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1 中国循证儿科杂志 201 年 6 月第 9 卷第 3 期 181 论著 DOI:.3969/j.isn 重庆单中心 2009 至 2011 年急性呼吸道感染住院患儿 2 种甲型流感病毒检出情况及临床特征分析谢晓虹金玲彭才静王丽佳邓昱刘恩梅摘要目的了解重庆地区急性呼吸道感染住院患儿新型甲型 H1N1 流感病毒 (S OIVs) 与季节性甲型流感病毒 (IVA) 检出情况及临床特征方法收集 2009 年 6 月至 2011 年月重庆医科大学附属儿童医院呼吸科急性呼吸道感染住院患儿鼻咽抽吸物 (NPA), 采用荧光定量 PCR 技术检测 S OIVs 和季节性 IVA 基因组 RNA, 分析流行特点和临床特征, 并采用 Logistic 回归分析急性呼吸道感染进展为重症肺炎的危险因素结果共收集 NPA 标本 7 份, 经 PCR 检测 IVA 阳性份 (9.8%), 其中 1.%(1/7) 为 S OIVs,8.%(90/7) 为季节性 IVA 2 种病毒阳性病例男女比例年龄分布和平均住院天数差异均无统计学意义 (P>0.0) 1S OIVs 在 2009 年夏季高发 (11/1,73.3%), 季节性 IVA 在 2009 年夏季 (26/9,27.%) 20 年夏季 (22/9,23.2%) 和 2011 年春季 (2/9,26.3%) 检出率明显高于其他各季节 22 种病毒阳性患儿临床症状外周血 WBC 计数 CRP 水平相当,S OIVs 阳性患儿重症毛细支气管炎 1 例 (6.7%), 季节性 IVA 阳性患儿重症肺炎 1 例 (1.6%) 31 份 S OIVs 阳性标本中, 单纯 S OIVs 感染 3 份, 合并其他病毒感染 9 份, 痰培养阳性 7 份 90 份季节性 IVA 阳性标本中, 单纯季节性 IVA 感染 21 份, 合并其他病毒感染 2 份, 痰培养阳性份心脏基础疾病 (OR=13.60) 发生喘息 (OR=6.82) 和合并腺病毒感染 (OR=6.21) 为季节性 IVA 感染患儿进展为重症肺炎的危险因素结论重庆单中心急性呼吸道感染住院患儿 S OIVs 检出率低于季节性 IVA S OIVs 和季节性 IVA 感染患儿均以下呼吸道感染为主心脏基础疾病喘息症状和合并腺病毒感染有可能是季节性 IVA 感染患儿进展为重症肺炎的危险因素关键词新型甲型 H1N1 流感病毒 ; 季节性甲型流感病毒 ; 儿童 ; 急性呼吸道感染 Comparativeanalysis ofepidemiologicaland clinicalfeatures in hospitalized children with acuterespiratoryinfectioncausedbynovelswine origininfluenzavirusandseasonalinfluenza virusainchongqingfrom 2009to2011 XIEXiao hong,jin Ling,PENGCai jing,wangli jia,dengyu,liu En mei(children'shospitalofchongqingmedical University,Chongqing0001,China) CorespondingAuthor:LIUEn mei,e mail:emliu186@126.com AbstractObjectiveTodescribetheepidemiologicalandclinicalfeaturesinhospitalizedchildrenwithacuterespiratory infectioncausedbynovelswine origininfluenzavirusandseasonalinfluenzavirusainchongqing.methodsatotalof7 nasopharyngealaspirateswerecolectedinhospitalizedchildrenwithacuterespiratorytractinfectionenroledinthedepartmentof respiratorymedicineinchildren'shospitalofchongqingmedicaluniversityfrom June2009toMay2011.TheRNAofS OIVs/ seasonalivainthesamplewasexaminedusingrealtimepcr.clinicaldatawererecordedandanalyzed.resultsthepresenceof IVAwasdetectedin(9.8%)samplesof7cases,includingS OIVsin1(1.%)samplesandseasonalIVAintherest ofsamples(8.%).nodiferencesingender,ageandaverageinpatienthospitalstaywerefoundbetweenpatientswiths OIVs infectionandseasonalivainfection.1theprevalenceofs OIVswas73.3% (11/1)insummerof2009,andtheincidenceof seasonalivainfectionwashigherinthesummerof2009(26/9,27.%),summerof20(22/9,23.2%)andspringof2011 (2/9,26.3%).Theincidenceofbothtwovirusesinfectionwaslowerinautumnandwinterof Therateofsevere pneumoniainpatientswiths OIVsandseasonalIVAinfectionwas1/1(6.7%)and1/90(1.6%).Therewerenosignificant diferencesinclinicalmanifestation,whitecelcounts,crplevelbetweens OIVsandseasonalIVA positivecases.1of90 seasonalivapositivecaseswerewithseverepneumoniaand1of1s OIVspositivecaseswaswithseverebronchiolitis.3Five sampleswerefoundwithsingles OIVsinfectionamong1S OIVspositivecases,otherrespiratoryvirusesweredetectedin9 基金项目云南及周边省市区传染病病原谱流行规律研究 :2012zx00212 作者单位重庆医科大学附属儿童医院重庆,0001 通讯作者刘恩梅,E mail:emliu186@126.com

2 182 ChinJEvidBasedPediatr June201,Vol9,No3 samples.twentyonesampleswerefoundtobesingleseasonalivapostiveamong90seasonalivapositivecases,otherrespiratory virusesweredetectedin2samples. Multivariatelogisticregresionanalysisshowedthatunderlingheartmedicalcondition (OR=13.60),wheezing(OR=6.82)andco infectionwithadenovirus(or=6.21)weretheriskfactorsofdevelopingsevere pneumoniainpatientswithseasonalivainfection.conclusion ThestudyindicatedthatthedetectionrateofS OIVsinfection andseasonalivawas1.% and8.% respectively,inhospitalizedchildrenwithacuteairwayrespiratoryinfectioninchongqing. Childrenyoungerthan2yearsoldappearedtobesusceptibletobothvirusinfections.Diagnosisofnon severerespiratorytract infectionwasmainlypresentedinhospitalizedpatientswiths OIVsandIVAinfectionintherespiratorymedicinedivisionofour hospital.underlingheartmedicalcondition,symptomofwheezing,andco infectionwithadenovirusincreasetheriskofdeveloping severepneumoniainpatientswithseasonalivainfection. Keywords Swine origininfluenzaah1n1virus; SeasonalinfluenzavirusA; Children; Acuterespiratorytraction infection 流感病毒根据病毒基质蛋白分为甲 (A) 乙 (B) 丙 (C)3 型, 其中以甲型流感病毒 (IVA) 最常见 [1] 目前, IVA 根据病毒包膜表面的血凝素 (HA) 和神经氨酸酶 (NA) 抗原性, 分为 16 种 HA(H1~16) 和 9 种 NA(N1~9) [2] IVA 表现出周期性季节性和区域性的特点,1918 至 1919 年在欧洲大流行的西班牙流感病毒为 H1N1 亚型, 是现在人群中流行的所有 IVA 的起源病毒近半世纪以来, 季节性 IVA 以 H3N2 亚型为主, 也有 H1N1 亚型 2009 年墨西哥暴发人感染甲型 H1N1 流感病毒株携带猪流感病毒禽流感病毒和人流感病毒 3 种基因片断, 是发生基因重排的新型 IVA [3], 故被命名为新型甲型 H1N1 流感病毒 (S OIVs) 流感病毒是儿童呼吸道感染最常见的病毒病原之一, 为了解重庆地区儿童 S OIVs 和季节性 IVA 的流行情况及感染后临床特征, 本研究采用 RT PCR 方法检测 2 年重庆医科大学附属儿童医院 ( 我院 ) 急性呼吸道感染住院患儿鼻咽抽吸物 (NPA) 的流感病毒表达, 结合患儿临床资料分析相关特征, 以期提高对儿童 S OIVs 和季节性 IVA 感染的认识水平 1 方法 1.1 标本来源本研究标本来源于 2009 年 6 月至 2011 年月我院呼吸科住院的急性呼吸道感染患儿的 NPA 标本标本采集时间为患儿入院当天, 经一次性可控式吸痰管插入患儿鼻咽部负压吸取管 NPA 约 2mL,3 管标本常规送检我院临床检验中心进行痰培养肺炎支原体和常见病毒荧光检测 ;1 管标本用于本研究,NPA 标本采集后立即置于冰箱,h 内送至我院儿科研究所呼吸实验室, 在超净台内将 NPA 常规离心分装并按标本收集时间顺序编号, 于 -80 保存备用 1.2 诊断标准急性呼吸道感染诊断标准 [] : 包括急性上呼吸道感染 ( 鼻炎咽炎扁桃体炎喉炎 ) 和下呼吸道感染 ( 急性支气管炎毛细支气管炎支气管肺炎和大叶性肺炎 ), 根据病史临床表现 X 线胸片和实验室检查进行诊断重症肺炎诊断参照中华医学会儿科学分会呼吸学组 2007 年制定的儿童重症肺炎的诊断标准 [] 1.3 病原体检测 RNA 提取和总 RNA 转录使用 QIAmpMiniElute VirusSpinDNA/RNA 提取试剂盒 ( 德国 QIAGEN 公司 ) 提取患儿 NPA 标本总 RNA, 操作按试剂盒说明书进行使用 SuperScriptⅢ 试剂盒 ( 美国 Invitrogen 公司 ) 将提取总 RNA 逆转录为 cdna, 操作按试剂盒说明书进行 S OIVs 和季节性 IVA 检测 S OIVs 和 IVA 引物及探针由美国 Invitrogen 公司合成首先合成 IVA 引物及探针,Forward: AAAGCGAATTTCAGTGTGAT 3,Reverse: GAAGGCAATGGTGAGATTT 3 ; 探针 :FAM CCCTCTTCGGT GAAAGCCCT BHQ1 用 Takara 一步法荧光定量 PCR 试剂盒 ( 大连宝生物公司 ) 进行荧光定量 PCR 检测, 明确标本为 A 型而非 B 型和 C 型流感病毒 ( 但不能确定 HA 或 NA 亚型 ) 反应条件 :0 预变性 min;9 变性 s,9 退火 s, 延伸 20s, 共 0 个循环对 IVA 阳性标本再用 S OIVs 引物及探针通过荧光定量 PCR 方法检测是否为 S OIVs 阳性, 引物探针序列和方法学详见文献 [6] 将 S OIVs 阳性的 PCR 扩增产物送重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室, 用 ABI30DNA 测序仪进行 DNA 测序分析, 测序结果用 Chromas 软件进行比对其他常见呼吸道病毒检测对 S OIVs 或季节性 IVA 检测阳性的标本采用多重巢式 PCR 检测呼吸道合胞病毒 (RSV) 腺病毒 (AdV) 副流感病毒 (PIV1-) 冠状病毒 (CoV) 和人偏肺病毒 (hmpv), 具体方法见文献 [7,8], 采用 RT PCR 方法检测人博卡病毒 (HBoV), 具体方法见文献 [9] 1.3. 阳性结果复核从 2009 年起, 由本课题组成员每月对当月采集的标本统一检测, 至 2011 年月后由本文第一作者对所有阳性结果的标本再行 S OIVs 和季节性 IVA 复测 1. S OIVs 和 IVA 阳性病例资料截取根据 NPA 标本号对应的住院号查找病历, 截取如下资料用于本文分析 :1 一般情况 : 性别年龄出生史 ;2 临床资料 : 临床症状体温血常规 CRP 痰培养肺炎支原体检测结果和诊断 ;3 根据标本送检时间 :3~ 月定义为春季,6~8 月为夏季,9~11 月为秋季,12 月至次年 2 月为冬季 1. 统计学方法采用 SAS9.1 软件进行统计分析计

中国循证儿科杂志 201 年 6 月第 9 卷第 3 期 183 量资料以 x±s 珋表示, 显著性采用 studentt 或秩和检验 ; 计数资料以率表示, 率的显著性采用 χ 2 检验或 Fisher 精确概率法对 S OIVs 和季节性 IVA 的流行特征采用按年龄分析的方法, 分为 <6 月龄 ~2 岁 ~ 岁和 > 岁根据重症肺炎的诊断标准和临床经验, 选取男性年龄 <2 岁

3 中国循证儿科杂志 201 年 6 月第 9 卷第 3 期 183 量资料以 x±s 珋表示, 显著性采用 studentt 或秩和检验 ; 计数资料以率表示, 率的显著性采用 χ 2 检验或 Fisher 精确概率法对 S OIVs 和季节性 IVA 的流行特征采用按年龄分析的方法, 分为 <6 月龄 ~2 岁 ~ 岁和 > 岁根据重症肺炎的诊断标准和临床经验, 选取男性年龄 <2 岁早产喘息史心脏基础疾病发热喘息症状合并 PIV3 RSV AdV 和肺炎链球菌感染等指标作为急性呼吸道感染进展为重症肺炎的危险因素, 先行单因素分析, 对有统计学意义的变量再进行 Logistic 回归分析 P<0.0 为差异有统计学意义 2 结果 2.1 一般情况 NPA 标本共 7 份, 经 PCR 检测 IVA 阳性份 (9.8%), 男 7 例 (70.%), 女 31 例其中, 1/(1.3%) 份为 S OIVs 阳性,90/(8.7%) 份为季节性 IVA 阳性, 阳性标本复核结果与首次检测一致 S OIVs 和季节性 IVA 阳性病例一般情况见表 1, 在男女比例年龄分布和平均住院天数上差异均无统计学意义 (P> 0.0) 2 种病毒阳性检出率 2 岁以下的儿童高于 2 岁以上儿童 (S OIVs:73.3% vs27.6%,p=0.027; 季节性 IVA: 76.0% vs23.%,p<0.001) 表 1 新型甲型 H1N1 流感病毒和季节性流感病毒阳性病例一般情况 [n(%)] Tab1 Generalcharacteristicsofswine origininfluenzaah1n1virusandinfluenzavirusapositivecases[n(%)] Male Medianage/ Age months(range) <6months -2years -years >years Total Hospitalizeddays/x±s Solopositive Co infection S OIVs(n=1) 13(86.7) 9(1-63) (33.3) 6(0.0) 3(20.0) 1(6.7).9±0..3± ±0. SeasonalIVA(n=90) 61(67.8) 9(1-13) 38(2.2) 31(3.) 1(1.6) 7(7.8) 8.2±1..7±0. 8.9±1.9 P Notes S OIVs:swine origininfluenzaah1n1virus;iva:influenzavirusa 2.2 S OIVs 和季节性 IVA 季节分布如图 1 所示,S OIVs 在 2009 年夏季高发 (11/1,73.3%), 而季节性 IVA 在 2009 年夏季 (26/9,27.%) 20 年夏季 (22/9,23.2%) 和 2011 年春季 (2/9,26.3%) 检出率高于其他各季节 2 种病毒在 2009 年和 20 年秋冬季的检出率均低于其他各季节图年 6 月至 2011 年月不同季节新型甲型 H1N1 流感病毒和季节性流感病毒检出情况 Fig1 Detectionofswine origininfluenzaah1n1virusand influenzavirusaindiferentseasonsfrom June2009 tomay2011 Notes S OIVs:swine origininfluenzaah1n1virus;iva: influenzavirusa 2.3 S OIVs 和季节性 IVA 感染病例的临床特征 1 例 S OIVs 阳性患儿中, 咳嗽 1 例, 发热 9 例, 喘息例, 腹泻例, 呼吸困难 1 例 ; 体温平均峰值 (39.2±0.2) ; 发生腹泻例患儿年龄 (8.±2.3) 个月 1 例外周血 WBC>1 9 L -1,2 例 CRP 升高下呼吸道感染 1 例, 其中肺炎例, 毛细支气管炎 3 例 ( 包括重症毛细支气管炎 1 例 ), 支气管炎 1 例 ; 上呼吸道感染 1 例 90 例季节性 IVA 阳性患儿中, 咳嗽 8 例, 发热 63 例, 喘息 2 例, 腹泻 29 例, 呼吸困难 1 例 ; 体温平均峰值 (38 9±0.1) ; 发生腹泻 29 例患儿年龄 (.6±0.8) 个月 7 例外周血 WBC>1 9 L -1,9 例 CRP 8mg L -1 下呼吸道感染 82 例, 其中肺炎 70 例 ( 包括重症肺炎 1 例 ), 毛细支气管炎 7 例, 支气管炎例 ; 上呼吸道感染 8 例, 包括急性感染性喉炎 2 例 S OIVs 和季节性 IVA 阳性患儿临床症状外周血 WBC 计数 CRP 水平相当 2. 其他呼吸道病原学检测情况 1 份 S OIVs 阳性标本中, 单纯 S OIVs 感染 3 份 (20.0%); 合并其他病毒感染 9 份 (60.0%), 其中 PIV3 份,Adv2 份,RSV hmpv 和 PIV 各 1 份 ; 痰培养阳性 7 份 (6.7%), 其中肺炎链球菌份, 肺炎克雷伯菌肺炎亚种溶血葡萄球菌阴沟肠杆菌和流感嗜血杆菌各 1 份肺炎支原体 PCR 检测阳性份 (26 7%) 1 例重症毛细支气管炎患儿的病原学检查结果为 S OIVs+AdV 90 例季节性 IVA 阳性标本中, 单纯季节性 IVA 感染 21 份 (23.3%); 合并其他病毒感染 2 份 (6.7%), 其中 PIV318 份 RSV19 份 HBoV7 份 AdV9 份 PIV1 份 CoV 份,hMPV2 份 PIV2 和 PIV 各 1 份 ; 痰培养阳性 7 份 (2.2%), 其中肺炎链球菌 18 份, 流感嗜血杆菌 11 份, 大肠埃希菌 8 份, 肺炎克雷伯菌肺炎亚种 6 份, 卡他莫拉菌 3 份, 金黄色葡萄球菌 3 份, 副流感嗜血杆菌 2 份 1 例重症肺炎患儿标本中, 单纯季节性 IVA 感染 1 份 ; 合并其他病毒感染份 (71.%), 其中 RSV 份,PIV3 ADV 各份,

4 18 ChinJEvidBasedPediatr June201,Vol9,No3 HBoV PIV 和 PIV1 各 1 份 ; 痰培养阳性份, 其中肺炎链球菌 3 份, 流感嗜血杆菌大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌肺炎亚种各 2 份, 黏质沙雷菌和产气肠杆菌各 1 份 2. S OIVs 和季节性 IVA 重症肺炎危险因素 1 份 S OIVs 阳性病例中, 仅 1 例 (6.7%) 诊断为重症毛细支气管炎, 故未统计分析重症和非重症呼吸感染患儿相关数据 90 例季节性 IVA 阳性病例中,1 例诊断为重症肺炎, 如表 2 所示, 重症肺炎患儿合并心脏基础疾病发生喘息合并 AdV 阳性比例均显著高于非重症呼吸道感染患儿, 进一步行多因素 Logistic 回归分析, 结果显示心脏基础疾病喘息症状与合并 AdV 感染是季节性 IVA 患儿进展为重症肺炎的危险因素, 但 9%CI 范围很宽 ( 表 3) 表 2 季节性流感病毒阳性病例重症肺炎和非重症呼吸道感染患儿情况比较 [n(%)] Tab2 Comparisonsbetweenseverepneumoniaandnon severerespiratorytractinfectioncaseswithpositivedetectionof seasonalinfluenzavirusa[n(%)] Severepneumonia (n=1) Non severerti (n=76) Male Aged Pre Wheezing Heart Whee Solo Virus Bacterial PIV3 Fever <2y mature history disease zing IVA culture RSV AdV Sp (71.) (78.6) (1.3) (21.) (3.7) (6.3) (78.6) (7.1) (71.) (71.) (28.6) (3.7) (28.6) (21.) (67.1) (90.8) (.3) (1.8) (2.63) (7.9) (0.8) (26.3) (2.6) (8.7) (18.) (18.) (6.6) (19.7) P < Notes IVA:influenzavirusA;PIV:parainfluenzavirus;RSV:respiratorysyncytialvirus;AdV:adenovirus;Sp:Streptococuspneumonia;RTI: respiratorytractinfection 表 3 季节性流感病毒阳性患儿发展为重症肺炎危险因素的 Logistic 回归分析 Tab3 Multivariablelogisticregressionanalysisofsevere pneumoniadevelopmentwithpositivedetection of seasonalinfluenzavirusa Variables Estimate SE Waldχ 2 P OR(9%CI) Heart disease ( ) Wheezing ( ) AdV Notes AdV:adenovirus 3 讨论 ( ) 本研究对 2009 年 S OIVs 暴发后 2 年间我院急性呼吸道感染住院患儿的 7 份 NPA 标本进行 S OIVs 和季节性 IVA 检测, 结果显示 S OIVs 阳性率为 1.%, 低于季节性 IVA(8.%), 提示该时间段重庆地区儿童人群爆发 S OIVs 疫情可能性不大 S OIVs 和季节性 IVA 患儿年龄分布相似 :S OIVs 阳性标本中岁 1/1 份 (93.3%), 0~2 岁 11/1 份 (73.3%); 季节性 IVA 阳性标本中岁 83/90 份 (92.2%),0~2 岁 69/90 份 (76.7%), 提示重庆地区 < 岁儿童特别是 2 岁以下婴幼儿为 S OIVs 和季节性 IVA 高发人群, 与文献报道一致 [], 可能与婴幼儿呼吸系统发育不成熟, 特异性和非特异性免疫应答低下有关有研究报道 [11] S OIVs 高发人群包括学龄前期儿童, 但多伴有急性白血病肾病综合征等基础疾病, 这部分患儿未在本文纳入范围内关于 IVA 流行的季节性, 中国北方地区流行高峰为 12 月或次年 1 月, 南方地区则为和 12 月 [12] 本组资料显示, 重庆地区 S OIVs 流行高峰以 2009 年夏季为主, 仅有 1 个高峰, 加拿大在 2009 年有 2 个流行高峰 ( 春季和秋季 ) [13] ; 而季节性 IVA 流行高峰为夏春季, 以夏季最为活跃,S OIVs 和季节性 IVA 均于秋冬季逐渐回落这些流行特点与当季的气候变化人群免疫状态等有关本组资料显示 S OIVs 和季节性 IVA 引起儿童呼吸道感染住院的最常见诊断均为肺炎, 临床表现相似, 以咳嗽发热和喘息为主, 发热以中高热为主,1 岁以下婴儿易合并腹泻, 但咽痛肌痛和乏力等主观症状不明显, 与患儿年龄小不能表述有关 ;S OIVs 和季节性 IVA 感染患儿外周血 WBC>1 9 L -1 8 例 (7.6%),CRP 8mg L 例 (.%), 提示 S OIVs 和季节性 IVA 感染一般不引起外周血 WBC 计数和 CRP 升高, 但 S OIVs 重症肺炎患儿除外 [1] 本文纳入的 S OIVs 感染患儿未出现 2009 年甲型 H1N1 流感临床病例调查协作小组报道的嗜睡惊厥和意识障碍等神经系统症状 [1], 可能与病毒载量病情和样本量有关流感患者合并其他呼吸道病毒感染概率可高达 20% [1], 但儿童特别是婴幼儿的协同感染情况不完全清楚, 本组资料显示 S OIVs 和季节性 IVA 合并其他呼吸道病毒感染率分别为 80.0% 和 76.7%, 其中以 PIV3 检出率最高, 这可能与 PIV3 流行季节与 S OIVs 和季节性 IVA 有较大重叠有关流感病毒与细菌的关系也同样密切, 有研究发现 S OIVs 和季节性 IVA 感染患者易继发细菌 ( 如肺炎链球菌 ) 感染 [16], 本组例 IVA 患儿痰培养肺炎链球菌阳性者 22 例 (21.0%), 但其中仅有 3 例诊断为重症肺炎, 考虑痰培养阳性为呼吸道定植菌可能性较大本研究结果显示 S OIVs 非重症呼吸道感染患儿临床

5 中国循证儿科杂志 201 年 6 月第 9 卷第 3 期 18 表现痰肺炎链球菌的检出情况与季节性 IVA 患儿差异无统计学意义, 但文献报道 [17] S OIVs 还可能并发肺不张呼吸窘迫综合征塑形性支气管炎等呼吸系统危重症本研究中单纯 S OIVs 感染患儿平均住院天数最短,S OIVs 感染患儿中仅有 1 例为重症毛细支气管炎, 结合 S OIVs 的结构特点 :PB2 NS1 及 PB F2 蛋白位点具备低致病性蛋白结构 [18], 推测与高致病性的禽流感病毒相比,S OIVs 可能是低致病力病毒, 同时可以解释 S OIVs 重症病例数量不占优势的现象通过多因素 Logstic 回归分析, 本研究发现心脏基础疾病和发生喘息有可能是季节性 IVA 患儿进展为重症肺炎的危险因素, 提示有心脏基础疾病的患儿感染季节性 IVA 及感染后出现喘息症状, 需警惕病情进一步加重, 同时这类患儿在季节性 IVA 流行季节需根据情况尽早接种疫苗另一个可能危险因素为 AdV 阳性, 由于本研究未对 AdV 进行分型, 且 7 型 AdV 多导致重症肺炎, 所以不能确定这部分患儿病情是否有 7 型 AdV 的参与但本研究发现, 单纯季节性 IVA 感染患儿平均住院天数与单纯 S OIVs 感染患儿接近, 痰检出其他病原的季节性 IVA 感染患儿平均住院时间最长, 且季节性 IVA 重症肺炎患儿痰其他病原检出率有高于普通感染患儿的趋向, 一定程度上提示季节性 IVA 合并其他病原存在的现象可能是影响患儿病情和治疗的重要因素之一本研究的不足之处和局限性 :1 本研究未纳入因病情较重由急诊科直接收入 ICU, 或有呼吸道症状但可能因合并神经血液等其他系统疾病未收入呼吸科病房的患儿, 这部分数据的缺失低估了 2 种病毒所致的重症病例数及临床特征 ;2 季节性 IVA 测序未进行亚型分析, 不同亚型可能对病情有不同影响 ;3 本研究 S OIVs 和季节性 IVA 阳性病例样本量不足, 导致季节性 IVA 阳性病例进展为重症肺炎危险因素的 9%CI 很宽, 对危险因素结果信心不足参考文献犤 1 犦 NelsonMI 牞 HolmesEC.Theevolutionofepidemicinfluenza. NatRevGenet 牞 2007 牞 8 牗 3 牘牶犤 2 犦 FouchierRA 牞 MunsterV 牞 WalestenA 牞 etal.characterization ofanovelinfluenzaavirushemagglutininsubtype 牗 H16 牘 obtainedfromblack headedguls.jvirol 牞 200 牞 79 牗牘牶犤 3 犦 GartenRJ 牞 DavisCT 牞 RuselCA 牞 etal.antigenicand geneticcharacteristicsofswine origin2009a 牗 H1N1 牘 influenza virusescirculatinginhumans.science 牞 2009 牞 32 牗 937 牘牶犤犦胡亚美牞江载芳. 诸福棠实用儿科学. 第 7 版. 北京牶人民卫生出版社牞犤犦 TheSubspecialtyGroupofRespiratoryDiseases 牗中华医学会儿科学分会呼吸组牘牞 TheEditorialBoard 牞 ChineseJournalof Pediatrics.Guidelinesformanagementofchildhoodcommunity acquiredpneumonia 牗 fortrialimplementation 牘牗 Ⅰ 牘.ChinJ Pediatr 牗中华儿科杂志牘牞 2007 牞牗 2 牘牶犤 6 犦 CentersforDiseaseControlandPrevention 牶 CDCprotocolof real timert PCRforswineinfluenzaA 牗 H1N1 牘牞 28April 2009revision1 牗 30April2009 牘.20 犤 7 犦 CoirasMT 牞 Pérez BrenaP 牞 GarcíaML 牞 etal.simultaneous detectionofinfluenzaa 牞 B 牞 andcviruses 牞 respiratory syncytialvirus 牞 andadenovirusesinclinicalsamplesby multiplexreversetranscriptionnested PCRasay.JMedVirol 牞 2003 牞 69 牗 1 牘牶犤 8 犦 CoirasMT 牞 AguilarJC 牞 GarcíaML 牞 etal.simultaneous detectionoffourteenrespiratoryvirusesinclinicalspecimensby twomultiplexreversetranscriptionnested PCRasays.JMed Virol 牞 200 牞 72 牗 3 牘牶 8 9 犤 9 犦 DengY 牞 GuX 牞 ZhaoX 牞 etal.highviralloadofhuman bocaviruscorelateswithdurationofwheezinginchildrenwith severelowerrespiratorytractinfection.plosone 牞 2012 牞 7 牗 3 牘牶 e333 犤犦 StempelHE 牞 MartinET 牞 KuypersJ 牞 etal.multipleviral respiratorypathogensinchildrenwithbronchiolitis.acta Paediatr 牞 2009 牞 98 牗 1 牘牶犤 11 犦 ShaL 牗沙莉牘牞 ZhuRN 牞 CaoL 牞 etal.analysisofclinical manifestationsofhospitalizedchildreninfectedwithseasonal influenzaavirusand2009novelinfluenzaa 牗 H1N1 牘 virusin Beijing.ChinaJPediatr 牗中华儿科杂志牘牞 2011 牞 9 牗 7 牘牶 39 犤 12 犦 ZhangJ 牗张静牘牞 YangWZ 牞 GuoYJ 牞 etal.epidemiologic characteristicsofinfluenzainchina 牞 from2001to2003.chin JEpidemiol 牗中华流行病学杂志牘牞 200 牞 2 牗 6 牘牶 61 6 犤 13 犦 HelfertyM 牞 VachonJ 牞 TarasukJ 牞 etal.incidenceofhospital admisionsandsevereoutcomesduringthefirstandsecond wavesofpandemic 牗 H1N1 牘 2009.CMAJ 牞 20 牞 182 牗 18 牘牶犤 1 犦 2009InfluenzaA 牗 H1N1 牘 ClinicalCaseInvestigationGroup 牗 2009 甲型 H1N1 流感临床病例调查协作组牘.Multi center investigationofthehospitalizedchildrenwith2009influenzaa 牗 H1N1 牘 infection.chinjpediatr 牗中华儿科杂志牘牞 20 牞 8 牗牘牶犤 1 犦 EsperFP 牞 SpahlingerT 牞 ZhouL.Rateandinfluenceof respiratoryvirusco infectiononpandemic 牗 H1N1 牘 influenza disease.jinfect 牞 2011 牞 63 牗牘牶犤 16 犦 ShresthaS 牞 FoxmanB 牞 DawidS 牞 etal.timeanddose dependentriskofpneumococcalpneumoniafolowinginfluenza 牶 amodelforwithin hostinteractionbetweeninfluenzaand Streptococcuspneumoniae.JRSocInterface 牞 2013 牞牗 86 牘牶犤 17 犦 ZhengYJ 牗郑跃杰牘牞 DengJK 牞 LuZW 牞 etal.clinical analysisof8childrenwithplasticbronchitisasociatedwith influenzaavirus 牗 H1N1 牘 infection.chinjpediatr 牗中华儿科杂志牘牞 2012 牞 0 牗 7 牘牶 21 2 犤 18 犦 NeumannG 牞 NodaT 牞 KawaokaY.Emergenceandpandemic potentialofswine originh1n1influenzavirus.nature 牞 2009 牞 9 牗 729 牘牶 ( 收稿日期 : 修回日期 : ) ( 本文编辑 : 张萍 )

福建农业学报材料与方法毒株主要仪器主要试剂引物设计的培养反应条件的建立荧光定量检测临床样本结果与分析

福建农业学报材料与方法毒株主要仪器主要试剂引物设计的培养反应条件的建立荧光定量检测临床样本结果与分析福建农业学报林甦朱春华陈珍刘斌琼施少华江斌蔡国漳林羽黄瑜甦男硕士助理研究员主要从事病毒学和动物传染病学研究福建农业学报材料与方法毒株主要仪器主要试剂引物设计的培养反应条件的建立荧光定量检测临床样本结果与分析林甦等鸡亚型白血病病毒荧光定量检测方法的建立福建农业学报讨论林甦等鸡亚型白血病病毒荧光定量检测方法的建立责任编辑