2659 人类鼻病毒 (human rhinovirus,hrv) 属于小 RNA 病毒科,HRV 分为 3 个亚型 : 即 HRV-A,HRV-B 和 HRV-C 亚型研究显示, 约有 50% 的上呼吸道感染与 HRV 感染有关 [1] 在成人 HRV 主要引起普通感冒, 而在婴幼儿和儿童, 除

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矶廉
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1 2658 急性呼吸道感染患儿鼻病毒和其他病原检测及分析临床论著王琦吴建军摘要目的探讨湖南急性呼吸道感染患儿中鼻病毒及病原的流行病学分布特征方法收集急性呼吸道感染患儿份鼻咽抽吸物 (NPAs) 样本及病历资料, 用聚合酶链反应方法 (PCR) RT-PCR 巢式 PCR 方法检测 NPAs 中鼻病毒 (HRV) 及其他 11 种常见呼吸道病毒, 同时进行细菌培养分离及鉴定结果 (1)1 447 份样本中 HRV 检出率为 18.73%(271/1 447), 其他呼吸道病毒检出依次为呼吸道合胞病毒 (RSV)14.44% 副流感病毒(PIV3)10.85%, 博卡病毒 (HBoV1) 8.15% 腺病毒(ADV)7.12% 偏肺病毒(HMPV)3.59% 流感病毒 A B 型 (IFVA IFVB)1.94% 和 1.52% 副流感病毒 1 2 型 (PIV1 PIV2)0.90% 和 0.28% 冠状病毒 NL63 和 HKU 10.62% 和 0.55%;( 2)HRV 检出率在年龄性别分布差异无统计学意义 (P>0.05), 在 5 月份检出率最高 (38.24%);(3)HRV 检出阳性与混合感染有相关性 (P<0.00), 多因素回归分析发现 HRV 检出阳性与 RSV(OR=0.618,95% CI 0.405~0.944) HMPV(OR=0.224,95% CI 0.069~0.725) ADV (OR=2.044,95% CI 1.156~3.612) 感染密切相关结论 HRV 是引起小儿急性呼吸道感染的主要病毒病原体,HRV 与 RSV HMPV ADV 的混合感染可能是呼吸道感染致病的主要原因关键词呼吸道感染 ; 鼻病毒属 ; 疾病暴发流行 ; 混合感染 Detection and analysis of HRV and other pathogens in children with acute respiratory tract infections Wang Qi *, Wu Jianjun. * National Institute for Viral Disease Control and Prevention, China CDC, Beijing , China Corresponding author: Wu Jianjun, wjj2118@126.com Abstract Objective To investigate the epidemiological distribution characteristics of human rhinovirus(hrv) and other pathogens with respiratory tract infection in children. Methods Nasopharyngeal aspirate samples(npas) of cases and clinical data were collected, HRV and other 11 kinds of respiratory viruses were detected by PCR, rt-pcr and nest PCR and bacterias were cultured, separated and identificated with automated microbial analysis system. Results (1) HRV-positive rate was 18.73% (271/1 447), RSV(14.44%), PIV3(10.85%), HBOV1(8.15%), ADV(7.12%), HMPV(3.59%), IFVA IFVB (1.94%), IFVB(1.52%), PIV1(0.90%), NL63(0.62%) HKU1(0.55%), PIV2(0.28%). (2) Age and gender distribution of HRV detection rate had not been statistically significant (P>0.05), it was highest in May (38.24%). (3) HRV was frequently to be detected co-infection with other respiratory viruses (P<0.00), multi-factor analysis showed that HRV-positive was closely related to RSV (OR=0.618, 95% CI ), HMPV (OR=0.224, 95% CI ) and ADV (OR=2.044, 95% CI ). Conclusion HRV was a major respiratory tract infection pathogens in children, co-infection may be the main reason with RSV, HMPV and ADV for pathogenic respiratory infection. Key words Respiratory tract infections; Rhinovirus; Disease outbreaks; co-infection DOI: /cma.j.issn 作者单位 : 北京, 中国疾病预防控制中心病毒病研究所 ( 王琦 ); 甘肃中医学院公共卫生学院中医预防医学研究所 ( 吴建军 ) 通讯作者 : 吴建军, wjj2118@126.com

2 2659 人类鼻病毒 (human rhinovirus,hrv) 属于小 RNA 病毒科,HRV 分为 3 个亚型 : 即 HRV-A,HRV-B 和 HRV-C 亚型研究显示, 约有 50% 的上呼吸道感染与 HRV 感染有关 [1] 在成人 HRV 主要引起普通感冒, 而在婴幼儿和儿童, 除上呼吸道感染外, 还可引起支气管炎和支气管肺炎 [1-4], 有报道鼻病毒感染可能与哮喘慢性阻塞性肺疾病等有关 [5-6] HRV 是引起小儿急性呼吸道感染的首要原因, 本文就中国湖南地区鼻病毒及常见呼吸道病毒流行病学特征进行分析资料与方法一标本来源及临床资料的收集收集 2008 年 9 月至 2011 年 2 月在湖南省人民医院儿科治疗中心就诊的急性呼吸道感染患儿鼻咽分泌物 (nasopharyngeal aspirates,npas) 共例本研究纳入的所有病例全部为急性呼吸道感染患儿, 诊断标准参照实用儿科学 ( 第七版 ) 包括 : 急性上呼吸道感染急性支气管炎肺炎和支气管哮喘急性发作临床流行病学资料及病案资料采用标准化调查表收集所有纳入的病例在住院当日即采集标本, 留取 1 ml 标本进行细菌病原学培养, 其余加入 2 ml 病毒保存液, 标本采集处理后置 -80 冰箱冷冻保存标本采集过程取得患者家属知情同意, 研究通过湖南省人民医院伦理委员会审查二标本中病毒 DNA 或 RNA 检测将收集的标本在室温下解冻,4 下 r/min 高速离心 5 min, 取上清液, 弃沉淀采用 QIAamp 公司 DNA RNA 提取试剂盒 (QIAamp Viral RNA Mini Kit QIAamp Viral DNA Mini Kit : 德国 QIAGEN 公司 ) 进行核酸提取采用反转录 (RT) -PCR 方法检测鼻病毒 (human rhinoviruses,hrv) 呼吸道合胞病毒 (respiratory syncytial virus,rsv) 流感病毒 A 型 (influenza A virus,ifva) 流感病毒 B 型 (influenza B virus,ifvb) 副流感病毒 (parainfluenza virus type1,piv1-3) 人偏肺病毒 (human parainfluenza virus,hmpv) 冠状病毒 -NL63(new coronavirus,hcov-nl63) 人冠状病毒 -HKU1(Human coronavirus,hcov-hku1); 采用 PCR 方法检测腺病毒 (adenovirus,adv); 采用巢式 PCR 方法检测人博卡病毒 1(human boca virus1,hbov1) PCR 产物 15 g/l 凝胶电泳分析, 阳性产物均进行测序分析测序在北京天一测序公 [7] 司, 具体操作参考文献方法三细菌培养将 NPAs 样本接种到血琼脂平板中国蓝平板沙保弱平板, 置普通孵箱 h 培养, 对可疑菌落进行分离, 采用法国生物梅里埃公司 VITEK232 全自动微生物分析系统各种细菌鉴定卡进行细菌鉴定四统计学分析计量资料用均数 ± 标准差 ( x ± s ) 表示, 符合正态分布资料两组之间采用 t 检验, 计数资料相对数比较采用 χ 2 检验, 两变量之间关联性分析符合条件的 Pearson 积矩相关, 不符合条件的用 Spearman 秩相关分析或 Pearson 列联系数进行分析, 多因素分析采用双变量的 Logistic 回归分析所有数据采用 SPSS 13.0 进行统计分析, 以 0.05 作为检验水准结一呼吸道感染患儿的一般情况及病毒检出情况收集的例病例, 年龄最小为刚出生 1 岁, 最大 12 岁, 中位年龄为 20.3 个月龄 ; 其中女 513 例 (35.45%), 男 934 例 (64.54%); 住院天数最长 76 d, 最少 3 d, 住院天数中位数为 8 d; 病程最长 403 d, 最短 3 d; 出院后有随访记录 675 例, 其中未愈 5 例, 好转 115 例, 治愈 555 例 12 种病毒检出以 HRV 检出率最高, 见表 1 表 1 呼吸道感染患儿 NPAs 中 12 种常见呼吸道病毒检出情况病毒种类检出阳性数检出率 (%) 顺位果 HRV RSV PIV HBOV ADV HMPV IFVA IFVB PIV NL HKU PIV

3 2660 表 2 HRV 与其他呼吸道病毒同时检出的结果 ( 括号内为检出例数 ) 组别 HRV 阳性 (n=271) HRV 阴性 (n=1 176) 检出其他呼吸道病毒阳性的例数检出 1 种病毒同时检出 2 种病毒同时检出 3 种病毒同时检出 4 种病毒 RSV(23) PIV3(10) HMPV(2) HBoV(17) HBoV(8) HBoV(2) PIV3(17) ADV(7) RSV(1) ADV(13) RSV(5) HMPV(1) IFVA(1) NL63(1) NL63(1) HKU1(1) RSV(137) HBoV(40) RSV(8) RSV(2) PIV3(85) PIV3(35) PIV3(7) HBoV(2) ADV(55) RSV(33) HBoV(7) ADV(2) HBoV(42) ADV(22) ADV(4) PIV3(2) HMPV(39) HMPV(10) IFVB(2) NL63(1) IFVA(21) IFVA(6) NL63(1) IFVB(16) IFVB(4) PIV2(1) PIV1(9) PIV1(4) HKU1(6) NL63(3) NL63(2) PIV2(2) PIV2(1) HKU1(1) 二 HRV 检出阳性的年龄性别月份分布状况在份样本中,HRV 检出阳性共计 271 例, 其中男 186 例 (68.63%), 女 85 例 (31.37%), 阳性率与性别分布之间没有关联 ( 关联性分析 χ 2 = 2.41, 相关系数 r=0.041); 另外,HRV 检出阳性病例中位年龄个月, 阴性患儿中位年龄为个月,Wilcoxon 符号秩和检验两者之间没统计学意义 (P>0.05) HRV 阳性检出率在 5 月份达到高峰 (38.24%), 而在 12 月 1 月 2 月检出率最低 ( 图 1) 三 HRV 与其他呼吸道感染病原联合感染的分析 1. HRV 与病毒或细菌的联合感染 :271 例 HRV 检出阳性患儿中与其他病毒联合检出有 2 例, 同时检出 4 种病毒阳性,16 例有 3 种病毒同时检出阳性, 73 例患者同时检出 2 种病毒阳性,180 例只有 HRV 检出阳性 ( 表 2) 例 HRV 检出阴性患儿有 2 例同时检出 4 种病毒阳性,10 例患儿同时检出 3 种病毒阳性,80 例患儿同时检出 2 种病毒阳性,413 例患儿同时检出 1 种病毒阳性 HRV 检出阳性和阴性与混合感染病毒种数分布相关性检验有统计学意义 (χ 2 =24.96,P=0.00; 相关系数 r=0.174,p =0.00) 271 例 HRV 检出阳性患儿细菌检出 3 种细菌混合感染有 10 例, 检出 2 种细菌混合感染有 86 例,1 种细菌混合感染有 30 例 2.HRV 与病毒或细菌联合感染的多因素分析 : 以 HRV 阳性与否作为因变量, 病毒和细菌感染的种数作为协变量进行 Logistic 多因素回归分析, 发现病毒感染的种数 (OR=0.807,95% CI 0.653~ 0.997) 是 HRV 检出阳性的主要影响因素 ( 表 3) 表 3 HRV 检出阳性结果与病毒的多因素关系 95.0% CI 影响因素 B P 值 OR 值下限上限 RSV HMPV IFVA IFVB PIV PIV PIV NL HKU ADV HBOV 细菌种数 Constant 讨论 HRV 属小 RNA 病毒科, 是目前全世界人群中普遍流行的一个病原体, 而且是引起呼吸道感染的重要病因 [1] 本研究在我国湖南地区 14 岁以下呼吸道感染的患儿中鼻咽抽吸物鼻病毒检出率为 18.73%,

4 2661 可能说明 HRV 是呼吸道感染性疾病的主要病原文献报道鼻病毒在呼吸道感染患儿中阳性检出率为 15.6% [8] 36.2% [9] 9.3% [10] 17.33% [11] 7.7% [12], 不同地区 HRV 检出阳性率的不同可能与检出方法受检的人群不同有关, 所以 HRV 地区差异是否存在需要进一步研究证实我们的资料还发现呼吸道感染患儿 HRV 检出阳性在年龄性别分布差异无统计学意义 ; 呼吸道感染患儿 HRV 主要流行在春季和秋季,HRV 检出与季节有密切关系 (P<0.05), 与国内外报道的流行季节分布是基本一致的 [1-2,9-11] 由于本研究对没有被纳入的呼吸道感染患儿样本没有收集到, 同时对非呼吸道感染患儿 HRV 没有检测, 所以对本结果需要进一步研究证实 HRV 感染可引起的呼吸道疾病如感冒病程一般在 1 周左右, 但人们更加关注 HRV 与其他病原微生物的混合感染, 关于 HRV 与呼吸道常见病毒的混合感染研究较多 [13-15], 其中 HRV RSV 以及 PIV 的混合感染被认为是最主要的呼吸道疾病病因 [9-10] 关于呼吸道病毒之间甚至病毒与细菌之间协同作用机制研究较少, 但是大样本的资料不断地增加了这种混合感染协同作用的证据其实, 随着研究的深入, 病原微生物的协同感染机制不断被认识 [16-17], 病毒与宿主细胞表面受体结合是介导病毒复制传播的首要因素, 流感病毒需要刺突 ( 如血凝素 ) 与宿主细胞表面受体结合完成病毒吸附程序, 这种结合需要蛋白酶的辅助, 细菌是这种蛋白酶潜在的资源 [16], 同时病毒感染对呼吸道上皮的破坏可能增加细菌的黏附, 所以病毒与细菌的混合感染增加了病原体在呼吸道致病的风险本研究还发现 HRV 检出阳性与阴性比较, 呼吸道常见病毒混合感染的种数的构成比存在差别, HRV 检出阳性混合感染病毒的种数会较少, 其中检出阳性感染 1 种病毒比例占总数的 66.42%, 而检出 HRV 阴性感染 1 种病毒比例占总数的 81.78%, 是否这样的数据能够提示 HRV 更能引起其他呼吸道病毒的混合感染需要继续关注通过多因素分析本研究发现对于呼吸道感染,RSV HMPV ADV 的感染与 HRV 阳性检出密切相关结合上述资料我们能否认为,HRV 和 RSV HMPV ADV 混合感染在呼吸道中更容易发生从而造成呼吸系统疾病, 关于此联合感染结论需要进一步研究证实参考文献 [1] Costa LF, Queiróz DA, Lopes da Silveira H, et al. Human rhinovirus and disease severity in children[j]. Pediatrics, 2014, 133(2): e [2] Delgado-Corcoran C, Witte MK, Ampofo K, et al. The Impact of Human Rhinovirus Infection in Pediatric Patients Undergoing Heart Surgery[J]. Pediatr Cardiol, [3] Bender JM, Taylor CS, Cumpio J, et al. Infants 1-90 Days Old Hospitalized With Human Rhinovirus Infection[J]. Marlowe EM J Clin Lab Anal, [4] Broberg E, Niemela J, Lahti E, et al. Human rhinovirus C-associated severe pneumonia in a neonate[j]. J Clin Virol, 2011, 51: [5] Olenec JP, Kim WK, Lee WM, et al. Weekly monitoring of children with asthma for infections and illness during common cold seasons[j]. J Allergy Clin Immunol, 2010, 125(5): [6] Singh M, Lee SH, Porter P, et al. Human Rhinovirus Proteinase 2A Induces Th1 and Th2 Immunity in COPD[J]. J Allergy Clin Immunol, 2010, 125(6): e2. [7] Kim H, Kim K, Kim DW, et al. Identification of Recombinant Human Rhinovirus A and C in Circulating Strains from Upper and Lower Respiratory Infections[J]. PLoS One, 2013, 27, 8(6): e [8] 张志勇, 陈昕, 赵耀, 等. 重庆地区急性呼吸道感染儿童人鼻病毒检测分析 [J]. 实用儿科杂志, 2008, 23(10): [9] Xie ZD, Xiao Y, Liu CY, et al. Three years surveillance of viral etiology of acute lower respiratory tract infection in children from 2007 to 2010[J]. Zhonghua Er Ke Za Zhi, 2011, 49(10): [10] Feng JH, Lin GY, Lu XD, et al. Detection and clinical features of human rhinovirus in hospitalized children with acute respiratory tract infection in eastern areas of Guangdong province[j]. Zhonghua Liu Xing Bing Xue Za Zhi, 2012, 33(10): [11] Xiao NG, Zhang B, Duan ZJ, et al. Viral etiology of 1165 hospitalized children with acute lower respiratory tract infection[j]. Zhongguo Dang Dai Er Ke Za Zhi, 2012, 14(1):

5 2662 [12] 宋明辉, 赵林清, 钱渊, 等. 北京地区急性呼吸道感染儿童中人鼻病毒感染状况研究 [J]. 病毒学报, 2013, 29(2): [13] 肖霓光, 张兵, 段招军, 等例急性下呼吸道感染住院儿童的病毒病原学分析 [J]. 中国当代儿科杂志, 2012, 14(1): [14] Canducci F, Debiaggi M, Sampaolo M, et al. Two-Year Prospective Study of Single Infections and Co-Infections by Respiratory Syncytial Virus and Viruses Identified Recently in Infants With Acute Respiratory Disease[J]. Journal of Medical Virology, 2008, 80(4): [15] 高小倩, 金玉, 谢志萍, 等. 南京地区年度呼吸道感染患儿腺病毒的流行病学研究 [J]. 病毒学报, 2012, 28(5): [16] Mancini DA, Mendonça RM, Dias AL, et al. Co-infection between influenza virus and flagellated bacteria[j]. Rev Inst Med Trop Sao Paulo, 2005, 47(5): [17] Takano M, Ozaki K, Nitahara Y, et al. Streptococcus pneumoniae and Haemophilus influenzae at the initial stage of influenza[j]. Pediatrics International, 2009, 51(5): ( 收稿日期 : ) ( 本文编辑 : 戚红丹 ) 王琦, 吴建军. 急性呼吸道感染患儿鼻病毒和其他病原检测及分析 [J/CD]. 中华临床医师杂志 : 电子版,2014,8(14):

by mild (22.7%). Inhaled corticosteroids, systemic corticosteroids, and antibiotics were applied to 94.8% (292 cases), 74.7% (230 cases), and 90.9% (2

by mild (22.7%). Inhaled corticosteroids, systemic corticosteroids, and antibiotics were applied to 94.8% (292 cases), 74.7% (230 cases), and 90.9% (2 论著临床研究 doi: 0.7499/j.issn.008-8830.204.2.007 郑州市城区儿童哮喘的流行病学调查及发病相关因素分析赵坤宋桂华古华倩 2 刘爽 3 张岩郭彦荣 (. 河南中医学院第一附属医院儿科医院, 河南郑州 450000; 2. 杭州市余杭区

2659 人类鼻病毒 (human rhinovirus,hrv) 属于小 RNA 病毒科,HRV 分为 3 个亚型 : 即 HRV-A,HRV-B 和 HRV-C 亚型 研究显示, 约有 50% 的上呼吸道感染与 HRV 感染有关 [1] 在成人 HRV 主要引起普通感冒, 而在婴幼儿和儿童, 除

2659 人类鼻病毒 (human rhinovirus,hrv) 属于小 RNA 病毒科,HRV 分为 3 个亚型 : 即 HRV-A,HRV-B 和 HRV-C 亚型研究显示, 约有 50% 的上呼吸道感染与 HRV 感染有关 [1] 在成人 HRV 主要引起普通感冒, 而在婴幼儿和儿童, 除