期 张 蕊 崔慧霞 杨 旭 等 %&' 和 在直肠癌组织中的表达及其与预后的关系 直肠癌作为典型的炎症相关肿瘤之一 其发生可在长期的慢性炎症基础上发展而来 研究表明肿瘤微环境中的炎症细胞和炎症因子在结直肠癌发生 发 展过程中起着重要的作用 %&' 60$60" 6$!$ 6$ 6$77$"9$2 0

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1 第 卷第 期 年 月 西安交通大学学报 医学版!" #$# # %&'& $ 临床研究 和 在直肠癌组织中的表达及其与预后的关系 张 蕊 崔慧霞 杨 旭 王晓鹏 张文陆 锦州医科大学 研究生学院 护理学院 附属第一医院放疗科 辽宁锦州 摘要 目的 检测 %&' 在直肠癌组织及癌旁组织中的表达差异 探讨二者与临床病理特征的关系 及其对患者生存的影响 方法 应用免疫组织化学法 对 例直肠癌组织和 例癌旁组织的 %&' 和 的表达进行检测 并对患者定期随访 分析两因子与预后的关系 结果 直肠癌组织中 %&' 的阳性表达率高于癌旁组织 %&' 的表达与淋巴结转移相关 与病理分期 淋巴结转移相关 两因子与年龄 性别 组织分化程度及肿瘤大小无关 两者之间的表达呈正相关 (%&' 阳性表达组总生存期 ) 均较阴性组缩短 多元回归分析显示 %&' 的表达 病理分期 淋巴结有无转移 肿物大小对预后有影响 结论 %&' 在直肠癌组织中表达增高 提示两者可能促进直肠癌的发展和淋巴结转移 且二者的表达与患者不良预后相关 关键词 直肠癌 髓样细胞触发受体 %&' 环氧化酶 中图分类号 & * 文献标志码 +!"!#$"% "'$$"! $ $"%'$'!" '! "!,-+./ &#0 1 -#0 0 +./ # +./ 0$",-+./ $" 2# 30"4 # $ 0! 21"05$670/6#$)!2.#670" )!2 8$6 9$": &00 " "! 2 $;067 +:020$ "4 # 0" ()" # " ##" "#()! "## *+ # ##"##",# -..# "## ## ##" # ()! "*+./"## ##" ###",#."# #&0 ". /" -..# " # ##& ()! "*+# ##. ##",# &&()!. " ".*+. " #" "&&1..#." #"/&.#. # " (& &&+$ ()! "*+. &&*." ()! # "" /# " *+ " ()!# ## #.# "" "# ##".#" *+, ) # ## #" "# ()! ## *+ 收稿日期 修回日期 基金项目 辽宁省科学技术计划项目. 辽宁省教育科学 十二五 规划.3/ 8 )# 6 $ 6 " 7: 6)!0$"!$ " %$!" 2 6$!: 0"0"6 50"!$." ' #!0 ")!0$"!$% $2: ;05$ $ 6 2 " 6$!: 0"0"6 50"!$.3/ 8 通信作者 张文陆 ' 9 02 $"2#! 9 优先出版 "7!" 0 "$!97 $02 92!" # $ #!"

2 期 张 蕊 崔慧霞 杨 旭 等 %&' 和 在直肠癌组织中的表达及其与预后的关系 直肠癌作为典型的炎症相关肿瘤之一 其发生可在长期的慢性炎症基础上发展而来 研究表明肿瘤微环境中的炎症细胞和炎症因子在结直肠癌发生 发 展过程中起着重要的作用 %&' 60$60" 6$!$ 6$ 6$77$"9$2 0!$27 是一种新型调控炎症反应的因子 正常情况下在肠道中罕有表达 但在 炎症性肠病 结肠癌中 %&' 表达水平增高 此外 在对非小细胞肺癌 " " 79 2!$22#"! "!$6.) 和肝癌的研究中表明 %&' 在癌细胞中有直接的促癌作用 并与患者死亡和肿瘤复发显著相 关 多项研究证实!!2$" 7$ 在结直肠癌中过表达 与结直肠癌的发生 发展 转移相关 且与患者更低的生存期相关 同时 有研究表明 %&' 的表达受到 信号通路的调控 但是 %&' 是否参与直肠癌的发生发展 在此过程中 是否与 %&' 存在协同作用 在直肠癌中的研究尚属罕见 本研究应用免疫组化的方法检测 %&' 和 在直肠癌和癌旁组织中的表达情况 分析二者的相关性 以及与临床病理特征的关系 通过临床随访 进一步阐述两因子与直肠癌患者预后的关系 资料与方法 研究对象 随机选取 年 月至 年 月在锦州医科大学附属第一医院大肠外科行手术切除并经病理证实为直肠腺癌的蜡块标本 例作为病例组 同时选取其相应癌旁组织 例 距离癌组织大于!9 作为对照组 其中男性 例 女性 例 年龄 岁 中位年龄为 岁 根据术后病理报告按 年 +31 制定的 %. 分期第 版进行分期 期 例 期 例 期 例 无淋巴结转移的 例 有淋巴结转移 例 所有患者以手术时间为随访起点 术后 年内每 个月复查 次 第 年每半年复查 第 年 每年复查 次 随访内容为血常规 肝肾功 肿瘤标志物 '+ + 等 和各项影像学检查 如肠镜 腹部 % 等 随访终 点为患者死亡 或者随访截止时间 生存时间以月为单位 随访至 年 月 失访病例作为脱落病例处理 本研究经锦州医科大学附属第一医院医学伦理委员会同意 所有患者均签署知情同意书 实验方法 术后标本经甲醛固定 切片备用 应用免疫组织化学检测 %&' 和 在直肠癌组织及相应癌旁组织中的表达 %&' 兔抗人单克隆抗体购自英国 +! 9 公司 兔抗人多克隆抗体 ) 试剂盒购自北京博奥森生物技术有限公司 实验步骤按照 ) 试剂盒说明进行操作 用 ) 代替一抗做阴性对照 已知阳性染色直肠癌切片做阳性对照 由两位资深病理医生在双盲条件下进行结果判定 每张片子在 倍镜头下随机选取 个视野 依照细胞染色密度和染色强度判定结果 细胞无染色算 分 染色 算 分 染色在 范围内算 分 计为 分 根据染色强度计分 无染色细胞 淡黄色 棕黄色 棕褐色依次计 分 和 之和用来判断结果 分者为阳性 分者为阴性 - 统计学方法 使用 ) )) 对数据进行分析 两因子不同组间差异用 检验 相关性用 $ 6 7 " 列联系数描述 生存曲线采用 <2 "$0$6 法绘制 6 " 检验做两组间的差异性检验 对可能影响生存时间的因素进行 多元回归分析 为差异有统计学意义 结 果. 和 在直肠癌及癌旁组织中的表达情况 免疫组化显示在直肠癌组织中 %&' 阳性主要定位于细胞核 部分定位于胞质中 在癌和癌旁组织中阳性表达率分别为 组间比较差异具有统计学意义 ( ( 阳性主要表达于胞质 少数细胞膜有着色 在对照组癌旁组织中的阳性表达为 低于癌组织中的阳性表达 差异具有统计学意义 ( 图 图 和 在直肠癌和癌旁组织中的表达 ;0' 6$770 "7 :%&' " 0"6$!2! "!$6 077#$7 "!$"077#$7= +%&' 在直肠癌组织中阳性表达 %&' 在癌旁组织中阴性表达 在直肠癌组织中阳性表达 8 在癌旁组织中阴性表达!" # $ #!"

3 西安交通大学学报 医学版 第 卷. 直肠癌中 的表达与临床病理特征的关系 %&' 的表达与年龄 性别 组织分化程度及肿瘤大小 %. 分期无相关性 %&' 在无淋巴结转移和有淋巴结转移的直肠癌组织中的阳性率分别为 ( 表 和 在直肠腺癌的表达与临床病理特征的关系!" # $ #!" ( 差异具有统计学意义 的表达与年龄 性别 组织分化程度 肿瘤大小无相关性 但 与病理分期 ( ( 及有无淋巴结转移 (( 相关 差异存在统计学意义 表 % ' 6$770 "7 :%&' " 0"6$!2$"! 6!0" 9"$066$20 "700!20"0! 20! 2:$#6$7 变量 性别 %&' 阳性 阳性 男 女 年龄 %. 分期. 分期... 肿物大小 分化程度 中 高 低.- 直肠癌中 和 表达的相关性 在 例直肠癌组织中 %&' 和 共同阳性表达例数为 例 共阴性表达为 例 经 检验的列联系数分析 两者之间的表达呈正相关 ( 表 表 在直肠癌组织中表达的相关性 % 66$20 " $$$" $ 6$770 "7 : %&' " 0"6$!2! "!$6 077#$7 %&' 的表达 的表达 阳性 阴性 阳性 总计 阴性 总计./ 直肠癌组织中 的表达对 ) 的影响 本研究随访时间截止到 年 月 随访资料完整的有 例 例失访 随访率 < 2 "$0$6 法分析结果表明 %&' 阳性表达组总生存期 ) 为 > 月 阴性组为 > 月 差异具有统计学意义 ( ( 图 + 阳性表达组 ) 为 > 月 阴性组为 > 月 差异具有统计学意义 (( 图.0 直肠癌患者的 多元回归分析 应用 多元回归分析对性别 年龄 病理分期 淋巴结有无转移 肿物大小 分化程度 %&' 和 的表达进行分析 结果表明病理分期 ( 淋巴结有无转移 ( 肿物大小 ( 及 %&' 的表达 ( 对预后有影响 表 表 - 多元回归分析检验结果 % %$7 6$7#2 7 : 9# $6$ 6$770 " " 2707 多元回归分析变量 置信区间性别 女性 男性 年龄 %. 分期. 分期... 肿物大小 分化程度 中 高 低 %&' 阳性 阴性 阳性 阴性

4 期 张 蕊 崔慧霞 杨 旭 等 %&' 和 在直肠癌组织中的表达及其与预后的关系 表达与年龄 性别 肿瘤大小 病理分期 组织分化程度等因素无明显差异 这可能与本研究样本例数较少有关 但是 %&' 的表达与淋巴结转移具有相关性 表明其参与直肠癌的淋巴结转移过程 或者说 %&' 促进直肠癌的发生发展中 以促进直肠癌的淋巴结转移为主 进一步对患者随访结果应用 < 生存分析 结果显示 %&' 阴性表达者较阳性表达者有更长的生存期 差异具有统计学意义 %&' 在非小细胞肺癌和肝癌中表达与不良 预后相关 结论与我们在直肠癌患者的预后分析一致 另一方面 流行病学研究表明 非甾体类抗炎药.)+ 87 的使用与胃肠道肿瘤风险降低有关 提示 炎症在癌症的发展中起着重要作用.)+ 87 的作用靶点是 和 二者可催化前列腺素的生物合成 遗传研究表明 及其下游产物 /' " 0"' 在胃肠道肿瘤的发生中 发挥关键作用 有研究显示 在大肠癌的进展过程中 常伴随着 基因的过表达 的表 图 表达阳性和阴性患者的 ) 曲线 ;0 5$6 27#6505 2!#65$7 : 0$" $ " "$ 05$%&' " $ 6$770 "7 +%&' 表达阳性和阴性患者的 ) 曲线 表达阳性和阴性患者的 ) 曲线 - 讨 论 %&' 与其可溶性形式 7%&' 不仅在各种种类的急 慢性炎症性疾病中有重要的诊断价值 而且 %&' 在肿瘤相关巨噬细胞中高表达 可增加肿瘤的侵袭性和复发 是患者预后的独立预测因 子 在肠道黏膜固有层中巨噬细胞表面的 %&' 只有极少量的表达 以适应抗原丰富的肠黏膜微环境 8 患者肠道中巨噬细胞上 %&' 的表达升高 且随着疾病严重程度及活动性的增加而 升高 本实验通过免疫组化的方法首次表明 %&' 在直肠癌组织中有表达 且阳性表达率高于癌旁组织 %&' 在正常肠道中罕有表达 但在 8 和直肠癌组织中却表达增高 因此 我们推测 %&' 在直肠癌的发 生中可能起着重要作用 同时 在,- 1 等应用葡聚糖硫酸钠盐 8)) 介导的结直肠炎及炎症相关结肠癌动物模型的研究表明 %&' 可促进炎症及结肠癌的发生 这也进一步佐证了 %&' 与肠癌发生 发展的相关性 另外 本研究发现 %&' 在直肠癌中的阳性 达与复发率高和预后差相关 )-.+/+ 等报告 在结直肠癌组织中 的阳性表达率为 且 的表达与预后不良相关 在结直肠癌中 可协同 960 9$2 6$0" 7$?'/;5 7!#2 6$" $ :!6 对肿瘤的恶性生物学行为起促进作用?'/; 及 与结直肠癌淋巴结转移密切相 关 本研究中 在直肠癌中的表达显著高于癌旁组织 且其表达与淋巴结转移 %. 分期相关 说明 在直肠癌的发展及淋巴结转移过程中起到重要作用 且生存分析结果表示有 表达者总生存期缩短 与预后不良相关 在对非小细胞肺癌的研究中表明 抑制 导致巨噬细胞 %&' 表达衰减 在肿瘤微环境中 %&' 的表达是依赖于 信号通路 抑制 表达使 %&' 在肿瘤相关巨噬细胞的表达衰减 提示 %&' 可能是肿瘤免疫调节作用的新 靶点 另一方面 %&' 可通过 8+ 信号通路 % 2 样受体 % 2 20 $6$!$ 6% 信号通路 诱导.;"#!2$ 6:!6 激活 而.; 和 在结直肠癌中的表达呈正相关性 且.; 持续激活还可能导致下游的 的过 表达 我们研究发现直肠癌中 %&' 的表达具有正相关性 ( 提示二者在直肠癌发生 发展中起到协同作用 在直肠癌中!" # $ #!"

5 西安交通大学学报 医学版 第 卷 的表达是否促进 %&' 的表达 需进一步研究证实 综上所述 本研究结果显示 %&' 两种炎症因子在直肠癌组织中的表达 参与了直肠癌的发展 淋巴结转移等过程 再者 在直肠癌组织中 %&' 和 的表达 协同促进直肠癌的发生 发展 但是直肠癌中两者间相互调控机制 尚需进一步的研究证实 %&' 在直肠癌中的阳性表达降低患者的生存期 是不良预后的危险因素 提示两者有望成为直肠癌的预后预测因子 参考文献 ( %)''+%$ "## ##* #"&$ )! ($'!* ' &* ## #""##." '2(" 32(&) (!" 3#$# 41+*152 & ()!- ".#& #& +( +2 *1)'') 1+ $)(!26 7 #". ## ## " # 7 &*#& $*1)'!6+ *1+' $) ()! # ## ## # " -." &*& 2+($ ' 0&)()! ##"# 6" ###&*#$# & '!0 ' 4*0 ' & ()! ""### #"# && $ +# 1+** ' *& ()! #" # " ## # ##&( * *& 3( 61 *22 ' %*1 '$&3" # ## - #"# ##& $ 2 '3*2 ' 2))*&* # #". ## ##&+#2 & 钟华 刘迪群 & 结直肠癌组织中 和 *+ 的表达及其临床意义 & 吉林大学学报 医学版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编辑 韩维栋!" # $ #!"

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