目录 手动纯化产品凝胶过滤离子交换标签蛋白纯化抗体纯化其他亲和纯化疏水及反相纯化工艺开发用层析柱层析空柱及对应填料附录一层析柱相关接头附录二层析应用指南 此书中常用缩写柱子类型常用缩写解释 : ST:

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2 目录 手动纯化产品凝胶过滤离子交换标签蛋白纯化抗体纯化其他亲和纯化疏水及反相纯化工艺开发用层析柱层析空柱及对应填料附录一层析柱相关接头附录二层析应用指南 此书中常用缩写柱子类型常用缩写解释 : ST: 不锈钢柱 PE:Peek 材质,Tricorn 柱形式 GL: 玻璃材质, Tricorn 柱形式 产品名常用缩写解释 : XL: 高载量 Pg:Prep grade, 制备级 HR:High Resolution, 高分辨率 LS:Low Sub, 低取代, 配基密度低 HS:High Sub, 高取代, 配基密度高 HP:High Performance, 高性能, 填料平均颗粒大小约 3 μm, 颗粒细能带来高分辨率的分离纯化 FF:Fast Flow, 快流速, 填料平均颗粒大小约 μm, 较 HP 颗粒粗, 具有良好的分辨率及轻松实现规模扩大的分离纯化 Sephadex G2(SF,F,M,C):SF:Superfine; F:Fine; M:Medium; C:Coarse; 分别表示填料的颗粒大小粗细, 颗粒越细分辨率越高 BioProcess Media 为了满足近年生物技术进入产品化的收成期需要,GE Healthcare 相继推出了许多特别适合生产应用的 BioProcess 凝胶, 它们的特点是 : 高重复性 : 适用于实验室至大规模工业生产的工艺放大 高物理 化学稳定性 : 易于清洗 消毒及再生, 所以介质寿命非常长久 高动态载量 流速快 : 易于装于生产柱内, 缩短生产周期和次数 每种凝胶均有完整的文献 档案及法规支持文件 (RSF) 注意 : 手册中标价为参考美金价格, 本公司保留无需通知随时调整价格的权利, 有关事宜请向您所在地 GE 业务人员垂询

3 GE 脱盐柱大家族 不同体积样品的脱盐和缓冲液置换处理 GE 脱盐柱大家族是液相 质谱 NMR 晶体衍射 光谱 电泳 免疫 细胞分析等样品前处理必不可少的工具, 可以有效去除盐离子 去垢剂 染料分子 缓冲试剂 (ph) 等杂质对分析的干扰, 帮助你获得更高质量 更加可靠的生化和细胞分析结果 品种齐全, 可根据不同的样品体积灵活选择最适的型号 硬件要求低, 可灵活选择离心 重力以及注射器等不同操作方式 相比透析, 处理速度快 回收率高 最大限度降低蛋白样品, 特别是低丰度蛋白的降解和修饰 适合蛋白 多肽 多糖等样品的脱盐和缓冲液置换 可平行处理大量样品, 通量更高, 平行性更好 手动纯化 产品名称货号最大样品体积操作方式 分子量范围 ( 以球蛋白为例 ) 包装价格 ( 美金 ) PD SpinTrap G μl 离心 ( 离心管 ) >000Da 0 columns 38 PD MultiTrap G μl 离心 (96 孔板 ) >000Da x 96 孔板 092 PD MiniTrap G ml 重力 ( 或离心 ) >000Da 0 columns 7 PD MiniTrap G ml 重力 ( 或离心 ) >700Da 0 columns 69 PD MidiTrap G ml 重力 ( 或离心 ) >000Da 0 columns 69 PD MidiTrap G ml 重力 ( 或离心 ) >700Da 0 columns ml 重力 ( 或离心 ) >000Da 30 columns 37 PD-0 Desalting Columns 缓冲液储槽 可将 PD-0 缓冲液单次 0 3 上样量增加至 2ml, 方便平衡 column 7 HiTrap Desalting ml (Sephadex G-2S) ml, 可通过串联拓展至 7.ml 注射器 ÄKTA 配套 >000Da columns columns 处理更大的样品体积? 请考虑配套 ÄKTA 层析设备, 使用 HiPrep 26/0 Desalting 层析柱或 Sephadex 大包装填料 HiPrep 26/0 Desalting 3ml (Sephadex G-2F) ml, 可通过串联拓展至 60ml ÄKTA 配套 >000Da column columns 7 29 Sephadex 大包装填料 Sephadex G-0, G-, G-2 大包装填料, 满足放大及生产规模请见第 3 页凝胶过滤填料 2

4 Vivaspin TM 离心式超滤管 手动纯化 蛋白等生物样品浓缩 大分子膜过滤纯化 缓冲液置换或样品脱盐 加样 离心, 即可完成样品浓缩, 操作简便快捷 一体化设计, 减少样品接触, 有效避免交叉污染 专利的 dead-stop 样品安全保护技术, 防止意外甩干, 给您珍贵的样品更多一道保障 采用超低吸附的 PES 材质滤膜, 蛋白回收率高达 9% 产品齐全, 选择灵活, 样品处理体积从 00 μl 到 ml, 截留分子量涵盖 3KDa 到 00KDa Vivaspin 00 Vivaspin 2 Vivaspin 6 Vivaspin 处理样品体积 00 00μl 00μl-2ml 2 6ml ml 截留分子量 (MWCO)

5 抗体 标签蛋白手动纯化产品 抗体快速制备抗体表达筛选白蛋白及 IgG 去除膜蛋白去垢剂筛选 His\GST\ 生物素标签蛋白制备 手动纯化 GE 磁珠系列 SpinTrap MultiTrap GraviTrap HiTrap 操作方式 磁力架 离心机 离心机 全自动样品处理工作站 重力 注射器 泵 ÄKTA 等层析系统 操作媒介.ml 离心管 2ml 离心管 96 孔板 重力柱 预装层析柱 应用 抗体与标签蛋白快 蛋白快速制备, 抗体标签 蛋白的高通量制备, 抗体表达 蛋白快速 小规模纯化制备 蛋白快速 小规模纯化制备 速制备, 免疫沉淀 蛋白表达筛选, 纯化条件 纯化条件 膜蛋白去垢剂的高通 Pull-down 等 与膜蛋白去垢剂筛选 免 量筛选 疫沉淀 抗体去除 应用 产品名称 货号 填料及特性 操作方式 包装 价格 ( 美金 ) Protein A HP SpinTrap Protein A Sepharose HP 离心机 (2ml 离心管 ) 6 columns 23 Protein A HP MultiTrap Protein A Sepharose HP 离心机 工作站 (96 孔板 ) 96-well plates 232 Protein G HP SpinTrap Protein G Sepharose HP 离心机 (2ml 离心管 ) 6 columns 263 抗体制备与筛选 Ab SpinTrap Protein G HP MultiTrap Protein G Sepharose HP Protein G Sepharose HP 离心机 (2ml 离心管 ) 离心机 工作站 (96 孔板 ) 0 columns 96-well plates Protein A/G HP SpinTrap Buffer Kit 提供目标蛋白富集和免疫沉淀配套试剂 套 338 Ab Buffer Kit 提供抗体纯化配套试剂 套 8 磁珠式抗体纯化产品, 请参阅第 6 页 ;HiTrap 及更大规模抗体纯化层析产品, 请参阅亲和层析章节, 第 26 页 Albumin & IgG Depletion SpinTrap Protein G 片段及 HSA 结合蛋白配基白蛋白 IgG 去除 HiTrap Albumin & IgGDepletion Protein G 片段及 HSA 结合蛋白配基 离心机 (2ml 离心管 ) 0 columns 注射器 泵 ÄKTA 等层析系统 2 ml 772 His SpinTrap Ni Sepharose HP 离心机 (2ml 离心管 ) 0 columns 9 His SpinTrap Kit His SpinTrap+His Buffer Kit 离心机 (2ml 离心管 ) 套 96 His SpinTrap TALON TALON Superflow( 低杂蛋白吸附 高纯度 ) 离心机 (2ml 离心管 ) 0 columns 29 His MultiTrap FF Ni Sepharose 6 Fast Flow( 高流速高载量 ) 离心机 工作站 (96 孔板 ) 96-well plates 07 His 标签蛋白纯 His MultiTrap HP Ni Sepharose HP( 高分辨率 ) 离心机 工作站 (96 孔板 ) 96-well plates 33 化 去垢剂筛选 His MultiTrap TALON TALON Superflow( 低杂蛋白吸附 高纯度 ) 离心机 工作站 (96 孔板 ) 96-well plates 8 His GraviTrap Ni Sepharose 6 Fast Flow 重力 (PD-0 重力柱 ) 0 columns 30 His GraviTrap Kit His GraviTrap 2+His Buffer Kit 重力 (PD-0 重力柱 ) 套 67 His GraviTrap TALON TALON Superflow ( 低杂蛋白吸附 高纯度 ) 重力 (PD-0 重力柱 ) 0 columns 329 His Buffer Kit 提供 His 纯化配套试剂 套 磁珠式 His 标签蛋白纯化产品, 请参阅第 6 页 ;HiTrap 及更大规模纯化层析产品, 请参阅亲和层析章节, 第 22 页

6 应用 产品名称 货号 填料及特性 操作方式 包装 价格 ( 美金 ) GST MultiTrap B Glutathione Sepharose B 离心机 工作站 (96 孔板 ) 96-well plates GST 标签蛋白纯化 GST Detection Module Anti-GST Antibody 用于 GST 融合蛋白检测 抗 GST 标签羊源抗体 0 Detections ml, 0 detections 0 手动纯化 生物素标签纯化和富集 客户自制亲和层析柱 免疫沉淀 HiTrap 及更大规模 GST 标签蛋白纯化层析产品, 请参阅亲和层析章节, 第 2 页 Streptavidin HP SpinTrap Streptavidin Sepharose High Performance 离心机 (2ml 离心管 ) Streptavidin HP SpinTrap Buffer Kit 利用生物素配基富集目标蛋白和免疫沉淀的配套试剂 Streptavidin HP MultiTrap Streptavidin Sepharose High Performance 离心机 工作站 (96 孔板 ) 磁珠式生物素纯化产品, 请参阅第 6 页 ;HiTrap 及更大规模纯化层析产品, 请参阅亲和层析章节, 第 30 页 NHS HP SpinTrap NHS-activated Sepharose HP 离心机 (2ml 离心管 ) NHS HP SpinTrap BufferKit 使用 NHS 配基产品富集目标蛋白和免疫沉淀的配套试剂 6 columns 298 套 well plates 2870 ml medium and empty spin columns 套 3 磁珠式 NHS- 纯化产品, 请参阅第 6 页 ;HiTrap 及更大规模纯化层析产品, 请参阅亲和层析章节, 第 30 页 手动纯化配套工具 产品名称 货号 用途 包装 价格 ( 美金 ) PD-0 空柱 客户自行灌制亲和层析柱 0 个 229 PD-0 重力柱配套 LabMate PD-0 Buffer Reservoir 缓冲液储槽, 可增加 PD-0 缓冲液体积至 2ml 0 个 3 PD-0 Spin Adapter PD-0 在离心机使用配套 0 个 2 MidiSpin Adapter MidiTrap 在离心机上使用配套 0 个 2 MiniSpin Adapter MiniTrap 在离心机上使用配套 0 个 2 MultiTrap 96 孔板 Collection Plate MultiTrap 和 PreDictor 配套收集板,96-well plate 00 μl, 96-well plates 8 式配套 V-shaped bottom 免疫沉淀初学者试剂盒, 提供了免疫沉淀实验所必需的 nprotein A Sepharose FF 和 Protein G Sepharose FF, 以及详细的免疫沉淀操作方法, 非常适合新接触免疫沉淀的科学家快速获得高质量的实验结果 选购货号 :Immunoprecipitation Starter Pack,

7 GE 磁珠纯化产品 磷酸化肽段富集免疫沉淀 Pull-down mrna 及核酸制备抗体及 His 标签蛋白小规模制备与筛选 操作简便快捷, 仅需磁力架即可完成纯化 方法成熟可靠, 结果重复性高, 提高 pull-down 免疫沉淀实验的成功率 蛋白载量高, 高达 22 μg human IgG/ml 填料 ( 以 Protein G 配基为例 ) 产品品种齐全, 包含 TiO2( 纯化磷酸化肽段 ) Protein A Protein G Protein A/G 混合 Ni 螯合 (His 标签纯化 ) 亲和素 ( 制备和富集生物素标签蛋白 核酸或多肽 ) Oligo(dT) ( 纯化 mrna) 等多种配基 手动 纯化 应用 产品 货号 配基 / 表面 包装 价格 ( 美金 ) 磷酸化肽段的 TiO2 Mag Sepharose TiO2 00 μl(% medium slurry) 38 捕获和富集 TiO2 Mag Sepharose TiO2 00 μl (% medium slurry) 7 Protein A Mag Sepharose Protein A 00 μl(% medium slurry) 8 Protein A Mag Sepharose Protein A 00 μl(% medium slurry) 80 免疫沉淀 Pull-down 磷酸化蛋白及低 Protein G Mag Sepharose Protein G Mag Sepharose Protein G Protein G 00 μl(% medium slurry) 00 μl(% medium slurry) 6 80 丰度蛋白富集 ( 间接法 ) Protein A/G HP SpinTrap Buffer Kit Sera-Mag SpeedBead Protein A/G 700 提供目标蛋白富集和免疫沉淀配套试剂 Protein A/G 混合模式 一套 ml(0mg/ml) Sera-Mag SpeedBead Protein A/G 7000 Protein A/G 混合模式 ml(0mg/ml) 62 Sera-Mag SpeedBead Protein A/G Protein A/G 混合模式 00ml(0mg/ml) NHS Mag Sepharose 预活化 NHS 基团 00 μl(% medium slurry) 6 NHS Mag Sepharose 预活化 NHS 基团 00 μl (% medium slurry) 80 NHS HP SpinTrap Buffer Kit 提供目标蛋白富集和免疫沉淀配套试剂 一套 3 Sera-Mag magnetic carboxylate 0020 羧基 /Hydrophobic ml(0mg/ml) 32 Sera-Mag magnetic carboxylate 0030 羧基 /Hydrophobic 00ml(0mg/ml) 免疫沉淀 Pull-down 磷 Sera-Mag magnetic carboxylate Sera-Mag magnetic carboxylate 羧基 /Hydrophobic 羧基 /Hydrophilic 000ml(0mg/ml) ml(0mg/ml) 32 酸化蛋白及低丰度蛋白富集 ( 直接法 ) Sera-Mag magnetic carboxylate Sera-Mag magnetic carboxylate 羧基 /Hydrophilic 羧基 /Hydrophilic 00ml(0mg/ml) 000ml(0mg/ml) Sera-Mag SpeedBead carboxylate 羧基 /Hydrophobic ml(0mg/ml) 0 Sera-Mag SpeedBead carboxylate 羧基 /Hydrophobic 00ml(0mg/ml) Sera-Mag SpeedBead carboxylate 6000 羧基 /Hydrophobic 000ml(0mg/ml) Sera-Mag SpeedBead carboxylate 0020 羧基 /Hydrophilic ml(0mg/ml) 0 Sera-Mag SpeedBead carboxylate 0030 羧基 /Hydrophilic 00ml(0mg/ml) Sera-Mag SpeedBead carboxylate 000 羧基 /Hydrophilic 000ml(0mg/ml) SpeedBeads 具有两层磁层, 在磁场中的响应速度是 Sera-Mag 磁珠的 2 倍, 可用于从悬浮液中更快 更完整的分离目标分子 6

8 应用 产品 货号 配基 / 表面 包装 价格 ( 美金 ) Protein A Mag Sepharose Xtra Protein A 2 ml (0% medium slurry) 2 Protein A Mag Sepharose Xtra Protein A ml (0% medium slurry) 32 抗体小规模纯 Protein G Mag Sepharose Xtra Protein G 2 ml (0% medium slurry) 2 化 克隆筛选 Protein G Mag Sepharose Xtra Protein G ml (0% medium slurry) 32 Ab Buffer Kit 纯化更大量抗体及抗体片段, 请参阅亲和层析填料章节, 第 26 页 提供抗体纯化配套试剂 一套 8 手动纯化 His 标签蛋白小规模纯化 筛选 His Mag Sepharose Ni His Mag Sepharose Ni His Mag Sepharose Ni His Mag Sepharose excel His Mag Sepharose excel His Mag Sepharose excel Ni 螯合 Ni 螯合 Ni 螯合 Ni Sepharose excel Ni Sepharose excel Ni Sepharose excel 2 ml (% medium slurry) 6 ml (% medium slurry) 32 0 ml (% medium slurry) 2 ml (0% medium slurry) 222 ml (0% medium slurry) 6 0 ml (0% medium slurry) 73 His Buffer Kit 提供 His 纯化配套试剂 一套 纯化更大量 His 标签蛋白, 请参阅亲和层析填料章节, 第 22 页 Streptavidin Mag Sepharose 链霉亲和素 2 ml (0% medium slurry) 2 Streptavidin Mag Sepharose 链霉亲和素 ml (0% medium slurry) 37 Sera-Mag Streptavidin-Coated Magnetic 链霉亲和素 (low binding capacity) ml(0mg/ml) 67 Sera-Mag Streptavidin-Coated Magnetic 链霉亲和素 (low binding capacity) ml(0mg/ml) 668 Sera-Mag Streptavidin-Coated Magnetic Sera-Mag Streptavidin-Coated Magnetic 3000 链霉亲和素 (medium binding capacity) ml(0mg/ml) 链霉亲和素 (medium binding capacity) ml(0mg/ml) Sera-Mag Streptavidin-Coated Magnetic 3000 链霉亲和素 (high binding capacity) ml(0mg/ml) 28 生物素标签蛋白 核酸 多肽制备与富集 Sera-Mag Streptavidin-Coated Magnetic 链霉亲和素 (high binding capacity) ml(0mg/ml) Sera-Mag SpeedBeads Streptavidin-Coated Magnetic 6600 链霉亲和素 (medium binding capacity) ml(0mg/ml) Sera-Mag SpeedBeads Streptavidin-Coated Magnetic 链霉亲和素 (medium binding capacity) ml(0mg/ml) Sera-Mag SpeedBeads Streptavidin-Blocked Magnetic 200 链霉亲和素 (low nonspecific binding) Sera-Mag SpeedBeads Streptavidin-Blocked Magnetic 2000 链霉亲和素 (low nonspecific binding) Sera-Mag SpeedBeads Streptavidin-Blocked Magnetic 链霉亲和素 (low nonspecific binding) Sera-Mag SpeedBeads Neutravidin-Coated Magnetic 7800 中性亲和素 Sera-Mag SpeedBeads Neutravidin-Coated Magnetic 中性亲和素 纯化更大量生物素化蛋白或多肽, 请参阅亲和层析填料章节, 第 30 页 ml(0mg/ml) ml(0mg/ml) 00ml(0mg/ml) ml(0mg/ml) ml(0mg/ml) Sera-Mag Oligo(dT)-Coated Magnetic Oligo(dT) ml(0mg/ml) 6 mrna 提取与制备 Sera-Mag Oligo(dT)-Coated Magnetic Oligo(dT) ml(0mg/ml) 63 Sera-Mag Oligo(dT)-Coated Magnetic Oligo(dT) 00ml(0mg/ml) MagRack 6 磁力架, 可并行处理 6 个. ml 离心管中的磁珠纯化 离心管一旦放在磁力架上, 磁珠和目标蛋白在几秒钟便可集中于磁铁附近, 在轻松去除上清同时确保蛋白得率 MagRack 6 选购货号 : 要处理更大的样品体积? 可以选择 MagRack Maxi 磁力架, 处理高达 0ml 样品 MagRack Maxi 选购货号 :

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16 A 280 A 280 A 280 A 280 A 离子交换 离子交换层析选择指南 样品 : 胰酶梯度洗脱 Mini Q (column.6 0 mm) 如果层析柱载量足够且没有放大的要求, 可用于中间纯化或精细纯化 MiniBeads (Q or S) 最高分辨率 ml Mono Q (column 0 mm) 如果层析柱载量足够且对放大没有要求, 可用于中间纯化或精细纯化 如果样品无颗粒物质则可以用于捕获步骤 如果分辨率是你的首要要求, 使用 SOURCE MonoBeads (Q or S) 最高分辨率 样品 : 胰酶梯度洗脱 min SOURCE (Q or S) RESOURCE Q, ml min SOURCE 30Q (XK6 0 mm) 分辨率 min Q Sepharose HP (XK 6 0 mm ) min 精细纯化 进一步去除微量杂质 或密切相关的成分 A 280 Q Sepharose FF (XK 6 0 mm ) min A 280 Q Sepharose XL Volume (l) 高分辨率 高通量 宽 ph 操作范围 样品 : 胰酶梯度洗脱 如果流速是你的首要要求, 使用 SOURCE 30 SOURCE 30 (Q or S) 使用预装 Sepharose High Performance Sepharose XL 和 Sepharose Fast Flow 的 HiTrap 层析柱用于填料选择和 ph 探索 在大规模生产中, 采用 Capto ImpRes (Q or SP) 提高生产效率如果 Q 或 S 的选择性无法满足要求, 可以尝试弱离子型 IEX 填料, 例如 DEAE CM 或 ANX Sepharose High Performance (Q or SP) 样品条件 : 较高纯度 高分辨率 易于放大 Capto ImpRes (Q or SP) 兼具高分辨率和高通量生产过程设计更加灵活 Sepharose Fast Flow (Q, SP, DEAE, CM, ANX) 易于放大 对选择性有多种选择 可以选择 Q 和 S 以外的多种基团 采用高柱床高度以提高生产效率 对于高盐物料使用 MMC 中度纯化 去除大部分杂质 样品条件 : 经过一定的纯化 Capto TM (Q, S, DEAE, adhere, MMC) 高通量与高载量, 易于放大 使用 Sepharose Q XL Virus 替代氯化铯梯度离心来进行病毒的纯化, 包括腺病毒或病毒载体 Sepharose XL (Q 或 SP) 对特定蛋白具有极高载量, 易于放大 直接使用阶梯洗脱 Sepharose Big Beads (Q 或 SP) 适合大规模生产, 粘性样品 蛋白捕获 分离 浓缩和稳定 目标蛋白 样品条件 : 澄清 或非澄清 样品 : 胰酶梯度洗脱 样品 : 胰酶梯度洗脱 样品 : 胰酶梯度洗脱 样品 : 重组的 α- 淀粉酶中试规模 : 在 l 后开始梯度洗脱

17 全新 Capto S ImpAct 层析填料 您理想中的 MAb 精细纯化 Capto S ImpAct 新的阳离子交换层析介质,Capto S ImpAct--- Improved Action, 此层析介质补充了原有阳离子交换的不足 Capto S ImpAct 主要优点 : 高结合载量, 一般 > 00 mg MAb/mL 介质 在高 MAb 载量下有效的聚合物去除 高分辨率精细纯化 设计的灵活性 : 大的流速和床高度操作窗口易于优化和放大 高生产率, 能够进行成本效益的生产 供应可靠性和全面的法规支持 3 离子交换 Capto S ImpAct 的推出使我们的 Mab 三步法工艺更加有效 3-step process MabSelect SuRe LX Capto S ImpAct Capto Q(FT*)

18 3 离子交换 货号 预装柱 内径 床高 (mm) Minibeads 超高分辨率分离 Mini Q.6/0 PE Mini S.6/0 PE Mini S PC 3.2/ Mini Q PC 3.2/3 2 MonoQ 高分辨率半制备 Mono Q /0 GL Mono Q 0/00 GL Mono S /0 GL Mono S 0/00 GL Mono P /0 GL.6/0.6/0 3.2/30 3.2/30 /0 0/00 /0 0/00 /0 柱体积 (ml) 离子交换预装柱 平均颗粒 (μm) 每毫升载量 3-mg 3-mg 3-mg 3-mg 0 mg 0 mg 0 mg 0 mg -0 mg 应用 / 特性 极高分辨 微量纯化和分析极高分辨 微量纯化和分析极高分辨 微量纯化和分析极高分辨 微量纯化和分析 纯化和分析纯化和分析纯化和分析纯化和分析蛋白及肽的快速高分辨率层析聚焦分离 ; 适合作阴离子交换 ( 弱阴离子交换 ) 最高流速 (ml/min) 耐反压 (MPa) ph 稳定性工作 [ 清洗 ] 3-; [2-] 3-3; [2-] ; [-] 2-2; [-] 2-2; [2-] 2-2; [2-] 2-2; [2-] 价格 ( 美金 ) Mono P /0 GL /0 0 0 mg 蛋白及肽的快速高分辨率层析聚焦分离 2 2-2; [2-] Mono Q.6/00 PE Mono S.6/00 PE Mono S PC.6/ Mono Q PC.6/.6/0.6/00.6/0.6/ mg 0 mg 0 mg 0 mg 纯化和分析纯化和分析纯化和分析 ; [2-] SOURCE 高流速半制备 RSOURCE Q ml 6./30 2 mg 高速 高载量 ; 适合放大 ; [-] RESOURCE Q 6 ml 6/ mg 高速 高载量 ; 适合放大 ; [-] SOURCE Q.6/00 PE.6/ mg 高速 高载量 ; 适合放大 2-2; [-] RESOURCE S ml 6./30 2 mg 高速 高载量 ; 适合放大 ; [-] RESOURCE S 6 ml 6/ mg 高速 高载量 ; 适合放大 ; [-] SOURCE S.6/00 PE.6/ mg 高速 高载量 ; 适合放大 2-2; [-] 2 Q SP Sepharose High Performance 方法探索和浓缩样品 HiTrap Q HP, ml 7/ mg BSA 少量样品纯化, 可使用注射器 2-2; [2-] HiTrap Q HP, ml 7/ mg BSA 少量样品纯化, 可使用注射器 2-2; [2-] HiTrap Q HP, ml 6/ mg BSA 少量样品纯化, 可使用注射器 2-2; [2-] HiTrap SP HP, ml 7/2 3 mg 核糖核酸酶少量样品纯化, 可使用注射器 -3; [3-] HiTrap SP HP, ml 7/2 3 mg 核糖核酸酶少量样品纯化, 可使用注射器 -3; [3-] HiTrap SP HP, ml 6/2 3 mg 核糖核酸酶少量样品纯化, 可使用注射器 -3; [3-] HiPrep Q HP 6/0 6/ mg BSA 小试样品分离 2-2; [2-] HiPrep SP HP 6/0 6/00 3 mg 核糖核酸酶 小试样品分离 -3; [3-] 922 SP Q CM DEAE ANX Sepharose Fast Flow 快速初步纯化易于放大 HiTrap lex Selection Kit 7/2 7 支装适合作工艺优化, 凝胶选择含有 7 个 ml 的预装柱 : HiTrap Q FF HiTrap SP FF HiTrap CM FF HiTrap DEAE FF HiTrap ANX FF (high sub) HiTrap Q XL HiTrap SP XL HiTrap ANX FF HS ml 7/2 适合作工艺优化及实验室规 mg 甲状腺球蛋白 HiTrap ANX FF HS ml 6/2 模蛋白制备, 弱阴离子交换 HiTrap Q FF ml 7/2 适合作工艺优化及实验室规 mg HSA HiTrap Q FF ml 6/2 模蛋白制备 HiTrap SP FF ml 7/2 70 mg 适合作工艺优化及实验室规 HiTrap SP FF ml 6/2 核糖核酸酶 A 模蛋白制备 HiTrap DEAE FF ml 7/2 0 mg HSA 适合作工艺优化及实验室规 7--0 HiTrap DEAE FF ml 6/2 模蛋白制备 ; [2-] ; [-] ; [3-] ; [-]

19 货号 预装柱 内径 床高 (mm) HiTrap CM FF ml HiTrap CM FF ml HiTrap Q XL ml HiTrap Q XL ml HiTrap SP XL ml HiTrap SP XL ml HiPrep 6/0 Q FF HiPrep 6/0 SP FF HiPrep 6/0 Q XL HiPrep 6/0 SP XL HiPrep 6/0 DEAE FF HiPrep 6/0 CM FF 7/2 6/2 7/2 6/2 7/2 6/2 6/00 6/00 6/00 6/00 6/00 6/00 柱体积 (ml) 离子交换预装柱 平均颗粒 (μm) 每毫升载量 0 mg 核糖核酸酶 A > 30 mg BSA > 60 mg 溶菌酶 mg HSA 70 mg 核糖核酸酶 A > 30 mg BSA > 60 mg 溶菌酶 0 mghsa 0 mg 核糖核酸酶 应用 / 特性 适合作工艺优化及实验室规模蛋白制备适合作工艺优化及实验室规模蛋白制备适合作工艺优化及实验室规模蛋白制备适合作工艺优化及实验室规模蛋白制备蛋白的快速半制备 / 制备分离 ; 蛋白的初步分离纯化蛋白的快速半制备 / 制备分离 ; 蛋白的初步分离纯化蛋白的快速半制备 / 制备分离 ; 蛋白的初步分离纯化蛋白的快速半制备 / 制备分离 ; 蛋白的初步分离纯化 最高流速 (ml/min) 耐反压 (MPa) ph 稳定性价格工作 ( 美金 ) [ 清洗 ] -3; [2-] 3-3; [2-] -3; [3-] 2-2; [-3] 3-3; [2-] 3-3; [3-] 2-2; [-] -3; [2-] 离子交换 6 Capto 满足高流速 高载量初步纯化的需要 HiTrap Capto IEX selection Kit 7/2 包含 个 ml 的预装柱 : HiTrap Capto Q HiTrap Capto S HiTrap Capto DEAE HiTrap Capto MMC HiTrap Capto adhere HiTrap Capto Q ml 7/2 HiTrap Capto Q ml 6/2 HiTrap Capto S, ml 7/2 HiTrap Capto S, ml 6/2 HiTrap Capto DEAE, ml 7/2 HiTrap Capto DEAE, ml 6/2 HiTrap Capto MMC ml 7/2 HiTrap Capto MMC ml 6/2 HiTrap Capto adhere ml 7/2 HiTrap Capto adhere ml 6/2 HiTrap Capto Core 700 ml 7/ 动态载量大于 00 mg BSA/ml 胶动态载量大于 mg 溶菌酶 /ml 胶动态载量大于 mg 卵清蛋白 /ml 胶动态载量在 30 ms/cm 时大于 mg N/A 3mg ovalbumin 高流速 高载量高流速 高载量高流速 高载量耐受高盐多位点, 用作抗体穿透, 一步吸附 HCP,DNA 等杂质用于病毒和其他大生物分子的中毒纯化和精细纯化步骤 2- [2-2] -2 [-2] 2-9 [-2] 2- [2-2] 3-2 [2-] Capto ImpAct 满足高流速高载量高分辨率的需要 HiTrap Capto S ImpAct, ml 7/ HiTrap Capto S ImpAct, m 6/2 0 8 Capto ImpRes 满足高流速 高分辨率的需要 动态载量大于 00 IgG/ml 胶 高流速 高载量高分辨率 -2 [3-] Hitrap Capto SP ImpRes ml 7/2 Hitrap Capto SP ImpRes ml 6/2 Hitrap Capto Q ImpRes ml 7/2 Hitrap Capto Q ImpRes ml 6/2 HitrapCapto Adhere ImpRes ml 7/2 HitrapCapto MMC ImpRes ml 6/ >9 mg BSA > mg BSA -8mgMab/ml 60-mgMab/ml 高流速 高分辨率高流速 高分辨率高流速 高分辨率 ; [-2] 2-; [2-2] 2-; [2-2] Capto MMC 复合式新型弱阳离子交换填料 蛋白可以高盐的条件下吸附 新的选择性 + O O S 基架 7 um 高流速琼脂糖复合式弱阳离子交换配基 OH OH O NH Capto adhere 复合式新型强阴离子交换填料 有效除去 : 聚合物 / 二聚体 DNA, 病毒, 脱落的 Protein A 宿主蛋白内毒素 OH OH O O _ O O N + + 基架 7 um 高流速琼脂糖复合式新型强阴离子交换填料 OH 8

20 离子交换填料 货号 产品 包装 每毫升载量 颗粒 大小 (μm) 特性 / 应用 ph 稳定性工作 [ 清洗 ] 耐压 (MPa) 最高流速 (cm/h) 价格 ( 美金 ) 3 离子交换 SOURCE 低反压精细纯化首选! SOURCE Q 目前 GE 产品中低压系统分辨率最高的散装填料,800 cm/h 流速下反压仅 MPa, 大大减少设备成本 颗粒大小均一, 流速 000 cm/h 以上仍保持高分辨率, 数分钟内即完成实验 极高的化学物理稳定性, 可用 M HCl 和 M NaOH 在位清洗, 寿命特长 低非特异性吸附, 回收率高 良好的重复性和工艺放大能力 可自行装于实验室用 Tricorn HR 柱及生产专用的 FineLINE 不锈钢层析柱 每米理论塔板数超过 30,000 一步水压式装柱法, 可于数分钟内自动装好填料, 重复性极高 0 ml 0 ml 0 ml 00 ml Litre 2 mg 高分辨率精细纯化 装入 HR 柱效果最佳 2-2 [-] 800 BioProcess Media SOURCE S 0 ml 0 ml 0 ml 00 ml Litre 0 mg BSA 高分辨率精细纯化 装入 HR 柱效果最佳 若用 XK26 柱, 需配 26mm Filter Kit (8-0-28) 2-2 [-] SOURCE 30Q 0 ml 0 ml Litre mg 白蛋白 30 极快速的中度至精细纯化 可用于各种 XK, HR, BPG, FineLINE 层析柱 2-2 [-] SOURCE 30S 0 ml 0 ml Litre 80 mg 溶菌酶 30 极快速的中度至精细纯化 可用于各种 XK, HR, BPG, FineLINE 层析柱 2-2 [-] Sepharose High Performance (H.P.) 高载量与高分辨率的结合! 当高分辨率是主要的纯化目标时,Sepharose High Performance 成为最符合经济和放大效益的选择 BioProcess Media Q Sepharose HP SP Sepharose HP Sepharose Fast Flow (F.F.) 高产量初步纯化首选! 7 ml 70 mg 3 经济的精细纯化 L BSA [2-2] L 7 ml mg 3 经济的精细纯化 -3 0 L 核糖核酸酶 [3-] L 在目前 GE 产品中最受欢迎的下游初步纯化介质 高流速加上高载量, 能快速纯化大量粗产品 高化学稳定性, 能承受各种样品 配合有效的在位清洗, 可反复再生过千次 BioProcess Media Q Sepharose FF 2 ml 300 ml L 0 L SP Sepharose FF 2 ml 300 ml L 0 L S Sepharose FF L 0 L DEAE Sepharose FF 2 ml 00 ml 0 L CM Sepharose FF 2 ml 00 ml 0 L ANX Sepharose FF(LS) 00 ml ANX Sepharose FF(LS) L ANX Sepharose 2 ml FF (HS) 00 ml L 0 L Q Sepharose FF L mg HSA 70 mg 核糖核酸酶 A 0 mg HSA 0 mg 核糖核酸酶 A mg 甲状腺球蛋白 快速 高产量纯化快速 高产量纯化快速 高产量纯化快速 高产量纯化快速 高产量纯化快速 高产量纯化快速 高产量纯化快速 高产量纯化 2-2 [-] -3 [3-] -3 [3-] 2-3 [-] -3 [2-] 3-3 [2-] 3-0 [2-] 2-2, [-] 最低

21 离子交换填料 货号 产品 包装 每毫升载量 颗粒 特性 / 应用 大小 (μm) ph 稳定性工作 [ 清洗 ] 耐压 (MPa) 最高流速 (cm/h) 价格 ( 美金 ) Capto 高载量高流速分离纯化! Capto Q Capto S Capto DEAE Capto adhere Capto MMC Capto Core Capto Core Capto Core 700 高流速琼脂糖基质, 刚性更强 传质速度更快 线状葡聚糖表面延伸剂, 载量提高 高流速 :>700 cm/h( cm 床高的使用流速 ) 低反压 :<3 bar(700 cm/h cm 床高 ) 高稳定性 : M NaOH 0 度 周稳定 2 ml >00 mg BSA 高流速 高载量 2-00ml L [2-2] 2 ml > mg lysozyme 高流速 高载量 -2 00ml [-2] 2 ml > mg ovalbumin 高流速 高载量 ml L 2 ml N/A 7 多位点, 用作抗体穿透, 一步吸附 ml HCP,DNA 等杂质 [2-] L 2 ml mg BSA 7 耐受高盐, 高流速 高载量 2-00 ml at L 30 ms/cm 2ml 8 用于病毒和其他大生物分 ml 3 mg ovalbumin 子的中毒纯化和精细纯化步骤 L BioProcess Media 离子交换 高结合载量, 一般 >00mg MAb/ml 介质 Capto ImpAct 高分辨率, 可应用于精细纯化 高流速高载量高分辨率分离纯化! 高生产率, 能够进行成本效益的生产 大的流速和柱床高度操作窗口易于优化以及放大 BioProcess Media Capto S ImpAct 2 ml 00 ml L L 0L 60 L > mg Lysozyme >00mg MAb 0 高流速 高载量 -2 高分辨率 [3-] 用于病毒和其它大生物分子的中度纯化和精细纯化的 Capto Core 700 Capto Core 700 填料设计用于病毒和其他生物大分子的纯化 新型的核心微球技术以及复合模式 辛胺配基使 Capto Core 700 在一种层析介质中具有大小分离以及吸附层析的双重功能 这些特点使 Capto core 700 成为疫苗生产中病毒纯化介质的极佳备选方案 分子量排阻为 700KD, 小于 700KD 的生物分子可以进入微球内部与离子交换基团结合, 大于 700kD 的蛋白会被排阻在微球外, 在流穿中通过 有效去除 HCP 和 DNA, 大多数 HCP 带有正电荷,pH 值在 7 以上 Capto Core 700 的配基带有正电荷, 因此在 ph7-9 与 HCP 结合 DNA 在广泛 ph 范围内都带有负电荷,Capto caore 700 可以有效地吸附 DNA 以去除样品中的 DNA Capto Core 700 的关键性能特点包括 : 与 GF 相比, 高达 00 倍的样品上样量以及明显更高的流速确保了生产效率显著提高具有激活的配基核心以及未激活的壳层的核心微球技术可有效的捕获污染物, 同时使目标分子流穿由于穿流层析和稳定的性能, 方便的条件优化, 可以使用更广泛操作范围

22 离子交换填料 3 离子交换 货号产品包装每毫升载量颗粒特性 / 应用大小 (μm) 颗粒平均直径约 0μm, 实现高分辨率 Capto ImpRes 良好的压力流速性质 高流速高载量高分辨率分离纯化! 较宽的操作窗口易于线性放大 高流速带来高的生产通量, 提高生产效率 Capto Q ImpRes 2 ml > mg BSA 0 高流速 高分辨率 ml L Capto SP ImpRes 2 ml >9 mg BSA 0 高流速 高分辨率 ml L Capto adhere ImpRes 2ml -8 mg MAb 0 高流速 高分辨率 ml L L L ml 60- mg MAb 0 高流速 高分辨率 ml Capto MMC ImpRes L L L ph 稳定性工作 [ 清洗 ] 2- [2-2] 3- [-2] 3-2 [2-] 3-2 [2-] 耐压 (MPa) 最高流速 (cm/h) 价格 ( 美金 ) BioProcess Media 2 MacroCap SP MacroCap SP MacroCap Q Sepharose XL 超高载量粗提凝胶! Q Sepharose XL SP Sepharose XL ml 0.3 mmol H + 0 纯化 PEG 蛋白 - 00 ml [2-3] L 2 ml 0.3 mmol H + 0 纯化 PEG 蛋白 - 00 ml [2-3] L 目前 GE 产品中超高载量凝胶 300 ml > 30 mg 载量高 3-3 L BSA 2-] 300 ml > 60 mg 载量高 -3 L Lysozyme 3-] BioProcess Media Sepharose Big Beads 快速处理巨量样品! 高物理稳定性的大颗粒凝胶, 能在最短时间内浓缩 初步纯化大量粗产品 处理稀释样品流速在 00cm/h 以上, 高黏性样品 ( 水的 2. 倍 ) 亦可保持 00cm/h BioProcess Media Q Sepharose Big Beads SP Sepharose Big Beads Sepharose CL _ 6B DEAE Sepharose CL-6B 6 Sephacel DEAE Sephacel L 0 高流速 L [2-] L 0 高流速 -3 0 L [3-] 较传统的偶联离子交换凝胶, 载量很高 渐被高流速 Sepharose FF 凝胶所代替 00 ml 70 mg L HSA [2-] 经改良预胀好的球状纤维介质, 提高了流动性质和分辨率 00 ml 60 mg L HSA Sephadex 一次性批量生产! QAE Sephadex A QAE Sephadex A SP Sephadex C 由于载量高 价钱便宜, 在工业批量生产中应用多年 因流速 体积受外在环境影响而改变, 渐被新一代 BioProcess 凝胶所取代 0 较 2 多孔, 孔径较大 对于分子量小于 30,000 者,2 比 0 的载量高 ;30,000-00,000 者,0 则比 2 的载量高 ; 大于 00,000 者, 结合限于颗粒表面, 所以 2 的载量更高 00 g 0 mg 干粉低分子量蛋白 多肽, 核苷酸 HSA 0- 以及巨大分子 (MW >,000) kg 00 g 80 mg 干粉中等大小的生物分子 HSA 0- (30-0 KD) kg 00 g.2gg 干粉小蛋白以及巨大分子 (MW > 0,000) kg 2

23 Ni Sepharose excel 革新您的 His 标签蛋白纯化 Ni Sephaorse excel 系列填料是 GE 推出的最新一代 His 标签蛋白纯化产品, 革新了传统的 His 标签蛋白纯化方法 这款全新产品大幅缩减了纯化中最耗时的样品前处理时间, 帮助科学家进行彻底 轻松的清洗以防止污染, 适合需添加 EDTA 和还原剂维持稳定的生物样品纯化, 也适用于真核分泌表达的 His 标签蛋白的纯化, 值得信赖! 耐受高达 00mM EDTA 和高浓度还原剂, 简化样品前处理, 并最大限度保护蛋白活性 无需脱 Ni 直接进行 NaOH 彻底清洗, 有效避免交叉污染, 延长使用寿命 Ni 脱落率显著降低, 无需反复再生, 使用保存更轻松 标签蛋白纯化 新一代 Ni Sephaorse excel 无需去除样品中 EDTA, 直接上柱, 节省 0% 的样品处理时间 新一代 Ni Sephaorse excel 中无需脱 Ni 直接进行 NaOH 清洗, 清洗步骤从 9 步缩减到 步

24 His 标签蛋白纯化预装柱 标签蛋白纯化 货号 预柱装 平均 颗粒 (μm) 每毫升结合量 组氨酸标签蛋白的纯化 Ni Sepharose High performance HisTrap HP ml HisTrap HP ml 3 >0 mg(his)6 重组蛋白组氨酸标签蛋白 HisTrap HP 是预装的 HisTrap HP 00 ml Ni Sepharose HP 填料 HisTrap HP ml 3 >0 mg(his)6 重组蛋白组氨酸标签蛋白 HisTrap HP 是预装的 HisTrap HP ml Ni Sepharose HP 填料 HisTrap HP 00 ml 2 组氨酸标签蛋白的纯化 Ni Sepharose 6 Fast Flow HisTrap FF ml HisTrap FF 00 ml 0 mg(his) HisTrap FF ml 融合蛋白 /ml 胶 HisTrap FF 00 ml HisTrap FF Crude ml HisTrap FF Crude ml HisTrap FF Crude 00 ml 0 mg(his) HisTrap FF Crude ml 融合蛋白 /ml 胶 HisTrap FF Crude 00 ml HisPrep FF 6/0 ml 0 mg(his)6 重组蛋白 应用 / 特性 高动态载量, 低配基脱落, 稳定性好 裂解液无需离心和过滤, 直接上未澄清的细胞裂解液高动态载量, 低配基脱落, 稳定性好 组氨酸标签蛋白 最高流速 (ml/min) 0 耐反压 (MPa) 0. PH 稳定性工作 3-2 [2-] 3-2 [2-] ; [3-2] ; [3-2] [2-] 价格 ( 美金 ) 3 组氨酸标签蛋白的纯化 excel 和 TALON HisTrap excel x ml HisTrap excel x ml HisTrap excel x ml >0 mghis 蛋白 氨酸标签蛋白. 保证高载量, 没有 Ni 离子脱落直接纯化真核细胞培分泌表达在胞外的组 HiTrap TALON crude ml HiTrap TALON crude ml HiTrap TALON crude 00 ml HiTrap TALON crude ml HiTrap TALON crude 00 ml > mghis 蛋白 当纯度比收率重要时, 方便的从未澄清的细胞裂解液中纯化组氨酸标签蛋白 用于金属离子螯合纯化 HiTrap IMAC HP, ml HiTrap IMAC HP, ml HiTrap IMAC FF, ml HiTrap IMAC FF, ml HiPrep IMAC 6/0 ml 3 umol Ni 2+ /Zn 2+ /ml 胶 2 umol Cu 2+ /ml 胶 可与金属作用的蛋白 肽类 核苷酸可与金属作用的蛋白 肽类 核苷酸 3-2 [2-] 3-2 [2-] HiTrap Chelating HP, ml 3 23 umol Cu 2+ /ml 胶 纯化含暴露氨基酸的蛋白 / 肽 :His (Cys,Trp) 如巨球蛋白 干扰素 3-3 [2-] HiTrap Chelating HP, ml HiTrap Chelating HP, ml HiTrap Chelating HP, 00 ml 3 23 umol Cu 2+ /ml 胶 纯化含暴露氨基酸的蛋白 / 肽 :His (Cys,Trp) 如巨球蛋白 干扰素 3-3 [2-] 组氨酸标签蛋白纯化完整解决方案选择指南您正在使用哪种表达系统 Ni Sepharose 6 FF/HP 通过偶联 Ni 2+ 使介质预带电荷, Ni 2+ 是纯化许多 His- 标记蛋白的首选离子 Ni Sepharose 6 FF/HP 具有非常高的蛋白载量, 这就意味着纯化同样的原核真核蛋白需要的介质量就更少, 成本也就更低 Talon 是螯合有 Co 2+ 离子的亲和填料, 其对 His 标签蛋白的选择性高于传统的 Ni 柱, 能够得到纯度更高的蛋白样品 较大的凝胶颗粒降低了填料对样品预处理的要求, 胞内胞外可使用细胞破碎液上柱纯化 高纯度高容量耐受 EDTA, Ni Sepharose excel 能够耐受高达 00 mm EDTA 和 0 mm DTT, 特别适合需添加 EDTA 还原剂, NaOH 和还原剂维持稳定的生物样品纯化, 也适用于真核分泌表达的 His 标签蛋白的纯化, 无需去除 EDTA 就能使用培养基上柱吸附, 从而极大地简化实验流程, 保护蛋白的活性 另外, 无需脱 Ni 直接进行 NaOH 彻底清洗, 防止交叉污染 IMAC TALON Ni Sepharose 和 Ni IMAC Sepharose 和 Chelating Sepharose 填料能够螯合不同的金属离子, 方便实验者 Superflow Sepharose Chelating Sepharose ( 基于钴离子 ) 产品 Sepharose excel 产品合成出适合自己目标蛋白的金属螯合层析填料 产品产品 23

25 His 标签蛋白纯化填料 货号 组氨酸标签蛋白的纯化 产品 包装 颗粒 大小 (μm) Ni Sepharose HP Ni Sepharose 6 FF TALON Superflow TALON Superflow Ni Sepharose excel Ni Sepharose excel Ni Sepharose excel Ni Sepharose excel 2 用于金属离子螯合纯化 IMAC Sepharose High Performance IMAC Sepharose 6 FF 2 ml 00 ml ml 2 ml 00 ml 00 ml 0ml 0ml 2ml 00ml 00ml L 00 ml 2 ml 00 ml L 3 3 每毫升结合量 ~ μmol Ni 2+ > 0 mg His 蛋白 ~ μmol Ni 2+ /ml 胶 >0 mghis 蛋白 > mghis 蛋白 >0 mghis 蛋白 μmol Ni 2+ /Zn 2+ 2 μmol Cu 2+ μmol Ni 2+ /Zn 2+ 2 μmol Cu 2+ 应用 可与金属作用的蛋白 脂类 核苷酸,Ni 2+ 脱落极低适合大规模 His 重组蛋白纯化 当纯度比收率重要时, 方便的从未澄清的细胞裂解液中纯化组氨酸标签蛋白直接纯化含 EDTA 的样品 Ni 离子脱落低, 无需脱 Ni 进行 NaOH 彻底清洗 可与金属作用的蛋白 肽类 核苷酸等可与金属作用的蛋白 肽类 核苷酸等 ph 稳定性最高流速工作 [ 清洗 ] (cm/h) 3-2 [2-] 2- [3-2] [2-] 3-2 [2-] < 0 < 0 价格 ( 美金 ) cm/h 28 H2O in a cm 93 (i.d. H) column 标签蛋白纯化 Chelating Sepharose FF 0 ml 00 ml L 2-30 μmol Zn 2+ 可与金属作用的蛋白 肽类 核苷酸等 3-3 [2-] 需要快速纯化 His 标签蛋白? 需要高通量制备或筛选? 请参阅 GE 手动纯化产品章节 MBP 和 Strep (II) 标签蛋白纯化预装柱 货号 产品 颗粒 每毫升 大小 (μm) 结合量 MBP 标签蛋白的纯化 :Dextrin Sepharose High performance MBPTrap HP ml MBPTrap HP ml MBPTrap HP ml MBPTrap HP ml 3 2 Strep (II) 标签蛋白的纯化 :StrepTactin Sepharose High performance StrepTrap HP ml StrepTrap HP ml StrepTrap HP ml StrepTrap HP ml r 应用 纯化 MBP 标签蛋白 标签蛋白纯化标签蛋白 最高流速 (cm/h) ph 稳定性工作 [ 清洗 ] 价格 ( 美金 ) MBP 和 Strep (II) 标签蛋白纯化填料 货号产品包装颗粒大小 (μm) MBP 标签蛋白的纯化 ml ml 2 Strep (II) 标签蛋白的纯化 每毫升结合量 Dextrin Sepharose HP 3 Approx. 7 mg MBP- Sal 纯化 MBP 标签蛋白 >7 Approx. 6 mg MBP-bGal ph 稳定性最高流速工作 [ 清洗 ] (cm/h) StrepTactin Sepharose HP 0ml 3 6mg Strep(II) 标签蛋白 > 价格 ( 美金 )

26 标签蛋白纯化 货号 预柱装 平均 颗粒 (μm) GST 标签蛋白纯化预装柱 每毫升载量 应用 / 特性 最高流速 (ml/min) GST 标签蛋白的纯化 :Glutathione Sepharose High Performance GSTrap HP ml 谷胱甘肽 S- 转移酶 (GST) 标签蛋白, 用 pgex GSTrap HP 00 ml 3 >7mg GST 融合蛋白系列表达载体表达, 其它谷胱甘肽 S- 转移酶和谷胱甘肽依赖的蛋白 GSTrap HP ml 谷胱甘肽 S- 转移酶 (GST) 标签蛋白, 用 pgex GSTrap HP ml 3 >7mg GST 融合蛋白系列表达载体表达, 其它谷胱甘肽 S- 转移酶 GSTrap HP 00 ml 和谷胱甘肽依赖的蛋白 2 GST 标签蛋白的纯化 :Glutathione Sepharose Fast Flow GSTrap FF 2 ml 系列表达载体表达, 其它谷胱甘肽 S- 转移酶 GSTrap FF ml >0 mg GST 融合蛋白谷胱甘肽 S- 转移酶 (GST) 标签蛋白, 用 pgex GSTrap FF 00 ml 和谷胱甘肽依赖的蛋白 GSTrap FF ml >0 mg GST 融合蛋白系列表达载体表达, 其它谷胱甘肽 S- 转移酶 GSTrap FF ml 谷胱甘肽 S- 转移酶 (GST) 标签蛋白, 用 pgex GSTrap FF 00 ml 和谷胱甘肽依赖的蛋白 GSTprep FF 6/0 >0 mg GST 融合蛋白系列表达载体表达, 其它谷胱甘肽 S- 转移酶 0 谷胱甘肽 S- 转移酶 (GST) 标签蛋白, 用 pgex 和谷胱甘肽依赖的蛋白 3 GST 标签蛋白的纯化 :Glutathione Sepharose B GSTrap B ml 系列表达载体表达, 其它谷胱甘肽 S- 转移酶 GSTrap B ml >2 mg horse liver GST 谷胱甘肽 S- 转移酶 (GST) 标签蛋白, 用 pgex GSTrap B 00 ml GSTrap B ml GSTrap B ml GSTrap B 00 ml 耐反压 (MPa) 0. PH 稳定性工作 3-2 [3-2] 3-2 [3-2] [3-2] [3-2] 3-2 [-3] -3 价格 ( 美金 ) 货号 产品 包装 平均颗粒 大小 (μm) GST 标签蛋白纯化填料 每毫升结合量 应用 ph 稳定性最高流速工作 [ 清洗 ] (cm/h) 价格 ( 美金 ) Glutathione Sepharose HP 2 ml 00 ml 3 >7 mg 蛋白 GST 羧端含谷胱甘肽 S- 转移酶的重组融合蛋白或依赖 S- 转移酶或谷胱甘肽的蛋白 3-2 [3-2] Glutathione Sepharose FF 2 ml 00 ml 00 ml >0 mg GST 蛋白 羧端含谷胱甘肽 S- 转移酶的重组融合蛋白或依赖 S- 转移酶或谷胱甘肽的蛋白 3-2 [3-2] Glutathione Sepharose B 0 ml 00 ml 300 ml >2 mg 谷胱甘肽羧端含谷胱甘肽 S- 转移酶的 S- 转移酶重组融合蛋白或依赖 S- 转移酶或谷胱甘肽的蛋白 -3 [-3] 需要快速纯化 GST 标签蛋白? 需要高通量制备或筛选? 请参阅 GE 手动纯化产品章节 GST 融合表达载体 货号 包装 价格 ( 美金 ) pgex Vectors multiple GST 融合蛋白的表达载体 GST Vector Primers for Sequencing multiple pgex 载体的顺序引物 E coli BL vial GST 融合蛋白的表达菌体 00 M3KO7 Helper Phage μl 用于 GST 表达系统的 M 噬菌体 切除 GST 标签的蛋白酶 PreScission Protease units 蛋白酶 ( 经纯化 ), 对 pgex-p 载体表达的 GST 融合蛋白上的 GST 标签进行位点特异性切割 27 Thrombin Protease units 蛋白酶 ( 经纯化 ), 对 pgex-t 载体表达的 GST 融合蛋白上的 GST 标签进行位点特异性切割 6 Factor Xa Protease units 蛋白酶 ( 经纯化 ), 对 pgex-x 载体表达的 GST 融合蛋白上的 GST 标签进行位点特异性切割 88 2

27 使用耐碱 MabSelect SuRe LX 降低单抗生产成本 抗体纯化 DBC, 0% breakthrough (mg/ml) MabSelect SuRe LX 0 MabSelect SuRe GdnHCl 处理 0 分钟 3 小时 0. M NaOH 处理 0 分钟 3 小时 磷酸处理 300 次在位清洗 Cycle no. Mabselect SuRe LX 能够耐受 300 次以上 0.M NaOH 的在位清洗 Mabselect SuRe LX 的碱清洗效果

28 Protein A 预装柱 抗体纯化 货号 预柱装 平均 颗粒 (μm) 货号 产品 rprotein A Sepharose FF nprotein A Sepharose FF rmpprotein A Sepharose FF Protein A Sepharose CL-B 包装 ml 2 ml 0 ml L ml 2 ml 0 ml L ml 2 ml 0 ml L. g 60 g 2 ml 00 ml 目标配体 6 mg 重组 Protein A/ml 6 mg Protein A/ml 6 mg 重组 Protein A/ml 2-3 mg Protein A/ml 每柱载量 (ml) 应用 / 特性 Protein A 填料 颗粒大小 (μm) 纯化 lgg; 目前最专一的单抗亲和介质之一的单抗亲和介质 每毫升结合量 (ml) 0 mg 人 IgG 30 mg 小鼠 IgG 3 mg 人 IgG 3 mg IgG mg 小鼠 IgG 应用 是实验室和工业规模从细胞培养纯化和回收抗体的理想选择 抗体纯化, 无任何动物衍生组份 低脱落 一步高纯度纯化单抗和多抗 纯化体液或细胞培养液中的免疫球蛋白 最高流速 (ml/min) 3-0 [2-] 3-9 [2-0] 3-0 [2-] 3-9 [2-0] 耐反压 (MPa) PH 稳定性 ph 稳定性 最高流速 工作 [ 清洗 ] (cm/h) 建议流速 价格 ( 美金 ) 价格 ( 美金 ) MabSelect 预装柱 货号 预柱装 平均 颗粒 (μm) 每柱载量 (ml) 应用 / 特性 最高流速 (ml/min) 耐反压 (MPa) PH 稳定性工作 价格 ( 美金 ) 高流速琼脂糖作为骨架, 填料的刚性和传质性能大大优于传统的 SepharoseFF 和 6FF 琼脂糖骨架, 可以在大规模生产时, 使用更高的流速而保持更高的载量, 大大提高生产效率 MabSelect Xtra 填料是在 MabSelect 的基础上优化而来, 是目前动态载量最高的不耐碱的抗体纯化填料 MabSelect SuRe 填料可用 NaOH 做在位清洗, 有效降低清洗成本 MabSelect SuRe LX 填料可用 NaOH 在位清洗, 动态载量最高, 达 60mg 人 IgG/ml BioProcess Media MabSelect 用于高通量捕获单抗能耐受进行在位清洗, 适合大规模抗体生产中, 有效降低生产成本 MabSelect Xtra 用于捕获高效价培养液中抗体, 载量更高

29 MabSelect 纯化填料 货号 产品 包装 目标配体 颗粒大小 (μm) 每毫升结合量 (ml) 应用 ph 稳定性工作 [ 清洗 ] 最高流速 (cm/h) 价格 ( 美金 ) MabSelect 2 ml ml L MabSelect SuRe 2 ml ml L MabSelect Xtra 2 ml ml L MabSelect SuRe LX 2ml ml 货号预柱装 重组 Protein A 修饰的耐碱 protein A 重组 Protein A 修饰的耐碱 protein A 平均颗粒 (μm) mg 人 IgG 30 mg 人 IgG 0 mg 人 IgG 60 mg 人 IgG Protein G 纯化预装柱 每柱载量 (ml) 应用 / 特性 目前单抗载量最高, 基团脱落最少, 最专一, 稳定性最好的单抗亲和介质之一能耐受 MNaOH 进行 CIP, 非常适合在位清洗要求严格的生产, 同时降低清洗成本超高载量非常适合大规模生产以降低柱床体积和溶剂消耗, 有效降低生产成本能耐受 MNaOH 进行 CIP, 非常适合在位清洗要求严格的生产, 同时降低清洗成本 纯化 lgg; 与 ProteinA 相比,Protein G 对牛 鼠 马的多 lgg 结合更强, 不同的是 Protein G 也可结合人 lgg 3-0 [2-2] 3-2 [2-2] 3-2 [2-2] 3-2 [2-] 最高流速 (ml/min) 耐反压 (MPa) 建议流速 PH 稳定性工作 价格 ( 美金 ) 抗体纯化 Protein G 纯化填料 货号 产品 包装 目标配体 颗粒大小 (μm) 每毫升结合量 (ml) 应用 ph 稳定性 最高流速 工作 [ 清洗 ] (cm/h) 价格 ( 美金 ) Protein G ml 2 mg 8 mg 人类 IgG 7 mg 天竺鼠 IgG;9 mg 山羊 IgG; Sepharose FF 2 ml 蛋白 G/ml 7 mg 大鼠 IgG;0 mg 小鼠 IgG; [2-0] ml ÄKTA start 需要快速, 小规模抗体纯化? 需要高通量制备或筛选? 请参阅 GE 手工纯化产品章节 P-P8 ÄKTA start 是一款用于实验室规模蛋白纯化的制备型层析系统 ÄKTA start 作为一个独立整机系统进行设计开发, 具有直观的设计 简单的流路和用户友好的界面 有了 ÄKTA start, 通过使用其内置的 Quick start 方法或预定义模板, 或通过创建你自己的方法, 可以很容易地纯化各种蛋白质 ÄKTA start 可以与 Frac30 组分收集器 用户友好的 UNICORN start.0 控制软件和重视应用的预装柱纯化包结合用于自动化解决方案 ÄKTA start 具有下列特征 : 紧凑的方案用于快速和可靠的一步蛋白质纯化 灵活的进样及收集方式 Quick start 方法和模板用于常规的纯化技术 直观的触摸屏显示和实时监测 订货信息 Product AKTA start 可选模块 Frac30 UNICORN start.0 控制软件 Code number

30 其他抗体纯化预装柱 货号 预柱装 平均 颗粒 (μm) 用于抗体纯化 : 纯化 lgm,lgy 每柱载量 (ml) 应用 / 特性 最高流速 (ml/min) 耐反压 (MPa) PH 稳定性工作 价格 ( 美金 ) 抗体纯化 2 抗体纯化 : 特异性纯化人类 lgg 3 用于抗体片断纯化 :Protein L HiTrap Protein L, ml HiTrap Protein L, ml HiTrap Protein L, ml HiTrap Protein L, ml 7mg 人类 IgG 8 约 2mg 人类 Fab 其他抗体纯化填料 主要作 lgm 的纯化 ; 也能纯化别的免疫球蛋白主要从鸡蛋黄纯化 lgm; 也能纯化别的免疫球蛋白 特异纯化人类 lgg, 能结合人类 lgg 的所有亚型, 包括 lgg3 纯化广泛的抗体片断, 例如 Fabs, 单链可变区片断 (scfv) 和区域抗体 (Dabs) 包括 kappa 的轻链 长期 短期 货号 产品 包装 目标配体 颗粒大小 (μm) 每毫升结合量 (ml) 应用 ph 稳定性 最高流速 工作 [ 清洗 ] (cm/h) 价格 ( 美金 ) GammaBind G ml 3 mg/ml > 8 mg 人 IgG 结合来自人 小鼠 大鼠的所有 IgG Sepharose 2 ml 亚基, 结合来自豚鼠 山羊 牛 绵 [2-9] 23 羊和马的所有 IgG GammaBind Plus ml mg Fab/ml > mg 人 IgG 增加大鼠和小鼠单抗的载量 ( 还有 Sepharose 2 ml 人 牛 绵羊 马 兔和山羊 ) [2-9] KappaSelect 2 ml mg/ml 7 mg Fab 主要特异吸附抗体的 Fab, 或纯化 ml 7 Fab 融合蛋白 IgSelect 2ml 7 mg/ml 7 7mg 人 IgG 特异纯化人类 IgG, 能结合人类 IgG 2-( 长期 ) ml 的所有亚型, 包括 IgG 3-3( 短期 ) ml 纯化广泛的抗体片断, 例如 Fabs, 单链 Capto L 2ml 0 mg/ml 8 约 2mg 人类 Fab 可变区片断 (scfv) 和区域抗体 (Dabs) ml 包括 kappa 的轻链 L 适用于捕获各种抗体片段 Capto L 亲和层析填料 Capto L, 适用于抗体和抗体片段的捕获 它结合了刚性的高流速琼脂糖基质及与免疫球蛋白结合的重组蛋白 L 配体, 这种配体对于抗体 K 轻链 (Kappa light chain) 上的可变区有很强的亲合力 因此,Capto L 适用于捕获各种抗体片段, 例如 Fab 单链抗体 (scfv) 和结构域抗体 (Dabs) Capto L 有大包装以及预装柱等形式可供选择, 并提供 Predictor 96 孔板用于结合与洗脱条件的快速筛选和优化 Capto L 的重要性能特点包括 : 较高的动态结合能力以及宽范围的抗体片段选择性 确保了一种含有 K 轻链抗体片段提纯的解决方案 允许高流速和高生产率以及配体渗漏低的刚性基质 具有管理支持和保证用于商业生产供应的 BioProcess 介质 为了确保捕获平台的全面性, 在 Capto L 对抗体片段缺乏亲合力的情况下,GE Healthcare 有大量具有互补性的亲和层析填料可供选择 : KappaSelect 层析填料与 KappaFab( 恒定区 ) 结合, 以及 LambdaFabSelect 层析填料与 LambdaFab( 恒定区 ) 结合 另外, 可以使用 MabSelect 捕获抗体片段, 因为其对重链子类型 VH3 具有亲合力 29

31 其他亲和层析预装柱 货号 预装柱 用于耦联配基 平均颗粒 ( μm) 每毫升载量 (ml) 应用 / 特性 最高流速 (ml/min ) 耐反压 (MPa) ph 稳定性工作 价格 ( 美金 ) ml ml μ 基团 通过游离氨快速与亲和配体结合 用于基团特异性纯化 HiTrap ConA B, ml HiTrap ConA B, ml HiTrap Blue HP, ml HiTrap Blue HP, ml HiTrap Heparin HP, ml HiTrap Heparin HP, ml HiTrap Heparin HP, ml HiPrep 6/0 Heparin FF HiTrap Streptavidin HP, ml HiTrap Benzamidine FF, 2 ml HiTrap Benzamidine FF, ml HiTrap Benzamidine FF, ml mg porcine thyroglobulin mg 人白蛋白 3 mg antithrombin lll 2 mg bovine antithrombin III 6 mg 生物素化的 BSA 3mg 胰蛋白酶原 能纯化糖蛋白 膜蛋白 糖脂 多糖 激素 脂蛋白等纯化抗凝血激酶 核酸酶 NAD + / NADP + 依赖酶 ATP 依赖酶 脂蛋白 干扰素 白蛋白等等纯化抗凝血激酶和别的凝集因子, 脂蛋白 脂酶 蛋白合成因子 激素 类固醇受体 DNA 结合蛋白 干扰素纯化抗凝血激酶和别的凝集因子, 脂蛋白 脂酶 蛋白合成因子 激素 类固醇受体 DNA 结合蛋白 干扰素利用生物素和抗生素的结合作用做亲和层析 ; 如使用生物素标记的抗体纯化相应抗原专门纯化丝氨酸蛋白酶, 胰蛋白酶和类胰蛋白酶 用于纯化核酸 6 其他亲和层析析 PlasmidSelect Xtra Starter Kit 含 HiPrep 26/0 Sepharose 6 FF, HiTrap PlasmidSelect Xtra, HiTrap SOURCE 30Q 各一支 >2 mg 超螺旋质粒用于治疗用超螺旋质粒 DNA 的纯化 3 其他亲和层析填料 货号 产品 包装 目标 配体 颗粒大小 (μm) 每毫升结合量 (ml) 应用 ph 稳定性最高流速工作 [ 清洗 ] (cm/h) 价格 ( 美金 ) 用于耦联配基 NHS activated 2 ml -NH2 6-23μ mol NHS ph Sepharose FF 00 ml -2 小时 [2-3] CNBr activated Sepharose FF 0 g 20 g -NH mg 胰蛋白酶原 ph 小时 3- [2-] CNBr activated Sepharose B g 20 g -NH mg 胰蛋白酶原 ph 小时 3- [2-] Epoxy-activated Sepharose 6B g 20 g -NH2 -OH; -SH 9-0 μ mol 环氧基 ph 9-3 > 6 小时 2- [2-] EAH Sepharose B 0 ml 00 ml 7- μ mol 氨基 ph..-2 小时 3- [3-] Activated Thiol Sepharose B g -SH μ mol ph Thiopropyl Sepharose 6B g -SH 8-3 μ mol 活化巯基 ph 小时 2-3 [2-3] 用于流感疫苗纯化 Capto DeVirS 2 ml 纯化流感疫苗 Capto DeVirS 00 ml μmols Capto DeVirS L

32 6 其他析货号产品包装目标配体 3 用于纯化核酸 PlasmidSelect Xtra 2ml ml L 用于基团特异性纯化 平均颗粒大小 (μm) 每毫升结合量 应用 ph 稳定性最高流速工作 [ 清洗 ] (cm/h) 价格 ( 美金 ) mercaptopyridine mg 超螺旋质粒用于治疗用超螺旋质粒 DNA 的纯化 ADP Sepharose B g 2 μmol 2 ADP 0. mg 葡糖 6 纯化 NADP + 依赖脱氢酶和其它对 NADP Sepharose B 磷酸脱氢酶 有亲和作用的酶如葡糖 -6- 磷酸脱氢酶 [-0] Blue Sepharose 6 FF 0 ml 00 ml μ mole >8mg HSA 纯化蛋白 干扰素 需要核苷酸辅助的酶 a 2- 巨球蛋白, 凝 -2 [3-3] L Cibacron Blue 血因子等 亲和层析 Capto Blue (HS) Capto Blue 2 ml 00 ml 2 ml 00 ml mg HSA 2 mg HSA 纯化白蛋白 干扰素 需要核苷酸辅助的酶 a- 巨球蛋白蛋白 凝血因子等 Capto Heparin 2ml 0ml L.8mg Heparin.mg ATIII 抗凝血酶 III 凝血因子 脂蛋白 脂酶 蛋白合成因子 ; 激素 类固醇受体 核酸结合酶 限制性内切酶 干扰素 > Heparin Sepharose 6 FF 0 ml 20 ml L mg 肝素 heparin ~ mg heparin 抗凝血酶 III 凝血因子 脂蛋白 脂酶 -2 蛋白合成因子 ; 激素 类固醇受体 核 [-3] 酸结合酶 限制性内切酶 干扰素 Streptavidin Sepharose HP ml > 300 μmol Biotin 3 6 mg 生物素标记的血清蛋白 利用生物素和抗生素的结合作用做亲和层析 ; 如使用生物素标记的抗体纯化相应抗原 2-0. 建议流速 Benzamidine 2 ml 2 μ mole 3 mg 专一结合丝氨酸蛋白酶 Sepharose FF (HS) 00 ml 苯甲酰胺 胰蛋白酶 胰蛋白酶和类胰蛋白酶, [-9] ml 更快速 Benzamidine 00 ml 7 μ mole 3 mg 专一结合丝氨酸蛋白酶 Sepharose 6B 苯甲酰胺 胰蛋白酶 胰蛋白酶和类胰蛋白酶 [2-3] Calmodulin 0 ml mg 3 mg ATP 酶 蛋白激酶 磷酸二 Sepharose B 钙调节 胰蛋白酶 酯酶 神经传递素 干扰 [-9] 因子 素 促肾上腺皮质激素 Con A ml 0-6 mg - mg 能纯化糖蛋白 膜蛋白 糖脂 多 Sepharose B 00 ml 刀豆球 甲状腺 糖 带甘露糖苷或葡糖苷残基的膜 [-9] ml Protein A 球蛋白 囊泡 IgM; 激素 ; 脂蛋白等 Gelatin 2 ml.-8 mg mg 一步纯化或去除纤维结合素 Sepharose B 00 ml 明胶 人血浆纤维 [2-0] gelatin 结合素 Gelatin L 一步纯化或去除纤维结合素 Sepharose FF [2-0] IgG Sepharose FF 0 ml 人类 IgG > 2 mg 一步纯化原核试验生物表达 -0 建议流速 ml Protein A 系统产生的 Protein A 融合产物 [3-] Lentil Lectin 2 ml.9-.2 mg 76 mg 能纯化糖蛋白 膜蛋白 ( 特别是 Sepharose B 扁豆外源 甲状腺 未含端甘露呲喃葡萄糖 [a - D - [-0] 7 凝集素 球蛋白 glucosepyranosyl] 甘露呲喃糖 [a - D - mannopyranosyl] 或相类 似残基分子 ) VIII Select 2 ml 000 IU 7 主要特异吸附 VIII ml VIII VIISelect 2ml.7mg 7 8mg VII 因子 VII 因子纯化 3-0 > ml L ECH Lysine 00ml 3-8umol Lysine.m 纤维蛋白溶酶原 与 Lysine 有特异结合的蛋白纯化 3-2 >0 Sepharose Fast Flow 3 需要快速纯化各类标签蛋白? 需要高通量制备或筛选? 请参阅 GE 手动纯化产品章节

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38 37 层XK 柱 Tricorn 柱 HiScale 柱 层析空柱9 主要用于中低压层析 (0-bar) 的 XK 柱, 因其 优秀性能广受好评 利于缓冲液均匀分配的 Plunger 设计 便利操作及清洁的 QuickLock 设计 具有适配器可灵活调节柱高 具有针对敏感样品纯化设计的温控双层外壳 Tricorn 空柱设计用于中高压层析系统进行中小规模的高分辨率层析 耐压高, 最高达 00bar 塑料薄膜保护玻璃柱管的设计更加耐用 Locking ring 能够保护柱床稳定性 HiScale 是一种新型的耐压达到 Bar 的玻璃空柱, 更加适合于新一代高流速填料如 Capto 和 MabSelect 系列 耐受的压力更高, 最高至 bar 设计的非旋转活塞装置可以轴向压缩装柱, 不会引起连接管路打结 标配有两个柱头对装柱高度提供了较高的灵活性 层析空柱所匹配的层析填料 推荐装填的层析空柱类型 填料类型凝胶过滤 Sephadex Sepharose Sephacryl Superdex prep grade Superose 离子交换层析 Capto Capto ImpRes Sepharose Fast Flow Sepharose High Performance Sepharose XL SOURCE Tricorn º XK 2, 2 HiScale º º º º º º º º 亲和层析 Capto Capto Blue Sepharose 6B/B/CL-B Sepharose Fast Flow Sepharose High Performance MabSelect/MabSelect Xtra/MabSelect SuRe/ MabSelect SuRe LX º º º º 反相层析 SOURCE 疏水 Capto Capto Phenyl Capto Butyl Sepharose Fast Flow Sepharose HighPerformance SOURCE, 2 º º 推荐 º 次推荐 - 不推荐 不推荐用于 XK 0 2 推荐使用预装柱

39 9 层层析空柱列表 货号产品空柱尺寸带一个适配器操作压力网孔尺寸价格内径 (mm) 高度 (cm) 体积 (ml) 柱床高度 ( cm) ( 美金 ) Column C0/0 Column C0/ Column C0/0 Column C6/ Column C6/0 Column C6/70 Column C6/00 Column C26/0 Column C26/70 Column C26/00 Column HR6/ Column HR6/0 Column HR6/0 Column XK6/ Column XK6/0 Column XK6/70 Column XK6/00 Column XK26/ Column XK26/0 Column XK26/70 Column XK26/00 Column XK0/ Column XK0/30 Column XK0/60 Column XK0/00 Hiscale TM 6/ Hiscale TM 6/0 Hiscale TM 26/ Hiscale TM 26/0 Hiscale TM 0/ Hiscale TM 0/0 TRICORN / TRICORN /0 TRICORN /00 TRICORN /0 TRICORN /0 TRICORN 0/ TRICORN 0/0 TRICORN 0/00 TRICORN 0/0 TRICORN 0/0 TRICORN 0/300 TRICORN 0/ bar (. psi, 0. MPa 30 bar (3 MPa, 30 psi) bar (0. MPa, 72 psi) 3 bar (3 psi, MPa) bar (2 psi 2 MPa) 00 bar (0 psi, 0 MPa) 0 bar (72 psi, MPa) 0 或 80 μm 尼龙 0 μm 尼龙 0 μm 尼龙 μm 尼龙 μm 聚丙烯 μm 聚丙烯 层析空析空柱柱38 可自行填装的层析柱 货号产品包装价格 ( 美金 ) INDEX COLUMN 70/00 INDEX COLUMN 70/90 INDEX COLUMN 00/00 INDEX COLUMN 00/90 INDEX COLUMN 0/00 INDEX COLUMN 0/90 INDEX COLUMN 0/00 INDEX COLUMN 0/90 BPG 00/00 BPG 00/70 BPG 00/90 BPG 0/00 BPG 0/90 BPG 0/00 BPG 0/70 BPG 0/90 FINELINE PILOT 3 FINELINE 00P FINELINE 00PL FINELINE 0P FINELINE 0PL Axichrom 0/300 SS Axichrom 0/00 SS 装柱器 货号 产品 包装 价格 ( 美金 ) 用于 C 型柱 RESERVOIR RC RESERVOIR RC RESERVOIR RC 用于 HR 型柱 PACKING EQUIPMENT HR 6 83 用于 XK 型柱 PACKING RESERVOIR RK6/ PACKING RESERVOIR RK PACKING CONNECTOR XK PACKING CONNECTOR XK 26 用于 Tricorn 型柱 TRICORN PACKING EQUIPMENT / TRICORN PACKING EQUIPMENT 0/ TRICORN PACKING CONNECTOR TRICORN PACKING CONNECTOR TRICORN PACKING CONNECTOR

40 实验室层析柱相关接头一层0 层析柱相关接头的选择附录一接头图示 接头名称 连接方式 包装数量 对应空柱类型 对应预装柱类型 货号 参考价格 HiTrap/HiPrep, 连接蠕动泵及 8 XK HiTrap,GSTrap, /6", male ÄKTA design 系统 MBPTrap, connector for StrepTrap,HiPrep ÄKTAdesign Connector 连接注射器 2 - HiTrap,GSTrap, /6" MBPTrap, Male/Luer StrepTrap Female Fingertight 连接 ÄKTAdesign 系 0 Tricorn HiTrap,GSTrap, Connector 统 MBPTrap, /6" Male for StrepTrap,HiPrep, Tubing o.d. GL, PC, ST, PE, /6" RESOURCE Union /6" 连接 ÄKTAdesign 系 XK HiScale Hiload female-/6" 统 female Stop Plug 堵头 XK HiTrap,GSTrap, Female, /6" MBPTrap, StrepTrap,HiPrep, Hiload Tubing 连接独立泵 C, HR HiPrep connectors o.d. 2.7 mm, M6 male - HiPrep,GL Tubing 连接独立泵 (C 柱 : connectors o.d. 连接 ÄKTAdesign 系.8 mm, M6 统 ) male Fingertight Union 连接独立泵 (C, HR Tricorn, C,HR HiPrep, GL, PE /6" - Male / 柱 : 连接 AKTAdesign M6 Female 系统 ) Union M6 连接独立泵 - HiPrep female - /6" male Fingertight 连接 ÄKTAdesign 0 - GL, PC, RESOURCE Narrow Head micro, 连接 Ettan Connector, LC o.d. /6" Stop Plug 堵头 Tricorn HiTrap,GSTrap, /6" Male MBPTrap, StrepTrap Tubing Connectors M6 male, For flanged tubing o.d..8mm 连接独立泵 Tricorn, C, HR Tubing Connector Flangeless/M 6 Male 连接独立泵 (C 柱 : 连接 ÄKTAdesign 系统 ) 2 C Tubing connector flangeless-m6 male 连接独立泵 (C 柱 : 连接 ÄKTAdesign 系统 ) C Connector Nut 连接独立泵 (C 柱 : 连接 ÄKTAdesign 系统 ) C Connect M6 Female, to /6" male 连接 ÄKTA Pilot 系统 2 C, HR Tubing connector SRTC-2 连接独立泵 HR Fingertight Connector /6" Male 连接 ÄKTAdesign 系统 0 HiScale Fingertight Stop Plug, /6'' 堵头 HiScale

41 层析应用指南 生物分子下游纯化的对象一般包括蛋白 酶 重组蛋白 单抗 抗体及抗原 肽类 病毒 生化分子等 纯化前首先需要测定生物分子的各物理和化学特性, 然后通过实验选择出最有效的纯化流程 蛋白质基本性质 推荐的层析方法. 使用电泳, 等电聚焦等手段测定 ; 目标蛋白的物理特性如分子量 PI 等未知 2. 使用层析方法测定, 如分离范围广阔的 Superose 6 预装柱很适合测定未知蛋白的分子量 ; 少量离子交换填料 在多个含不同 ph 缓冲液的试管中, 可简易地测出 PI, 并选择纯化用缓冲液的最佳 ph 附. 使用最通用的凝胶过滤方法, 选择分离范围广阔的介质如 Superose Sephacryl HR 依据分子量将样品分成不同组份 ; 8. HiTrap Igselect 是特异性纯化人的 IgG 所有亚型 2. 用含专一配体或抗体的亲和层析填料结合目标蛋白, 亦可用各种活化偶联填料偶联目标蛋白的底物 受体等自制 目标蛋白的特性或样品成分不太了解 亲和填料, 再用以结合目标蛋白, 一步即可得到高纯度样品 ; 3. 体积大的样品, 往往使用离子交换层析加以浓缩及粗纯化 高盐洗脱的样品, 可先用疏水层析纯化 疏水层析利 用高盐吸附 低盐洗脱的原理, 洗脱样品又可直接上离子交换等吸附性层析, 两种方法常被交替使用于纯化流程中 为避免堵塞填料, 一般使用 Sepharose Big Beads Sepharose XL Sepharose Fast Flow 等大颗粒离子交换填料, 将离心 处理大体积样品 超滤 粗纯化结合为一, 提高回收率, 缩短纯化周期 处理过的样品处于高盐状态下, 很适合直接上疏水层析 若作离子交换, 需先用 Sephadex -G2 脱盐 疏水层析是较 硫酸铵沉淀后的样品 新的技术, 随着填料种类不断增多, 渐被融入各生产工艺中 利用 HiTrap HIC Selection Kit 可在八 种疏水填料中选择最 适合填料及最佳的纯化条件 低盐洗脱的样品可稍加稀释或直接上其它吸附性层析 推荐的处理方法推荐层析方法 应用领域 固化外源凝集素如刀豆球蛋白 花生 大麦等凝集素, 两种附上外源凝集素的 Sepharose 6MB 亲和层析填料, 专为俘获整个细胞或大 糖类分子 可结合碳水化合物的糖类残基, 很适合用作分离糖化细 复合物, 如膜囊等 胞膜组份 细胞 甚至亚细胞细胞器, 纯化糖蛋白等 膜蛋白分离常使用去污剂以保持其活性 离子性去污剂. 膜蛋白纯化试剂盒可轻松筛选出适合于组氨酸标签膜蛋白溶解和纯化的去 应选用与目标蛋白相反电荷者, 避免在作离子交换时和 污剂 膜蛋白 目标蛋白竞争交换填料, 籍此除去去污剂 非离子性去 2. His MultiTrap 96 孔板可以用于膜蛋白表达的筛选, 得到高表达菌株 污剂可以疏水层析除去 纯化后的样品通过一系列方法如蛋白印迹 凝胶过滤 或光散射可对结果进行分析和 3. His Mag Sepharose,Ni 磁珠快速纯化得到的小包装细胞膜可溶解在不同的去污剂中, 溶解后可使用相同的去污剂直接进行纯化 评价. rprotein A Sepharose FF 对 IgG 有较高的载量和专一性, 基团脱落更少 脱落的 rprotein A 用离子交换 Q Sepharose HP Capto Adhere 或凝胶过滤 Superdex 0, 很容易去除 2. Mabselect Sure 是目前 GE 产品中耐强碱的创新性 Protein A 亲和层析介质可以耐受 0.~0.N 的氢氧化钠, 使用高达 0.N 的氢氧化钠进行在位清洗 / 消毒大大降低了抗体产品被内毒素污染和批间交叉污染的风险 抗体也叫免疫球蛋白 (Ig), 是一大类能与抗原产生特异性结合的蛋白, 抗体的应用有 :, 清洗效果更好, 有利于延长介质使用寿命, 同时也大大降低了 CIP/SIP 的成本 治疗性应用 : 癌症治疗 / 免疫性疾病治疗 3. MabSelect SuRe LX 是在 MabSelect SuRe 基础上开发的超高载量的抗体纯化 诊断应用 : 体内诊断 / 体外诊断 / 检测试剂 介质, 具有 MabSelect SuRe 的所有特性 但是动态载量高达 60mg/ml 是高表 分析应用 : 酶联免疫分析 / 抗体芯片 达抗体纯化工艺的首选填料 抗体 结构功能研究来源主要是腹水和杂交瘤细胞培养上清液 腹水有大量. Mabselect Xtra 是高载量的亲和层析填料, 其动态载量超过 mg/ml 填料 ( 停留时间 2. min) 在工艺生产过程中可以有效减少层析柱的体积, 从而降低生产成本 白蛋白 转铁蛋白和宿主抗体等 Protein G 和 Protein A 对 IgG 的 Fc 区有专一性亲和作用, 能一步纯化各种不同. 疏水层析 Phenyl Sepharose HP 亦很适合纯化 IgG 可有效去除抗体中的聚集体 宿主抗体和污染 IgG 可用凝胶过滤 Superdex 0 在精细纯化中去除 来源的 IgG 6. HiTrap IgM 是用来纯化融合瘤细胞培养的单抗 IgM, 结合量达 mg IgM HiTrap IgY 是专门用来纯化 IgY, 结合量达 00mg 纯 IgY 7. KappaSelect 是专为纯化 Fab(kappa) 片断而设计的亲和填料, 能有效地捕获 Fab, 获得高纯度和高产量的 Fab 0 附录二 层析应用指南0

42 层析应用指南抗原 利用 IgG 抗原与抗体的亲和作用 最有效的方法是用活化偶联填料如 CNBr NHs activated Sepharose FF 偶联 IgG, 再进一步获取 IgG 抗原. GST 融合载体使要表达的蛋白和谷胱甘肽 S 转移酶一起表达, 利用 Glutathione SepharoseB/FF 作亲和层析纯化, 再利用凝血酶或因子 Xa 切开 2. Protein A 融合载体使要表达的蛋白和 Protein A 的 IgG 结合部位融合在一起 南0 应用领域推荐的处理方法推荐层析方法层重组蛋白 重组蛋白在设计 构建时应已融入纯化构想, 可以通过亲和标签的作用一步实现高纯度的纯化 表达, 以 IgG Sepharose6 FF 纯化 3. 含组氨酸标记 (Histidine-tagged) 的融合蛋白可用 Chelating Sepharose /IMAC Sepharose 螯合 Ni 2+ 金属, 在一般或变性条件 (8M 尿素 ) 下通过组氨酸螯合融合蛋白 HisTrap 试剂盒提供整套 His-Tag 蛋白的纯化方法. 如果您要求更高的纯度, 或 Ni 2+ 不是最佳金属离子时, 另一种预装 Co 2+ 金属离子的产品 TALON Superflow 可供选择. 纯化真核细胞培养上清分泌表达的标签蛋白, 例如昆虫细胞,CHO 细胞, 或者使传统 IMAC 填料金属离子脱落的样品, 可以使用 Ni Sepharose excel. 高化学稳定性的 Superose 2 及 Sepharose 6FF 凝胶过滤填料很适合在变性 条件下做纯化 包涵体蛋白 包涵体蛋白往往需溶于 6M 盐酸胍或 8M 尿素中才能进 2. Superdex 7 Q Sepharose FF 和 Phenyl Sepharose FF 分别被发现有助包涵体行相关纯化, 变性纯化后的蛋白需要复性至蛋白的天然蛋白的复性 构象, 一般包涵体蛋白样品的纯度越高, 复性效果越好 3. SOURCE 30 RPC 反相层析填料很适合纯化复性前的粗品, 并可以 M NaOH 重生 此方法纯化后的包涵体蛋白, 复性回收率明显提高 将包涵体蛋白在变性条件下固定 ( 吸附 ) 在层析填料上, 固相复性方法也被用于以 HiTrap Chelating 金属螯合层析直接复性及纯化包涵一般用各种 Sepharose FF 离子交换层析填料 去除变性体形式表达的组氨酸融合蛋白 ; 以 HiTrap Heparin 肝素亲和层析直接复性及纯 包涵体蛋白固相复性 剂后, 蛋白在填料上成功复性, 再将复性好的蛋白洗脱化包涵体形式表达的含多个赖氨酸的融合蛋白 两种亲和层析预装柱均可反复下来 固相复性避免了一般复性过程中蛋白质聚体的形多次重复使用, 比一般试剂盒更方便 耐用成, 所以复性得率更高, 而且无需大量稀释样品, 并将 复性和初纯化合二为一, 大大节省时间及提高回收率. Sephadex LH- 葡聚糖凝胶同时具备吸附性层析和分子筛功能, 可使用水 醇 丙酮 氯仿等各种试剂, 广泛用于各种天然产物的分离, 包括生物碱 甙 黄酮 醌类 内脂 萜类 甾类等 2. 生物碱在酸性缓冲液中带正电, 成为盐, HiTrap SP 阳离子交换层析柱可以分离许多结构非常近似的生物碱 相反, 黄酮 蒽醌 皂甙 有机酸等可溶于 中草药有效成分 偏碱的缓冲液中, 在 HiTrap Q 阴离子交换柱上分离效果良好 中药的化学成分极其复杂 传统中药多是煎熬后服用, 3. 一般多糖纯化大多使用分子筛如 Sephadex,Sephacryl 若分子量在 600KD 有效成分多较为亲水, 包括生物碱 黄酮 蒽醌 皂甙 以下, 并需更高分辨率, 可选择新一代的 Superdex 一般植物可能含水溶性 有机酸 多糖 肽和蛋白质 灵活及综合性地利用多种酸溶性 碱溶性多种多糖 综合利用分子筛及离子交换层析有助进一步获各组层析方法 如离子交换 分子筛 反相层析, 更容易分份纯品 另外, 多糖药物需去除可引起过敏反应的蛋白质, 传统 Sevag 方法用离到单一活性成分丁醇脱蛋白需反复数十次 阴阳离子交换法可以一 两步快速去除多糖中残存 的蛋白质. SOURCE 30RPC 反相层析也很适合各种中药有效成分的检测 分离和放大制备 由于中药的成分非常复杂, SOURCE 反相层析可用范围为 ph-, 并可用 M NaOH,M HCL 清洗 再生 比传统硅胶反相层析更易于工艺优化及在位清洗, 寿命也更长 肽类的来源有天然提取, 合成肽和重组肽三种 大多数. 多肽耐有机溶剂, 可用高选择性的反相层析如 SOURCE 30RPC SOURCE 多肽都是化学合成的, 只有非常少的肽是来源于天然提 RPC SOURCE RPC 或离子交换层析作纯化 肽类 取, 更大的肽一般指超过 2 氨基酸需要通过重组 DNA 的技术表达生产 多肽的紫外吸收通常在 6 nm-2 nm, 如果含有芳香族的基团, 紫外的吸收最大值会在 268 nm-280 nm 2. Superdex Peptide 是专为肽分子纯化设计的凝胶过滤预装柱, 高化学稳定性, ph -, 兼容有机溶剂 ( 乙腈 +TFA), 能配合反相层析做出更精美的肽图 3. 当分离的多肽带有电荷的时候, 可以选择用离子交换层析进行分离, 如 HP, SOURCE,Minibeads Monobeads 等精细填料

43 0 层析应用应用领域推荐的处理方法推荐层析方法 核酸 病毒 寡核苷酸 脱盐 小分子去除 核酸的纯化用于去除影响测序或 PCR 污染物等研究 核酸可大致上分为质粒 DNA 噬菌体 DNA 和 PCR 产物等, 病毒也可视作核酸大分子, 和质粒 DNA 一样寡酸苷酸多应用在反义 (anti-sense) DNA SiRNA PCR 和 cdna 合成等研究 衔接不同层析手段之间或样品的预处理步骤中, 需要置换样品中的盐分或去除一些小分子 使用分离大分子的 Sephacry S-000 SF Superose 或 Sepharose FF 凝胶过滤填料去除杂蛋白, 再配合离子交换如 Mono Q SOURCE Q 分离核酸合成后含三苯甲基的寡核苷酸以阴离子交换的 MonoQ 或快速低反压的 SOURCE Q 在 ph2 下可去除副产物, 并避免凝集和保护基的脱落 载量大大高过反相层析, 可用做大量制备 不含三苯甲基的失败序列可用反相柱 ProRPC 去除 使用凝胶过滤填料 Sephadex G0,G,G2, 等去除小分子, 效率高, 处理量可达柱床体积 30% 只需在进样后收集首 /3-/2 柱体积的洗脱液, 就可以去除该填料分离范围上限以下的小分子, 简单直接 由于只是去除小分子, 柱高 0cm 以上即可 整个过程一般可于数分种至半小时完成 Sephadex G2 系列填料专为蛋白质脱盐而设计, 预装柱 Hitrap Desalting(ml) 可用针筒操作 HiPrep Desalting(26ml) 可在数分钟为多至 0ml 样品脱盐 指南南2. 凝胶过滤填料 Sepharose Fast Flow 或 Sepharose 6 Fast Flow 是经典的病毒 类疫苗纯化方法, 可以去除培养基中的杂蛋白 处理量大 快速的特点 柱高一般 0-70cm, 上样量一般为 0-% 病毒类疫苗纯化 2. Capto Core 700 填料设计用于病毒和其他生物大分子的纯化 新型的核心微球技术以及复合模式 辛胺配基使 Capto Core 700 在一种层析填料中具有大小 分离以及吸附层析的双重功能 3. 随着药监部门对产品质量的严格要求, 杂质的残留水平的提高, 如 :DNA 的去除 清蛋白等 GE 公司的新一代填料, 如 Capto Q,Capto Devir S 等新填料在 DNA 卵清蛋白去除都有很好的应用 阴离子交换在血浆蛋白的纯化中应用非常广泛. 结合低温乙醇法在丙种球蛋白纯化后期用 DEAE saphrose FF 或者新一代的 CaptoQ 吸附二聚体等杂质从而达到提高产品纯度的目的 血浆蛋白 2. 白蛋白纯化过程中使用阴离子交换吸附 PKA 微量的 IgG 以及聚体 3. 凝血因子 VIII 纯化过程中使用大孔径的 MacroCap Q 可以增加载量和收率 抗生素聚合物分析 亲和层析在血浆蛋白纯化中的应用主要有 : 使用 CaptoHeparin 或 Heparin sepharose 6 Fast Flow 纯化 AT III 和凝血因子 IX; 使用 VIII select 纯化凝血因子 VIII; 使用 VII Select 纯化凝血因子 VII; 使用 a- Antitrypsin Select 纯化 a--antitrypsin 中国药典从 00 年版起要求抗生素头孢曲松钠需要找出聚合物占产品的百分比, 规定使用 SephadexG0 凝胶过滤法测定 基因治疗用病毒载体 SOURCE Q, Q sepharose XL,, Capto Q 处理流程包括 :. 用 Sepharose6 Fast Flow 进行基团分离除 RNA 和缓冲液交换 基因治疗用质粒 PlasmidSelect Xtra 层析填料是整个平台的基础, 使得仅 以一套工序纯化双螺旋 (sc) 共价闭合环状质粒 DNA 便可 满足从批量生产到临床应用等多种需求 2. 用 PlasmidSelectXtra 捕获和选择性吸附 sc 质粒 DNA 3. 最后用 SOURCE30Q 进行精纯 整个处理过程高容量, 高产量, 能规模放大以在高度调控的环境下进行经济的工业生产 整个工艺主要由层析和过滤步骤组成, 依次包括除杂, 三个层析步骤和超滤等步骤