28 华南预防医学 2013 年 12 月第 39 卷第 6 期 SouthChinaJPrevMed,December2013,Vol39,No 6 sistanttociprofloxacin,folowed bysalmonela I4,5,12:i: (5 0%) and Salmonela

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1 华南预防医学 2013 年 12 月第 39 卷第 6 期 SouthChinaJPrevMed,December2013,Vol39,No 6 27 食品安全与营养 年广东地区人源主要血清型沙门菌喹诺酮耐药特征分析 梁兆铭 1,2, 柯碧霞 3, 邓小玲 3, 何冬梅 3, 柯昌文 3, 李柏生 3 3, 杨杏芬 摘要 目的了解广东省沙门菌对喹诺酮耐药特征及其基因突变情况 方法选用 年广东省非伤寒沙门菌监测收集的 4 种主要血清型沙门菌, 采用半定量药敏检测法测定 年收集的沙门菌临床株对萘啶酸和环丙沙星的最小抑菌浓度 (MIC); 通过 PCR 扩增鼠伤寒沙门菌株的 gyra 和 parc 的基因, 并对序列进行测定, 对比野生株, 发现突变位点及突变类型 结果共对 年收集的 496 株鼠伤寒沙门菌 鼠伤寒沙门菌变种 肠炎沙门菌和斯坦利沙门菌进行耐药性分析,75 4%(374/496) 沙门菌对萘啶酸耐药, 其中鼠伤寒沙门菌 鼠伤寒沙门菌变种 肠炎沙门菌 斯坦利沙门菌耐药率分别为 82 5%(207/251) 84 0%(84/100) 79 5%(70/88) 22 8%(13/57);5 4%(27/496) 沙门菌对环丙沙星耐药, 其中鼠伤寒沙门菌 鼠伤寒沙门菌变种 肠炎沙门菌的耐药率分别为 8 0%(20/251) 5 0%(5/100) 2 3%(2/88) 71 7%(180/251) 鼠伤寒沙门菌发生基因突变, 其中 86 1%(155/180) 发生 gyra 上突变,37 2%(67/180) 发生 parc 上突变, 23 3%(42/180) 发生双基因突变 环丙沙星耐药株 中敏株 敏感株分别有 7 株 (35 0%,7/20) 1 株 (3 1%,1/32) 6 株 (3 0%,6/199) 发生 gyraser83 位点突变,3 组间 Ser83 位点突变率差异有统计学意义 (P<0 01); 环丙沙星耐药株 中敏株 敏感株分别有 15 株 (75 0%,15/20) 21 株 (65 6%, 21/32) 111 株 (55 8%,111/199) 发生 gyraasp87 位点突变,3 组间突变率差异无统计学意义 (P> 0 05) 5 株 parcser80 位点突变株均突变为 Arg, 此突变的菌株均伴有 Ser83Phe 及 Asp87Asn;9 株 parcthr57 突变株均对萘啶酸耐药 结论广东省沙门菌对萘啶酸普遍耐药, 对环丙沙星仍普遍敏感 ;gyra 和 parc 中可能影响沙门菌耐药的突变位点应进一步确认其对耐药的影响 关键词 沙门菌 ; 喹诺酮 ; 最小抑菌浓度 ; 耐药中图分类号 :R516 3 文献标识码 :A 文章编号 : (2013) Characteristicsofmainhuman sourcesalmonelaserovarsresistanttoquinoloneinguangdong Province, LIANGZhao ming,kebi xia,dengxiao ling,hedong mei,kechang wen,libai sheng,yang Xing fen. SchoolofPublicHealth,SunYat senuniversity,guangzhou ,China Abstract Objective ToinvestigatethequinoloneresistancetoSalmonelaandmutationrelevant toquinoloneresistanceinguangdongprovince.methods WeselectfourmainSalmonelaserovarsfrom Non typhisalmonelasurveilanceinguangdongbetween2010and2011todeterminetheminimuminhibi toryconcentrationofnalidixicacidandciprofloxacinbysemi quantitativesusceptibilitytestanddetectmu tantsingyraandparcbysequencing.results Salmonelatyphimurium,SalmonelaI4,5,12:i:,Sal monelaenteritidis,andsalmonelastanleyfrom2010to2011wereselectedfortheantimicrobialsuscepti bilitytest.wefound75 4% (374/496)ofSalmonelawereresistanttonalidixicacid,ofwhichresistant ratesofsalmonelatyphimurium,salmonelai4,5,12:i:,salmonelaenteritidisandstanleysalmonelato nalidixicacidwere82 5% (207/251),84 0% (84/100),79 5% (70/88),and22 8% (13/57),re spectively.5 4% ofsalmonelawereresistanttociprofloxacin.8 0% ofsalmonelatyphimuriumwasre 基金项目 : 广东省食品安全卫生应急技术研究中心基金 ( 粤科函社字 [2011]733 号 ) 作者单位 :1 中山大学公共卫生学院, 广东广州 ;2 广东省生物制品与药物研究所 ;3 广东省疾病预防控制中心作者简介 : 梁兆铭 (1988 ), 男, 硕士, 技师, 研究方向为食源性疾病病原学通讯作者 : 邓小玲,E mail:dengxiaolinggd@aliyun.com

2 28 华南预防医学 2013 年 12 月第 39 卷第 6 期 SouthChinaJPrevMed,December2013,Vol39,No 6 sistanttociprofloxacin,folowed bysalmonela I4,5,12:i: (5 0%) and Salmonela enteritidis (2 3%).Mutantsweredetectedin71 7% ofsalmonelatyphimurium isolates.86 1% ofthemutants weredetectedingyraand37 2% inparc,and23 3% inbothgenes.locusmutationatser83ingyra wasobservedin35 0% oftheciprofloxacin resistantisolates,3 1% ofintermediateisolatesand3 0% of thesusceptibleisolates(p<0 01).LocusmutationatAsp87ingyrAwasobservedin75 0% ofthecipro floxacin resistantisolates,65 6% ofintermediateisolatesand55 8% ofthesusceptibleisolates(p> 0 05).ArgwasdetectedinalfiveisolateswithmutantsatSer80inparC.NineisolateswithThr57mu tantsinparcwerealresistanttonalidixicacid.conclusion GeneralySalmonelaisolatesinGuangdong werehighlyresistanttonalidixicacid,butsensitivetociprofloxacin.mutantsingyraandparcwhichmight afectquinoloneresistanceinsalmonelaisolatesshouldbeconfirmedbyfurtherexperiments. Keywords Salmonela;Quinolone; Minimuminhibitoryconcentration; Drugresistance 喹诺酮由最早的萘啶酸发展至今已有 50 年 作为第 1 代喹诺酮的代表, 萘啶酸仅用于尿道感染, 但抗菌谱窄, 容易产生耐药, 已被淘汰 第 3 代以后的喹诺酮在主体骨架引入氟原子, 亦称为氟喹诺酮 (Fluoroquinolone,FQ) 氟喹诺酮包括第 3 代和第 4 代药物, 前者如环丙沙星 诺氟沙星 氧氟沙星等 ; 后者如莫西沙星 吉米沙星 曲伐沙星等 作为氟喹诺酮的代表, 环丙沙星是临床治疗的经验用药 [1-2] 萘啶酸虽然已被淘汰, 但沙门菌对萘啶酸的药敏结果对氟喹诺酮的临床治疗效果有一定指示作用 [3] 沙门菌是重要的食源性疾病致病菌, 多见于食源性感染 [4] 全球每年约有 9400 万人感染沙门菌,15 5 万人死亡, 其中 8000 万为食源性感染 [5] 国外报道的沙门菌多表现为对萘啶酸耐药, 最小抑菌浓度 (minimum inhibitoryconcentration,mic) 以大于 128μg/mL 为主 ; 对环丙沙星等 FQ 则多表现为敏感性大幅下降,MIC 普遍集中 0 25~1 00μg/ ml [6] 国外陆续出现不同程度耐药的沙门菌株 [6-11] 临床上也出现对喹诺酮和 FQ 高水平耐药的沙门菌, 导致 FQ 类药物临床治疗无效 [1,12-13] 我国部分省份开展了沙门菌监测, 采用定性药敏检测方法 (Kirby Bauer 法 ) 对沙门菌耐药状况进行研究 结果显示, 沙门菌对环丙沙星的耐药率为 5 6% [14],64 5% 的婴幼儿分离株对环丙沙星耐药 [15] 广东省沙门菌耐药情况显示, 沙门菌对萘啶酸及环丙沙星的耐药率也呈上升趋势 [16-18] 研究表明, 位于拓扑异构酶编码基因中的喹诺酮耐药决定区 (quinoloneresistance determiningre gion,qrdr) 在沙门菌对氟喹诺酮耐药中发挥重要作用, 特别是 QRDR 中 gyra 和 parc 基因 [19-20] QRDR 内核苷酸的点突变引起相应位点的氨基酸替换,FQ 无法识别发生改变后的拓扑异构酶空间结构, 便无法发挥抗菌作用, 细菌表现为耐药 本研究在广东省沙门菌监测的基础上, 对广东 省非伤寒沙门菌对喹诺酮耐药特征进行阐述 本研究将采用半定量药敏检测方法 (MIC 法 ) 对喹诺酮耐药程度进行检测, 主要针对沙门菌对萘啶酸和环丙沙星的耐药情况及分析鼠伤寒沙门菌的 QRDR 序列特征, 初探喹诺酮耐药与 QRDR 的基因突变关系 1 材料和方法 1 1 菌株来源 年广东省 12 个地市 27 家哨点医院开展非伤寒沙门菌监测, 收集到沙门菌 724 株, 共 72 个血清型 鼠伤寒沙门菌 (Salmonelatyphimuri um,st) 为 251 株 ( 年分别为 株 ) 鼠伤寒沙门菌变种 (SalmonelaI4,5,12:i:, SI) 为 100 株 ( 年分别为 株 ) 肠炎沙门菌 (Salmonelaenteritidis,SE) 为 88 株 ( 年分别为 株 ) 斯坦利沙门菌 (Salmonel lastanley,ss) 为 57 株 ( 年分别为 株 ), 共计 500 株, 占沙门菌株总数 69 0%, 是广东省主要的非伤寒沙门菌血清型, 其他 68 个血清型沙门菌共计 224 株, 占 31 0%, 且对环丙沙星普遍敏感, 因此不列作研究对象 1 2 主要试剂冻干药敏板 ( 天津市金章科技发展公司 ), 萘啶酸浓度 0 5~512 0μg/mL, 共 11 个梯度 ; 环丙沙星浓度 0 015~16 000μg/mL, 共 11 个梯度 gyra 和 parc 扩增引物 ( 购自上海生工生物工程股份有限公司 ) 序列见表 1 [1,21] 表 1 gyra 和 parc 扩增用引物 基因 引物序列 (5' 3') 片段大小退火温度 (bp) ( ) gyra CTGAAGCCGGTACACCGTCG TCGGCCATCAGTTCGTGGGC parc CTATGCGATGTCAGAGCTGG TAACAGCAGCTCGGCGTATT

3 华南预防医学 2013 年 12 月第 39 卷第 6 期 SouthChinaJPrevMed,December2013,Vol39,No 6 29 PremixExTaq(Takara, 日本 ) BigDyeTermina torv3 1cyclesequencingkit(AppliedBiosystems, 美国 ) AutoSeqG 50TerminatorRemovalKit(GEHealth caretm, 美国 ) 高度去离子甲酰胺 (HighlyDeionized Formamide,HiDi)(AppliedBiosystems, 美国 ) 1 3 主要仪器设备 PCR 反应仪 (Eppendorf, 德国 ) 3100Genetic Analyzer(AppliedBiosystems, 德国 ) 37 恒温培养箱 (SHEL LAB, 美国 ) 1 4 实验方法 MIC 测定将目标菌落悬浮于 1 5mL 稀释液中, 调至 0 5 麦氏浓度, 使菌液的细菌含量达到 CFU/mL 吸取 10μL 上述菌悬液至 10mL 肉汤中, 使接种终浓度为 1~ CFU/mL 吸取 100μL 稀释后的菌液到 96 孔药敏板中, 孵育 17h 结果观察 : 在光亮比较强的环境下, 生长对照混浊表明细菌生长良好, 空白对照孔清澈透亮 ; 然后对比每种抗生素其不长菌的最底孔浓度, 即为 MIC 值, 结果按照 CLSI2011 年标准判断沙门菌对萘啶酸和环丙沙星的耐药, 见表 2 [22] 表 2 沙门菌对萘啶酸和环丙沙星的耐药判断标准 MIC(μg/mL) 抗生素 敏感 中敏 耐药 萘啶酸 环丙沙星 注 : 表示沙门菌对萘啶酸耐药标准仅敏感和耐药 QRDR 序列特征分析 煮沸法提取细菌 DNA 作为反应模版备用 ;PCR 扩增体系 25 0μL: PremixExTaq12 5μL ddh 2 O9 5μL 正向引物 1 0μL 反向引物 1 0μL DNA 模板 1 0μL;PCR 结果观察采用 QIAxcelAdvancedSystem 进行 DNA 片段分析 ; 测序反应体系 10μL:BigDye3 10 5μL 5 Sequencingbufer2 0μL ddh 2 O5 5μL 正向引物 1 0μL 纯化 PCR 产物 1 0μL; 纯化测序产物, 运用 3100GeneticAnalyzer 进行序列测定 ; 利用 DNAStar 软件包对序列文件进行分析 利用 MEGA 5 0 对编辑好的序列进行比对 参考序列来自 NC BI 的 GenBank 上收录的鼠伤寒沙门菌野生株 ( 序列号 :NC_003197) [23] 1 5 统计分析 采用卡方检验比较环丙沙星耐药株 中敏株 敏感株中 Ser83 或 Asp87 发生突变的比例 2 结果 2 1 沙门菌对萘啶酸及环丙沙星的耐药结果 共对 年收集的 500 株鼠伤寒沙门菌 鼠伤寒沙门菌变种 肠炎沙门菌和斯坦利沙门菌中的 496 株 ( 其中 4 株沙门菌冻存后不能复苏 ) 进行耐药性分析,75 4%(374/496) 的沙门菌对萘啶酸耐药, 其中 82 5%(207/251) 鼠伤寒沙门菌 84 0% (84/100) 鼠伤寒沙门菌变种 79 5%(70/88) 肠炎沙门菌及 22 8%(13/57) 斯坦利沙门菌对萘啶酸耐药 耐药株中,54 6% (113/207) 鼠伤寒沙门菌 64 3%(54/84) 鼠伤寒沙门菌变种 40 0%(28/70) 肠炎沙门菌和 53 8%(7/13) 斯坦利沙门菌的 MIC >512 0μg/mL 2010 年沙门菌对萘啶酸耐药率为 76 1% (156/205),2011 年为 74 9% (218/291); MIC>512 0 μg/ml 的菌株 2010 年占 34 1% (70/205),2011 年占 45 4%(132/291), 见表 3 5 4%(27/496) 的沙门菌对环丙沙星耐药, 其中 8 0%(20/251) 鼠伤寒沙门菌 5 0%(5/100) 鼠伤寒沙门菌变种 2 3%(2/88) 肠炎沙门菌对环丙沙星的耐药 对环丙沙星 MIC>16 000μg/mL 均为鼠伤寒沙门菌, 共有 6 株 2010 年沙门菌对环丙沙星耐药率为 3 9% (8/205),2011 年为 6 5% (19/291);MIC>16 000μg/mL 的菌株 2010 年占 2 4%(5/205),2011 年仅占 0 3%(1/291), 见表 QRDR 突变及其对鼠伤寒沙门菌耐氟喹诺酮的影响 71 7%(180/251) 鼠伤寒沙门菌的 QRDR 发生突变, 其中 86 1% (155/180) 发生 gyra 上突变, 37 2%(67/180) 发生 parc 上突变,23 3%(42/180) 发生双基因突变 gyra 的突变点集中在 Asp87 (58 5%,147/251) 和 Ser83(5 6%,14/251);parC 的突变点集中在 Phe60(18 7%,47/251), 其次为 Leu131(8 8%,22/251) 及 Leu132(8 8%,22/251), 见表 5 鼠伤寒沙门菌对环丙沙星耐药情况中,7 株 (35 0%,7/20) 耐药株 1 株 (3 1%,1/32) 中敏株 6 株 (3 0%,6/199) 敏感株发生 gyraser83 位点突变,3 组间 Ser83 位点突变率有统计学意义 ( 2 = 35 7,P<0 01) 15 株 (75 0%,15/20) 耐药株 21 株 (65 6%,21/32) 中敏株 111 株 (55 8%,111/199) 敏感株发生 gyraasp87 位点突变, 各组间突变率差异无统计学意义 ( 2 =3 5,P>0 05) 仅 2 0% (5/251) 的鼠伤寒沙门菌发生 parc Ser80 的突变, 且均为 Ser80Arg, 此突变的菌株均伴有 Ser83Phe 及 Asp87Asn 9 株 parcthr57 突变株, 均对萘啶酸耐药,77 8% (7/9) 的菌株 MIC 512μg/mL; 未发现 Thr57 突变株对环丙沙星耐药

4 30 华南预防医学 2013 年 12 月第 39 卷第 6 期 SouthChinaJPrevMed,December2013,Vol39,No 6 萘啶酸 (MIC, μg/ml) 表 株沙门菌对萘啶酸的耐药结果血清型年份鼠伤寒沙门菌鼠伤寒沙门菌变种肠炎沙门菌斯坦利沙门菌 菌株数 构成比 菌株数 构成比 菌株数 ( 株 ) (%) ( 株 ) (%) ( 株 ) 构成比 菌株数 构成比 菌株数 (%) ( 株 ) (%) ( 株 ) 构成比 菌株数 构成比 (%) ( 株 ) (%) > 合计 环丙沙星 (MIC, μg/ml) 表 株沙门菌对环丙沙星的耐药结果血清型年份鼠伤寒沙门菌鼠伤寒沙门菌变种肠炎沙门菌斯坦利沙门菌 菌株数 构成比 菌株数 构成比 ( 株 ) (%) ( 株 ) (%) 菌株数 构成比 菌株数 构成比 菌株数 构成比 ( 株 ) (%) ( 株 ) (%) ( 株 ) (%) 菌株数 构成比 ( 株 ) (%) > 合计 讨论 细菌耐药株的出现一直被认为与抗生素滥用有关 抗生素过度使用导致环境中抗生素大量积累, 增强了菌株的自然选择作用, 筛选出高度耐药株 [24] 国彬等在环境中检出环丙沙星等 FQ, 表明过度使用的抗生素随家禽家畜的粪便外排至环境 谭 [25] 蓉对人畜使用喹诺酮类抗生素后, 排泄物中残留该类抗生素的活性等特征进行分析, 结果表明抗生素排泄到环境中, 为环境中微生物创造选择压力, 加速诱导耐药株的产生 沙门菌对喹诺酮的耐药性与血清型有关 鼠伤寒沙门菌是全球普遍认为耐药较严重的沙门菌血清型 目前关于临床用 FQ 治疗沙门菌感染无效的病例中, 感染鼠伤寒沙门菌的报道较多 [1,13] DT104 ( 噬菌体分型 ) 是全球分布较广的一类鼠伤寒沙门菌, 以对抗生素多重耐药见称 [26-27],16% 的 DT104 对环丙沙星的敏感率下降, 并且有对环丙沙星耐药 鼠伤寒沙门菌变种是鼠伤寒沙门菌的一种血清型突变型, 为鞭毛抗原单相表达的血清型, 但其生化特征及分子遗传特征与鼠伤寒沙门菌相似 [28] 在本研究中, 鼠伤寒沙门菌变种对萘啶酸的耐药率与鼠伤

5 华南预防医学 2013 年 12 月第 39 卷第 6 期 SouthChinaJPrevMed,December2013,Vol39,No 6 31 表 株鼠伤寒沙门菌的 gyra 及 parc 基因突变结果 基因 突变位点 氨基酸菌株数比例突变基因替换 ( 株 ) (%) 位点 氨基酸 菌株数比例 替换 ( 株 ) (%) gyra 57 Asn Lys parc 57 Thr Ala Ser Cys Ala Pro Ser Phe Lys Ile Ser Tyr Lys Leu Asp Asn Phe Cys Asp Tyr Phe Ile Leu Val Phe Leu Arg Cys Lys Leu Arg Phe Lys Val Leu Pro Val Ile Leu Met Ser Arg Leu Val Glu Gly Glu Val Leu Ala Leu Ala Leu Val 寒沙门菌一致, 因此鼠伤寒沙门菌变种也是应该重点关注的血清型 肠炎沙门菌是全国沙门菌监测中分离率最高的血清型, 但多重耐药株在鼠伤寒沙门菌中的分布明显要比肠炎沙门菌高 [14] 然而肠炎沙门菌对喹诺酮耐药也在加重 [29] 国外研究显示沙门菌对喹诺酮的耐药机制与 QRDR 中 gyra 及 parc 上关键位点的基因突变有密切联系 [30] 本研究结果提示,gyrA 上 83 位点的 Ser Phe 可能是鼠伤寒沙门菌耐喹诺酮的重要突变类型 Asp87 是 gyra 上报道较多的另一重要突变位点, 但本研究未见其与耐药之间有明显关系 Phe60 是本研究中 parc 突变最多的位点, 突变导致的氨基酸替换依次为 Ile Leu Cys, 但本研究未观察到其与耐药之间有明显关系 此外本研究中 gyra 及 parc 的其他突变位点在国外报道中较少见 [9,31-33], 其对沙门菌耐药的作用有待进一步探究 参考文献 : [1] CASINI,BREUILJ,DARCHISJP,etal Fluoroquinolonere sistancelinkedtogyra,gyrb,andparcmutationsinsalmonela entericatyphimuriumisolatesinhumans[j].emerginfectdis, 2003,9(11): [3] 李明, 彭树道. 肠道外沙门菌对氟喹诺酮类药物治疗耐药性 [2] SJOLUND KARLSSONM,FOLSTERJP,PECICG,etal.E mergenceofplasmid mediatedquinoloneresistanceamongnon TyphiSalmonelaentericaisolatesfrom humansintheunited States[J].AntimicrobAgentsChemother,2009,53(5): 例分析 [J]. 中国民康医学,2006(22): [4] HOELERK,MORENOSA,WIEDMANNM.Animalcontactas asourceofhuman non typhoidalsalmonelosis[j]. VetRes, 2011,42(1):34. [5] MAJOWICZSE,MUSTOJ,SCALLANE,etal.Theglobalbur denofnontyphoidalsalmonelagastroenteritis[j].clininfect Dis,2010,50(6): [6] AL MASHHADANIM,HEWSONR,VIVANCOSR,etal.For eigntravelanddecreasedciprofloxacinsusceptibilityinsalmonela entericainfections[j].emerginfectdis,2011,17(1): [7] JEONGHS,KIM JA,SHINJH,etal.Prevalenceofplasmid mediatedquinoloneresistanceandmutationsinthegyraseandto poisomeraseivgenesinsalmonelaisolatedfrom12tertiary care hospitalsinkorea[j].microbdrugresist,2011,17(4): [8] ESCRIBANOI,RODRIGUEZJC,ROYOG.Mutationsinthe gyrageneinsalmonelaentericaclinicalisolateswithdecreased ciprofloxacinsusceptibility[j].intjantimicrobagents,2004,24 (3): [9] GRIGGSDJ,GENSBERGK,PIDDOCKLJ.MutationsingyrA geneofquinolone resistantsalmonelaserotypesisolatedfromhu mansandanimals[j].antimicrobagentschemother,1996,40 (4): [10] CRUMPJA,KRETSINGERK,GAYK,etal.Clinicalresponse andoutcomeofinfectionwithsalmonelaentericaserotypetyphi withdecreasedsusceptibilitytofluoroquinolones:aunitedstates foodnetmulticenterretrospectivecohortstudy[j].antimicroba gentschemother,2008,52(4): [11] KEHRENBERGC,DEJA,FRIEDERICHSS,etal.Molecular mechanismsofdecreasedsusceptibilitytofluoroquinolonesinavian Salmonelaserovarsandtheirmutantsselectedduringthedetermi nationofmutantpreventionconcentrations[j].jantimicrobche mother,2007,59(5): [12] KOERALAKD,THANH DP,THAPASD,etal.Highlyre sistantsalmonelaentericaserovartyphiwithanovelgyramuta tionraisesquestionsaboutthelong term eficacyofolderfluoro quinolonesfortreatingtyphoidfever[j].antimicrobagentsche mother,2012,56(5): [13] NAKAYA H,YASUHARA A,YOSHIMURA K,etal.Life threateninginfantilediarheafromfluoroquinolone resistantsalmo nelaentericatyphimurium withmutationsinbothgyraandparc [J].EmergInfectDis,2003,9(2): [14] RANL,WUS,GAOY,etal.Laboratory basedsurveilanceof nontyphoidalsalmonela infectionsin China[J]. Foodborne PathogDis,2011,8(8): [15] YUF,CHENQ,YUX,etal.Highprevalenceofplasmid medi atedquinoloneresistancedeterminantaac(6') Ib cramongstsal monelaentericaserotypetyphimurium isolatesfrom hospitalisedp aediatricpatientswithdiarhoeainchina[j].intjantimicroba gents,2011,37(2): [16] 柯碧霞, 邓小玲, 张丽华, 等. 广东省 2007 年度非伤寒沙门菌监测及病原学特征分析 [J]. 中华流行病学杂志,2008,29

6 32 华南预防医学 2013 年 12 月第 39 卷第 6 期 SouthChinaJPrevMed,December2013,Vol39,No 6 (12): [17] 柯碧霞, 邓小玲, 李柏生, 等. 广东省 年沙门菌监测 [J]. 中华流行病学杂志,2011,32(8): [18] 何冬梅, 柯碧霞, 邓小玲, 等.2010 年广东省沙门菌监测及其病原学特征分析 [J]. 中华预防医学杂志,2012,46(5): [19] STRAHILEVITZJ,JACOBYGA,HOOPERDC,etal.Plas mid mediatedquinoloneresistance:amultifacetedthreat[j]. ClinMicrobiolRev,2009,22(4): [20] MARIANSKJ,HIASAH.Mechanism ofquinoloneaction.a drug inducedstructuralperturbationofthedna precedesstrand cleavagebytopoisomeraseiv[j].jbiolchem,1997,272(14): [21] ROBISCEKA,STRAHILEVITZJ,JACOBYGA,etal.Fluoro quinolone modifyingenzyme:anewadaptationofacommonamin oglycosideacetyltransferase[j].natmed,2006,12(1): [22] CLSI.Performancestandardsforantimicrobialsusceptibilitytes ting:twenty firstinformationalsupplement[s].clsidocument M100 S21.Wayne,PA:ClinicalandLaboratoryStandardsInsti tute,2011. [23] MCCLELLANDM,SANDERSONKE,SPIETHJ,etal.Com pletegenomesequenceofsalmonelaentericaserovartyphimurium LT2[J].Nature,2001,413(6858): [24] 国彬, 姚丽贤, 何兆桓, 等. 高效液相色谱法测定畜禽废物中磺胺类 喹诺酮类抗生素 [J]. 环境化学,2011,30(12): [25] 谭蓉. 使用喹诺酮类抗生素人畜的排泄物对环境的污染 [J]. 环境与健康杂志,2009,26(12): [26] THRELFALLEJ.EpidemicSalmonelatyphimuriumDT104 a trulyinternationalmultiresistantclone[j].journalofantimicrobi alchemotherapy,2000,46(1):7-10. [27] MOLBAKK,BAGGESENDL,AARESTRUPFM,etal.An outbreakofmultidrug resistant,quinolone resistantsalmonelaen tericaserotypetyphimuriumdt104[j].nengljmed,1999,341 (19): [28] HOPKINSKL,KIRHNERM,GUERRAB,etal.Multiresistant Salmonelaentericaserovar4,5,12:i: ineurope:anewpandem icstrain?[j].eurosurveil,2010,15(22): [29] MOLBAKK,GERNER SMIDTP,WEGENERH C.Increasing quinoloneresistancein Salmonela enterica serotypeenteritidis [J].EmergInfectDis,2002,8(5): [30] TALUKDERKA,KHAJANCHIBK,ISLAMMA,etal.Fluo roquinoloneresistancelinkedtobothgyraandparcmutationsin thequinoloneresistance determiningregionofshigeladysenteriae type1[j].curmicrobiol,2006,52(2): [31] EAVESDJ,LIEBANAE,WOODWARDM J,etal.Detection ofgyramutationsinquinolone resistantsalmonelaentericabyde naturinghigh performanceliquidchromatography[j].jclinmi crobiol,2002,40(11): [32] HUANGTM,CHANGYF,CHANGCF.Detectionofmuta tionsinthegyrageneandclasiintegronfromquinolone resistant SalmonelaentericaserovarCholeraesuisisolatesinTaiwan[J]. VetMicrobiol,2004,100(3-4): [33] HAMIDIANM,TAJBAKHSHM,TOHIDPOUR,etal.Detection ofnovelgyramutationsinnalidixicacid resistantisolatesofsal monelaentericafrompatientswithdiarhoea[j].intjantimicrob Agents,2011,37(4): ( 收稿日期 : ) ( 本文编辑 : 袁华晖, 江金女 ) 欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍 ( 上接第 26 页 ) [10] 吴南卫, 李祥, 邓瑶, 等. 三亚市食物中毒中人感染副溶血性弧菌的毒力基因及耐药性研究 [J]. 现代预防医学,2012,39 (16): [11] 董雪, 李继耀, 王冰, 等. 沈阳地区 193 份腹泻患者副溶血弧菌感染情况分析 [J]. 中国卫生检验杂志,2009,19(4): [12] 王庆才. 细菌性肠道感染的临床表现及治疗 ( 下 )[J]. 中国社 区医师,2007,23(22):16. [13] 叶灵琼, 陈万义, 刘卫兵, 等. 副溶血弧菌耐药谱及其对头孢类药物抗性分析 [J]. 中国食品学报,2011,11(7): ( 收稿日期 : ) ( 本文编辑 : 刘惠玲 )

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