140 临床肿瘤学杂志 2011 年 2 月第 16 卷第 2 期 手术标本中 Ki 67 EGFR HER 2 和 p53 的表达情况, 分析它们与乳腺癌临床病理特征的关系, 进而探讨它们之间的相互关系 1 资料与方法 1 1 标本来源收集我院 2009 年至 2010 年资料完整的女性乳腺癌手术

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1 139 Ki 67 EGFR HER 2 和 p53 在乳腺癌中的表达及其相关性 1, 上海上海交通大学医学院附属瑞金医院肿瘤放化疗科夏红强, 何建蓉 摘要 目的分析 Ki 67 EGFR HER 2 p53 在乳腺癌组织中的表达, 并探讨其与乳腺癌临床病理特征之间的相关性 方法用免疫组化法检测 138 例乳腺癌患者病理组织中 Ki 67 EGFR HER 2 和 p53 蛋白的表达, 并结合临床病理特征进行相关性分析 结果 Ki 67 EGFR HER 2 和 p53 在乳腺癌组织中的表达率依次为 91 30% 17 39% 62 32% 和 23 19%, 不同年龄组其表达均无统计学差异 (>0 05) Ki 67 的表达与组织学分级 病理类型 肿块大小 淋巴结是否转移及分期显著相关 (<0 05);EGFR 表达与病理类型和 ER 状态显著相关 (<0 05);HER 2 表达与病理类型 组织学分级 淋巴结转移 远处转移及分期无相关性 (>0 05); 而 p53 表达与组织学分级 ER 和 R 状态呈显著相关 (<0 05) ER 和 R 呈正相关 ; EGFR HER 2 p53 与 ER 均为负相关 ;HER 2 和 R 呈负相关 ;Ki 67 与 EGFR HER 2 p53 ER 及 R 之间均无相关性 ;p53 与 EGFR 呈正相关 ;EGFR 与 HER 2 呈负相关 结论联合检测乳腺癌组织中 EGFR Ki 67 HER 2 和 p53 蛋白的表达能更清楚地了解乳腺癌的生物学行为, 对乳腺癌的诊断 指导治疗及评价预后有重要的临床意义 关键词 乳腺癌 ; Ki 67; EGFR; HER 2; p53; 雌激素受体 ; 孕激素受体中图分类号 :R737 9 文献标识码 :A 文章编号 : (2011) ExpresionofKi 67,EGFR,HER 2andp53proteininhumanbreastcancerandtheircorrelation XIAHong qiang,hejian rong.departmentofoncology,afiliatedruijinghospitaltoshanghaijiaotonguni versity,shanghai200025,china Corespondingauthor:HEJian rong,e mail:hejrong@hotmail.com Abstract Objective ToinvestigatetheexpresionofEGFR,Ki 67,HER 2andp53inbreastcancerandtheircorelation withclinicopathologicalfactors.methods ImmunohistochemistrywasusedtodetecttheexpresionofEGFR,Ki 67,HER 2andp53 in138casesofbreastcancertisuesandthecorelationwithpathologicalfactorswereanalyzed.results Thepositiveexpresionof EGFR,Ki 67,HER 2andp53was91 30%,17 39%,62 32% and23 19%,respectively.TheexpresionsofEGFR,Ki 67,HER 2 andp53werenotstatisticalycorelatedwithage(>0 05).Ki 67expresionwasstatisticalycorelatedwithgrade,pathology,tumor size,lymphnodemetastasisandstage(<0 05);EGFRexpresionwassignificantlycorelatedwithpathologyandER(<0 05); HER 2expresionwasnotsignificantlycorelatedwithpathology,grade,lymphnodemetastasisandstage(>0 05);p53expresion wassignificantlycorelatedwithgrade,erandr(<0 05).ERpositivelycorelatedwithR;EGFR,HER 2andp53negatively corelatedwither.her 2negativelycorelatedwithR.NosignificantcorelationwasfoundamongKi 67andEGFR,HER 2,p53, ER,R.p53positivelycorelatedwithEGFR,whileEGFRnegativelycorelatedwithHER 2.Conclusion ThedetectionofEGFR, Ki 67,HER 2andp53proteinexpresioninbreastcancerishelpfultoabeterunderstandingofthebiologicalbehaviorofbreastcanc erwithdiagnosis,treatmentandprognosticevaluation. KeyWords Breastcancer; Ki 67; EGFR; HER 2; p53; Eestrogenreceptor; rogesteronereceptor 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一 Ki 67 的表达被认为是细胞增殖的标志之一 ; 野生型 p53 是抑癌基因, 人类许多肿瘤的发生 发展都与 p53 基因的突变有关 ;HER 2 基因的过表达不仅与肿瘤的 发生 发展有关, 还是一个重要的临床预后指标 ; 而过度表达的 EGFR 也与肿瘤的生物学行为和预后有密切关系, 但它们在乳腺癌中的相互关系却少有探讨 因此, 我们应用免疫组织化学方法检测乳腺癌 上海交通大学医学院附属瑞金医院乳腺诊治中心 2 通讯作者,E mail:hejrong@hotmail.com

2 140 临床肿瘤学杂志 2011 年 2 月第 16 卷第 2 期 手术标本中 Ki 67 EGFR HER 2 和 p53 的表达情况, 分析它们与乳腺癌临床病理特征的关系, 进而探讨它们之间的相互关系 1 资料与方法 1 1 标本来源收集我院 2009 年至 2010 年资料完整的女性乳腺癌手术标本 138 例, 年龄 28~79 岁, 平均年龄为 46 岁 组织学类型 : 浸润性导管癌 122 例, 其他 16 例 ( 包括浸润性小叶癌 4 例 导管内癌 4 例 乳头状腺癌 6 例 髓样癌 2 例 ) 组织学分级 :Ⅰ 级 8 例,Ⅱ 级 46 例,Ⅲ 级 84 例 TNM 分期 : Ⅰ 期 4 例,Ⅱ 期 98 例,Ⅲ 期 29 例,Ⅳ 期 7 例 患者术前均未接受过化 放疗等治疗 1 2 试剂鼠抗人 Ki 67 抗原单克隆抗体 抗 p53 单克隆抗体 鼠抗人 EGFR 单克隆抗体,ER R HER 2 等抗体均购自 Dako 公司 1 3 方法所有标本均在同一条件下采用免疫组化 S 法进行染色, 均设阴性和阳性对照 1 4 结果判定病理组织学分级采用 Bloom Rich ardson 系统的 Notingham 改良方案 ; 参见文献 [1] 中 ER R 阳性细胞标准以及文献 [2] 中 HER 2 阳性标准 ;Ki 67 p53 及 EGFR 参考文献 [3] 来判定 1 5 统计学分析采用 SSS13 0 版软件进行 χ 2 检验和相关性分析 以 <0 05 为差异有统计学意义 2 结果 2 1 Ki 67 EGFR HER 2 p53 在乳腺癌组织中的表达乳腺癌组织中 Ki 67 EGFR HER 2 和 p53 表达率分别为 91 30% 17 39% 62 32% 和 23 19%; ER R 表达率分别为 65 22% 和 40 58% 不同年龄组其表达差异均无统计学意义 (>0 05) Ki 67 的表达率最高, 与组织学分级 病理类型 肿块大小 淋巴结是否转移及分期显著相关 (<0 05), 与有无远处转移 ER 和 R 无关 (>0 05);EGFR 表达率最低, 在不同病理类型和 ER 状态差异有统计学意义 (<0 05), 与不同组织学分级 肿块大小 淋巴结及远处转移 R 和分期无关 (>0 05); HER 2 表达在不同病理类型 组织学分级 淋巴结转移及远处转移 分期等差异均无统计学意义 (> 0 05); 而 p53 表达在不同组织学分级 ER 和 R 状态差异有统计学意义 (<0 05), 但与肿块大小 淋巴结及远处转移 分期无关 (>0 05) 见表 1 图 1 图 1 Ki 67 HER 2 p53 和 EGFR 在乳腺癌组织中的阳性表达 (S 100) 2 2 Ki 67 EGFR HER 2 p53 ER R 之间的相关性对上述指标行 Spearman 相关性分析发现,ER 和 R 呈正相关 (r=0 604,=0 000); 除 Ki 67 外, EGFR HER 2 p53 与 ER 均呈负相关,r 依次为 和 0 311, 均为 0 000; 此外, HER 2 与 R 呈负相关 (r=0 243,=0 004); Ki 67 与 EGFR HER 2 p53 ER R 之间均无相关性 (>0 05);p53 与 EGFR 呈正相关 (r=0 256, =0 002);EGFR 表达与 HER 2 呈负相关 (r= 0 186,=0 029) 见表 2 3 讨论乳腺癌是危害妇女健康的常见恶性肿瘤 在乳腺癌的发生 发展过程中诸多因素可以影响肿瘤细胞的生物学行为 ER 和 R 的表达状况是指导乳腺癌内分泌治疗的决定性因素, 也是判断乳腺癌预后的重要因素之一 在正常乳腺上皮细胞的胞核内均含有 ER 和 R, 当细胞发生癌变时,ER 和 R 可以消失或保留, 乳腺癌中 ER 总体的阳性表达率约为 60% 本研究中 ER 阳性率为 65 22%,ER 和 R

3 141 临床病理参数 n 表 1 Ki 67 EGFR HER 2 p53 表达与临床病理特征的关系 Ki 67 EGFR HER 2 年龄 ( 岁 ) > 分级 G G G 病理类型 浸润性导管癌 其他 肿瘤直径 (cm) < ~ > N 分期 N N N N M 分期 M M ER R TNM 分期 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ p53 表 2 Ki 67 EGFR HER 2 p53 ER R 之间的相关 系数 R Ki 67 EGFR HER 2 p53 ER R Ki EGFR HER 注 : <0 05; <0 01 呈正相关, 与文献报道一致 同时我们还发现, HER 2 过度表达与 ER R 阳性表达呈负相关, 提示 ER 和 HER 2 信号转导通路上存在某些关联, ER 在雌激素作用下可抑制 HER 2 表达, 当 ER 表达降低时,HER 2 表达增强 [4],HER 2 过度表达可阻止内分泌治疗的反应 [5] 本研究发现,p53 与 ER 负相关 (r=0 311, =0 000) Shirley [6] 报道用阿霉素或电离辐射 MCF 7 细胞诱发 p53 表达改变后,ER 的表达也改

4 142 临床肿瘤学杂志 2011 年 2 月第 16 卷第 2 期 变, 表明 p53 可以对 ER 进行调节 反之,ER 可对抗 p53 介导的细胞凋亡 [7 8] [9] Mao 等亦证实 p53 和 ER 呈负相关 p53 能正向激活 EGFR 的表达而促进细胞增殖 [10] ; 可增加 ER 和 EGFR/HER 2 旁路途径, 抵抗 4 羟基三苯氧胺 (OHT) 细胞毒作用, 影响内分泌治疗 [11] ; 且有助于靶向药物西妥昔单抗对 EGFR 受体下游信号通路的抑制 [12] 这也解释了本研究另一结果, 即 p53 表达与 EGFR 呈明显正相 [13] 关 (r=0 256,=0 002), 与 Theodoropoulos 等在结直肠癌中的研究一致 此外, 我们还观察到 EGFR 和 ER 呈负相关 (r =0 303,=0 000), 以及 p53 和 EGFR 呈正相 [14] 关,(r=0 256,=0 002) Tzaida 等研究认为 EGFR 与 ER 负相关,EGFR 阳性者多见于分化差 HER 2 和 p53 阳性的乳腺癌, 并提示预后不良, 说明 EGFR ER 和 HER 2 之间存在密切联系 本研究中 EGFR 表达与 HER 2 呈负相关 (r= 0 186,=0 029) HER 2 至今未发现特异性配体, 但可与 EFGR 受体形成异源二聚体, 使 EGFR 过度表达 [15], 预示 EGFR 与 HER 2 之间有一定联系 ZD1839 为一种特异性 EGFR 酪氨酸激酶抑制剂, 可使 EGFR 异源二聚体失活, 阻止 HER 2 过表达的信号传导 [16] 其他 ErbB 家族的同源或异源二聚体在相应配体存在的情况下都能启动 I3K 或 MAK 信号通路, 所以赫赛汀对 HER 2 过表达乳腺癌细胞的生长抑制作用在很大程度上受到其他 ErbB 家族成员是否共表达以及是否存在其配体等因素的影响, 单独 HER 2 过表达一项指标并不能预测赫赛汀的敏感性 EGFR/HER 2 酪氨酸激酶双重抑制剂 Lapatinib( 拉帕替尼 ) 能抑制赫赛汀耐药株的增殖 [17] 新一代 HER 2 单抗 ertuzumab( 帕妥珠单抗 ) 能通过位阻作用阻断 EGFR/HER 2 和 HER 2/ HER 3 的异源二聚化及其启动的下游信号通路 以上均表明 EGFR 和 HER 2 之间具有复杂密切的关系 [18] Ki 67 抗原为细胞核内分裂增殖相关蛋白, 在细胞周期 S G 1 G 2 M 期均有表达,G 0 期缺如, 常作为肿瘤细胞增殖活性的可靠标记 [19] 本研究发现 Ki 67 与 EGFR HER 2 p53 ER R 之间均无相关性 (>0 05) 但多数学者认为 Ki 67 与 p53 表达呈正相关,Ki 67 阳性表达者预后不良 [20 21] 这一结论与我们的结果并不完全一致, 考虑主要与研究样本大小及样本构成不同有关, 这一点仍需扩大样 本量进一步验证 恶性肿瘤是一个多因素 多步骤作用的结果, 其发生要经过一系列基因表达变化的共同作用 Ki 67 EGFR HER 2 和 p53 都是目前临床上比较常用的重要肿瘤指标 我们的研究表明,4 个指标相互之间可能存在复杂而密切的联系, 探究其表达及相互关系可更清楚地了解乳腺癌的发生 发展及生物学行为, 对诊断 治疗及预后预测有重要的临床意义, 同时可以为靶向药物的个体化治疗提供参考和疗效预测 [22] 参考文献 [1] HarveyJM,ClarkGM,OsborneCK,etal.Estrogenreceptor statusbyimmunohistochemistryissuperiortotheligand binding asayforpredictingresponsetoadjuvantendocrinetherapyin breastcancer[j].jclinoncol,1999,17(5): [2] 乳腺癌 HER2 检测指南 编写组. 乳腺癌 HER2 检测指南 [J]. 中华病理学杂志,2006,35(10): [3] 许良中, 杨文涛. 免疫组织化学反应结果的判断标准 [J]. 中国癌症杂志,1996,6: [4] HuseinMR,Abd ElwahedSR,AbdulwahedAR.Alterationsof estrogenreceptors,progesteronereceptorsandc erbb2oncogene proteinexpresioninductalcarcinomasofthebreast[j].cel BiolInt,2008,32(6): [5] TancherS,RudasM,MaderRM,etal.DoweneedHER2/neu testingforalpatientswithprimarybreastcarcinoma[j].canc er,2003,98(12): [6] ShirleySH,RundhaugJE,TianJ,etal.Transcriptionalregula tionofestrogenreceptor alphabyp53inhumanbreastcancer cels[j].cancerres,2009,69: [7] Fern ndez CuestaL,AnagantiS,Hainaut,etal.Estrogenlev elsactasarheostatonp53levelsandmodulatep53 dependent responsesinbreastcancercellines[j].breastcancerres Treat,2010[ ].htp:// pubmed/ [8] SayeedA,KonduriSD,LiuW,etal.Estrogenreceptoralpha inhibitsp53 mediatedtranscriptionalrepresion:implicationsfor theregulationofapoptosis[j].cancerres,2007,67: [9] MaoXY,FanCF,ZhengHC,etal.p53nuclearaccumulation anderalphaexpresioninductalhyperplasiaofbreastinaco hortof215chinesewomen[j].jexpclincancerres,2010, 29:112. [10] NorbergT,KlaarS,KarfG,etal.Increasedp53mutationfrequen cyduringtumorprogpresion,resultsfromabreastcancercohort [J].CancerRos,2001,61(22): [11] Fernandez CuestaL,AnagantiS,Hainaut,etal.p53statusin fluencesresponsetotamoxifenbutnottofulvestrantinbreast cancercellines[j].intjcancer,2010[ ].htp://

5 143 [12] BoualiS,ChrétienAS,RamacciC,etal.p53andTENex presioncontributetotheinhibitionofegfrdownstream signa lingpathwaybycetuximab[j].cancergenether,2009,16 (6): [13] TheodoropoulosGE,KarafokaE,apailiouJG,etal.p53and EGFRexpresionincolorectalcancer:areappraisalof old tis suemarkersinpatientswithlongfolow up[j].anticancerres, 2009,29(2): [14] TzaidaO,GogasH,DafniU,etal.Evaluationoftheprognostic andpredictivevalueofher 1/EGFR inbreastcancerpatients participatinginarandomizedstudywithdose densesequential adjuvantchemotherapy[j]. Oncology,2007,72(5 6): [15] ZhangY,OpreskoL,ShankaranH,etal.HER/ErbBreceptor interactionsandsignalingpaternsinhumanmammaryepithelial cels[j].bmccelbiol,2009,10:7880. [16] AnidoJ,Matar,AlbanelJ,etal.ZD1839,aspecificepider malgrowthfactorreceptor(egfr)tyrosinekinaseinhibitor,in ducestheformationofinactiveegfr/her2andegfr/her3 heterodimersandpreventsheregulinsignalinginher2 overex presingbreastcancercels[j].clincancerres,2003,9(4): [17] KonecnyGE,egramMD,VenkatesanN,etal.Activityofthe dualkinaseinhibitorlapatinib(gw572016) againsther 2 overexpresingandtrastuzumab treatedbreastcancercels[j]. CancerRes,2006,66(3): [18] AgusDB,AkitaRW,FoxWD,etal.Targetingligand activated ErbB2signalinginhibitsbreastandprostatetumorgrowth[J]. CancerCel,2002,2(2): [19] UruticoecheaA,SmithIE,DowsetM.roliferationmarkerKi 67inearlybreastcancer[J].JClinOncol,2005,23(28): [20] HanprasertpongJ,TungsinmunkongK,ChichareonS,etal. Corelationofp53andKi 67(MIB 1)expresionswithclinico pathologicalfeaturesandprognosisofearlystagecervicalsqua mouscelcarcinomas[j].jobstetgynaecolres,2010,36(3): [21] LiBJ,ZhuZH,WangJY,etal.ExpresioncorelationofKi 67 top53,vegf,andc erbb 2genesinbreastcancerandtheir clinicalsignificances[j]. AiZheng,2004,23(10): [22] MoriyaT,KanomataN,KozukaY,etal.Molecularmorphologi calapproachtothepathologicalstudyofdevelopmentandad vancementofhumanbreastcancer[j].medmolmorphol,2010, 43(2):6773. 收稿日期 : ; 修回日期 :

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