482 暨南大学学报 ( 自然科学与医学版 ) 第 37 卷 cilin resistantstaphylococusaureus,mrsainorthopedicsinfection.methods:atotalof162staphylo cocusaureusisolateswerecolect

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1 第 37 卷第 6 期暨南大学学报 ( 自然科学与医学版 ) Vol.37 No 年 12 月 JournalofJinanUniversity(NaturalScience&MedicineEdition) Dec 重庆西南医院骨科感染金黄色葡萄球菌的分子分型及耐药性研究王轶男 1, 凤梓涵 2, 徐磊 2, 姜北 1, 黎庶 1, 傅景曙 3, 谢肇 3, 王海连 4 1, 胡晓梅 (1. 第三军医大学微生物学教研室重庆市微生物工程实验室, 重庆 ;2. 第三军医大学学员旅十五营, 重庆 ; 3. 第三军医大学西南医院骨科, 重庆 ;4. 清华大学玉泉医院心血管内科, 北京 ) [ 摘要 ] 目的 : 了解骨科感染中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA) 的检出率, 分析其分型特点和耐药特征, 为临床治疗和流行病学研究提供依据. 方法 : 从重庆西南医院骨科患者送检标本中分离出 162 株金黄色葡萄球菌, 以 meca femb 双重聚合酶链式反应 (PCR) 鉴定 MRSA, 应用葡萄球菌染色体 mec 耐药盒 (SCCmec) 对金黄色葡萄球菌 A 蛋白基因 (spa) 分型多位点序列分型 (MLST) 方法确定菌株序列型别, 并检测所有菌株对青霉素苯唑西林庆大霉素利福平及四环素等 13 种抗菌药物的耐药情况. 结果 :162 株金葡菌中共检出 34 株 MRSA(20.99%), 包括 SCCmecⅠ 型 16 株,SCCmecⅣ 型 17 株,SCCmecⅤ 型 1 株, 未检测到 SCCmecⅡ Ⅲ 型.spa 及 MLST 分型结果显示, 所有 MRSA 菌株共分为 14 个 spa 型,9 个 ST 型. 药敏试验显示菌株多重耐药现象较少, 未发现耐万古霉素的 MR SA. 结论 : 西南医院骨科 MRSA 主要为 SCCmecⅠ Ⅳ 型,ST59 MRSA Ⅳ t437 为主要流行克隆, 其对克林霉素红霉素耐药率较高. [ 关键词 ] 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 ; 抗生素 ; 骨科感染 ; 分子分型 ; 耐药谱 [ 中图分类号 ] R446.5 [ 文献标志码 ] A [ 文章编号 ] (2016) doi: /j.jdxb Moleculartypingandantimicrobialsusceptibilityofmethicilin resistant staphylococcusaureusisolatesfrom SouthwestHospitalofChongqing WANGYinan 1, FENGZihan 2, XULei 2, JIANGBei 1, LIShu 1, FUJingshu 3, XIEZhao 3, WANGHailian 4, HUXiaomei 1 (1.DepartmentofMicrobiology,LaboratoryofMicrobiologicalEngineering,ColegeofBasicMedicalSciences, thethirdmilitarymedicaluniversity,chongqing400038,china;2.fifteenthbatalion,cadetbrigade, thethirdmilitarymedicaluniversity,chongqing400038,china;3.departmentoforthopedics, SouthwestHospital,theThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400038,China; 4.DepartmentofCardiovascular,YuquanHospital,TsinghuaUniversity,Beijing100049,China) [Abstract] Aim:Todeterminethedetectionrate,moleculartypes,anddrugsusceptibilitiesofmethi [ 收稿日期 ] [ 基金项目 ] 国家自然科学基金项目 ( ; );2015 年大学生创新创业训练计划 ( ); 军队技术产品研究重点项目 (BWS13C014) [ 作者简介 ] 王轶男 (1990-), 女, 研究方向 : 感染与免疫,E mail:wangyinan0546@163.com 通信作者 : 胡晓梅, 女, 教授, 研究方向 : 感染与免疫,E mail:hxmay2008@163.com

2 482 暨南大学学报 ( 自然科学与医学版 ) 第 37 卷 cilin resistantstaphylococusaureus,mrsainorthopedicsinfection.methods:atotalof162staphylo cocusaureusisolateswerecolectedbetweenseptember2013andjuly2014fromtheorthopedicsdepart mentofsouthwesthospitalinchongqing.mrsastrainswereidentifiedusingthemeca fembduplexpcr method.theirmoleculartypesweredeterminedusingthestaphylococcalcasetechromosomalmec (SCCmec),staphylococcalproteinA(spa),multilocussequencetypingmethods(MLST).Theirdrug susceptibilitiesto13antibioticswerealsodetermined.results:thirty fourmrsafrom162staphylococ cusaureusisolateswerefound,including16sccmecⅠ,17sccmecⅣ andlsccmecⅤ MRSA.14spa types,9sequencetypes(st).drugsensitivetytestshowedthattherewerelesmulti drugresistant strains.conclusion:themrsastrainsintheorthopedicsdepartmentofthishospitalaremainlysccmec ⅠandSCCmecⅣ.ThepredominantcloneisST59 MRSA Ⅳ t437.thedrugresistanceratetoerythro mycinandclindamycinisveryhigh. [Keywords] methicilin resistantstaphylococusaureus; antibiotics; orthopedicsinfection; mo leculartyping; drugresistantprofile 金黄色葡萄球菌 (methicilin resiststaphylococus aureus,mrsa) 简称金葡菌, 是临床感染的重要致病菌, 在骨科感染病原菌中居首位 [1]. 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是金葡菌获得了具有高度多态性的外源性葡萄球菌染色体盒 SCCmec(staphylococcalcas setechromosomemec) 后形成的 [2]. 根据所携带的 SCCmec 不同, 可以将金葡菌分为不同的型别. SCCmecⅠ Ⅲ 型 MRSA 主要为医院获得型 MRSA (hospital acquiredmrsa,ha MRSA),Ⅳ Ⅴ 型主要为社区获得型 MRSA (community acquiredmrsa, CA MRSA) [3]. 由于两者对抗生素的敏感性及毒力存在差异 [4], 故检测 SCCmec 分型及耐药谱, 可明确菌株分型特点及流行株, 进一步结合耐药谱合理选用抗生素, 从而有效防控感染和耐药菌株的传播. 多位点序列分型 (multilocussequencetyping,mlst) 和 spa 均是基于公共数据库, 对 MRSA 菌株特定靶基因的序列分型, 有利于比较不同时间和空间的数据, 发现流行克隆在分子分型上的宏观变化趋势 [5]. 本研究以重庆西南医院骨科收集的金葡菌株为研究对象, 用 meca femb 双重聚合酶链式反应 (PCR) 法鉴定 MRSA, 并对其进行 SCCmec spa 及 MLST 分型. 在此基础上, 检测所有菌株耐药谱, 所得结果不仅可以丰富骨科金葡菌分子流行病学资料, 为骨科金葡菌感染的监控提供依据, 还可结合分子分型及耐药特征, 进一步探究其流行原因及耐药机制, 对金葡菌感染的防控具有重要意义. 1 材料与方法 1.1 材料 (1) 菌株来源 162 株金葡菌来源于重庆西南医院 2013 年 9 月至 2015 年 7 月骨科患者, 临床诊断包括骨髓炎术后感染等, 细菌分离自骨髓组织脓液及伤口分泌物等. 标准质控菌株 MRSANCTC 10442(SCCmecⅠ ) MRSA N315(SCCmecⅡ ) MRSA 85/2082 (SCCmecⅢ ) MRSA JCSC 4744 (SCCmecⅣ ) 和 MRSAWZ153(SCCmecⅤ ), 由温州医学院余方友教授惠赠. (2) 仪器与试剂仪器为 Bio RadPCR 仪凝胶成像仪及 BioFosun 微生物鉴定药敏分析仪. 药敏试验测试药物为苯唑西林青霉素庆大霉素万古霉素利福平四环素环丙沙星左氧氟沙星莫西沙星克林霉素红霉素复方新诺明及呋喃妥因. (3) 引物 MRSA 鉴定 SCCmec 分型 spa 分型和 MLST 分型引物参照文献 [6] 设计, 引物序列见表 1, 由华大基因合成. 1.2 方法 (1)MRSA 的鉴定过夜菌以溶葡萄球菌素消化后提取基因组, 作为 PCR 模板. 以 meca femb 双重 PCR 方法鉴定 MRSA [7],mecA femb 双重阳性者为 MRSA,femB 阳性而 meca 阴性者为甲氧西林敏感金葡菌 (methicilin sensitivestaphylococusaureus, MSSA).

3 第 6 期王轶男, 等 : 重庆西南医院骨科感染金黄色葡萄球菌的分子分型及耐药性研究 483 表 1 引物序列及扩增长度 Table1 Primersequencesandamplificationlength 方法基因片段引物名称引物序列片段大小 /bp MRSA 鉴定 meca MecA F 5 -GTAGAAATGACTGAACGTCCGATAA MecA R 5 -CCAATTCCACATTGTTTCGGTCTAA-3 femb FemB F 5 -TTACAGAGTTAACTGTTACC FemB R 5 -ATACAAATCCAGCACGCTCT-3 SCCmec 分型 cra2 B β 5 -ATTGCCTTGATAATAGCCTTCT α3 5 -TAAAGGCATCAATGCACAAACACT-3 crc crcf 5 -CGTCTATTACAAGATGTTAAGGATAAT crcr 5 -CCTTTATAGACTGGATTATTCAAAATAT-3 IS F1 5 -GCCACTCATAACATATGGAA R1 5 -CATCCGAGTGAAACCCAAA-3 MecA IS431 5RmecA 5 -TATACCAAACCCGACAACTAC R CGGCTACAGTGATAACATCC-3 spa 分型 spa spa F 5 -GACGATCCTTCGGTGAGC spa R 5 -CAGCAGTAGTGCCGTTTG-3 MLST 分型 arc arc F 5 -TTGATTCACCAGCGCGTATTGTC arc R 5 -AGGTATCTGCTTCAATCAGCG-3 aroe aroe F 5 -ATCGGAAATCCTATTTCACATTC aroe R 5 -GGTGTTGTATTAATAACGATATC-3 glpf glpf F 5 -CTAGGAACTGCAATCTTAATCC glpf R 5 -TGGTAAAATCGCATGTCCAATTC-3 gmk gmk F 5 -ATCGTTTTATCGGGACCATC gmk R 5 -TCATTAACTACAACGTAATCGTA-3 pta pta F 5 -GTTAAAATCGTATTACCTGAAGG pta R 5 -GACCCTTTTGTTGAAAAGCTTAA-3 tpi tpi F 5 -TCGTTCATTCTGAACGTCGTGAA tpi R 5 -TTTGCACCTTCTAACAATTGTAC-3 yqil yqil F 5 -CAGCATACAGGACACCTATTGGC yqil R 5 -CGTTGAGGAATCGATACTGGAAC-3 (2)SCCmec 分型 PCR 扩增 mec 复合物及 cr 复合物各基因组分, 以 MRSASCCmecⅠ Ⅴ 型标准株为阳性对照判断 SCCmec 型别, 未检测出特异条带或检出结果不符合标准的则为未定型别. (3)spa 分型 PCR 扩增 spa 片段, 产物送华大基因测序, 测序结果参照 spa 基因分型数据库 (ht tp://spaserver.ridom.de/) 已公布的重复序列, 确定型别 [8]. (4)MLST 分型 PCR 分别扩增金葡菌 7 个看家基因 (arc aroe glpf gmk pta tpi 及 yqil), 产物送华大基因测序, 测序结果与 MLST 数据库 (htp:// saureus.mlst.net/) 进行比对, 每个管家基因可得到相应的等位基因号 (alelenumber), 根据 7 个等位基因号的组合得到每株细菌的序列分型 (sequence type,st) [9]. (5) 药敏试验采用全自动微生物鉴定仪和药敏分析系统对细菌进行药敏分析, 按照美国临床和实验室标准协会 (ClinicalandLaboratoryStandards Institute,CLSI)2015 [10] 标准进行药敏判定, 并根据药敏结果计算耐药率. 1.3 统计学方法本组研究统计学分析采用 SPSS19 0 软件, 统计学方法为 Fisher 精确概率检验. 2 结果 2.1 MRSA 鉴定 162 株骨科金葡菌中,34 株为 MRSA, 检出率 20 98%( 图 1).

484 暨南大学学报 ( 自然科学与医学版 ) 第 37 卷 7 泳道为 MRSA, 其余为 MSSA 图 1 meca femb 双重 PCR 法鉴定 MRSA Fig.

2 SCCmecmoleculartyping 2.2 MRSA 菌株的基本临床学特征 34 株 MRSA 中 15 株源自创面 9 株源自组织 5 株源自关节液 3 株源自骨髓血液与脓液来源的各 1 株 ( 只有在患者出现菌血症或脓毒血症相关症状时才进行血液标本细菌培养 ). 临床诊断骨关节术后感染 15 例, 骨髓炎 10 例, 其余为创伤等因素所致的皮肤软组织感染.

spa 分型结果显示,34 株 MRSA 共分为 14 个 spa 基因型, 其中优势型别为 t437(50%,17/34) t441(8 82%,3/34) t030(5 88%,2/34) t4549 (5 88%,2/34).

4 484 暨南大学学报 ( 自然科学与医学版 ) 第 37 卷 7 泳道为 MRSA, 其余为 MSSA 图 1 meca femb 双重 PCR 法鉴定 MRSA Fig.1 meca fembpcrmethodtoidentifymrsa A: 质控菌株 SCCmec 分型凝胶电泳结果,M:DNA 标准,1~5 泳道分别对应 SCCmecⅠ ~Ⅴ 型 B:MRSA 菌株 SCCmec 分型凝胶电泳结果,1~2 泳道为 SCCmecⅠ 型,3~4 为 SCCmecⅣ 型,5 为 SCCmecⅤ 型. 图 2 SCCmec 分子分型 Fig.2 SCCmecmoleculartyping 2.2 MRSA 菌株的基本临床学特征 34 株 MRSA 中 15 株源自创面 9 株源自组织 5 株源自关节液 3 株源自骨髓血液与脓液来源的各 1 株 ( 只有在患者出现菌血症或脓毒血症相关症状时才进行血液标本细菌培养 ). 临床诊断骨关节术后感染 15 例, 骨髓炎 10 例, 其余为创伤等因素所致的皮肤软组织感染. 患者中 2 例患有 I 型糖尿病,1 例患有冠心病二尖瓣重度关闭不全, 其余患者无特殊基础疾病. 2.3 MRSA 分子分型 34 株 MRSA 中,HA MRSA 占 47 06% (16/ 34),CA MRSA 占 52 94%(18/34), 其中 SCCmecⅠ 型 16 株,SCCmecⅣ 型 17 株,SCCmecⅤ 型 1 株, 未检测到 SCCmecⅡ Ⅲ 型 ( 图 2). spa 分型结果显示,34 株 MRSA 共分为 14 个 spa 基因型, 其中优势型别为 t437(50%,17/34) t441(8 82%,3/34) t030(5 88%,2/34) t4549 (5 88%,2/34). MLST 分型结果显示,34 株 MRSA 共分为 9 个 ST 型, 其中优势型别为 ST59(61 76%,21/34) ST630(14 71%,5/34) 及 ST338(5 88%,2/34). 此外, 发现新 ST 型 1 株, 等位基因谱为药敏试验分析 MSSA 对青霉素红霉素及克林霉素耐药率较高, 分别为 89 06% 41 41% 及 39 06%. 此外, 本次研究中还发现 13 株对苯唑西林耐药的 MSSA.MR SA 对 β 内酰胺类抗生素青霉素苯唑西林耐药率分别为 100% 和 91 18%. 其中 HA MRSA 对苯唑西林全部耐药,CA MRSA 对苯唑西林耐药率为 83 33%. 此外,MRSA 对红霉素克林霉素及四环素有较高耐药率, 分别为 91 18% 70 59% 及 50%; 对利福平, 庆大霉素呋喃妥因复方新诺明及喹诺酮类耐药率较低, 未发现对万古霉素耐药的金葡菌 ( 表 2).MLST 分型的优势型别 ST59, 较其他型别对红霉素 (100% vs 76 92%;P<0 05) 和克林霉素 (95 23% vs 46 15%;P<0 01) 耐药率显著增高. spa 分型的优势型别 t437, 较其他型别对克林霉素耐药率 (94 11% vs 56 25%;P<0 05) 显著增高 ( 图 3). 表株金葡菌的药敏临床鉴定结果 Table2 AntimicrobialsucsceptibilitytestofclinicalS.aureus % MRSA 抗生素抗生素 MSSA HA MRSA CA MRSA 大类类别 (n=128) (n=16) (n=18) β 内酰胺类苯唑西林青霉素氨基糖苷类庆大霉素糖肽类万古霉素利福霉素类利福平四环素类四环素喹诺酮类环丙沙星左氧氟沙星莫西沙星林可胺类克林霉素大环内酯类红霉素磺胺类复方新诺明合成抗菌药呋喃妥因

5 第 6 期王轶男, 等 : 重庆西南医院骨科感染金黄色葡萄球菌的分子分型及耐药性研究 485 t437 型与其他型别对抗生素的耐药率比较 ST59 型与其他型别对抗生素的耐药率比较 HA MRSA 与 CA MRSA 对抗生素的耐药率比较. 统计学方法为 Fisher 精确概率检验图 3 药敏试验结果比较 Fig.3 Antimicrobialsusceptibilitytestresults 3 讨论骨科患者多为开放性伤口, 较易发生感染, 而金葡菌是骨科感染最常见的病原菌之一, 因此对于骨科金葡菌感染, 特别是 MRSA 的流行病学研究, 具有重要防控意义. 既往的金葡菌流行病学研究样本常来自不同科室, 鉴于不同地区不同科室不同疾病的金葡菌感染特点有很大不同, 因此, 这种研究具有一定局限性. 本研究选取单一科室的样本, 具有更好的针对性及临床指导意义, 本组结果也反映出这种特异性, 表现出与既往流行病学调查结果的诸多不同之处, 下面具体讨论. 本研究 162 株西南医院骨科感染金葡菌中, MRSA 检出率为 20 99%, 与之前课题组测得重庆地区 MRSA 检出率为 45% 存在差异 [11]. 其原因可能是文献 [11] 中的菌株虽都源于重庆, 但存在科室差异. 骨科患者感染多源自外伤伤口或术后切口, 送检标本中的金葡菌主要来源于患者皮肤表面定植或者自然环境, 故 MRSA 检出率常低于其他科室 [12]. 此外, 其他地区骨科 MRSA 分离率 32 91% ~ 50 27% [13], 本组较低的分离率可能与近年来 MR SA 在重庆的整体流行状况和该医院抗生素的规范使用有关. meca 一直以来被认为是判定 MRSA 的金标准 [14], 但本研究中发现的 3 株 SCCmecⅣ 型 MRSA 并未表现出苯唑西林耐药. 通常在没有药物选择压力下,mec 基因簇的 meci 编码的阻遏蛋白 MecI 结合在 meca 的启动区, 使 meca 的表达处于抑制状态. 而抗生素可作为诱导剂, 与细胞表面的 MecR1 蛋白结合, 使其发生自身裂解而发挥转肽酶活性, 分解结合在 meca 启动子上的阻遏蛋白 MecI [15]. 由于苯唑西林本身与 MecR1 亲和力较低 [14], 可能研究中发现的菌株, 其 MecR1 蛋白并未分解 MecI, 使 meca 的表达处于抑制状态. 如使用头孢西丁等易结合 MecR1 的抗生素, 可能会启动其耐药基因的表达 [14], 影响治疗效果. 此外, 位于 mecr1 下游的 mecr2 编码的 MecR2 蛋白, 可降低阻遏蛋白 MecI 的稳定性, 使其更易被降解, 当 mecr2 发生点突变时, 携带 meca 的金葡菌也不能表现出与其对应的耐药性 [16]. 值得注意的是, 本研究还发现 13 株未携带 meca 基因, 但对苯唑西林耐药的金葡菌, 推测其原因可能为, 菌株内编码 β 内酰胺酶的基因表达升高 [17], 或其携带新型耐药基因 mecc [18]. 深入探究其原因, 有助于增进对金葡菌耐药机制的理解, 并据此合理选择抗生素, 控制耐药基因在菌株间的传播. 在我国 MRSA 主要流行型为 SCCmecⅡ Ⅲ 型, 其常携带多种耐药基因, 表现为多重耐药性 [19-20]. 而本研究中并未发现 SCCmecⅡ Ⅲ 型, 取而代之的是 SCCmecⅠ Ⅳ 型, 分别占到了 47 06%(16/34) 50%(17/34). 在抗生素选择压力较弱时,SCCmec Ⅱ Ⅲ 型 MRSA 的环境适应力不如携带较少耐药基因的 SCCmecⅠ Ⅳ 型 [21-22], 这可能是本研究中未检测出 SCCmecⅡ Ⅲ 型的原因. MRSA 和 MSSA 对临床常用的克林霉素红霉素及四环素等, 均表现出不同程度耐药. 二者对红霉素的耐药率最高, 分别为 91 8% 41 41%.HA MR SA 和 CA MRSA 所携带的耐药元件不同, 对药物的

6 486 暨南大学学报 ( 自然科学与医学版 ) 第 37 卷敏感性也应存在一定差异 [23], 但本研究并未显示出该差异, 可能因菌株多为 SCCmecⅠ 和 Ⅳ 型, 其 SCCmec 元件所含耐药基因并无差异. MLST 和 spa 分型显示,ST59 MRSA Ⅳ t437 为优势型, 其特征耐药谱为红霉素克林霉素及四环素.ST59 MRSA Ⅳ t437 作为主要的 CA MRSA, 曾在美国和台湾地区流行 [5]. 此前重庆地区报道的优势型为 ST239 MRSA Ⅲ t037(28 82%,17/59), ST59 MRSA Ⅳ t437 仅作为偶发株传播到重庆地区 [11]. 本研究发现 ST59 MRSA Ⅳ t437(32 35%, 11/34) 已成为西南医院骨科主要流行克隆, 可能因为 ST59 MRSA Ⅳ t437 所携带的 Ⅳ 型元件的长度相对较短, 移动更为轻便, 故相对容易在不同遗传背景的流行菌株间转移. 此外,spa 分型的优势型别 t437 及 MLST 分型的优势型别 ST59 抗生素耐药率显著高于其他型别. 在本课题组对 t030 型替代 t037 型的机制中发现, 前者拥有特殊的耐药表型和生存竞争优势 [24], 而 t437 型是否存在生存竞争等方面优势, 还有待研究. ST59 型 MRSA 源于 CC59 克隆群, 有报道显示其耐药谱为红霉素克林霉素 [25], 本研究发现其对红霉素及克林霉素均有较高的耐药率, 且明显高于其他型别, 与上述报道结果一致. 克林霉素与红霉素均为临床常用的抗生素, 对两者的耐药率较高, 可能是 ST59 MRSA Ⅳ t437 成为优势型别的原因之一. 但优势型别的 spa MLST 分型特征与抗生素耐药特征关联的原因, 及影响其流行的其他因素, 还有待进一步研究. 综上所述, 西南医院骨科 MRSA 对克林霉素红霉素耐药率较高,ST59 MRSA Ⅳ t437 为优势克隆, 应结合其分子分型特点和耐药谱, 深入探究其流行机制, 并合理选用抗生素, 防范耐药株更广泛的传播. [ 参考文献 ] [1] 陈希莲, 朱德全. 骨科住院患者感染病原菌分布及耐药性分析 [J]. 中华医院感染学杂志,2008,18(4): CHENXL,ZHUDQ.Pathogensdistributionofhospital infectionandtheirdrugresistanceindepartmentofortho pedics[j].chinesejournalofnosocomiology,2008,18 (4): [2] Internationalworkinggroupontheclasificationofstaphy lococcalcasete chromosome elements(iwg SCC). Clasificationofstaphylococcalcasetechromosomemec (SCCmec):guidelinesforreportingnovelSCCmecele ments[j]. Antimicrob AgentsChemother,2009,53 (12): [3] ISOBEH,TAKANOT,NISHIYAMAA,etal.Evolu tionandvirulenceofpanton Valentineleukocidin positive ST30methicilin resistantstaphylococusaureusin the past30yearsinjapan[j].biomedres,2012,33(2): [4] ROSENSTEINNE,STOCKERSA,POPOXICT,etal. AntimicrobialresistanceofNeiseriameningitidisinthe UnitedStates,1997.TheActiveBacterialCoreSurveil lance(abcs)team[j].clininfectdis,2000,30(1): [5] 杨延成, 程航, 周人杰, 等.SCCmec 遗传元件及其在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子分型中的应用 [J]. 遗传,2015,37(5): YANGYC,CHENGH,ZHOURJ,etal.Applicationof thesccmecelementinthemoleculartypingofmethicil lin resistantstaphylococcusaureus[j].heredity,2015, 37(5): [6] 程航, 曾方银, 胡启文, 等. 广州地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子分型及耐药性分析 [J]. 第三军医大学学报,2013,35(8): CHENGH,ZENGFY,HUQW,etal.Moleculartyp ingandantimicrobialsusceptibilityofmethicilinresistant Staphylococcusaureusisolated from Guangzhou,China [J].JournalsofThirdMilitaryMedicalUniversity,2013, 35(8): [7] KOBAYASHIN,WUH,KOJIMAK,etal.Detectionof meca,fema,andfembgenesinclinicalstrainsofstaphy locociusingpolymerasechainreaction[j].epidemiol Infect,1994,113(2): [8] RUPPITSCHW,INDRAA,STOGERA,etal.Clasif yingspatypesincomplexesimprovesinterpretationoftyp ingresultsformethicilin resistantstaphylococusaureus [J].JClinMicrobiol,2006,44(7): [9] ENRIGHTM C,DAYNP,DAVIESCE,etal.Multi locussequencetypingforcharacterizationofmethicilin resistantandmethicilin susceptibleclonesofstaphylococ cusaureus[j].jclinmicrobiol,2000,38(3): [10] ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute.Performance standardsforantimicrobialsusceptibilitytesting:twenty fifthinformationalsupplement.clsidocumentm100 S25

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目录一 2014 年全院 5533 株细菌分布及前 10 位主要细菌耐药性结果二按照标本类型 ( 或感染部位 ) 进行的病原菌构成及药敏分析 1 呼吸道标本病原菌构成及药敏分析 2 尿液标本病原菌构成及药敏分析 3 血流骨髓标本病原菌构成及药敏分析 4 皮肤软组织标本病原菌构成及药敏分析 5

目录一 2014 年全院 5533 株细菌分布及前 10 位主要细菌耐药性结果二按照标本类型 ( 或感染部位 ) 进行的病原菌构成及药敏分析 1 呼吸道标本病原菌构成及药敏分析 2 尿液标本病原菌构成及药敏分析 3 血流骨髓标本病原菌构成及药敏分析 4 皮肤软组织标本病原菌构成及药敏分析 5 2014 年安医大一附院病原菌分布及药物敏感性分析编者 : 沈继录编审 : 王中新徐元宏 1 目录一 2014 年全院 5533 株细菌分布及前 10 位主要细菌耐药性结果二按照标本类型 ( 或感染部位 ) 进行的病原菌构成及药敏分析 1 呼吸道标本病原菌构成及药敏分析 2 尿液标本病原菌构成及药敏分析 3 血流骨髓标本病原菌构成及药敏分析 4 皮肤软组织标本病原菌构成及药敏分析 5 伤口引流液标本病原菌构成及药敏分析