Key words pneumatic nozzle multi-cell assembly tissue engineering regenerative medicine 1-2 / Wonhye 3D bio-printer Khalil multinoz

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1 Chinese Journal of Biomedical Engineering Vol. 32 No. 2 April 2013 * ms 30 μm 3 2 CD34 Oil red O R318 A Research on Three-Dimension Multi-Cell Assembly Technique Based on neumatic Control YANG Min XU Ming-En * CHEN Jie-Yi ZHAO Zhan-Ying GE Ya-Kun YAN Ming GUO Miao College of Life Information Science & Instrument Engineering Hang Zhou Dian Zi University Hangzhou China Abstract Three-dimension controlled cell-assembly technology provides new theory and technology for tissue engineering and regenerative medicine. Organs have complex three-dimensional structures composed of different cells. The multi-cell assembly technique is one crucial tool to development of cell-assembly technology. In this study we developed a multi-cell assembly technique based on the pneumatic control. We designed and constructed pneumatic nozzle model by making use of compressed air as power and non-horizontal arrangement method. Based on this system we conducted a series of cell assembly experiments on three kinds of color matrix material and two kinds of living cells. Results demonstrated that the system can realize accurate switching and assembly among three nozzles. In the assembling process jet of nozzle responds quickly at start-stop moreover the start-stop response delay is short than 5 ms and the forming precision is small than 30 μm the positions of nozzle is accurate nozzles were not interfere with others and the system is easy to realize and convenient for multi-nozzle extend and control. Based on the system the molding assembly of many kinds of important biological value structure of three kinds of materials such as ladder structure circular cavity structure and olygonal structure can be completed. On the other hand the assembly of two living cells can also be completed. The results of CD34 and Oil red O staining experiment showed that the growth of the assembly of cells is good within the structures cellular localization accurate and cell trait keep good. This system is simple flexible reliable easy to realize and convenient for multi-cell assembly which can be used in fabricating complex tissue and organs. doi / j. issn Y Y C23031 * xumingen@ hdu. edu. cn

2 Key words pneumatic nozzle multi-cell assembly tissue engineering regenerative medicine 1-2 / Wonhye 3D bio-printer Khalil multinozzle deposition 1 8 MAC2-104 Delta Tau 10 9 DMC1380 Fig. 1 1 The system diagram of multi-cell assembly platform

3 A B C a b c A a B 120 B b a A B C 3 3 Fig. 3 3 Assembly drawing Fig. 4 4 Electromagnetic valve driving circuit 3 MAC2-104 DMC1380 MAC2-104 X Y Z DMC MAC Fig. 2 neumatic nozzle model rogrammable Logic Controller 2. 2 LC MAC 2524 Windows Comm μm Visual C + + Visual Basic Delphi DB101-2H F-TEC MAC 2 4 C MAC

4 Fig. 5 5 Motion control module Fig. 6 6 Upper control software X Y Z 3 DMC MAC Q I M 4 M MAC I / O MAC M 0 ~ M 7 8 ~ M 15 M 8 8 M 12 V 0 V M 5 M 5 0 V 12 V JQC - 3FF 7 Fig. 7 Control flow chart M 5 DMC

5 2 215 Q i i = i i = 1 s Q 1 s = 1 L 1 + R 1 2 s 4 C 1 s 1 Q 2 s 0 Q 3 R 1 L 1 C 1 δq + h * δm = du + δw 1 Q m h * Q 3 = R 2 U R 2 Q 2 = Q 3 2 s = R 2 Q 2 s 6 ( ) 0 = R 0 R g R 0 R 1 + R 0 C V d 1 dt 2 0 R 0 R 1 s = L 1 s + R 1 + R 2 Q 3 s 7 g 1 Matlab C V Simulink R 0 s = 0 0 R g R d 0 [ ( R ) R 0 C V dt ] e - st dt Simulink 8 3 g 0 1 Q 3 [ ] [ ] [ ] s Q 3 s Fig. 8 8 The control model of injection system 0 0 Ma 1 Q Ma 1 Q Ma 0 Ma Ma 0. 5 Ma 1 Q Q 3 5 ms 1 ~ 5 mm / s ms 1 ~ 5 mm / s Ma 0 Ma 3 SolidWorks

6 Fig. 9 nozzle 10 6 / ml 1 ml / 4 30 min μm 3 mm / s 0. 2 mm / s 200 mm / s 3 mm / ms 120 μm / 5 % 9 5 % DMEM Dulbecco s Modified Initial response of the inlet pressure and Eagle s Medium Sigma USA CO2 flow 2 d 6 3 A1 A2 A3 A1 A2 A a ~ d a 10 Fig. 10 Stop response of inlet pressure and b nozzle flow Aurora STL 3 c Gelatin 14 - Sodium alginate 15 2 mg 3. 5 mg 10 ml NaOH ph r / min 10 min 70 4 e 3 extracellular matrix ECM μm c d 11 e ~ h % 12 h 1 f 3

7 2 217 g h a b c d e f g h Fig. 11 Model made by pneumatic control nozzle. a Structure of concentric cylindrical b Structure of circular cavity c Structure of hexagon d Structure of complex square e Structure of multilayer f Structure of clovers g Structure of sex symbol h Structure of square 12 Oil red O 2 d CD34 Fig the fat cells a CD34 b Oil red O Multi-cell assembly structure. a CD34 dyeing fat cells and fat stem cells b Oil red O stain reveals

8 hippocampus J syndrome alginate / fibrinogen matrix J. Biomaterials cell encapsulation J. Lab Chip 2010 J 7 1 Itskov V Curto C astalkova E et al. Cell assembly sequences arising from spike threshold adaptation keep track of time in the. Journal Neuroscience Dean D Ruggeri ZM Boland T et al. Cell damage evaluation of thermal inkjet printed Chinese hamster ovary cells J. Biotechnology and Bioengineering Xu Mingen Wang Xiaohong Yan Yongnian et al. An cellassembly derived physiological 3D model of the metabolic based on adipose-derived stromal cells and a gelatin / Chan V Zorlutuna Jeong JH et al. Three-dimensional photopatterning of hydrogels using stereolithography for long-term Mironov V restwich G Forgacs G. Bioprinting living structures. Journal of Materials Chemistry Lee W Lee V olio S et al. On-demand three-dimensional freeform fabrication of multi-layered hydrogel scaffold with fluidic channels J. Biotechnology and Bioengineering Liu Li Xiong Zhuo Zhang Renji manufacturing J olymers rototyping Journal Langer R. future directions J 10 Delta Tau Data System Inc. Chatsworth Delta Tau Data System Inc Software reference Manuals-ewin32 RO Z System lnc Software reference Manuals-Comm32 RO Z Data System lnc J Biomaterials Tek Chiganos TC Mohammed JS et al. et al. A Novel osteochondral scaffold fabricated via multi-nozzle low-temperature deposition. Journal of Bioactive and Compatible 8 Khalil S Nam J Sun W. Multi-nozzle deposition for construction of 3d biopolymer tissue scaffolds J. Rapid Tissue engineering perspectives challenges and. Tissue Engineering Turbo MAC Users Manual M.. DELTATAU Data. DELTATAU. 14 Sakai S Inagaki H Inamoto K et al. Wrapping tissues with a pre-established cage-like layer composed of living cells J. Rapid prototyping

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