药物分析与检验 GC 测定盐酸克林霉素棕榈酸酯中的 9 种残留溶剂 王建 1, 王红波 2, 王知坚 1* (1. 浙江省食品药品检验所, 杭州 310004;2. 浙江工业大学, 杭州 310014) 摘要 : 目的建立毛细管气相色谱法测定盐酸克林霉素棕榈酸酯中的残留溶剂 方法乙醇 丙酮 乙腈 二氯甲烷 乙酸乙酯和三氯甲烷测定采用顶空进样法, 色谱柱为 DB-624(6% 氰丙基苯基 -94% 二甲基聚硅氧烷固定液 ) 石英毛细管柱, 柱温为 60, 维持 10 min, 以 20 min 1 升至 180, 维持 2 min, 二甲基甲酰胺 - 水 (1 4) 为溶剂 ; 甲苯 吡啶和二甲基甲酰胺测定采用直接进样法, 色谱柱为 DB-624(6% 氰丙基苯基 -94% 二甲基聚硅氧烷固定液 ) 石英毛细管柱, 柱温为 90, 二氯甲烷为溶剂 结果被测物均能得到很好的分离, 峰面积与浓度呈良好的线性关系, 精密度和回收率良好 结论该法可用于盐酸克林霉素棕榈酸酯原料药中残留溶剂的检测 关键词 : 盐酸克林霉素棕榈酸酯 ; 气相毛细管色谱法 ; 残留溶剂 ; 顶空进样 ; 直接进样中图分类号 :R927.11 文献标志码 :B 文章编号 :1007-7693(2012)09-0829-05 Determination of Nine Residual Organic Solvent in Clindamycin Palmitate Hydrochloride by GC WANG Jian 1, WANG Hongbo 2, WANG Zhijian 1* (1.Zhejiang Institute for Drug Control, Hangzhou 310004, China; 2.Zhejiang University of Technology, Hangzhou 310014, China) ABSTRACT: OBJECTIVE To establish a method of capillary gas chromatography for the determination of residual solvents in clindamycin palmitate hydrochloride. METHODS Ethanol, acetone, acetonitrile, dichloromethane, acetic ether and trichlormethane were separated on DB-624 capillary column through head-space sampling mode. The column temperature was maintained at 60 for 10 min, then was raised to 180 at the rate of 20 min 1 and maintained at 180 for 2 min. The sample was dissolved in dimethylformamide-water (1 4). Pyridine, toluene and dimethylformamide were separated on DB-624 capillary column through direct sampling mode. The column temperature was 90. The sample was dissolved in dichloromethane. RESULTS The measured solvents were separated completely. The calibration curve of each solvent showed a good linear relationship with precision and accuracy. CONCLUSION The established method is simple, reliable, which can be used for determination of residual solvents in clindamycin palmitate hydrochloride. KEY WORDS: clindamycin palmitate hydrochloride; GC; residual organic solvents; head-space sampling; direct sampling 盐酸克林霉素棕榈酸酯是克林霉素的衍生物, 收载于国家食品药品监督管理局新药转正标准第 44 册, 但质量标准中未列残留溶剂检查项 由于其合成过程中使用了乙醇 丙酮 乙腈 二氯甲烷 乙酸乙酯 三氯甲烷 甲苯 吡啶 二甲基甲酰胺, 根据新药审批和中国药典的要求, 必须对其残留溶剂进行控制 笔者根据中国药典 2010 年版二部附录残留溶剂检查法和人用药品注册技术要求国际协调会议 ( ICH ) 的要求 [1-5], 建立了毛细管气相色谱法测定盐酸克林霉素棕榈酸酯中 9 种残留溶剂的方法, 低沸点的乙醇 丙酮 乙腈 二氯甲烷 乙酸乙酯和三氯甲烷采用顶空进样法 测定, 高沸点的甲苯 吡啶和二甲基甲酰胺采用直接进样法进行测定, 并考察全国 3 家制药公司产品中的残留溶剂, 为国家药品标准增订盐酸克林霉素棕榈酸酯残留溶剂检查项目提供科学依据 1 仪器与试药 Agilent 6890 气相色谱仪 ( 美国 Agilent 公司 ), Agilent 7694E 顶空进样器,Agilent 7683E 自动进样器 乙醇 乙酸乙酯 丙酮 甲苯 吡啶 二氯甲烷 三氯甲烷均为分析纯 ( 杭州化学试剂有限公司 ); 二甲基甲酰胺 乙腈为色谱纯 (Merck 公司 ) 样品来源 : 浙江海翔药业股份有限公司, 批号 :20100101,20100102,20100103; 西南合成 基金项目 : 国家药典委员会国家药品标准提高研究项目 ( 国药典化发 [2010]84 号 ) 作者简介 : 王建, 男, 博士, 主任药师 Tel: (0571)86459458 E-mail: wangjianhw2000@yahoo.com.cn 主任药师 Tel: (0571)86459427 E-mail: ksss888@126.com * 通信作者 : 王知坚, 男, 副 中国现代应用药学 2012 年 9 月第 29 卷第 9 期 Chin JMAP, 2012 September, Vol.29 No.9 829
制药股份有限公司, 批号 :201005006,201005007, 201006001; 海南海神同洲制药有限公司, 批号 : 1011061,1012221,1101191 2 方法与结果 2.1 乙醇 丙酮 乙腈 二氯甲烷 乙酸乙酯和 三氯甲烷的测定 取本品约 0.4 g, 精密称定, 置顶空瓶中, 精 密加入二甲基甲酰胺 - 水 (1 4) 溶液 5 ml 使溶解, 密封瓶口, 作为供试品溶液 ; 精密称取乙醇 乙酸乙酯 丙酮 乙腈 二氯甲烷和三氯甲烷适量, 加二甲基甲酰胺 - 水 (1 4) 溶液制成每 1 ml 分别约含 0.2,0.2,0.2,0.03,0.05 和 0.005 mg 的混合溶液, 精密量取 5 ml 置顶空瓶中, 密封瓶口, 作为对照品溶液 按残留溶剂测定法 ( 中国药典 2010 年版二部附录 Ⅷ P 第二法 ) 测定, 以 DB-624 毛细管柱 (30 m 0.32 mm, 固定液为 6% 氰丙基苯基 -94% 二甲基聚硅氧烷 ) 为色谱柱, 柱温为 60 维持 10 min, 以 20 min 1 升至 180, 维持 2 min; 检测器为氢火焰离子化检测器 (FID), 检测器温度为 250 ; 进样口温度为 200 ; 分流比 :1 1 顶空进样, 顶空瓶平衡温度为 90, 平衡时间为 30 min, 进样体积为 1.0 ml 取对照品溶液顶空进样, 各成分峰之间的分离度应符合要求 分别精密量取供试品溶液与对照品溶液顶空进样, 记录色谱图, 按外标法以峰面积计算 含乙醇 乙酸乙酯 丙酮 乙腈 二氯甲烷和三氯甲烷分别不得过 0.3%,0.3%,0.3%,0.041%,0.06% 和 0.006% 2.2 吡啶 甲苯和二甲基甲酰胺的测定精密称取本品适量, 加二氯甲烷制成每 1 ml 中约含 50 mg 的溶液, 作为供试品溶液 ; 精密称取甲苯 吡啶和二甲基甲酰胺适量, 加二氯甲烷制成每 1 ml 中分别约含 45,10 和 45 µg 的溶液, 作为对照品溶液 按残留溶剂测定法 ( 中国药典 2010 年版二部附录 Ⅷ P 第三法 ) 测定, 以 DB-624 毛细管柱 (30 m 0.32 mm, 固定液为 6% 氰丙基苯基 -94% 二甲基聚硅氧烷 ) 为色谱柱 ; 柱温为 90 ; 检测器为氢火焰离子化检测器 (FID), 检测器温度为 250 ; 进样口温度为 200 ; 分流比 :20 1 取对照品溶液 1.0 µl 进样, 各成分峰之间的分离度应符合要求 分别精密量取供试品溶液与对照品溶液各 1.0 µl, 进样, 记录色谱图, 按外标法以峰面积计算 含甲苯 吡啶和二甲基甲酰胺分别 不得过 0.089%,0.02% 和 0.088% 2.3 系统适用性实验按 2.1 项下方法, 取对照品溶液进样, 记录色谱图, 结果见图 1 乙醇 丙酮 乙腈 二氯甲烷 乙酸乙酯和三氯甲烷的理论板数分别为 93 383,93 814,94 020,97 586,80 9661 和 66 962, 各峰间的分离度分别为 9.26,6.08,3.59,26.45, 5.77 按 2.2 项下方法, 取对照品溶液进样, 记录色谱图, 结果见图 2 吡啶 甲苯和二甲基甲酰胺的理论板数分别为 72 394,74 028 和 77 752, 各峰间的分离度分别为 1.77,24.13 图 1 GC 色谱图 A 对照品 ;B 样品 ;C 空白对照 ;1 乙醇 ;2 丙酮 ;3 乙腈 ;4 二氯甲烷 ;5 乙酸乙酯 ;6 三氯甲烷 ;7 甲苯 ;8 二甲基甲酰胺 Fig 1 GC chromatogram A reference substance; B sample; C blank; 1 ethanol; 2 acetone; 3 acetonitrile; 4 dichloromethane; 5 acetic ether; 6 trichlormethane; 7 toluene; 8 dimethylformamide 图 2 GC 色谱图 A 对照品 ;B 样品 ;C 空白对照 ;1 吡啶 ;2 甲苯 ;3 二甲基甲酰胺 Fig 2 GC chromatogram A reference substance; B sample; C blank; 1 pyridine; 2 toluene; 3 dimethylformamide 2.4 线性关系分别精密称取乙醇 丙酮 乙腈 二氯甲烷 乙酸乙酯和三氯甲烷各适量, 加二甲基甲酰胺 - 水 (1 4) 溶液溶解并稀释, 制成系列浓度的对照品溶液, 分别精密量取 5 ml, 置顶空取样瓶, 按 2.1 项下方法测定 分别精密称取吡啶 甲苯和二甲基甲酰胺各适量, 加二氯甲烷溶解并稀释, 制成一系列浓度的对照品溶液, 按 2.2 项下方法测定 结果见表 1, 色谱峰面积 (A) 与浓度 (C) 呈良好的线性关系 830 Chin JMAP, 2012 September, Vol.29 No.9 中国现代应用药学 2012 年 9 月第 29 卷第 9 期
表 1 线性关系试验结果 Tab 1 Linearity and its range 溶剂 线性范围 / mg ml -1 回归方程 r 乙醇 0.04~0.22 A= 0.508+0.158C 0.999 1 丙酮 0.04~0.22 A= 1.050+0.403C 0.999 3 乙腈 0.004~0.019 A= 0.053+0.226C 0.997 3 二氯甲烷 0.006~0.029 A=0.053+0.623C 0.999 8 乙酸乙酯 0.04~0.22 A= 1.267+0.736C 0.999 7 三氯甲烷 0.001~0.006 A=0.023+0.329C 0.997 6 吡啶 0.002~0.012 A=0.479+0.761C 0.999 4 甲苯 0.01~0.05 A=0.730+1.062C 0.999 6 二甲基甲酰胺 0.01~0.05 A= 0.109+0.279C 0.999 8 2.5 精密度试验 取乙醇 丙酮 乙腈 二氯甲烷 乙酸乙酯 和三氯甲烷的对照品混合溶液 6 份, 按 2.1 项 下方法进样, 取吡啶 甲苯和二甲基甲酰胺对照品溶液 6 份, 按 2.2 项下方法进样 结果乙醇 丙酮 乙腈 二氯甲烷 乙酸乙酯 三氯甲烷 吡啶 甲苯和二甲基甲酰胺测定的 RSD 分别为 2.5%,3.8%,3.2%,2.4%,1.5%,3.0%,3.5%, 3.1%,2.3% (n=6) 2.6 回收率试验精密称取已测定残留溶剂含量的样品 ( 批号 : 1011061)9 份, 分别精密加入乙醇 丙酮 乙腈 二氯甲烷 乙酸乙酯 三氯甲烷 吡啶 甲苯和二甲基甲酰胺对照品溶液适量, 按 2.1 2.2 项下方法测定 设计 3 个不同的浓度进行测定,9 个测定结果, 计算回收率 结果见表 2 平均回收率均在 95%~105% 之内, 符合残留溶剂测定准确度的要求 表 2 回收率实验结果 Tab 2 Results of recovery 溶剂乙醇丙酮乙腈二氯甲烷乙酸乙酯三氯甲烷吡啶甲苯二甲基甲酰胺 1 回收量 /mg 1.025 2 0.934 2 0.153 2 0.201 8 0.114 0 0.019 5 0.190 1 0.729 8 0.741 2 回收率 /% 100.5 98.2 100.4 94.7 94.8 101.6 98.6 99.4 102.2 2 回收量 /mg 1.020 2 0.945 6 0.153 8 0.206 5 0.114 5 0.019 4 0.183 9 0.729 1 0.757 1 回收率 /% 100.0 99.4 100.8 96.9 95.2 101.0 95.4 99.3 104.4 3 回收量 /mg 1.072 1 0.960 8 0.157 2 0.202 9 0.113 8 0.017 7 0.190 7 0.759 2 0.756 4 回收率 /% 105.1 101.0 103.0 95.2 94.6 92.2 98.9 103.4 104.3 4 回收量 /mg 1.269 3 1.290 7 0.150 9 0.272 3 1.031 6 0.031 5 0.313 8 1.032 0 0.807 6 回收率 /% 100.4 96.6 97.0 93.5 91.7 91.3 100.9 107.0 108.2 5 回收量 /mg 1.278 1 1.269 3 0.147 5 0.268 2 1.082 3 0.030 9 0.309 1 0.958 7 0.759 1 回收率 /% 101.1 95.0 94.8 92.1 96.2 89.6 99.4 99.4 101.7 6 7 8 9 回收量 /mg 1.245 2 1.242 6 0.144 7 0.262 7 1.090 1 0.031 8 0.311 3 0.971 3 0.771 0 回收率 /% 98.5 93.0 93.0 90.2 96.9 92.2 100.1 100.7 103.3 加入量 /mg 1.562 1 1.2920 0.2365 0.355 2 1.461 0 0.040 5 0.342 7 1.152 5 1.013 4 回收量 /mg 1.679 3 1.2830 0.2367 0.347 7 1.456 6 0.043 9 0.324 5 1.074 1 0.996 2 回收率 /% 107.5 99.3 100.0 97.9 99.7 108.4 94.7 93.2 98.3 加入量 /mg 1.562 1 1.2920 0.2365 0.355 2 1.461 0 0.040 5 0.342 7 1.152 5 1.013 4 回收量 /mg 1.607 4 1.3230 0.2337 0.358 0 1.462 5 0.038 0 0.344 1 1.175 6 1.049 9 回收率 /% 102.9 102.4 98.8 100.8 100.1 93.8 100.4 102.0 103.6 加入量 /mg 1.562 1 1.292 0 0.236 5 0.355 2 1.461 0 0.040 5 0.342 7 1.152 5 1.013 4 回收量 /mg 1.540 2 1.280 4 0.241 9 0.354 1 1.484 4 0.038 6 0.354 0 1.206 7 1.083 3 回收率 /% 98.6 99.1 102.3 99.7 101.6 95.3 103.3 104.7 106.9 平均回收率 /% 101.6 98.2 98.9 95.7 96.8 96.2 99.1 101.0 103.6 RSD/% 3.0 3.0 3.4 3.5 3.2 6.2 3.1 3.9 2.8 中国现代应用药学 2012 年 9 月第 29 卷第 9 期 Chin JMAP, 2012 September, Vol.29 No.9 831
2.7 检测限 通过逐级降低浓度, 进样测定, 确定检测限, 信噪比为 3 1, 结果乙醇 丙酮 乙腈 二氯甲 烷 乙酸乙酯 三氯甲烷 吡啶 甲苯和二甲基甲酰胺测定的最低检测浓度分别为 11,1.1,0.9, 1.5,1.1,1.2,1.2,1.3 和 5.2 μg ml 1 2.8 样品测定 取 3 家制药公司各 3 批样品, 按 2.1 和 2.2 项下方法测定,9 种有机溶剂残留量测定结果见表 3 结果表明,2 家制药公司产品中均检出有一定量的丙酮残留,1 家制药公司产品中检出有一定量的乙醇和乙酸乙酯残留 本法能有效地检出和控制盐酸克林霉素棕榈酸酯中的残留溶剂 表 3 样品测定结果 Tab 3 Results of sample analysis 批号 乙醇 /% 丙酮 /% 乙腈 /% 二氯甲烷 /% 乙酸乙酯 /% 三氯甲烷 /% 吡啶 /% 甲苯 /% 二甲基甲酰胺 /% 201005006 0.025 0.012 未检出 未检出 0.185 未检出 未检出 未检出 未检出 201005007 0.024 0.005 未检出 未检出 0.148 未检出 未检出 未检出 未检出 201006001 0.027 0.006 未检出 未检出 0.151 未检出 未检出 未检出 未检出 20100101 未检出 0.066 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 20100102 未检出 0.048 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 20100103 未检出 0.002 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 1011061 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 1012221 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 1101191 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 3 讨论 3.1 进样方式的选择采用顶空进样法测定残留溶剂, 对测定干扰小, 对仪器污染少, 因此低沸点的乙醇 丙酮 乙腈 二氯甲烷 乙酸乙酯和三氯甲烷测定首选顶空进样 二甲基甲酰胺的沸点高, 不宜采用顶空进样法测定 ; 甲苯极性小, 以二甲基甲酰胺 - 水 (1 4) 为溶剂顶空进样法测定, 重复性不好 ; 吡啶采用顶空进样法测定, 顶空进样器有残留, 峰形不佳 ; 因此甲苯 吡啶和二甲基甲酰胺采用直接进样法进行测定 3.2 色谱柱的选择试验了 5% 苯基 -95% 甲基聚硅氧烷柱 (HP-5) 柱, 结果丙酮和乙腈峰分离不完全, 且二甲基甲酰胺峰形不佳 ; 试验了聚乙二醇 -20M(HP-INNOWAX) 柱, 结果乙醇和二氯甲烷峰分离不完全 ; 用 6% 氰丙基苯基 -94% 二甲基聚硅氧烷固定液柱, 各成分峰之间的分离度符合要求, 二甲基甲酰胺峰形最佳 因此色谱柱选择 6% 氰丙基苯基 -94% 二甲基聚硅氧烷固定液 (DB-624) 柱 3.3 柱温的选择吡啶 甲苯和二甲基甲酰胺测定通过试验系列柱温 (80,90,100 ), 结果表明, 柱温为 100 时, 甲苯和吡啶峰的分离度为 1.43, 柱温为 90 时, 甲苯和吡啶峰的分离度为 1.77, 吡啶 甲苯和二甲基甲酰胺保留时间适宜, 因此选择柱温为 90 3.4 溶解介质的选择二氯甲烷和三氯甲烷水溶性差, 不能直接用水作为溶剂溶解, 且盐酸克林霉素棕榈酸酯用水溶解后, 呈胶状溶液, 因此选择用二甲基甲酰胺溶解, 并加入一定比例的水, 以增加检测的灵敏度 经过试验, 用二甲基甲酰胺 - 水 (1 4) 溶液为溶剂, 可将盐酸克林霉素棕榈酸酯 二氯甲烷和三氯甲烷完全溶解, 无基质效应, 回收率好, 因此选择二甲基甲酰胺 - 水 (1 4) 溶液作为溶剂 3.5 供试品溶液的选择三氯甲烷检测的灵敏度低, 因此增大供试品的取样量, 经过试验, 供试品的取样量为 0.4 g 较为适宜, 盐酸克林霉素棕榈酸酯可完全溶解, 三氯甲烷检测的灵敏度符合要求 REFERENCES [1] Ch.P(2010)VolⅡ( 中国药典 2010 年版. 二部 ) [S]. 2010: Appendix Ⅷ P. [2] ZOU L C, BAI G, XU L P, et al. Determination of residual solvents in clindamycin phosphate by head space GC method 832 Chin JMAP, 2012 September, Vol.29 No.9 中国现代应用药学 2012 年 9 月第 29 卷第 9 期
[J]. Anti Infect Pharm( 抗感染药学 ), 2009, 6(3): 162. [3] LI H T, HUANG N T. Detemination of residual organic solvent in cefonicid sodium by capillary gas chromatography [J]. Her Med( 医药导报 ), 2007, 26(8): 946. [4] YING G H, DENG Y, LI Y L, et al. Determination of residual organic solvents in amoxicillin sodium for injection by GC [J]. Chin J Mod Appl Pharm( 中国现代应用药学 ), 2010, 27(8): 738-741. [5] RUAN H, CHEN Y. Determination of residual solvents in azlocillin sodium by GC [J]. Chin J Mod Appl Pharm( 中国现 代应用药学 ), 2011, 28(11): 1047-1050. 收稿日期 :2012-01-16 HPLC 测定 4- 邻甲苯磺酰氧基苯并噁唑酮原料药的含量及有关物质 马云龙, 唐莉, 梁泰刚, 李青山 * ( 山西医科大学药学院, 太原 030001) 摘要 : 目的 建立高效液相色谱法测定非甾体抗炎镇痛化合物 4- 邻甲苯磺酰氧基苯并噁唑酮 (MBB) 原料药的含量及有关 物质 方法 采用 Odyssil C 18 (150 mm 4.6 mm,5 µm) 色谱柱, 以甲醇 - 水 (65 35) 为流动相, 流速为 0.8 ml min 1, 检测 波长为 273 nm, 柱温为 25 结果 供试品中主成分峰与各杂质峰分离良好,MBB 的线性范围为 1~150 µg ml 1, 回归 方程为 A=3 959.8C 2 831(r=0.999 7), 平均回收率为 99.2%(RSD=1.1%,n=9), 检测限为 1 ng 结论 本方法简便 准确 专属性好, 可用于 MBB 原料药的含量测定及有关物质检查 关键词 :4- 邻甲苯磺酰氧基苯并噁唑酮 ; 含量测定 ; 有关物质 ; 高效液相色谱法 中图分类号 :R917.101 文献标志码 :B 文章编号 :1007-7693(2012)09-0833-03 Determination of Crude Drug 4-O-Methyl-benzenesulfonyl-2(3H)-benzoxazolone and Its Related Substances by HPLC MA Yunlong, TANG Li, LIANG Taigang, LI Qingshan * (School of Pharmaceutical Science, Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, China) ABSTRACT: OBJECTIVE To establish an HPLC method for determining the content of non-steroidal anti-inflammatory compound 4-O-methyl-benzenesulfonyl-2(3H)-benzoxazolone(MBB) and its related substances. METHODS The chromatographic separation was performed on an Odyssil C 18 column (150 mm 4.6 mm, 5 µm). The mobile phase was consisted of methanol-water(65 35) at a flow rate of 0.8 ml min 1. The detection wavelength was set at 273 nm and the column temperature was 25. RESULTS MBB was completely separated from impurities. The linear range was 1 150 µg ml 1, and the regression equation was A=3 959.8C 283 1(r=0.999 7). The average recovery was 99.2%(RSD=1.1%, n=9). The limit of detection was 1 ng. CONCLUSION The analytical method was simple, accurate and selective for the analysis of crude drug MBB and its related substances. KEY WORDS: 4-O-methyl-benzenesulfonyl-2(3H)-benzoxazolone; content determination; related substances; HPLC 4- 邻甲苯磺酰氧基苯并噁唑酮 (MBB) 是由本课题组筛选并首次合成的具有显著抗炎镇痛功能的活性化合物 [1], 药理学实验表明,MBB 对乙酸所致小鼠扭体的抑制率达到了 54.59%, 可作为潜在的非甾体镇痛抗炎候选药物 [2] 目前尚未建立 MBB 的含量测定和有关物质的检测方法 为了控制该化合物的质量并为后续研究提供质量稳定 均一的样品, 本实验对 MBB 进行了系统的含量及 有关物质研究 [3-5] 结果表明, 该方法简便 灵敏 专属 准确, 可为 MBB 的进一步研究提供参考 1 仪器与试药 LC-10Atvp 高效液相色谱仪,SPD-10Atvp 紫外检测器 ( 日本 Shimadzu 公司 ),N2000 双通道色谱工作站 ;Sartorius CP225D 电子天平 ( 德国赛多利斯公司 ) MBB 对照品 ( 本课题组合成, 经 3 次重结晶, 高效液相色谱峰面积归一化法测定, 纯度 基金项目 : 山西省科技攻关项目 (20110321076-01) 作者简介 : 马云龙, 男, 硕士 Tel: (0351)4135243 E-mail: ma5924@163.com (0351)4690322 E-mail: qingshanl@yahoo.com * 通信作者 : 李青山, 男, 博士, 博导 Tel: 中国现代应用药学 2012 年 9 月第 29 卷第 9 期 Chin JMAP, 2012 September, Vol.29 No.9 833