奈 米 標 章 產 品 驗 證 制 度 奈 米 銀 抗 菌 熱 可 塑 性 彈 性 體 驗 證 規 範 文 件 編 號 :TN-043 版 次 :1.0 著 作 權 所 有, 侵 權 必 究
制 定 / 修 正 紀 錄 版 次 日 期 制 定 / 修 正 摘 要 審 查 / 核 准 1.0 102.01.02 規 範 制 定 推 行 審 議 會 101 年 度 第 2 次 審 議 會 通 過 著 作 權 所 有, 侵 權 必 究
前 言 奈 米 技 術 產 品 為 一 新 興 科 技 產 品,21 世 紀 全 球 各 先 進 國 家 均 積 極 研 發 生 產, 市 場 上 各 類 型 之 奈 米 產 品 亦 日 益 增 多, 為 提 升 奈 米 技 術 產 品 之 品 質 與 形 象, 保 障 民 眾 消 費 權 益, 進 而 促 成 國 內 奈 米 產 業 之 健 全 發 展, 特 由 經 濟 部 主 導, 工 業 局 主 管, 並 委 由 工 業 技 術 研 究 院 推 動 奈 米 標 章 產 品 驗 證 制 度 奈 米 技 術 產 品 為 新 興 產 品, 多 無 相 關 之 產 品 及 檢 測 標 準 可 供 遵 循, 故 由 奈 米 標 章 專 業 執 行 機 構 敬 邀 國 內 相 關 學 者 專 家, 組 成 工 作 小 組, 起 草 制 定 產 品 規 範 草 案, 並 予 以 檢 測 確 認 產 品 規 範 草 案 完 成 後, 經 奈 米 標 章 技 術 評 議 會 評 議 同 意, 送 請 奈 米 標 章 推 行 審 議 會 審 議 通 過 後 公 告, 作 為 奈 米 標 章 產 品 檢 測 確 認 及 審 查 之 依 據 奈 米 標 章 對 奈 米 技 術 產 品 之 驗 證, 主 要 重 點 包 括 產 品 的 奈 米 尺 寸 奈 米 功 能 及 其 他 要 求 :(1) 奈 米 尺 寸 : 確 認 為 真 正 之 奈 米 技 術 產 品, 其 奈 米 尺 寸 須 小 於 100 nm, 或 具 有 奈 米 結 構 者 ;(2) 奈 米 功 能 : 應 較 原 傳 統 產 品 增 加 新 功 能, 或 增 強 原 有 功 能 者 如 奈 米 技 術 紡 織 品, 可 能 增 加 抗 菌 功 能, 或 增 強 抗 紫 外 線 保 暖 散 熱 等 功 能 者 ;(3) 其 他 要 求 : 包 括 產 品 安 全 仍 由 主 管 機 關 審 理 奈 米 技 術 產 品 如 係 法 定 管 制 品 者, 另 須 符 合 相 關 法 規 之 要 求 ; 同 時 產 品 耐 候 性 亦 須 符 合 產 業 一 般 要 求 奈 米 標 章 驗 證 產 品 規 範 之 制 定, 主 要 是 針 對 上 述 奈 米 尺 寸 及 奈 米 功 能 之 品 質 要 求 及 試 驗 方 法 制 定 之 並 為 確 保 產 品 之 品 質, 依 產 品 規 範 之 試 驗 方 法, 將 廠 商 所 申 請 之 產 品, 交 由 奈 米 標 章 產 品 驗 證 制 度 登 錄 實 驗 室 或 具 公 信 力 之 檢 測 機 構 確 認 其 測 試 結 果 符 合 產 品 規 範 之 要 求 熱 可 塑 性 彈 性 體, 簡 稱 TPE (Thermoplastic Elastomer), 是 近 年 合 成 橡 膠 原 料 中 最 受 矚 目 的 產 品 之 一 TPE 之 性 能 介 於 硫 化 橡 膠 和 塑 膠 之 間 ; 亦 即 兼 具 橡 膠 的 彈 性, 但 卻 因 為 在 高 溫 下, 其 加 工 特 性 ( 熱 可 塑 性 ) 與 塑 膠 相 近, 故 可 以 使 用 塑 膠 加 工 之 方 式 進 行 產 品 加 工, 其 應 用 產 品 包 括 SBS SEBS 等 序 列 產 品 如 瑜 珈 墊 止 滑 墊 自 行 車 把 手 薄 膜 等, 更 可 重 複 回 收 再 使 用, 深 具 有 市 場 潛 力 有 鑒 於 奈 米 銀 抗 菌 熱 可 塑 性 彈 性 體 在 使 用 及 保 存 上 能 降 低 細 菌 的 滋 生, 特 制 定 本 產 品 規 範, 藉 由 奈 米 銀 材 料 加 工, 使 抗 菌 熱 可 塑 性 彈 性 體 具 有 奈 米 銀 表 面 抗 菌 之 效 果, 使 得 細 菌 不 易 在 塑 性 彈 性 體 表 面 滋 生 繁 殖, 達 到 保 護 使 用 者 衛 生 安 全 的 效 果, 有 助 於 提 升 其 衛 生 品 質 以 及 降 低 疾 病 的 傳 染 著 作 權 所 有, 侵 權 必 究
-1- 奈 米 標 章 驗 證 產 品 規 範 奈 米 銀 抗 菌 熱 可 塑 性 彈 性 體 編 號 TN-043 1. 適 用 範 圍 本 規 範 適 用 於 具 抗 菌 功 能 之 熱 可 塑 性 彈 性 體, 其 抗 菌 功 能 源 自 於 奈 米 銀 2. 參 考 資 料 2.1 CNS 7302:1986 化 學 分 析 用 玻 璃 皿 2.2 CNS 17025:2007 測 試 與 校 正 實 驗 室 能 力 一 般 要 求 2.3 TN-019 奈 米 銀 抗 菌 工 業 用 塑 膠 容 器 驗 證 規 範 3.1 版 2.4 TN-036 奈 米 銀 抗 菌 塑 膠 馬 桶 蓋 驗 證 規 範 1.0 版 2.5 ISO 16700:2004(E) Microbeam analysis Scanning electron microscopy Guidelines for calibrating image magnification 2.6 ISO 22196:2011 Measurement of antibacterial activity on plastics and other non-porous surfaces 2.7 ISO 22309:2011 Microbeam analysis Quantitative analysis using energydispersive spectrometry (EDS) for elements with an atomic number of 11 (Na) or above 2.8 JIS Z 2801:2010 Antibacterial products Test for antibacterial activity and efficacy 公 布 日 期 102 年 01 月 02 日 奈 米 標 章 產 品 驗 證 制 度 印 行 修 正 日 期 年 月 日 本 規 範 非 經 同 意 不 得 翻 印
-2-3. 用 語 釋 義 3.1 奈 米 銀 抗 菌 熱 可 塑 性 彈 性 體 : 以 熱 塑 性 彈 性 體 材 質 製 作, 採 用 奈 米 銀 材 料 進 行 表 面 抗 菌 功 能 之 熱 可 塑 性 彈 性 體 母 粒, 可 進 一 步 製 作 相 關 產 品 並 具 有 抗 菌 之 效 果 3.2 奈 米 銀 : 係 指 任 一 維 平 均 尺 寸 在 100 nm 以 下 之 銀 材 料 3.3 熱 可 塑 性 彈 性 體 : 本 驗 證 規 範 之 熱 可 塑 性 彈 性 體 以 熱 塑 性 彈 性 體 材 質 製 作, 簡 稱 TPE (Thermoplastic Elastomer) 3.4 抗 菌 性 : 能 抑 制 細 菌 之 增 殖 或 使 其 減 少 數 目 之 性 質 3.5 抗 菌 率 : 係 指 試 驗 細 菌 在 試 片 上 所 減 少 細 菌 數 目 之 百 分 比 4. 判 定 基 準 奈 米 銀 抗 菌 熱 可 塑 性 彈 性 體 須 依 本 規 範 規 定 之 方 法 進 行 測 試 並 符 合 下 列 之 要 求 水 準, 方 可 取 得 奈 米 標 章 項 目 特 性 要 求 水 準 備 註 奈 米 尺 寸 奈 米 銀 抗 菌 熱 可 塑 性 彈 性 體 所 使 用 奈 米 材 料 之 尺 寸 及 成 分 奈 米 銀 成 分 須 確 認, 其 任 一 維 平 均 尺 寸 在 100 nm 以 下 廠 商 須 提 供 測 試 報 告 或 證 明 奈 米 功 能 對 特 定 之 金 黃 色 葡 萄 球 菌 及 大 腸 桿 菌 之 抗 菌 率 抗 菌 率 須 99 % 以 上 5. 試 驗 方 法 5.1 樣 品 製 備 : 樣 品 以 隨 機 抽 取 方 式 進 行, 但 應 採 取 足 以 代 表 預 計 選 用 之 熱 可 塑 性 彈 性 體 類 型 或 同 等 級 所 採 樣 品 數 應 可 供 製 作 相 關 測 試 試 樣 ; 每 一 試 樣 必 須 有 一 面 為 製 品 加 工 完 成 面, 並 作 為 受 測 面 樣 品 尺 寸 以 符 合 受 測 大 小 即 可 5.2 奈 米 尺 寸 : 詳 見 附 錄 1 5.3 奈 米 功 能 : 詳 見 附 錄 2 6. 試 驗 報 告 6.1 報 告 內 容 應 符 合 CNS 17025:2007 [ 測 試 與 校 正 實 驗 室 能 力 一 般 要 求 ] 第 5.10 節 之 要 求 6.2 對 於 奈 米 尺 寸 奈 米 功 能 及 其 他 要 求 之 試 驗 報 告 應 包 含 充 分 數 據 資 料, 必 要 時 附 加 照 片 以 茲 佐 證 6.3 奈 米 尺 寸 之 試 驗 報 告 至 少 應 包 含 以 下 內 容 : (1) 所 測 試 產 品 所 含 奈 米 銀 成 分 (2) 所 測 試 產 品 所 含 奈 米 銀 尺 寸 6.4 奈 米 功 能 之 試 驗 報 告 至 少 應 包 含 以 下 內 容 : (1) 樣 品 名 稱 (2) 試 驗 用 菌 株 (3) 抗 菌 率
-3-7. 標 示 (4) 接 種 菌 數 (5) 接 種 對 照 組 對 照 組 與 試 驗 組 培 養 後 的 菌 數 符 合 奈 米 標 章 之 產 品 應 標 示 下 列 附 加 事 項 : 7.1 認 可 產 品 名 稱 7.2 使 用 之 奈 米 級 原 材 料 及 加 工 方 式 7.3 奈 米 標 章 及 認 可 之 產 品 功 能 說 明 ( 試 驗 用 菌 株 抗 菌 率 ) 7.4 產 品 使 用 應 注 意 事 項 7.5 其 他 相 關 法 規 要 求 事 項 8. 附 則 本 規 範 由 工 作 小 組 制 定, 經 奈 米 標 章 技 術 評 議 會 評 議 及 奈 米 標 章 推 行 審 議 會 審 議 核 准 後 發 行, 修 正 時 亦 同
-4- 附 錄 1 奈 米 銀 抗 菌 熱 可 塑 性 彈 性 體 奈 米 尺 寸 試 驗 方 法 1. 概 要 本 試 驗 方 法 係 以 穿 透 式 / 掃 描 式 電 子 顯 微 鏡 對 產 品 表 面 含 100 nm 以 下 奈 米 銀 之 尺 寸 測 定 法, 及 以 能 量 散 射 光 譜 儀 測 定 奈 米 銀 的 成 分 2. 裝 置 及 材 料 2.1 量 測 儀 器 (1) 穿 透 式 電 子 顯 微 鏡 : 參 考 ISO 16700:2004(E) Microbeam analysis Scanning electron microscopy Guidelines for calibrating image magnification (2) 能 量 散 射 光 譜 儀 : 參 考 ISO 22309:2011 Microbeam analysis Quantitative analysis using energy-dispersive spectrometry (EDS) for elements with an atomic number of 11 (Na) or above 2.2 樣 品 製 備 3. 原 理 3.1 穿 透 式 電 子 顯 微 鏡 利 用 高 能 量 的 電 子 (200 kev) 與 樣 品 產 生 的 交 互 作 用 作 為 基 礎 而 獲 得 樣 品 的 微 結 構 影 像 在 穿 透 式 電 子 顯 微 基 本 成 像 原 理 中, 低 中 倍 率 ( 倍 率 適 用 範 圍 為 2500 X 150 kx) 之 TEM 顯 微 成 像 主 要 是 利 用 穿 透 式 電 子 束 成 像, 因 而 形 成 明 視 野 像 (Bright Field), 此 種 影 像 主 要 源 自 於 振 幅 對 比 (Amplitude Contrast) 而 高 分 辨 電 子 顯 微 影 像 成 像 ( 倍 率 適 用 範 圍 為 200 kx 1.0 MX) 是 利 用 穿 透 電 子 束 與 繞 射 電 子 束 交 互 干 涉 而 成 週 期 性 條 紋 或 是 晶 格 影 像 其 成 像 原 理 是 來 自 於 各 電 子 束 間 的 相 位 差, 因 此 所 產 生 的 對 比 稱 之 為 相 位 對 比 (Phase Contrast) 接 著 利 用 電 荷 耦 合 元 件 攝 相 機 (Charge Coupled Device Camera) 紀 錄 影 像, 最 後 再 根 據 影 像 利 用 分 析 軟 體 作 為 所 欲 量 測 輪 廓 兩 點 間 之 水 平 距 離 的 量 測 3.2 能 量 散 佈 光 譜 儀 能 量 散 佈 光 譜 儀 (Energy Dispersive Spectrometer, EDS) 之 原 理 係 當 原 子 的 內 層 電 子 受 到 外 來 電 子 束 的 激 發 而 脫 離 軌 道 時, 外 層 電 子 將 躍 遷 至 內 層 軌 道 並 釋 放 特 定 能 量 的 X 光 由 於 各 元 素 之 能 階 分 佈 不 同, 因 此 藉 由 分 析 此 特 性 X 光 能 量 或 波 長 即 可 用 以 鑑 定 材 料 的 組 成 元 素 4. 注 意 事 項 4.1 本 檢 測 法 為 乾 式 量 測 法, 毋 須 浸 泡 於 溶 液 中 4.2 檢 測 設 備 若 須 抽 真 空, 易 污 染 真 空 腔 者, 應 作 特 殊 處 理 4.3 檢 測 設 備 須 使 用 具 追 溯 的 標 準 樣 本 先 行 驗 證, 以 確 認 檢 測 設 備 的 準 確 性 4.4 如 必 要 時 可 將 試 片 鍍 導 電 層, 以 增 加 系 統 的 判 讀 性 5. 判 定 奈 米 銀 成 分 須 確 認, 且 其 任 一 維 平 均 尺 寸 在 100 nm 以 下
-5-1. 試 驗 準 備 1.1 試 藥 及 器 材 附 錄 2 奈 米 銀 抗 菌 熱 可 塑 性 彈 性 體 抗 菌 功 能 試 驗 方 法 (1) 酒 精 : 純 度 95 % 以 上, 試 劑 級 (2) 薄 膜 : 包 含 覆 蓋 薄 膜 與 替 代 薄 膜, 材 質 為 聚 乙 烯 聚 丙 烯 或 聚 酯 纖 維, 厚 度 無 特 別 規 定, 無 吸 水 性, 應 不 影 響 試 驗 菌 種 發 育 ( 覆 蓋 薄 膜 : 大 小 為 40 mm ± 2 mm 的 正 方 形 ; 替 代 薄 膜 : 大 小 為 50 mm ± 2 mm 的 正 方 形 ) (3) 氯 化 鈉 : 生 理 食 塩 水, 濃 度 0.85 % ( W / W ) (4) 氫 氧 化 鈉 溶 液 : 濃 度 0.1 mol/l (5) 鹽 酸 溶 液 : 濃 度 0.1 mol/l (6) 非 離 子 型 界 面 活 性 劑 : 聚 氧 乙 烯 山 梨 糖 醇 酐 單 油 酸 酯 (Polyoxyethylene sorbitan monooleate) 聚 山 梨 醇 酯 80(Tween 80) (7) 培 養 皿 : 拋 棄 式 培 養 皿 或 玻 璃 培 養 皿, 皿 底 之 內 外 應 平 坦 無 氣 泡 無 刮 傷 或 其 他 缺 點 (8) 高 溫 高 壓 滅 菌 釜 : 用 於 培 養 基 和 稀 釋 水 等 不 能 乾 熱 滅 菌 之 材 料 及 用 具 等 之 滅 菌, 能 保 持 溫 度 121 及 壓 力 103 kpa (1.05 kg/cm 2 ) 至 少 15 分 鐘 (9) 乾 熱 滅 菌 器 : 用 於 試 驗 片 與 玻 璃 器 皿 之 滅 菌 可 保 持 在 160 至 少 2 小 時 或 170 至 少 1 小 時 (10) 接 種 環 : 前 端 環 圈 約 4 mm 白 金 耳 或 拋 棄 式 接 種 環 (11) 培 養 箱 : 能 保 持 溫 度 (35 ± 1) (12) 量 筒 :100 ml 500 ml 及 1000 ml 之 量 筒 (13) 三 角 錐 瓶 :250 ml 500 ml 1000 ml 及 2000 ml 其 材 質 能 適 用 於 高 溫 高 壓 滅 菌 釜 (14) 玻 璃 試 管 : 其 材 質 能 適 用 於 高 溫 高 壓 滅 菌 釜 (15) 生 物 安 全 櫃 : 符 合 生 物 安 全 等 級 第 二 級 或 同 等 性 能 之 無 菌 操 作 台 (16) 菌 落 計 數 器 : 用 於 計 算 菌 落 數 目 1.2 試 驗 菌 株 (1) 金 黃 色 葡 萄 球 菌 Staphylococcus aureus (BCRC (1) 10451,ATCC (2) 6538P) (2) 大 腸 桿 菌 Escherichia coli (BCRC (1) 11634,ATCC (2) 8739) 1.3 培 養 基 調 製 註 (1) :BCRC (Bioresource Collection and Research Center): 財 團 法 人 食 品 工 業 發 展 研 究 所 生 物 資 源 保 存 及 研 究 中 心 註 (2) :ATCC (American Type Culture Collection): 美 國 標 準 菌 種 中 心 依 下 列 配 方 配 製 培 養 基, 或 使 用 市 售 的 培 養 基 均 可 (1) 營 養 瓊 脂 培 養 基 (Nutrient Agar, NA) (3) 蛋 白 腖 (Peptone) 肉 精 (Meat Extract) 5.0 g 3.0 g
-6- 瓊 脂 粉 末 (Agar powder) 蒸 餾 水 / 去 離 子 水 15.0 g 1000 ml 以 氫 氧 化 鈉 溶 液 或 鹽 酸 溶 液 調 整 ph 值 為 6.6 7.0 (25 ), 經 高 溫 高 壓 滅 菌 釜 滅 菌 15 分 鐘 後 備 用 若 無 法 完 全 使 用 完, 應 置 於 5 10 環 境 中 保 存, 若 配 製 後 超 過 1 個 月 不 應 再 使 用 註 (3) : 參 考 ISO 22196:2011 (2) 營 養 培 養 液 (Nutrient Broth, NB) (3) 蛋 白 腖 (Peptone) 肉 精 (Meat Extract) 氯 化 鈉 蒸 餾 水 / 去 離 子 水 10.0 g 3.0 g 5.0 g 1000 ml 以 氫 氧 化 鈉 溶 液 或 鹽 酸 溶 液 調 整 ph 值 為 7.0 7.2 (25 ), 經 高 溫 高 壓 滅 菌 釜 滅 菌 15 分 鐘 後 備 用 若 無 法 完 全 使 用 完, 應 置 於 5 10 環 境 中 保 存, 若 配 製 後 超 過 1 個 月 不 應 再 使 用 (3) 1/500 營 養 培 養 液 (1/500 Nutrient Broth, 1/500 NB) 用 蒸 餾 水 / 去 離 子 水 稀 釋 項 次 (2) 配 製 之 NB, 並 以 氫 氧 化 鈉 溶 液 或 鹽 酸 溶 液 調 整 ph 值 為 6.8 7.2 (25 ), 使 其 體 積 成 為 500 倍, 經 高 溫 高 壓 滅 菌 釜 滅 菌 15 分 鐘 後 備 用 若 無 法 完 全 使 用 完, 應 置 於 5 10 環 境 中 保 存, (3) 若 配 製 後 超 過 1 星 期 以 上 未 用 者 則 不 應 再 使 用 (4) SCDLP 液 體 培 養 基 (Soya Casein Digest Lecithin Polysorbate Broth) (4) 酪 蛋 白 製 蛋 白 腖 (Casein Peptone) 大 豆 製 蛋 白 腖 (Soybean Peptone) 氯 化 鈉 磷 酸 氫 二 鉀 葡 萄 糖 卵 磷 脂 (Lecithin) 非 離 子 型 界 面 活 性 劑 蒸 餾 水 / 去 離 子 水 17.0 g 3.0 g 5.0 g 2.5 g 2.5 g 1.0 g 7.0 g 1000 ml 以 氫 氧 化 鈉 溶 液 或 鹽 酸 溶 液 調 整 ph 值 為 6.8 7.2 (25 ), 經 高 溫 高 壓 滅 菌 釜 滅 菌 15 分 鐘 後 備 用 若 無 法 完 全 使 用 完, 應 置 於 5 10 環 境 中 保 存, 若 配 製 後 超 過 1 個 月 不 應 再 使 用 註 (4) : 參 考 JIS Z 2801:2010 (5) 磷 酸 緩 衝 液 (Phosphate Buffer Solution) 以 500 ml 蒸 餾 水 / 去 離 子 水 溶 解 34.0 g 磷 酸 二 氫 鉀 (KH 2 PO 4 ), 使 用 氫 氧 化 鈉 溶 液 或 鹽 酸 溶 液 調 整 ph 值 為 6.8 7.2 (25 ) 後, 加 蒸 餾 水 / 去 離 子 水 至 1000 ml 經 高 溫 高 壓 滅 菌 釜 滅 菌 15 分 鐘 後 備 用 若 無 法 完 全 使 用 完, 應 置 於 5 10 環 境 中 保 存, 若 配 製 後 超 過 1 個 月 不 應 再 使 用 (6) 磷 酸 緩 衝 生 理 食 鹽 水 (Phosphate Buffered Physiological Saline)( 生 菌 數 測 定 用 )
-7- 以 生 理 食 鹽 水 稀 釋 項 次 (5) 配 製 之 磷 酸 緩 衝 液 至 800 倍 經 高 溫 高 壓 滅 菌 釜 滅 菌 15 分 鐘 後 備 用 若 無 法 完 全 使 用 完, 應 置 於 5 10 環 境 中 保 存, 若 配 製 後 超 過 1 個 月 不 應 再 使 用 1.4 試 驗 菌 株 的 活 化 與 保 存 自 菌 種 保 存 機 構 取 得 的 菌 株, 依 所 附 活 化 說 明 書 進 行 活 化 進 行 活 化 後, 移 植 一 白 金 耳 量 至 NA 培 養 基, 於 攝 氏 (35 1) 下 培 養 24 小 時 48 小 時 後, 以 5 10 冷 藏 保 存 移 植 細 菌 後, 於 1 個 月 以 內 進 行 同 樣 的 次 代 培 養 以 從 保 存 機 關 取 得 的 原 株 進 行 次 代 培 養 時, 以 5 次 為 限 度 移 植 後 超 過 1 個 月, 則 不 得 再 使 用 1.5 試 驗 菌 株 前 培 養 將 1.4 節 活 化 後 的 試 驗 菌 株 移 植 至 NA 培 養 基, 最 適 培 養 溫 度 為 (35 1), 培 養 16 小 時 24 小 時 後, 再 移 植 一 白 金 耳 量 至 新 的 NA 培 養 基, 最 適 培 養 溫 度 為 (35 1), 培 養 16 小 時 20 小 時 1.6 接 種 用 菌 液 濃 度 調 製 2. 樣 品 處 理 取 1.5 節 前 培 養 之 一 白 金 耳 試 驗 菌 株 均 勻 地 懸 溶 於 適 量 之 1/500 NB, 並 將 接 種 用 菌 液 依 適 當 方 法 ( 如 光 密 度 法 ) 推 算 其 生 菌 數, 並 調 整 至 (2.5 10 5 1.0 10 6 ) 個 /ml (3), 若 須 保 存 可 置 於 冰 上 (0 ), 但 不 可 超 過 2 小 時 待 測 奈 米 銀 抗 菌 熱 可 塑 性 彈 性 體 試 片 為 邊 長 50 mm 2 mm( 厚 度 10 mm 以 內 ) 表 面 平 整 之 正 方 形 塊, 作 為 加 工 試 驗 片 試 片 全 面 以 脫 脂 棉 沾 酒 精 (95 % 以 上 ) 輕 輕 擦 拭 2 至 3 回, 並 放 置 使 乾 燥 加 工 試 驗 片 為 各 2 片 ( 即 2 重 覆 ) 2 菌 種, 計 4 片 ; 另 須 準 備 無 加 工 試 驗 片 為 各 2 片 ( 即 2 重 覆 ) 2 菌 種 2 組, 計 8 片, 若 未 提 供 無 加 工 試 驗 片 時, 可 以 以 替 代 薄 膜 替 代 3. 試 驗 操 作 3.1 抗 菌 性 測 試 (1) 對 照 組 ( 即 無 加 工 試 驗 片 ;2 重 覆 / 菌 種 ) 培 養 皿 4 個 (2 重 覆 2 菌 種 ), 分 別 放 入 無 加 工 試 驗 片, 接 種 0.4 ml 接 種 用 菌 液 (1.0 10 5 4.0 10 5 菌 / 片 ), 然 後 在 其 上 面 覆 蓋 薄 膜, 置 於 (35 1), 相 對 濕 度 90 % 以 上, 培 養 (24 ± 1) 小 時 (2) 試 驗 組 ( 即 加 工 試 驗 片 ;2 重 覆 / 菌 種 ) 培 養 皿 4 個 (2 重 覆 2 菌 種 ), 分 別 放 入 加 工 試 驗 片, 接 種 0.4 ml 接 種 用 菌 液, 然 後 在 其 上 面 覆 蓋 薄 膜, 置 於 (35 1), 相 對 濕 度 90 % 以 上, 培 養 (24 ± 1) 小 時 3.2 生 菌 數 的 測 定 (1) 接 種 對 照 組 ( 即 接 種 後 立 即 洗 下 之 菌 數 ) 培 養 皿 4 個 (2 重 覆 2 菌 種 ), 分 別 放 入 無 加 工 試 驗 片, 並 在 其 上 接 種 0.4 ml 接 種 用 菌 液, 且 在 其 上 面 覆 蓋 薄 膜 後, 接 入 後 迅 速 以 10 ml SCDLP 培 (5) 養 基 充 分 洗 出 附 著 之 菌 液 並 依 生 菌 數 法 以 NA 培 養 基 在 (35 1) 下 培
-8- 養 40 小 時 48 小 時, 測 出 洗 出 之 液 體 1 ml 中 之 生 菌 數 ( 個 /ml), 並 求 出 2 重 覆 生 菌 數 的 平 均 值 其 10 倍 的 值 即 為 接 種 對 照 組 之 菌 數 (A) 註 (5) : 參 考 CNS 10890:2009 (2) 對 照 組 經 培 養 後 之 無 加 工 試 驗 片 培 養 皿 4 個 (2 重 覆 2 菌 種 ), 依 第 3.2 (1) 節 所 述 生 菌 數 法, 計 算 其 生 菌 數, 並 求 出 2 重 覆 生 菌 數 的 平 均 值 其 10 倍 的 值 即 為 對 照 組 之 菌 數 (B) (3) 試 驗 組 4. 試 驗 成 立 條 件 經 培 養 後 之 加 工 試 驗 片 培 養 皿 4 個 (2 重 覆 2 菌 種 ), 依 第 3.2 (1) 節 所 述 生 菌 數 法, 計 算 其 生 菌 數, 並 求 出 2 重 覆 生 菌 數 的 平 均 值 其 10 倍 的 值 即 為 試 驗 組 之 菌 數 (T) 4.1 對 於 接 種 對 照 區 及 對 照 組 之 各 2 個 生 菌 數, 依 下 列 公 式 計 算, 其 計 算 值 在 0.2 以 下 ( 最 高 對 數 值 - 最 低 對 數 值 )/ 對 數 平 均 值 0.2 4.2 對 於 接 種 對 照 區 及 對 照 組 的 減 少 率, 依 下 列 公 式 計 算, 其 計 算 值 在 90 % 以 下 ( 接 種 對 照 區 - 對 照 組 )/ 接 種 對 照 區 100 90 % 4.3 對 於 接 種 對 照 區 的 2 個 生 菌 數, 其 平 均 值 在 (1.0 10 5 4.0 10 5 )CFU 範 圍 內 備 考 :CFU 為 菌 落 形 成 單 位 (Colony Forming Unit) 5. 結 果 R = B -T B 100 式 中,R = 抗 菌 率 (%), 表 示 到 小 數 點 以 下 第 二 位 B = 對 照 組 菌 數 T = 試 驗 組 菌 數