明智之选 品质至上 我们一直致力于满足您不断变化的蛋白质研究需求, 为您提供适用于多种应用领域, 可实现快速 可靠的蛋白质电泳的一整套产品, 不论是工作流程的第一步还是最后一步 我们所有的蛋白预制胶均具有出众的性能 可靠性 可重复性和质量一致性 我们品种齐全的蛋白预制胶产品可针对您的研究所需提供各种

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1 为您所选的蛋白预制胶 性能可靠, 品类齐全 蛋白预制胶解决方案

2 明智之选 品质至上 我们一直致力于满足您不断变化的蛋白质研究需求, 为您提供适用于多种应用领域, 可实现快速 可靠的蛋白质电泳的一整套产品, 不论是工作流程的第一步还是最后一步 我们所有的蛋白预制胶均具有出众的性能 可靠性 可重复性和质量一致性 我们品种齐全的蛋白预制胶产品可针对您的研究所需提供各种凝胶方案 不论您的蛋白质是 2.5 还是 500, 不论是要在非变性 还是等电点条件下进行分离 或者您想要鉴别蛋白酶的活性 我们都可以提供适合您的应用的凝胶 您可通过这本手册比较凝胶种类, 了解每种产品的优势, 选择推荐的蛋白质分子量标准, 从而获得更理想的蛋白质分离结果

3 目录 概述 2 宽范围分子量蛋白质分离 : Bis-Tris 和 Tris- 甘氨酸凝胶 4 高分子量蛋白质分离 : Tris- 乙酸凝胶 9 低分子量蛋白质分离 : Tricine 凝胶 10 非变性蛋白凝胶电泳 : Bis-Tris 凝胶 11 电泳槽和蛋白染料 12 蛋白小型胶迁移图 蛋白质分子量标准 插页 封底内页

4 概述 四种优化的蛋白预制胶 我们的蛋白预制胶有 4 种不同类型可供选择 选择使用哪种类型取决于待分离蛋白质的丰度 蛋白质分子量大小和下游应用, 如下一页中的选择指南所示 Bis-Tris 和 Tris- 甘氨酸两种凝胶类型均已经过优化, 具有高性能和长保质期, 适用于宽范围蛋白质的分离 当蛋白质丰度较低或下游应用需要高蛋白完整性时, 可选择 Bis-Tris 凝胶类型, 如翻译后修饰的分析 质谱或测序 相比于 Tris- 甘氨酸凝胶,Bis-Tris 凝胶可提供更高的蛋白检测灵敏度 我们的 Invitrogen Bolt 和 NuPAGE 预制胶采用了创新型 Bis-Tris 体系, 它是在传统 Laemmli Tris- 甘氨酸系统的基础上改进而来的 Bis-Tris 凝胶在电泳过程中提供中性 (ph 7.0) 环境, 可提高蛋白样本完整性和凝胶稳定性, 有助于减少蛋白质修饰, 获得理想的高分辨率条带和更漂亮的蛋白质免疫印迹结果 我们的 Invitrogen Bolt Bis-Tris Plus 小型胶是在已被广泛引用的 Invitrogen NuPAGE Bis-Tris 预制胶的基础上研发而来的 丙烯酰胺浓度的选择我们可提供多种浓度的凝胶, 用于不同范围的蛋白质分离 凝胶浓度的选择应取决于待分离的分子大小 通常, 分子应在约 70% 的凝胶长度上进行迁移, 以获得最佳分辨率 使用较低浓度的凝胶分离较大的分子, 使用较高浓度的凝胶分离较小的蛋白质和肽段 梯度凝胶分离蛋白质的范围大于固定浓度的凝胶 鉴于手工配制梯度凝胶的难度更高,Invitrogen 梯度预制胶的便捷性和高重复性可帮助您轻松实现理想的蛋白质分离 参阅本手册后方折页的说明, 查看不同范围的分子量标准的凝胶迁移图 小型胶和中型胶 Invitrogen 蛋白预制胶有两种尺寸可供选择 : 小型胶和中型胶 这两种凝胶的高度相同, 电泳时间相近, 但中型胶的凝胶尺寸更宽 (8 cm x 13 cm), 可以满足更高通量的电泳需求 中型胶中更多的孔数可以容纳更多种样本或更大的样本体积 当分离高丰度蛋白时, 可选择性能强劲的 Invitrogen Novex Tris- 甘氨酸预制胶, 该凝胶具有理想的蛋白分离性能, 生成锐利且笔直的条带 Invitrogen NuPAGE Tris- 乙酸预制胶推荐用于高分子量蛋白质 ( 高达 500 ) 的分离 Tricine 凝胶则推荐用于分离低分子量蛋白和肽段 我们的 Invitrogen Novex Tricine 预制胶在分离分子量低至 2.5 的蛋白质时, 具有更高的分辨率 Invitrogen NativePAGE 凝胶也采用了 Bis-Tris 体系, 适用于非变性条件下的蛋白质分离, 可分离分子量高达 10,000 的蛋白质 了解更多信息, 请登录 thermofisher.com/proteingels 2

5 蛋白预制胶选择指南根据样本类型 分离类型和分子量查找符合您研究需求的预制胶 变性分离 * 样本类型 分子量范围 低丰度蛋白质和翻译后修饰蛋白 高丰度蛋白 宽范围分子量蛋白质 (6 400 ) 高分子量蛋白质 ( ) Bolt Bis-Tris Plus 小型胶 ( 上样量高达 60 μl) Bis-Tris 凝胶 NuPAGE Bis-Tris 预制胶 Tris- 乙酸凝胶 NuPAGE Tris- 乙酸预制胶 Tris- 甘氨酸凝胶 Novex Tris- 甘氨酸小型胶, WedgeWell 形式 ( 上样量高达 60 μl) 低分子量蛋白质 ( ) Tricine 凝胶 Novex Tricine 小型预制胶 * 低通量应用 对于中等或高通量应用, 请登录 thermofisher.com/specialtygels, 参见 Invitrogen E-PAGE 48 孔或 96 孔凝胶 非变性分离 分子量 等电点 1 维 NativePAGE 预制胶 Novex Tris- 甘氨酸小型胶, WedgeWell 形式 NuPAGE Tris- 乙酸预制胶 Novex IEF 预制胶 ZOOM IPG 胶条 2 维 NuPAGE Bis-Tris 预制胶,2D 孔 Novex Tris- 甘氨酸预制胶,2D 孔 Novex Tris- 甘氨酸预制胶,2D 孔 Novex Tris- 甘氨酸预制胶, 2D 孔或 NuPAGE Bis-Tris 预制胶, 2D 孔 Novex Tris- 甘氨酸 ZOOM 预制胶,IPG 孔或 NuPAGE Bis-Tris ZOOM 预制胶,IPG 孔 蛋白酶活性 Novex Zymogram 预制胶 ( 酪蛋白 蓝色酪蛋白或明胶底物 ) 了解更多信息, 请登录 thermofisher.com/specialtygels 使用我们的交互式凝胶选择工具查找适合的蛋白预制胶, 请登录 thermofisher.com/minigelselection 3

6 宽范围分子量蛋白质分离 Bis-Tris 凝胶 : 优化的蛋白质分离, 适用于高灵敏度应用 Bis-Tris 凝胶提供了中性 ph 环境, 可最大程度地减少蛋白质降解 此外, 分离低丰度蛋白质时, 保护蛋白质的完整性变得尤为重要 Bis-Tris 凝胶配方包括了 Bolt Bis-Tris Plus 小型胶和 NuPAGE Bis-Tris 小型胶两种 Bolt Bis-Tris Plus 小型胶可在变性电泳条件下实现宽范围分子量蛋白质的理想分离 独特的 WedgeWell 楔形孔设计使得样本上样体积较其他预制胶增加了一倍 Bolt 预制胶适用于蛋白质免疫印迹分析和其他注重蛋白质完整性且对灵敏度要求更高的应用领域 Bolt Bis-Tris Plus 预制胶的优势 : 保护蛋白质的完整性 中性 ph 体系可最大程度地减少蛋白质修饰或降解, 避免不理想的分离效果 高样本容量 WedgeWell 楔形孔设计可实现极低浓度的样本检测或低丰度蛋白显示 Bolt Bis-Tris Plus 小型胶的楔形孔设计 出众的条带品质和条带容量 Bolt Bis-Tris Plus 预制胶的独特配方可以获得锐利笔直的条带, 且条带容量更高 蛋白质分辨率更佳 凝胶长度增加 10%, 与标准小型胶相较可以检测出更多蛋白条带 MagicMark standard GST IKKβ EPHB3 HCK MAPK14 FLT1 DDR2 MagicMark standard GST IKKβ EPHB3 HCK MAPK14 FLT1 DDR2 高批次间一致性 Rf 值 ( 迁移 ) 变异系数 (CV) 仅为 2% 优化的电泳条件 恒压下分离蛋白质, 仅需 35 分钟左右 Bolt Bis-Tris Plus 预制胶 Bio-Rad TGX 预制胶 Bolt Bis-Tris Plus 小型胶有助于获取更佳的蛋白质免疫印迹结果 采用 Bolt 预制胶获得的蛋白质免疫印迹结果显示了清晰的蛋白质信号, 该信号只对应全长蛋白, 而采用 Bio-Rad TGX 预制胶获得的蛋白质免疫印迹结果则显示了多个低分子量的降解产物 在 Bolt Bis-Tris Plus 预制胶和 Bio-Rad TGX Tris- 甘氨酸预制胶上分析癌症相关的蛋白激酶 (IKKβ EPHB3 HCK MAPK14 FLT1 和 DDR2) 将纯化的激酶 ( 各 50 ng) 与 Invitrogen MagicMark XP 蛋白质分子量标准和纯化的重组 GST 蛋白上样至 10 孔 4 12% Bolt 预制胶和 10 孔 4 20% Bio-Rad TGX 预制胶上 采用各制造商的实验方案分离样本并转印至 0.45 μm 的 PVDF 膜上 通过 GST 抗体和 Invitrogen WesternBreeze 化学发光检测试剂进行免疫检测 采用 LAS-1000 系统 (FujiFilm) 进行印迹成像 了解更多信息, 请登录 thermofisher.com/bolt 4

7 NC PVDF Bolt Bis-Tris Plus 预制胶 Tris- 甘氨酸预制胶 Bolt Bis-Tris Plus 预制胶具有更高的灵敏度 使用 Invitrogen iblot 2 干式转印系统将 A431 细胞中提取出的总细胞抽提物从 4 12% Bolt Bis-Tris Plus 预制胶和 4 20% Tris- 甘氨酸预制胶转印至 NC 膜和 PVDF 膜上 采用 100 ng/ml 的人表皮生长因子 (hegf) 处理细胞, 上调磷酸化 -EGF 受体的表达 细胞提取物的蛋白质上样量为 20 μg 至 1.2 μg 使用 1:200 稀释的磷酸化 -EGF 受体 (Tyr1068) (1H12) 小鼠 mab (Cell Signaling Technology) 和 1:2,000 稀释的抗小鼠 HRP 二抗 (Jackson ImmunoResearch), 在 Invitrogen ibind 蛋白质免疫印迹系统上处理印迹 采用 Invitrogen Novex ECL HRP 底物检测 与 Tris- 甘氨酸预制胶获得的印迹相比,Bolt 预制胶所得印迹的检测灵敏度几乎是 2 倍 250 规格 凝胶百分比 8% 10% 12% 4 12% 凝胶尺寸 保质期 分离范围 电泳时间 电泳缓冲液 样本缓冲液 推荐的分子量标准 小型 (8 x 8 cm),1.0 mm 厚 4 25 C 下 16 个月 15 至 260 (MOPS 缓冲液 ), 3.5 至 160 (MES 缓冲液 ) 20 分钟 (MES 缓冲液 ) 35 分钟 (MOPS 缓冲液 ) MES SDS 电泳缓冲液或 MOPS SDS 电泳缓冲液 Bolt LDS 样本缓冲液及 Bolt 样本还原剂 ibright 预染蛋白质分子量标准 Invitrogen ibright 预染蛋白质分子量标准 凝胶 :Novex 4 20% Tris- 甘氨酸小型胶,WedgeWell 形式 ; 左 : 凝胶分离后的预染蛋白质分子量标准 ; 中 : 蛋白质免疫印迹的化学发光成像 ; 右 : 蛋白质免疫印迹的近红外荧光成像 5

8 文献引用数量超 20,000 篇的 NuPAGE Bis-Tris 预制胶 Bis-Tris 凝胶可为蛋白质提供中性 ph 环境, 从而保护蛋白质的完整性, 获得锐利而笔直的条带 NuPAGE Bis-Tris 预制胶具有 Bis-Tris 配方的优点, 其可靠性已被超过 20,000 篇文献证明 经过广泛验证 值得信赖的 NuPAGE Bis-Tris 预制胶在较宽的蛋白质分子量范围内都具备出众的分辨率 NuPAGE Bis-Tris 预制胶提供了小型胶和中型胶两种尺寸 NuPAGE Bis-Tris 预制胶的优势 : 保护蛋白质完整性 中性 ph 体系可最大程度地减少蛋白质修饰或降解, 从而避免多带或条带位置不符 高批次间一致性 Rf 值 ( 迁移 ) 变异系数 (CV) 仅为 2% NuPAGE 4 12% Bis-Tris 中型胶 长保质期 室温下可保存 12 个月 规格凝胶百分比 10% 12% 4 12% 和 8% ( 仅中型胶 ) 小型 (8 x 8 cm),1.0 mm 和 1.5 mm 厚 ; 凝胶尺寸中型 (8 x 13 cm),1.0 mm 厚保质期 4 25 C 下 12 个月 15 至 260 (MOPS 缓冲液 ), 分离范围 3.5 至 160 (MES 缓冲液 ) 电泳时间仅 35 分钟 NuPAGE MES SDS 电泳缓冲液用于小分子量蛋白质,NuPAGE MOPS SDS 电泳缓冲液电泳缓冲液用于中等至大分子量蛋白质 ; 利用电泳缓冲液中的 NuPAGE 抗氧化剂, 在电泳过程中维持还原状态 NuPAGE LDS 样本缓冲液及 NuPAGE 样本缓冲液样本还原剂 ibright 预染蛋白质分子量标准 ( 用于蛋推荐的分子量标准白质免疫印迹 ),PageRuler Plus 预染蛋白质分子量标准 ( 用于凝胶染色 ) Bio-Rad 4 12% Criterion XT Bis-Tris 凝胶 NuPAGE Bis-Tris 预制胶可获得更笔直的泳道和条带 在 NuPAGE 4 12% Bis-Tris 中型胶 (MOPS 缓冲液 ) 和 Bio-Rad 4 12% Criterion XT Bis-Tris 预制胶 (MOPS 缓冲液 ) 的每个泳道上上样 5 μl Invitrogen Mark12 非预染标准品, 并使用 Coomassie 染料染色 ibright 预染蛋白质分子量标准 凝胶 :Novex 4 20% Tris- 甘氨酸小型胶,WedgeWell 形式 ; 左 : 凝胶分离后的预染蛋白质分子量标准 ; 中 : 蛋白质免疫印迹的化学发光成像 ; 右 : 蛋白质免疫印迹的近红外荧光成像 Thermo Scientific PageRuler Plus 预染蛋白质分子量标准 使用 NuPAGE MES SDS 电泳缓冲液在 NuPAGE 4 12% Bis-Tris 预制胶上进行电泳 了解更多信息, 请登录 thermofisher.com/nupage 6

9 Tris- 甘氨酸凝胶 :60µL 超大上样体积 Tris- 甘氨酸凝胶适用于广泛的样本类型 Novex Tris- 甘氨酸凝胶基于经典的 Laemmli 配方, 性能极佳, 可将各种大小的蛋白质分离成分辨率极佳的条带, 适用于含有去污剂和高盐浓度的样本 此外,Novex Tris- 甘氨酸小型胶具有 WedgeWell 楔形孔设计, 其上样孔容量更大, 上样体积可达 60 μl, 并且更易于上样操作 Novex Tris- 甘氨酸 (WedgeWell 形式 ) 预制胶的优势 : 高性能 极佳的蛋白条带分辨率和清晰度 楔形孔 上样量高达 60 μl, 不影响凝胶的宽度或长度 ( 仅小型胶 ) 快速电泳条件 使用恒压快速分离蛋白质, 只需不到 60 分钟 灵活 Novex Tris- 甘氨酸预制胶不含 SDS, 可用于非变性或变性条件的蛋白质电泳 Novex Tris- 甘氨酸小型胶 (WedgeWell 形式 ) 的楔形孔设计 Novex 4 20% Tris- 甘氨酸小型胶, WedgeWell 形式 Bio-Rad TGX 4 20% 预制胶 Novex Tris- 甘氨酸小型胶 (WedgeWell 形式 ) 可提供更佳的蛋白分辨率和条带清晰度 将蛋白质分子量标准 纯化的蛋白质和大肠杆菌裂解物上样至 Novex 4 20% Tris- 甘氨酸梯度小型胶 (WedgeWell 形式 ) 和 Bio-Rad TGX 4 20% 梯度预制胶上 Bio-Rad TGX 预制胶的第 泳道上显示了多个低分子量的蛋白降解产物 这些并未在 Novex Tris- 甘氨酸预制胶上观察到 Novex 预制胶还显示了较 Bio-Rad 预制胶更佳的蛋白条带清晰度和裂解物分辨率 泳道 1 和 10:5 μl Mark12 非预染标准品 ; 泳道 2:10 μg 大肠杆菌裂解物 (10 μl 样本体积 ); 泳道 3:6 μg 过氧化氢酶 (10 μl 样本体积 ); 泳道 4:6 μg 碳酸酐酶 (10 μl 样本体积 ); 泳道 5:6 μg 溶菌酶 (10 μl 样本体积 ); 泳道 6:6 μg higm (10 μl 样本体积 ); 泳道 7:6 μg BSA (10 μl 样本体积 ); 泳道 8:6 μg β- 半乳糖苷酶 (10 μl 样本体积 ); 泳道 9:20 μg 大肠杆菌裂解物 (20 μl 样本体积 ) 7

10 20 µl 30 µl 40 µl 50 µl 60 µl 20 µl 30 µl 40 µl 50 µl 60 µl Novex Novex Tris- Tris-Glycine 甘氨酸小型胶 mini,wedgewell gel, WedgeWell 形式,10 format, 孔 10-well Bio-Rad TGX 预制胶,10 孔 Bio-Rad TGX gel, 10-well Novex Tris- 甘氨酸小型胶 (WedgeWell 形式 ) 的样本容量更高 将不同体积的 (20 60 μl) 荧光蛋白分子量标准上样至 Novex Tris- 甘氨酸 10 孔小型胶 (WedgeWell 形式 ) 和 Bio-Rad TGX 10 孔预制胶上, 每隔一孔加样 在 Bio-Rad 预制胶上, 可以观察到 50 μl 和 60 μl 上样泳道相邻的泳道有样本溢出现象 规格 凝胶百分比凝胶尺寸保质期分离范围电泳时间电泳缓冲液 6% 8% 10% 12% 14% 16% 4 12% 4 20% 8 16% 10 20% 小型 (8 x 8 cm), 中型 (8 x 13 cm);1.0 mm 厚 4 C 下长达 12 个月 8 至 分钟 Novex Tris- 甘氨酸 SDS 电泳缓冲液 ; 对于非变性电泳, 推荐 Novex Tris- 甘氨酸非变性电泳缓冲液 ~250 ~130 ~100 ~70 ~55 ~35 ~25 ~15 样本缓冲液推荐的分子量标准 Novex Tris- 甘氨酸 SDS 样本缓冲液 ; 对于非变性电泳, 推荐 Novex Tris- 甘氨酸非变性样本缓冲液 ibright 预染蛋白质分子量标准 ( 用于蛋白质免疫印迹 ),PageRuler Plus 预染蛋白质分子量标准 ( 用于凝胶染色 ) 10 ibright 预染蛋白质分子量标准 凝胶 :Novex 4 20% Tris- 甘氨酸小型胶,WedgeWell 形式 ; 左 : 凝胶分离后的预染蛋白质分子量标准 ; 中 : 蛋白质免疫印迹的化学发光成像 ; 右 : 蛋白质免疫印迹的近红外荧光成像 ~10 PageRuler Plus 预染蛋白质分子量标准 凝胶 :4 20% Tris- 甘氨酸 (SDS-PAGE) 8

11 高分子量蛋白质分离 Tris- 乙酸凝胶 : 适用于高分子量蛋白质的分离和检测 Tris- 乙酸凝胶与 SDS 电泳缓冲液结合使用时, 可实现高分子量蛋白质的理想分离 NuPAGE Tris- 乙酸预制胶提供了 ph 8.1 的环境, 可最大程度地减少蛋白质修饰, 形成更锐利的条带 NuPAGE Tris- 乙酸预制胶还可与 Novex Tris- 甘氨酸非变性电泳缓冲液结合使用, 相比 Tris- 甘氨酸凝胶系统可以更高效地分离非变性蛋白质 20 µg 6.7 µg 2.3 µg 0.74 µg 0.25 µg 83 ng 28 ng 9 ng NuPAGE 3 8% Tris-Acetate 乙酸小型胶 mini gel EGFR (~190 ) NuPAGE Tris- 乙酸凝胶和缓冲液可实现 : 高分子量蛋白质的理想分离 20 µg 10 µg 5 µg 2.5 µg 1.25 µg 0.75 µg 0.62 µg 通过经过优化的样本制备过程, 保护蛋白质样本的完整性 极佳的高分子量蛋白质转印效率 规格凝胶百分比 7% 3 8% 小型 (8 x 8 cm),1.0 mm 和 1.5 mm 凝胶尺寸厚 ; 中型 (8 x 13 cm),1.0 mm 厚保质期 2 8 C 下 6 个月分离范围 30 至 500 变性凝胶电泳 60 分钟 ; 电泳时间非变性凝胶电泳 2 3 小时对于变性蛋白质, 我们推荐 NuPAGE Tris- 乙酸 SDS 电泳缓冲液 ; 对于非变电泳缓冲液性蛋白质, 我们推荐 Novex Tris- 甘氨酸非变性电泳缓冲液对于变性蛋白质, 我们推荐 NuPAGE LDS 样本缓冲液 ; 对于非变性蛋白质, 样本缓冲液我们推荐 Novex Tris- 甘氨酸非变性样本缓冲液 Spectra 多色高分子量蛋白质标准品推荐的分子量标准 ( 用于蛋白质免疫印迹 ),HiMark 非预染蛋白质标准品 ( 用于凝胶染色 ) ~300 ~250 ~180 ~130 ~100 ~70 ~50 ~40 EGFR (~190 ) Novex 4 20% Tris- 甘氨酸小型胶,WedgeWell 形式 高分子量蛋白转印效果的优化提高了蛋白质免疫印迹检测的灵敏度 使用 iblot 2 干式转印系统从 Novex 4 20% Tris- 甘氨酸小型胶 (WedgeWell 形式 ) 和 NuPAGE 3 8% Tris- 乙酸小型胶上转印 A431 裂解物中的 EGFR, 然后进行蛋白质免疫印迹分析 Thermo Scientific Spectra 多色高分子量蛋白质标准品 凝胶 :4 12% Tris- 甘氨酸预制胶 (SDS- PAGE) kinase Invitrogen HiMark 非预染蛋白质分子量标准和高分子量蛋白 凝胶 :NuPAGE 3 8% Tris- 乙酸预制胶 ; 染料 :Thermo Scientific Coomassie R-250 染料 ; 左图 :5 μl HiMark 非预染蛋白质标准品 ; 右图 :4 μl 蛋白激酶样本 9

12 低分子量蛋白质分离 Tricine 凝胶 : 适用于低分子量蛋白质的分离和检测 Tricine 凝胶可实现低分子量蛋白和肽段的理想分离 Novex Tricine 预制胶是适用于肽段和低分子量蛋白质分析的高分辨率凝胶 Novex Tricine 预制胶系统是基于 Tris- 甘氨酸系统改进而成的, 即用三羟甲基甘氨酸 (Tricine) 替代电泳缓冲液中的甘氨酸 该系统通过不连续的缓冲系统分离低分子量蛋白 Novex Tricine 预制胶相比 Tris- 甘氨酸凝胶的优势 : 分离分子量低至 2.5 的蛋白质时分辨率更高 兼容性更好, 转印至 PVDF 膜后可直接用于下游蛋白测序应用 Novex Novex 16% 16% Tricine Tricine 预制胶 gel α-tubulin α-tubulin Cleaved caspase-3 由于三羟甲基甘氨酸缓冲系统的 ph 更低, 可最大程度地减少蛋白质修饰 最大程度地避免转印过程中蛋白质穿透转印膜 Bio-Rad TGX 4 20% Tris-Glycine 甘氨酸预制胶 gel Cleaved caspase-3 Novex Tricine 预制胶可以更好地分离低分子量蛋白 泳道 1:Thermo Scientific PageRuler 预染 NIR 蛋白质分子量标准 ; 泳道 2 9: 每孔上样 1μL 1.5x 连续稀释的经过细胞色素 c 处理的 Jurkat 细胞裂解物 在 Novex 16% Tricine 预制胶和 Bio-Rad TGX 4 20% Tris- 甘氨酸预制胶上分离后, 使用 caspase-3 和 α- 微管蛋白抗体检测印迹膜, 然后分别使用 Invitrogen Alexa Fluor Plus 680 和 Invitrogen Alexa Fluor Plus 800 标记二抗检测 Novex 16% Tricine 预制胶可以很好地分离 caspase-3 裂解后的 17 和 19 条带, 而 Bio-Rad TGX Tris- 甘氨酸预制胶则无法分离 规格 凝胶百分比 10% 16% 10 20% 凝胶尺寸 小型 (8 x 8 cm),1.0 mm 厚 保质期 2 8 C 下 1 2 个月 分离范围 2 至 20 ~40 ~25 ~15 ~ 电泳时间电泳缓冲液样本缓冲液推荐的分子量标准 90 分钟 Novex Tricine SDS 电泳缓冲液 Novex Tricine SDS 样本缓冲液 Spectra 多色低分子量蛋白质标准品 ( 用于蛋白质免疫印迹 ),PageRuler 非预染低分子量蛋白质标准 ( 用于凝胶染色 ) ~4.5 ~1.7 Spectra 多色低分子量蛋白质标准品 凝胶 :Tricine 预制胶 Thermo Scientific PageRuler 非预染低分子量蛋白质标准 凝胶 :Tricine 预制胶 ; 染料 : 考马斯亮蓝 10

13 非变性蛋白凝胶电泳 Bis-Tris 凝胶 : 出众的非变性蛋白和蛋白复合物分辨率 Bis-Tris 凝胶可对非变性蛋白和蛋白复合物进行灵敏且高分辨率的分析, 适用于分子量估算和纯度评估 NativePAGE Bis- Tris 预制胶基于蓝色非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (BN-PAGE) 技术, 该技术具有近中性 ph 环境和去污剂兼容性, 克服了传统非变性电泳的限制 我们可提供 NativePAGE Bis-Tris 预制胶, 用于天然蛋白和蛋白复合物的蓝色非变性电泳 NativePAGE Bis-Tris 预制胶系统相比传统 Tris- 甘氨酸凝胶的优势 : 宽分子量分离范围 从 15 到 10,000 中性 ph 分离 更好地保持蛋白质复合物的天然状态 BN-PAGE 技术 在凝胶中实现不依赖于等电点 (pi) 的蛋白质分离 性能理想 分辨率高于 Tris- 甘氨酸非变性电泳 NativePAGE 3 12% Bis-Tris 小型胶 NativePAGE Bis-Tris 小型胶电泳可分辨极大的蛋白质和蛋白复合物 使用小型胶槽在 Invitrogen NativePAGE 3 12% Bis-Tris 小型胶上对两倍连续稀释的蛋白提取物进行电泳 泳道 1 和 10: 空白 ; 泳道 2 和 6:5 μl Invitrogen NativeMark 非预染蛋白质标准品 ; 泳道 3 4 和 5:10 5 和 2.5 μg 菠菜叶绿体提取物 ; 泳道 7 8 和 9:10 5 和 2.5 μg 牛线粒体提取物 规格 凝胶百分比 3 12% 4 16% 凝胶尺寸 小型 (8 x 8 cm),1.0 mm 厚 保质期 2 8 C 下 1 2 个月 分离范围 15 至 10,000 电泳时间 90 分钟 电泳缓冲液 NativePAGE 电泳缓冲液及 NativePAGE 阴极缓冲液添加剂 样本缓冲液 NativePAGE 样本缓冲液 推荐的分子量标准 NativeMark 非预染蛋白质标准品 1,236 1, NativeMark 非预染蛋白质标准品 凝胶 :4 16% NativePAGE Bis-Tris 预制胶 ; 染料 :Coomassie G

14 Invitrogen Bolt Bis-Tris Plus 预制胶 变性分离 0 8% MES 10% MES 12% MES 4 12% MES 8% MOPS 10% MOPS 12% MOPS 4 12% MOPS 蛋白小型胶迁移图 凝胶长度 % 这些图显示了各种分子量的蛋白质在我们的小型胶上的迁移模式, 帮助您轻松选择分离目的蛋白的最佳凝胶

15 0 Invitrogen NuPAGE Bis-Tris 预制胶 变性分离 8% MES 8% MOPS 10% MES 10% MOPS 4 12% MES 4 12% MOPS 12% MES 12% MOPS Invitrogen Novex Tris- 甘氨酸预制胶,WedgeWell 形式 变性分离 10% 12% 8 16% 4 12% 4 20% 蛋白小型胶迁移图 凝胶长度 %

16 0 Invitrogen NuPAGE Tris- 乙酸预制胶 变性分离 3 8% 7% Invitrogen Novex Tricine 预制胶 印迹和测序 合成肽与胰蛋白酶分析 宽范围 NuPAGE Tris- 乙酸预制胶 非变性分离 Invitrogen NativePAGE 预制胶 非变性分离 10% 16% 10 20% 3 8% 7% 3 12% 4 16% ,048 1,048 1,236 1,048 1, 蛋白小型胶迁移图 凝胶长度 %

17 电泳槽和蛋白染料 1 款电泳槽 181 种预制胶凝胶染料 Mini Gel Tank 电泳槽较传统的电泳槽更直观 更便捷 独特的并排式胶槽设计, 使您可以进行 1 块或 2 块小型胶的电泳 Mini Gel Tank 电泳槽的优势 : 通用 兼容我们所有的小型预制胶, 包括 Bolt NuPAGE Novex 和 NativePAGE 凝胶 上样更方便 前置孔设计, 便于上样操作 同时观察两块凝胶 人性化的并排式胶槽设计 易于监测电泳进程 白色电泳槽背板帮助轻松分辨预染分子量标准 电泳缓冲液用量更省 2 个槽室独立, 您只需加入足够每块凝胶使用的缓冲液即可 便捷的蛋白质免疫印迹 新型小型胶转印模块, 适用于 Mini Gel Tank 电泳槽, 可以轻松进行蛋白质转印 我们可为您的应用提供多种凝胶染色方案, 包括考马斯染色 银染和荧光染色 考马斯染色 Invitrogen SimplyBlue SafeStain 是一种快速 灵敏且安全的即用型考马斯 G-250 染料, 可用于观察聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白条带 SimplyBlue SafeStain 完全无毒性, 且无需甲醇或乙酸固定剂或脱色液 银染 Thermo Scientific Pierce 银染试剂盒是一套快速 超灵敏且通用的银染系统, 可用于检测聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白质 Pierce 银染试剂盒是一种金属银 (Ag) 蛋白染料, 可生成非常清晰且均匀的凝胶背景, 并获得一致且高灵敏度的染色结果 了解更多信息, 请登录 thermofisher.com/minigeltank 了解更多信息, 请登录 thermofisher.com/proteinstains 12

18 蛋白质分子量标准 全系列蛋白质分子量标准, 帮助您进行蛋白质分析 查看我们品种齐全的即用型预染和非预染蛋白质分子量标准, 在凝胶电泳和蛋白质免疫印迹过程中轻松进行蛋白质分析 预染蛋白质分子量标准推荐用于 : 近似指示蛋白质分子量 我们提供高性价比的蛋白质分子量标准 质优价廉 : 性能理想 锐利的蛋白质条带, 稳定的迁移模式, 分子量测定更简便 易于使用 蛋白质分子量标准可直接上样, 无需加热 品质可靠 极佳的批次间一致性和可重复性 监测电泳进程 评估蛋白质免疫印迹中, 蛋白质转印至印迹膜上的效率 非预染蛋白质分子量标准推荐用于 : 在各种缓冲液系统中, 目标蛋白质分子量的精确测定 如需了解更多信息, 请登录 thermofisher.com/proteinladders

19 从我们的蛋白质分离 转印和检测技术手册中获取实用信息, 优化您的蛋白质分离和免疫印迹结果 即刻免费获取技术手册, 请浏览下方网页 thermofisher.com/pagehandbook thermofisher.com/transferhandbook thermofisher.com/detecthandbook 如需了解更多信息, 请登录 thermofisher.com/proteingels 免费服务电话 : / 销售服务信箱 技术咨询信箱 For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures Thermo Fisher Scientific Inc. All rights reserved. All trademarks are the property of Thermo Fisher Scientific and its subsidiaries unless otherwise specified.

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