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- 燕 牛
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1 ２３０ ~２３５ 研究论文 Ａｒｔｉｃｌｅｓ ２０１７ 年 第 ７ 卷 第 ３ 期 Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ＩＳＳＮ ２０９５ ２３４１ 生物技术进展 秀丽隐杆线虫免疫衰老指标的建立 白志慧 ꎬ 王 彦 ꎬ 张日丽ꎬ 许维恒ꎬ 张俊平 中国人民解放军第二军医大学药学院ꎬ 上海 ２００４３３ 摘 要: 秀丽隐杆线虫是研究衰老的重要模式生物ꎬ但目前对其免疫衰老的研究缺乏评价指标ꎮ 建立了秀丽隐杆线虫 铜绿假单胞菌感染模型ꎬ考察了线虫抗感染免疫能力与衰老之间的关系ꎬ建立了线虫免疫衰老的评价指标ꎮ 首先用铜绿 假单胞菌感染线虫建立模型ꎬ将处于不同衰老程度的线虫用于感染实验ꎬ考察了线虫感染后的生存时间与衰老程度的关 系ꎻ将感染后的生存时间作为抗感染免疫衰老的指标ꎬ其结果与线虫抗氧化能力和寿命指标的结果相互印证ꎮ 结果显 示ꎬ７ ｄ １４ ｄ ２１ ｄ 龄的线虫感染后的生存时间依次减少ꎬ与抗氧化能力的衰退情况相符ꎻ与野生型相比ꎬ长寿线虫( ｄａｆ ２ 突变线虫) 感染后的生存时间延长ꎬ短寿线虫( ｄａｆ １６ 突变线虫) 感染后的生存时间缩短ꎬ线虫的抗感染免疫指标与寿命 指标结果相符ꎻ能延长线虫寿命的化合物酪氨酸也延长了线虫感染后的生存时间ꎮ 因此线虫 铜绿假单胞菌感染模型可 以用于评价线虫的免疫衰老ꎬ感染后线虫的生存时间可作为免疫衰老的评价指标ꎮ 关键词: 秀丽隐杆线虫ꎻ铜绿假单胞菌ꎻ抗感染ꎻ免疫衰老 ＤＯＩ:１０.１９５８６ / ｊ.２０９５ ２３４１.２０１６.０１５４ Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｅ Ａｇｉｎｇ Ｉｎｄｅｘ ｏｆ Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｅｌｅｇａｎｓ ＢＡＩ Ｚｈｉｈｕｉ ꎬ ＷＡＮＧ Ｙａｎ ꎬ ＺＨＡＮＧ Ｒｉｌｉꎬ ＸＵ Ｗｅｉｈｅｎｇꎬ ＺＨＡＮＧ Ｊｕｎｐｉｎｇ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙꎬ Ｓｅｃｏｎｄ Ｍｉｌｉｔａｒｙ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｓｈａｎｇｈａｉ ２００４３３ꎬ Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｅｌｅｇａｎｓ ｉｓ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｍｏｄｅｌ ｏｒｇａｎｉｓｍ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ａｇｉｎｇ. Ｈｏｗｅｖｅｒꎬ ｉｔ ｌａｃｋｓ ａｎ ｉｎｄｅｘ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏ ａｇｉｎｇ. Ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙꎬ ｔｈｒｏｕｇｈ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃ. ｅｌｅｇａｎｓ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｍｏｄｅｌꎬ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ａｎｔｉ ｉｎｆｅｃｔｉｖｅ ｉｍｍｕｎｅ ａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ａｇｉｎｇ ｏｆ Ｃ. ｅｌｅｇａｎｓ ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄꎬ ａｎｄ ａｎ ｉｎｄｅｘ ｏｆ Ｃ. ｅｌｅｇａｎｓ ｉｍｍｕｎｏ ａｇｉｎｇ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ. Ｆｉｒｓｔｌｙꎬ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｍｏｄｅｌ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｕｓｉｎｇ Ｐ. ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ｔｏ ｉｎｆｅｃｔ Ｃ. ｅｌｅｇａｎｓ. Ｃ. ｅｌｅｇａｎｓ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｅｇｒｅｅｓ ｏｆ ａｇｉｎｇ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｍｏｄｅｌ ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｔｉｍｅ ａｎｄ ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ ａｇｉｎｇ. Ｔｈｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｔｉｍｅ ａｆｔｅｒ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｗａｓ ｕｓｅｄ ａｓ ａｎ ａｎｔｉ ｉｎｆｅｃｔｉｖｅ ｉｍｍｕｎｏ ａｇｉｎｇ ｉｎｄｅｘ. Ｔｈｅ ｄａｔａ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏ ａｇｉｎｇ ｉｎｄｅｘ ｗａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｄａｔａ ｏｆ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｃａｐａｃｉｔｙ ａｎｄ ｔｈｅ ｌｉｆｅｓｐａｎ. Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ａｇｉｎｇ ｏｆ Ｃ. ｅｌｅｇａｎｓ (７ ｄꎬ １４ ｄ ａｎｄ ２１ ｄ ｏｌｄ) ꎬ ｔｈｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｔｉｍｅ ｏｆ ｉｎｆｅｃｔｅｄ Ｃ. ｅｌｅｇａｎｓ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｓｅｑｕｅｎｔｉａｌｌｙꎬ ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｄｅｃｌｉｎｅ ｏｆ ｔｈｅｉｒ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｃａｐａｃｉｔｙ. Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｗｉｌｄｔｙｐｅꎬ ｄａｆ ２ ｍｕｔａｔｉｏｎ Ｃ. ｅｌｅｇａｎｓ ｗｉｔｈ ｌｏｎｇ ｌｉｆｅｓｐａｎ ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ ｌｏｎｇｅｒ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｔｉｍｅ ａｆｔｅｒ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎꎬ ｗｈｉｌｅ ｄａｆ １６ ｍｕｔａｔｉｏｎ Ｃ. ｅｌｅｇａｎｓ ｗｉｔｈ ｓｈｏｒｔ ｌｉｆｅｓｐａｎ ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ ｓｈｏｒｔｅｒ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｔｉｍｅ ｗｉｔｈ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ. Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ａｎｔｉ ｉｎｆｅｃｔｉｖｅ ｉｍｍｕｎｏ ａｇｉｎｇ ｉｎｄｅｘ ｗｅｒｅ ｉｎ ａｃｃｏｒｄａｎｃｅ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｄａｔａ ｏｆ ｌｉｆｅｓｐａｎ ｉｎｄｅｘ. Ｔｙｒｏｓｉｎｅꎬ ａ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｗｉｔｈ ａｎｔｉ ａｇｉｎｇ ａｃｔｉｖｉｔｙꎬ ｐｒｏｌｏｎｇｅｄ ｔｈｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｔｉｍｅ ｏｆ Ｃ. ｅｌｅｇａｎｓ ａｆｔｅｒ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ. Ｃｏｌｌｅｃｔｉｖｅｌｙꎬ Ｃ. ｅｌｅｇａｎｓ Ｐ. ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｍｏｄｅｌ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏ ａｇｉｎｇ ｏｆ Ｃ. ｅｌｅｇａｎｓ. Ｔｈｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｔｉｍｅ ｏｆ Ｃ. ｅｌｅｇａｎｓ ａｆｔｅｒ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ａｓ ａｎ ｉｎｄｅｘ ｔｏ ｉｎｄｉｃａｔｅ ｉｍｍｕｎｏ ａｇｉｎｇ ｏｆ Ｃ. ｅｌｅｇａｎｓ. Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ:ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｅｌｅｇａｎｓꎻ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａꎻ ａｎｔｉ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎꎻ ｉｍｍｕｎｏ ａｇｉｎｇ 秀丽隐杆线虫( Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｅｌｅｇａｎｓꎬ简称线 虫) 是衰老研究中重要的模式生物ꎮ 线虫成虫体 长约为 １ ｍｍꎬ实验室培养以大肠杆菌 Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＯＰ５０ 为 食ꎬ ２０ 下 的 线 虫 寿 命 为 三 周 左 右 [１] ꎮ 由于线虫用于寿命研究所需要的时间相 对其他物种短ꎬ基因干扰技术简单ꎬ与人类有相似 收稿日期:２０１６ １１ ３０ꎻ 接受日期:２０１６ １２ ２９ 基金项目:上海市浦江人才计划项目(１４ＰＪＤ００１) 资助ꎮ 作者简介: 白志慧与王 彦为本文共同第一作者ꎮ 白志慧ꎬ硕士研究生ꎬ研究方向为分子免疫药理ꎮ Ｅ ｍａｉｌ: ｂｚｈ ｃａｔ １２６.ｃｏｍꎮ 王 彦ꎬ副教授ꎬ研究方向为抗感染药物药理ꎮ Ｅ ｍａｉｌ:ｗａｎｇｙａｎｓｍｍｕ １２６.ｃｏｍꎮ 通信作者:张俊平ꎬ教授ꎬ研究方向为分子免 疫药理ꎮ Ｅ ｍａｉｌ:ｊｐｚｈａｎｇ０８ １６３.ｃｏｍ
2 白志慧 ꎬ 等 : 秀丽隐杆线虫免疫衰老指标的建立 231 的衰老进程 ꎬ 组织器官的变化可以在显微镜下观察等优势 ꎬ 被广泛应用于衰老相关研究 ꎬ 例如有研究报道二甲双胍和酪氨酸对线虫具有抗衰老作用 [2] ꎮ 评价线虫衰老的指标有很多 ꎬ 包括寿命 抗氧化能力 吞咽次数 运动能力和生殖能力等 [3] ꎮ 寿命这一指标可以整体评价机体的衰老进程 ꎬ 但实验周期长 [2] ꎻ 寿命之外的观察指标可以从一个侧面来反映衰老的进程 [4] ꎬ 因此大多需要多个指标同时观察监测 ꎬ 从而对衰老进程有一个全面客观的评价 ꎮ 近年来对免疫衰老的研究逐渐成为研究的热点 ꎮ 随着机体年龄的增加 ꎬ 免疫功能逐渐退化称为免疫衰老 [5] ꎮ 衰老和免疫功能的退化互为因果关系 ꎬ 抗衰老的同时免疫功能得以维护和保持 ꎬ 而提高免疫功能的同时又常常可以延缓衰老 [5] ꎮ 线虫具有天然免疫 [6] ꎬ 但是还没有成熟的指标来指示线虫的免疫衰老进程 ꎮ 我们通过查阅文献发现先前有研究利用线虫 - 铜绿假单胞菌感染模型考察致病菌感染能力或者筛选抗感染化合物 [7] ꎮ 在本研究中 ꎬ 我们改进了线虫 - 铜绿假单胞菌感染模型 ꎬ 改进后的模型可以反映线虫的免疫功能状态 ꎬ 从免疫功能角度对线虫衰老的程度给予评价 ꎬ 以期为免疫衰老评价体系的建立提供参考 ꎮ 1 材料和方法 1.1 材料 线虫株和菌株野生型线虫 Bristol N2 突变型线虫 daf 16(mu86)Ⅰ daf 2(e1370) Ⅲ 大肠杆菌 E. coli OP50 铜绿假单胞菌 P. aeruginosa PA14 均由美国哈佛大学的 Eleftherios Mylonakis 教授惠赠 ꎮ 试剂与仪器酪氨酸 5 氟尿苷 (5 Fluoro 2 deoxyuridineꎬfudr) 购自南京宝曼公司 ꎻ 百草枯购自阿拉丁公司 ꎻLB 肉汤培养基 胰蛋白胨 琼脂粉购自 BDꎬ 其他试剂均为国药生产 ꎮ 体视显微镜 (Nikon SMZ745)ꎻX 300BS Ⅲ 型恒温培养箱产自上海新苗医疗器械制造有限公司 ꎮ 1.2 方法 菌株培养挑单克隆 OP50 在 LB 液体培养基中培养过夜 ꎬ3 500 g 离心 10 minꎬ 浓缩 20 倍后均匀涂布在线虫培养板 (nematode growth medi umꎬngm) 中 ꎮ 挑 PA14 单克隆于 LB 培养基中 ꎬ 37 振荡培养 14 ~ 16 h 后 ( 不可超过 16 h)ꎬ 将菌 液涂布于 SK( slow killing) 板上 ꎬ 涂布后的 SK 板 在 37 静置培养 24 h 后置于 25 再静置培养 24 hꎮ 线虫一般培养及同期化所用方法参照 [8] Sutphin 等的方法 ꎬ 在 20 下培养 ꎬ 线虫生长在 涂有 OP50 的 NGM 培养板中 ꎮ 若培养板中食物 缺失 ꎬ 将线虫转移至新的 NGM 板中 ꎮ 待板中线 虫长至生殖期 ꎬ 将健康的有卵线虫成虫挑至新的 NGM 板中 ꎬ20 下线虫自然产卵 3 ~ 4 h 后将成虫 挑出 ꎬ 剩下的卵在 20 培养 ꎬ2 d 后 ꎬ 线虫长至 L4 期 ꎮ [9] 感染实验实验方法参考 Powell 等的 方法 ꎬ 将长至 L4 期的线虫转移至实验 NGM 板 中 ꎬ 每个 9 cm 平板中约 100 条线虫 ꎮ 实验 NGM 板中加了 49 μmol / L 的 FUDR 用以抑制线虫卵的 生长 ꎬ100 mg / L 氨苄青霉素用以防止其他杂菌污 染 ꎮ 在培养过程中 ꎬ2 d 观察一次线虫生长情况 ꎬ 一个星期内每 2 天转移一次线虫 ꎬ 一星期后每 7 d 转移一次线虫 ꎮ 待线虫长至 7 d 14 d 21 d 后随 机挑取健康线虫转移至涂有铜绿假单胞菌 PA14 的 SK 板中 ꎬ 每天记录线虫生存死亡数直至线虫 全部死亡 ꎬ 以 OP50 培养的线虫为健康对照 ꎮ 25 下培养 ꎬ 每组 3 块平行板 ꎬ 每板 30 条线虫 ꎮ 死亡标准 : 线虫无移动 ꎬ 且用铂金丝触碰线虫头部 和尾部 ꎬ 线虫无反应视为死亡 ꎮ 酪氨酸处理线虫感染实验 : 将长至 L4 期的线 虫转移至实验 NGM 板中 ꎬ 每个 9 cm 平板中约 100 条线虫 ꎮ 实验 NGM 板中加了 1 mol / L 的酪氨 酸 ꎬ49 μmol / L 的 FUDR 用以抑制线虫卵的生长 ꎬ 100 mg / L 氨苄青霉素用以防止其他杂菌污染 ꎮ 待线虫长至 14 dꎬ 随机挑取健康线虫转移至涂有 铜绿假单胞菌 PA14 的 SK 板中 ꎬ 每天记录线虫生 存死亡数直至线虫全部死亡 ꎮ 氧化应激实验实验方法参考 Zarse [10] 的 方法 ꎬ 待线虫长至 7 d 14 d 21 d 后随机挑取健康 线虫转移至含有 10 mmol / L 百草枯的 NGM 板中 ꎬ 每天记录线虫生存死亡数直至线虫全部死亡 ꎮ 在 20 下培养 ꎬ 每组 3 块平行板 ꎬ 每板 30 条线虫 ꎮ 其余方法同感染实验 ꎮ 统计学分析生存曲线采用 Kaplan Meier 分析法 ꎬLog rank ( Mantel Cox) Text 比较生存率 差异 ꎮ 定量资料以平均值 ± 标准差表示 ꎬP <0.05
3 ２３２ 生物技术进展 Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ 表示有统计学差异ꎮ 文中数据统计及作图如无特 殊说明均由 ＳＰＳＳ １８.０ 软件完成ꎮ ２ 结果与分析 ２.１ 线虫 铜绿假单胞菌感染模型的建立 铜绿假单胞菌 ＰＡ１４ 感染线虫后线虫活动力 感染后平均生存时间为 １１１.９３±５.１３ ｈꎬ最长生存 时间为 １９６ ｈꎻ１４ ｄ 龄的线虫感染后的平均生存时 间为 ６２.３２±２.７０ ｈꎬ最长生存时间为 １２７ ｈꎻ２１ ｄ 龄的线虫感染后的平均生存时间为 ４５. ６１ ± ３. ９１ ｈꎬ最长生存时间为 １１５ ｈꎮ 表明线虫的抗感染能 力随衰老而减弱ꎮ 下降 死亡率升高ꎮ ７ ｄ 龄的线虫喂食大肠杆菌 ＯＰ５０ １２５ ｈ 后线虫状态良好ꎬ 无死亡现象ꎮ ７ ｄ 龄的线虫喂食铜绿假单胞菌 ＰＡ１４ ３２ ｈ 后出现死 亡现象ꎻ１００ ｈ 后线虫死亡率高于 ５０ ꎻ１２５ ｈ 后 线虫死亡率为 ７０ ( Ｐ<０.０００ １ꎬ图 １) ꎮ 线虫喂食 ＰＡ１４ 后活动能力明显下降ꎬ被 ＰＡ１４ 感染的线虫 死亡后身体逐渐透明( 图 １) ꎮ 图２ 不同衰老程度的线虫抗细菌感染生存曲线 Ｆｉｇ.２ Ｔｈｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｃｕｒｖｅｓ ｏｆ Ｃ. ｅｌｅｇａｎｓ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｇｉｎｇ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ａｇａｉｎｓｔ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ. ２.３ 线虫的抗感染免疫指标与抗氧化之间的 关系 利用百枯草处理使线虫处于氧化应激ꎬ随着 线虫的衰老ꎬ其抗氧化能力逐渐降低ꎬ百枯草导致 氧化刺激 后 的 生 存 曲 线 逐 渐 左 移 ( Ｐ < ０. ０００ １ꎬ 图 ３) ꎮ ７ ｄ 龄的线虫氧化刺激后平均生存时间为 １６２.９７±５.３３ ｈꎬ最长生存时间为 ２５５ ｈꎻ１４ ｄ 龄的 线虫氧化刺激后平均生存时间为 ９０.４５ ± ４.９４ ｈꎬ 最长生存时间为 ２２０ ｈꎻ２１ ｄ 龄的线虫氧化刺激后 平均生存时间为 ７９.５２ ± ４.３４ ｈꎬ最长生存时间为 １６７ ｈꎮ 线虫的抗感染免疫指标与抗氧化指标的 结果相符ꎮ 图１ Ｆｉｇ.１ 铜绿假单胞菌与大肠杆菌感染后线虫的 生存曲线( Ａ) 和状态( Ｂ) Ｔｈｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｃｕｒｖｅ( Ａ) ａｎｄ ｓｔａｔｅ( Ｂ) ｏｆ Ｃ. ｅｌｅｇａｎｓ ａｆｔｅｒ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｂｙ Ｐ. ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ａｎｄ Ｅ. ｃｏｌｉ. 注:图中箭头方向为感染死亡线虫ꎮ ２.２ 线虫的抗感染能力与衰老之间的关系 在线虫培养到第 ７ ｄ １４ ｄ 和 ２１ ｄ 时ꎬ随着线 虫的衰老ꎬ其抗感染能力逐渐降低ꎬ感染后的生存 曲线逐渐左移( Ｐ<０.０００ １ꎬ图 ２) ꎮ ７ ｄ 龄的线虫 图 ３ 不同衰老程度的线虫抗氧化生存曲线 Ｆｉｇ.３ Ｔｈｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｃｕｒｖｅｓ ｏｆ Ｃ. ｅｌｅｇａｎｓ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｇｉｎｇ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ａｇａｉｎｓｔ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ.
4 白志慧 ꎬ 等 : 秀丽隐杆线虫免疫衰老指标的建立 长寿线虫和短寿线虫的抗感染能力为了进一步证明该感染模型中线虫的生存时间可以作为线虫衰老的评价指标 ꎬ 利用寿命相关基因突变的线虫开展研究 ꎬ 考察评价指标与公认的寿命指标是否相符 ꎮ 实验中利用了 14 d 龄的线虫 ꎮ 14 d 龄的野生型线虫感染后的平均生存时间为 62.32±2.70 hꎬ 最长生存时间为 127 hꎻ14 d 龄的短寿线虫 daf 16 突变株感染平均生存时间为 30 62±1.29 h( P< ꎬ 图 4)ꎬ 最长生存时间为 67.5 hꎻ14 d 龄的长寿线虫 daf 2 突变株感染平均生存时间为 96.13±4.86 h(p< ꎬ 图 4)ꎬ 最长生存时间为 220 hꎮ 先前的研究显示 daf 16 基因突变导致线虫寿命缩短 [11] ꎬdaf 2 基因突变导致线虫寿命延长 [12] ꎬ 本研究结果显示 : 长寿的线虫抗感染能力比短寿的线虫更强 ꎬ 说明抗感染能力与寿命指标相符 ꎮ 图 4 不同线虫株抗铜绿假单胞菌感染生存曲线 Fig.4 The survival curves of different C. elegans strains against infection by P. aeruginosa. 2.5 抗衰老化合物酪氨酸能增强线虫的抗感染能力酪氨酸处理线虫 14 d 能提高线虫的抗感染能力 (P<0.05ꎬ 图 5)ꎮ 14 d 对照组线虫感染平均生存时间为 76.83±3.23 hꎬ 酪氨酸处理组平均生存时间 86.33±3.50 hꎬ 增加了 12.36%ꎬ 最长生存时间从 112 h 增加到 136 hꎬ 这说明 ꎬ 能够延长线虫寿命的酪氨酸也可以增强线虫抗感染能力 ꎮ 3 讨论衰老常伴随着各种疾病的发生 ꎬ 例如糖尿病 心血管疾病和神经系统疾病等 [13] ꎬ 因此 ꎬ 抗衰老研究是一个历久弥新的领域 ꎮ 秀丽隐杆线虫是抗 图 5 酪氨酸处理 14 d 的线虫抗铜绿假单胞菌 Fig.5 感染生存曲线 The survival curves of C. elegans against infection by P. aeruginosa for 14 days. 衰老研究中重要的模式生物 ꎬ 检测其衰老的指标 有很多 ꎬ 其中自然寿命是衰老研究的首选指标 ꎬ 但 其实验周期长 ꎮ 其他衰老指标包括吞咽 生殖 体 [3ꎬ11ꎬ14] 长等不能完全反应衰老的状况 ꎬ 如二甲双 胍是第一个即将用于临床试验的抗衰老药物 ꎬ 但 其对线虫吞咽功能没有影响 [4] ꎻ 姜黄素有延长线 虫寿命的作用 ꎬ 但处理 4 d 和 8 d 后的线虫吞咽能 力却有下降趋势 ꎬ 产卵率没有变化 [15] ꎻ 酪氨酸也 有延长线虫寿命的作用 ꎬ 但该化合物对线虫体长 没有影响 [16] ꎮ 衰老的生化指标一般利用抗衰老 基因的表达情况 蛋白 DAF 16 核质转运情况 等 [17ꎬ18] ꎬ 但衰老是多基因参与的过程 ꎬ 少数几个 基因不能全面客观地评价线虫的衰老情况 ꎮ 近年 来 ꎬ 衰老的免疫学说逐渐受到重视 ꎬ 从无脊椎动物 到哺乳动物 ꎬ 机体的免疫功能至关重要 ꎬ 且与衰老 过程互为因果 [5] ꎬ 因此 ꎬ 通过免疫力来延缓衰老 也已成为研究的热点 ꎮ 然而 ꎬ 从线虫免疫角度来 评价衰老的研究报道很少 ꎮ 为了全面客观地反映 线虫的衰老状态 ꎬ 免疫功能的检测必不可少 ꎬ 因此 本研究建立了线虫抗感染免疫衰老的指标 ꎮ 本研究利用改进后的线虫 - 铜绿假单胞菌感 染模型反映线虫的免疫功能状态 ꎬ 为衰老研究提 供了新的考察指标 ꎮ 在本研究开展之前 ꎬ 线虫 - 铜绿假单胞菌感染模型主要用于抗感染药物的筛 选 ꎬ 研究者一般感染 L4 期或成虫期的线虫 24 ~ 48 hꎬ 再将感染的线虫转移至含有化合物的板中 ꎬ 通 过比较线虫的生存时间筛选或者评价抗感染化合 物 [19] ꎬ 但未能与抗衰老研究相关联 ꎮ 本研究改进 了原有的感染模型 ꎬ 将线虫在含有化合物的培养
5 234 生物技术进展 Current Biotechnology 板中培养几天或者十几天后 ꎬ 得到了一定衰老程度的线虫 ꎬ 再让这些线虫感染铜绿假单胞菌 ꎬ 观察线虫对铜绿假单胞菌的易感性 ꎬ 利用线虫感染后的生存时间反映线虫的免疫衰老的情况 ꎬ 线虫在感染后的生存时间越短说明免疫衰老越严重 ꎮ 本研究改进了感染模型 ꎬ 将该模型用于免疫衰老研究 ꎬ 为考察线虫的免疫衰老提供了可靠的评价指标 ꎬ 该抗感染指标可以用于研究衰老相关基因 ꎬ 也可以用于筛选抗衰老化合物 ꎬ 而且实验周期短 可靠性强 ꎮ 抗氧化能力这一指标的设立是基于衰老的自由基学说 ꎮ 自由基学说认为机体的衰老是由于细胞正常代谢过程中产生的自由基不断积累造成的 ꎬ 随着年龄的增加以及外界环境的刺激 ꎬ 自由基不断积累引起 DNA 损伤 蛋白质核酸等大分子交联 损害生物膜 ꎬ 影响机体正常功能 ꎬ 因此提高机体抗氧化和清除自由基能力是抗衰老的重点 [20] ꎮ 在线虫研究中有抗衰老作用的化合物一般能提高线虫的抗氧化能力 [21ꎬ22] ꎮ 因此本研究以抗氧化能力作为衰老指标的阳性对照 ꎬ 通过研究发现 ꎬ 线虫的抗感染能力与抗氧化能力相符 ꎬ7 d 14 d 21 d 龄的线虫抗氧化能力逐渐降低 ꎬ 其抗感染能力也同样逐渐降低 ꎬ 进一步说明本研究模型用于评价衰老具有可靠性 ꎮ 在线虫衰老的研究中 ꎬ 寿命是衰老的重要指标 [23] ꎮ 胰岛素 / 胰岛素样生长因子 1 ( Insulin / IGF 1) 信号通路是第一个被发现的与衰老相关的信号通路 [24] ꎮ DAF 2 是线虫体内唯一的胰岛素样生长因子受体 ꎬ 在调控线虫衰老方面有重要作用 ꎮ DAF 2 与配体结合后 ꎬ 激活 Insulin / IGF 1 信号通路下游的 AGE 1 PDK 1ꎬ 最终激活的 AKT 1/ 2 SGK 1 使转录因子 DAF 16 / FOXO 磷酸化 ꎬ 阻止其入核发挥作用 ꎮ 而 DAF 16 / FOXO 作为转录因子可以调控下游抗性基因 ꎬ 其正向作用于寿命性状 [25] ꎮ 因此 ꎬdaf 2 基因突变会延长线虫的寿命 ꎬ 延缓衰老 ꎬ 而 daf 16 基因突变会缩短线虫寿命 ꎬ 加速衰老 ꎮ 本研究分别利用了 daf 2 daf 16 突变线虫 ꎬ 实验结果表明应用抗感染能力这一评价指标和应用寿命这一公认指标相比可以得出同样的研究结论 ꎬ 这进一步证明抗感染能力可用于线虫衰老的评价 ꎮ 有文献报道酪氨酸能延长线虫寿命 提高抗氧化力 ꎬ 具有抗衰老作用 [16] ꎮ 本研究以文献报道 的酪氨酸浓度处理野生型线虫 14 dꎬ 结果表明酪氨酸能提高线虫的抗感染能力 ꎬ 说明抗感染能力这一指标可以用于评价抗衰老化合物 ꎮ 总之 ꎬ 线虫 - 铜绿假单胞菌感染模型在衰老研究中具有应用价值 ꎬ 可用于评价抗衰老化合物和抗衰老基因 ꎮ 本研究提出了免疫衰老这一评价指标 ꎬ 利用感染后线虫的生存时间作为免疫衰老的评价指标 ꎬ 可以与其他指标取长补短 ꎬ 有助于更全面客观地开展衰老相关研究 ꎮ 参考文献 [1] Stiernagle T. Maintenance of C. elegans [ EB / OL]. http: / / / chapters / www_strainmain tain / strainmain tain.htmlꎬ [2] Lees Hꎬ Walters Hꎬ Cox L S. Animal and human models to un derstand ageing [ J]. Maturitasꎬ 2016ꎬ 93: [3] Keith S Aꎬ Amrit F Rꎬ Ratnappan Rꎬ et al.. The C. elegans healthspan and stress resistance assaytoolkit [ J ]. Methodsꎬ 2014ꎬ 68(3): [4] Onken Bꎬ Driscoll M. Metformin induces a dietary restriction like state and the oxidative stress response to extend C. elegans Healthspan via AMPKꎬ LKB1ꎬ and SKN 1 [ J]. PLoS ONEꎬ 2010ꎬ 5(1): e8758. [5] Drela N. Immunological theory of senescence [ J]. Postepy. Biochem.ꎬ 2014ꎬ 60(2): [6] Ermolaeva M Aꎬ Schumacher B. Insights from the worm: The C. elegans model for innate immunity [ J]. Semin. Immunol.ꎬ 2014ꎬ 26(4): [7] Papp Dꎬ Csermely Pꎬ Söti C. A role for SKN 1 / Nrf in pathogen resistance and immunosenescence in Caenorhabditis elegans [J]. PLoS Pathog.ꎬ 2012ꎬ 8(4): e [8] Sutphin G Lꎬ Kaeberlein M. Measuring Caenorhabditis elegans life span on solid media [J]. J. Vis. Exp.ꎬ 2009(27): [ 9] Powell J Rꎬ Ausubel F M. Models of Caenorhabditis elegans in fection by bacterial and fungal pathogens [ J]. Methods Mol. Biol.ꎬ 2008ꎬ 415: [10] Zarse Kꎬ Jabin Sꎬ Ristow M. L theanine extends lifespan of a dult Caenorhabditis elegans [J]. Eur. J. Nutr.ꎬ 2012ꎬ 51(6): [11] Collins J Jꎬ Huang Cꎬ Hughes Sꎬ et al.. The measurement and analysis of age related changes in Caenorhabditis elegas [ EB / OL]. http: / / / chapters / www_measuremen tanalysiscelegans / measurementanalysiscelegans. htmlꎬ [12] Kenyon Cꎬ Chang Jꎬ Gensch Eꎬ et al.. A C. elegans mutant that lives twice as long as wild type [ J]. Natureꎬ 1993ꎬ 366 (6454): [13] D Antona G Ragni Mꎬ Cardile Aꎬ et al.. Branched chain amino acid supplementation promotes survival and supports car diac and skeletal muscle mitochondrial biogenesis in middle aged mice [J]. Cell Metab.ꎬ 2010ꎬ 12(4): [14] Huang Cꎬ Xiong Cꎬ Kornfeld K. Measurements of age related
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Dan Buettner / /
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12 2 2 0 1 6 4 South China Fisheries Science Vol. 12, No. 2 Apr., 2016 doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-0780. 2016. 02. 016,,,, (,,, 510300) : ( Pinctada maxima),,,, 54. 55%, 0 0. 25 m - 2, 0 70. 31 gm - 2,
标题
648 江 苏 农 业 学 报 (Jiangsu J. of Agr. Sci. ),2013,29(3):648 ~ 653 h ttp: / / w w w. jsn y x b.c o m 王 摇 丹, 孙 摇 蕾, 孙 家 正, 等. 桑 葚 冻 结 过 程 中 的 温 度 变 化 特 性 [J]. 江 苏 农 业 学 报,2013,29(3):648 鄄 653. doi:10. 3969
TGF-β AngⅡ B SD ~ 220g SPF. SCXK No SYXK ~ 25 40% ~ 70% OR37G-C
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H 2 SO ml ml 1. 0 ml C 4. 0 ml - 30 min 490 nm 0 ~ 100 μg /ml Zhao = VρN 100% 1 m V ml ρ g
16 6 2018 11 Chinese Journal of Bioprocess Engineering Vol. 16 No. 6 Nov. 2018 doi 10. 3969 /j. issn. 1672-3678. 2018. 06. 004 1 2 1 1 1. 330200 2. 330006 4 Box-Behnken 1 25 g /ml 121 92 min 2 6. 284%
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2011 年 Journal of Capital Medical University 4月 第2 期 Apr 2011 Vol 32 No 2 基础研究 doi: 10 3969 / j issn 1006-7795 2011 02 015 人脑识别不同性别名字反应时的差异研究 高迎霄 陈昭燃 * 张明霞 ( 首都医科大学神经生物系高级脑功能中心) 摘要 目的 探讨男女对不同性别名字认知加工速度是否存在差异
5期xin
中 国 农 学 通 报 2014,30(5):23-27 Chinese Agricultural Science Bulletin 大 肠 杆 菌 生 物 膜 的 筛 选 及 生 长 曲 线 测 定 喻 华 英, 李 启 峰 ( 塔 里 木 大 学 动 物 科 学 学 院, 新 疆 阿 拉 尔 843300) 摘 要 : 为 探 究 犊 牛 腹 泻 病 中 大 肠 杆 菌 生 物 膜 的 形 成
1 1. M J M M J M J M M J
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中图分类号：；文献标识码： ；文章篇号: (2004)01-000#-0#
虾青素对秀丽隐杆线虫衰老的影响及其机制的初步研究 罗卿心, 刘晓娟, 曹庸, 贺丽苹, 赵力超, 刘欣 ( 华南农业大学食品学院, 广东广州 510642) 摘要 : 本文研究了虾青素对秀丽隐杆线虫衰老和正常生理功能的影响及其相关作用机制 试验设立对照组和虾青素组 (0.08 mm 0.16 mm 0.40 mm 0.80 mm), 观察 N2 野生型线虫的寿命及相关生理指标 ( 生殖能力 吞咽频率和移动力
43 14. 45 3 7 220 1 2 cm /s 2 1. 5 3 1 4 c d 1 /40 1 /4 1 /9 600 0. 129 6 7 1 /6 400 1 /256 000 1. 5 2 2 2. 1 /m /Hz /kn / kn m 6 6 0. 1 ~ 50 600 1 80
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/MPa / kg m - 3 /MPa /MPa 2. 1E ~ 56 ANSYS 6 Hz (a) 一阶垂向弯曲 (b) 一阶侧向弯曲 (c) 一阶扭转 (d) 二阶侧向弯曲 (e) 二阶垂向弯曲 (f) 弯扭组合 2 6 Hz
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1 2 1 2 3 1 2 1. 100054 2. 100054 3. 100036 ph ph ph Langmuir 166. 67 mg /g Al 2 O 3 ph 7. 0 ~ 9. 0 ph HCO - 4 5. 00 mg /L 5 ph doi 10. 13928 /j. cnki. wrahe. 2017. 03. 017 TV213. 4 + TU991. 26 + 6 A 1000-0860
168 健 等 木醋对几种小浆果扦插繁殖的影响 第1期 the view of the comprehensive rooting quality, spraying wood vinegar can change rooting situation, and the optimal concent
第 31 卷 第 1 期 2013 年 3 月 经 济 林 研 究 Nonwood Forest Research Vol. 31 No.1 Mar. 2013 木醋对几种小浆果扦插繁殖的影响 健 1,2 杨国亭 1 刘德江 2 (1. 东北林业大学 生态研究中心 黑龙江 哈尔滨 150040 2. 佳木斯大学 生命科学学院 黑龙江 佳木斯 154007) 摘 要 为了解决小浆果扦插繁殖中生根率及成活率低等问题
21 13 D / 2 10 ig ig 10 d 1. 0 g kg /2 2 β- 5 g kg g kg mg kg - 1 ig ig 24 h 5% 1 2% CMC-Na 2. 5 ml 30
21 13 1 2 1* 2 1. 430065 2. 445000 20 10 5 g kg - 1 5 mg kg - 1 ig 10 d ig HE 1 TFF1 TFF1 P < 0. 01 P < 0. 01 P < 0. 01 P < 0. 05 R285. 5 doi 10. 13422 /j. cnki. syfjx. 2015130100 A 1005-9903 2015 13-0100-05
~ 4 mm h 8 60 min 1 10 min N min 8. 7% min 2 9 Tab. 1 1 Test result of modified
30 1 2013 1 Journal of Highway and Transportation Research and Development Vol. 30 No. 1 Jan. 2013 doi 10. 3969 /j. issn. 1002-0268. 2013. 01. 004 1 2 2 2 2 1. 400074 2. 400067 240 U416. 217 A 1002-0268
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 1339 非 酒 精 性 脂 肪 性 肝 病 (nonalcoholic fatty liver disease,nafld) 是 一 种 与 胰 岛 素 抵 抗 遗
1338 中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 九 味 肝 泰 胶 囊 对 高 脂 饮 食 诱 导 大 鼠 非 酒 精 性 脂 肪 肝 的 治 疗 作 用 陈 菲 1 2,, 艾 国 3, 盛 柳 青 1, 麻 佳 蕾 1, 黄 正 明 1. 金 华 职 业 技 术 学 院 医 学 院, 浙 江 金 华
* CUSUM EWMA PCA TS79 A DOI /j. issn X Incipient Fault Detection in Papermaking Wa
2 *. 20037 2. 50640 CUSUM EWMA PCA TS79 A DOI 0. 980 /j. issn. 0254-508X. 207. 08. 004 Incipient Fault Detection in Papermaking Wastewater Treatment Processes WANG Ling-song MA Pu-fan YE Feng-ying XIONG
600 现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 5 期 2016 年 5 月 were significantly decreased, but the levels of IL-12 in two groups were significantly increa
现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 5 期 2016 年 5 月 599 喘 可 治 注 射 液 联 合 细 辛 脑 注 射 液 治 疗 小 儿 毛 细 支 气 管 炎 的 临 床 研 究 唐 辉 英, 佘 定 平, 马 颐 娇 深 圳 市 儿 童 医 院 呼 吸 科, 广 东 深 圳 518026 摘 要 : 目 的 探 讨 喘 可 治 注 射 液 联 合
~ a 3 h NCEP ~ 24 3 ~ ~ 8 9 ~ km m ~ 500 m 500 ~ 800 m 800 ~ m a 200
31 1 2013 3 Journal of Arid Meteorology Vol. 31 No. 1 March 2013. J. 2013 31 1 62-69. doi 10. 11755 /j. issn. 1006-7639 2013-01 - 0062 211101 2000 ~ 2010 3 h 2. 5 2. 5 NCEP 2 5 ~ 7 02 11 05 ~ 08 2 ~ 8
[1-3] (Smile) [4] 808 nm (CW) W 1 50% 1 W 1 W Fig.1 Thermal design of semiconductor laser vertical stack ; Ansys 20 bar ; bar 2 25 Fig
![[1-3] (Smile) [4] 808 nm (CW) W 1 50% 1 W 1 W Fig.1 Thermal design of semiconductor laser vertical stack ; Ansys 20 bar ; bar 2 25 Fig](/thumbs/91/106435555.jpg "[1-3] (Smile) [4] 808 nm (CW) W 1 50% 1 W 1 W Fig.1 Thermal design of semiconductor laser vertical stack ; Ansys 20 bar ; bar 2 25 Fig")
40 6 2011 6 Vol.40 No.6 Infrared and Laser Engineering Jun. 2011 808 nm 2000 W 1 1 1 1 2 2 2 2 2 12 (1. 710119 2. 710119) : bar 808 nm bar 100 W 808 nm 20 bar 2 000 W bar LIV bar 808 nm : : TN248.4 TN365
Syngene GBOXHR Retsch MM400 KQ DE Eppendorf Table 1 The sources of Astragali Radix and Hedysarum Radix No. 1 AMM2011_NMGTY Astr
PCR 龙平, 崔占虎, 李虔全, 徐建平, 张春红, 周立社 * *, 李旻辉 ( 包头医学院, 内蒙古包头 014060) DNA 30 28 DNA trnl-trnf PCR PCR 136 bp 323 bp 10% PCR PCR Astragalus membranaceus Fisch. Bge. var. mongho- licus Bge. Hsiao A. membranaceus
12-1b T Q235B ML15 Ca OH Table 1 Chemical composition of specimens % C Si Mn S P Cr Ni Fe
* - - 100084 Q235B ML15 Ca OH 2 DOI 10. 13204 /j. gyjz201508023 STUDY OF GALVANIC CORROSION SENSITIVITY BETWEEN ANY COUPLE OF STUD WELDMENT OR BEAM Lu Xinying Li Yang Li Yuanjin Department of Civil Engineering
2 ( 自 然 科 学 版 ) 第 20 卷 波 ). 这 种 压 缩 波 空 气 必 然 有 一 部 分 要 绕 流 到 车 身 两 端 的 环 状 空 间 中, 形 成 与 列 车 运 行 方 向 相 反 的 空 气 流 动. 在 列 车 尾 部, 会 产 生 低 于 大 气 压 的 空 气 流
第 20 卷 第 3 期 2014 年 6 月 ( 自 然 科 学 版 ) JOURNAL OF SHANGHAI UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE) Vol. 20 No. 3 June 2014 DOI: 10.3969/j.issn.1007-2861.2013.07.031 基 于 FLUENT 测 轨 道 交 通 隧 道 中 电 波 折 射 率 结 构 常 数 张 永
< F63756D656E D2D796E2DB9A4D7F72D31C6DABFAF2D31D6D0D2BDD2A9CFD6B4FABBAF2D C4EA2DB5DA31C6DA2D30302DB7E2C3E6CDC6BDE9A3A D31A3A92E6D6469>
绎 阴 元元 / 100102 MCAT MCAO 84~333 mg kg -1 167 333 mg kg -1 MCAT 84 167 mg kg -1 MCAT 27% 37% 84~333 mg kg -1 MCAT 21%~ 32% MCAO LDH 10%~ 12% MDA 28%~38% SOD 15%~36% GSH 14%~36% doi: 10.3969/j.issn.1674-3849.2013.01.016
戊 酸 雌 二 醇 片 联 合 宫 颈 注 射 利 多 卡 因 用 于 绝 经 后 妇 女 取 环 的 临 床 效 果 评 价 陆 琴 芬, 等 371 Keywords groups, no removal difficulties and failure, was statistically s
370 临 床 与 病 理 杂 志 J Clin Pathol Res 2015, 35(3) http://www.lcbl.net doi: 10.3978/j.issn.2095-6959.2015.03.009 View this article at: http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.2095-6959.2015.03.009 戊 酸 雌 二 醇 片 联
18 A B S 17.44±1() ±6.26( ) 54.23±5.5( ) 6.42±1.51() m 30m t α =.05 ( )AB 1 5 (p>.05)( )AB 1 5 (p<.05)( )A (p>.05)( )B (p<.05)( )A B
The Effect of Different Training Method on Quick Coordination ability in High School Female Soccer Players 18 A B S 17.44±1() 161.39±6.26( ) 54.23±5.5( ) 6.42±1.51() 15 60-90 30m 30m t α =.05 ( )AB 1 5
1.0 % 0.25 % 85μm % U416 Sulfate expansion deformation law and mechanism of cement stabilized macadam base of saline areas in Xinjiang Song
1.0 % 0.25 % 85μm 0.97 0.136 % U416 Sulfate expansion deformation law and mechanism of cement stabilized macadam base of saline areas in Xinjiang Song Liang 1,2 Wang Xuan-cang 1 1 School of Highway, Chang
by mild (22.7%). Inhaled corticosteroids, systemic corticosteroids, and antibiotics were applied to 94.8% (292 cases), 74.7% (230 cases), and 90.9% (2
论 著 临 床 研 究 doi: 0.7499/j.issn.008-8830.204.2.007 郑 州 市 城 区 儿 童 哮 喘 的 流 行 病 学 调 查 及 发 病 相 关 因 素 分 析 赵 坤 宋 桂 华 古 华 倩 2 刘 爽 3 张 岩 郭 彦 荣 (. 河 南 中 医 学 院 第 一 附 属 医 院 儿 科 医 院, 河 南 郑 州 450000; 2. 杭 州 市 余 杭 区
绎 阴 元元 510515 Caco-2 Caco-2 P 380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂
![380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂](/thumbs/43/23114460.jpg "380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂")
中 国 细 胞 生 物 学 学 报 Chinese Journal of Cell Biology 2011, 33(4): 379-384 http://www.cjcb.org 全 小 麦 啤 酒 酵 母 菌 株 的 诱 变 育 种 及 应 用 研 究 袁 仲 1* 张 百 胜 1 张 慎 举 1 马 绮 云 2 陈 柯 羽 2 ( 1 商 丘 职 业 技 术 学 院 园 林 食 品 加 工 系,
南華大學數位論文
南 華 大 學 自 然 醫 學 研 究 所 碩 士 論 文 老 老 恒 言 之 飲 食 宜 忌 與 養 生 粥 譜 研 究 To explore the regimen of porridge and dietary compatibility and incompatibility from the Lao Lao Heng Yan ( Lasting Words in Gerontology )
金 鹏 等 体 育 锻 炼 缓 解 公 务 员 心 理 压 力 相 关 量 表 的 编 制 及 常 模 的 建 立 89 此, 本 文 从 探 索 性 研 究 入 手, 对 体 育 锻 炼 缓 解 公 务 员 心 理 压 力 展 开 研 究, 尝 试 编 制 一 个 基 于 本 土 化, 具 有 良
天津体育学院学报 研究报道 88~ 88 ~92 Short Comunications 体育锻炼缓解公务员心理压力相关量表的编制及常模的建立 金 摘要 鹏 1 刘 慧2 以体育锻炼促进心理健康理论为依据 在前期访谈和问卷调查的基础上 对体育锻炼缓解公务员心理压力问题进行了研究 结果表明 体育 锻炼缓解公务员心理压力量表 的结构由 4 个维度构成 可累计解释总方差的 58.319% 构成 4 个因子的题项分布合理
相 关 报 道 近 年 来 临 床 上 运 用 多 种 针 灸 疗 法 治 疗 肥 胖 及 其 引 起 的 并 发 症, 如 高 脂 血 症 糖 尿 病 高 血 压 及 痛 经 等, 均 获 得 满 意 疗 效. caused by sedentary lifestyle and genetic f
在 线 投 稿 : http://www.baishideng.com/wcjd/ch/index.aspx 帮 助 平 台 : http://www.wjgnet.com/esps/helpdesk.aspx DOI: 10.11569/wcjd.v24.i5.815 世 界 华 人 消 化 杂 志 2016 年 2 月 18 日 ; 24(5): 815-820 ISSN 1009-3079 (print)
211 better than those in the control group, with significant difference between two groups (P < 0.05). The ocular hypertension of patients in the cont
210 毛 果 芸 香 碱 联 合 拉 坦 前 列 素 治 疗 原 发 性 急 性 闭 角 型 青 光 眼 的 疗 效 观 察 符 元 党 1, 郑 振 优 2, 林 再 雄 2, 周 吉 良 1. 昌 江 黎 族 自 治 县 中 西 医 结 合 医 院, 海 南 昌 江 572700 2. 海 南 医 学 院 附 属 医 院 眼 科, 海 南 海 口 570100 1 摘 要 : 目 的 探 讨
I II III IV 1 2 3 4 5 Effects of dietary medium-chain triglycerides on the growth performance and the intestinal microflora in young pigs Wei-Kang Lai Abstract The purpose of the study is to investigate
< F63756D656E D2D796E2DB9A4D7F72D31C6DABFAF2D31D6D0D2BDD2A9CFD6B4FABBAF2D C4EA2DB5DA34C6DAB8BDBCD32D30302DB7E2C3E6CDC6BDE941A3A D34A3A92E6D6469>
2013 绎 Vol.15 No.4 阴 元元 450002 Ki-6772 Wistar 6 5 mg kg -1 30 0.8 mg kg -1 7.5 15.0 22.5 g kg -1 1 30 Ki-67 TUNEL Ki-67 P
医学科研方法
医 学 科 研 方 法 主 讲 苏 秀 兰 细 胞 生 物 学 教 授 第 一 讲 绪 论 一 概 念 : 在 医 学 科 学 研 究 活 动 中, 运 用 科 学 的 实 践 和 理 论 思 维 的 技 巧, 充 分 发 挥 自 己 的 智 慧, 去 寻 找 观 念 世 界 与 现 实 世 界 之 间 的 联 系 或 规 律, 从 而 发 现 新 现 象, 提 出 新 理 论 的 手 段 二 医
22 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2011 Vol. 43 No % 3% 3% /% % 6. 67% 1. 71% 1. 11% 0. 14% 0.
2011 43 5 21 3 1 1* 1 2 3 1 1. 2. 3. 78. 68±2. 95 g 28 300 3 5 3% 3 1 ALT TP ALB AST 0. 05 P>0. 05 ALT TP ALB P>0. 05 AST 0. 05 GLOB P>0. 05 2 INS 0. 05 TSH T 3 0. 05 P>0. 05 GLU GH T4 IGF-I P>0. 05 S816.
, GC/MS ph GC/MS I
S00017052 O O , GC/MS ph GC/MS I Abstract Drug abuse is a serious issue throughout the world. Amphetamine-type stimulants (ATS) are substances frequently used by drug abusers. There are significant needs
Fig. 1 Frame calculation model 1 mm Table 1 Joints displacement mm
33 2 2011 4 ol. 33 No. 2 Apr. 2011 1002-8412 2011 02-0104-08 1 1 1 2 361003 3. 361009 3 1. 361005 2. GB50023-2009 TU746. 3 A Study on Single-span RC Frame Reinforced with Steel Truss System Yuan Xing-ren
标题
环 球 中 医 药 2016 年 5 月 第 9 卷 第 5 期 摇 Global Traditional Chinese Medicine, May 2016,Vol 郾 9, No 郾 5 摇 557 两 种 电 针 对 脊 髓 损 伤 14 天 后 大 鼠 运 动 功 能 神 经 元 及 MEK2 p 鄄 ERK1 表 达 的 影 响 论 著 宋 良 玉 摇 吕 威 摇 景 泉 凯 摇 莫 雨
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1. 530023 2. 530001 3. 530001 DCP 100 DCP 47 53 3 HOMA -IR HOMA - IR P
third in 20 years. The student population will be in the range of million before Keywords education age population family planning
2017 6 225 POPULATION & ECONOMICS No. 6 2017 Tot. No. 225 100028 1982 2015 12849. 16 2035 9114. 74 2015 3700 1 /3 2020 2015 2020 3000 4000 C921 G465 DOI 10. 3969 /j. issn. 1000-4149. 2017. 06. 008 A 1000-4149
第 期 黄雪莲等 响应面优化绿色木霉菌培养基 材料与方法 菌种 仪器与试剂 菌种的活化 单因素试验 响应面优化试验 优化工艺的验证 数据处理 结果与分析
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 响应面优化绿色木霉菌培养基 黄雪莲 于新 仲恺农业工程学院轻工食品学院 广东广州 利用响应面分析法对绿色木霉菌的培养基进行优化 通过测量不同营养条件下绿色木霉 菌落生长直径研究其生物学特性 在单因素实验的基础上 选定葡萄糖添加量 丙氨酸添加量和磷酸二氢钾添加量 个因素进行中心组合实验 建立二次回归方程 并应用响应面分析法进行优化 结果表明 绿色木霉菌最佳培养基为葡萄糖
2015医学版第六期
第 4 卷 第 6 期 205 年 2 月 Journal of Lanzhou University(Medical Sciences) Vol.4 No.6 Dec. 205 文 章 编 号 :000-282 (205) 06-0054-05 金 昌 队 列 人 群 代 谢 综 合 征 率 及 组 分 分 析 彭 峥, 白 亚 娜, 王 凤 杰 2, 李 娟 生, 李 海 燕 2, 刘 燕 青,
P. C Evelyn. M. Duvall 2 quality of life cabana
2012 3 193 POPULATION JOURNAL No. 3. 2012 Tot. No. 193 100871 2008 Logit C913. 6 A doi 10. 3969 /j. issn. 1004-129X. 2012. 03. 004 1004-129X 2012 03-0031 - 11 2011-12 - 10 10JJD840001 1962-2010 1% 60 1.
. STEM OER STEM 600 STEM CCSS STEM CCSS STEM ISTE Indiana Department of STEM Education 2013 STEM STEM STEM STEM STEM 10 STEM 2017 S
23 3 2017 6 Open Education Research Vol. 23 No. 3 Jun. 2017 STEM 1 2 1 1 1 1. 475004 2. 475004 STEM STEM STEM STEM STEM STEM STEM STEM STEM STEM STEM STEM STEM G443 A 1007-2179 2017 03-0050-12 STEM 2011
03 年 8 月 Vol.5 No.8 支 气 管 哮 喘 ( 简 称 哮 喘 ) 是 儿 童 时 期 最 常 见 的 慢 性 呼 吸 道 疾 病 之 一 近 年 来, 随 着 人 类 文 明 的 发 展 社 会 化 进 程 的 加 快 经 济 水 平 的 提 高 和 科 技 的 进 步, 环 境
03 年 8 月 Vol.5 No.8 DOI:0.7499/j.issn.008-8830.03.08.003 论 著 临 床 研 究 成 都 地 区 0~4 岁 城 乡 儿 童 哮 喘 流 行 病 学 调 查 对 比 分 析 李 敏 张 琼 时 维 娟 李 兰 李 艳 庞 英 姚 兵 蒋 虹 (. 四 川 省 医 学 科 学 院 / 四 川 省 人 民 医 院 儿 科, 四 川 成 都 6007;.
: 307, [], [2],,,, [3] (Response Surface Methodology, RSA),,, [4,5] Design-Expert 6.0,,,, [6] VPJ33 ph 3,, ph, OD, Design-Expert 6.0 Box-Behnken, VPJ3
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微 生 物 学 通 报 FEB 20, 2008, 35(2) 306~30 Microbiology 2008 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@im.ac.cn 生 物 实 验 室 响 应 面 分 析 法 优 化 副 溶 血 性 弧 菌 生 长 条 件 刘 代 新 宁 喜 斌 * 张 继 伦 2 (. 200090) (2. 20202) 摘 要
CHIPS Oaxaca - Blinder % Sicular et al CASS Becker & Chiswick ~ 2000 Becker & Chiswick 196
2015 3 179 2015 5 Comparative Economic & Social Systems No. 3 2015 May 2015 2001 ~ 2011 F812 A 1003-3947 2015 03-0020-14 Wu & Perloff 2004 Benjamin et al. 2004 Sicular et al. 2007 1998 2003 40% 1985 2.
2008 GUANGDONG WEILIANG YUANSU KEXUE : g/ d a : b : a/ b Ag As Au Cd Ce 1817
2008 GUANGDONG WEILIANG YUANSU KEXUE 15 2 : 1006 2 446X (2008) 02 2 00152 17. (, 201800) :,, ;, : ; ; ; ; : R 15313 : A, () () ( ) () () () [ 1 ],, 1,, ( ) 1996 1997, 4 ( ), 12 42 [ 2 ], (1) 1, 36, 17
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HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY 硕 士 学 位 论 文 MASTER S DEGREE DISSERTATION 80 后 女 硕 士 生 择 偶 现 状 以 武 汉 市 七 所 高 校 为 例 POST-80S FEMALE POSTGRADUATE MATE SELECTION STATUS STUDY TAKE WUHAN SEVEN UNIVERSITIES
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25 4 Vol. 25 No. 4 2012 12 JOURNAL OF SHIJIAZHUANG TIEDAO UNIVERSITY NATURAL SCIENCE Dec. 2012 1 2 1 2 3 4 1 2 1. 050043 2. 050043 3. 3300134. 450052 ANSYS C80 C80 125 ac70 0 U24 A 2095-0373201204-0017-06
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参 会 人 员 名 单 Last Name 姓 名 公 司 Tel Fax Bai 柏 煜 康 复 之 家 8610 8761 4189 8610 8761 4189 Bai 白 威 久 禧 道 和 股 权 投 资 管 理 ( 天 津 ) 有 限 公 司 8610 6506 7108 8610 6506 7108 Bao 包 景 明 通 用 技 术 集 团 投 资 管 理 有 限 公 司 8610
附件1：
附 件 4: 上 海 高 职 高 专 院 校 市 级 精 品 课 程 申 报 表 课 程 名 称 所 属 专 业 大 类 名 称 所 属 专 业 类 名 称 妇 婴 护 理 技 术 医 药 卫 生 类 护 理 专 业 所 属 专 业 名 称 ( 专 业 课 程 填 写 ) 妇 婴 护 理 技 术 课 程 负 责 人 金 庆 跃 推 荐 单 位 ( 盖 章 ) 上 海 济 光 职 业 技 术 学 院
% GIS / / Fig. 1 Characteristics of flood disaster variation in suburbs of Shang
20 6 2011 12 JOURNAL OF NATURAL DISASTERS Vol. 20 No. 6 Dec. 2011 1004-4574 2011 06-0094 - 05 200062 1949-1990 1949 1977 0. 8 0. 03345 0. 01243 30 100 P426. 616 A Risk analysis of flood disaster in Shanghai
115 的 大 量 废 弃 物 被 丢 弃 或 直 接 燃 烧 [3] 此 外, 海 南 省 文 昌 鸡 年 产 量 约 8 0 只, 鸡 粪 年 产 量 超 过 100 万 t 这 些 富 含 养 分 的 固 体 有 机 废 弃 物 不 进 行 处 理, 不 仅 会 极 大 浪 费 大 量 养 分
![115 的 大 量 废 弃 物 被 丢 弃 或 直 接 燃 烧 [3] 此 外, 海 南 省 文 昌 鸡 年 产 量 约 8 0 只, 鸡 粪 年 产 量 超 过 100 万 t 这 些 富 含 养 分 的 固 体 有 机 废 弃 物 不 进 行 处 理, 不 仅 会 极 大 浪 费 大 量 养 分](/thumbs/40/22009911.jpg "115 的 大 量 废 弃 物 被 丢 弃 或 直 接 燃 烧 [3] 此 外, 海 南 省 文 昌 鸡 年 产 量 约 8 0 只, 鸡 粪 年 产 量 超 过 100 万 t 这 些 富 含 养 分 的 固 体 有 机 废 弃 物 不 进 行 处 理, 不 仅 会 极 大 浪 费 大 量 养 分")
广东农业科学 16 43 6 114-118 Guangdong Agricultural Sciences doi 10.16768/j.issn.1004-874X.16.06.0 刘军 董存明 吕诗锦 等. 腐熟菌剂不同添加量对鸡粪椰糠高温堆肥的影响 [J]. 广东农业科学 16 43 6 114-118. 腐熟菌剂不同添加量对鸡粪 椰糠高温堆肥的影响 刘 军 董存明 吕诗锦 阮云泽 王蓓蓓
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中 国 环 境 科 学 2012,32(5):933~941 China Environmental Science 系 统 动 力 学 在 空 港 区 域 规 划 环 境 影 响 评 价 中 的 应 用 刘 慧 1,2, 郭 怀 成 1*, 盛 虎 1, 都 小 尚 1,3, 李 娜 1 1, 杨 永 辉 (1. 北 京 大 学 环 境 科 学 与 工 程 学 院, 北 京 100871; 2.
研 发 前 沿, 相 关 报 道, Key Words: Laparoscopy; Early enteral nutrition; Colorectal cancer surgery Niu WB, Li ZY, Zhou CX, Wang GY, Yu YM. Clinical effects
: http://www.baishideng.com/wcjd/ch/index.aspx : http://www.wjgnet.com/esps/helpdesk.aspx DOI: 10.11569/wcjd.v23.i5.857 2015 2 18 ; 23(5): 857-861 ISSN 1009-3079 (print) ISSN 2219-2859 (online) 2015. CLINICAL
2005 5,,,,,,,,,,,,,,,,, , , 2174, 7014 %, % 4, 1961, ,30, 30,, 4,1976,627,,,,, 3 (1993,12 ),, 2
3,,,,,, 1872,,,, 3 2004 ( 04BZS030),, 1 2005 5,,,,,,,,,,,,,,,,, 1928 716,1935 6 2682 1928 2 1935 6 1966, 2174, 7014 %, 94137 % 4, 1961, 59 1929,30, 30,, 4,1976,627,,,,, 3 (1993,12 ),, 2 , :,,,, :,,,,,,
Ansys /4 Ansys % 9 60% MU10 M m 1 Fig. Actual situation of measured building 1 Fig. 1 First floor plan of typical r
0 5 011 10 JOURNAL OF NATURAL DISASTERS Vol. 0 No. 5 Oct. 011 1004-4574 011 05-0018 - 06 1 3 1. 41008. 41008 3. 410000 7 0. 10g 7 0. 15g 3. 1% 5% P64. 3 A Field test and numerical simulations of seismic
76 34 2. 1. 1 Fig. 1 1 a-a b-b a-a σ ma = 74. 4 MPa σ a = 15. 74 MPa σ 0a =90. 15 MPa 0. 9 σ t =135 MPa b-b σ mb = 21. 77 MPa τ b = 13. 789 MPa σ 0b =
34 11 2012 11 SHIP SCIENCE AND TECHNOLOGY Vol. 34 No. 11 Nov. 2012 0 430064 GB150-98 ASME THR3 +. 4 A 1672-7649 2012 11-0075 - 07 doi 10. 3404 /j. issn. 1672-7649. 2012. 11. 017 Stress and fatigue analysis
16 31, %, 15 % 1949 ( 1), : 4 8, ;, , , 5, , 5. 05, 400kg,
31 2 2007 3 Vol1 31, No12 March 2007 15 Population Research,,, ; 2020 420 435 kg, 18 14136 ; 450 kg, 14173,,,, :, ;, ; : ; ;,, :100101 21 20,,, (2010 2020 2030 2040 ),,,,, (2020 ) (2030 2040 ), 1 1. 1
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4 4 Vol. 4 No. 4 2013 8 Journal of Food Safety and Quality Aug., 2013 聂雪梅 *, 李立, 孙利, 高飞 (, 100123) 摘要 : 2011 12,, 2007~2011,,,, 关键词 : ; ; ; ; Trade and notification situation on food import and export
g ml 10% ph 色谱条件 kinetex C μm 100 A 4. 6 mm 150 mm 25 5 μl A B 10 mmol /L ml /min
25 4 2013 8 监测技术 5 1 2 1 ( 1. 江苏省疾病预防控制中心, 江苏南京 210009; 2. 南京医科大学第二附属医院, 江苏南京 210029) 5 Phenomenex kinetex C 18 2. 6 μm 4. 6 mm 150 mm 10 mmol /L ph 2. 5 + 60 40 DAD 280 nm 5 20. 0 mg /L ~ 100 mg /L 0.
Untitiled
中 国 农 学 通 报 2009,25(11):117-122 Chinese gricultural Science Bulletin 钙 处 理 对 枇 杷 果 实 采 后 生 理 特 性 的 研 究 郑 国 华 ( 福 建 农 林 大 学 园 艺 学 院, 福 州 350002) 摘 要 : 适 当 的 钙 处 理 可 明 显 减 缓 枇 杷 果 实 的 采 后 生 理 活 力 试 验 结 果
km km mm km m /s hpa 500 hpa E N 41 N 37 N 121
32 2 2014 4 Journal of Arid Meteorology Vol. 32 No. 2 Apr 2014. 08. 03 J. 2014 32 2256-262 LU Guirong WANG Wen YU Huaizhenget al. The Influence of Damrey Typhoon on 08. 03 Rainstorm Process in Rizhao of
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5 10 15 20 大 宗 交 易 的 价 格 效 应 : 信 息 泄 露 还 是 价 格 操 纵? # 黄 张 凯, 洪 洁 瑛, 王 浩 ( 清 华 大 学 经 济 管 理 学 院, 北 京 100084) 摘 要 : 本 文 运 用 事 件 研 究 的 方 法 分 析 大 宗 交 易 的 价 格 效 应 与 过 去 的 研 究 不 同, 本 文 将 分 析 拓 展 到 交 易 前 的 价 格
untitled
20 1 2010 10 Vol.20 Special 1 The Chinese Journal of Nonferrous Metals Oct. 2010 1004-0609(2010)S1-s0127-05 Ti-6Al-4V 1 2 2 (1. 710016 2., 710049) 500~1 000 20 Ti-6Al-4V(TC4) TC4 800 TC4 800 TC4 TC4 800
0 No. 0 6 JOURNAL OF HISTORIOGRAPHY Serial No. 6 0087 K09 A 00-0 0-00- 90 89 0-0-8 0JJD77000 < > 99 97 98 00 07 0 90 9 97 9 90 000 998 99 9 96 9 7 9 6 99 99 989 9 9 9 000 60 007 687 0 6 7 8 9 瑏瑠 90 6 7
% % 99% Sautman B. Preferential Policies for Ethnic Minorities in China The Case
1001-5558 2015 03-0037-11 2000 2010 C95 DOI:10.16486/j.cnki.62-1035/d.2015.03.005 A 1 2014 14CRK014 2013 13SHC012 1 47 2181 N. W. Journal of Ethnology 2015 3 86 2015.No.3 Total No.86 20 70 122000 2007
85% NCEP CFS 10 CFS CFS BP BP BP ~ 15 d CFS BP r - 1 r CFS 2. 1 CFS 10% 50% 3 d CFS Cli
1 2 3 1. 310030 2. 100054 3. 116000 CFS BP doi 10. 13928 /j. cnki. wrahe. 2016. 04. 020 TV697. 1 A 1000-0860 2016 04-0088-05 Abandoned water risk ratio control-based reservoir pre-discharge control method
<4D6963726F736F667420576F7264202D20B2CCA3BA4542B2A1B6BE52746120496747BFB9CCE5D3EBB1C7D1CAB0A9B7D6C6DAB5C4B9D8CFB52E646F63>
EB 病 毒 Rta/IgG 抗 体 与 鼻 咽 癌 分 期 的 关 系 蔡 永 林, 郑 裕 明, 成 积 儒, 李 军, 莫 永 坤, 钟 青 燕 ( 广 西 梧 州 市 红 十 字 会 医 院, 梧 州 市 肿 瘤 防 治 研 究 所, 广 西 梧 州 543002) 摘 要 : 目 的 探 讨 EB 病 毒 Rta/IgG 抗 体 与 鼻 咽 癌 临 床 分 期 的 关 系 方 法 用 酶
标题
第 48 卷 第 6 期 2 1 6 年 6 月 哈 尔 滨 工 业 大 学 学 报 JOURNAL OF HARBIN INSTITUTE OF TECHNOLOGY Vol 48 No 6 Jun. 216 doi:1.11918 / j.issn.367 6234.216.6.1 大 跨 度 楼 盖 结 构 在 运 动 荷 载 下 的 振 动 性 能 杨 维 国 1, 马 伯 涛 2, 宋 毛
31 17 www. watergasheat. com km 2 17 km 15 km hm % mm Fig. 1 Technical route of p
31 17 215 9 CHINA WATER & WASTEWATER Vol. 31 No. 17 Sep. 215 < > 232 SUSTAIN BMP SUSTAIN TU992 C 1-462 215 17-111 - 8 Planning and Design of Sponge City Case Study of Beijing Yongding River Ecological
2015内镜杂志-WMD.FIT)
第 22 卷 第 6 期 中 国 内 镜 杂 志 Vol. 22 No.6 2016 年 6 月 China Journal of Endoscopy Jun. 2016 DOI: 10.3969/j.issn.1007-1989.2016.06.015 文 章 编 号 : 1007-1989(2016)06-0056-05 论 著 对 经 口 牵 引 辅 助 内 镜 黏 膜 下 剥 离 术 中 牵
定稿
第 31 卷 第 8 期 2014 年 8 月 机 电 工 程 Journal of Mechanical & Electrical Engineering Vol. 31 No. 8 Aug. 2014 DOI:10.3969/j.issn.1001-4551.2014.08.008 * 基 于 逆 向 技 术 的 骨 盆 环 三 维 重 构 与 结 构 分 析 1,2 田 卫 军, 李 郁 (1.
THE APPLICATION OF ISOTOPE RATIO ANALYSIS BY INDUCTIVELY COUPLED PLASMA MASS SPECTROMETER A Dissertation Presented By Chaoyong YANG Supervisor: Prof.D
10384 070302 9825042 UDC 2001.6. 2001.7. 20016 THE APPLICATION OF ISOTOPE RATIO ANALYSIS BY INDUCTIVELY COUPLED PLASMA MASS SPECTROMETER A Dissertation Presented By Chaoyong YANG Supervisor: Prof.Dr. Xiaoru
徐 小 平, 等. 封 闭 式 负 压 引 流 技 术 治 疗 Fournier 坏 疽 的 临 床 疗 效 349 结 果 : 治 疗 后 7 14 d 观 察 组 FGSI 均 较 对 照 组 低 (P <0.05), 观 察 组 平 均 清 创 次 数 为 3.8 次, 明 显 少 于 对 照
wcjd@wjgnet.com 世 界 华 人 消 化 杂 志 2015 年 1 月 18 日 ; 23(2): 348-352 ISSN 1009-3079 (print) ISSN 2219-2859 (online) 临 床 经 验 CLINICAL PRACTICE 封 闭 式 负 压 引 流 技 术 治 疗 Fournier 坏 疽 的 临 床 疗 效 徐 小 平, 蔡 晓 辉, 张 磊,
第一章 图 １ １ 传染病的特征 ９ Ｔ ｈ１ Ｔ ｈ２ 细胞调节机制简图 正调节 负调节 细胞因子与细菌的相互作用机制目前尚未完全明了 有实验表明 细胞因子与细菌之间 存在有互利和互抑双重效应 例如 Ｔ Ｎ Ｆα 和 ＩＦＮγ 可抑制放线菌的生长而 ＩＬ ６ 的作用则 反之 ＩＬ １ ２ 和 ＧＭ ＣＳＦ 可促进某些致病性大肠杆菌生长而 ＩＬ １ｒａ 可抑制之 研究表 明 某些致病性大肠杆菌有与
United Nations ~ ~ % 2010
42 3 2018 5 Vol. 42 No. 3 May 2018 38 Population Research 2014 60 3% ~ 4% 10% 60 +
基于因子分析法对沪深农业类上市公司财务绩效实证分析
山 东 农 业 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ),2014,45(3):449-453 VOL.45 NO.3 2014 Journal of Shandong Agricultural University (Natural Science Edition) doi:10.3969/j.issn.1000-2324.2014.03.024 基 于 因 子 分 析 法 对 沪 深 农 业
% 8. 48% 3 80 Alcalase Novozymes Alcalase 2. 4 L Bacillus licheniformis 2. 4 AU /g 1. 2 Hitachi S-4700 JEOL JEM-1200EX Olympus Bu
2011 33 6 1117-1121 http / /xuebao. jxau. edu. cn Acta Agriculturae Universitatis Jiangxiensis E - mail ndxb7775@ sina. com * 311400 Alcalase 2. 4 L TS225. 1 + 6 A 1000-2286 2011 06-1117 - 05 A Study on
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基 于 胜 任 特 征 模 型 的 结 构 化 面 试 信 度 和 效 度 验 证 张 玮 北 京 邮 电 大 学 经 济 管 理 学 院, 北 京 (100876) E-mail: weeo1984@sina.com 摘 要 : 提 高 结 构 化 面 试 信 度 和 效 度 是 面 试 技 术 研 究 的 核 心 内 容 近 年 来 国 内 有 少 数 学 者 探 讨 过 基 于 胜 任 特 征
200 31 5 SWAN 0. 01 0. 01 6 min TITAN Thunder Identification Tracking Analysis SWAN TITAN and Nowcasting 19 TREC Tracking Radar Echo by Correlaction T
31 1 2013 3 Journal of Arid Meteorology Vol. 31 No. 1 March 2013. SWAN J. 2013 31 1 199-205. doi 10. 11755 /j. issn. 1006-7639 2013-01 - 0199 SWAN 730020 2011 7 7 SWAN SWAN 2012 2 SWAN 1006-7639 2013-01
运 动 干 预 对 老 年 糖 尿 病 - 域 型 患 者 生 命 质 量 的 影 响 重 糖 尿 病 并 发 症 袁 无 肝 尧 肾 等 脏 器 功 能 损 害 袁 血 压 180~105 mmhg 袁 心 电 图 正 常 曰 渊 6 冤 能 按 照 课 题 组 安 排 空 余 时 间 袁 坚 持
运 动 干 预 对 老 年 糖 尿 病 - 域 型 患 者 生 命 质 量 的 影 响 费 加 明 1 袁 2 摘 要 院 目 的 院 评 价 运 动 干 预 对 老 年 糖 尿 病 -Ⅱ 型 患 者 生 命 质 量 的 影 响 遥 方 法 院 将 30 例 老 年 糖 尿 病 -Ⅱ 型 患 者 随 机 分 为 运 动 和 袁 采 用 规 律 运 动 对 进 行 12 周 干 预 实 验 袁 则 不
symmetrical cutting patterns with various materials for visual designing; ii. This part combined costumes, bags and oilpaper umbrellas with the tradit
The Application of Chinese Paper Cutting Patterns to Bag,Costume Designs and oilpaper umbrella TSAI,Yi-lun LIN,Yu-wen Abstract Using bags and costumes is regarded as the extension of human body, and the
- MP <34 P<0.001 UA UA/MCA MCA P<0.05 UA UA/MCA UtA PI RI P<0.05 UtA 24 BP 24 MP III
98017624 Changes of maternal and fetal hemodynamics in early-onset severe preeclampsia : : 98017624 : 98-6 : : : : : OO - MP 46 30 16 92
标题
853 对实验性大鼠甲状腺肿的影响 * 田先翔,王瑞,泮剑英,吴勇,鲁云,郑国华 ( 湖北中医药大学药学院,武汉摇 430065) 摘摇 要摇 目的摇 研究对实验性大鼠甲状腺肿模型的影响及其作用机制 方法摇 将 SD 大鼠随机分为 6 组:,,低 中 高剂量组, 除外,其余各组大鼠连续灌服 丙基硫氧嘧啶(20 mg kg d ) 造模 低 中 高剂量组同时灌服水溶液,剂量分别为 4. 4, 8. 8,17.
材料 方法 载体构建 转基因植株的获得
生物技术通报 唐宏琨 曾洪梅 杨秀芬 邱德文 通过根癌农杆菌 介导转化法 将含有激发子基因 的植物表达载体 转化三生烟 获得了转基因烟草植株 用 检测确认了阳性转化株 用 杂交 和 杂交进一步证实了 基因的整合 转录和表达 对 代转基因阳性株进行 接种试验 结果显示 与非转基 因对照相比 表达 的烟草叶片枯斑数量减少 表明蛋白激发子基因 的表达提高了转基因烟草对 的抗性 激发子 基因 烟草 转化 材料
36(4) (2004) Journal of Soil and Water Conservation, 36(4) (2004) earthworms dig soil on surface and prevent plants to grow. But until D
(1) (2) (3) 16 20 35 Effect of Vegetation and Soil Properties on Earthworm Population Li-Ling Lin Professor, Department of Soil and Water Conservation, National Chung Hsing University, Taichung, Taiwan,
SHEHUI KEXUEBAN
430073 610207 31 1 15AFX008 2016-11-02 DF02D922. 1 A 1671-7023201701-0099-12 2 3 4 Benjamin van Rooij 5 1 6 99 SHEHUI KEXUEBAN 7 8 13 9 14 10 15 16 11 17 12 18 20 70 1 2015 1986-125 2 100 1 2014 3 2014
福 利 部 疾 病 管 制 署,2013;Lin, Wang, Tung, & Chen, 2009) 腸 病 毒 的 型 別 繁 多, 廣 泛 的 分 布 於 全 球, 在 室 溫 中 存 活 穩 定, 適 合 在 濕 熱 的 環 境 下 生 存, 常 發 生 在 夏 季 及 早 秋, 而 在 熱
預 防 並 不 難 - 談 腸 病 毒 的 照 護 與 預 防 台 北 醫 學 大 學 公 共 衛 生 系 趙 映 婷 基 隆 長 庚 醫 院 護 理 部 陳 淑 賢 基 隆 長 庚 醫 院 小 兒 科 蔡 明 翰 前 言 腸 病 毒 這 個 病 名 我 們 並 不 陌 生, 但 是 我 們 到 底 對 腸 病 毒 的 了 解 有 多 少? 很 多 人 常 常 把 腸 病 毒 感 冒 流 感 病 毒
从 灵 敏 度 和 特 异 度 综 合 分 析, 认 为 PGⅠ 60 μg/l PGⅠ/PGⅡ 6 是 中 国 胃 癌 高 发 区 居 民 胃 癌 和 慢 性 萎 缩 性 胃 炎 筛 查 较 为 合 适 的 界 定 值 何 宝 国 等 [8] 应 用 乳 胶 增 强 免 疫 比 浊 法 进 行 测
![从 灵 敏 度 和 特 异 度 综 合 分 析, 认 为 PGⅠ 60 μg/l PGⅠ/PGⅡ 6 是 中 国 胃 癌 高 发 区 居 民 胃 癌 和 慢 性 萎 缩 性 胃 炎 筛 查 较 为 合 适 的 界 定 值 何 宝 国 等 [8] 应 用 乳 胶 增 强 免 疫 比 浊 法 进 行 测](/thumbs/40/21925308.jpg "从 灵 敏 度 和 特 异 度 综 合 分 析, 认 为 PGⅠ 60 μg/l PGⅠ/PGⅡ 6 是 中 国 胃 癌 高 发 区 居 民 胃 癌 和 慢 性 萎 缩 性 胃 炎 筛 查 较 为 合 适 的 界 定 值 何 宝 国 等 [8] 应 用 乳 胶 增 强 免 疫 比 浊 法 进 行 测")
胃 蛋 白 酶 原 测 定 在 胃 癌 及 其 癌 前 病 变 诊 断 中 的 应 用 关 键 词 胃 蛋 白 酶 原 测 定 胃 癌 癌 前 病 变 胃 癌 是 我 国 死 亡 率 最 高 的 恶 性 肿 瘤, 提 高 早 期 胃 癌 的 检 出 率 可 大 大 降 低 胃 癌 死 亡 率, 改 善 病 人 生 活 质 量 日 本 早 期 胃 癌 较 高 的 发 现 率 及 手 术 率 得 益 于
IPCC CO (IPCC2006) 1 : = ( 1) 1 (kj/kg) (kgc/gj) (tc/t)
2011 5 5 (278 ) China Industrial Economics May 2011 No.5 1 12 (1. 100005; 2. 066004) [ ] : ; ; : ; ; [ ] ; ; ; [ ]F290 [ ]A [ ]1006-480X(2011)05-0047-11 2008 CO 2 ( ) (2009) (GDP) (Binhocker et al. 2008)