Microsoft PowerPoint - 8-尚红e.ppt

Size: px

Start display at page:

Download "Microsoft PowerPoint - 8-尚红e.ppt"

头娱鲸穆
5 years ago
Views:

1 艾滋病实验室检测卫生部艾滋病免疫学重点实验室中国医科大学附属一院艾滋病确认实验室尚红

2 HIV 感染者 3320 万妇女 1520 万 <15 岁儿童 250 万 2007 HIV 感染者 250 万 2007 AIDS 死亡 210 万

3 截止 2007 年底 HIV 感染者 70 万 AIDS 8.5 万全人群感染率 0.05% 07 年新增感染者 5 万卫生部 WHO UNAIDS

4 艾滋病在亚洲流行的形势 Pattern of the HIV Epidemic - Asia General Population 一般人群 Family 家庭 Bridge Population 桥梁人群 Sex workers 性工作者 Source Population 源头人群 Drug Users 吸毒者 Children 儿童

5 艾滋病今天在中国流行的形势 HIV Epidemic Status - China Source Population 源头人群 Drug Users 吸毒者 Bridge Population 桥梁人群 Sex workers 性工作者 General Population 一般人群 Family 家庭 Children 儿童

6 HIV-1 亚型及 HIV-2 的地理分布 B BFCFC B F HIV-2 A,G,A/ C A,D G C A,B,A/B,A/B HIV-2 C C,E EB B Subtypes A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, K, CRFs, and untypable

7 HIV 感染自然史 CD4 T Cells/mm Primary Infection Possible acute HIV syndrome Wide dissemination of virus Seeding of lymphoid organs Clinical Latency Opportunistic disease Constitutional symptoms Death 1:512 1:256 1:128 1:64 1:32 1:16 1:8 Plasma Viremia Titer 300 1: : Weeks Years

8 实验室检测 HIV 筛查实验 HIV 确证实验检测 HIV /AIDS 患者 CD4 T 细胞计数和 HIV 病毒载量, 以监测病情, 确定开始抗病毒治疗的时间, 评价抗病毒治疗的效果 HIV 基因型耐药检测, 判断是否有耐药发生及流行

9 HIV 抗体筛查方法常用的筛查方法是酶联免疫试验 (ELISA) 室间质评和室内质控快速检测 (RT) 及其它检测 (1) 明胶颗粒凝集试验 (PA) (2) 斑点 EIA 或称斑点 ELISA (dot-eia) (3) 斑点免疫胶体金 ( 或胶体硒 ) 快速试验 (4) 艾滋病唾液检测卡尿液 HIV 抗体检测快速诊断阳性结果还需经 ELISA 方法验证对筛查阴性和阳性者, 均需做好检测后咨询

10 HIV 抗体确认试验确认试验的试剂 : 必须是经国家食品药品监督管理局 (SFDA) 注册批准在有效期内的试剂确认试验方法 : 包括免疫印迹试验 (WB) 条带免疫试验 (LIATEK HIVⅢ) 放射免疫沉淀试验 (RIPA) 及免疫荧光试验 (IFA) 国内常用的确认试验方法是 WB

11 P24 抗原测定适用范围 HIV-1 抗体不确定或窗口期的辅助诊断 HIV-1 阳性母亲所生婴儿的鉴别诊断第四代 HIV-1 抗原 / 抗体 ELISA 试剂检测呈阳性反应, 但 HIV-1 抗体确认阴性者的诊断结果报告和解释 HIV-1 P24 抗原阳性仅作为 HIV 感染的辅助诊断依据, 不能依此确诊 HIV-1 P24 抗原阴性结果只表示在本试验中无反应, 不能排除 HIV 感染

12 HIV 核酸定量检测定量检测常用于监测 HIV 感染者的病程进展和抗病毒治疗效果目前常用的 HIV RNA 定量测定方法有逆转录 PCR 实验 (RT-PCR) 核酸序列扩增实验 (NASBA) 分支 DNA 杂交实验 (bdna) 实时荧光定量 PCR 方法等, 最低检测限可达拷贝 / 毫升按照仪器读数报告结果, 应注明使用的试验方法样品种类和样品量测定结果小于最低检测限时, 应注明最低检测限水平注意低于最低检测限的结果不能排除 HIV 感染应附上仪器打印的数据

13 临床应用窗口期辅助诊断 ( 婴儿血液筛查 ) VL log copies/ml d0 4w 12w 24w 10 例患者治疗期间平均 VL 的变化情况指导治疗方案及疗效测定预测疾病进程年发病率 < >30000 血浆病毒载量 ( 拷备数 / 毫升 )

14 Anti HIV test generations reactivity Viral load Depen ds on the kit Ag p 24 IgM Anti- HIV IgG anti HIV 4th generatio n 3rd generation 2nd generation 2nd generation peptide 1st generatio n Weeks after contamination

15 免疫功能测定 Infection Seroconversion HAART Death CD4 T cells/μl CD4 T cell depletion 2-6 weeks mean of 10 years Flu-like Disease Asymptomatic phase Symptomatic phase AIDS CD4+T 淋巴细胞是艾滋病诊断疾病分期制定抗病毒治疗和预防机会性感染方案的实验室标准指标

16 成人及青少年艾滋病分期标准 (CDC, 美国,1993 年 ) 临床阶段 CD4+T 细胞 A 无症状或急性 HIV 感染或持续性全身淋巴结肿大 B 出现症状, 不是 A 或 C C 艾滋病指针性症状 >500/ul( 29%) A1 B1 C /ul (14-28%) A2 B2 C2 <200/ul(<14%) A3 B3 C3 CD4<200/ul 和 / 或出现艾滋病指征性症状 ( 如卡氏肺囊虫肺炎等 ) 时, 就可定义为进入艾滋病期如表中 A3,B3,C1-3 期

17 成人 / 青少年抗病毒治疗总体标准临床标准实验室标准处理意见急性感染期任何 CD 4+ T 淋巴细胞水平建议治疗 WHO 临床分期 Ⅳ 期任何 CD 4+ T 淋巴细胞水平 * 治疗 WHO 临床分期 Ⅲ 期任何 CD 4+ T 淋巴细胞水平 * 建议治疗任何分期 CD 4+ T 淋巴细胞 <200/mm 3 治疗 WHO 临床分期 Ⅰ 期,Ⅱ 期 CD 4+ T 淋巴细胞计数在之间, 而且符合以下任何一条标准, a) 一年内 CD 4+ T 淋巴细胞计数下降超过 30%, 或者 CD 4+ T 淋巴细胞计数绝对数下降超过 100/mm 3 b) 病毒载量在 100,000 拷贝 /ml 以上 ** c) 患者具有治疗意愿, 并可以保证良好依从性建议治疗如果患者为女性, 当使用含有 NVP 治疗方案时, 建议推迟到 CD 4+ T 淋巴细胞 <250/mm 3 以后再开始治疗 *** 注 :* 女性患者基线 CD4+T 淋巴细胞 250/mm 3 时, 不推荐使用含有奈韦拉平 (NVP) 的方案, 因为奈韦拉平可以增加肝毒性 ** 有条件地区可以在开始抗病毒治疗前进行病毒载量检测 *** 女性患者基线 CD4+T 淋巴细胞 250/mm 3 使用含有奈韦拉平 (NVP) 的治疗方案时, 会增加肝毒性的危险, 需谨慎使用国家免费艾滋病抗病毒药物治疗手册国家免费艾滋病抗病毒药物治疗手册 ( 修订 )

18 % with AIDS at 3 yrs Relationship of CD4 lymphocytes, plasma HIV RNA and disease progression >55,000 20K-55K 7K-20K 1.5K-7K <1500 Plasma RNA CD4 < 200 CD CD CD CD4 > 750 J Mellors et al, Multicenter AIDS Cohort Study

19 抗逆转录病毒治疗 (HAART) 目的 CD4+ T-cells Relative Levels Plasma HIV Viremia Long term durability? Limit of detection Months Years After HIV Infection Acute HIV infection Symptom 减少 HIV 传播

20 美国 AIDS 患病数和死亡数 1995 HAART

21 HAART 治疗 24 月 CD4 和 VL 变化 VL(log copies/ml) CD4 counts(cell/ul) M 12M 24M 治疗时间 VL CD4 有效率 70% 年病死率 30%( 治疗前 ), 5% ( 治疗后 )

22 HIV-1 耐药性检测随着 HAART 治疗的广泛开展, 病毒变异和耐药株正在不断出现, 甚至对一个药物的耐药可引起多种药物的交叉耐药目前耐药性检测有两种方法即表型检测及基因型检测表型检测通过用药期间的病毒培养能直接测出感染毒株对药物的敏感度, 并能揭示事先存在或交叉的耐药情况, 有利于指导 HIV-1 感染者有效地用药, 不足之处为耗时长技术要求高, 价格高基因型检测则通过分子生物学方法检测与耐药性相关的病毒基因突变费用较低, 技术也相对容易, 结果分析较负杂, 需要掌握大量相关知识目前国际上广泛应用于临床的是基因型耐药检测

23 国外报道的 HIV-1 原发耐药株流行情况国家与地区病人数 NRTI NNRTI PI 任何药物年份作者欧洲 % 3% 3% 9% Wensing 伦敦 239 4% 2% 1% 7% Garcia-Diaz 德国 831 5% 3% 2% 9% Oelte 瑞士 % 0%-7% 0%-5% 8% Yerly 美国 / 澳大利亚 % 11% 3% 13% Little 美国 % 6% 3% 10% Ross 美国 195 9% 7% 2% 16% Eshleman 芝加哥 66 15% 12% 3% 25% Bennett 洛山机 73 14% 11% 2% 20% 旧金山 STD 门诊 54 5% 5% 0 9% 2004 Truong 旧金山原发 HIV 感染 48 4% 0% 5% 10% 2004

24 2006年HIV耐药监测面覆盖全国 Expanded HIVDR surveillance in 2005 HEILONGJIANG JILIN XINJIANG LIAONING GANSU NEIMENGGU BEIJING TIANJIN NCDCLab NCAIDS HEBEI NINGXIA QINGHAI SHANXI SHAANXI TIBET CMU CMU Lab CMMA MMAL SCDC Shanghai SHANDONG HENAN JIANGSU SHANGHAI SICHUAN HUBEI ANHUI ZHEJIANG JIANGXI HUNAN GUIZHOU FUJIAN YUNNAN TAIWAN GUANGXI GUANGDONG HONG KONG MACAO HAINAN CDC Lab

25 全国艾滋病检测实验室网络参比实验室 ( 中国 CDC) 确证实验室 2007 年底, 验收 191 个筛查实验室 2007 年底, 验收 6918 个年 99 年 00 年 01 年 02 年 03 年 04 年 05 年 06 年 07 年 00 年 01 年 02 年 03 年 04 年 05 年 06 年 07 年

26 我国艾滋病检测确证实验室能力验证 (PT) 发展历程表 HIV 耐药性检测 HIV 抗体快速检测 HBsAg HCV 抗体检测组织的 PT 项目 DBS-DNA HIV 基因亚型检测 HIV-1 新近感染检测 (BED 方法 ) 梅毒特异性抗体检测梅毒非特异性抗体检测 DBS-DNA HIV 基因亚型检测 HIV-1 新近感染检测 (BED 方法 ) 梅毒特异性抗体检测梅毒非特异性抗体检测 HIV 病毒载量测定 HIV 病毒载量测定 HIV 病毒载量测定 CD4+T 淋巴细胞测定 CD4+T 淋巴细胞测定 CD4+T 淋巴细胞测定 CD4+T 淋巴细胞测定 HIV 抗体 WB HIV 抗体 WB HIV 抗体 WB HIV 抗体 WB HIV 抗体 WB HIV 抗体 EIA HIV 抗体 EIA HIV 抗体 EIA HIV 抗体 EIA HIV 抗体 EIA 开始年份 2003 年 2004 年 2005 年 2006 年 2007 年

27 国务院制定 : 中国遏制与防治艾滋病行动计划中国遏制与防治艾滋病行动计划 ( 年 ) 三防治策略和行动措施 2. 开展艾滋病抗病毒治疗的实验室检测和耐药监测

28 面临的挑战实验室检测能力和实验室的质量控制有待进一步提高 ; 实验室检测覆盖面需进一步扩大 ; 耐药检测个体化服务 ; 实验室检测人员培训应进一步加强.

29 中国历史上曾经成功根除性病 Cohen MS et al. JID:174, 1996 At the time of formation of the PRC, the national prevalence of syphilis was 7.0% The prevalence of syphilis in some national minorities was as high as 50% After the Campaign against STDs (1964), the national prevalence of syphilis was 0.004%!

30 防治艾滋病你我同参与

31 致谢中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心参比实验室治疗关怀室中国 HIV 耐药监测网络

National and Provincial Life Tables Derived from China’s 2000 Census Data

National and Provincial Life Tables Derived from China s 2000 Census Data Yong Cai Department of Sociology University of Utah Salt Lake City, UT 84112-0250 yong.cai@soc.utah.edu Feburay 21, 2005 Data available