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- 饮钰 郎
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1 骨 有 明 訊 肌 動 蛋 白 絲 與 細 胞 形 態 關 係 之 研 究 科 別 : 生 物 科 第 48 屆 科 學 展 覽 北 二 區 佳 作 作 者 : 呂 苹 瑋 范 競 勻 指 導 老 師 : 陳 季 瑄 老 師
2 壹 摘 要 本 研 究 以 人 類 的 子 宮 頸 癌 細 胞 (HeLa cell) 為 細 胞 骨 架 的 觀 察 對 象, 經 過 培 養 與 繼 代, 利 用 免 疫 螢 光 染 色, 以 山 羊 的 肌 動 蛋 白 絲 抗 體 (Goat anti-β-actin antibody) 偵 測 骨 架,4',6 - 二 脒 基 -2- 苯 基 吲 哚 (4',6-diamidino-2-phenylindole) 偵 測 細 胞 核 經 一 系 列 的 探 討 後, 發 現 當 細 胞 與 細 胞 間 密 度 越 高 時, 肌 動 蛋 白 絲 越 短 越 鬆 且 方 向 一 致 性 低, 我 們 推 測 極 有 可 能 是 因 為 伸 展 空 間 受 限 所 致, 密 度 低 則 反 之 另 外, 我 們 也 研 究 細 胞 有 絲 分 裂 (M phase) 到 不 同 階 段 時, 細 胞 形 狀 的 變 化 及 其 骨 架 的 關 係, 我 們 除 了 發 現 到 肌 動 蛋 白 絲 在 細 胞 分 裂 時, 會 較 分 裂 前 後 更 密 更 錯 綜 複 雜 之 外, 我 們 更 探 討 細 胞 核 內 在 分 裂 時 會 出 現 綠 色 點 狀 螢 光, 違 反 肌 動 蛋 白 絲 抗 體 的 專 一 性 貳 研 究 動 機 高 一 下 學 期 的 生 物 課, 同 學 間 在 做 書 報 討 論 時 有 聊 到 在 不 同 細 胞 週 期 時, 細 胞 形 態 會 有 變 化, 於 是 我 們 想 知 道, 在 分 裂 期 時 細 胞 要 如 何 利 用 骨 架 完 成 分 裂 又 同 時 要 維 持 細 胞 的 穩 定 性 此 外, 我 們 也 對 細 胞 的 形 狀 和 其 骨 架 變 化 的 關 係 十 分 感 興 趣 再 者, 生 物 界 存 在 各 種 形 狀 的 細 胞, 例 如 : 長 條 分 節 的 肌 肉 細 胞 扁 平 的 表 皮 細 胞 神 經 細 胞 雙 凹 圓 盤 狀 的 紅 血 球 細 胞 柱 狀 細 胞.. 除 了 部 分 原 因 是 為 了 適 應 環 境 及 發 揮 其 功 能 外, 細 胞 的 形 狀 想 必 也 跟 細 胞 骨 架 有 密 切 關 聯, 在 詢 問 老 師 後, 以 普 遍 利 用 的 HeLa cell 為 研 究 對 象, 並 開 始 著 手 構 思 在 閱 讀 科 學 期 刊 時, 我 們 得 知 骨 架 分 為 微 質 管 中 間 絲 與 肌 動 蛋 白 絲 三 種, 經 由 查 詢 資 料 後 發 現, 微 質 管 已 有 許 多 相 關 研 究 及 豐 富 的 資 料, 所 以 我 們 決 定 以 相 同 方 法 觀 察 較 少 人 探 討 的 肌 動 蛋 白 絲, 期 待 能 有 所 突 破 肌 動 蛋 白 絲 中 間 絲 197
3 微 質 管 參 研 究 目 的 實 驗 一 : 了 解 細 胞 間 疏 密 程 度 與 細 胞 骨 架 的 關 係 實 驗 二 : 細 胞 有 絲 分 裂 到 各 期 形 態 與 細 胞 骨 架 的 關 係 肆 研 究 器 材 與 材 料 1. 海 拉 細 胞 2. 培 養 皿 3. P-1000,P-200,P-20 的 微 量 吸 管 ( 分 注 器 ) ml 的 微 量 管 5. 蓋 玻 片 與 載 玻 片 6. 螢 光 顯 微 鏡 7. 1X PBS 緩 衝 液,pH PBST 緩 衝 液 (1X PBS 加 0.05%Tween-20) 9. 非 離 子 界 面 活 性 劑 (triton X-100), 用 PBS 作 為 溶 劑 10. 4% 的 福 馬 林, 用 PBS 作 為 溶 劑 螢 光 顯 微 鏡 11. 安 佳 脫 脂 奶 粉 12. 山 羊 的 肌 動 蛋 白 絲 一 級 抗 體 (Goat anti-β-actin antibody 以 下 簡 稱 一 級 抗 體 ) 13. 驢 子 的 肌 動 蛋 白 絲 二 級 抗 體 (Fluorescein-conjugated anti-donkey IgG 及 Rhdamine Red 以 下 簡 稱 二 級 抗 體 ) 14. 4',6- 二 脒 基 -2- 苯 基 吲 哚 (4',6-diamidino-2-phenylindole 簡 稱 DAPI) 15. Mounting Solution( 甘 油 加 水 或 加 PBS 緩 衝 液 ) 16. Immersion( 油 鏡 ) 198
4 伍 研 究 過 程 與 方 法 一 細 胞 的 繼 代 與 保 存 ( 一 ) 細 胞 之 繼 代 細 胞 培 養 3~4 天 左 右, 可 將 細 胞 株 或 初 代 細 胞 繼 代 (passage) 培 養 1. 將 細 胞 培 養 液 移 去 後, 以 PBS 緩 衝 液 洗 細 胞 面, 再 將 PBS 緩 衝 液 倒 去 2. 加 入 少 許 之 TV 溶 液 ( 以 能 覆 蓋 細 胞 面 為 原 則 ) 在 37 作 用 數 分 鐘 單 層 的 細 胞 將 會 逐 漸 變 成 單 一 細 胞, 然 後 從 培 養 角 瓶 脫 落 3. 取 細 胞 培 養 液 於 800rpm 離 心 10 分 鐘 然 後 將 細 胞 消 化 液 倒 掉, 再 將 細 胞 懸 浮 於 培 養 基 內, 置 於 37 培 養 ( 二 ) 細 胞 之 保 存 與 解 凍 1. 取 培 養 兩 天 左 右 之 細 胞, 以 蛋 白 酶 將 單 層 細 胞 消 化 為 單 一 細 胞 後, 將 細 胞 懸 浮 於 細 胞 保 存 液 (90% 胎 牛 血 清 及 10%DMSO) 然 後 將 細 胞 液 分 裝 於 1.5ml 的 微 量 離 心 管, 並 置 於 保 麗 龍 內, 以 紗 布 包 裹, 隨 後 置 於 -70 過 夜 再 將 細 胞 移 入 -196 液 態 氮 保 存 2. 若 要 解 凍 細 胞, 可 將 細 胞 從 液 態 氮 桶 取 出, 並 迅 速 置 於 37 之 水 浴 內, 使 其 迅 速 解 凍, 隨 後 離 心 將 DMSO 移 去, 再 將 細 胞 懸 浮 於 培 養 基 內, 於 37 培 養 箱 培 養 二 細 胞 免 疫 螢 光 染 色 1. 將 培 養 在 蓋 玻 片 上 的 細 胞, 置 於 35mm 的 培 養 皿 2. 吸 去 培 養 液, 加 入 PBS 緩 衝 液 清 洗 ( 照 片 一 ) 3. 吸 去 福 馬 林, 加 入 PBS 緩 衝 液 清 洗 4. 用 非 離 子 界 面 活 性 劑 打 洞, 靜 置 10 分 鐘 5. 吸 去 非 離 子 界 面 活 性 劑, 加 入 PBS 緩 衝 液 清 洗 6. 加 入 酪 蛋 白, 靜 置 約 一 小 時 ( 亦 可 置 於 4 冰 箱 放 隔 夜 ) 7. 吸 去 酪 蛋 白, 加 入 PBST 緩 衝 液 清 洗 ( 照 片 二 ) 8. 吸 去 PBST 緩 衝 液, 加 入 一 級 抗 體 ( 與 PBS 稀 釋 成 1:4) 成 表 面 張 力, 靜 置 3 小 時 ( 可 放 隔 夜 ) ( 照 片 三 ) 9. 吸 去 一 級 抗 體 加 入 PBST 緩 衝 液 清 洗 三 次 各 20 分 鐘 10. 加 入 二 級 抗 體 ( 與 PBS 緩 衝 液 稀 釋 成 1:20), 靜 置 半 小 時 ( 照 片 四 ) 11. 吸 去 二 級 抗 體 ( 可 回 收 ), 加 入 PBST 清 洗 三 次, 每 次 40 分 鐘 越 久 越 好 12. 吸 去 PBST 緩 衝 液, 加 入 DAPI( 與 PBS 稀 釋 成 1:1) 在 蓋 玻 片 上 形 成 表 面 張 力, 靜 置 半 小 時 13. 吸 去 DAPI, 加 入 PBST 緩 衝 液 清 洗 14. 吸 去 PBST 緩 衝 液, 加 入 去 離 子 水 ( 立 即 吸 出 ), 重 複 2 次 15. 在 載 玻 片 上 滴 一 滴 Mounting Solution 將 蓋 玻 片 緩 慢 反 蓋 上 照 片 五 16. 吸 去 玻 片 邊 緣 多 餘 之 Mounting Solution 並 在 蓋 玻 片 四 周 塗 上 指 甲 油 封 片 照 片 六 * 補 充 說 明 : 1. 所 有 實 驗 步 驟 皆 在 室 溫 完 成 199
5 2. 清 洗 若 無 註 明, 則 皆 是 三 次, 每 次 間 隔 10 分 鐘 3. 加 入 的 溶 液 皆 須 漫 過 整 個 蓋 玻 片 4. 酪 蛋 白 來 自 安 佳 脫 脂 奶 粉, 並 用 PBS 作 為 溶 劑, 調 成 5%, 代 替 小 牛 血 清 蛋 白 (BSA) 5. 一 級 抗 體 若 要 放 隔 夜 需 覆 蓋 過 整 個 培 養 皿, 且 濃 度 要 較 高 6. 其 中 實 驗 一 因 不 需 觀 察 細 胞 核, 故 可 跳 過 步 驟 照 片 一 : 吸 去 培 養 液 照 片 二 :Blocking 照 片 三 : 一 級 抗 體 做 表 面 張 力 照 片 四 : 二 級 抗 體 做 表 面 張 力 照 片 五 : 滴 Mounting Solution 並 蓋 蓋 玻 片 照 片 六 : 以 指 甲 油 封 片 200
6 陸 步 驟 原 理 說 明 原 理 一 : 肌 動 蛋 白 絲 的 螢 光 染 色 間 接 免 疫 螢 光 抗 體 (IndirectImmunofluorescence) 先 用 一 級 抗 體 去 跟 抗 原 結 合, 再 用 標 有 螢 光 物 質 的 抗 體 ( 二 級 抗 體 ) 去 偵 測 一 級 抗 體 而 因 為 抗 原 與 一 級 抗 體 結 合 後 再 用 二 級 抗 體 去 偵 測 時, 一 個 ( 抗 原 - 一 級 抗 體 ) 複 合 物 可 能 與 兩 個 以 上 標 有 螢 光 物 質 的 二 級 抗 體 結 合, 便 因 此 使 螢 光 反 應 放 大, 就 是 所 謂 的 訊 息 放 大 反 應 以 牛 奶 ( 或 血 清 ) 覆 蓋 住 triton 所 產 生 的 雜 質, 即 抑 制 非 特 異 性 物 質 的 結 合 方 法 一 : 細 胞 膜 的 打 洞 Triton X-100 Triton X-100 細 胞 膜 雜 質 及 釋 出 的 細 胞 質 以 非 離 子 界 面 活 性 劑 (triton X-100) 洞 穿 細 胞 膜, 使 一 級 抗 體 能 夠 通 過 細 胞 膜 並 偵 測 骨 架 打 洞 後 會 有 胞 內 與 胞 外 的 物 質 進 出, 由 細 胞 釋 出 的 物 質, 會 在 之 後 用 緩 衝 液 清 洗 掉 201
7 方 法 二 :Blocking 酪 蛋 白 或 小 牛 血 清 蛋 白 (BSA) 抑 制 非 特 異 性 結 合, 如 此 一 級 抗 體 便 可 偵 側 到 肌 動 蛋 白 絲, 帶 有 螢 光 團 的 二 級 抗 體 再 與 一 級 抗 體 結 合, 發 出 螢 光 原 理 二 : 細 胞 核 的 螢 光 染 色 (DAPI 為 染 劑 ) 1. DAPI 兩 端 的 NH2 釋 出 一 個 電 子, 使 其 帶 正 電, 鑲 嵌 在 DNA 雙 股 螺 旋 帶 負 電 的 鹼 基 之 間 2. DNA 雙 股 螺 旋 與 DAPI 結 合, 用 以 偵 測 細 胞 核 ( 右 圖 ) 3. 在 螢 光 顯 微 鏡 觀 察 下,DAPI 染 劑 是 用 紫 外 光 波 長 的 光 線 激 發 當 DAPI 與 雙 股 DNA 結 合 時, 最 大 吸 收 波 長 為 358nm, 最 大 發 射 波 長 為 461nm, 其 發 散 光 的 波 長 範 圍 含 蓋 了 藍 色 至 青 綠 色 DAPI 也 可 以 和 RNA 結 合, 但 產 生 的 螢 光 強 度 不 及 與 DNA 結 合 的 結 果, 其 發 散 光 的 波 長 範 圍 約 在 400nm 左 右 下 圖 是 我 們 用 此 方 法 做 出 的 結 果 : 成 功 的 呈 現 出 綠 色 為 肌 動 蛋 白 絲 所 在 位 置, 藍 色 為 細 胞 核 202
8 實 驗 一 : 細 胞 間 疏 密 程 度 與 細 胞 骨 架 的 關 係 1. 以 下 先 以 六 張 照 片 說 明 疏 密 不 同 的 細 胞 組, 在 電 腦 不 同 的 處 理 下 所 呈 現 的 情 形 ( 倍 率 60X) 較 疏 組 : 細 胞 數 約 2~5 個 較 密 組 : 細 胞 數 約 55~65 個 ( 一 ) 螢 光 下 的 肌 動 蛋 白 絲 ( 綠 色 ) 螢 光 下 的 肌 動 蛋 白 絲 ( 綠 色 ) ( 二 ) 螢 光 下 的 細 胞 核 ( 藍 色 ) 螢 光 下 的 細 胞 核 ( 藍 色 ) ( 三 ) 沒 有 螢 光 的 細 胞 整 體 沒 有 螢 光 的 細 胞 整 體 203
9 2. 下 表 為 細 胞 疏 密 度 不 同 的 細 胞 組 其 肌 動 蛋 白 絲 所 呈 現 的 情 形 : 較 疏 組 較 密 組 圖 當 細 胞 形 狀 拉 的 較 長 時, 骨 架 沿 著 細 胞 膜 延 伸 圖 肌 動 蛋 白 絲 呈 交 叉 排 列 圖 在 細 胞 較 疏 的 環 境 下 骨 架 較 長 圖 肌 動 蛋 白 絲 分 佈 較 平 均 圖 肌 動 蛋 白 絲 呈 現 幾 乎 互 相 平 行 204 圖 肌 動 蛋 白 絲 分 佈 無 明 顯 方 向 性
10 3. 下 表 為 細 胞 間 疏 密 之 比 較 : 細 胞 疏 密 度 比 較 項 目 較 疏 組 較 密 組 1. 一 致 性 較 高 ( 見 圖 1-3-1) 骨 架 方 向 的 一 致 性 2. 接 近 平 行 ( 見 圖 1-3-1) 1. 一 致 性 較 低 ( 見 圖 1-1-2) 2. 錯 綜 複 雜 ( 見 圖 1-2-2) 3. 順 著 細 胞 伸 展 的 方 向 ( 見 圖 1-2-1) 3. 沒 有 明 顯 的 伸 展 方 向 ( 見 圖 1-1-2) 1. 較 長 ( 見 圖 1-3-1) 骨 架 長 短 及 粗 細 2. 粗 細 無 明 顯 相 對 關 係 1. 較 短 ( 見 圖 1-3-2) 2. 粗 細 無 明 顯 相 對 關 係 細 胞 形 狀 可 延 展 較 長, 細 胞 形 狀 較 長 伸 展 空 間 有 限, 細 胞 形 狀 較 圓 骨 架 張 力 因 延 展, 骨 架 線 條 拉 的 較 緊 由 細 胞 膜 邊 緣 可 看 出 鬚 狀 的 骨 架, 線 條 拉 的 較 鬆 實 驗 二 : 細 胞 有 絲 分 裂 各 期 型 態 與 細 胞 骨 架 的 關 係 細 胞 週 期 可 分 為 G1 G2 S M 四 期 G1 為 細 胞 生 長 期 S 為 DNA 複 製 期 G2 為 細 胞 分 裂 準 備 期,M 期 為 細 胞 分 裂 期 下 圖 為 細 胞 週 期 的 螢 光 染 色, 綠 色 藍 色 紅 色 依 序 為 紡 綞 絲 (Spindle microtubule) 染 色 體 (Chromosomes) 及 細 胞 骨 架 (cytoskeleton); 其 中 除 第 一 張 圖 為 G2 期, 餘 皆 為 M 期 中 的 各 期 : 205
11 M 期 為 本 實 驗 所 觀 察 的 時 期, 即 細 胞 真 正 進 行 有 絲 分 裂 的 時 期 下 為 不 同 分 裂 時 間 點 的 實 驗 照 片 : 圖 3-1 上 圖 皆 為 尚 未 進 行 分 裂 的 兩 顆 細 胞, 可 看 出 細 胞 核 內 沒 有 點 狀 的 螢 光 物 質 下 面 十 張 照 片 從 剛 開 始 進 行 分 裂 到 分 裂 結 束, 可 大 致 描 述 M 期 的 分 裂 情 形 兩 張 為 一 組 ( 左 為 有 染 色 時, 右 為 原 本 之 細 胞, 可 對 照 比 較 各 階 段 細 胞 的 肌 動 蛋 白 絲 與 細 胞 核 的 變 化 ): 1. 圖 分 裂 時 細 胞 核 出 現 被 綠 色 螢 光 標 記 的 物 質 圖 可 清 楚 看 到 兩 個 細 胞 核 206
12 2. 圖 骨 架 模 糊 無 清 楚 線 條 圖 可 清 楚 看 到 兩 個 細 胞 核 相 連 3. 圖 質 內 骨 架 模 糊 散 亂 圖 核 尚 有 部 分 連 接 207
13 4. 圖 兩 顆 細 胞 逐 漸 成 形 並 分 離 圖 核 已 完 全 分 開 5. 圖 細 胞 分 裂 末 期, 核 中 已 無 綠 色 點 狀 螢 光 出 現 圖 細 胞 核 已 完 全 分 開 208
14 捌 討 論 在 實 驗 一, 我 們 觀 察 細 胞 在 疏 密 環 境 不 同 時 細 胞 的 形 態 與 骨 架 的 關 係, 但 是 細 胞 是 如 何 感 受 到 與 其 他 細 胞 之 間 疏 密 度 的 不 同 呢? 我 們 認 為, 細 胞 是 因 為 受 其 他 細 胞 擠 壓 所 致, 所 以 在 細 胞 與 細 胞 間 較 疏 鬆 時, 細 胞 因 為 可 以 盡 量 延 伸, 平 貼 於 培 養 皿 上, 故 整 體 形 狀 較 長, 肌 動 蛋 白 絲 也 拉 的 較 長, 同 時 也 較 緊 繃, 彼 此 呈 現 平 行 之 關 係 而 細 胞 在 較 緊 密 的 環 境 下, 因 為 無 空 間 可 伸 展, 所 以 骨 架 較 短, 且 拉 的 較 鬆, 骨 架 有 交 錯 排 列 的 情 形 驗 證 細 胞 形 狀 的 伸 縮 與 肌 動 蛋 白 絲 的 控 制 有 密 切 關 係 在 實 驗 二, 我 們 觀 察 細 胞 在 M 期 的 分 裂 情 形 與 骨 架 變 化 之 關 係 實 驗 結 果 發 現, 在 細 胞 分 裂 時, 原 本 線 條 清 楚 的 骨 架 此 時 變 得 模 糊, 在 細 胞 膜 邊 緣 呈 現 散 亂 的 分 布, 此 外, 細 胞 核 中 出 現 點 狀 的 螢 光, 到 了 分 裂 完 成 時, 核 中 的 點 狀 螢 光 消 失, 而 骨 架 也 重 新 出 現 就 一 般 認 知 而 言, 骨 架 的 位 置 是 在 細 胞 核 至 胞 膜 之 間, 與 肌 動 蛋 白 絲 特 異 性 結 合 的 抗 體 不 應 該 會 偵 測 到 其 他 物 質, 為 此 奇 特 現 象, 我 們 做 了 以 下 天 馬 行 空 的 推 測, 探 討 核 中 物 質 的 出 現 原 因 : 1. 分 裂 時 細 胞 的 不 穩 定, 使 核 內 某 種 物 質 也 一 併 被 激 發, 表 現 出 螢 光 2. 分 裂 時, 核 膜 的 通 透 性 大 量 增 加, 少 部 份 接 在 二 抗 上 的 螢 光 團 破 碎 並 經 由 沒 有 專 一 性 的 孔 道 進 入 核 內 3. 分 裂 時 細 胞 的 不 穩 定, 使 因 變 化 而 散 亂 的 骨 架, 帶 著 一 級 抗 體 二 級 抗 體 及 螢 光 團 一 併 進 入 核 內 4. 就 我 們 拍 出 的 照 片 而 言, 取 樣 了 五 十 幾 盤 細 胞, 卻 很 難 找 到 剛 好 分 裂 到 一 半 的 細 胞, 可 見 細 胞 的 分 裂 速 度 非 常 快, 所 以 我 們 的 實 驗 結 果 照 片 才 會 多 偏 重 在 快 要 分 裂 及 剛 分 裂 完 這 部 份 5. 核 內 可 能 存 在 肌 動 蛋 白 絲, 在 分 裂 時 為 了 維 持 形 狀 的 穩 定 性, 會 從 原 本 的 游 離 奘 聚 合 成 明 顯 的 骨 架, 以 便 控 制 細 胞 核 的 分 裂, 所 以 才 有 M 期 出 現 被 螢 光 標 記 的 物 質 玖 結 論 1. 細 胞 與 細 胞 間 密 度 越 低, 其 肌 動 蛋 白 絲 越 長 方 向 性 越 一 致, 鮮 少 交 錯, 且 明 顯 地 順 著 細 胞 伸 展 方 向, 密 度 越 高 則 反 之 2. 細 胞 在 分 裂 時 的 肌 動 蛋 白 絲, 較 分 裂 前 更 為 密 集, 直 到 分 裂 後 才 又 出 現 和 原 來 一 樣 明 顯 的 絲 狀 3. 一 般 在 生 長 期 之 細 胞, 核 內 不 會 有 綠 色 螢 光 ( 對 肌 動 蛋 白 絲 有 高 度 專 一 性 ), 但 在 細 胞 分 裂 時, 核 內 出 現 被 標 記 螢 光 之 物 質, 且 持 續 至 兩 個 細 胞 核 完 全 分 離 拾 感 想 與 未 來 展 望 這 次 能 夠 完 成 這 項 研 究 首 先 特 別 感 謝 師 長 及 學 姊 學 長 們, 在 這 一 年 多 來, 不 論 是 實 驗 操 作 上 的 指 導, 或 是 理 論 的 基 本 概 念 解 說, 對 我 們 來 說 都 是 很 大 的 收 穫 與 難 得 的 經 驗 再 者, 也 要 感 謝 有 這 次 專 題 研 究 的 機 會, 從 一 開 始 的 靈 感 激 發 蒐 集 資 料, 到 開 始 著 手 進 行 研 究, 這 中 間 的 過 程 是 我 們 最 珍 惜 的, 不 僅 學 到 了 許 多 學 術 上 的 知 識, 也 學 會 如 何 對 一 件 事 思 考 209
15 提 出 問 題 與 想 法 更 學 會 與 他 人 溝 通 交 換 彼 此 意 見, 相 信 在 不 久 後 的 將 來, 在 接 觸 學 問 的 研 究 身 處 群 體 生 活 勇 於 提 出 自 己 的 想 法 和 接 納 他 人 的 意 見 皆 有 相 當 大 的 幫 助 此 外, 也 要 感 謝 自 然 科 教 師 長 期 以 來 的 指 教 與 陪 伴, 在 我 們 遇 到 困 難 時, 恰 如 其 分 地 給 予 懇 切 的 建 議, 並 和 我 們 討 論 實 驗 的 內 容, 提 醒 我 們 一 些 需 要 改 進 的 地 方 當 然 還 有 傳 授 親 身 經 驗 的 學 姊 不 時 為 我 們 打 氣 的 學 妹 及 互 相 鼓 勵 一 同 奮 鬥 的 同 學 們 這 次 的 實 驗 是 暫 時 告 一 段 落, 未 來 我 們 希 望 能 朝 以 下 幾 點 進 一 步 發 展 : 1. 進 一 步 研 究 同 是 細 胞 骨 架 的 中 間 絲 微 質 管 與 細 胞 型 態 的 關 係, 如 此 一 來, 掌 握 到 三 種 骨 架 的 形 態, 可 再 做 疊 合 或 是 分 開 分 析 比 較, 得 到 細 胞 骨 架 與 型 態 更 進 一 步 的 相 對 關 係 2. 生 物 界 存 在 各 種 形 狀 的 細 胞, 例 如 : 長 條 分 節 的 肌 肉 細 胞 扁 平 的 表 皮 細 胞 神 經 細 胞 雙 凹 圓 盤 狀 的 紅 血 球 細 胞 柱 狀 細 胞.. 除 了 部 分 原 因 是 為 了 適 應 環 境 及 發 揮 其 功 能 外, 細 胞 的 形 狀 想 必 也 跟 細 胞 骨 架 有 密 切 關 聯, 更 深 入 針 對 各 種 不 同 形 狀 的 細 胞, 以 相 同 的 免 疫 螢 光 染 色 方 法, 探 討 與 其 骨 架 的 關 係, 並 比 較 之 3. 利 用 縱 向 切 片, 在 電 腦 上 組 合 成 一 個 立 體 結 構 的 細 胞, 藉 以 研 究 細 胞 在 分 裂 時 期 與 其 骨 架 的 變 化, 細 胞 如 何 利 用 骨 架 的 變 化 維 持 穩 定 性 及 進 行 分 裂, 立 體 結 構 比 平 面 更 為 精 準 可 信 4. 以 特 定 的 無 毒 螢 光 染 劑, 擴 散 通 過 細 胞 膜, 再 利 用 細 胞 之 粒 線 體 激 發 螢 光, 即 可 在 螢 光 顯 微 鏡 下 觀 察 立 體 動 態 的 細 胞 分 裂 情 形 與 骨 架 的 運 動 關 係 5. 以 破 壞 骨 架, 來 摧 毀 細 胞, 在 藥 學 上 已 運 用 廣 泛 ( 如 Vincristine), 除 了 病 變 的 細 胞 外, 能 否 也 應 用 在 病 毒 上, 值 得 研 究 6. 應 激 纖 維 (Stress Fiber) 由 肌 動 蛋 白 絲 構 成, 目 的 在 於 與 細 胞 膜 接 合, 穩 定 聚 焦 接 觸 點 ( 下 圖 之 紅 點 ), 以 便 細 胞 黏 貼 在 物 體 表 面 可 做 免 疫 螢 光 染 色 進 一 步 觀 察 該 點 7. 利 用 同 步 化 使 所 有 培 養 皿 上 的 細 胞 週 期 同 時 進 行, 假 定 共 10 盤 細 胞, 培 養 在 培 養 皿 上 後, 每 兩 小 時 拿 出 一 盤 培 養 皿 做 免 疫 螢 光 染 色, 便 可 更 精 確 的 鎖 定 分 裂 週 期, 拍 到 細 胞 核 與 細 胞 核 分 裂 到 一 半 的 照 片, 也 能 一 次 做 更 大 量 的 取 樣, 以 利 比 較 210
16 拾 參 考 資 料 及 其 他 一 書 籍 : 1. Campbell 李 家 維 等 編 譯 (2001) 生 物 學 偉 明 圖 書 出 版 2. 林 榮 培 楊 揚 輝 螢 光 顯 微 鏡 檢 查 法 行 政 院 農 業 委 員 會 家 畜 試 驗 所 3. 魏 保 生 主 編 細 胞 和 分 子 生 物 學 科 學 出 版 社 二 網 頁 : 1. 螢 光 顯 微 鏡 下 的 細 胞 National Institute for Medical Research 2. 維 基 百 科
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经 无 数 次 的 提 取 和 提 纯, 最 终 得 到 一 小 匙 东 西 这 种 东 西 在 显 微 镜 下 呈 现 出 针 状 晶 体 的 形 状, 在 水 中 溶 解 后 得 到 一 种 带 乳 光 的 汁 液 当 他 将 少 许 溶 液 涂 抹 健 康 烟 叶 上 几 天 后, 这 烟 叶
生 命 的 历 程 什 么 是 生 命 生 命 是 什 么? 人 类 是 生 命 体 的 一 类, 他 们 有 组 织 器 官 等 形 体 上 的 相 同 之 处, 但 也 有 性 别 年 龄 肤 色 等 巨 大 的 差 别 ; 我 们 知 道 成 千 上 万 种 动 物 植 物 直 至 微 生 物 都 是 生 命 体, 因 为 它 们 同 人 类 一 样 都 有 产 生 生 长 衰 老 及 消 亡
去 中 和 ; [3] 消 化 最 好 在 37 培 养 箱 或 室 温 25 以 上 的 环 境 下 进 行 消 化, 消 化 2--5 min 后, 把 培 养 瓶 放 在 显 微 镜 下 观 察, 发 现 胞 质 回 缩 细 胞 间 隙 增 大, 细 胞 变 圆 后, 立 即 将 培 养 瓶
![去 中 和 ; [3] 消 化 最 好 在 37 培 养 箱 或 室 温 25 以 上 的 环 境 下 进 行 消 化, 消 化 2--5 min 后, 把 培 养 瓶 放 在 显 微 镜 下 观 察, 发 现 胞 质 回 缩 细 胞 间 隙 增 大, 细 胞 变 圆 后, 立 即 将 培 养 瓶](/thumbs/42/23090277.jpg "去 中 和 ; [3] 消 化 最 好 在 37 培 养 箱 或 室 温 25 以 上 的 环 境 下 进 行 消 化, 消 化 2--5 min 后, 把 培 养 瓶 放 在 显 微 镜 下 观 察, 发 现 胞 质 回 缩 细 胞 间 隙 增 大, 细 胞 变 圆 后, 立 即 将 培 养 瓶")
第 一 节 细 胞 培 养 的 相 关 技 术 1 细 胞 的 复 苏 概 述 复 苏 细 胞 要 求 快 速 融 化 的 手 段, 这 样 可 以 保 证 细 胞 外 结 晶 在 很 短 的 时 间 内 即 融 化 避 免 由 于 缓 慢 融 化 使 水 分 渗 入 细 胞 内 形 成 胞 内 再 结 晶 对 细 胞 造 成 损 害 用 品 培 养 液 吸 管 离 心 管 培 养 瓶 步 骤 [1]
生物真题+模拟卷（14）.FIT)
教 师 招 聘 考 试 中 学 生 物 全 真 模 拟 试 卷 ( 一 ) 渊 时 间 院 120 分 钟 满 分 院 100 分 冤 一 尧 单 项 选 择 题 渊 圆 园 小 题 袁 每 小 题 员 分 袁 共 圆 园 分 冤 员 援 关 于 人 体 细 胞 功 能 和 结 构 的 叙 述 袁 正 确 的 是 渊 粤 援 在 细 胞 核 内 砸 晕 粤 能 够 传 递 和 表 达 遗 传 信 息
附件四：作品送展表（夾於作品說明書第一頁，請勿裝訂）
嘉 義 市 第 31 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明 書 科 別 : 生 活 與 應 用 科 學 科 組 別 : 國 小 組 作 品 名 稱 : 果 真 有 酵 - 水 果 酵 素 的 應 用 關 鍵 詞 : 水 果 酵 素 環 保 編 號 : 1 摘 要 本 研 究 主 要 的 目 的 是 蒐 集 常 見 的 水 果, 利 用 多 餘 的 果 皮 和 剩 餘 的 果 肉 製 造
校园之星
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( 总 第 1094 1095 期 ) 浙 江 省 人 民 政 府 主 办 2015 年 10 月 20 日 出 版 省 政 府 文 件 浙 江 省 人 民 政 府 关 于 全 面 开 展 县 域 经 济 体 制 综 合 改 革 的 指 导 意 见 ( 浙 政 发 2015 31 号 ) (3) 省
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國立中山大學學位論文典藏.PDF
國 立 中 山 大 學 中 國 文 學 系 ( 暑 期 專 班 ) 碩 士 在 職 專 班 碩 士 論 文 漢 初 異 姓 諸 侯 王 研 究 研 究 生 : 林 裕 斌 撰 指 導 教 授 : 劉 文 強 教 授 中 華 民 國 97 年 5 月 摘 要 本 篇 論 文 探 究 的 對 象 是 漢 朝 初 年 八 位 異 姓 諸 侯 王, 並 涵 蓋 與 操 縱 他 們 興 盛 殞 落 息 息 相
商 周 三 代 年 代 學 的 研 究 經 過 近 五 年 的 努 力, 完 成 夏 商 周 年 表 本 大 事 概 覽 中 夏 商 周 三 代 的 大 事 紀 年, 即 採 用 夏 商 周 斷 代 工 程 的 考 論 成 果 對 於 無 法 考 證 年 份 的 史 事 或 發 生 在 史 前 時
中 外 歷 史 大 事 概 覽 編 者 說 明 : 1. 傳 說 時 代 與 夏 商 周 年 表 : 人 類 在 未 有 文 字 記 事 之 前, 口 耳 相 傳 的 神 話 傳 說, 是 先 民 對 自 然 變 化 的 體 驗 與 歷 史 經 歷 的 口 述 這 些 傳 說, 或 者 存 有 誇 張 和 穿 鑿, 隨 著 考 古 文 物 的 出 土 與 歷 史 學 家 的 努 力, 汰 偽 存 真,
第 三 条 实 验 室 技 术 安 全 工 作 贯 彻 以 人 为 本 安 全 第 一 预 防 为 主 综 合 治 理 的 方 针 各 单 位 及 教 职 工 学 生 应 树 立 安 全 意 识, 履 行 安 全 义 务 承 担 安 全 责 任 第 四 条 实 验 室 技 术 安 全 工 作 坚 持
校 发 2015 28 号 北 京 科 技 大 学 实 验 室 技 术 安 全 管 理 规 定 第 一 章 总 则 第 一 条 为 加 强 学 校 实 验 室 安 全 管 理, 防 止 实 验 室 安 全 事 故 发 生, 保 障 教 职 工 及 学 生 的 人 身 财 产 安 全, 促 进 学 校 各 项 事 业 健 康 稳 定 发 展, 根 据 国 家 相 关 法 律 法 规, 结 合 学 校
2015年全国硕士研究生入学考试
2015 年 全 国 硕 士 研 究 生 入 学 考 试 佛 山 科 学 技 术 学 院 自 命 题 考 试 科 目 考 试 大 纲 ( 科 目 名 称 : 农 业 知 识 综 合 二 科 目 代 码 :340 ) 一 考 查 目 标 农 业 知 识 综 合 二 侧 重 于 动 物 生 产 类 综 合 知 识 的 考 查 考 试 内 容 应 主 要 涵 盖 动 物 遗 传 学 动 物 生 理 学 动
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臺 北 縣 立 樟 樹 國 中 96 學 年 度 第 二 學 期 區 域 性 自 然 科 學 領 域 資 賦 優 異 教 育 方 案 實 施 計 劃 一 依 據 : ( 一 ) 特 殊 教 育 法 第 二 十 九 條 ( 二 ) 特 殊 教 育 法 施 行 細 則 第 四 條 第 二 項 ( 三 ) 身 心 障 礙 及 資 賦 優 異 學 生 鑑 定 標 準 二 目 的 : ( 一 ) 推 廣 資
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中国商人必胜宝典--各地商人性格特征剖析
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中 国 太 平 洋 人 寿 保 险 股 份 有 限 公 司 世 纪 行 人 身 意 外 伤 害 保 险 (C 款 ) 条 款 太 平 洋 人 寿 [2013] 意 外 伤 害 保 险 062 号 阅 读 指 引 本... 阅 读 指 引 有 助 于 理 解 条 款, 对 本 合 同 内 容 的 解 释 以 条 款 为 准 您 拥 有 的 重 要 权 益 本 合 同 提 供 的 保 障 在 保 险 责
徐州市财政局文件
徐 州 市 财 政 局 2016 年 部 门 预 算 第 一 部 分 部 门 概 况 一 部 门 主 要 职 责 ( 一 ) 切 实 履 行 宏 观 调 控 职 责, 参 与 制 定 各 项 宏 观 经 济 政 策, 提 出 运 用 财 税 政 策 实 施 宏 观 调 控 促 进 经 济 发 展 方 式 转 变 综 合 平 衡 社 会 财 力 促 进 区 域 协 调 发 展 和 推 进 基 本 公
谋 划 实 施 五 大 功 能 区 域 发 展 战 略, 全 市 一 体 化 发 展 效 能 显 著 提 升 我 们 按 照 国 家 区 域 发 展 战 略 新 型 城 镇 化 和 生 态 文 明 建 设 等 新 要 求, 立 足 重 庆 实 际, 综 合 考 虑 人 口 资 源 环 境 经 济 社
2016 年 重 庆 市 人 民 政 府 工 作 报 告 2016 年 1 月 24 日 在 重 庆 市 第 四 届 人 民 代 表 大 会 第 四 次 会 议 上 重 庆 市 人 民 政 府 市 长 黄 奇 帆 各 位 代 表 : 我 代 表 市 人 民 政 府, 向 大 会 报 告 工 作, 请 连 同 重 庆 市 国 民 经 济 和 社 会 发 展 第 十 三 个 五 年 规 划 纲 要 (
关于章丘市2015年财政预算
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关 于 2015 年 全 省 财 政 预 算 执 行 情 况 和 2016 年 全 省 及 省 级 财 政 预 算 草 案 的 报 告 2016 年 1 月 16 日 在 甘 肃 省 第 十 二 届 人 民 代 表 大 会 第 四 次 会 议 上 甘 肃 省 财 政 厅 各 位 代 表 : 受 省 人 民 政 府 委 托, 现 将 2015 年 全 省 财 政 预 算 执 行 情 况 和 2016
12.2016 年 省 本 级 国 有 资 本 经 营 收 入 支 出 预 算 表 13. 关 于 2016 年 省 本 级 国 有 资 本 经 营 预 算 的 说 明
甘 肃 省 省 本 级 2016 年 预 算 1.2016 年 省 本 级 一 般 公 共 预 算 收 入 预 算 表 2.2016 年 省 本 级 一 般 公 共 预 算 支 出 预 算 表 3.2016 年 省 本 级 一 般 公 共 预 算 基 本 支 出 预 算 表 4.2016 年 省 本 级 一 般 公 共 预 算 三 公 经 费 会 议 费 培 训 费 安 排 汇 总 表 5. 关 于
信 息 公 开 选 项 : 主 动 公 开 分 送 : 国 家 发 展 改 革 委 规 划 司 抄 送 : 各 市 发 展 和 改 革 委 员 会 住 房 和 城 乡 建 设 委 员 会 ( 局 ), 自 治 区 农 垦 局, 中 国 人 民 银 行 南 宁 中 心 支 行 广 西 壮 族 自 治
广 西 壮 族 自 治 区 发 展 和 改 革 委 员 会 广 西 壮 族 自 治 区 住 房 和 城 乡 建 设 厅 桂 发 改 城 镇 2016 440 号 各 市 县 人 民 政 府, 自 治 区 人 民 政 府 各 组 成 部 门 各 直 属 机 构 : 根 据 国 务 院 深 入 推 进 新 型 城 镇 化 建 设 电 视 电 话 会 议 全 区 经 济 工 作 会 议 以 及 自 治 区
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中 评 协 办 2016 13 号 中 国 资 产 评 估 协 会 关 于 印 发 2016 年 度 中 国 资 产 评 估 协 会 培 训 计 划 的 通 知 各 省 自 治 区 直 辖 市 计 划 单 列 市 资 产 评 估 协 会 ( 有 关 注 册 会 计 师 协 会 ): 现 将 2016 年 度 中 国 资 产 评 估 协 会 培 训 计 划 印 发 给 你 们, 请 按 要 求 认 真
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表 一 : 2015 年 江 苏 省 一 般 公 共 预 算 收 支 执 行 情 况 表 收 入 项 目 2015 年 执 行 数 2014 年 决 算 数 增 长 率 支 出 项 目 2015 年 执 行 数 2014 年 决 算 数 增 长 率 收 入 合 计 80,285,861 72,331,426 11.0% 支 出 合 计 96,814,691 84,724,466 14.3% 1. 税
但 是, 也 应 清 醒 地 看 到, 目 前 我 国 公 民 科 学 素 质 水 平 与 发 达 国 家 相 比 仍 有 较 大 差 距, 全 民 科 学 素 质 工 作 发 展 还 不 平 衡, 不 能 满 足 全 面 建 成 小 康 社 会 和 建 设 创 新 型 国 家 的 需 要 主 要
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施 意 见 一 指 导 思 想 贯 彻 党 中 央 国 务 院 重 大 决 策, 按 照 我 省 实 施 三 大 发 展 战 略 奋 力 推 进 两 个 跨 越 的 总 体 部 署, 主 动 适 应 经 济 发 展 新 常 态, 主 动 融 入 产 业 转 型 升 级 和 创 新 驱 动 发 展,
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综 合 管 廊 建 设 ( 二 ) 基 本 原 则 1 规 划 引 领, 适 度 超 前 以 城 市 总 体 规 划 为 依 据, 结 合 道 路 地 下 空 间 等 主 体 工 程 规 划, 充 分 衔 接 各 专 业 管 线 专 项 规 划, 适 度 超 前 编 制 地 下 综 合 管 廊 专
广 东 省 城 市 地 下 综 合 管 廊 建 设 实 施 方 案 为 贯 彻 落 实 国 务 院 办 公 厅 关 于 推 进 城 市 地 下 综 合 管 廊 建 设 的 指 导 意 见 ( 国 办 发 2015 61 号 ), 解 决 反 复 开 挖 路 面 管 线 事 故 频 发 等 问 题, 提 高 城 市 安 全 保 障 水 平 和 运 转 效 率, 提 升 城 市 综 合 承 载 力 和
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揭 府 办 函 2016 71 揭 阳 市 人 民 政 府 办 公 室 关 于 印 发 揭 阳 市 2016 年 政 府 信 息 公 开 工 作 要 点 分 工 方 案 的 通 知 各 县, 市 直 及 中 央 省 驻 揭 有 关 单 位 : 揭 阳 市 2016 年 政 府 信 息 公 开 工 作 要 点 分 工 方 案 已 经 市 人 民 政 府 同 意, 现 印 发 给 你 们, 请 结 合
辽宁省十二届人大
关 于 辽 宁 省 2015 年 预 算 执 行 情 况 和 2016 年 预 算 草 案 的 报 告 2016 年 1 月 26 日 在 辽 宁 省 第 十 二 届 人 民 代 表 大 会 第 六 次 会 议 上 辽 宁 省 财 政 厅 各 位 代 表 : 受 省 人 民 政 府 委 托, 向 大 会 报 告 2015 年 全 省 财 政 收 支 预 算 执 行 情 况, 提 出 2016 年 全
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马 鞍 山 大 事 记 编 辑 说 明 一 2016 年 马 鞍 山 大 事 记 ( 季 刊 ) 采 取 编 年 体 和 纪 事 本 末 体 相 结 合 的 方 法, 记 述 马 鞍 山 市 本 年 度 的 大 事 和 要 事 依 时 叙 事, 一 事 一 记 二 根 据 安 徽 省 第 二 届 志 书 编 纂 行 文 规 范 要 求, 本 刊 内 文 中 第 一 次 出 现 的 人 物 在 其 姓
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西 秀 区 人 民 政 府 公 报 西 秀 区 人 民 政 府 主 管 主 办 2015 年 10 月 21 日 第 3 期 目 录 主 任 : 张 勇 副 主 任 : 王 启 平 委 员 : 朱 霞 益 齐 林 梁 晓 雯 诸 永 红 汪 波 熊 杰 叶 会 飞 主 编 : 朱 霞 益 执 行 副 主 编 : 齐 林 副 主 编 : 王 海 潘 盛 斌 吴 丁 李 昌 军 王 幸 何 午 编 审
开 发 利 用 规 划, 统 筹 地 下 各 类 设 施 管 线 布 局, 原 则 上 不 允 许 在 中 心 城 区 规 划 新 建 生 产 经 营 性 危 险 化 学 品 输 送 管 线, 其 他 地 区 新 建 的 危 险 化 学 品 输 送 管 线, 不 得 在 穿 越 其 他 管 线 等
国 务 院 办 公 厅 关 于 加 强 城 市 地 下 管 线 建 设 管 理 的 指 导 意 见 国 办 发 2014 27 号 各 省 自 治 区 直 辖 市 人 民 政 府, 国 务 院 各 部 委 各 直 属 机 构 : 城 市 地 下 管 线 是 指 城 市 范 围 内 供 水 排 水 燃 气 热 力 电 力 通 信 广 播 电 视 工 业 等 管 线 及 其 附 属 设 施, 是 保 障
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2016 年 非 公 开 发 行 股 票 募 集 资 金 使 用 可 行 性 分 析 为 推 动 福 建 龙 马 环 卫 装 备 股 份 有 限 公 司 ( 以 下 简 称 龙 马 环 卫 公 司 或 母 公 司 ) 和 厦 门 福 龙 马 环 境 工 程 有 限 公 司 ( 以 下 简 称 厦 门
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第一章 前言
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产 品 明 细 及 功 效 [ 名 称 ]: 都 市 翡 翠 红 枣 粉 (100 克 ) [ 功 效 ]: 瘦 身, 美 白, 防 止 衰 老, 肌 肤 红 润 [ 原 理 ]: 红 枣 有 促 进 肠 蠕 动 的 功 能, 因 此 可 以 预 防 便 秘, 还 有 一 定 的 减 肥 作 用 红 枣 富 含 美 白 因 子, 经 常 使 用 能 让 暗 黄 的 肌 肤 加 速 美 白, 有 效
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我 可 以 向 你 们 保 证 以 下 的 内 容 100% 真 实, 请 您 一 定 耐 心 看 完 从 医 15 年 来, 我 也 反 复 告 诉 病 人 这 些 事 实 但 是 没 有 人 愿 意 去 听, 更 没 有 人 愿 意 去 相 信 或 许, 我 们 的 同 胞 们 真 的 需 要
保 健 : 顶 尖 专 家 谈 癌 症 2014-03-22 权 健 3813 服 务 中 心 环 境 污 染 不 良 生 活 方 式 与 现 代 社 会 生 活 造 成 的 精 神 压 力 等 等 原 因, 使 得 我 国 癌 情 汹 涌, 人 们 也 日 益 变 得 谈 癌 色 变 最 新 数 据 显 示, 中 国 每 天 8550 人 成 为 癌 症 患 者 ; 中 国 癌 症 患 者 年 轻
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紀 念 藥 師 佛 聖 誕 美 之 食 素 金 剛 乘 弟 子 集 資 捐 印 二 冊 佛 曆 三 三 七 年 歲 次 庚 寅 八 月 廿 五 日 i 1 1 1 2 5 7 10 15 19 19 20 21 22 25 28 29 30 31 32 32 34 36 38 40 41 41 42 44 46 48 49 50 51 51 52 53 54 54 56 58 58 60 60 62
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中 華 民 國 第 四 十 四 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明 書 國 小 組 生 活 與 應 用 科 學 科 080802 臺 北 縣 三 重 市 興 穀 國 民 小 學 指 導 老 師 姓 名 黃 小 紋 黃 書 卿 作 者 姓 名 邵 雅 慈 蔡 旻 真 許 瀚 心 王 澤 雄 黃 一 崧 中 華 民 國 第 四 十 四 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明
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附 件 : 紫 光 古 汉 000590- 置 出 1.72 亿 元 应 收 帐 款 明 细 清 单 客 户 金 额 湖 南 清 华 紫 光 古 汉 药 业 有 限 公 司 16,099,600.00 湖 南 清 华 紫 光 古 汉 药 业 有 限 公 司 14,339,504.00 广 东 省 揭 东 县 新 特 药 公 司 4,610,491.11 衡 阳 市 康 馨 医 药 有 限 责 任 公
第 一 部 分 投 标 邀 请 一. 项 目 名 称 : 北 京 大 学 附 属 中 学 副 食 品 商 店 协 议 供 货 商 招 标 项 目 二. 项 目 内 容 : 北 京 大 学 附 属 中 学 采 购 中 心 现 就 学 校 副 食 品 商 店 的 供 货 协 议 商 进 行 招 标, 中
北 京 大 学 附 属 中 学 副 食 品 商 店 协 议 供 货 商 招 标 项 目 招 标 文 件 招 标 人 : 北 京 大 学 附 属 中 学 二 〇 一 五 年 十 一 月 第 一 部 分 投 标 邀 请 一. 项 目 名 称 : 北 京 大 学 附 属 中 学 副 食 品 商 店 协 议 供 货 商 招 标 项 目 二. 项 目 内 容 : 北 京 大 学 附 属 中 学 采 购 中 心
材料與方法
10-12 250-350 Sprague-Dawley rat ( SD ) 12 ( AM 8 00-PM 8 00 ) (Control group) (HS) (Heat shock group) 15 0 4 6 16 24 (PAE) ( Pulmonary air embolism group) 20 40 (25 l/min) 40 17 20 (HS&PAE) 15 4 16 20
禽 病 治 疗 过 程 中 的 用 药 误 区 及 防 治 对 策 一 用 药 误 区 : 目 前, 在 禽 类 疾 病 的 治 疗 过 程 中, 药 物 的 应 用 经 常 存 在 以 下 几 个 方 面 的 误 区 和 不 足 : 1 不 注 意 给 药 的 时 间 : 无 论 什 么 药 物, 因 固 定 给 药 模 式 或 用 药 习 惯, 不 是 在 料 前 喂, 就 是 在 料 后 喂
学院信息第八期
石 景 山 区 业 余 大 学 暨 石 景 山 社 区 学 院 学 院 信 息 半 月 刊 每 月 15 日 30 日 下 发 2013 年 第 四 期 ( 总 第 145 期 ) 2013 年 4 月 15 日 本 期 要 目 学 习 型 组 织 建 设 1 业 余 大 学 召 开 党 总 支 2013 年 工 作 计 划 布 置 会 学 习 党 章 新 内 容 用 行 动 为 党 旗 增 光 添
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2005-11
2005-11 看 不 见 的 星 球 告 诉 我 一 些 迷 人 的 星 球 吧, 我 不 喜 欢 残 酷 和 恶 心 的 场 面 你 说 好 吧, 我 笑 着 点 点 头, 当 然, 没 问 题 希 希 拉 加 希 希 拉 加 是 一 个 迷 人 的 星 球, 鲜 花 和 湖 泊 让 所 有 旅 人 过 目 不 忘 在 希 希 拉 加, 你 见 不 到 一 寸 裸 露 的 土 壤, 每 一 块
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11 12 12 14 14 16 16 18 18 19 19 20 21 22 22 23 24 26 26 33 38 39 42 44 49 52 54 55 55 87 99 132 141 141 143 144 146 147 148 152 158 159 159 160 161 161 162 162 165 172 173 173 174 183 184 184 185 199
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16 11 6 9 1920 900 31 350 60 3 5 36 150 50 60 2000 1000 1974 8200 1978 25000 1983 2097 7 35 1984 1295 43 500 700 2 3 65 50 10 1 3 5 5 10 1757 150 100 1950 100 60 1953 1968 118 05 142 45 1976 601 2 523
除外責任修正條文對照.doc
宏 泰 人 壽 住 院 醫 療 保 險 附 約 除 外 責 任 本 次 送 審 條 文 前 次 送 審 條 文 說 明 第 十 一 條 : 被 保 險 人 因 下 列 原 因 所 致 之 疾 病 或 傷 害 而 住 院 診 療 者, 本 公 司 不 負 給 付 該 被 保 險 人 各 項 保 險 金 的 責 任 一 被 保 險 人 之 故 意 行 為 ( 包 括 自 殺 及 自 殺 未 遂 ) 二
卫生监督信息2(12).FIT)
目 录 惠 州 监 督 信 息 匀 哉 陨 在 匀 韵 哉 陨 晕 云 韵 砸 酝 粤 栽 陨 韵 晕 韵 云 匀 耘 粤 蕴 栽 匀 陨 晕 杂 孕 耘 悦 栽 陨 晕 本 刊 专 稿 我 所 召 开 野 三 打 冶 工 作 推 进 会 专 题 专 栏 渊 1 冤 圆 园 员 2 年 第 2 期 渊 总 第 猿 7 期 冤 三 打 两 建 惠 州 卫 监 人 在 行 动 渊 2 冤 野 三 德 冶
兽医临床诊断学实验指导
兽 医 临 床 诊 断 学 实 验 指 导 河 北 科 技 师 范 学 院 动 物 科 学 系 临 床 兽 医 学 实 验 室 2009 年 2 月 目 录 学 生 实 验 守 则... 3 实 习 一 动 物 的 接 近 保 定 和 基 本 检 查 法...4 实 习 二 临 床 基 本 检 查 法 及 一 般 检 查...10 实 习 三 循 环 系 统 的 临 床 检 查...15 实 习 四
海宁史志1ML.FIT)
2013 年 第 1 期 总 第 29 期 海 宁 市 史 志 办 公 室 海 宁 市 史 志 学 会 海 宁 州 志 稿 金 石 志 序 叶 海 宁 州 志 稿 曳 渊 李 圭 袁 刘 蔚 仁 袁 朱 宝 瑨 等 编 袁 1922 年 遥 冤 范 金 伐 石 以 传 文 字, 古 人 所 托 以 不 朽, 而 后 入 资 以 考 古 者 也 近 世 之 儒, 咸 重 金 石 之 文, 或 据 以
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103- 衛 生 與 護 理 類 專 業 科 目 ( 一 ) 1. 有 關 原 始 生 物 起 源 的 演 化 大 方 向 中, 下 列 何 者 正 確? (A) 由 好 氧 厭 氧 (B) 由 構 造 複 雜 構 造 簡 單 (C) 由 異 營 自 營 (D) 由 多 細 胞 單 細 胞. 植 物 的 莖 頂 及 根 尖 細 胞 利 用 能 量 進 行 細 胞 分 裂, 與 下 列 何 種 生 命
细 胞 生 物 学 实 验 指 导 细 胞 生 物 教 研 室 目 录 实 验 一 动 物 细 胞 的 基 本 形 态 观 察 和 显 微 测 量 1 实 验 二 线 粒 体 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 4 实 验 三 液 泡 系 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 6 实 验 四 细 胞 生 理 活 动 的 观 察 7 实 验 五 细 胞 组 分 的 化 学 反 应
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疾 病 名 柯 萨 奇 病 毒 感 染 英 文 名 coxsackie virus infections 缩 写 别 名 ICD 号 A08.3 概 述 柯 萨 奇 病 毒 感 染 是 由 柯 萨 奇 病 毒 引 起 的 病 毒 性 感 染 性 疾 病 临 床 表 现 复 杂 多 样, 有 无 菌 性 脑 膜 炎 脑 炎 心 肌 炎 心 包 炎 流 行 性 胸 肌 痛 疱 疹 性 咽 峡 炎 等,
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宜蘭縣風景區管理所五峰旗風景特定風景區開放行動咖啡車作業投標須知
宜 蘭 縣 礁 溪 鄉 湯 圍 溝 公 園 委 託 經 營 管 理 契 約 書 立 契 約 書 人 宜 蘭 縣 政 府 ( 以 下 簡 稱 甲 方 ) 為 充 分 利 用 湯 圍 溝 公 園 空 間 效 益, 並 提 昇 遊 憩 服 務 品 質, 特 委 託 ( 以 下 簡 稱 乙 方 ) 經 營 管 理, 特 訂 定 本 契 約, 契 約 內 容 如 后 : 第 一 條 : 一 契 約 文 件 及
第 二 十 七 章 一 夜 苦 熬 第 二 十 八 章 租 房 同 居 第 二 十 九 章 二 人 世 界 第 三 十 章 取 消 面 试 第 三 十 一 章 中 暑 卧 床 第 三 十 二 章 找 到 工 作 第
商 场 风 月 之 新 欢 旧 爱 七 寸 明 月 / 著 第 一 章 凌 晨 惊 梦... 4 第 二 章 前 台 MM... 7 第 三 章 陪 赌 陪 嫖... 11 第 四 章 淫 声 荡 语... 15 第 五 章 孤 儿 报 恩... 19 第 六 章 一 招 断 腕... 21 第 七 章 惹 毛 警 察... 26 第 八 章 痛 扁 犯 人... 29 第 九 章 薄 惩 邢 科...
12 12 1 30 40 20 30 10 20 6 10 10 2 34.8 56.1 18.0 20.9 3.8 0.4 17.9 18.3 11.7 9.1 9.1 8.3 9.2 6.3 10.8 8.0 3 1949 1952 1957 1965 1975 1980 1985 100 100 100 100 100 100 100 11.0 19.4 26.1 26.2
报 告 简 要 丽 江 古 城 位 于 云 南 省 西 北 部, 始 建 于 宋 末 元 初 古 城 西 北 方 30 公 里 处 是 海 拔 5596 米 的 玉 龙 雪 山 及 第 四 世 冰 川 遗 迹 丽 江 古 城 在 南 宋 时 期 就 初 具 规 模, 已 有 八 九 百 年 的 历
丽 江 古 城 托 管 挂 牌 可 行 性 分 析 报 告 上 海 文 化 产 权 交 易 所 申 江 文 化 商 品 运 营 服 务 平 台 二 零 一 六 年 七 月 报 告 简 要 丽 江 古 城 位 于 云 南 省 西 北 部, 始 建 于 宋 末 元 初 古 城 西 北 方 30 公 里 处 是 海 拔 5596 米 的 玉 龙 雪 山 及 第 四 世 冰 川 遗 迹 丽 江 古 城 在
有 不 良 企 图 时, 就 要 立 即 躲 开 他 当 你 实 在 难 以 分 辨 对 方 是 真 心 实 意 还 是 虚 情 假 意 时, 可 向 父 母 老 师 或 周 围 较 成 熟 和 亲 近 的 朋 友 请 教, 请 他 们 帮 你 分 析 情 况, 做 出 判 断 此 时, 拒 绝 帮
第 一 章 女 生 安 全 2009 年 11 月 2 日 深 夜,51 岁 的 农 民 李 某 翻 墙 进 入 某 中 学 行 窃, 他 悄 悄 来 到 一 小 屋 前, 并 无 所 获 见 屋 内 3 名 少 女 都 已 熟 睡, 便 生 邪 念, 欲 行 不 轨 3 少 女 慷 醒 后, 遭 李 某 的 殴 打 和 猥 亵, 其 中 一 名 16 岁 女 生 乘 机 溜 出 房 外, 将 房
《垓下歌》 項羽
1. 2. 3. 4. MM1 1 5. 6. 7. 8. MM1 2 9. ( ) 爲 10. 11. MM1 3 12. 13. 14. 15. 縧 16. MM1 4 17. 18. 19. MM1 5 20. 21. 22. 23. 24. 25. MM1 6 26. 27. 28. 29. 30. 31. MM1 7 32. 爲 33. 34. 35. 36. MM1 8 37. 38.
內 容 及 試 題 範 例 術 科 評 量 規 範 評 分 標 準 一 (, 工 具 與 材 料 由 本 校 提 供, 考 生 無 須 自 備 ) ( 一 ) 基 本 焊 接 工 具 操 作 及 辨 識 基 本 手 工 具 設 備 ( 二 ) 測 驗 時 間 50 分 鐘 ( 三 ) 工 具 與 材
104 學 年 度 高 級 中 等 學 校 特 色 招 生 職 業 類 科 甄 選 入 學 內 容 審 查 表 學 校 名 稱 ( 全 銜 ) 私 立 治 平 高 中 日 期 104 年 4 月 25 日 ( 六 ) 科 班 名 資 訊 科 特 色 班 項 目 基 本 焊 接 工 具 操 作 辨 識 基 本 手 工 具 設 備 一 可 聯 接 性 : 術 科 命 題 規 範 命 題 內 容 基 本
交 通 部 公 路 總 局 新 竹 區 監 理 所 104 年 第 2 次 契 約 服 務 員 甄 試 試 場 序 號 試 場 序 號 姓 名 A01 A02 A03 A04 A05 A06 A07 A08 A09 A10 A11 A12 A13 A14 A15 A16 張 齡 文 王 美 蕙 吳
交 通 部 公 路 總 局 新 竹 區 監 理 所 104 年 第 2 次 契 約 服 務 員 甄 試 試 場 規 則 一 考 生 應 於 考 試 當 日 攜 帶 國 民 身 分 證 正 本 或 其 他 足 資 證 明 身 分 之 證 件 於 上 午 8 時 50 分 前 至 本 所 行 政 大 樓 2 樓 道 安 教 室 入 場 考 試, 未 攜 帶 者 一 律 不 得 參 加 考 試 ; 冒 名
美 国 研 究
1991 2 1991 3 1991 4 1991 5 1991 6 1991 7 1991 8 1991 9 1991 10 1991 11 1991 12 1991 13 1991 14 1991 15 1991 16 1991 17 1991 18 1991 19 1991 20 1991 21 1991 22 1991 23 1991 24 1991 25 1991 26 1991 27 1991
材料與方法
µ µ µ κ 17 18 19 20 µ µ µ 21 H 2 DCF-DA H 2 O 2 H 2 DCF-DA 酶 esterase H 2 DCF-DA deacetylation H 2 DCF H 2 DCF H 2 DCF DCF H 2 DCF DCF Bae et al., 1997; Vanden et al., 1997; Atlante et al., 1997; Wang
精 品 库 我 们 的 都 是 精 品 _www.jingpinwenku.com A 型 题 第 1~90 小 题, 每 小 题 1.5 分, 共 135 分 第 91~120 小 题, 每 小 题 2 分, 共 60 分 B 型 题 X 型 题 第 121~150 小 题, 每 小 题 1.5
更 多 内 容 请 查 看 精 品 文 库 网 www.jingpinwenku.com 2014 年 全 国 硕 士 研 究 生 入 学 统 一 考 试 西 医 综 合 之 基 础 医 学 考 试 大 纲 Ⅰ. 考 试 性 质 西 医 综 合 考 试 是 为 高 等 院 校 和 科 研 院 所 招 收 医 学 专 业 的 硕 士 研 究 生 而 设 置 具 有 选 拔 性 质 的 全 国 统 一
G F G m m r DNA NH X A B H X I I I C C C C C C C CC B CA C C C O l 化学实验基本操作-加热、干燥和冷却.doc
1 [ ] [ ] 1 2 1 2 3 4 5 6 [ ] 7 2 [ ] [ ] 8 9 10 [ ] 3 [ ] [ ] 1 2-2 11 12 13 14 15 16 17 [ ] g) = 100% 5.0g 18 19 4 [ ] [ ] 20 21 [ ] 22 23 24 25 5 [ ] [ ] 26 27 [ ] - 28 6 [ ] [ ] 29 30 31 32 33 34 2-31
摘 要 我 們 將 日 常 生 活 上 常 吃 到 的 蔬 菜 水 果, 利 用 與 水 酒 精 作 為 溶 劑, 製 作 出 濃 度 相 同 的 溶 液, 觀 察 透 過 配 合 菜 瓜 布 清 潔 各 種 汙 垢 的 能 力 如 何, 我 們 還 利 用 了 黑 糖 水 與 蔬 果 進 行 一
作 品 名 稱 : 清 潔 汙 垢 - 天 然 ㄟ 尚 好 摘 要 我 們 將 日 常 生 活 上 常 吃 到 的 蔬 菜 水 果, 利 用 與 水 酒 精 作 為 溶 劑, 製 作 出 濃 度 相 同 的 溶 液, 觀 察 透 過 配 合 菜 瓜 布 清 潔 各 種 汙 垢 的 能 力 如 何, 我 們 還 利 用 了 黑 糖 水 與 蔬 果 進 行 一 個 月 的 發 酵, 以 一 個 禮 拜
293细胞的大规模培养
293 293 293 1C 293 293 293 293 5 75 Ad5 E1 McMaster University F.L.Graham J.S.Miley 1976 DNA 293 Ad5 293 293 Ca2+ 293 293 293 5-6 20 CelliGen CelliGen PlusTM Bioflo3000 6 1200cm2/g 293 Hela CHO 293 1 98%
实验室安全基础
实 验 室 安 全 知 识 讲 座 ( 教 案 ) 第 1 章 绪 论 1.1 实 验 室 安 全 知 识 讲 座 课 程 概 况 1.1.1 教 学 目 的 通 过 学 习 必 要 的 安 全 知 识 和 安 全 管 理 制 度, 提 高 学 生 安 全 意 识 和 安 全 素 质, 减 少 和 消 除 实 验 室 安 全 事 故, 掌 握 必 要 的 灭 火 方 法 和 逃 生 自 救 常 识,
( CIP) /. :, 2003 ISBN 7 81010 776 3.......... R24 65 CIP ( 2003) 102280 ( 2 ) 1200 ( 201203) 850 mm 1168 mm 1 /16 30. 5 881 5 301 10 400 2003 12 2 20
2 ) ( CIP) /. :, 2003 ISBN 7 81010 776 3.......... R24 65 CIP ( 2003) 102280 ( 2 ) 1200 ( 201203) 850 mm 1168 mm 1 /16 30. 5 881 5 301 10 400 2003 12 2 2003 12 3 ISBN 7 81010 776 3 / R 739 64. 00 ( ) )
2. 对 DNA 载 体 的 控 制 元 件 和 选 择 标 记 的 序 列 与 来 源, 如 : 真 核 启 动 子 增 强 子 终 止 序 列 抗 生 素 抗 性 标 记 等 进 行 分 析 建 议 避 免 使 用 抗 青 霉 素 或 其 它 饽 邗 0 房 咕 氐 目 剐 员 昙 牵 好 使
预 防 用 DNA 疫 苗 临 床 前 研 究 技 术 指 导 原 则 一 前 言 DNA 疫 苗 是 将 外 源 目 的 基 因 片 段 构 建 在 DNA 质 粒 中, 重 组 后 的 DNA 导 入 机 体 后 可 表 达 目 的 蛋 白, 目 的 蛋 白 刺 激 机 体 产 生 特 异 性 免 疫 学 反 应 而 达 到 预 防 某 种 疾 病 的 生 物 制 剂 该 指 导 原 适 用 于
D1z.mps
第 3 章 孵 化 技 术 本 章 按 照 种 蛋 孵 化 的 程 序, 介 绍 了 蛋 的 构 造 与 形 成 种 蛋 的 管 理 家 禽 的 胚 胎 发 育 人 工 孵 化 的 条 件 和 控 制 孵 化 机 的 构 造 与 管 理 孵 化 效 果 的 检 查 与 分 析 以 及 初 生 雏 的 处 理 等 内 容 对 种 蛋 的 选 择 与 消 毒 孵 化 条 件 的 标 准 与 控 制 孵
考 试 科 目 代 码 考 试 科 目 名 称 724 教 育 心 理 学 728 建 筑 理 论 综 合 729 中 外 美 术 史 及 理 论 730 美 术 史 论 732 城 乡 规 划 基 本 理 论 与 相 关 知 识 733 细 胞 生 物 学 734 教 育 学 综 合 801 理
2016 年 硕 士 研 究 生 初 试 考 试 自 命 题 科 目 大 纲 查 询 导 航 页 考 试 科 目 代 码 考 试 科 目 名 称 211 翻 译 硕 士 英 语 240 德 语 245 二 外 俄 语 246 二 外 日 语 247 二 外 德 语 248 二 外 法 语 333 教 育 学 综 合 337 工 业 设 计 理 论 344 风 景 园 林 基 础 349 药 学 综
‘十动物解剖学、组织学及胚胎学
www.powerpigs.net 猪 场 动 力 网 目 录 动 物 解 剖 学 组 织 学 及 胚 胎 学... 1 病 理 学... 26 兽 医 产 科 学 辅 导 资 料... 52 兽 医 传 染 病 学... 61 寄 生 虫... 134 生 理 学... 159 动 物 生 物 化 学 纲 要... 192 兽 医 法 规... 211 兽 医 公 共 卫 生 学... 225 外
/. : 2008.10 ISBN 978-7-81086-588-3 Ⅰ. Ⅱ. Ⅲ. - Ⅳ. R155 CIP (2008) 149577, 17 710032 029-84776765 029-84776764 2008 10 1 2008 1
/. : 2008.10 ISBN 978-7-81086-588-3 Ⅰ. Ⅱ. Ⅲ. - Ⅳ. R155 CIP (2008) 149577, 17 710032 029-84776765 029-84776764 http://press.fmmu.sn.cn 2008 10 1 2008 10 1 787 1092 1/16 13.5 150 ISBN 978-7-81086-588-3/R
1 2 3 3.1 3.2 3.3 PM10 3.4 TVOC 4 4.1 4.2 1 1 1 (m 3 /h. ) 3~5 30 1~2 20 20 20 20 30 10 20 20 20 25 4.3 2 2 PM10 0.08 mg/m 3 500 cfu/m 3 500 cfu/m 3 β- 4.4 3 3 20 g/m 2 00 cfu/cm 2 00 cfu/cm 2 2 4.5 4.5.1
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題 目 : 誰 的 氣 量 大? 班 級 : 六 年 六 班 科 目 : 自 然 科 組 員 : 劉 芊 華 宋 瑀 恬 詹 舒 評 戴 宜 君 ( 第 九 組 ) 指 導 老 師 : 顏 君 叡 壹 研 究 動 機 五 年 級 自 然 課 曾 學 習 過 簡 易 滅 火 器 的 製 作, 從 寶 特 瓶 中 不 斷 的 冒 出 的 氣 泡, 令 我 們 覺 得 非 常 有 趣 它 的 原 理 是
X MGC X 22 X 23 X MGC X BALB/c 26 X MGC X MGC X MGC X..
1 0 3 8 4 9726023 UDC X MGC80-3 2000 7 2000 7 2000 7 2000 6 22.3.4...11..11 12 13 15 15 20 20 X MGC80-3. 22 X 22 X 23 X MGC80-3.23 X BALB/c 26 X MGC80-3.27 X MGC80-3 28 29 29 30 31 32 33 X MGC80-3 34 X..34.35.36
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