第五讲

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1 Stata 软件基本操作和数据分析入门 第五讲 多组平均水平的比较 赵耐青 一 复习和补充两组比较的统计检验 1. 配对设计资料 ( 又称为 Dependent Samples) a) 对于小样本的情况下, 如果配对的差值资料服从正态分布, 用配对 t 检验 (ttest 差值变量 =0) b) 大样本的情况下, 可以用配对 t 检验 c) 小样本的情况下, 并且配对差值呈偏态分布, 则用配对符号秩检验 (signrank 差值变量 =0) 2. 成组设计 (Two Independent Samples) a) 如果方差齐性并且大样本情况下, 可以用成组 t 检验 (ttest 效应指标变量,by( 分组变量 )) b) 如果方差齐性并且两组资料分别呈正态分布, 可以用成组 t 检验 c) 如果方差不齐, 或者小样本情况下偏态分布, 则用秩和检验 (Ranksum test) group x

2 二 多组比较 1. 完全随机分组设计 ( 要求各组资料之间相互独立 ) a) 方差齐性并且独立以及每一组资料都服从正态分布 ( 小样本时要求 ), 则采用 完全随机设计的方差分析方法 ( 即 : 单因素方差分析,One Way ANOVA) 进 行分析 b) 方差不齐或小样本情况下资料偏态, 则用 Kruskal Wallis 检验 (H 检验 ) 例 5.1 为研究胃癌与胃粘膜细胞中 DNA 含量 (A.U) 的关系, 某医师测得数据如下, 试问四 组人群的胃粘膜细胞中平均 DNA 含量是否相同? 组别 group DNA 含量 (A.U) 浅表型胃炎 肠化生 早期胃癌

3 晚期胃癌 由于这四组对象的资料是相互独立的, 因此属于完全随机分组类型的 检验问题是考察四组 DNA 含量的平均水平相同吗 如果每一组资料都正态分布并且方差齐性可以用 One way-anova 进行分析, 反之用 Kruskal Wallis 检验 STATA 数据输入格式 g x

4 分组正态性检验,α=0.05. sktest x if g== Skewness/Kurtosis tests for Normality joint Variable Pr(Skewness) Pr(Kurtosis) adj chi2(2) Prob>chi x sktest x if g==2 Skewness/Kurtosis tests for Normality joint Variable Pr(Skewness) Pr(Kurtosis) adj chi2(2) Prob>chi x sktest x if g==3 Skewness/Kurtosis tests for Normality joint Variable Pr(Skewness) Pr(Kurtosis) adj chi2(2) Prob>chi x sktest x if g==4 Skewness/Kurtosis tests for Normality joint Variable Pr(Skewness) Pr(Kurtosis) adj chi2(2) Prob>chi x 上述结果表明每一组资料都服从正态分布 单因素方差分析的 STATA 命令 :oneway 效应指标变量分组变量,t b 其中 t 表示计算每一组均数和标准差,b 表示采用 Bonferroni 统计方法进行两

5 两比较 本例命令为 oneway x group,t b. oneway x g,t b Summary of x g Mean Std. Dev. Freq Total Analysis of Variance Source SS df MS F Prob > F Between groups Within groups Total Bartlett's test for equal variances: chi2(3) = Prob>chi2 = 方差齐性的检验为 : 卡方 =1.1354, 自由度 =3,P 值 =0.769, 因此可以认为方差是齐性的 H0:μ1=μ2=μ3=μ4 四组总体均数相同 H1:μ1,μ2,μ3,μ4 不全相同 α=0.05, 相应的统计量 F=77.87 以及相应的自由度为 3 和 43,P 值 <0.0001, 因此 4 组均数 的差别有统计学意义 Comparison of x by g (Bonferroni) Row Mean- Col Mean ( 第 2 组样本均数 - 第 1 组样本均数 ) 0.000(H0:μ1=μ2 检验的 P 值 ) ( 第 3 组样本均数 - 第 2 组样本均数 ) (H0:μ3=μ2 检验的 P 值 ) ( 第 4 组样本均数 - 第 3 组样本均数 ) (H0:μ3=μ4 检验的 P 值 )\ 上述输出为两两比较的结果, 在表格的每个单元中, 第一行为两组均数的差值, 第二行为两组均数比较检验的 P 值 根据上述结果可以知道, 第 2 组 第 3 组和第 4 组的 AU 均数均大于第 1 组的 AU 均数, 并且差别有统计学意义 说明肠化生患者和胃癌患者的 DNA 的 AU 含量平均水平均高于正常人的 AU 平均水平, 并且差别有统计学意义 第 3 组和第 4 组的 AU 均数也大于第 2 组的 AU 平均水平, 并且差别有统计学意义 说明胃

6 癌患者的 DNA 的 AU 含量平均水平均高于肠化生患者的 AU 平均水平, 并且差别有统计学意义 第 3 组和第 4 组两组均数的差别没有统计学意义, 说明没有足够的证据可以 DNA 的 AU 含量与癌症的早期与晚期有关系 假如本例的资料不满足方差分析的要求, 则用 Kruskal Wallis 检验, 数据结构同上 命令为 : kwallis 效应指标变量, by( 分组变量 ) 本例的命令为 kwallis x,by(g) H 0 :4 组的 AU 总体分布相同 H 1 :4 组的 AU 总体分布不全相同 α=0.05 结果如下 : Test: Equality of populations (Kruskal-Wallis test) g _Obs _RankSum chi-squared = with 3 d.f. probability = chi-squared with ties = with 3 d.f. probability = 说明 :4 组 AU 的总体分布不全相同, 然后秩和检验, 但 α 应取小一些 ( 多重比较时, 会增大 第一类错误的概率 ) 根据 Sidak 检验的建议 : α 1 =, 其中 k 为要比较的次数,α 1 (1 α) k 为多组比较总的检验水平 ( 一般为 0.05),α 为两两比较时的检验水平 2 如本例 :4 组两两比较共比 C = 次, 因此 a = 1 (0.95) 6 = , 对于比较第 1 组和第 2 组的 AU 分布差别的操作命令为 : 先计算中位数 sort g 组别变量排序 by g:centile x,centile(50) 计算各组中位数 -> g = 1 -- Binom. Interp. -- Variable Obs Percentile Centile [95% Conf. Interval] x > g = 2 -- Binom. Interp. -- Variable Obs Percentile Centile [95% Conf. Interval] x > g = 3 -- Binom. Interp. -- Variable Obs Percentile Centile [95% Conf. Interval]

7 x > g = 4 -- Binom. Interp. -- Variable Obs Percentile Centile [95% Conf. Interval] x 得到这 4 组中位数分别为 :M 1 =12.29,M 2 =14.855,M 3 =21.14 和 M 4 =21.36 ranksum x if g==1 g==2,by(g) Two-sample Wilcoxon rank-sum (Mann-Whitney) test g obs rank sum expected combined unadjusted variance adjustment for ties adjusted variance Ho: x(g==1) = x(g==2) z = Prob > z = P 值 <α, 因此第 2 组 AU 的平均水平要高于第 1 组的平均水平 (M 2 >M 1 ), 并且差别有统计学 意义 第 1 组与第 3 组比较 ranksum x if g==1 g==3,by(g) Two-sample Wilcoxon rank-sum (Mann-Whitney) test g obs rank sum expected combined unadjusted variance adjustment for ties adjusted variance Ho: x(g==1) = x(g==3)

8 z = Prob > z = P 值 <α, 因此第 3 组 AU 的平均水平要高于第 1 组的平均水平 (M 3 >M 1 ), 并且差别有统计学意义, 其他比较类似进行 要注意的问题 : 在方差分析中, 要求每一组资料服从正态分布 ( 小样本时 ), 并不是要求各组资料服从一个正态分布 ( 因为这就意味各组的总体均数相同, 失去统计检验的必要性 ), 所以不能把各组的资料合在一起作正态性检验 总的讲, 方差分析对正态性具有稳健性, 即 : 偏态分布对方差分析的结果影响不会太大, 故正态性检验的 α 取 0.05 也就可以了 样本量较大时, 方差分析对正态性要求大大降低 ( 根据中心极限定理可知 : 样本均数近似服从正态分布 ) 并且由于大多数情况下, 样本资料只是近似服从正态分布而不是完全服从正态分布 由于在大样本情况下, 用正态性检验就变为很敏感, 对于不是完全服从正态分布的资料往往会拒绝正态性检验的 H 0 : 资料服从正态分布 因为正态性检验不能检验资料是否近似服从正态分布, 而是检验是否服从正态分布 故在大样本情况下, 考察资料的近似正态性, 应用频数图进行考察 方差齐性问题对方差分析相对比较敏感, 并且并不是随着样本量增大而方差齐性对方差分析减少影响的 但是当各组样本量接近相同或相同时, 方差齐性对方差分析呈现某种稳健性 即 : 只有当各组样本量相同时, 方差齐性对方差分析结果的影响大大降低 这时随着样本量增大, 影响会进一步降低 相反, 如果各组样本量相差太大时, 方差齐性对方差分析结果的影响很大 这时随着样本量增大, 影响会进一步加大 2. 随机区组设计 ( 处理组之间可能不独立 ) a) 残差 ( 定义为 : eij = Xij + X Xi. X. j, 也就是随机区组方差分析中的误差项 ) 的方差齐性且小样本时正态分布, 则用随机区组的方差分析 ( 无重复的两因 素方差分析,Two-way ANOVA) b) 不满足方差齐性或小样本时资料偏态, 则对用秩变换后再用随机区组的方 差分析也可以直接用非参数随机区组的秩和检验 Fredman test) 例 2 下表是某湖水中 8 个观察地点不同季节取样的氯化物含量测定值, 请问在不同季节该湖 水中氯化物的含量有无差别? 表 2 某湖水中不同季节的氯化物含量测定值 (mg/l) location no 春 夏 秋 冬 显然同一地点不同季节的氯化物含量有一定的相关性, 故不能采用完全随机设计的方差 分析方法对 4 个季节的氯化物含量进行统计分析 可以把同一地点的 4 个季节氯化物含量视为 一个区组, 因此可以用随机区组的方差分析进行统计分析

9 设第 8 个地点在冬季的氯化物总体均数为 μ 0, 同样在冬季, 第 i 个地点的氯化物总体均数 与第 8 个地点在冬季的氯化物总体均数相差 β i,i=1,2,3,4,5,6,7 因此在冬季的这 8 个地点在冬季的氯化物总体均数可以表示为 地点编号 冬季氯化物均数 μ 0 +β 1 μ 0 +β 2 μ 0 +β 3 μ 0 +β 4 μ 0 +β 5 μ 0 +β 6 μ 0 +β 7 μ 0 假定在同一地区, 春季的氯化物总体均数与冬季的氯化物总体均数相差 α 1, 因此春节和冬季 的氯化物总体均数可以表示为 地点编号 冬季氯化物均数 μ 0 +β 1 μ 0 +β 2 μ 0 +β 3 μ 0 +β 4 μ 0 +β 5 μ 0 +β 6 μ 0 +β 7 μ 0 春季氯化物均数 μ 0 +α 1 +β 1 μ 0 +α 1 +β 2 μ 0 +α 1 +β 3 μ 0 +α 1 +β 4 μ 0 +α 1 +β 5 μ 0 +α 1 +β 6 μ 0 +α 1 +β 7 μ 0 如果 α 1 =0 说明在同一地点, 冬季和春季的氯化物总体均数相同 ;α 1 >0 说明春季的氯化物含 量平均高于冬季氯化物含量, 反之 α<0, 说明春季氯化物含量均数低于冬季氯化物含量 同理假定在同一地区, 夏季和秋季的氯化物总体均数与冬季的氯化物总体均数分别相差 α 2 和 α 3, 则四个季节的氯化物总体均数可以表示为 地点编号 冬季氯化物均数 μ 0 +β 1 μ 0 +β 2 μ 0 +β 3 μ 0 +β 4 μ 0 +β 5 μ 0 +β 6 μ 0 +β 7 μ 0 春季氯化物均数 μ 0 +α 1 +β 1 μ 0 +α 1 +β 2 μ 0 +α 1 +β 3 μ 0 +α 1 +β 4 μ 0 +α 1 +β 5 μ 0 +α 1 +β 6 μ 0 +α 1 +β 7 μ 0 夏季氯化物均数 μ 0 +α 2 +β 1 μ 0 +α 2 +β 2 μ 0 +α 2 +β 3 μ 0 +α 2 +β 4 μ 0 +α 2 +β 5 μ 0 +α 2 +β 6 μ 0 +α 2 +β 7 μ 0 春季氯化物均数 μ 0 +α 3 +β 1 μ 0 +α 3 +β 2 μ 0 +α 3 +β 3 μ 0 +α 3 +β 4 μ 0 +α 3 +β 5 μ 0 +α 3 +β 6 μ 0 +α 3 +β 7 μ 0 根据上述总体均数表示, 可以知道 : 在四个季节中的氯化物总体均数 ( 同一地点 ) 无变化就是 H 0 :α 1 =α 2 =α 3 =0( 在随机区组方差分析中称为无处理效应, 但不能称 4 组的总体均数相同, 因 为在同一季节中不同地点的总体均数可能不同 ) H 1 :α 1,α 2,α 3 不全为 0 Stata 数据输入格式 t id x

10 其中 id 表示观察地点编号,t=1,2,3,4 对应表示春节 夏季 秋季和冬季 Stata 操作命令 : anova x t id. anova x t id Number of obs = 32 R-squared = Root MSE = Adj R-squared = Source Partial SS df MS F Prob > F Model t id Residual Total MS处理 处理效应 H 0 :α 1 =α 2 =α 3 =0 的检验对应的统计量 F = = = MS 相应的 P 值 <0.0001( 计算机输出值是 ), 所以拒绝无效假设, 可以认为 4 个季节的氯化物总体均数不全相同 不同季节中的两两比较用 LSD 方法检验如下 : 在输入 anova x t id 命令后, 再输入 regress 命令便得到下列结果 误差

11 Source SS df MS Number of obs = F( 10, 21) = Model Prob > F = Residual R-squared = Adj R-squared = Total Root MSE =

12 x Coef. Std. Err. t P> t [95% Conf. Interval] _cons (μ0) t α1= α2= α3= id 4 (dropped) β1= β2= β3= β4= β5= β6= β7= (dropped) 其中 α 1 = 6.081, 对应的假设检验 H0:α1=0 的统计量 t=11.95,p 值 <0.001,95% 可信区间 为 (5.022,7.139), 因此可以认为春季的氯化物平均高于冬季, 差别有统计学意义, 对应的假设检验 H0:α2=0 的统计量 t=7.50,p 值 <0.001,95% 可信区间为 α 2 = (2.758,4.874), 因此可以认为夏季的氯化物平均高于冬季, 差别有统计学意义, 对应的假设检验 H0:α3=0 的统计量 t=2.37,p 值 =0.027,95% 可信区间为 α 3 = (0.1494,2.266), 因此可以认为秋季的氯化物平均高于冬季, 差别有统计学意义 对于春季氯化物平均数 (μ0+α1+βi) 与夏季的氯化物平均数 (μ0+α2+βi) 比较对应为 α1>α2 α1=α2 和 α1<α2 的问题 因此需要检验 H0:α1=α2 vs H1:α1 α2, 相应的 STATA 命令 (anova x t id 命令和 regress 命令后 ) 为 test b[t[1]]=_b[t[2]], 得到下列结果 ( 1) t[2] - t[3] = 0.0 F( 1, 21) = Prob > F = 相应的统计量 F=26.28,P 值 <0.0001, 差别有统计学意义 由于 α1 的估计值 >α2 的估计值, 所以可以认为春季氯化物平均高于夏季的氯化物含量 同理检验 H0:α1=α3 vs H1:α1 α3, 只需输入命令 test b[t[1]]=_b[t[3]] 检验 H0:α2=α3 vs H1:α2 α3, 只需输入命令 test b[t[2]]=_b[t[3]] 此处不在详细叙述了 由于随机区组方差分析要求残差 ( eij = Xij + X Xi. X. j ) 服从正态分布, 再输入 regress 以后, 只要输入 predict 残差变量名,residual, 就可以得到残差计算值 本例用 e 表示残差变量名, 因此输入 predict e,residual

13 就可以得到残差计算值 e, 然后对残差进行正态性检验 (sktest 残差变量名 ) 本例输入命令为 : sktest e 结果如下 (H 0 : 残差服从正态分布 vs H 1 : 残差偏态分布, α=0.05) Skewness/Kurtosis tests for Normality joint Variable Pr(Skewness) Pr(Kurtosis) adj chi2(2) Prob>chi e P 值 = >>α, 因此可以认为资料近似服从正态分布 ( 大样本时, 可以不考虑正态性问题 ) 如果资料呈偏态分布, 可以对资料进行秩变换 (Rank Transform) 后, 然后把变换后的秩视为原始数据进行随机区组的方差分析 秩变换的 STATA 命令为 egen 秩变量名 =rank( 观察变量名 ),by( 区组变量 ) 为了说明上述操作分析的过程, 故借用本例资料进行秩变换操作说明如下 ( 本例资料正态分布, 无需用秩变换, 只是说明操作而言 ). 设用 r 表示秩变量名, 则本例操作为 egen r=rank(x),by(id) 产生秩 r anova 命令 anova r t id 结果如下 Number of obs = 32 R-squared = Root MSE = Adj R-squared = Source Partial SS df MS F Prob > F Model t id Residual Total

14 命令 regress regress 结果如下 Source SS df MS Number of obs = F( 10, 21) = Model Prob > F = Residual R-squared = Adj R-squared = Total Root MSE = r Coef. Std. Err. t P> t [95% Conf. Interval] _cons t (dropped) id (dropped) 进一步两两比较 test _b[t[1]]=_b[t[2]] ( 1) t[1] - t[2] = 0.0 F( 1, 21) = Prob > F = test _b[t[1]]=_b[t[3]] ( 1) t[1] - t[3] = 0.0 F( 1, 21) = Prob > F = test _b[t[2]]=_b[t[3]] ( 1) t[2] - t[3] = 0.0 F( 1, 21) = Prob > F = 解释如同上述, 不再重复

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