 2 =1.558, P=.5);RRM1 表 达 阳 性 组 的 1 年 生 存 率 (27.6) 低 于 阴 性 组 (58.7), 差 异 有 统 计 学 意 义 (χ 2 =6.916, P=.9);RRM1 蛋 白 高 表 达 组 的 中 位 生 存 期 (1.7 个 月,95CI: ) 低 于 低 表 达 组 (13.3 个 月, 95CI: ), 但 差 异 无 统 计 学 意 义 (P=.); R M M 1 蛋 白 高 表 达 组 的 疾 病 进 展 时 间 为 (3. 1 个 月, 95CI: ) 低 于 低 表 达 组 (5.11 个 月,95CI: ), 差 异 有 统 计 学 意 义 (P=.2)( 图 2, 表 2) 中 国 肺 癌 杂 志
3 32 1年月第1卷第期 A Chi J Lug Cacer, April 1, Vol.1, No. B 图 1 RRM1蛋白在晚期NSCLC组织中的表达 SP 2 A 阳性表达 B 阴性表达 Fig 1 Expressio of RRM1 i advaced NSCLC tissues (SP, 2). A: Positive; B: Negative. Survival Curves (RRM1 positive vs egative) B A Time To Progressio (RRM1 expressio positive vs egative) Time/Moth Time/Moth 图 2 RRM1表达水平与NSCLC患者的生存曲线之间的关系 A 总体生存时间 B 疾病进展时间 Fig 2 Relatioships betwee expressios of RRM1 ad the survival curves of NSCLC patiets. A: overall survival; B: time to progressio. 表 1 各组晚期NSCLC患者的临床特征 Tab 1 Characteristics of patiets with advaced NSCLC Characteristic All patiets Total ( ) RRM1(-) subgroup RRM1(+) subgroup Sex Male Female Smokig Status No-smoker Smoker Age (years) Media Rage ECOG PS Histology Adeocarcioma Squamous cell carcioma Others IIIb IV Stage No. of cycles Media Rage ECOG PS: Easter Cooperative Ocology Group Performace Status Scale.
4 1年月第1卷第期 33 Chi J Lug Cacer, April 1, Vol.1, No. 表 2 晚期NSCLC患者的临床疗效及预后 Tab 2 Respose to treatmet ad survival time of patiets with advaced NSCLC All patiets ( =75) Outcome RRM1 (-) subgroup ( =6) RRM1 (+) subgroup ( =29) Respose Complete respose [ ()] 28 (37.3) 19 (1.3) 9 (31.1) Stable disease [ ()] 2 (32.) 19 (1.3) 5 (17.2) Progressive disease [ ()] 23 (3.7) 8 (17.) 15 (51.7) Partial respose [ ()] Survival Media (moths) CI: CI: CI: year survival rate () CI: CI: CI: Media TTP (moths).3 95CI: CI: CI: TTP: time to progress. 3 讨论 总体生存期明显短于阴性表达组患者 5.1个月 vs 12.9个 月 P=.22 本研究显示RRM1蛋白高表达组的中位 [] 近年研究 表明 细胞信号转导中相关因子的表达 生存期 1.7个月 低于低表达组 13.3个月 但差 异常 肿瘤细胞DNA修复的异常及其它相关基因的表达 异无统计学意义 P=. RMM1蛋白高表达组的疾 异常与肺癌耐药的产生也存在密切联系 提示前瞻性地 病进展时间为 3.1个月 低于低表达组 5.11个月 进行分子指标的测定是进行个体化治疗 提高化疗疗效 差异有统计学意义 P=.2 的关键 通过本研究进一步证实 在晚期化疗的NSCLC患者 RRM1是核苷酸还原酶调节M1亚单位 当ERCC1与 中RRM1蛋白的表达水平与肿瘤细胞对吉西他滨耐药及 XPD XPG XPA等修复基因将DNA链中受损的部分切除 患者预后密切相关 提示RRM1蛋白表达水平高低可能 后 DNA链上留下的空缺就由RRM1提供的核苷酸来填 会成为筛选接受化疗的患者的一项指标 通过对RRM1 [5] 补 目前研究表明 RRM1是导致肿瘤细胞对吉西他滨 蛋白的检测 可以预测不同人群对吉西他滨的敏感程度 类耐药的一个重要因素 以指导临床用药 提高药物治疗的有效率 同时减少不 [6] Rosell等 采用定量PCR的方法检测了75例NSCLC患 者的肿瘤标本中RRM1 mrna等的表达 其中有22例患者 必要的药物毒副作用和经济支出 更好地实现对患者的 个体化治疗 接受了GP方案化疗 发现低水平表达RRM1 mrna的吉 [7] 总之 RRM1蛋白的表达水平与接受GP方案治疗的 西他滨联合顺铂组患者对化疗的反应较好 Lee等 研究 晚期NSCLC患者的化疗疗效及预后密切相关 但RRM1 以免疫组织化学法检测了例晚期NSCLC组织中RRM1 蛋白能否作为筛选患者的指标并真正应用于临床 尚有 蛋白的表达 结果发现RRM1蛋白表达阳性率为35 许多重要问题需要解决 RRM1蛋白阳性表达组患者的疾病控制率 PR+SD 低 参 考 文 献 于阴性表达组患者 23 vs 56 本研究显示RRM1 蛋白表达阳性率为38.7 RRM1蛋白高表达组的化疗 有效率 31.1 低于低表达组 1.3 差异有统计 学意义 P=.5 RRM1蛋白高表达组的1年生存率 1 29, 59(): Cep p i 等 [8] Natl Compr Cac Netw,, 8(7): 检 测 了 7 例 NSCLC 患 者 组 织 中 R R M 1 mrna等的表达水平 结果发现低表达RRM1 mrna 的患者的中位生存时间较长 13.9个月 vs 1.9个月 P=.39) Lee等[7]研究发现RRM1蛋白阳性表达组患者的 Aggarwal C, Somaiah N, Simo GR, et al. Biomarkers with predictive ad progostic fuctio i o-small cell lug cacer: ready for prime time? J 27.6 低于低表达组 58.7 差异有统计学意义 P=.9 Jemal A, Siegel R, Ward E, et al. Cacer statistics, 29. CA Cacer J Cli, Arora A, Siddiqui IA, Shukla Y, et al. Modulatio of p53 i 7, 12-dimethylbez[a] athracee-iduced ski tumors by diallyl sulfide i Swiss albio mice. Mol Cacer Ther, 2, 3(11): Adams VR, Harvey RD. Histological ad geetic markers for o-small-cell lug cacer: customizig treatmet based o idividual tumor biology. Am J
5 3 中 国 肺 癌 杂 志 年 月 第 1 卷 第 期 Chi J Lug Cacer, A pril 1, Vol.1, No. Health Syst Pharm,, 67(1 Suppl 1): S3-S9. 5 Rosell R, Cobo M, Isla D, et al. Pharmacogeomics ad gemcitabie. A Ocol, 26, 17(suppl 5): v13-v16 6 Rosell R, Scagliotti G, Daeberg KD, et al. Trascripts i pretreatmet biopsies from a three-arm radomized trial i metastatic o-small cell lug cacer. Ocogee, 23, 22(23): Lee JJ, Maeg CH, Baek SK, et al. The immuohistochemical overexpressio of riboucleotide reductase regulatory subuit M1 (RRM1) protei is a predictor of shorter survival to gemcitabie-based chemotherapy i advaced o-small cell lug cacer (NSCLC). Lug Cacer,, 7(2): -. 8 Ceppi P, Volate M, Novello S, et al. ERCC1 ad RRM1 gee expressios but ot EGFR are predictive of shorter survival i advaced o-small cell lug cacer treated with cisplati ad gemcitabie. A Oc, 26, 17(12): ( 收 稿 :-1-11 修 回 :-1-) ( 本 文 编 辑 南 娟 ) 启 事 中 国 肺 癌 杂 志 免 收 作 者 审 稿 费 声 明 为 缩 短 审 稿 周 期, 加 快 文 章 发 表 速 度, 扩 大 本 刊 学 术 影 响, 经 研 究 决 定, 自 28 年 月 2 日 起, 中 国 肺 癌 杂 志 免 除 所 有 作 者 审 稿 费 本 刊 专 家 审 稿 费 用 仍 照 常 发 放, 由 本 刊 承 担 相 关 支 出 所 有 投 稿 作 者 仅 需 提 供 单 位 介 绍 信 和 基 金 证 明 即 可 为 了 方 便 作 者 投 稿 专 家 审 稿 及 提 高 编 辑 部 工 作 效 率 和 管 理 水 平, 本 刊 将 采 用 在 线 投 稿 方 式 投 稿 网 址 中 文 英 文 详 情 可 以 访 问 本 刊 网 站 : 或 编 辑 :clugca@gmail.com;clugca@yahoo.com.c 来 电 垂 询 : /2799 中 国 肺 癌 杂 志 所 刊 载 王 金 万 等 作 者 论 文 被 遴 选 为 29 年 中 国 百 篇 最 具 影 响 国 内 学 术 论 文 消 息 年 11 月 26 日 中 国 科 学 技 术 信 息 研 究 所 向 外 界 发 布 了 年 度 中 国 科 技 论 文 统 计 结 果, 同 时 公 布 了 29 年 中 国 百 篇 最 具 影 响 国 际 和 国 内 论 文 中 国 医 学 科 学 院 肿 瘤 医 院 王 金 万 孙 燕 等 联 合 家 临 床 科 研 机 构 在 中 国 肺 癌 杂 志 所 刊 发 题 为 重 组 人 血 管 内 皮 抑 素 联 合 NP 方 案 治 疗 晚 期 NSCLC 随 机 双 盲 对 照 多 中 心 III 期 临 床 研 究 一 文 [ 王 金 万, 孙 燕, 刘 永 煜, 等. 重 组 人 血 管 内 皮 抑 素 联 合 NP 方 案 治 疗 晚 期 NSCLC 随 机 双 盲 对 照 多 中 心 III 期 临 床 研 究. 中 国 肺 癌 杂 志,, 8(8): ] 被 遴 选 为 29 中 国 年 百 篇 最 具 影 响 国 内 学 术 论 文 之 一 该 结 果 是 由 科 技 部 直 属 的 中 国 科 学 技 术 信 息 研 究 所 公 布 的, 代 表 了 我 国 科 技 论 文 发 展 的 最 高 水 平 27 年 中 国 科 学 技 术 信 息 研 究 所 首 次 发 布 我 国 百 篇 最 具 影 响 的 优 秀 学 术 论 文, 受 到 学 术 界 的 广 泛 关 注,28 年 该 所 重 新 修 订 了 论 文 评 定 指 标, 力 求 做 到 客 观 公 平 公 正 准 确 可 靠 论 文 学 术 影 响 的 主 要 文 献 计 量 指 标 为 : 论 文 的 创 新 性 ; 发 表 论 文 的 期 刊 水 平 ; 是 否 处 于 研 究 前 沿, 是 否 属 于 研 究 热 点 ; 论 文 的 合 作 强 度 ; 论 文 的 文 献 类 型 ; 论 文 的 完 整 性 ; 论 文 的 参 考 文 献 情 况 ; 论 文 他 引 量 中 国 肺 癌 杂 志 编 辑 部 年 12 月 中 国 肺 癌 杂 志
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