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1 * 仅用于实验室, 不用于诊断和治疗 请随时跟我们索取并使用最新版本的说明书 RENEW- 剥离缓冲液 ( 蛋白印迹膜再生液 ) 独创的 RENEW 用于免疫印迹的蛋白膜再生液, 也叫剥离缓冲液 可直接取代市场上同类品牌的产品! 效果 更优! 目录号 : K-SBS (50ml) - 推广型号 K-SBS (250ml)- 精品主推 K-SBS (500ml)- 畅销型号 操作手册请以试剂盒中配套的英文手册为准! 在您收到定购的产品时, 请确认操作手册是配套的! 注意 : 以英文原版说明书为准, 本中文说明书仅作参考 有翻译不妥的地方还请各位老师批评指正! 反馈信箱 :tech@aderr.com 2016 年 09 月, 第 1 版, 对应英文第 1 版 艾德科技 ( 北京 ) 有限公司 A&D Technology Corporation -1-

2 目录表 一. 公司简介 二. 产品简介 三. 优势特点 四. 保存方式 / 有效日期 五. 推荐化学发光液选型指南 六. 重要提示 七. 组件和另外所需材料 八. 剥离操作步骤 九. 故障排除 十. 定购信息 十一. 推荐产品 十二. 推荐阅读

3 一. 公司简介 Cyanagen 是意大利顶尖的生物公司, 因其高水平的跨学科知识, 专门研发荧光标记物 和化学发光底物产品系列, 基因组学, 蛋白质学和化学传感器等等产品 目前, 超过 100 多种随时准备使用的不同荧光标记产品可供选择, 并且也可以与 60 多 种交联剂和生物素化试剂相结合,Cyanagen 公司可以大大的拓展您在实验中的可能性 Cyanagen 公司拥有完善的质量管理体系 ISO9001 的认证 产品您可以放心使用 二. 产品简介 剥离缓冲液是一种随时准备使用的容许一抗和二抗快速的从消化纤维膜和 PVDF 膜剥离 因此, 可以使用不同的抗体对于免疫印迹从新探针标记 剥离缓冲液与所有的化学发光底物是兼容的 当然, 如果采用我们配套的 WESTAR 系列化学发光液, 效果更为理想 剥离和从新标记 --- 剥离缓冲液 : -3-

4 剥离和从新标记 --- 比较 : 艾德科技 ( 北京 ) 有限公司一站式采购 实验室好伙伴 三. 优势特点 1. 高效的 : 在短时间内针对大多数抗体进行剥离时是非常稳健的方法 ; 2. 温和的 : 在印迹过程中不会损害目标蛋白 ; 3. 节约时间 : 无需再次跑胶和印迹 ; 4. 节约样本 : 使用同样的靶蛋白可以从新探针标记膜 ; 5. 安全无毒 : 无毒且无味 实验过程安全 四. 保存方式 / 有效日期 4 C 或室温保存, 至少 2 年 五. 推荐化学发光液选型指南 : WESTAR Supernova EtaC Ultra 2.0 EtaC 2.0 Nova 2.0 ECL-SUN 信号强度 超强 非常强 较强 强 标准 信号时间 较短 较好 适中 较长 超长 定量蛋白 超级低丰度 非常低丰度 中等丰度 高丰度 超高丰度 -4-

5 六. 重要提示 :. 印迹可以 4 C 储存在 PBS 或 TBS 中直至剥离步骤开始执行 不要以干的形式储存印迹 在剥离前后对于靶蛋白进行量化比较是不推荐的, 因为, 该程序会移走小份固化的蛋白 同样的原因, 剥离的膜也不应该演示缺失蛋白的标记 当几个抗原被连续的检测到, 我们推荐使用预期弱的信号开始的抗原 七. 组件和另外所需的材料 K-SBS (Solution 50 ml) enough stripping for: 2 small format blots (8.6 x 6.7 x 0.1 cm) K-SBS (Solution 250 ml) enough stripping for: 10 small format blots (8.6 x 6.7 x 0.1 cm) 5 medium format blots (13.3 x 8.7 x 0.1 cm) 1 large format blots (16 x 20 x 0.1 cm) K-SBS (Solution 2x250 ml) enough stripping for: 20 small format blots (8.6 x 6.7 x 0.1 cm) 10 medium format blots (13.3 x 8.7 x 0.1 cm) 5 large format blots (16 x 20 x 0.1 cm) 蛋白质印迹, 预先阻断, 探针和使用化学发光底物检测的试剂 ; 洗涤液例如 :Tris-buffered saline(tbs) 或 phosphate-buffered saline(pbs) 用 0.05% Tween 20; 封闭液 ; 对于一抗和二抗蛋白印迹实验的初级和二级的抗体 ; 在剥离过程印迹的孵育准备塑料盘, 洗涤和封闭液 ; 检测化学发光信号的成像设备和仪器 -5-

6 八. 剥离操作步骤 1. 在室温下加热剥离缓冲液的瓶子 2. 使用镊子拿去适当的剥离缓冲液加载到塑料瓶子中, 将印迹完全浸润在剥离缓冲液中 温 和的混匀室温孵育 20 分钟 3. 从剥离缓冲液上移走印迹并且使用 TBS 或 PBS Tween TM 20 清洗 5 分钟 4. 免疫检测试剂按照如下来检测脱去的效果 : 检测完全脱去二抗 : 使用新的化学发光工作液孵育膜并曝光 5 分钟显影 或使用恰当的成像系统成像, 使用第一检测同样的设置 如果没有检测到信号, 说明二抗已经成功的从免疫原或一抗上脱掉 检测完全脱去一抗 : 使用 HRP- 标记的二抗孵育膜, 紧接着在清洗液中清洗 在化学发光工作液孵育并曝光 5 分钟显影 或使用恰当的成像系统成像, 使用第一检测同样的设置 如果没有检测到信号, 说明一抗已经成功的从免疫原上脱掉 5. 在确定膜被恰当的剥离后, 我们可以执行二次免疫原实验 备注 : 印迹剥离和从新标记探针可以重复几次, 但是可能会需要更长的曝光时间或更为灵敏的化学发光底物 随后的从新标记探针导致信号减少 在剥离后从新封闭膜是没有必要的, 但是在某些程序中可能是必要的 九. 故障排除 图片存在的问题与对策在剥离后仍然可以检测到带 可能的原因高亲和的抗原 - 抗体限制 优化起膜时间和温度确保在不损害免疫原的情况下完全的移走抗体 十. 订购信息 货号 名称 规格 描述 K-SBS RENEW- 剥离缓冲液 50ml 2 张标准印迹 K-SBS RENEW- 剥离缓冲液 250ml 10 张标准印迹 K-SBS RENEW- 剥离缓冲液 500ml 20 张标准印迹 K-XLS WESTAR ECL Sun 免疫印迹化学发光试剂 50ml 500 cm 2 膜 K-XLS WESTAR ECL Sun 免疫印迹化学发光试剂 250ml 2,500 cm 2 膜 K-XLS WESTAR ECL Sun 免疫印迹化学发光试剂 500ml 5,000 cm 2 膜 -6-

7 K-XLS WESTAR Nova 2011 免疫印迹化学发光试剂 50ml 500 cm 2 膜 K-XLS WESTAR Nova 2011 免疫印迹化学发光试剂 250ml 2,500 cm 2 膜 K-XLS WESTAR Nova 2011 免疫印迹化学发光试剂 500ml 5,000 cm 2 膜 K-XLS WESTAR Nova 2.0 免疫印迹化学发光试剂 250ml 2,500 cm 2 膜 K-XLS WESTAR Nova 2.0 免疫印迹化学发光试剂 500ml 5,000 cm 2 膜 K-XLS WESTAR ETAC 免疫印迹化学发光试剂 50ml 500 cm 2 膜 K-XLS WESTAR ETAC 免疫印迹化学发光试剂 250ml 2,500 cm 2 膜 K-XLS WESTAR ETAC 免疫印迹化学发光试剂 500ml 5,000 cm 2 膜 K-XLS WESTAR ETAC 2.0 免疫印迹化学发光试剂 250ml 2,500 cm 2 膜 K-XLS WESTAR ETAC 2.0 免疫印迹化学发光试剂 500ml 5,000 cm 2 膜 K-XLS WESTAR ETAC Ultra 免疫印迹化学发光试剂 20ml 200 cm 2 膜 K-XLS WESTAR ETAC Ultra 免疫印迹化学发光试剂 100ml 1,000 cm 2 膜 K-XLS WESTAR ETAC Ultra 免疫印迹化学发光试剂 200ml 2,000 cm 2 膜 K-XLS WESTAR ETAC Ultra2.0 免疫印迹化学发光试剂 100ml 1,000 cm 2 膜 K-XLS WESTAR ETAC Ultra2.0 免疫印迹化学发光试剂 200ml 2,000 cm 2 膜 K-XLS WESTAR Supernova 免疫印迹化学发光试剂 20ml 200 cm 2 膜 K-XLS WESTAR Supernova 免疫印迹化学发光试剂 100ml 1,000 cm 2 膜 K-XLS WESTAR Supernova 免疫印迹化学发光试剂 200ml 2,000 cm 2 膜 K-NAGS 绿染料 -Green Stain 10000X 1ml 低背景绿荧光 K-SBS 剥离缓冲液 -Renew 250ml 无味无损抗体 K-PRTD 红宝石染料 -RuBy Gel Stain 250ml 荧光蛋白胶染 十一. 推荐产品 DNA 样本的制备 : 货号 品名 D-P EpiQuik Nuclear Extraction Kit A-D1801 全血基因组 DNA 极速提取试剂盒 ( 离心柱 ) A-D1901 细胞 / 组织基因组 DNA 提取试剂盒 ( 离心柱 ) A-D3111 新型极速植物基因组 DNA 提取试剂盒 ( 离心柱 ) A-D7111 石蜡包埋组织基因组 DNA 提取试剂盒 ( 离心柱 ) DNA 甲基化修饰试剂盒 : 货号 品名 A-P-1026 DNA 甲基化极速修饰试剂盒 ( 二步法 ) A-P-1016 A&Direct DNA 甲基化直接修饰试剂盒 ( 一步法 ) DNA 甲基化定量检测试剂盒 : 货号 品名 A-P-1025 DNA 甲基化阳性套装 A-P-1034 DNA 甲基化定量检测试剂盒 ( 比色法 ) A-P-1035 DNA 甲基化定量检测试剂盒 ( 荧光法 ) A-P-1036 DNA 甲基化化定量检测试剂盒 ( 比色法 ) A-P-1037 DNA 甲基化化定量检测试剂盒 ( 荧光法 ) -7-

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10 艾德科技 ( 北京 ) 有限公司 A&D Technology Corporation 地址 : 北京昌平区中关村生命科学园东 60 米艾德园 (102206) 电话 : 传真 : 网址 : tech@aderr.com -10-

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