秘密★三年

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1 第十届药典委员会细菌专业委员会 2012 年第一次会议纪要 一 国家药品标准提高课题会议结合 2015 版中国药典编制大纲的要求对 2009~2011 年细菌制品标准提高课题进行了全面梳理 对 2009 年课题需要进一步开展的工作提出了具体意见, 对 2010 年课题中期汇报进行了审议并对 2011 年课题立题进行了确认 课题承担单位均为中国食品药品检定研究院 ( 中检院 ) ( 一 )2009 年标准提高课题回顾与总结 1. 微生态制品菌种鉴别方法的改进课题承担单位采用 PCR 方法建立了微生态制品生产用菌种 16S rrna 序列测定, 用于微生态制品生产用菌种表型的鉴别, 将进一步开展方法标准化研究和扩大验证, 为 中国药典 2015 年版三部微生态制品总论的修订提供依据 2. 吸附无细胞百白破联合疫苗建立 PT FHA 含量定量检测法该课题系采用双抗体夹心 ELISA 方法建立 PT FHA 含量定量检测方法, 用于吸附无细胞百白破联合疫苗生产过程中有效组分的质量控制 中检院对此方法进行了方法学验证, 并应用该方法对不同生产企业无细胞百日咳疫苗生产过程中 PT FHA 的含

2 量进行检测, 证明该方法可用于无细胞百日咳疫苗生产过程中有效成分的检测 专家建议进一步开展对该方法及试剂的标准化研究并扩大验证, 为在 中国药典 收载的该品种标准中增订 PT 和 FHA 含量测定及限度提供依据 3. 建立吸附破伤风疫苗类毒素聚合体含量测定方法该课题系采用高效液相色谱法 (HPLC) 建立类毒素聚合体检测方法, 用于生产企业生产过程中的质量控制 中检院对此方法进行了方法学验证, 并应用此方法对国内企业生产的白喉 破伤风类毒素原液进行了检测, 证明该方法能够对类毒素中单体和多聚体进行有效分离 灵敏度高 重现性好, 可用于类毒素类制品中多聚体的质量控制分析 专家建议进一步开展对该方法及试剂的标准化研究并扩大验证, 为在 中国药典 收载的该品种标准中增订类毒素聚合体含量测定及限度提供依据 4. 建立吸附白喉破伤风联合疫苗类毒素聚合体含量测定方法方法建立同吸附破伤风联合疫苗 鉴于该品种多年未生产, 课题承担单位不能收集样品开展进一步工作, 拟停止课题进一步工作 5. 重组 B 亚单位 / 菌体霍乱疫苗 ( 肠溶胶囊 ) 按照细菌专业委员会的相关意见, 课题承担单位中检院建立了霍乱残余毒素检测方法并确定了限度 该起草标准已完成上网公示, 迄今未收到不同意见的反馈 拟在 2010 年版 中国药典

3 三部第二增补本予以收载 6. 卡介菌多糖核酸注射液按照 2009 年生物制品标准提高拟增修订内容的公示内容, 课题承担单位中检院收集汇总了生产企业对该产品成品增订乙醇 乙醚残留量测定 ( 顶空进样气相色谱法 ) 和鉴别实验 ( 多重 PCR 法 ) 的扩大验证结果和相关数据, 以 中国生物制品规程 2000 年版同品种标准内容为基础, 参照 中国药典 2010 年版体例进行标准起草, 并按照细菌专业委员会审核意见, 增订核酸和多糖含量的上限, 同时将制造部分中去除酚方法由 以透析法除酚 修订为 采用透析法或其它经批准的方法除酚 拟在 2010 年版 中国药典 三部第二增补本予以收载 专家建议课题承担单位应继续开展完善效力评价方法的相关研究工作 7. 铜绿假单胞菌注射液课题承担单位以肝癌细胞 BEL-7402 为靶细胞, 建立了体外肿瘤细胞抑制实验 (MTT 法 ) 替代原小鼠抑瘤试验用于该品种体外效力测定, 新建方法结合了制品的作用机理和给药途径, 与原动物试验相比易于标准化, 但应继续开展如下工作 : (1) 检定用细胞的标准化和细胞库的建立 ; (2)IC50( 半数抑制量 ) 的计算方法可采用改良寇氏法或直线回归法, 直线回归法需生产企业提供内部参考品 ; (3) 进一步扩大验证

4 8. 注射用红色诺卡氏菌细胞壁骨架 枯草芽孢杆菌喷雾剂和假单胞菌制剂三个品种标准提高增修订已完成上网公示征求意见, 没有收到不同意见的反馈, 课题承担单位应尽快完成品种标准的文字起草, 提交标准起草稿和修订说明报国家药典委员会 9. 微生态活菌试剂杂菌检查法该课题承担单位中检院由于前期未能买到全部对照培养基而未能按期开展研究工作, 专家建议中检院继续开展此项课题的研究 标准提高课题承担单位应按照相关要求, 完成后续工作, 尽快提交课题总结 ( 包括标准起草稿和起草说明 ) 报国家药典委员会 ( 二 )2010 年标准提高课题会议要求课题承担单位在 2012 年 12 月前完成全部相关课题的复核 验证及文字起草和修订工作, 并将资料报国家药典委员会 2010 年国家药品标准提高课题的进展情况及讨论意见如下 : 1. 皮内注射用卡介苗鉴别试验和无有毒分支杆菌试验的修订该课题由中检院牵头, 成都和上海生物制品研究所有限公司参与, 建立了卡介苗成品鉴别试验和无有毒分枝杆菌试验替代方法的研究, 考察了所建立方法的灵敏度和重复性, 并开展了质控

5 参考品建立及验证工作 2. 皮上划痕用鼠疫活疫苗该课题由中检定院牵头, 兰州生物制品研究所有限公司参与, 建立了皮上划痕用鼠疫活疫苗活菌数快速检测方法及噬菌体裂解法进行纯菌检查的方法, 考察了所建立方法的灵敏度和特异性, 并开展了质控参考品建立及验证工作 3. 皮上划痕人用炭疽活疫苗该课题由中国食品药品检定研究院牵头, 兰州生物制品研究所有限公司参与, 建立了皮上划痕人用炭疽活疫苗活菌数快速检测方法及噬菌体裂解法进行纯菌检查的方法, 考察了所建立方法的灵敏度和特异性, 并开展了质控参考品建立及验证工作 4. 皮上划痕人用布氏活疫苗该课题由中检院牵头, 兰州生物制品研究所有限公司参与, 建立了皮上划痕人用布氏活疫苗活菌数快速检测方法及噬菌体裂解法进行纯菌检查的方法, 考察了所建立方法的灵敏度和特异性, 并开展了质控参考品建立及验证工作 5. A 群 C 群脑膜炎球菌多糖结合疫苗新标准起草目前国内已批准 4 家企业生产, 各家生产工艺不完全相同 与会专家经过讨论, 对该品种新标准的起草提出以下建议 : (1) 不同载体 不同剂型的疫苗按不同品种分别收载 (2) 参照 中国药典 2010 年版三部中单价疫苗的相关要求对 4 家生产企业的标准进行整合 ;

6 (3) 增订游离载体蛋白鉴别试验和含量测定, 并统一方法 ; 6. ACWY135 四价脑膜炎球菌多糖疫苗新标准起草目前国内已批准 4 家企业生产, 生产工艺基本一致 与会专家建议课题承担单位参照 中国药典 2010 年版三部中单价疫苗的相关要求对 4 家生产企业的标准进行整合, 起草国家标准 7. 金葡素注射液肠毒素 C 2 测定方法标准化课题承担单位采用双抗体夹心 ELISA 方法建立了冻干肠毒素 C2 定量标准品和肠毒素 C2 检测方法, 用于金葡素注射液活性成分的测定, 控制生产工艺和产品质量的一致性, 专家建议进一步加强冻干肠毒素 C2 标准品水分的控制, 扩大验证范围, 包括增加协作标定实验室和组织生产企业参与方法验证 8. 百日咳组分含量测定方法研究及标准化课题承担单位完成了大肠杆菌表达的重组百日咳粘着素 (PRN) 和 PRN 单抗的制备, 前期研究结果显示该重组 PRN 结构和免疫原性与天然 PRN 一致, 将进一步研究制备 PRN 多抗, 建立双抗体夹心 ELISA 法用于百日咳组分含量测定 9. 微生态活菌制品菌种基因库的建立课题承担单位采用 16SrRNA 基因序列测定方法 (2009 年标准提高课题 ) 完成了对现有上市微生态制品生产用菌种 16S rrna 基因序列的测定, 建立了微生态制品生产用菌种 16S rrna 基因数据库, 通过与 GenBank 对应菌株的序列比对, 发现个别微生态制品生产用菌种命名不一致 专家建议对测定方法应进一

7 步标准化和扩大验证, 结合生产用菌种命名的修订在微生态制品总论种子批检定增订 16S rrna 基因序列测定, 上述增修订内容拟在 中国药典 2015 年版三部中收载 10. 肺炎球菌多糖疫苗多糖含量及效力测定方法的研究课题承担单位建立了肺炎球菌多糖疫苗多糖含量及效力测定方法, 专家建议应建立多糖含量测定标准品和鉴别试验用参考血清, 并进一步开展该方法的标准化研究 11. 螨类制剂组分及活性检测方法的研究课题承担单位采用荧光酶联免疫竞争抑制法初步建立了过敏原制品活性测定 ( 测定特异性 IgE 含量 ) 的方法, 专家建议进一步扩大验证, 积累数据, 开展标准试剂的研究 ( 三 )2011 年标准提高课题结合标准提高工作开展的实际情况, 经与会专家讨论, 进一步明确 2011 年细菌制品标准提高课题如下 : 序号课题承担单位 1 建立肺炎球菌多糖疫苗国家标准中检院 2 建立螨制剂国家标准中检院三 对气管炎疫苗国家标准的相关问题的讨论气管炎疫苗是 中国生物制品规程 2000 年版暂行版收载的品种, 根据 国药管注 [2000]337 号文 的规定, 执行的截止日期为 2003 年 9 月 30 日, 逾期未能转为正式规程的暂行规程, 将取消该制品的生产批准文号并停止该制品的生产 该制品因生

8 产工艺落后 有效成分不明确, 被列为 2004 年国家局提高国家药品标准行动计划 ( 国食药监注 [2004]35 号 ) 中要求需要进行临床再评价的品种 多年来, 生产企业一致未完成标准提高的相关工作和提交该品种标准修订的申请, 依据上述情况, 我委于 2011 年发文并经网上征求意见后向国家局上报关于废止包括气管炎疫苗在内的 131 个生物制品国家标准的建议 本次会议针对北京天坛生物制品有限公司和先声卫科生物制品有限公司提交的关于保留气管炎疫苗国家标准的申请进行了讨论, 专家建议生产企业应开展以下研究工作,2012 年底以前提交相关资料并按照有关程序申报 : 1. 全面筛选和确认生产用种子批菌种, 选择出生物学特征显著 菌株典型整齐 能诱导出较高效价抗体的菌种 ; 2. 提交生产用菌种应急性毒性试验结果或有关安全实验资料, 保证产品的安全性 ; 3. 完善生产工艺 ( 包括菌种的培养时间 收获时间 防腐剂加量的科学性及配制方法 ); 4. 提供采用分光光度法测定细菌浓度的数据 ( 包括原液和成品 ), 以便汇总提供较全面的浓度界定值 ; 5. 研究成品中效力试验的检测方法或提供有关试验资料以便更有效控制制品质量 ; 6. 提供有关的临床研究资料 四 2015 年版 中国药典 三部编制工作

9 按照 2015 年版 中国药典 三部编制大纲的要求, 会议进 一步确定了疫苗类制品药典标准开展相关工作内容 任务分工和 工作进度 ( 见下表 ) 品种 / 项目 标准完善和提高内容 承担单位 / 牵头人 进度计划 人用疫苗总论 ( 细 通用性要求 (EuP, 曾明 2012 年 10 月 菌部分 ) USP) 提交起草稿 生物制品生产检定用菌毒种 增订菌毒种质量控制要求原则 叶强李凤祥 2012 年 10 月提交起草稿 残留溶剂限度防腐剂限度 相关品种相关品种 已收载附录, 相关品种情况根据抑菌效果验证确定限度 上海 湖北 四川 北京药检所 渗透压摩尔浓 相关品种 增订渗透压摩尔浓度测定及限度规定 度 佐剂吸附率检测 含佐剂疫苗 开展方法研究, 增订吸附率检测项目和限度规定 武汉生研所中检院复核 2012 年 10 月底提交方法建立及限度的初步结果 载体蛋白检测 结合疫苗 AC 流脑多糖结合疫苗 ACWY135 四价流脑多糖疫苗肺炎多糖疫苗 重组 B 亚单位 / 菌体霍乱疫苗 ( 肠溶胶囊 ) 游离载体蛋白含量检测及限度要求 2010 年标准提高拟新增品种 2010 年标准提高拟新增品种 2010 年标准提高拟新增品种 2009 年标准提高拟新增品种 兰州生研所中检院复核中检院 中检院 中检院 中检院 五 审议 2010 年版中国药典注释起草稿 2012 年 10 月底提交方法建立及限度的初步结果

10 会议围绕药典注释的编写大纲要求, 对细菌制品共计 18 个注释起草稿进行了讨论, 对注释中概述 制造 检定等方面的内容提出了具体修改意见 要求各起草单位按照修订意见对起草稿进行修订完善, 并于 2012 年 4 月 30 日前完成第一修订稿,5 月 15 日前完成第二修订稿,6 月底前完成第三修订稿 各次修订稿完成后由起草者以电子邮件方式发送给审稿专家, 同时抄送国家药典委员会 国家药典委员会将根据工作进度, 及时组织召开专家审稿会

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Ñ Ö Ö Ö Ö Ö Ñ Ö Ö Ö Ö Ö Ö Ñ Ö Ö Ù Ñ Ö Ö Ñ Ö Ö Ö Ö Ö Ö 中国药典 年版药用辅料标准起草工作交流会 月 日于西宁召开 国家药典委员会于 年 月 日组织承担药用辅料标准起草任务的 个药品检验所在青海省西宁市召开辅料 标准起草工作交流会 国家局药品注册司派员参加了会议 青海省食品药品监督管理局魏富财副局长到会致欢迎词 中国药 品生物制品检定所和上海市食品药品检验所就药用辅料标准起草工作进行了大会经验交流

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