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1 GE 医疗中国 凝胶选择指南 HiLoad HiTrap HiTrap MultiTrap GraviTrap Mag Sepharose SpinTrap HiScale Tricorn GE 梦想启动未来 了解 GE 医疗生命科学最产品 活动 优惠信息, 请关注我们的官方微信平台 :GEHC_LS

2 技术资料手动纯化填料选择如何选择凝胶凝胶过滤预装柱反相预装柱离子交换预装柱亲和预装柱疏水预装柱工艺开发用层析柱凝胶过滤填料 SOURCE 高速低反压介质 ( 填料 ) 离子交换填料亲和层析填料疏水层析填料可自行装填的实验室用层析柱在位清洗和消毒直接回答实验室和工业规模的层析和过滤技术问题 内容 * 注意 : 手册中标价为参考美金, 本公司保留无需通知随时调整的权利, 有关事宜请向您所在地 GE 业务人员垂询 为了满足近年生物技术进入产品化的收成期需要,GE Healthcare 相继推出了许多特别适合生产应用的 凝胶, 它们的特点是 : 高重复性 : 适用于实验室至大规模工业生产的工艺放大 高物理 化学稳定性 : 易于清洗 消毒及再生, 所以介质寿命非常长久 高动态载量 流速快 : 易于装于生产柱内, 缩短生产周期和次数 每种凝胶均有完整的文献 档案及法规支持文件 (RSF) 在下游纯化中, 可应用不同层析技术在纯化生物分子的同时, 去除各种污染物 去除 内毒素 内毒素又称热原 含脂肪 A 糖类和蛋白, 是带负电的复合大分子 内毒素的脂肪 A 部份有很强的疏水性 但在高盐下会凝集, 无法上疏水层析 利用疏水层析试验盒 (7-9-0) 可选择结合目标蛋白的介质而去除内毒素 内毒素与阴离子交换介质 Q 或 DE AE Sepharose Fast Flow 有较强结合 可洗脱目标蛋白后用高盐缓冲液或 NaOH 去除 利用 CNBr 或 NHS Sepharose FF 可偶联内毒素底物如 LAL,PMB, 自动成亲合层析介质结合内毒素 内毒素经常是多聚体, 凝胶过滤层析可有效地将之去除 去除 蛋白中的核酸 大量核酸增加样本黏度, 令区带扩张, 反压增加, 降低分辨率和流速 药审和食检对核酸含量也有严格限制 胞内表达蛋白的核酸问题尤其严重 核酸带阴电荷, 在初步纯化时利用阳离子交换介质如 SP Sepharose Big Beads,SP 或 CM Sepharose FF,SP SepharoseXL 结合目标蛋白, 可除去大量核酸 核酸在高盐下会和蛋白解离, 疏水层析介质很适合用来结合目标蛋白, 在纯化蛋白的同时去除核酸 利用核酸酶将核酸切成小片断, 用凝胶过滤做精细纯化时便很容易去除了 去除 病毒和微生物 病毒和微生物可成为病原, 应尽量减除 结合不同层析技术, 使用注射用水, 用 NaOH 定期进行仪器和凝胶的在位消毒和在位清洗, 皆可避免污染物增加 病毒大都有脂外壳 可用与目标蛋白电荷相反的 S/D (solvent/detergent) 处理, 使病毒失活, 如 Triton 和 Tween 再用适当的离子交换介质如 CM Sepharose FF 结合目标蛋白, 去除 S/D 其它污染物可以改变 ph 和离子强度使其从目标分子中解离或失活, 凝胶过滤介质 Superdex 及多种吸附性介质, SOURCE 都是很好的精细纯化介质, 可去除多种微量污染物

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4 手动纯化填料选择指南 : Disposable PD-0 Desalting columns LabMate PD-0 Buffer reservoir PD MidiTrap G PD MiniTrap G PD SpinTrap G PD MultiTrap G columns 0 columns 0 columns x 96-well plates / 2. ml /.0 ml / 0. ml / 0 l /, PD MidiTrap G PD MiniTrap G Mini Dialysis Kit - kda cut-off Mini Dialysis Kit - kda cut-off Mini Dialysis Kit - 8 kda cut-off Mini Dialysis Kit - 8 kda cut-off D Clean-Up Kit SDS-PAGE Clean-Up Kit columns 0 columns 0 x 20 μl 0 x 2 ml 0 x 20 μl 0 x 2 ml 0 samples 0 samples 20 l 2 ml 2ml 20 l 2 ml 2ml 800 l 00 l His GraviTrap His GraviTrap Kit His MultiTrap HP His MultiTrap FF His SpinTrap His SpinTrap Kit His Buffer Kit A nti-his Antibody His Mag Sepharose Ni His Mag Sepharose Ni His Mag Sepharose Ni GST GST MultiTrap FF GST MultiTrap B pgex Vectors multiple GST Vector Primers for Sequencing multiple E. coli BL MK07 Helper Phage Bulk GST Purification Module PreScission Protease Thrombin Protease Factor Xa Protease Anti-GST Antibody GST Detection Module GST 96-well Detection Module well filter plates 96-well filter plates 70 μl 2 x ml x ml 0 x ml 96-well filter plates 96-well filter plates vial 00 μl 00 units 00 units 00 units 0 detections plates His GraviTrap, HisTrap, His SpinTrap 96 GST 96 GST GST pgex GST GST M Bulk Glutathione Sepharose B pgex-p GST GST pgex-t GST GST pgex-x GST GST GST GST GST Purify App GE 医疗生命科学部基于苹果 ios 和谷歌 Android 平台, 推出了高效实用的移动应用, 帮助您的工作更加轻松和高效的选择适合的填料和预装柱! 您可以根据您的需求, 实验条件, 实验方式进行几个简单的问题选择, 我们将依据您的选择给出最适合您的纯化填料选择建议, 并提供产品的应用摘要 重要的技术参数以及针对系统与层析柱兼容性的实用提示 在 App Store 和 Google Play 中, 您都可以直接搜索 Purify 以下载本软件, 也可直接扫描以下二维码下载 :

5 如何选择凝胶 生物分子下游纯化的对象一般包括蛋白 酶 重组蛋白 单抗 抗体及抗原 肽类 病毒 生化分子等 纯化前首先需要测定生物分子的各物理和化学特性, 然后通过实验选择出最有效的纯化流程 测定 分子量 PI 当目标蛋白的物理特性如分子量 PI 等都不清楚时, 可用 PAGE 电泳方法或层析方法加以测定 分离范围广阔的 Superose HR 预装柱很适合测定未知蛋白的分子量 用少量离子交换介质在多个含不同 ph 缓冲液的试管中, 可简易地测出 PI, 并选择纯化用缓冲液的最佳 ph 选择 层析方法 若对目标蛋白的特性或样品成分不太了解, 可尝试几种不同的纯化方法 : 一 ] 使用最通用的凝胶过滤方法, 选择分离范围广阔的介质如 Superose Sephacryl HR 依据分子量将样品分成不同组份 二 ] 用含专一配体或抗体的亲和层析介质结合目标蛋白 亦可用各种活化偶联介质偶联目标蛋白的底物 受体等自制亲和介质, 再用以结合目标蛋白 一步即可得到高纯度样品 三 ] 体积大的样品, 往往使用离子交换层析加以浓缩及粗纯化 高盐洗脱的样品, 可再用疏水层析纯化 疏水层析利用高盐吸附 低盐洗脱的原理, 洗脱样品又可直接上离子交换等吸附性层析 两种方法常被交替使用于纯化流程中 纯化 大量粗品 处理大量原液时, 为避免堵塞柱子, 一般使用 Sepharose Big Beads SepharoseXL Sepharose Fast Flow 等大颗粒离子交换介质 将离心 超滤 初纯化结合为一 提高回收率, 缩短纯化周期 纯化 硫酸氨样品 硫酸氨沉淀方法常被用来初步净化样品, 经处理过的样本处于高盐状态下, 很适合直接上疏水层析 若作离子交换, 需先用 Sephadex G-2 脱盐 疏水层析是较的技术, 随着介质种类不断增多, 渐被融入各生产工艺中 利用 HiTrap HIC Test Kit 和 RESOURCE HIC Test Kit 可在八种疏水介质中选择最适合介质及最佳的纯化条件 低盐洗脱的样品可稍加稀释或直接上其它吸附性层析 纯化 糖类分子 固化外源凝集素如刀豆球蛋白 花生 大麦等凝集素, 可结合碳水化合物的糖类残基, 很适合用作分离糖化细胞膜组份 细胞 甚至亚细胞细胞器, 纯化糖蛋白等 两种附上外源凝集素的 Sepharose 6MB 亲和层析介质, 专为俘获整个细胞或大复合物, 如膜囊等 纯化 膜蛋白 膜蛋白分离常使用去污剂以保持其活性 离子性去污剂应选用与目标蛋白相反电荷者, 避免在作离子交换时和目标蛋白竞争交换介质, 籍此除去去污剂 非离子性去污剂可以疏水层析除去 推出的膜蛋白纯化试剂盒可轻松筛选出适合于组蛋白标签膜蛋白溶解和纯化的去污剂 通过 His Mag SepharoseNi 磁珠快速纯化得到的小包装细胞膜可溶解在不同的去污剂中, 溶解后可使用相同的去污剂直接进行纯化 通过一系列方法如蛋白印迹 凝胶过滤 或光散射可对结果进行分析和评价 纯化 单抗 抗原 单抗多为 IgG 来源主要是腹水和融合瘤培养上清液 腹水有大量白蛋白 转铁蛋白和宿主抗体等 Protein G 和 Protein A 对 IgG 的 Fc 区有专一性亲和作用, 能一步纯化各种不 同来源的 IgG 重组 Protein A 介质 rprotein A Sepharose FF 对 IgG 有较高的载量和专一性, 基团脱落更少 脱落的 rprotein A 用离子交换 Q Sepharose HP Capto Adhere 或凝胶过滤 Superdex 0, 很容易去除 0 年推出了的 MabSelect, 是较早使用高流速琼脂糖凝胶 ( High flow Agarose) 作为骨架的型 Protein A 层析介质, 其刚性和传质性能大大优于传统 Fast Flow 填料, 使用更高的流速而保持更高的载量, 专为大规模抗体纯化而设计, 适合快速高效的进行抗体生产和放大, 已经成为单抗纯化和放大的标准介质 Mabselect Sure 是目前 GE 产品中耐强碱的创性 Protein A 亲和层析介质耐强碱的 Protein A 亲和层析介质, 可以耐受 0.~0.N 的氢氧化钠, 使用高达 0.N 的氢氧化钠进行在位清洗 / 消毒大大降低了抗体产品被内毒素污染和批间交叉污染的风险, 清洗效果更好, 有利于延长介质使用寿命, 同时也大大降低了 CIP/ SIP 的成本 MabSelect SuRe LX 是在 MabSelect SuRe 基础上开发的超高载量的抗体纯化介质, 具有 MabSelect SuRe 的所有特性 但是动态载量高达 60mg/ml 是高表达抗体纯化工艺的首选介质 Mabselect Xtra 是高载量的亲和层析介质, 其动态载量超过 mg/ml 介质 ( 停留时间 2. min) 在工艺生产过程中可以有效减少层析柱的体积, 从而降低生产成本 为了进一步减少抗体分离纯化步骤, 提高特定杂质的去除效率, 以满足日益增长的治疗用抗体的生产需要,07 年初,GE Healthcare 推出了型复合模式的强阴离子交换介质 : Capto adhere 介质, 专为治疗用抗体的分离纯化而设计, 其配基 (N-Benzyl-N-methylethanolamine) 综合了阴离子交换 氢键和疏水等多种复杂的作用方式, 对宿主蛋白 脱落的 Protein A 和聚集体有非常独特而高效的去除能力 MabSelect SuRe 的卓越性能以及 Capto adhere 的复合多除杂功能, 使得抗体纯化工艺由经典的三步层析 (Mabselect SuRe+Capto S+ Capto Q) 转变为两步层析 (Mabselect SuRe+ Capto adhere) 得以实现, 这样仅用两步层析就可以得到符合药用级质量要求的高纯度抗体产品, 大大缩短了工艺时间, 提高生产效率, 同时增加了收率, 降低了生产成本 血清互补剂如小牛血清可先用 Protein G 预处理, 在培养前除去 IgG 疏水层析 Phenyl Sepharose HP 亦很适合纯化 IgG 可有效去除抗体中的聚集体 宿主抗体和污染 IgG 可用凝胶过滤 Superdex 0 在精细纯化中去除 纯化 IgG 抗原最有效的方法是用活化偶联介质如 CNBr NHs activated Sepharose FF 偶联 IgG, 再进一步获取 IgG 抗原 HiTrap IgM 是用来纯化融合瘤细胞培养的单抗 IgM, 结合量达 mg IgM HiTrap IgY 是专门用来纯化 IgY, 结合量达 00mg 纯 IgY KappaSelect 是专为纯化 Fab(kappa) 片断而设计的亲和介质, 能有效地捕获 Fab, 获得高纯度和高产量的 Fab HiTrap Igselect 是特异性纯化人的 IgG 所有亚型 纯化 重组蛋白 重组蛋白在设计 构建时应已融入纯化构想 GE Healthcare 提供三个快速表达 一步纯化的融合系统 一 ] GST 融合载体使要表达的蛋白和谷胱甘肽 S 转移酶一起表达, 然后利用 Glutathione Sepharose B/FF 作亲和层析纯化, 再利用凝血酶或因子 Xa 切开 二 ] Protein A 融合载体使要表达的蛋白和 Protein A 的 IgG 结合部位融合在一起表达, 以 IgG Sepharose 6 FF 纯化 三 ] 含组氨酸标记 (Histidine-tagged) 的融合蛋白可用 Chelating Sepharose /IMAC Sepharose 螯合 Ni 2+ 金属, 在一般或变性条件 (8M 尿素 ) 下透过组氨酸螯合融合蛋白 HisTrap 试剂盒提供整套 His-Tag 蛋白的纯化方法 四 ] 如果您要求更高的纯度, 或 Ni2+ 不是最佳金属离子时, 另一种预装 Co2+ 金属离子的产品 TALON Superflow 可供选择 五 ] 纯化真核细胞培养上清分泌表达的标签蛋白, 例如昆虫细胞,CHO 细胞, 或者使传统 IMAC 填料金属离子脱落的样品, 可以使用 Ni Sepharose excel 纯化 包涵体蛋白 包涵体蛋白往往需溶于 6M 盐酸胍或 8M 尿素中 高化学稳定性的 Superose 2 及 Sepharose 6FF 凝胶过滤介质很适合在变性条件下做纯化 变性纯化后的蛋白需要复性至蛋白的天然构象 Superdex 7 Q Sepharose FF 和 Phenyl Sepharose FF 分别被发现有助包涵体蛋白的复性 一般包涵体蛋白样品的纯度越高, 复性效果越好 SOURCE 0 RPC 反相层析介质很适合纯化复性前的粗品, 并可以 M NaOH 重生 此方法纯化后的包涵体蛋白, 复性回收率明显提高 包涵体蛋白固相复性 近年许多文献报导将包涵体蛋白在变性条件下固定 ( 吸附 ) 在层析介质上, 一般用各种 Sepharose FF 离子交换层析介质 去除变性剂后, 蛋白在介质上成功复性, 再将复性好的蛋白洗脱下来 固相复性避免了一般复性过程中蛋白质聚体的形成, 所以复性得率更高, 而且无需大量稀释样品, 并将复性和初纯化合二为一, 大大节省时间及提高回收率 固相复性方法也被用于以 HiTrap Chelating 金属螯合层析直接复性及纯化包涵体形式表达的组氨酸融合蛋白 ; 以 HiTrap Heparin 肝素亲和层析直接复性及纯化包涵体形式表达的含多个赖氨酸的融合蛋白 两种亲和层析预装柱均可反复多次重复使用, 比一般试剂盒更方便 耐用 纯化 中草药有效成分 中药的化学成分极其复杂 传统中药多是煎熬后服用, 有效成分多较为亲水, 包括生物碱 黄酮 蒽醌 皂甙 有机酸 多糖 肽和蛋白质 灵活及综合性地利用多种层析方法 如离子交换 分子筛 反相层析, 更容易分离到单一活性成分 Sephadex LH- 葡聚糖凝胶同时具备吸附性层析和分子筛功能, 例 : 如用甲醇分离黄酮甙, 三糖甙先被洗下来, 二糖甙其次, 单糖甙随后, 最后是甙元 Sephadex LH- 可使用水 醇 丙酮 氯仿等各种试剂, 广泛用于各种天然产物的分离, 包括生物碱 甙 黄酮 醌类 内脂 萜类 甾类等

6 如何选择凝胶 生物碱在酸性缓冲液中带正电, 成为盐, HiTrap SP 阳离子交换层析柱可以分离许多结构非常近似的生物碱 相反, 黄酮 蒽醌 皂甙 有机酸等可溶于偏碱的缓冲液中, 在 HiTrap Q 阴离子交换柱上分离效果良好 一般多糖纯化大多使用分子筛如 Sephadex, Sephacryl 若分子量在 600KD 以下, 并需更高分辨率, 可选择一代的 Superdex 一般植物可能含水溶性 酸溶性 碱溶性多种多糖 综合利用分子筛及离子交换层析有助进一步获各组份纯品 另外, 多糖药物需去除可引起过敏反应的蛋白质, 传统 Sevag 方法用丁醇脱蛋白需反复数十次 阴阳离子交换法可以一 两步快速去除多糖中残存的蛋白质 SOURCE 0RPC 反相层析也很适合各种中药有效成分的检测 分离和放大制备 由于中药的成分非常复杂,SOURCE 反相层析可用范围为 ph-, 并可用 M NaOH, M HCL 清洗 再生 比传统硅胶反相层析更易于工艺优化及在位清洗, 寿命也更长 纯化 肽类 肽类的来源有天然萃取, 合成肽和重组肽三种 肽容易被酶降解, 但可从有机溶剂或促溶剂中复性, 所以多以高选择性的反相层析如 SOURCE 0RPC SOURCE RPC SOURCE RPC Whatman 的 HPLC 柱, 或离子交换 Minibeads Monobeads 作纯化 Superdex Peptide HR 是专为肽分子纯化设计的凝胶过滤预装柱, 能配合反相层析做出更精美的肽图 肽分子制备可用离子交换配合凝胶过滤 Superdex 0 PG 纯化 核酸 病毒 核酸的纯化用于去除影响测序或 PCR 污染物等研究 核酸可大致上分为质粒 DNA 噬菌体 DNA 和 PCR 产物等 病毒也可视作核酸大分子, 和质粒 DNA 一样, 可用分离大分子的 Sephacry S-000 SF Superose 或 Sepharoce FF 凝胶过滤介质去除杂蛋白, 再配合离子交换如 Mono Q SOURCE Q 分离核酸 纯化 寡核苷酸 寡酸苷酸多应用在反义 (anti-sense) DNA SiRNA PCR 和 cdna 合成等研究 合成后含 三苯甲基的寡核苷酸以阴离子交换的 Mono Q 或快速低反压的 SOURCE Q 在 ph2 下可去除副产物, 并避免凝集和保护基的脱落 载量大大高过反相层析, 可用做大量制备 不含三苯甲基的失败序列可用反相柱 ProRPC 去除 脱盐 小分子去除 使用凝胶过滤介质 Sephadex G0,G,G2, 等去除小分子, 效率高, 处理量可达床体积 0% 只需在进样后收集首 /-/2 柱体积的洗脱液, 就可以去除该填料分离范围上限以下的小分子, 简单直接 由于只是去除小分子, 柱高 0cm 以上即可 整个过程一般可于数分种至半小时完成 Sephadex G2 系列介质专为蛋白质脱盐而设计, 预装柱 HiTrap Desalting(ml) 可用针筒操作 HiPrep Desalting (26ml) 可在数分钟为多至 0ml 样品脱盐 疫苗纯化 -- 病毒类疫苗纯化 凝胶过滤介质 Sepharose Fast Flow 或 Sepharose 6 Fast Flow 是经典的病毒类疫苗纯化方法, 可以去除培养基中的杂蛋白 处理量大 快速的特点 柱高一般 0-70cm, 上样量一般为 0-% 目前使用此方法生产的疫苗品种有 : 乙肝 狂犬 出血热 流感等, 分子量较小的疫苗也可以 Sephacryl S-00 HR, 如甲肝疫苗 Capto Core 700 填料设计用于病毒和其他生物大分子的纯化 型的核心微球技术以及复合模式 辛胺配基使 Capto Core 700 在一种层析介质中具有大小分离以及吸附层析的双重功能 这些特点使 Capto core 700 成为疫苗生产中病毒纯化介质的极佳备选方案 随着药监部门对产品质量的严格要求, 杂质的残留水平的提高, 如 :DNA 的去除 卵 清蛋白等 GE 公司的一代介质, 如 Capto Q,Capto Devir S 等介质在 DNA 卵清蛋白去除都有很好的应用 纯化 血浆蛋白 阴离子交换在血浆蛋白的纯化中应用非常广泛, 结合低温乙醇法在丙种球蛋白纯化后期用 DEAE saphrose FF 或者一代的 Capto Q 吸附二聚体等杂质从而达到提高产品纯度的目的, 同样也可以在白蛋白纯化过程中使用阴离子交换吸附 PKA 微量的 IgG 以及聚体, 在凝血 VIII 因子纯化过程中使用大孔径的 MacroCap Q 可以增加载量和回收率 使用传统的 DEAEsephardex A-0 纯化凝血酶原复合物 (PCC) 也是非常经典的方法 亲和层析在血浆蛋白纯化中的应用主要有 : 使用 Capto Heparin 或 Heparin sepharose 6 Fast Flow 纯化 AT III 和凝血因子 IX; 使用 VIII select 纯化凝血因子 VIII; 使用 VII Select 纯化凝血因子 VII; 使用 a- Antitrypsin Select 纯化 a- -antitrypsin 抗生素聚合物分析 中国药典从 00 年版起要求抗生素头孢曲松钠需要找出聚合物占产品的白分比, 规定使用 SephadexG0 凝胶过滤法测定 纯化 基因治疗用病毒载体 SOURCE Q;Q sepharpse XL;Capto Q 纯化 基因治疗用质粒 PlasmidSelect Xtra 层析介质是整个平台的基础, 使得仅以一套工序纯化双螺旋 (sc) 共价闭合环状质粒 DNA 便可满足从批量生产到临床应用等多种需求 处理流程包括 : 一 ] 用 Sepharose6 Fast Flow 进行基团分离除 RNA 换缓冲液交换 ; 二 ] 用 PlasmidSelectXtra 捕获和选择性解吸附 sc 质粒 DNA 三 ] 最后用 SOURCE0Q 进行精纯 整个处理过程高容量, 高产量, 能规模放大以在高度调控的环境下进行经济的工业生产 整个工艺主要由层析和过滤步骤组成, 依次包括除杂, 三个层析步骤和超滤等步骤 此书中常用缩写 柱子类型常用缩写解释 : ST: 不锈钢柱 PE:Peek 材质,Tricorn 柱形式 GL: 玻璃材质, Tricorn 柱形式 产品名常用缩写解释 : XL: 高载量 Pg:Prep grade, 制备级 HR:High Resolution, 高分辨率 LS:Low Sub, 低取代, 配基密度低 HS:High Sub, 高取代, 配基密度高 HP:High Performance, 高性能, 填料平均颗粒大小约 μm, 颗粒细能带来高分辨率的分离纯化 FF:Fast Flow, 快流速, 填料平均颗粒大小约 μm, 较 HP 颗粒粗, 具有良好的分辨率及轻松实现规模扩大的分离纯化 Sephadex G2(SF,F,M,C):SF:Superfine; F:Fine; M:Medium; C:Coarse; 分别表示填料的颗粒大小粗细, 颗粒越细分辨率越高

7 凝胶过滤预装柱 货号 预装柱 内径 床高 (mm) 柱体积 (ml) 平均颗粒 (μm) 球蛋白分离范围 (D) 特性 耐反压 (MPa) (ml/min) 一 ]Superdex 预装柱高分辨率首选! Superdex Peptide 0/00 GL Superdex 7 0/00 GL Superdex 7 /0 GL 0/00 0/00 / ,000,000-70,000,000-70,000 肽及其它小分子的半制备和高性能分析纯化蛋白 肽 核苷酸及其它小分子的半制备和高性能分析纯化 Superdex 0 Increase 0/00 GL Superdex 0 Increase /0 GL Superdex 0 0/00 GL Superdex 0 /0 GL 0/00 /0 0/00 / ~ ~ , ,000 0, ,000 蛋白 DNA 片段及其它小分子的半制备和高性能分析纯化 蛋白 DNA 片段及其它 HiLoad 6/60 Superdex 0 pg HiLoad 26/60 Superdex 0 pg HiLoad 6/60 Superdex 7 pg HiLoad 26/60 Superdex 7 pg HiLoad 6/60 Superdex 0 pg HiLoad 26/60 Superdex 0 pg Superdex Peptide PC.2/0 6/600 26/600 6/600 26/600 6/600 26/ <0,000 <0,000,000-70,000,000-70,000 0, ,000 0, ,000 小分子的半制备和高性能分析纯化肽及其他小分子的制备纯化 蛋白 肽 核苷酸及其它小分子的快速制备纯化 蛋白 DNA 片段及其它小分子的快速制备纯化.2/ 肽及其它小分子的半制备和高 2 0. 性能分析纯化 Superdex 7 PC.2/00 2.,000-70,000 蛋白 肽 核苷酸及其它小分 /0 子的快速制备纯化 Superdex 0 Increase.2/00.2/ ,000 ~600,000 蛋白 DNA 片段及其它小分子 的半制备和高性能分析纯化 Superdex 0 PC.2/0.2/ , ,000 蛋白 DNA 片段及其它小分子 的半制备和高性能分析纯化 269 Superdex 0 Increase 色谱柱 Superdex 0 Increase 色谱柱中的色谱分析填料以高流速琼脂糖基架为主要成分, 具有良好的压力 / 流动属性, 微球颗粒小 ( 平均颗粒大小 8.6μm) 另外, 其非特异性吸附低, 可以使生物材料的回收率更高 较小的微球粒度可以进行高分辨的分析分离 Superdex 0 Increase 色谱柱具有以下特点 : 用于各种蛋白质的制备和分析多种用途与 Superdex 0 相比分辨率提高, 适用于较高纯度以及改善分析结果与 Superdex 0 相比运行时间缩短, 可以更快得到结果 Superdex 0 Increase 填料提供三种不同尺寸的高性能玻璃预装柱, 每种色谱柱都有自己的用途 Superdex 0 Increase 0/00 GL 对小规模 (mg) 预制备和高分辨率分析均适用 Superdex 0 Increase / 0 GL 用于纯度快速筛查以及不同条件的迅速筛选 可以在 7 min 内得到结果, 具有良好的分辨率 Superdex 0 Increase.2/00 是制备级 (μg 级 ) 用途以及高分辨率分析的选择, 尤其是在可用样本量有限时, 即使少量样本也可以产生良好的检测信号 6

8 凝胶过滤预装柱 货号 预装柱 内径 床高 (mm) 柱体积 (ml) 平均颗粒 (μm) 球蛋白分离范围 (D) 特性 耐反压 (MPa) (ml/min) 二 ]Superose 预装柱分离范围最宽广! Superose 2 0/00 GL 0/ ,000-00,000 蛋白 肽 寡核苷酸及多糖的半制备和高性能分析纯化 Superose 6 0/00 GL 0/00 2 -,000-,000,000 蛋白 肽 寡核苷酸 核酸及多糖的半制备和高性能分析纯化 Superose 2 PC.2/0.2/ ,000-00,000 蛋白 肽 寡核苷酸及多糖的半制备和高性能分析纯化化 Superose 6 PC.2/0.2// ,000-,000,000 蛋白 肽 寡核苷酸及多糖的半制备和高性能分析纯化 三 ]Sephacryl 预装柱经济高效, 选择最多! HiPrep 6/60 Sephacryl S-00 HR HiPrep 26/60 Sephacryl S-00 HR 6/600 26/ ,000-00,000,000-00,000 蛋白及肽的制备纯化蛋白, 如 : 血清蛋白 ( 白 HiPrep 6/60 Sephacryl S-0 HR HiPrep 26/60 Sephacryl S-0 HR HiPrep 6/60 Sephacryl S-00 HR HiPrep 26/60 Sephacryl S-00 HR HiPrep 6/60 Sephacryl S-00 HR HiPrep 26/60 Sephacryl S-00 HR HiPrep 6/60 Sephacryl S-00 HR HiPrep 26/60 Sephacryl S-00 HR 6/600 26/600 6/600 26/600 6/600 26/600 6/600 26/ ,000-20,000,000-20,000 0,000-,00,000 0,000-,00,000,000-8,000,000,000-8,000,000 0,000-,000,000 0,000-,000,000 蛋白 ) 的制备纯化蛋白, 如 : 膜蛋白和血清蛋白 ( 抗体 ) 的制备纯化多糖 具延伸结构的大分子如蛋白多糖 脂质体 < 2,000 bp DNA 限制片段 < 2,000 bp DNA 限制片段如 DNA 限制片段 四 ]Sephadex 预装柱脱盐 缓冲液交换首选! HiTrap Desalting x ml (Sephadex G-2 S) HiPrep 26/0 Desalting x ml (Sephadex G-2 F) HiPrep 26/0 Desalting x ml Pre-packed Disposable PD-0 (0 支 ) (Sephadex G-2 M) 6/2 26/00 26/00.7/ ,000-, HiTrap Desalting ml 6/2 2-0,000-,000,000-,000,000-,000,000-,000 快速脱盐 / 缓冲液交换制备和高低分子量的分离 快速脱盐 / 缓冲液交换制备和高低分子量的分离一次性组脱盐 / 缓冲液交换制备 反相预装柱 货号 一 ]SOURCE RPC 快速放大制备首选! 可在 ph-2 下进行反相纯化, 比硅胶介质载量更高, 流速更快, 适合生产放大 预装柱 SOURCE RPC ST.6/00 RESOURCE RPC, ml RESOURCE RPC, ml 二 ]μrpc PRORPC MICRORPC C2/C8 ST.6/00 内径 床高 (mm).6/00 6./0 6./00.6/00 柱体积 (ml) 平均颗粒 ( μm) 配体 疏水性近似 C8 疏水性近似 C8 C2/C8 每柱载量 7 mg BSA 0 mg BSA 0 mg BSA 2 mg 应用 / 特性 能于宽达 ph-2 提供高分辨 高载量的肽, 寡核苷酸等的分析及制备, 特别于碱性 ph 拥有别於一般 RPC 柱所能提供的高分辨和重复性高速蛋白 寡核苷酸 肽制备 备有多种 和 0μm 颗粒大小的 SOURCERPC 和 SOURCE0RPC 介质包装作生产放大用途 每米理论塔板数 0 000, 肽图分析首选, 快速 高敏感度 高分辨率的蛋白 肽 多核苷酸及其它生物分子的微量制备 / 分离 (ml/min) 耐反压 (MPa) ph 稳定性工作 [ 清洗 ] -2-2 [-] -2 [-]

9 离子交换预装柱 货号 预装柱 内径 床高 (mm) 一 ]Minibeads 预装柱超高分辨率分离 Mini Q TM.6/0 PE.6/0 柱体积 (ml) 0.8 平均颗粒 (μm) 每毫升载量 6 mg 淀粉酶 应用 / 特性 极高分辨 微量纯化和分析 (ml/min) 2 耐反压 (MPa) 8 ph 稳定性工作 [ 清洗 ] -; [-] Mini S TM.6/0 PE.6/0 0.8 mg 核糖核酸酶 极高分辨 微量纯化和分析 2 8 -; [-] Mini S PC.2/.2/ mg 核糖核酸酶 极高分辨 微量纯化和分析 Mini Q PC.2/.2/ mg 淀粉酶 极高分辨 微量纯化和分析 二 ]MonoQ 预装柱高分辨率半制备 Mono Q TM /0 GL /0 0 6 mg HSA 纯化和分析 2-2; [2-] Mono Q 0/00 GL 0/ mg HSA 纯化和分析 0 2-2; [2-] Mono S TM /0 GL /0 0 7 mg lgg 纯化和分析 2-2; [2-] Mono S 0/00 GL 0/ mg lgg 纯化和分析 0 2-2; [2-] Mono P TM /0 GL /0 0-0 mg 球蛋白 蛋白及肽的快速高分辨率层析聚焦分离 ; 适合作阴离子交换 ( 弱阴离子交换 ) 2-2; [2-] 三 ]Source 预装柱高流速半制备 Mono P /0 GL Mono Q.6/00 PE Mono S.6/00 PE Mono S PC.6/ Mono Q PC.6/ RSOURCE Q ml /0.6/0.6/0.6/0 6./ mg 球蛋白 6 mg HSA 7 mg HSA 7 6 mg BSA 蛋白及肽的快速高分辨率层析聚焦分离纯化和分析 纯化和分析纯化和分析 高速 高载量 ; 适合放大 ; [2-] 2-2; [2-] ; [-] RESOURCE Q 6 ml 6/0 6 mg BSA 高速 高载量 ; 适合放大 ; [-] SOURCE Q.6/00 PE.6/00.7 mg BSA 高速 高载量 ; 适合放大 2-2; [-] RESOURCE S ml 6./0 80 mg 溶菌酶 高速 高载量 ; 适合放大 ; [-] RESOURCE S 6 ml 6/ mg 溶菌酶 高速 高载量 ; 适合放大 ; [-] SOURCE S.6/00 PE.6/ mg 溶菌酶 四 ]Q SP Sepharose High Performance 预装柱方法探索和浓缩样品 高速 高载量 ; 适合放大 2-2; [-] HiTrap Q HP, ml HiTrap Q HP, ml HiTrap Q HP, ml HiTrap SP HP, ml HiTrap SP HP, ml HiTrap SP HP, ml 非标签蛋白纯化包 Untagged Package 7/2 6/2 7/2 6/2 70 mg BSA 少量样品纯化, 可使用注射器 70 mg BSA 少量样品纯化, 可使用注射器 mg 核糖核酸酶 少量样品纯化, 可使用注射器 mg 核糖核酸酶少量样品纯化, 可使用注射器 HiTrap Q HP ml, HiTrap SP HP ml, HiPrep 6/60 Sephacryl S-0HR 2-2; [2-] 2-2; [2-] -; [-] -; [-] HiPrep Q HP 6/0 HiPrep SP HP 6/0 6/00 6/00 60mg BSA mg 核糖核酸酶 小试样品分离小试样品分离 ; [2-] -; [-] 五 ]SP Q CM DEAE ANX Sepharose Fast Flow 预装柱快速初步纯化易于放大 HiTrap lex Selection Kit 7/2 7 支装 HiTrap ANXFF HS ml HiTrap ANXFF HS ml HiTrap Q FF ml HiTrap Q FF ml HiTrap SP FF ml HiTrap SP FF ml HiTrap DEAE FF ml HiTrap DEAE FF ml 7/2 6/2 7/2 6/2 7/2 6/2 7/2 6/2 mg BSA mg HSA 70 mg 核糖核酸酶 7 mg BSA 适合作工艺优化, 凝胶选择含有 7 个 ml 的预装柱 : HiTrap Q FF HiTrap SP FF HiTrap CM FF HiTrap DEAE FF HiTrap ANX FF (high sub) HiTrap Q XL HiTrap SP XL 适合作工艺优化及实验室规模蛋白制备, 弱阴离子交换适合作工艺优化及实验室规模蛋白制备 - 2-0; [2-] 2-2; [-] -; [-] 2-2; [-]

10 离子交换预装柱 货号 预装柱 内径 床高 (mm) 柱体积 (ml) 平均颗粒 (μm) 每毫升载量 应用 / 特性 (ml/min) 耐反压 (MPa) ph 稳定性工作 [ 清洗 ] HiTrap CM FF ml HiTrap CM FF ml HiTrap Q XL ml HiTrap Q XL ml HiTrap SP XL ml HiTrap SP XL ml HiPrep 6/0 Q FF HiPrep 6/0 SP FF HiPrep 6/0 Q XL HiPrep 6/0 SP XL HiPrep 6/0 DEAE FF HiPrep 6/0 CM FF 7/2 6/2 7/2 6/2 7/2 6/2 6/00 6/00 6/00 6/00 6/00 6/00 六 ]Capto 预装柱满足高流速 高载量初步纯化的需要 0 mg 核糖核酸酶 A > 0 mg BSA > 60 mg 溶菌酶 mg HSA 70 mg 核糖核酸酶 A > 0 mg BSA > 60 mg 溶菌酶 0 mghsa 0 mg 核糖核酸酶 蛋白的快速半制备 / 制备分离 ; 蛋白的初步分离纯化 ; [2-] -; [2-] -; [-] 2-2; [-] -; [2-] -; [-] 2-2; [-] -; [2-] HiTrap Capto IEX selection Kit HiTrap Capto Q ml HiTrap Capto Q ml HiTrap Capto S, ml HiTrap Capto S, ml HiTrap Capto DEAE, ml HiTrap Capto DEAE, ml HiTrap Capto MMC ml HiTrap Capto MMC ml HiTrap Capto adhere ml HiTrap Capto adhere ml 7/2 7/2 6/2 7/2 6/2 7/2 6/2 7/2 6/2 7/2 6/2 HiTrap Capto Core 700 ml 7/ 动态载量大于 00 mg BSA/ml 胶动态载量大于 mg 溶菌酶 /ml 胶动态载量大于 mg 卵清蛋白 /ml 胶动态载量在 0 ms/cm 时大于 mg mg ovalbumin/ml medium 包含 个 ml 的预装柱 : HiTrap Capto Q HiTrap Capto S HiTrap Capto DEAE HiTrap Capto MMC HiTrap Capto adhere 高流速 高载量 高流速 高载量 高流速 高载量 耐受高盐 多位点, 用作抗体穿透, 一步吸附 HCP,DNA 等杂质 用于病毒和其他大生物分子的中毒纯化和精细纯化步骤 2- [2-2] -2 [-2] 2-9 [-2] 2- [2-2] -2 [2-] 七 ]capto 预装柱满足高流速 高分辨率的中度纯化的需要 Hitrap Capto SP ImpRes ml 7/2 Hitrap Capto SP ImpRes ml 6/2 Hitrap Capto Q ImpRes ml 7/2 Hitrap Capto Q ImpRes ml 6/2 HitrapCapto Adhere ImpRes ml 7/2 HitrapCapto MMC ImpRes ml 6/2 HiTrap Capto IEX 选择试剂盒 HiTrap TM Capto IEXTM Selection Kit 包括 个 ml 的预装柱 : Capto Q ( 强阴离子交换 ) Capto S ( 强阳离子交换 ) Capto DEAE ( 弱阴离子交换 ) Capto MMC ( 复合式弱阳离子交换 ) 和 Capto adhere ( 复合式强阴离子交换 ) >9 mg BSA >0 mg BSA -8mgMab/ml 60-mgMab/ml 高流速 高分辨率 高流速 高分辨率 高流速 高分辨率 Capto MMC 复合式型弱阳离子交换填料蛋白可以高盐的条件下吸附的选择性 OH OH + O O S 基架 7 mm 高流速琼脂糖复合式弱阳离子交换配基 ; [-2] 2-; [2-2] 2-; [2-2] O NH O O _ Capto 基架 : 保留琼脂糖基架的亲水特性, 增加刚性 高流速下的高载量可以提高生产能力 质量传递快可以增加回收率 处理大体积样品时可以缩短工艺时间 Capto MMC 和 Capto adhere 由于与目标分子的复合式作用而与传统的离子交换填料有不同的选择性 除了离子交换作用外, 此两种填料与目标物还存在疏水和氢键相互作用 Capto adhere 复合式型强阴离子交换填料有效除去 : 聚合物 / 二聚体 DNA, 病毒, 脱落的 Protein A 宿主蛋白内毒素 OH OH O O N + + 基架 7 mm 高流速琼脂糖复合式型强阴离子交换填料 OH 9

11 亲和预装柱 货号 预柱装 平均 颗粒 (μm) HisTrap HP ml HisTrap HP ml HisTrap HP ml HisTrap HP ml HisTrap HP ml His SpinTrap 0 00 μl HisTrap HP ml His SpinTrap kit His buffer kit His MultiTrap HP 96well filter plates 每柱载量 一 ] 组氨酸标签蛋白的纯化 Ni Sepharose High performance 0 mg(his) 6 重组蛋白 0 mg(his) 6 重组蛋白 70 μg(his)6 重组蛋白 mg(his) 6 重组蛋白 / 孔 应用 / 特性 组氨酸标签蛋白 HisTrap HP 是预装的 Ni Sepharose HP 填料 适合小体积组氨酸标签蛋白的快速离心纯化包含 和 采用 HisGraviTrap, HisTrap, His Spintrap 纯化组氨酸标签蛋白所需的缓冲液每孔凝胶体积 0 μl, 适合高通量小体积组氨酸标签蛋白的快速纯化 (ml/min) 离心 离心或抽真空 耐反压 (MPa) 最大上样体积 600 μl 最大上样体积 600 μl PH 稳定 性工作 -2 [2-] -2 [2-] -2 [2-] -2 [2-] 二 ] 组氨酸标签蛋白的纯化 Ni Sepharose 6 Fast Flow HisTrap FF ml HisTrap FF 00 ml HisTrap FF ml HisTrap FF 00 ml( 客户订制 ) HisTrap FF Crude ml HisTrap FF Crude ml HisTrap FF Crude 00 ml HisTrap FF Crude ml HisTrap FF Crude 00 ml 0 mg(his)6 融合蛋白 /ml 胶 0 mg(his) 6 融合蛋白 /ml 胶 高动态载量, 低配基脱落, 稳定性好 无需离心和过滤, 直接上未澄清的细胞裂解液裂解液高动态载量, 低配基脱落, 稳定性好 2-; [-2] 2-; [-2] HisPrep FF 6/0 ml His GraviTrap 0 ml His GraviTrap kit His MultiTrap FF 96well filter plates 0 mg(his) 6 重组蛋白 0 mg(his)6 重组蛋白 800 μg(his) 6 融合蛋白 / 孔 组氨酸标签蛋白 HisTrap FF crude 柱是预装的 Ni Sepharose 6FF 填料, 适合放大生产 适合小体积组氨酸标签蛋白的快速离心纯化包含 和 His Buffer kit 每孔凝胶体积 0 μl, 适合高通量小体积组氨酸标签蛋白的快速纯化 0 重力 离心或抽真空 0. 最大上样体积 600 μl -2 [2-] -2 [2-] -2 [2-] 三 ] 组氨酸标签蛋白的纯化 TALON 和 excel HisTrap excel x ml HisTrap excel x ml HisTrap excel x ml >0 mghis 蛋白 直接纯化真核细胞培分泌表达在胞外的组 氨酸标签蛋白. 保证高载量, 没有 Ni 离子脱落 HiTrap TALON crude ml HiTrap TALON crude ml HiTrap TALON crude 00 ml HiTrap TALON crude ml HiTrap TALON crude 00 ml > mghis 蛋白 组氨酸标签蛋白纯化包 Tagged PackageHis 当纯度比收率重要时, 方便的从未澄清的细胞裂解液中纯化组氨酸标签蛋白 包括 HisTrap HP ml, HiTrap TALON crude ml, HiTrap Desalting ml 2-76 四 ] 用于金属离子螯合纯化 HiTrap IMAC HP, ml HiTrap IMAC HP, ml HiTrap IMAC FF, ml HiTrap IMAC FF, ml HiPrep IMAC 6/0 ml HiTrap Chelating HP, ml HiTrap Chelating HP, ml HiTrap Chelating HP, ml HiTrap Chelating HP, ml 00 umol Ni 2+ /Zn 2+ /ml 胶 2 umol Cu 2+ /ml 胶 umol Ni 2+ /Zn 2+ /ml 胶 2 umol Cu 2+ /ml 胶 2 umol Cu 2+ /ml 胶 2 umol Cu 2+ /ml 胶 可与金属作用的蛋白 肽类 核苷酸 可与金属作用的蛋白 肽类 核苷酸 纯化含暴露氨基酸的蛋白 / 肽 :His (Cys,Trp) 如巨球蛋白 干扰素 -2 [2-] -2 [2-] - [2-] - [2-]

12 亲和预装柱 货号 预柱装 平均 颗粒 (μm) 四 ]GST 标签蛋白的纯化 :Glutathione Sepharose High Performance GSTrap HP ml GSTrap HP 00 ml GSTrap HP ml GSTrap HP ml GSTrap HP 00 ml GSTrap FF ml GSTrap FF 2 ml GSTrap FF 00 ml GSTrap FF ml GSTrap FF ml GSTrap FF 00 ml GSTprep FF 6/0 GST MultiTrap FF 96well filter plates 0 mg GST 融合蛋白 0 mg GST 融合蛋白 五 ]GST 标签蛋白的纯化 :Glutathione Sepharose Fast Flow GSTrap B ml GSTrap B ml GSTrap B 00 ml GSTrap B ml GSTrap B ml GSTrap B 00 ml GST 标签蛋白纯化包 Tagged Package,GST mg GST 融合蛋白 mg GST 融合蛋白 2 mg GST 融合蛋白 0. mggst/ 孔 每柱载量 六 ]GST 标签蛋白的纯化 :Glutathione Sepharose B mg horse liver GST 谷胱甘肽 S- 转移酶 (GST) 标签蛋白, 用 pgex 系列表达载体表达, 其它谷胱甘肽 S- 转移酶和谷胱甘肽依赖的蛋白 应用 / 特性 谷胱甘肽 S- 转移酶 (GST) 标签蛋白, 用 pgex 系列表达载体表达, 其它谷胱甘肽 S- 转移酶和谷胱甘肽依赖的蛋白 适合高通量小体积 GST 标签蛋白的快速离心纯化 谷胱甘肽 S- 转移酶 (GST) 标签蛋白, 用 pgex 系列表达载体表达, 其它谷胱甘肽 S- 转移酶 包含 GSTRAP B ml, HiTrap Desalting ml (ml/min) 0 离心或抽真空 耐反压 (MPa) 0. PH 稳定 性工作 -2 [-2] -2 [-2] -2 [-2] -2 [-2] -2-2 [-2] - [-] GST MultiTrap B 96well filter plates MBP 标签蛋白的纯化 MBPTrap HP ml Step(II) 标签蛋白的纯化 StrepTrap HP ml 0. mg GST-tagged protein/well 标签蛋白 与填料螯合力很强的 Ni 2+ 离子的产品 Ni Sepharose excel 在进行真核细胞培养上清进行纯化时, 由于培养上清中一些干扰成分的存在, 常规 IMAC 填料会在上样时发生固化金属离子脱落的现象, 金属离子的脱落会直接导致目的蛋白的低结合 此外, 真核细胞培养上清中目的蛋白浓度较低 因此在纯化实验进行前, 需要进行缓冲液置换 透析等操作, 以求达到去除干扰物质 获得较好纯化效果的目的 这些额外的实验操作耗时耗力, 且对于一些敏感蛋白来说, 这些步骤会对蛋白性质产生直接的影响 Ni Sepharose excel 产品专门针对真核细胞培养上清的纯化而设计,Ni 2+ 与填料螯合更为紧密, 在直接将培养上清进行上样操作时, 可有效避免上述问题 Ni Sepharose excel, 结合载量 ~0 mg/ml, 填料平均粒径 μm Ni 2+ 离子与 IMAC 填料的结合力更强, 可有效克服金属离子脱落问题, 可纯化如昆虫细胞 CHO 细胞等真核培养细胞上清 此外, 也可以针对对其他来源的 可能造成金属离子脱落的样本进行纯化 预装产品主要有 :HisTrap excel 柱 高通量 小体积纯化 GST 标签蛋白 纯化 MBP 标签蛋白 纯化 标签蛋白 离心或抽真空 预装有 Co 2+ 离子的产品 TALON Superflow - [-] 如果您要求更高的纯度,Ni 2+ 不是最佳金属离子时,GE Healthcare 提供了另一种预装 Co 2+ 金属离子的产品形式可供选择 TALON Superflow, 结合载量 ~ mg/ml, 填料粒径约 60-60μm 预装有 Co 2+ 离子的 IMAC 填料, 此种填料对组氨酸标签蛋白的选择性较好, 而对于宿主蛋白的亲和力较低, 当实验结果对于纯度的要求大于产率时可进行选用 可在变性及非变性条件下进行实验, 所用的咪唑浓度比预装有 Ni 2+ 离子填料所用的咪唑浓度更低 预装产品主要有 : 用于筛选或平行纯化的 96 孔过滤板 His MultiTrap TALON,His SpinTrap TALON 离心小柱, His GraviTrap TALON 重力柱, 可上未澄清裂解物的 HisTrap TALON crude 柱

13 protein Protein A 抗体纯化包 Antibody Package, Protein A 包含 HiTrap Protein A HP ml, HiTrap Desalting ml protein Protein G 抗体纯化包 Antibody Package, Protein G 包含 HiTrap Protein G HP ml, HiTrap Desalting ml 一 protein protein 62 二 三 2

14 亲和预装柱 货号 预装柱 平均颗粒 ( μm) 每柱载量 应用 / 特性 (ml/min ) 耐反压 (MPa) ph 稳定性工作 十四, 用于抗体片断纯化 :Protein L HiTrap Protein L, ml HiTrap Protein L, ml HiTrap Protein L, ml HiTrap Protein L, ml 8 约 2mg 人类 Fab 纯化广泛的抗体片断, 例如 Fabs, 单链可变区片断 (scfv) 和区域抗体 (Dabs) 包括 kappa 的轻链 五 μ μ 十六 ] 用于基团特异性纯化 HiTrap ConA B, ml HiTrap ConA B, ml HiTrap Blue HP, ml 十七 ] 用于纯化核酸 HiTrap Blue HP, ml HiTrap Heparin HP, ml HiTrap Heparin HP, ml HiTrap Heparin HP, ml HiPrep 6/0 HEPARIN FF HiTrap Streptavidin HP, ml Streptavidin HP Spin Trap 6 00 μl Streptavidin HP Spin Trap Buffer kit Streptavidin HP MultiTrap 96well filter plates HiTrap Benzamidine FF, 2 ml HiTrap Benzamidine FF, ml HiTrap Benzamidine FF, ml PlasmidSelect Xtra Starter Kit 含 HiPrep 26/0 Sepharose 6 FF, HiTrap PlasmidSelect Xtra, HiTrap SOURCE 0Q 各一支 - mg porcine thyroglobulin mg porcine thyroglobulin > 8 mg HSA > 00 mg HSA mg antithrombin lll 能纯化糖蛋白 膜蛋白 糖脂 多糖 激素 脂蛋白等 纯化抗凝血激酶 核酸酶 NAD + / NADP+ 依整酶 ATP 依赖酶 脂蛋白 干扰素 白蛋白等等纯化抗凝血激酶和别的凝集因子, 脂蛋白 脂酶 蛋白合成因子 激素 类固醇受体 DNA 结合蛋白 干扰素 2 mg antithrombin III/ml 胶 6 mg 生物素化的 BSA 利用生物素和抗生素的结合作用做亲和层析 ; 如使用生物素标记的抗体纯化相应抗原 6 mg 生物素化的 BSA 快速 方便, 小量纯化生物素化的基质, 如生物素标签蛋白 6 mg 生物素化的 BSA 快速 方便, 高通量纯化生物素化的基质, 如生物素标签蛋白 mg 胰蛋白酶原专门纯化丝氨酸蛋白酶, 胰蛋白酶和类胰蛋白酶 7 mg 胰蛋白酶原 mg 超螺旋质粒用于治疗用超螺旋质粒 DNA 的纯化 适用于捕获各种抗体片段 Capto L 亲和层析介质 Capto L, 适用于抗体和抗体片段的捕获 它结合了刚性的高流速琼脂糖基质及与免疫球蛋白结合的重组蛋白 L 配体, 这种配体对于抗体 K 轻链 (Kappa light chain) 上的可变区有很强的亲合力 因此,Capto L 适用于捕获各种抗体片段, 例如 Fab 单链抗体 (scfv) 和结构域抗体 (Dabs) Capto L 有大包装以及预装柱等形式可供选择, 可加速结合与洗脱条件的筛选和优化 预装柱包括 PreDictor 96 孔培养板 Capto L 的重要性能特点包括 : 较高的动态结合能力以及宽范围的抗体片段选择性 确保了一种含有 K 轻链抗体片段提纯的解决方案 允许高流速和高生产率以及配体渗漏低的刚性基底基质 具有管理支持和保证用于商业生产供应的 介质 为了确保捕获平台的全面性, 在 Capto L 对抗体片段缺乏亲合力的情况下,GE Healthcare 有大量具有互补性的亲和层析介质可供选择 : KappaSelect 层析介质与 KappaFab( 恒定区 ) 结合, 以及 LambdaFabSelect 层析介质与 LambdaFab( 恒定区 ) 结合 另外, 可以使用 MabSelect 捕获抗体片段, 因为其对重链子类型 VH 具有亲合力

15 疏水预装柱 货号 预装柱 内径 床高 (mm) 柱体积 (ml) 平均颗粒 ( μm) 每柱载量 应用 / 特性 最高耐流速反压 (ml/min )(MPa) ph 稳定性工作 [ 清洗 ] 一 ]Phenyl Butyl Octyl Sepharose Fast Flow 预装柱预处理及中度纯化介质 : 疏水性的顺序为 : Butyl-S < Butyl < Octyl < Phenyl HiPrep 6/0 Phenyl FF (LS) HiPrep 6/0 Butyl FF SOURCE PHE HiTrap Capto Phenyl (HS) ml HiTrap Capto Phenyl (HS) ml HiTrap Capto Butyl ml HiTrap Capto Butyl ml HiTrap Phenyl FF (LS) ml HiTrap Phenyl FF (LS) ml HiTrap Phenyl FF (HS) ml HiTrap Phenyl FF (HS) ml HiTrap Butyl FF, ml HiTrap Butyl FF, ml HiTrap Butyl-S FF, ml HiTrap Butyl-S FF, ml HiTrap Octyl FF, ml HiTrap Octyl FF, ml HiPrep Phenyl HP 6/0 HiPrep 6/0 Phenyl FF (HS) HiPrep 6/0 Octyl FF HiTrap HIC Selection Kit 7.6/00 7/2 6/2 7/2 6/2 7/2 6/2 7/2 6/2 7/2 6/2 7/2 6/2 7/2 6/2 6/00 6/00 6/00 6/00 6/ mg 27 mg BSA 27 mg BSA 27 mg BSA mg BSA 2 mg HSA mg HSA 6 mg HSA 80 mg HSA 80 mg HSA 配体密度 00 μmol 配体密度 00 μmol 蛋白 肽的快速高分辨率疏水层析柱工艺开发 工艺开发 工艺开发 工艺开发 工艺开发 工艺开拓, 小量制备 配体密度 0 μmol 配体密度 20 μmol 配体密度 0 μmol 配体密度 0 μmol 配体密度 μmol 配体密度 2 μmol mg 小试样品分离 α -chymotrypsinogen 7 mg HSA 快速蛋白 生物分子的制备 快速蛋白 生物分子的制备快速蛋白 生物分子的制备这试剂盒包含七根不同特性的预装柱 :Phenyl Sepharose HP, Phenyl Sepharose FF (LS), Phenyl Sepharose FF (HS),Butyl Sepharose FF,Octyl Sepharose FF, Butyl Sepharose HP 及 Butyl-S-Sepharose FF [-] -; [2-] -; [2-] -; [2-] -; [2-] -; [2-] -; [2-] -; [2-] -; [2-] -; [2-] -; [2-] -; [2-] -; [2-] -; [2-] -; [2-] -; [-] - [2-] - [2-] - [2-] - [2-] - [2-] 二 ]Sepharose High Performance 预装柱中等制备级疏水分离 HiTrap Phenyl HP, ml HiTrap Phenyl HP, ml HiTrap Butyl HP, xml HiTrap Butyl HP, x ml HiTrapCaptoPhenylImpRes ml HiTrapCaptoPhenylImpRes ml 7/2 6/2 7/2 6/2 7/2 6/ mg HSA mg HSA 8 mg β-lactoglobulin mg β-lactoglobulin 9mgBSA/ml 9mgBSA/ml 蛋白纯化或分离制备蛋白纯化或分离制备中度纯化的工艺开发 中度纯化的工艺开发 -; [2-] -; [2-] -;[2-] -;[2-] -; [2-] -; [2-]

16 工艺开发用层析柱 针对高通量工艺开发的 PreDictor 96 孔板 PreDictor TM plates 为一次性使用的 96 孔滤板, 预填充适量的 TM 层析介质 PreDictor 板可采用手动或自动的工作流程, 对层析条件进行平行筛选, 从而支持高通量的工艺开发 (high-throughputprocess development HTPD) PreDictor 板可快速高效的评估样品与介质的结合 / 清洗 / 洗脱条件的相关参数, 同时还可以评估介质基准 使用 PreDictor 板获得的数据与层析柱所得的数据具有很好的相关性, 使得 PreDictor 板成为工艺操作条件初筛的极佳的工具 X2 X X 执行 计划 HTPD 流程 优化 PreDictor 平台 分析 评估 工艺优化验证流程预测 HiScreen 预装层优化析柱 工艺开发流程 货号单一填料 PreDictor 板 描述 PreDictorRoboColumn 预装柱 PreDictorCapto Q 2 ul PreDictorCapto Q ul PreDictorCapto Q 0 ul PreDictorCapto S 2 ul PreDictorCapto S ul PreDictorCapto S 0 ul PreDictorCapto DEAE 2 ul PreDictorCapto DEAE ul PreDictorCapto DEAE 0 ul PreDictorCapto MMC 6 ul PreDictorCapto MMC ul PreDictorCapto MMC 0 ul PreDictorCapto adhere 6 ul PreDictorCapto adhere ul PreDictorCapto adhere 0 ul PreDictorCapto adhere ImpRes, PreDictorCapto adhere ImpRes, PreDictorCapto MMC ImpRes, 6 PreDictorCapto MMC ImpRes, PreDictorMabSelect 6 ul PreDictorMabSelect ul PreDictorMabSelect 0 ul PreDictorMabSelectSuRe 6 ul PreDictorMabSelectSuRe ul PreDictorMabSelectSuRe 0 ul PreDictorMabSelectXtra 6 ul PreDictorMabSelectXtra ul PreDictorMabSelectXtra 0 ul PreDictorMabSelectSuRe LX, PreDictorMabSelectSuRe LX, 2 PreDictorMabSelectSuRe LX, 6 PreDictor Q Sepharose FF 6 ul PreDictor Q Sepharose FF ul 货号单一填料 PreDictor 板 多种填料筛选板 描述 PreDictor Q Sepharose FF 0 ul PreDictor SP Sepharose FF 6 ul PreDictor SP Sepharose FF u PreDictor SP Sepharose FF 0 u PreDictorCapto Q ImpRes 6uL PreDictorCapto Q ImpRes ul PreDictorCapto SP ImpRes 6uL PreDictorCapto SP ImpRes ul PreDictor Butyl FF, 6 ul PreDictor Butyl FF, 0 ul PreDictor Butyl S 6FF, 6uL PreDictor Butyl S 6FF, 0 ul PreDictorOctyl FF, 6 ul PreDictorOctyl FF, 0 ul PreDictor Phenyl 6FF HS, 6 ul PreDictor Phenyl 6FF HS, 0 ul PreDictor Phenyl 6FF LS, 6 ul PreDictor Phenyl 6FF LS, 0 ul PreDictorCapto Butyl, 6 ul PreDictorCapto Butyl, 0 ul PreDictorCaptoOctyl, 6 ul PreDictorCaptoOctyl, 0 ul PreDictorCapto Phenyl HS, 6 u PreDictorCapto Phenyl HS, 0 PreDictor AIEX screen 2ul/6ul PreDictor AIEX screening ul PreDictor CIEX screen 2ul/6ul PreDictor CIEX screening ul PreDictor HIC Screen High, 6 u PreDictor HIC Screen High, 0 PreDictor HIC Screen Low, 6 ul PreDictor HIC Screen Low, 0 u 在 PreDictor 板实验后, 工业过程开发的下一步是在层析柱形式中验证性能 预装层析柱是快速和可靠的, 而 PreDictorRoboColumn 是设计用于使用机器系统进行平行实验的一个选择 PreDictorRoboColumn 单元是预装 填料的小型化层析柱, 包括 HIC 填料 每个单元包含 8 根相同的层析柱, 并提供 个不同的体积 :0 0 和 600 μl 货号离子交换 描述 RoboColumnCapto Q, 0 ul RoboColumnCapto Q, 600 ul RoboColumnCapto S, 0 ul RoboColumnCapto S, 600 ul RoboColumnCapto DEAE, 0 ul RoboColumnCapto DEAE, 600 ul RoboColumn Q Seph HP, 0ul RoboColumn Q Seph HP, 600 ul RoboColumn SP Seph HP, 0ul RoboColumn SP Seph HP, 600 ul RoboColumn Q Seph FF, 0 ul RoboColumn Q Seph FF, 600 ul 货号离子交换 描述 RoboColumn SP Seph FF, 0 ul RoboColumn SP Seph FF, 600 ul RoboColumnCapto Q ImpRes, 0 RoboColumnCapto Q ImpRes, 600 RoboColumnCapto SP ImpRes, RoboColumnCapto SP ImpRes,

17 工艺开发用层析柱 货号多模式的填料 描述 PreDictorRoboColumnCapto MMC PreDictorRoboColumnCapto MMC PreDictorRoboColumnsCapto ad PreDictorRoboColumnCaptoadh RoboColumnCapto MMC, 0 ul RoboColumnCapto MMC, 600 ul RoboColumnCapto adhere, 0ul RoboColumnCapto adhere,600 ul RoboColumnMabSelect, 0ul RoboColumnMabSelect, 0ul RoboColumnMabSelectSuRe 0ul RoboColumn MabSelectSuRe,0ul RoboColumnMabSelectXtra 0ul RoboColumnMabSelectXtra 0ul RoboColumnMabSelectSuRe LX, RoboColumnMabSelectSuRe LX, RoboColumnCapto L 0 ul RoboColumnCapto L, 600u 货号疏水层析 描述 RoboColumnCaptoPhe(hs),0ul RoboColumnCaptoPhe(hs),600ul RoboColumnCapto Butyl, 0 ul RoboColumnCapto Butyl, 600 ul RoboColumnPheSephFF(hs) 0ul RoboColumnPheSephFF(hs) 600ul RoboColumnPheSephFF(ls) 0ul RoboColumnPheSephFF(ls) 600ul RoboColumn Butyl SephFF, 0ul RoboColumn Butyl SephFF,600 ul RoboColumn Butyl-S SephFF0ul RoboColumn Butyl-S SephFF600ul RoboColumnOctylSephFF, 0ul RoboColumnOctylSephFF 600 ul RoboColumn Butyl Seph HP,0ul RoboColumn Butyl SephHP, 600ul RoboColumnPheSeph HP, 0ul RoboColumnPheSeph HP, 600 ul 方便工艺过程开发的 HiScreen 层析柱 HiScreen 预装层析柱被设计用于层析柱验证 摸索和优化实验 它们装有.7 ml 填料, 并具有 0 cm 床高度以限制所需要的样品量, 同时提供足够的塔板数以显示分离的可放大性 货号 亲和 离子交换 多模式 疏水 预装柱 HiScreen Ni FF HiScreen IMAC FF HiScreen Capto TM Blue HiScreen Blue FF HiScreen MabSelect SuRe TM LX HiScreen MabSelect Sure HiScreen MabSelect TM HiScreen MabSelect Xtra HiScreen Capto Q ImpRes HiScreen Capto SP ImpRes HiScreen Capto Q HiScreen Capto S HiScreen Capto DEAE HiScreen Q FF HiScreen SP FF HiScreen Q HP HiScreen SP HP HiScreen Capto Core 700 HiScreen Capto MMC HiScreen Capto adhere HiScreen adhereimpres HiScreen MMC ImpRes 平均颗粒 (μm) HiScreen Capto 7 Phenyl (HS) HiScreen Capto Butyl 7 HiScreen Butyl FF HiScreen Butyl-S FF HiScreen Octyl FF HiScreen Phenyl FF (HS) HiScreen Phenyl FF (LS) HiScreen Phenyl HP HiScreenCapto PhenylImpRes 0 每柱载量 0mg(His)6 融合蛋白 88 mghis 标签蛋白 2mg 人白蛋白 2mg 人白蛋白 28 mg humanigg mg human IgG mg human IgG 68 mg human IgG 29 mg BSA 7 mg BSA 70 mg BSA 60 mg LysDzyme 0 mg Ovalbumin 6 mg HSA 29 mg Ribonuclease A 2 mg HSA 29 mg Ribonuclease A mg 卵清白蛋白 -8mgMab/ml 60-mgMab/ml 配基密度 27 μmol/ml 配基密度 μmol/ml 配基密度 0 μmol/ml 配基密度 0 μmol/ml 配基密度 μmol/ml 配基密度 0 μmol/ml 配基密度 2 μmol/ml 配基密度 2 μmol/ml 配基密度 9 μmol/ml 应用 / 特性 高动态载量, 低配基脱落, 稳定性好用于 His 标签蛋白放大工艺探索高动态载量, 低配基脱落, 稳定性好高动态载量, 低配基脱落, 稳定性好用于抗体放大工艺探索用于抗体放大工艺探索 ; 柱高 0 cm, 与生产的条件相似 柱体积小, 节省样品 用于离子交换放大工艺探索 用于疏水层析放大工艺探索 2. (ml/min ) 应用 HIS 标签蛋白的工艺探索 应用 Blue 吸附蛋白的工艺探索应用 Blue 吸附蛋白的工艺探索 耐压 (bar) ph 稳定性

18 凝胶过滤填料 货号 高分辨率首选! 一 ]Superdex 产品 包装 分离 范围 ( 球蛋白 ) 颗粒大小 (μm) 特性 / 应用 ph 稳定性工作 [ 清洗 ] 耐压 (MPa) (cm/h) 目前 GE 产品中分辨率 选择性最高的凝胶过滤介质, 流速快而反压低 低非特异性吸附, 提高回收率 化学物理稳定性特高, 在 0.M HCl 或 M NaOH 中 0 C 00h, 分辨率保持不变 装柱方法简单方便, 可自行装入实验室用 Tricorn HR XK 柱, 生产用 BPG 柱等层析柱 另有三种特为 FPLC HPLC 分析 检测工作设计的 Superdex 系列 0/00 GL 预装柱 Superdex 0 pg Superdex 7 pg Superdex 0 pg 分离范围最宽广! 二 ]Superose Superose 6 pg Superose 2 pg 经济高效, 选择最多! 三 ]Sephacryl Sephacryl S-00 HR ml L L 0 ml L L 0 ml L L 2 ml L L 2 ml L L 70 ml 0 L 0 ml < 0, x , 重组蛋白肽类 多糖 小蛋白等 重组蛋白 细胞色素 单抗 大蛋白 肽类蛋白 多糖 寡核苷酸 病毒 肽类 激素 小蛋白 -2 [-] -2 [-] -2 [-] 宽广的分离范围配合高分辨率, 能一次性分离生物分子大小差异大的混合物 刚性特好, 在高粘性液体如 8M 尿素下也能保持流速, 适合糖类 核酸 病毒, 特别是包涵体蛋白在促溶剂中的纯化 凝胶的寿命特长 颗粒细小, 大小分布集中, 允许高流速纯化, 适合中 高压层析系统使用 ,000 0, , ,000-2 [-] -0 肽类蛋白 多糖 -2 [-] 六种不同分离范围, 提供了广阔的选择性 介质反压特低 易于自行装柱 良好的机械性能, 提供快速高分辨率的纯化 化学稳定性高过传统凝胶, 可用 0.M NaOH 在位清洗 经济型 HiPrep 6 26/60 Sephacryl 00, 0, 00HR 预装柱提高重复性和分辨率 - [2-] Sephacryl S-0 HR 70 ml 0 L , 蛋白, 如 : 血清蛋白 白蛋白 血液抗体 单抗 (IgG/MAB) - [2-] ml Sephacryl S-00 HR 70 ml 0 L 0 ml 0,000-.x 蛋白, 如 : 膜蛋白和血清蛋白 血液抗体 单抗 (IgG/MAB) - [2-] Sephacryl S-00 HR 70 ml 0 L,000-8x 多糖 具延伸结构的大分子如蛋白多糖 脂质体 - [2-] < 2,000 bp DNA 限制片段 ml Sephacryl S-00 HR 70 ml 0 L 葡聚糖 0, < 2,000 bp DNA 限制片段如 DNA 限制片段 - [2-] x ml Sephacryl S-000 SF 70 ml 葡聚糖 x0-0-0 巨大多糖分子 蛋白多糖 ; 小颗粒分子, 如膜结合囊 - [2-] 未经测试 L x0 8 (< 00-00nm 直径 ) 或病毒 7

19 货号 高流速大分子分离! 四 ]Sepharose Fast Flow 产品 包装 分离 范围 ( 球蛋白 ) 凝胶过滤填料 颗粒大小 (μm) 特性 / 应用 ph 稳定性工作 [ 清洗 ] 耐压 (MPa) 高度偶联的联琼脂糖介质, 大大加强了机械性能, 流速特快, 适合工业规模生产 经去电荷处理, 非特异性吸附极低, 提高回收率 极高的化学稳定性, 可用多种促溶剂 有机溶剂工作及 -2M NaOH 在位清洗 (cm/h) Sepharose 6 FF L 0 L 0,000- x0 6-6 巨大分子如 DNA 质粒 病毒 2-2 [2-] Sepharose FF L 0 L 60,000- x0 6-6 巨大分子如重组乙型肝炎表面抗原 病毒 2-2 [2-] 传统大分子分离! 五 ]Sepharose 传统的偶联琼脂糖介质, 非特异性吸附极低, 回收率高 有三种不同浓度的琼脂糖供选择, 分离范围十分宽阔, 从 0,000 到 0,000,000 适合分离分子量大小差异大, 而对分辨率要求不高的样本 Sepharose B L 60, 蛋白 多糖 肽类 分子 L x0 6 量的测定 [-] Sepharose 6B L 0 L 0,000- x0 6-6 蛋白 多糖 肽类 分子量的测定 -9 [-] 0.02 有机溶剂纯化! 六 ]Sepharose CL Sepharose 和 2, 二溴丙醇反应而成, 增强了 Sepharose 的物理和化学稳定性 特别适合含有机溶剂的分离, 能承受较强的在位清洗, 并可以高温消毒 流速方面比传统的 Sepharose 有明显提高 Sepharose L 70, 蛋白 大分子复合物 病毒核酸 CL - 2B 0 L 0x0 6 蛋白多糖 分子量的测量 特别是 [2-] 不能溶解 / 凝集于水溶液的分子 Sepharose CL - B L 0 L 60,000- x0 6-6 大蛋白 肽类 多糖 特别是不能溶解 / 凝集于水溶液的分子及 - [2-] 分子的测定 Sepharose CL - 6B L 0 L 0,000- x0 6-6 蛋白 肽类 多糖 特别是不能溶解 / 凝集于水溶液的分子及分 - [2-] 子的测定 大量文献可供参考! 七 ]Sephadex 经典的葡聚糖和环氧氯丙烷 [epicnlorohydrin] 偶联介质, 拥有极高的选择性 多种分离范围 颗粒大小供选择 粗颗粒 (Coarse) 流速较快, 细颗粒 (Fine) 流速较慢, 分辨率较高 Sephadex 已逐渐被一代 凝胶所代替 Sephadex G-0 00 g 00 g < 700 干粉 0- 抗生素的分析, 还适合亲水蛋白 多肽和寡糖类样品有效去除杂质 2- [2-] kg Sephadex G- 00 g 00 g kg ( 肽 ) 干粉 0- 实验室中的缓冲液交换 脱盐 去除酶的小分子 分离分子量接近的小分子 肽等 2- [2-] Sephadex G-2 Coarse 00 g 00 g kg ( 肽 ) 干粉 工业上去盐及交换缓冲液用! 2- [2-] Sephadex G-2 Medium 00 g 00 g kg 干粉 [2-] Sephadex G-2 Fine 00 g 00 g kg 干粉 [2-] Sephadex G-2 Superfine 00 g 00 g kg 干粉 [2-] 80 8

20 凝胶过滤填料 货号 产品 包装 分离范围 ( 球蛋白 ) 颗粒大小 (μm) 特性 / 应用 ph 稳定性工作 [ 清洗 ] (cm/h) 八 ]Sephadex LH- 中草药及小分子纯化! Sephadex LH- 2 g 干粉 胆固醇 脂肪酸 激素 维他命 g 8- 天然产物 [2-] g 九 ] 分子筛 Marker kg Blue Dextran 00 0 g 分子量约 Gel Filtration Calibration kit LMW 含分子量分别为 : 的六种分子 Gel Filtration Calibration kit HMW 含分子量分别为 : 的六种分子 69 SOURCE 高速低反压介质 ( 填料 ) 低反压精细纯化首选! 目前 GE 产品中低压系统分辨率最高的介质,800 cm/h 流速下反压仅 MPa, 大大减少设备成本 SOURCE 颗粒大小完全均一, 流速 000 cm/h 以上仍保持高分辨率, 数分钟内即完成实验 极高的化学物理稳定性, 可用 M HCl 和 M NaOH 在位清洗, 寿命特长 低非特异性吸附, 回收率高 良好的重复性和工艺放大能力 可自行装于实验室用 Tricorn HR 柱及生产专用的 FineLINE 不锈钢层析柱 每米理论塔板数超过 0,000 一步水压式装柱法, 可于数分钟内自动装好填料, 重复性极高 货号 产品 包装 每毫升载量 颗粒大小 (μm) 特性 / 应用 ph 稳定性工作 [ 清洗 ] 耐压 (MPa) (cm/h) 一 ] 离子交换 SOURCE Q 0 ml 0 ml 0 ml 00 ml Litre 0 mg 白蛋白 高分辨率精细纯化 装入 HR 柱效果最佳 若用 XK26 柱, 需配 26mm Filter Kit (8-0-28) 2-2 [-] ml SOURCE S SOURCE 0Q 0 ml 0 ml 00 ml Litre 0 ml 0 ml Litre 80 mg 溶菌酶 mg 白蛋白 0 极快速的中度至精细纯化 可用于各种 XK, HR, BPG, FineLINE 层析柱 2-2 [-] 2-2 [-] SOURCE 0S 0 ml 0 ml Litre 80 mg 溶菌酶 [-] 二 ] 反相层析 可在 ph-2 下进行反相纯化, 比硅胶介质载量更高, 反压更低 减低生产成本 SOURCE RPC SOURCE 0 RPC 0 ml 0 ml 00 ml L 0 ml 0 ml 00 ml L 0 mg 胰岛素 72 mg 胰岛素 0 介质均一, 放大 重复性好, 易于装柱, 适合生产用在碱性下分离纯化血管紧张肽, 脂肪动员激素及酸性下不稳定的生长因子 -2 [-] -2 [-]

21 离子交换填料 凝胶基架在纯化步骤的选择 离子交换凝胶基架 Sepharose Big Beads Sepharose XL Sepharose Fast Flow Sepharose High Performance SOURCE 0 SOURCE 粗分离中度纯化精细纯化 强阳 S SP 强阴 Q QAE 弱阳 CM 弱阴 DEAE 的分别在于使交换介质守全离子化的 ph 范围, 较宽者为强, 较窄者为弱, 与结合强度无关 传统的凝胶多数为弱阴 DEAE 弱阳 CM, 同样的纯化工作, 可以强阳 S,SP 强阴 Q,QAE 介质代替 传统的纤维素介质如 DE2,CM2 由于流速太慢, 柱床高度会随缓冲液浓度及 ph 改变, 难以用于下游纯化 纤维素介质不能承受 0.M 以上 NaOH 在位清洗, 重生效果差, 寿命短, 所以已被化学稳定性高 流速快的高度偶联琼脂糖介质, 如四种以 Sepharose FF 为基架的离子交换介质代替 货号 产品 包装 每毫升载量 颗粒 大小 (μm) 高载量与高分辨率的结合! 一 ]Sepharose High Performance (H.P.) & Capto ImpRes 特性 / 应用 ph 稳定性工作 [ 清洗 ] 目前 GE 琼脂糖类产品范围内颗粒最细, 分辨率最高 当高解析度是主要的纯化目标时,Sepharose High Performance 的高载量令其成为最符合经济和放大效益的选择 耐压 (MPa) (cm/h) Q Sepharose HP SP Sepharose HP Capto SP ImpRes Capto Q ImpRes 7 ml L L 7 ml L L 2 ml 00 ml L 2 ml 00 ml L 70 mg BSA mg 核糖核酸酶 >9 mg BSA >0 mg BSA 0 0 经济的精细纯化高流速 高分辨率高流速 高分辨率 2-2 [2-2] - [-] - [-2] 2- [2-2] 高产量初步纯化首选! 二 ]Sepharose Fast Flow (F.F.) 在目前 GE 产品中最受欢迎的下游初步纯化介质 高流速加上高载量, 能快速纯化大量粗产品 高化学稳定性, 能承受各种校正样品 配合有效的在位清洗, 可反复重生过千次 Capto Q ImpRes Capto adhere ImpRes Capto MMC ImpRes Q Sepharose FF SP Sepharose FF S Sepharose FF DEAE Sepharose FF CM Sepharose FF Anx Sepharose FF Anx Sepharose FF ANX Sepharose FF (hs) Q Sepharose FF 2 ml 00ml L 2ml 00ml L L 0L 2ml 00ml L L 0L 2 ml 00 ml L 0 L 2 ml 00 ml L 0 L L 0 L 2 ml 00 ml 0 L 2 ml 00 ml 0 L 00 ml L 2 ml 00 ml L 0 L L >0 mg BSA -8 mg MAb 60- mg MAb/ml mg HSA 70 mg 核糖核酸酶 0 mg HSA 0 mg 核糖核酸酶 mg BSA 0 0 高流速 高分辨率高流速 高分辨率高流速 高分辨率快速 高产量纯化 2- [2-2] -2 [2-] -2 [2-] 2-2 [-] - [-] - [-] 2- [-] - [2-] - [2-] -0 [2-] 2-2, [-]

22 高载量高流速分离纯化! 三 ]Capto 离子交换填料 高流速琼脂糖 (high flow agarose) 基质, 刚性更强 传质速度更快 线状葡聚糖表面延伸剂, 载量提高 高流速 :>700 cm/h( cm 床高的使用流速 ) 低反压 :< bar(700 cm/h cm 床高 ) 高稳定性 : M NaOH 0 度 周稳定 货号 产品 包装 每毫升载量 颗粒 大小 (μm) Capto Q 2 ml 00ml L 00 mg BSA/ml medium 特性 / 应用 高流速 高载量 2- ph 稳定性工作 [ 清洗 ] [2-2] 耐压 (MPa) (cm/h) 四 ]Macrocap SP Capto S Capto DEAE Capto adhere Capto MMC Capto Core 700 Capto Core 700 Capto Core 700 Q Sepharose XL SP Sepharose XL 七 ]Sepharose CL _ 6B 八 ]Sephacel 超高载量粗提凝胶! 五 ]Sepharose XL 快速处理巨量样品! 六 ]Sepharose Big Beads Q Sepharose Big Beads SP Sepharose Big Beads DEAE Sepharose CL-6B DEAE Sephacel 一次性批量生产! 九 ]Sephadex Macrocap SP MacroCap Q 2 ml 00ml 2 ml 00 ml L 2 ml 00 ml L 2 ml 00 ml L 2ml 00ml L 2 ml 00 ml L 2 ml 00 ml L 00 ml L 00 ml L L 0 L L 0 L 00 ml 0 L 00 ml 0 L mg lysozyme/ml medium mg ovalbumin/ml medium N/A mg BSA/ml medium at 0 ms/cm mg ovalbumin/ml medium 0. mmol H+/ml medium 0. mmol H+/ml medium > 0 mg BSA > 60 mg Lysozyme 高流速 高载量 高流速 高载量 多位点, 用作抗体穿透, 一步吸附 HCP,DNA 等杂质 耐受高盐, 高流速 高载量 用于病毒和其他大生物分子的中毒纯化和精细纯化步骤 载量高 -2 [-2] [2-] ] - -] 较传统的偶联离子交换凝胶, 载量很高 渐被高流速 Sepharose FF 凝胶所代替 70 mg -2 HSA [2-] 经改良预胀好的球状纤维介质, 提高了流动性质和分辨率 0 mg HSA 0 纯化 PEG 蛋白 - [2-] 0 纯化 PEG 蛋白 - [2-] 目前 GE 产品中最超高载量凝胶, 较传统离子交换凝胶高出 -0 倍的载量 高物理稳定性的大颗粒凝胶, 能在最短时间内浓缩 初步纯化大量粗产品 处理稀释样品流速在 00cm/h 以上, 高黏性样品 ( 水的 2. 倍 ) 亦可保持 00cm/h 只于特别应用 2-2 [2-] - [-] 由于载量高 价钱便宜, 在工业批量生产中应用多年 因流速 体积受外在环境影响而改变, 渐被一代 凝胶所取代 0 较 2 多孔, 孔径较大 对于分子量小于 0,000 者,2 比 0 的载量高 ;0,000-00,000 者,0 则比 2 的载量高 ; 大于 00,000 者, 结合限于颗粒表面, 所以 2 的载量更高 QAE Sephadex A-2 QAE Sephadex A-0 SP Sephadex C-2 00 g kg 00 g kg 00 g kg 0 mg HSA 80 mg HSA 20 mg 核糖核酸酶 干粉 0- 干粉 0- 干粉 0- 低分子量蛋白 多肽, 核苷酸以及巨大分子 (MW >,000) 中等大小的生物分子 (0-0 KD) 小蛋白以及巨大分子 (MW > 0,000) 2- [2-] 2-2 [2-2] 2- [2-]

23 离子交换填料 十 ]Whatman 高级离子交换纤维素 (AIEC) 仅供大规模工业使用 由于此类介质为纤维素骨架, 物理性状不佳, 建议使用 Capto 或 Sepharose Fast Flow 骨架的介质替换 货号 产品 包装 每毫升载量 颗粒 大小 (μm) DEAE Sephadex A-0 CM Sephadex C-2 CM Sephadex C-0 00 g 00 g kg 00 g 00 g kg 00 g 00 g kg 0 mg HSA mg 核糖核酸酶 0 mg 牛碳氧血红蛋白 干粉 0- 干粉 0- 干粉 0- 特性 / 应用 中等大小的生物分子 (0-0 KD) 小蛋白以及巨大分子 (MW >,000) 中等大小的生物分子 (0-0 KD) ph 稳定性工作 [ 清洗 ] 2-2 [2-2] 2- [2-] 2-2 [2-2] 耐压 (MPa) (cm/h) 货号 产品 物理形态 包装 小离子载量 (meq/dg*) 蛋白载量 ** (mg/dg*) (mg/ml) 装填密度 ** (dg*/ml) PH 工作稳定性 DE2 DE2 DE2 DE QA2 CM2 CM2 CM2 干纤维状 干微粒状 预溶胀微粒状 预溶胀微粒状 预溶胀微粒状 干纤维状干微粒状 预溶胀微粒状 00 g 20 g 00 g 00 g 00 g 2 Kg 00 g 2 Kg 00 g 2 Kg 20 g 00 g 00 g 00 g 2 Kg * dg 干燥时克数 ** g 加入的克数 ( 干的或预溶胀的 ) 0 mm 醋酸缓冲溶液 ph. 中的 lysozyme 0 mm 醋酸缓冲溶液 ph.0 中的 lysozyme 0 mm 磷酸缓冲溶液 ph 8. 中, 牛血清蛋白 十一 ]CDR 细胞碎片清除剂 货号 产品 Cell debris remover Capto Core 700 的关键性能特点包括 : 包装 00 g 用于病毒和其它大生物分子的中度纯化和精细纯化的 Capto Core Kg 与 GF 相比, 高达 00 倍的样品上样量以及明显更高的流速确 保了生产效率显著提高 具有激活的配基核心以及未激活的壳层的核心微球技术可有 效的捕获污染物, 同时使目标分子流穿 由于穿流层析和稳定的性能, 方便的条件优化, 可以使用更 广泛操作范围 应用 在蛋白质纯化中作为助滤剂初步清理细胞裂解物, 去除多余的悬浮胶体和不容物, 留下溶液的靶蛋白 也可用其他助滤剂 : 参见无灰粉 2 Capto Core 700 填料设计用于病毒和其他生物大分子的纯化 型的核心微球技术以及复合模式 辛胺配基使 Capto Core 700 在一种层析介质中具有大小分离以及吸附层析的双重功能 这些特点使 Capto core 700 成为疫苗生产中病毒纯化介质的极佳备选方案 分子量排阻为 700,000D, 小于 700KD 的生物分子可以进入微球内部与离子交换基团结合, 大于 700kD 的蛋白会被排阻在微球外, 在流穿 中通过 有效去除 HCP 和 DNA, 大多数 HCP 带有正电荷,pH 值在 7 以上 Capto Core 700 的配基带有正电荷, 因此在 ph7-9 与 HCP 梁洪结合 DNA 在广泛 ph 范围内都带有负电荷,Capto caore 700 可以有效地吸附 DNA 以去除样品中的 DNA 22

24 亲和层析填料 货号 产品 包装 目标 配体 颗粒大小 (μm) 每毫升结合量 应用 ph 稳定性工作 [ 清洗 ] (cm/h) 一 ] 组氨酸标签蛋白的纯化 Ni Sepharose HP Ni Sepharose 6 FF 2 ml 00 ml ml 2 ml ~ μmol Ni 2+ > 0 mg His 蛋白 ~ μmol Ni 2+ /ml 胶 可与金属作用的蛋白 脂类 核苷酸,Ni 2+ 脱落极低适合大规模 His 重组蛋白纯化 -2 [2-] 2- [-2] < 0 < ml TALON Superflow TALON Superflow Ni Sepharose excel Ni Sepharose excel Ni Sepharose excel Ni Sepharose excel 00 ml 0ml 0ml 2ml 00ml 00ml L > mghis 蛋白 >0 mghis 蛋白 当纯度比收率重要时, 方便的从未澄清的细胞裂解液中纯化组氨酸标签蛋白直接纯化真核细胞培分泌表达在胞外的组氨酸标签蛋白. 保证高载量, 没有 Ni 离子脱落 cm/h H2O in a cm (i.d. H) column 二 ] GST 标签蛋白的纯化 三 ] MBP 标签蛋白的纯化 Glutathione Sepharose HP Glutathione Sepharose FF Glutathione Sepharose B Dextrin Sepharose HP 2 ml 00 ml 2 ml 00 ml 00 ml 0 ml 00 ml 00 ml 2 ml 00 ml - μmol 谷胱甘肽 7 μ mol 谷胱甘肽 mg 重组 GST mg GST fusion protein > mg 谷胱甘肽 S- 转移酶 羧端含谷胱甘肽 S- 转移酶的重组融合蛋白或依赖 S- 转移酶或谷胱甘肽的蛋白羧端含谷胱甘肽 S- 转移酶的重组融合蛋白或依赖 S- 转移酶或谷胱甘肽的蛋白羧端含谷胱甘肽 S- 转移酶的重组融合蛋白或依赖 S- 转移酶或谷胱甘肽的蛋白 Approx. 7 mg MBP- Sal 纯化 MBP 标签蛋白 Approx. 6 mg MBP-bGal -2 [-2] -2 [-2] - [-] [2-] 四 ] Step (II) 标签蛋白的纯化 StrepTactin Sepharose HP 0 ml 6 mg Step II 标签蛋白 五 ] 用于金属离子螯合纯化 IMAC Sepharose 00 ml μmol Ni 2+ /Zn 2+ 可与金属作用的蛋白 High Performance 2 μmol Cu 2+ 肽类 核苷酸等 [2-] IMAC Sepharose 6 FF 2 ml μmol Ni 2+ /Zn 2+ 可与金属作用的蛋白 ml 2 μmol Cu 2+ 肽类 核苷酸等 [2-] L Chelating 0 ml 亚氨双乙酸 μmol 可与金属作用的蛋 Sepharose FF 00 ml iminodi- Zn 2+ 白 肽类 核苷酸等 [2-] L acetic acid 组氨酸标签蛋白纯化完整解决方案选择指南 Ni Sepharose 6 FF/HP 通过偶联 Ni 2+ 使介质预带电荷, Ni 2+ 是纯化许多 His- 标记蛋白的首选离子 Ni Sepharose 6 FF/HP 具有非常高的蛋白载量, 这就意味着纯化同样的蛋白需要的介质量就更少, 成本也就更低 Talon 是螯合有 Co 2+ 离子的亲和填料, 其对 HIS 标签蛋白的选择性高于传统的 NI 柱, 能够得到纯度更高的蛋白样品 较大的凝胶颗粒降低了填料对样品预处理的要求, 可使用细胞破碎液上柱纯化 Ni Sepharose excel 能够耐受 0 mm EDTA 和 0 mm DTT, 特别适合真核分泌表达的 HIS 标签蛋白的纯化, 无需预处理就能使用培养基上柱吸附, 从而极大地简化实验流程, 保护蛋白的活性 IMAC Sepharose 和 Chelating Sepharose 填料能够螯合不同的金属离子, 方便实验者合成出适合自己目标蛋白的金属螯合层析填料 原核 您的要求是什么 高纯度 预螯合的 TALON Superflow ( 基于钴离子 ) 产品 ( 第 2 页 ) 您正在使用哪种表达系统 预螯合的 Ni Sepharose 产品 ( 第 6 页 ) 胞内 高容量 真核 蛋白质如何被表达? 未螯合的 IMAC Sepharose 产品 ( 第 页 ) 胞外 预螯合的 Ni Sepharose excel 产品 ( 第 0 页 ) 2

25 亲和层析填料 货号 产品 包装 目标 配体 颗粒大小 (μm) 每毫升结合量 应用 ph 稳定性工作 [ 清洗 ] (cm/h) 六 ] 用于抗体纯化 rprotein A Sepharose FF nprotein A Sepharose FF rmpprotein A Sepharose FF Protein A Sepharose CL-B ml 2 ml 0 ml L ml 2 ml 0 ml L ml 2 ml 0 ml L. g 60 g 2 ml 00 ml 6 mg 重组 Protein A 6 mg Protein A 6 mg 重组 Protein A 2- mg Protein A mg 人类 IgG; 0 mg 小鼠 IgG; 每毫升结合量 mg 人 IgG mg 人类 IgG 6-2 mg 人类 IgG; 2 mg 小鼠 IgG; 是实验室和工业规模从细胞培养纯化和回收抗体的理想选择抗体纯化, 无任何动物衍生组份低脱落 一步高纯度纯化单抗和多抗纯化体液或细胞培养液中的免疫球蛋白 -0 [2-] -9 [2-0] -0 [2-] -9 [2-0] 建议流速 00 > Protein G Sepharose FF GammaBind G Sepharose GammaBind Plus Sepharose KappaSelect KappaSelect IgSelect ml 2 ml 0 ml ml 2 ml ml 2 ml 2 ml 0 ml 2ml 0ml ml 2 mg 蛋白 G mg Fab/ml 由 S.Cerevisiae 产生的重组的 KD 蛋白 -6 2 mg 人类 IgG; 2 mg 牛 IgG; -6 > 7 mg 人 IgG -6 > mg 人 IgG mg/ml 7 mg 天竺鼠 IgG;9 mg 山羊 IgG; 7 mg 大鼠 IgG;0 mg 小鼠 IgG; 结合来自人 小鼠 大鼠的所有 IgG 亚基, 结合来自豚鼠 山羊 牛 绵羊和马的所有 IgG 增加大鼠和小鼠单抗的载量 ( 还有人 牛 绵羊 马 兔和山羊 ) 主要特异吸附抗体的 Fab, 或纯化 Fab 融合蛋白特异纯化人类 IgG, 能结合人类 IgG ( 在 2.min 保留时间内 ) 的所有亚型, 包括 IgG -9 [2-9] -9 [2-9] -9 [2-9] -0 2-( 长期 ) -( 短期 ) Capto L 2ml 00ml 0 mg/ml 8 约 2mg 人类 Fab 纯化广泛的抗体片断, 例如 Fabs, 单链可变区片断 (scfv) 和区域抗体 (Dabs) 2-0 包括 kappa 的轻链 00 cm/ cm 柱床 L 七 ] MabSelect 用于抗体纯化 高流速琼脂糖作为骨架, 介质的刚性和传质性能大大优于传统的 SepharoseFF 和 6FF 琼脂糖骨架, 可以在大规模生产时, 使用更高的流速而保持更高的载量, 大大提高生产效率 MabSelect Xtra 介质是在 MabSelect 介质的基础上优化而来, 是市面上目前最高的动态载量的介质之一 MabSelect SuRe 介质可用 NaOH 做在位清洗, 有效降低清洗成本 Mabselect 2 ml 0 ml L MabSelect SuRe 2 ml 0 ml L MabSelect Xtra 2 ml 0 ml L MabSelect SuRe LX 2ml 00ml 6 mg 8 重组 Protein A 6 mg 8 修饰的耐碱 protein A 大于 6 mg 7 重组 Protein A 6 mg 8 修饰的耐碱 protein A 0 mg 人类 IgG; 每毫升胶动态载量大于 0 mg 人 IgG 每毫升胶动态载量约 0 mg 人 IgG 每毫升胶动态载量约 60 mg 人 IgG 目前单抗载量最高, 基团脱落最少, 最专一, 稳定性最好的单抗亲和介质之一能耐受 MNaOH 进行 CIP, 非常适合在位清洗要求严格的生产, 同时降低清洗成本超高载量非常适合大规模生产以降低柱床体积和溶剂消耗, 有效降低生产成本能耐受 MNaOH 进行 CIP, 非常适合在位清洗要求严格的生产, 同时降低清洗成本 -0 [2-2] -2 [2-2] -2 [2-2] -2 [2-] 建议流速

26 亲和层析填料 货号 产品 包装 目标 配体 颗粒大小 (μm) 每毫升结合量 应用 ph 稳定性工作 [ 清洗 ] (cm/h) 八 ] 用于耦联配基 NHS activated Sepharose FF CNBr activated Sepharose FF CNBr activated Sepharose B CNBr activated Sepharose 6MB Activated CH Sepharose B Epoxy-activated Sepharose 6B EAH Sepharose B Activated Thiol Sepharose B Thiopropyl Sepharose 6B 2 ml 00 ml 0 g 20 g g 20 g g g 20 g g 20 g 0 ml 00 ml g g -NH2 -NH2 -NH2 -NH2 -NH2 -NH2 -OH; -SH -SH -SH 最少 2 mg IgG 尤其适合较小的分子 -26 mg 胰蛋白酶原 2-60 mg 胰蛋白酶原结合带配体的细胞以作细胞亲和层析 0- μ mol 甘氨酰白氨酸 9-0 μ mol 环氧基 7- μ mol 氨基 μ mol 8- μ mol 活化硫基 ph 小时 ph 小时 ph 小时 ph 小时 ph -0 - 小时 ph 9- > 6 小时 ph..-2 小时 ph -8 ph -8-6 小时 - [2-] 2- [2-] 2- [2-] 视结合细胞而定 2- [2-] 2- [2-] - [-] 2-2- [2-] 九 ] 用于基团特异性纯化 Blue Sepharose 6 FF 0 ml 00 ml L μ mole Cibacron Blue -6 >8 mg HSA 纯化蛋白 干扰素 需要核苷酸辅助的酶 a 2 - 巨球蛋白, 凝血因子等 -2 [-] Capto Blue (HS) Capto Blue Capto Heparin 2 ml 00 ml 2 ml 00 ml 2ml 0ml L.8mg Heparin 7 0 mg HSA 7 2 mg HSA.mg ATIII 纯化白蛋白 干扰素 需要核苷酸辅助的酶 a- 巨球蛋白蛋白 凝血因子等 抗凝血酶 III 凝血因子 脂蛋白 脂酶 蛋白合成因子 ; 激素 类固醇受体 核酸结合酶 限制性内切酶 干扰素 > Heparin Sepharose 6 FF L 20 ml 0 ml mg 肝素 heparin -6 2 mg 抗凝血酶 III -2 [-] > Streptavidin Sepharose HP ml > 00 mmol Biotin 6 mg 生物素标记的血清蛋白 利用生物素和抗生素的结合作用做亲和层析 ; 如使用生物素标记的抗体纯化相应抗原 2-0. 建议流速 0 9 2

27 亲和层析填料 货号 产品包装 每毫升 配体含量 颗粒大小 (μm) 每毫升结合量 应用 ph 稳定性工作 [ 清洗 ] (cm/h) Benzamidine Sepharose FF (HS) Benzamidine Sepharose 6B Calmodulin Sepharose B Con A Sepharose B Gelatin 2 ml 00 ml 00 ml 00 ml 0 ml 00 ml 00 ml ml 2 ml 2 μ mole 苯甲酰胺 7 μ mole 苯甲酰胺 mg 钙调节因子 0-6 mg 刀豆球 Protein A.-8 mg mg 胰蛋白酶 mg 胰蛋白酶 mg 胰蛋白酶 - mg 甲状腺球蛋白 mg 专一结合丝氨酸蛋白酶 胰蛋白酶和类胰蛋白酶, 更快速专一结合丝氨酸蛋白酶 胰蛋白酶和类胰蛋白酶 ATP 酶 蛋白激酶 磷酸二酯酶 神经传递素 干扰素 促肾上腺皮质激素能纯化糖蛋白 膜蛋白 糖脂 多糖 带甘露糖苷或葡糖苷残基的膜囊泡 IgM; 激素 ; 脂蛋白等一步纯化或去除纤维结合素 2-8 [-9] 2- [2-] -9 [-9] -9 [-9] Sepharose B 00 ml 明胶 血浆纤维 [2-0] Gelatin Sepharose FF L gelatin -6 结合素 2-0 [2-0] IgG Sepharose FF Lentil Lectin Sepharose B 0 ml 0 ml 2 ml 人类 IgG.9-.2 mg 扁豆外源凝集素 -6 > 2 mg Protein A 6- mg 甲状腺球蛋白 一步纯化原核试验生物表达系统产生的 Protein A 融合产物能纯化糖蛋白 膜蛋白 ( 特别是未含端甘露呲喃葡萄糖 [a - D - glucosepyranosyl] 甘露呲喃糖 [a - D - mannopyranosyl] 或相类 -0 [-] -2 [-0] 建议流速 似残基分子 ) VIII Select VIISelect 2 ml 00 ml 2ml 0ml 000 IU VIII.7mg 7 7 8mg VII 因子 主要特异吸附 VIII VII 因子纯化 > ECH Lysine Sepharose Fast Flow L 00ml -8umol Lysine.m 纤维蛋白溶酶原与 Lysine 有特异结合的蛋白纯化 -2 >0 十 ] 用于纯化核酸 ADP Sepharose B Sepharose B g 2 μmol 2 ADP mg 葡糖 6 磷酸脱氢酶 纯化 NADP+ 依赖脱氢酶和其它对 NADP+ 有亲和作用的酶如葡糖 -6- 磷酸脱氢酶 -0 [-0] PlasmidSelect Xtra 2ml 0 ml L 2-mercaptopyridine mg 超螺旋质粒 用于治疗用超螺旋质粒 DNA 的纯化 十一 ] 用于流感疫苗纯化 高度刚性基质 ( 与用于 Capto MMC 的基质相同 ) 允许高流速和高柱床高度, 与高容量结合是高生产能力的基础 对各种病毒的类亲和行为, 这使得 Capto VirS 成为在不同病毒疫苗生产中的通用填料 极好的化学稳定性允许使用 M NaOH 进行在位清洗和净化 Capto DeVirs 2 ml 纯化流感疫苗 Capto DeVirs 00 ml μmols Capto DeVirs L 26

28 疏水层析填料 生物分子表面大都含或强或弱的疏水区域, 在不同环境下, 与各种疏水介质产生不同强弱和结合 高离子强度可加强疏水性 和离子交换刚刚相反, 高盐吸附, 低盐洗脱 经洗脱样品又可直接或稍加稀释后上其它层析柱, 做为连接下游和层析步骤的桥梁 并可完全取代传统的盐析沉淀技术, 更符合工业生产要求 比反相层析介质的配体密度低许多, 无需有机溶液剂洗脱, 保存生物活性 配体种类繁多, 提供宽广的选择性 基架 粗分离中度纯化中度纯化 Phenyl Sepharose 6 Fast Flow (HS) Phenyl Sepharose 6 Fast Flow (LS) Octyl Sepharose Fast Flow Butyl Sepharose Fast Flow Phenyl Sepharose High Performance Capto Phenyl (HS) Capto Butyl 疏水层析的分离效果受不同配体 缓冲液 盐浓度 温度等多种因素影响 哪种介质最适合很难预测, 必须经过试验 疏水层析试盒 [ 货号 7-9-0] 提供了五种不同疏水层析小预装柱, 可快速筛选适合介质 货号 产品 包装 每毫升 载量 颗粒大小 (μm) 每毫升结合量 特性 / 应用 ph 稳定性工作 [ 清洗 ] (cm/h) 一 ] 预处理及中度纯化介质 Capto Phenyl (HS) Capto Butyl Butyl Sepharose FF Butyl Sepharose FF (HS) Octyl Sepharose FF Phenyl Sepharose 6 FF (LS) Phenyl Sepharose 6 FF(HS) Phenyl Sepharose Big Beads Butyl-S Sepharose 6 FF 2 ml L 2 ml 2 ml 0 ml 00 ml L L 2 ml 0 ml L L 2 ml 0 ml L L 2 ml 0 ml L L L 2 ml 0 ml L L 27 μmol 苯基 μmol 丁基 0 μ mole 正丁烷基 n-butyl 正丁烷基 0 μ mole 正辛烷基 n-octyl μ mole 苯基 Phenyl 0 μ mole 苯基 Phenyl μ moles 27 mg BSA 27 mg BSA 7 mg lgg 26 mg HSA 26 mg lgg 7 mg HSA 0 mg lgg 2 mg HSA 0 mg lgg 6 mg HSA 疏水性最强 疏水性最弱 疏水性最弱, 适合含脂族 (aliphatic) 配体的生物分子 疏水性中等, 适合各种蛋白的分离和纯化 适合含芳香族 (aromatic) 配体的蛋白, 特别是单抗 疏水性最强, 载量高, 适合含芳香族 (aromatic) 配体的生物分子的预处理 疏水性最弱的疏水填料 - [2-] - [2-] - [2-] - [2-] - [2-] - [2-] - [2-] - [2-] - [2-] 二 ] 精细分离介质 Phenyl Sepharose High Performance butyl Sepharose High Performance Capto Phenyl ImpRes 7ml L L 2ml 0ml L L 2ml 00ml L L 2umol 0umol 0umol 0 mg a-chymotrypsinogen 8 mg b-lactoglobulin 9 mg BSA 精细分离 精细分离 高流速精细纯化

29 可自行填装的实验室用层析柱 货号产品空柱尺寸带一个适配器操作压力网孔尺寸内径 (mm) 高度 (cm) 体积 (ml) 柱床高度 ( cm) 货号产品包装 Column C0/0 Column C0/ Column C0/0 Column C6/ Column C6/0 Column C6/70 Column C6/00 Column C26/0 Column C26/70 Column C26/00 Column HR6/ Column HR6/0 Column HR6/0 Column XK6/ Column XK6/0 Column XK6/70 Column XK6/00 Column XK26/ Column XK26/0 Column XK26/70 Column XK26/00 Column XK0/ Column XK0/0 Column XK0/60 Column XK0/00 XK0 FF kit Hiscale TM 6/ Hiscale TM 6/0 Hiscale TM 26/ Hiscale TM 26/0 Hiscale TM 0/ Hiscale TM 0/0 TRICORN / TRICORN /0 TRICORN /00 TRICORN /0 TRICORN /0 TRICORN 0/ TRICORN 0/0 TRICORN 0/00 TRICORN 0/0 TRICORN 0/0 TRICORN 0/00 TRICORN 0/600 可自行填装的层析柱 INDEX COLUMN 70/00 INDEX COLUMN 70/90 INDEX COLUMN 00/00 INDEX COLUMN 00/90 INDEX COLUMN 0/00 INDEX COLUMN 0/90 INDEX COLUMN 0/00 INDEX COLUMN 0/90 BPG 00/00 BPG 00/70 BPG 00/90 BPG 0/00 BPG 0/90 BPG 0/00 BPG 0/70 BPG 0/90 FINELINE PILOT FINELINE 00P FINELINE 00PL FINELINE 0P FINELINE 0PL Axichrom 0/00 SS Axichrom 0/00 SS mm 0 mm 00 mm 0 mm 0 mm mm 0 mm 00 mm 0 mm 0 mm 00 mm 600 mm 装柱器 货号 产品 包装 用于 C 型柱 用于 HR 型柱 用于 XK 型柱 用于 Tricorn 型柱 RESERVOIR RC 0 RESERVOIR RC 6 RESERVOIR RC 26 bar (. psi, 0. MPa 0 bar ( MPa, 0 psi) bar (0. MPa, 72 psi) bar ( psi, MPa) bar 00 bar (0 psi, 0 MPa) 0 bar (72 psi, MPa) PACKING EQUIPMENT HR 6 PACKING RESERVOIR RK6/26 PACKING RESERVOIR RK0 PACKING CONNECTOR XK 6 PACKING CONNECTOR XK 26 TRICORN PACKING EQUIPMENT /0 TRICORN PACKING EQUIPMENT 0/00 TRICORN PACKING CONNECTOR - TRICORN PACKING CONNECTOR -0 TRICORN PACKING CONNECTOR 或 80 μm 尼龙 0 μm 尼龙 0 μm 尼龙 μm 尼龙

30 HiScale TM columns HiScale 是一种型的耐压达到 Bar 的玻璃空柱系列产品, 其主要应用于工艺开发和实验室级别的层析, 和经典的 xk 系列空柱的构成了完整的产品线 HiScale 柱操作简便并具有一致的可重复性 该系列柱更加适合于一代高流速填料如 Capto 和 MabSelect 系列, 与 ÄKTA 平台配合, 用于生物分子的工艺开发与毫克到克级别的实验室制备, 配合 AKTA avant 用于工艺开发, 更是锦上添花 产品特点如下 : 耐受的压力更高, 最高至 bar, 与现代的 介质的完美配合设计的非旋转活塞装置可以实现轴向压缩的方式装柱, 同时不会引起连接管路打结柱头 QuickLock 机制, 使柱头的操作和清洗更快方便快捷标配有两个柱头对装柱高度提供了较高的灵活性能适用于目前所有使用 GE Healthcare 的 XK 柱的方法和应用 HiScale 柱子的很多创性设计简化和改善了柱子的功能性 货号 产品 HiScale 6/ 空柱尺寸内径 (mm) 柱高 (cm) 6 体积 (ml) 0 柱床高度 (cm) 0- 操作压力 网孔尺寸 HiScale 6/ HiScale 26/ HiScale 26/ bar μm 尼龙 HiScale 0/ HiScale 0/ 在位清洗和消毒 (CIP&SIP) 在位消毒 [Sanitization-in-place] 和在位清洗 [Cleaning-in-place] 对层析介质和仪器的保养十分重要 在位消毒 [SIP] 的目的是将微生物感染减到最低, 绝大多数的微生物可用 0.-M NaOH 以该凝胶的建议流速洗约 0.- 小时消除 在位清洗 [CIP] 的目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白 凝胶在使用十次以后, 最少做一次 CIP 事实上, 做 CIP 时, 往往已经包含了 SIP, 不必再重复 一代 Bioprocess 凝胶由于拥有很高的化学稳定性, 大都可用至 -2M NaOH 在位清洗 离子交换 疏水层析介质 以 0cm/h 用 0.-2M NaOH 相反方向洗四个体积, 再以最少三个柱体积平衡缓冲液再生 凝胶过滤介质 CIP 的方法相同 但流速需减至 cm/h, 接触至少一至二小时 SOURCE 介质 用二至五个柱体积 M NaCl M NaOH M HCl M NaCl 的顺序以 80cm/h 洗柱 每个溶液间需用二个柱体积蒸馏水过柱 去除脂类及疏水性强的蛋白 使用递增式梯度以四至十个柱体积 70% 乙醇或 0% 异丙醇洗柱, 再用最好少三个柱体积蒸馏水加以过柱 或用二外柱体积 0.% 非离子性去污剂 [ 溶在 M 乙酸中 ] 洗柱, 再用五个柱体积 70% 乙醇过柱, 最后用三至四个柱体积蒸馏水加以清洗 29