目 录 1. 简介... (2) 2. 实验条件与设备... (2) 2.1 实验室要求... (2) 2.2 仪器设备... (2) 2.3 常用工具与耗材... (2) 3. 实验动物... (3) 4. 实验试剂及配置... (3) 4.1 实验试剂... (3) 4.2 试剂配制... (3
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- 抱兑 訾
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1 膜片钳技术系列手册 (6) 大鼠海马神经元原代培养方法 刘卫吴丽颖刘振伟编写 (2015 年 5 月 31 日 )
2 目 录 1. 简介... (2) 2. 实验条件与设备... (2) 2.1 实验室要求... (2) 2.2 仪器设备... (2) 2.3 常用工具与耗材... (2) 3. 实验动物... (3) 4. 实验试剂及配置... (3) 4.1 实验试剂... (3) 4.2 试剂配制... (3) 5. 实验操作... (4) 5.1 准备工作... (4) 5.2 剥离组织... (4) 5.3 消化和分散... (5) 5.4 细胞计数... (5) 5.5 存活率检测... (5) 5.6 细胞接种... (5) 5.7 更换培养液... (6) 6. 神经元形态观察... (6) 7. 免疫组化染色观察... (7) 8. 无血清培养... (7) 9. 注意事项... (8) 10. 膜片钳实验... (8) - 1 -
3 1. 简介 神经元培养是二十世纪七十年代发展起来的一种组织培养技术 最早培养的是外周交感节神经元, 后来中枢神经元的培养也获得成功 1977 年,Banker GA 和 Cowan WM(Rat hippocampal neurons in dispersed cell culture. Brain Res. 1977, 126: ) 首次报道了胚胎大鼠海马神经元的分散培养, 为研究 单个神经元的生理功能和药物作用的细胞分子机制提供了良好的标本 至今, 该技术已经成为众多生物 实验室的常规技术 神经元培养技术的基本原理是, 应用蛋白酶对需要培养的脑组织区域进行消化分散, 获得单一细胞悬液, 在培养皿 / 瓶中进行接种培养 在这种体外培养过程中, 神经元可从分散造成的损伤中完全恢复, 并生长发育为具有相对较完整形态结构和生理功能的神经元个体, 同时神经元间还会形成交织成网状的 突触联系 培养神经元作为良好的实验标本在生理学 神经生物学 分子生物学和药理学等学科中应用十分广 泛, 在共聚焦显微技术 免疫化学和电生理技术中经常被使用 不仅可直接观察活细胞自然的形态和功能发育, 而且还可比较药物作用前后的变化 药物对神经元的影响还排除了血液 代谢产物和激素等各 种因素的干扰 与急性分散的神经元标本相比, 机械损伤对其造成的影响很小, 其形态非常完整, 突起较多, 细胞 基本上处于比较自然的生长发育状态 然而, 尽管其生存于模拟体内的特殊环境与条件下, 与在体神经 元的环境相比仍存在很大差异, 所以在对实验结果的分析上, 不能简单地将其移植到在体的情况 海马属大脑边缘系统, 与情绪 学习记忆有关, 它具有明显的产生突触传递长时程增强 (LTP) 和长 时程抑制 (LTD) 的能力 LTP 和 LTD 目前被认为是学习记忆的基础 海马又是常引起癫痫发作的病变部 位, 并且海马细胞对缺氧 缺血特别敏感 因此, 海马成为研究脑功能与脑疾病的良好标本 海马主要的细胞类型是锥体神经元, 占海马全部神经元的 90% 左右 海马神经元培养获得的海马神 经元也多为锥体神经元, 虽然也含有少量中间神经元和其它类型神经元 本文介绍的是大鼠海马神经元常用的培养方法, 大家在使用时应该掌握一般的普适原则, 因实验条 件不同要学会变通 此外, 本方法也可为培养其它神经元提供参考 2. 实验条件与设备 2.1 实验室要求细胞培养是一种无菌操作技术, 要求工作环境和条件必须保证无微生物污染, 因此要求有独立无菌 的细胞培养间 细胞培养间内要配备常用设备, 如紫外灯 倒置显微镜等 细胞培养间一般包括更衣间 ( 更换工作服 拖鞋 ) 缓冲间 ( 放置冰箱 无菌器械及物品 ) 与洁净室 ( 操作间, 放置超净工作台 培 养箱 离心机 倒置显微镜等 ) 培养间内最好有空气过滤 层流装置 2.2 仪器设备必需的设备 :CO 2 培养箱 CO 2 气瓶 超净工作台 解剖显微镜 倒置显微镜 低速台式离心机 (1,000-1,500 rpm) 分析天平 (0.1 mg) ph 计 纯水机 冰箱 高压消毒锅 恒温水浴锅 恒温振荡 器 电烤箱 酸缸 选配的设备 : 渗透压仪 倒置荧光显微镜 数码相机 图像采集卡 酶标仪等 2.3 常用工具与耗材培养皿 (35 mm) 200 目筛网 滤器及微孔滤膜 (0.2 μm) 各种规格移液枪 酒精灯 血球计数器 常用手术器械 ( 眼科镊 显微手术镊 手术剪等 ) 常用玻璃器皿 ( 试管 离心管 吸管 滴管等 ) 各种培养液储存器 - 2 -
4 3. 实验动物 新生 Wistar/SD 大鼠, 当天出生 (24h 内 ), 要由有资质的实验动物中心提供 还可采用胎鼠 鼠龄偏大的大鼠, 培养的神经元不易存活 4. 实验试剂及配置 4.1 实验试剂 表 1 神经元培养用试剂 名称 英文 生产厂家 备注 DMEM 培养基 Dulbecco s Modified Eagle Medium Gibcol/Sigma 高糖型 胎牛血清 fetal bovine serum Gibcol/Hyclone/ 国产 马血清 equine serum Gibcol/ Hyclone/ 国产 N-2 添加剂 N-2 supplement Gibcol B-27 添加剂 B-27 supplements Gibcol 胰蛋白酶 Trypsin Gibcol/ 国产 L- 多聚赖氨酸 poly-l-lysine Sigma 分子量 : kda 阿糖胞苷 cytosine arabinofuranoside (Ara-C) Sigma 谷氨酰胺 L-glutamine Sigma 青霉素 Penicillin 国产 ( 如华北制药 ) 80 万单位 / 支 链霉素 Streptomycin 国产 ( 如华北制药 ) 100 万单位 / 支 注 :(1) 无机盐 葡萄糖等采用国产的即可, 但要求为分析纯 (2) 所用蒸馏水至少为双蒸水 如果采用纯水机, 可直接使用纯水 4.2 试剂配制 (1) 磷酸缓冲液 (PBS 液 ) 为配置其它试剂的平衡液 取 KH 2 PO g,na 2 HPO 4 12H 2 O 1.7 g,kcl 0.1 g,nacl 4.0 g, 用双蒸 水溶解并加至 500 ml, 调 ph 值为 7.2 用 0.2 μm 的微孔滤膜过滤,4 C 保存备用 (2) 胰蛋白酶储备液水解神经元间结构蛋白的连接, 从而分离细胞 将 0.5 g 胰蛋白酶溶于 100 ml 磷酸缓冲液中, 配成 浓度为 0.5% 的胰蛋白酶储备液, 分装后冻存备用 分散神经元时, 还经常用到木瓜蛋白酶 (Papain) 和胶原蛋白酶 (Collagenase) 木瓜蛋白酶能水解 半胱氨酸的巯基, 常用浓度为 20 单位 /ml 胶原蛋白酶常用于消化纤维组织 上皮组织和肿瘤细胞, 在 神经系统多用于分散神经节 常用浓度为 mg/ml (3) 培养基质目前常用的培养基质 ( 又称底物 ) 有胶原 ( 如鼠尾胶 小牛皮胶 ) 多聚赖氨酸 / 多聚鸟氨酸 细胞 黏附因子 单层非神经元细胞 ( 如星形胶质细胞 ) 等 培养基质有利于神经细胞贴壁生长, 同时有些基 质对神经细胞有支持 营养作用 多聚赖氨酸的制备 : 取 L- 多聚赖氨酸 25 mg, 用双蒸水溶解并稀释至 330 ml, 终浓度为 mg/ml, 用 0.2 μm 的微孔滤膜过滤,4 C 保存备用 鼠尾胶的制备 : 取两根大鼠尾, 在无水乙醇中固定 15 min 后抽取胶原纤维, 剪碎, 用 75% 乙醇 浸泡 30 min, 用双蒸水冲洗 3 次 将剪碎的胶原纤维放入 250 ml 经高压消毒的 0.1% 乙酸溶液中, 4 C 保存, 不时摇晃 7 d 后取上清液, 分装,4 C 保存备用 - 3 -
5 小牛皮胶 : 购自国外 (4) 谷氨酰胺储备液取谷氨酰胺 g, 用磷酸缓冲液溶解并稀释至 100 ml, 浓度为 40 mmol/l, 冻存备用 (5) 青链霉素储备液用于防止细菌污染 取青霉素 80 万单位, 用 20 ml 双蒸水溶解 ; 取链霉素 100 万单位, 用 25 ml 双 蒸水溶解 2 种溶液按照 1:1 比例混匀, 分装, 冻存 (6) 解剖液分离并剪碎海马组织用液 要求是不含钙镁的平衡盐溶液, 高压蒸汽消毒 取葡萄糖 3.0 g, 蔗糖 7.5 g,nacl 8.0 g,kcl 0.4 g,na 2 HPO 4 7H 2 O 0.18 g,kh 2 PO g, 酚红 1 mg,5 ml 青链霉素储备液, 用 9.0 mmol/l HEPES 缓冲液溶解, 并加到 1,000 ml,ph 7.3, 渗透压调至 mosm 用 0.2 μm 的微孔滤膜 过滤,4 C 保存备用 (7)DMEM 培养基取高糖 DMEM 一个包装 (13.4 g), 用双蒸水溶解, 加 NaHCO g, 并加适量葡萄糖 ( 终浓度 6%), 用双蒸水稀释并加到 1,000ml, 调 ph 值为 7.3 用 0.2 μm 的微孔滤膜过滤 (8) 阿糖胞苷储备液用于抑止神经胶质细胞的生长 取 5 mg 阿糖胞苷, 用 25 ml 磷酸缓冲液溶解成浓度 0.2 mg/ml, 用 0.2 μm 的微孔滤膜过滤,4 C 保存备用 (9) 种植液 DMEM 培养基 75%, 马血清 10%, 胎牛血清 10%, 谷氨酰胺储备液 4.5%, 青链霉素储备液 0.5% 使 用前数小时配置, 并置于培养箱中备用 (10) 饲养液 DMEM 培养基 82%, 马血清 10%,N-2 1%,B-27 2%, 谷氨酰胺储备液 4.5%, 青链霉素储备液 0.5% 使用前数小时配置, 并置于培养箱中备用 N2 B27 等添加剂是神经细胞培养中常用的, 它们含有多种促进细胞生长增殖的因子 主要活性因 子有 : 胰岛素 三碘甲腺原氨酸 转铁蛋白 超氧化物歧化酶 腐胺 孕酮 亚硒酸钠 谷氨酰胺 谷 胱甘肽 维生素 E 脂肪酸等等 5. 实验操作 5.1 准备工作 细胞培养间和超净工作台消毒 准备已消毒好的器械和物品 包被培养皿 / 玻片 : 使用前 2 d, 在无菌条件下取 35 mm 塑料培养皿 ( 来自 Corning/Nunclon/ NORMAX 等 ), 每皿加多聚赖氨酸 1 ml, 放置过夜后, 吸去多余多聚赖氨酸, 自然干燥备用 如果采用玻 片, 可将玻片浸在多聚赖氨酸溶液中 5 min 取出, 室温过夜备用 包被前玻片要用 75% 乙醇溶液清洗 配置种植液和饲养液 : 使用前数小时配制, 并置于 37 C 5% CO 2 培养箱中备用 5.2 剥离组织整个操作过程均在超净工作台内进行 取出生 24 h 以内的 Wistar/SD 大鼠, 用碎冰块包埋大鼠 10 min 左右, 进行冰冻麻醉, 然后用 75% 乙醇浸泡一下进行消毒 在无菌条件下断头, 沿颅骨正中剪开皮肤和 颅骨, 向两边分开, 小心取出全脑, 浸入冰浴的解剖液中 在冰浴的解剖液中, 首先切除小脑和脑干部分, 然后沿脑正中线将脑切为左右两个半球, 海马位于 半球的腹内侧, 需要在解剖显微镜下用镊子剥离双侧海马 完整的海马呈月牙形, 与其它脑区边界比较清晰 - 4 -
6 5.3 消化和分散用手术刀片或剪刀将海马剪切成 1-2 mm 3 的小块, 取出海马小块放入盛有 0.125% 胰蛋白酶液的试管 中, 在 37 C CO 2 培养箱中消化 期间轻晃试管 1-2 次, 以利细胞消化 消化 min 后, 用吸管将组织块移入适量种植液中终止消化,1,000 rpm 离心 1 min, 弃上清, 再 加入适量种植液, 用抛光过的适当口径 ( 尖端直径 1-2 mm) 的滴管吹打细胞, 使之均匀分散 最后用 200 目滤器过滤, 制成细胞悬液 5.4 细胞计数取 50 μl 上述细胞悬液, 稀释到 1 ml( 稀释 20 倍 ), 计数过程操作如下 : (1) 准备 1 个血球计数器 ( 图 1), 将盖玻片放在 计数器槽上 ; (2) 各取 100 μl 细胞悬液沿盖玻片边缘加入到血球计数器的四大格内, 静置 3-5 min (3) 镜下观察并计算四大格内细胞总数, 压格线的 细胞只计数左侧与上方的, 未被过滤掉的小的 细胞团块 ( 含 2 个细胞及以上 ) 按照 1 个细胞 计数或者不计数 (4) 计算细胞密度 : 因四大格中每一大格体积 = 0.1 mm 3,1 ml = 10,000 个大格 则 : 细胞密度 ( 细胞数 /ml)=( 四大格内细胞数 / 4) 稀释倍数 10,000 图 1. 血球计数器例如, 当四大格细胞数为 100 个时, 按照上述稀释倍数 ( 为 20 倍 ), 则 : 细胞密度 =(100/4) 20 10,000 /ml = /ml 注 :(1) 一般要求细胞密度为 /ml (2) 计数过程 : 计数前一定要将细胞测悬液吹均匀 ; 加入细胞悬液时, 盖片下不能有气泡, 也 不能让细胞悬液流入旁边槽中 如果出现这些情况, 要重新操作 (3) 如果固定每次新生大鼠的数量和整个操作流程, 可不用每次都计数 5.5 存活率测定 (1) 台盼蓝染色法 : 用 0.4% 台盼蓝 (trypan blue)1 滴染色 9 滴细胞悬液,3 min 后, 在倒置显微 镜下检查, 存活神经元不被染色, 胞体有明显的光泽, 死细胞胞体呈淡蓝色 在 100 倍镜下, 计数 10 个视野 / 皿 细胞存活率 (%)= 存活细胞总数 / 细胞总数 (2)MTT 比色法 :MTT( 四甲基偶氮唑蓝 ) 是一种能接受氢原子的染料, 被活细胞的线粒体琥珀酸 脱氢酶还原为水不溶性的深紫色结晶 (formazan, 甲月赞 ), 用特定溶剂可溶解这种结晶, 最后用酶标仪 在 570 nm 波长附近 ( nm) 处测定 formazan 光吸收值, 可反映活细胞的数量和代谢活力, 并由此反 映细胞的存活 生长 增殖等情况 称取 MTT 0.5 克, 溶于 100 ml 的磷酸缓冲液或无酚红的培养基中 (MTT 浓度为 5 mg/ml), 用 0.22 μm 滤膜过滤以除去溶液里的细菌, 放 4 避光保存即可 在配制和保存的过程中要注意避光 同 MTT 法类似的还有 XTT 法 MTS 法, 此处不再赘述 5.6 细胞接种根据上述细胞密度, 在细胞悬液中加入适量种植液, 按照需要将细胞按 /ml 的密度接种在多 聚赖氨酸 / 鼠尾胶 / 小牛皮胶包被的 35 mm 培养皿或培养皿中的盖玻片中, 置于 37 C 5%CO 2 培养箱中进行培养 - 5 -
7 5.7 更换培养液培养 24 h 后更换培养基, 将种植液换为饲养液 以后每周更换两次, 每次半量更换 为抑制非神经 元过度增殖, 在培养的第 4 或 5 d 向培养基中加入适量阿糖胞苷 : 每皿中加阿糖胞苷储备液 l, 终浓度为 3-5 µg/ml 6. 神经元形态观察 倒置相差显微镜下观察, 分散培养的大鼠海马神经元, 在接种 1 小时后即可有贴壁, 多数在 6-12 h 贴壁, 细胞呈单个圆形或椭圆形 2-3 d 后, 细胞明显增大, 长出数个突起并向四周延伸 6-7 d 时, 相 差显微镜下, 可见神经元具有明显的光晕, 呈三角形或多边形, 边界清晰, 胞体明亮, 胞核和核仁清晰 可见 在培养过程中神经元之间的纤维联系逐渐丰富, 并形成网络 从培养开始胶质细胞也逐渐增多,5-7 d 时胶质细胞明显增多, 胞体呈扁平多角, 核在中央或偏于一 侧 待 7-10 d, 胶质细胞会连接成片, 厚厚地一层铺在神经元下 随着培养时间的延长, 从 1 个月左右开始, 海马神经元逐渐退化 变性, 表现为神经元胞体光晕消 失, 胞体皱缩, 突起萎缩 翘起, 有的胞体内出现空泡, 直至脱落死亡, 导致神经元的数量逐渐减少 一般认为, 培养 d 时, 对神经细胞进行形态结构分析 电生理实验和生化 组化测定比较适 宜, 除非要观察不同培养时间 ( 培龄 ) 对观察指标的影响, 这时, 可以从培养 6 d 开始观察, 直到 30 d 左右为止 但多数情况下, 膜片钳实验多采用培养 d 以内的神经元, 胞体直径约 μm, 这一培养期 内的神经元离子通道 受体功能均已成熟, 突起也呈交织的网状, 有完整的突触联系形成, 在胞体上除 了能记录出各种电压门控性离子通道电流外, 还能够记录到突触自发活动和配体门控性离子通道电流, 电流钳模式下, 也能诱发出动作电位 图 2. 大鼠海马神经元培养 d 神经元胞体具有明显的光晕, 呈三角形或多边形, 突起明显, 胞核和核仁清晰可见 左右两图为采用显 微镜不同滤色片获得的细胞影像.(x 400) - 6 -
8 图 3. 大鼠海马神经元培养 3 d( 左 ) 和 30 d( 右 ) 均为用特异性烯醇化酶 (NSE) 染色.(x 400) 图 4. 大鼠海马神经元培养 12 d 神经元胞体呈三角形或多边形, 长突起, 交织成网状 ; 胞体光晕很强, 核清晰, 适合进行膜片钳实验. (x 400) 7. 免疫组化染色观察 免疫组化染色是鉴定培养细胞特征的有效方法 通过使用抗体可确定特定细胞的数目 形态特征 抗原表达水平 细胞间相互关系等 如 : 微管相关蛋白 2(MAP2) 胶原原纤维酸性蛋白(GFAP) 神经元特异性烯醇化酶 (NSE) 等染色 ( 见图 3) 8. 无血清培养 血清中含有大量的营养成分 生长因子 激素, 还具有很好的离子缓冲系统, 因此被广泛地用于各 种组织的培养, 被添加到种植液 饲养液中 常用的有马血清 小牛或胎牛血清 使用前一般需要在 56 水浴中热灭活补体 30 min 虽然血清含有各种营养而利于神经元生长, 但血清有如下缺点 : - 7 -
9 在进行神经细胞营养研究时, 由于血清成份复杂且不稳定, 妨碍对神经细胞营养要求的确切了解 ; 在进行激素和药物研究时, 激素或药物与血清成份的结合, 干扰了其对神经细胞的作用 ; 血清干扰对培养神经细胞释放产物的分析 ; 血清只能采用过滤消毒, 而过滤消毒只能除去细菌, 不能除去病毒和支原体 基于以上原因, 在对培养基成分要求严格控制时, 可采用无血清培养基 (Neurobasal Medium) 来培 养 在接种细胞时, 采用无血清培养液 (Neurobasal Medium 98%,N3 1%, 谷氨酰胺 1 %); 接种第 10 d, 在培养皿中加入阿糖胞苷抑止胶质细胞生长, 作用 48h 后更换新鲜无血清培养液 以后每周换无血清培 养液 此外, 无血清培养液也有不同配方, 如 DMEM/F12 98%+N3 1%+ 谷氨酰胺 1 % 9. 注意事项 1. 无菌操作 : 无论是配置液体还是取材 使用工具, 细胞培养的整个操作过程都要在无菌条件下进行 2. 剥离海马 :(1) 为保证神经元接种的质量和数量, 剥离海马要快速 完整, 并在低温的解剖液 中操作 ;( 2) 剥离海马时, 要尽量分离掉血管, 防止成纤维细胞的混入而影响神经元的生长 3. 选择血清 : 不同批号 / 批次的各类血清之间可能存在较大差异, 这对神经元影响很大, 要预先筛 选适合神经元生长的血清 4. 胰蛋白酶 :(1) 不同批号的胰蛋白酶的消化能力可能差距, 这对实验结果影响较大 应确定浓 度后进行预实验, 确定具体的消化时间, 一般在 min 不等 ;(2) 胰蛋白酶使用量与海马组织的多 少 / 大鼠的数量有关, 消化时间长短与胰蛋白酶浓度有关, 这要在实验中摸索 5. 消化后的吹打 : 用吸管吹打细胞时不要过重, 尽量不要起泡沫, 以免损伤神经元 6. 胶质细胞问题 : 在接种的神经细胞中混有胶质细胞, 胶质细胞可分泌神经营养物质促进神经元生长, 但由于其可增殖, 和神经元争夺培养基中的营养, 所以须在其增殖的高峰使用有丝分裂抑制剂 ( 如 阿糖胞苷 ), 作用 48 h, 抑制胶质细胞的过度生长 7. 接种细胞后 :( 1)24 h 内不要触动培养皿, 以免影响细胞贴壁 ;(2)24 内不要开启培养箱门, 以免影响培养箱内温度与 CO 2 含量 8. 神经生长因子 (NGF): 海马神经元培养液中可添加 NGF, 而在神经节细胞的培养中,NGF 是必不可少的 神经生长因子粗制剂的提取方法 : 取一只体重 25 g 左右的成年雄性昆明小鼠, 无菌条件下取 其双侧颌下腺, 用灭菌双蒸水冲洗两遍, 放入 5 ml 灭菌双蒸水中, 剪碎, 摇晃, 浸泡 20 min 后, 以 1500 rmp 的转速离心 5 min, 取上清液, 用 Hank s 平衡盐溶液稀释至 25 ml, 最后用 0.2 μm 的微孔滤膜过滤后 分装, 冻存备用 使用时, 按照 1 ml 培养液中加入 50 μl NGF 的比例添加 10. 膜片钳实验 培养的海马神经元一般从培养的第 12 d 左右使用较为合适, 此时, 神经元发育成熟 突触联系形成 膜片钳实验开始前, 要将培养液更换为通道记录液 (Recording solution) 更换时, 先将培养液倒掉, 然后倒入 1 ml 左右记录液, 轻晃清洗, 可清洗 1-2 次, 最后倒入 ml 记录液 注意 : 事先最好对记录液进行过滤 实验时, 无论是记录液还是电极内液, 都要根据膜片钳记录模式 实验目的 所欲记录的离子通道 等要求来配制 例如, 记录海马神经元全细胞 Ca 2+ 电流的记录液 ( 细胞外液 ) 配方可以是 (mmol/l): NaCl 140,KCl 5,CaCl 2 2,MgCl 2 1,HEPES 10, 葡萄糖 10,TTX 0.001,4-AP 1,TEA 10, 调 ph 值为 7.3 电极内液 ( 细胞内液 ) 配方可以是 (mmol/l): CsCl 140,HEPES 10,EGTA 10,Na 2 ATP 2, 用 CsOH 调 ph 为
10 图 5. 培养海马神经元全细胞记录左图显示培养的神经元与记录电极已经形成全细胞记录模式 ; 右图为记录的神经元全细胞 Ca 2+ 电流 ( 细 胞钳制电位 =-90 mv, 去极化到 +10 mv, 步阶 20 mv). 图 7. 烟碱对培养海马神经元突触活动的影响 压力给予烟碱 (2 mmol/l) 后, 海马神经元自发兴奋性突触后电流 (sepsc) 发放频率增强, 但未见诱发 的烟碱电流. 注 : (1) 本文作者刘卫,2001 年获军事医学科学院毒物药物研究所博士学位, 现在山东泰安解放军第 88 医院药剂科工作 吴丽颖,2001 年获军事医学科学院基础医学研究所博士学位, 现在军事医学科学院基础医学研究所工作 (2) 本文部分资料由原军事医学科学院毒物药物研究所杨胜博士 基础医学研究所马子敏博士提供, 在此一并致谢! ( 完 ) - 9 -
目 录 1. 简介... (2) 2. 实验条件与设备... (2) 2.1 实验室要求... (2) 2.2 仪器设备... (2) 2.3 常用工具与耗材... (3) 3. 实验动物... (3) 4. 实验试剂及配置... (3) 4.1 实验试剂... (3) 4.2 试剂配制... (3
膜片钳技术系列手册 (7) 大鼠背根神经节细胞急性分散方法 刘振伟 编写 (2015 年 6 月 27 日 ) 目 录 1. 简介... (2) 2. 实验条件与设备... (2) 2.1 实验室要求... (2) 2.2 仪器设备... (2) 2.3 常用工具与耗材... (3) 3. 实验动物... (3) 4. 实验试剂及配置... (3) 4.1 实验试剂... (3) 4.2 试剂配制...
3 4 5 1 1-20 4 2, 260mOsm/kg 320 mosm/kg HEPES ph 7.2-7.4 ph ph (7.4-7.7), ph (7.0-7.4) NaHCO 3 CO 2 CO 2 CO 2 5 2
1 (1) (2) ( ) (3) (4) (5) (1) (2) (3) 2 (1) ( ) (2) (3) (4) 1 2 1 3 4 5 1 1-20 4 2, 260mOsm/kg 320 mosm/kg HEPES ph 7.2-7.4 ph ph (7.4-7.7), ph (7.0-7.4) NaHCO 3 CO 2 CO 2 CO 2 5 2 NaHCO 3 1.97g/L CO 2
- 2-2- HCO HPO SO 3 4 4 P P R P QR Q R Q + - - H HCO3 - HCO 3 - - Cl HCO 3 HCO - 3 - HCO - 3 - HCO 3 - = 100 2- SO 4 - H 2 PO 4 HPO 4 - HPO 4 2- Na
儿科学 儿科学 儿科学 儿科学 儿科学 儿科学 ( 专业学位 ) 儿科学 ( 专业学位 ) 儿科学 ( 专业学位 ) 儿科学 ( 专业学位 ) 儿科学 ( 专业学位 ) 耳鼻咽喉科学 ( 专业学位 ) 非定向 全国统考
2017 年医学院 ( 含转化院 遗传所 ) 硕士研究生上线考生名单 准考证号 报考专业 外语政治 业务 1 业务 2 总分 报考类别 考试方式 备注 103357000912484 72 72 242 0 386 非定向 全国统考 103357000912003 71 72 242 0 385 非定向 全国统考 103357000911503 77 73 234 0 384 非定向 全国统考 103357000911098
去 中 和 ; [3] 消 化 最 好 在 37 培 养 箱 或 室 温 25 以 上 的 环 境 下 进 行 消 化, 消 化 2--5 min 后, 把 培 养 瓶 放 在 显 微 镜 下 观 察, 发 现 胞 质 回 缩 细 胞 间 隙 增 大, 细 胞 变 圆 后, 立 即 将 培 养 瓶
![去 中 和 ; [3] 消 化 最 好 在 37 培 养 箱 或 室 温 25 以 上 的 环 境 下 进 行 消 化, 消 化 2--5 min 后, 把 培 养 瓶 放 在 显 微 镜 下 观 察, 发 现 胞 质 回 缩 细 胞 间 隙 增 大, 细 胞 变 圆 后, 立 即 将 培 养 瓶](/thumbs/42/23090277.jpg "去 中 和 ; [3] 消 化 最 好 在 37 培 养 箱 或 室 温 25 以 上 的 环 境 下 进 行 消 化, 消 化 2--5 min 后, 把 培 养 瓶 放 在 显 微 镜 下 观 察, 发 现 胞 质 回 缩 细 胞 间 隙 增 大, 细 胞 变 圆 后, 立 即 将 培 养 瓶")
第 一 节 细 胞 培 养 的 相 关 技 术 1 细 胞 的 复 苏 概 述 复 苏 细 胞 要 求 快 速 融 化 的 手 段, 这 样 可 以 保 证 细 胞 外 结 晶 在 很 短 的 时 间 内 即 融 化 避 免 由 于 缓 慢 融 化 使 水 分 渗 入 细 胞 内 形 成 胞 内 再 结 晶 对 细 胞 造 成 损 害 用 品 培 养 液 吸 管 离 心 管 培 养 瓶 步 骤 [1]
细胞凋亡检测 doc
[ - 1 - ] cell apoptosis detection BMS306FI rh Annexin V FITC KIT 300 test 5000 ANNEXIN V rh Annexin V FITC KIT 200 test 4880 BMS306FI/100T rh Annexin V FITC KIT 100 test 2850 BMS306FI/c rh Annexin V FITC
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细 胞 培 养 技 术 常 见 问 题 解 答 一 细 胞 培 养 基 础 问 答 1.BHK 细 胞 就 是 指 BHK21 吗? 答 :BHK 细 胞 是 指 幼 年 叙 利 亚 地 鼠 肾 细 胞 (Baby Hamster Syrian Kidney),1961 年 建 株 原 始 的 细 胞 株 是 成 纤 维 细 胞, 贴 壁 依 赖 性 1963 年 获 得 单 细 胞 克 隆 细 胞
材料 方法
生物技术通报 姜燕 采用鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 和胶体金标记鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 及对照抗体羊抗鼠 利用双抗体免疫夹心反应原理特异性地结合人血红蛋白抗原 在 内可得到胶体金显色结果的原理研制便潜血单克 隆一步法胶体金检测试卡 用于诊断因各种原因引起的消化道出血疾病 应用杂交瘤技术制备两株鼠抗人血红蛋白 抗 体 方法检测 效价 免疫胶体金技术制备胶体金检测试卡 法检测 效价的结果显示 鼠抗人
Microsoft Word - 24.doc
閱 讀 (1) 楊 桃 毒 素 過 去 有 許 多 糖 尿 病 或 高 血 壓 患 者 吃 過 新 鮮 楊 桃 或 楊 桃 汁 後, 出 現 嘔 吐 頭 暈 意 識 不 清 等 症 狀, 研 判 因 為 他 們 腎 功 能 不 佳, 無 法 排 出 楊 桃 中 不 明 的 中 毒 成 分 楊 桃 中 的 不 明 成 分 可 能 導 致 部 分 特 殊 體 質 的 尿 毒 症 病 患, 出 現 神 經
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High Efficiency Particulate Air Filter HEPA CO 2 74 30 min 2 min CO 2 37 5 CO 2 CO 2 90 14 h) 3000 CO 2 4-20 -80-196 1000 2500 rpm Zeiss 70 1. 5 2. 3. 4. 15 20 1 2 3 4 2 NaOH 5 6 5 30 min
(mg/kg ) / 3 20 25 1 (h) 30 35 40 50 100 1000 1000 1000 1250 2000 60 80 60 80 80 100 15 25 2 4 2 4 3 4 2.5 5 10 20 0.5 1.5 10 80 100 100 150 300 24 72 5 1 2 R l A = + R l A Ku = AC DC (s) AC 50
GBZ －2004.doc
C 52 GBZ GBZ/T 160.30 2004 Methods for determination of inorganic phosphorus compounds in the air of workplace 2004 5 21 2004 12 1 GBZ/T 160.30-2004 GBZ 1 GBZ 2 [ Phosphorus pentoxide Phosphorus pentasulfide
第 期 甘金华等 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 材料与方法 试剂及溶液
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 甘金华 邓薇 李进平 艾晓辉 中国水产科学研究院长江水产研究所 湖北荆州 武汉纺织大学环境与城建学院 湖北武汉 采用改进的碳二亚胺两步法将强力霉素半抗原与载体蛋白 连接制备强力霉素 牛血清白蛋白 人工免疫抗原 并用同样方法将强力霉素与载体蛋白 连接制备人强力霉素 卵清白蛋白 人工包被抗原 经紫外扫描分析和动物免疫试验证实 强力霉素人工抗原合成成功
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附 表 一 : 统 一 定 价 药 品 表 金 额 : 元 定 价 目 1 293 追 风 透 骨 片 48 片 追 风 透 骨 片 24 片 追 风 透 骨 片 24 片 ( 薄 膜 追 风 透 骨 片 48 片 ( 薄 膜 ( 瓶 ) 30.0 * ( 瓶 ) 15.4 ( 瓶 ) 16.9 ( 瓶 ) 33.0 追 风 透 骨 丸 水 蜜 丸 6g 袋 1.8 * 追 风 透 骨 丸 水 蜜
校园之星
10 1 12 13 A B A B 14 15 16 17 18 19 20 21 2 23 24 25 26 S S 27 28 A B A B 29 V 30 N S 31 N S S S S N S S S 32 3 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 4 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 5 56 57 58 59 60 61 62 63
兽医临床诊断学实验指导
兽 医 临 床 诊 断 学 实 验 指 导 河 北 科 技 师 范 学 院 动 物 科 学 系 临 床 兽 医 学 实 验 室 2009 年 2 月 目 录 学 生 实 验 守 则... 3 实 习 一 动 物 的 接 近 保 定 和 基 本 检 查 法...4 实 习 二 临 床 基 本 检 查 法 及 一 般 检 查...10 实 习 三 循 环 系 统 的 临 床 检 查...15 实 习 四
卫生检验学实习指导.doc
2007.3 1 ... 1 V B2... 4... 7... 9... 12... 14... 17... 19... 25... 29... 31... 34 2 1. 2. 3. ph= 3-9( ph=5-6) Fe 2+ lgk =21.3 510nm, 1.1 10 4 Fe 2+ Fe 3+ Fe 2+ Fe 2+ 1. 1 cm l ml2m15ml 25ml 2. 1. 000
臧晓南 张学成 王高歌 刘金姐 张晓辉 刘 滨 对两种丝状蓝藻 钝顶节旋藻和盐泽螺旋藻 在基因工程中常用作选择试剂的 种抗生素 氯霉素 氨苄青霉素 红霉素 链霉素 卡那霉素 庆大霉素和新霉素 的敏感性作比较实验 结果表明 两种蓝藻对抗生素的敏感性既有共同的特点 也有 明显的差异 它们对红霉素 氯霉素和链霉素最敏感 致死浓度分别为 和 两种蓝藻对氨苄青霉素比较敏感 的氨苄青霉素即可抑制 和 的生长 但
Ps22Pdf
, 90, 6000 t, 1333 ha,, 500 600 t,, 131.3 ha,,,,,,,,,, ,, 9 10, 11 12, 3 4,,,,, 0.067ha 500 1000kg,, 0.067ha 2000 3000kg, 4000 5000kg,,,,,,,,,,,,,,,, ,, ( ),,,,, : 1.,,,,,,,,,,,,, 2., 11, 23 31 , 7, 37,,,
AA.S92
目 录 第 一 章 肾 的 概 述 (1) 第 二 章 泌 尿 系 统 疾 病 的 诊 断 (41) 第 三 章 肾 血 管 疾 病 (101) 第 四 章 肾 脏 运 转 异 常 综 合 症 (117) 第 五 章 遗 传 性 和 先 天 性 肾 病 (124) 第 六 章 免 疫 介 导 性 肾 脏 病 (133) 第 七 章 尿 路 感 染 第 八 章 肾 衰 第 九 章 尿 失 禁 (143)
第 期 黄雪莲等 响应面优化绿色木霉菌培养基 材料与方法 菌种 仪器与试剂 菌种的活化 单因素试验 响应面优化试验 优化工艺的验证 数据处理 结果与分析
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 响应面优化绿色木霉菌培养基 黄雪莲 于新 仲恺农业工程学院轻工食品学院 广东广州 利用响应面分析法对绿色木霉菌的培养基进行优化 通过测量不同营养条件下绿色木霉 菌落生长直径研究其生物学特性 在单因素实验的基础上 选定葡萄糖添加量 丙氨酸添加量和磷酸二氢钾添加量 个因素进行中心组合实验 建立二次回归方程 并应用响应面分析法进行优化 结果表明 绿色木霉菌最佳培养基为葡萄糖
招生人数 其中合计推免推免硕士连读 考 试 科 目 01( 全日制 ) 耳鼻咽喉科学 ( 专业学位 ) 肿瘤学 01( 全日制 ) 内科学 ( 专业学位 ) 康复医学与理疗学 01( 全日制 ) 康复医学与理疗学 ( 专业学位 ) 麻醉学
001 北京协和医院 100104 病理学与病理生理学 01( 全日制 ) 病理学与病理生理学 ( 学术型 ) 1 1 只招收推荐免试生, 不接受统考生报名 100201 内科学 01( 全日制 ) 内科学 ( 学术型 ) 12 10 西医 ) 或 654 基础医学综合 4 一无 100208 临床检验诊断学 01( 全日制 ) 临床检验诊断学 ( 学术型 ) 1 1 只招收推荐免试生, 不接受统考生报名
出國報告(出國類別：研習)
出 國 報 告 ( 出 國 類 別 : 實 習 ) 赴 日 本 北 海 道 大 學 研 習 家 禽 流 行 性 感 冒 野 鳥 跨 國 監 測 網 絡 高 病 原 性 (HPAI) 病 毒 特 性 分 析 及 進 行 研 究 現 況 交 流 服 務 機 關 : 行 政 院 農 業 委 員 會 家 畜 衛 生 試 驗 所 姓 名 職 稱 : 陳 麗 璇 助 理 研 究 員 李 婉 甄 助 理 研 究
中国科学技术大学 材料工程 05 校外调剂 0870 化学工程 吉林大学 应用化学 05 校外调剂 0870 化学工程 四川大学 制药
045700000787 东北大学 07030 分析化学 05 校外调剂 07030 无机化学 68 66 94 04 34 063700000004 沈阳药科大学 07030 分析化学 04 校内跨专业调剂 070303 有机化学 73 56 9 00 30 0007008903 北京大学 0780Z 药学类 05 校外调剂 070303 有机化学 75 67 09 8 4 085750830 苏州大学
卢书成 韩明莲 祝世娜 王效东 牡丹江医学院 建立一种灵敏度高 特异性强的成骨细胞内雌激素受体检测方法 探讨不同月龄雌性 大鼠 成骨细胞内雌激素受体表达规律 以此拟描述不同年龄人类女性个体成骨细胞内雌激素受体表达的生理曲 线 以不同月龄雌性 大鼠为标本 二次酶消化法收集成骨细胞并培养 倒置相差显微镜观察成骨细胞形态 钙钴法碱性磷酸酶染色 上清液碱性磷酸酶 及骨钙素 检测对成骨细胞进行鉴定 应 用流式细胞仪对不同月龄雌性
廁所維護保養手冊
公 廁 管 理 與 清 潔 維 護 講 義 台 灣 衛 浴 文 化 協 會 台 北 市 大 安 區 基 隆 路 四 段 43 號 建 築 系 電 話 :2737-6244 傳 真 :2737-6721 吳 明 修 台 灣 衛 浴 文 化 協 會 創 會 理 事 長 鄭 政 利 台 灣 衛 浴 文 化 協 會 名 譽 理 事 長 沈 英 標 台 灣 衛 浴 文 化 協 會 現 任 理 事 長 何 昆
实验指导编写模板
顾 勇 编 著 2008 年 3 月 目 录 前 言 2 动 物 生 物 学 实 验 守 则 3 实 验 一 : 动 物 的 细 胞 和 组 织 及 多 细 胞 动 物 的 胚 胎 发 育 5 实 验 二 : 原 生 动 物 系 列 实 验 9 实 验 三 : 蛔 虫 和 环 毛 蚓 的 比 较 解 剖 13 实 验 四 :( 或 日 本 沼 虾 ) 和 棉 蝗 的 比 较 解 剖 与 观 察 18
前 言 发 酵 工 艺 学 是 生 物 工 程 及 其 相 关 专 业 的 主 要 课 程 之 一, 在 我 国 高 等 院 校 中 的 开 设 有 四 十 多 年 的 历 史 但 直 到 1995 年 沈 阳 药 科 大 学 熊 宗 贵 教 授 的 发 酵 工 艺 原 理 教 材 ( 药 学 类
主 编 : 陈 今 朝 长 江 师 范 学 院 生 命 科 学 与 技 术 实 验 教 学 中 心 2010 年 6 月 前 言 发 酵 工 艺 学 是 生 物 工 程 及 其 相 关 专 业 的 主 要 课 程 之 一, 在 我 国 高 等 院 校 中 的 开 设 有 四 十 多 年 的 历 史 但 直 到 1995 年 沈 阳 药 科 大 学 熊 宗 贵 教 授 的 发 酵 工 艺 原 理 教
第一章 图 １ １ 传染病的特征 ９ Ｔ ｈ１ Ｔ ｈ２ 细胞调节机制简图 正调节 负调节 细胞因子与细菌的相互作用机制目前尚未完全明了 有实验表明 细胞因子与细菌之间 存在有互利和互抑双重效应 例如 Ｔ Ｎ Ｆα 和 ＩＦＮγ 可抑制放线菌的生长而 ＩＬ ６ 的作用则 反之 ＩＬ １ ２ 和 ＧＭ ＣＳＦ 可促进某些致病性大肠杆菌生长而 ＩＬ １ｒａ 可抑制之 研究表 明 某些致病性大肠杆菌有与
递, 激 素 神 经 递 质 药 物 需 通 过 细 胞 膜 外 表 面 上 的 相 应 受 体 的 作 用 细 胞 壁 植 物 细 胞 所 特 有 细 胞 器 内 质 网 : 膜 性 管 道 系 统, 核 糖 体 附 着 于 粗 面 内 质 网 上, 滑 面 内 质 网 高 尔 基 复 合 体 :
前 言 这 门 课 要 讲 的 内 容 学 什 么? 这 门 课 的 重 要 性 有 什 么 用 处? 1 与 我 们 的 专 业 密 切 相 关 2 与 我 们 的 生 活 息 息 相 关 学 习 方 法 怎 样 学? 1 理 论 联 系 实 际 2 局 部 与 整 体 的 关 系 生 命 系 统 的 层 次 : 生 物 圈 : 地 球 上 有 生 命 存 在 的 环 境 的 总 和 地 球 表
习题.doc
1 2-1 2 NaOH 3 4 5 6 7 8NH 4 HCO 3 9 3 4 1 2 3 4 5 6 5 6 1 2 3 PH 4-5 7 1 2? 8 1 2? 9 1 2 3 4 10 PH 1PH 2PH 11 11.0~4.0mm 2 1 2 1 2 3 4 5 6 3 1 2 3 4 1 2 3 5 2 3 4 5 6 1 2 3 4 7 8 1 2 3 4 9 1 2 3 4 5 6
688 生理学报 Acta Physiologica Sinica, December 25, 2012, 64(6): 学研究院实验动物中心提供 [ 合格证号 :SCXK ( 沪 ) ] ; 各种钙通道的拮抗剂 :ω-conotoxin GVIA 购自美国 Alo
![688 生理学报 Acta Physiologica Sinica, December 25, 2012, 64(6): 学研究院实验动物中心提供 [ 合格证号 :SCXK ( 沪 ) ] ; 各种钙通道的拮抗剂 :ω-conotoxin GVIA 购自美国 Alo](/thumbs/91/107463014.jpg "688 生理学报 Acta Physiologica Sinica, December 25, 2012, 64(6): 学研究院实验动物中心提供 [ 合格证号 :SCXK ( 沪 ) ] ; 各种钙通道的拮抗剂 :ω-conotoxin GVIA 购自美国 Alo")
生理学报 Acta Physiologica Sinica, December 25, 2012, 64(6): 687 694 http://www.actaps.com.cn 687 实验技术 原代培养海马神经元的多种电压门控钙通道电流成分 林智颖 2, 陈晓春 1,2,3,*, 张静 2, 黄天文 1,2 1 福建医科大学附属协和医院神经内科 ; 2 福建省老年医学研究所 ; 3 福建省神经生物学研究中心,
第十一章 颈部疾病病人的护理
第 十 一 章 颈 部 疾 病 病 人 的 护 理 学 习 目 标 1. 了 解 颈 部 常 见 肿 块 病 人 的 身 体 状 况 及 处 理 原 则 ; 能 提 出 甲 状 腺 肿 瘤 甲 状 腺 功 能 亢 进 病 人 的 护 理 诊 断 并 制 定 出 护 理 措 施 2. 熟 悉 甲 状 腺 肿 瘤 甲 状 腺 功 能 亢 进 病 人 的 身 体 状 况 手 术 适 应 证 3. 掌 握
Microsoft PowerPoint - xxg-2 [兼容模式]
![Microsoft PowerPoint - xxg-2 [兼容模式]](/thumbs/92/108071468.jpg "Microsoft PowerPoint - xxg-2 [兼容模式]")
心肌细胞的分离与培养技术 基础部生理学教研室 郭海涛 心脏功能研究的不同水平 整体水平 器官和系统水平 细胞和分子水平 1955 年, 对鸡胚心 肌组织分 离并以单 个细胞的 形式保存 于培养基 中 乳鼠心肌细胞的分离与培养 一 材料 第四军医大学 乳鼠 : 1~3 d 液体 : 培养基 小牛血清 消化酶 缓冲液及 75% 酒精等 物品 : 眼科剪 眼科镊 (4 套 ) 培养皿 (2
12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL
![12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL](/thumbs/91/106935627.jpg "12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL")
( )2017 57 5JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)2017,Vol.57No.5 11 LY294002, (, 330006) : LY294002 PI3K/AKT 0 10 15 20 25 30μmol L -1 LY294002(LY294002 ) A549,PBS CCK8 LY294002 A549 ; Westernblot
国内高等医学院校基础医学二级学科评价结果（1）
国内高等校基础医学二级学科竞争力评价简介 北京大学医学图书馆参考国内外各项评价指标体系, 建立了一套基础医学二级学科竞争力评价指标体系 分别从人才队伍 科学研究和教学成果三方面一共涉及 34 项指标, 对全国 39 家校的 12 个基础医学二级学科进行了评价 我们已经连续做了 4 年的评价,2012 年度的评价结果见下表或 http://library.bjmu.edu.cn/ 名 次 2012 年度国内高等校基础医学二级学科评价结果
性病临床诊疗指南（全）.doc
Guidelines for Diagnosis and Treatment of Sexually Transmitted Diseases National Center for STD Control, China CDC 1 2 / 3 4 5 6 1991 2000 8 1996 2004 1 1 HIV HIV 7 HIV HIV 1991 2000 8 1996 2004 1 1 HIV
生命科学研究 房 蓓 武泰存 王景安 以玉米沈单 号为材料 用溶液培养的方法研究了缺锌 低锌和正常供锌对玉米生长发育的影响 进一步明确了一定量低锌比缺锌对玉米的伤害更大 并对其 同工酶谱及蛋白质表达进行了分析 结果表明 一定浓度的低锌培养使玉米生长受抑及受害最重 且地上部分比地下部分更敏感 低锌和缺锌处理时 种同工酶的酶谱和蛋白表达与正常供锌时均有明显的差异 尤其在一定量低锌浓度时 有些同工酶的表达增强或被特异性诱导
untitled
1 1-1 16 mm 3 23 mm 24 mm 1-2 1-1 12~14 mm 2 mm 1-2 2 1 1. 1-3 (1) (2) 2. 1-4 (1) (2) (3) 1-3 1-4 3. (1) 1-5 (2) 1-5 (3) (4) 1-6 1-5 1-6 3 4. 1-7 (1) (2) 1-7 5. 12 6 1-8 1-8 4 1 1-9 1/6 5/6 1-10 1-10 5
11JR3.mps
模 块 三 饲 料 及 其 加 工 利 用 模 块 目 标 了 解 饲 料 的 有 关 概 念 及 国 际 饲 料 分 类 中 八 大 类 饲 料 的 分 类 标 准 ; 掌 握 青 饲 料 粗 饲 料 青 贮 饲 料 能 量 饲 料 蛋 白 质 饲 料 矿 物 质 饲 料 饲 料 添 加 剂 的 营 养 特 性 和 利 用 特 点 ; 掌 握 各 类 饲 料 中 常 用 饲 料 原 料 的 种 类
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HJ 中 华 人 民 共 和 国 环 境 保 护 行 业 标 准 HJ/T 2 微 生 物 菌 剂 使 用 环 境 安 全 评 价 导 则 The Guild of Safety-Assessment of Microbial Community Used in the Environment ( 征 求 意 见 稿 ) 20 发 布 20 实 施 国 家 环 境 保 护 总 局 发 布 目 次 前
第 一 节 体 液 的 正 常 代 谢 体 液 平 衡 包 括 : 细 胞 内 外 体 液 之 间 的 渗 透 压 平 衡 每 日 体 液 的 出 入 量 平 衡 ( 含 内 生 无 形 ) 体 液 中 电 解 质 分 布 的 平 衡 酸 与 碱 的 平 衡 等 四 大 平 衡 彼 此 之 间 相
第 二 章 外 科 体 液 代 谢 失 衡 病 人 的 护 理 许 昌 技 术 经 济 学 校 时 小 红 第 一 节 体 液 的 正 常 代 谢 体 液 平 衡 包 括 : 细 胞 内 外 体 液 之 间 的 渗 透 压 平 衡 每 日 体 液 的 出 入 量 平 衡 ( 含 内 生 无 形 ) 体 液 中 电 解 质 分 布 的 平 衡 酸 与 碱 的 平 衡 等 四 大 平 衡 彼 此 之 间
※※※※※
... 1 (030-910301)... 2... 3... 5... 7... 8 (030-910302)... 9... 10... 11... 13... 14 (030-910303)... 15... 16... 18... 20... 21 (030-910304)... 22 ... 23... 24... 26... 27 (030-910305)... 28... 29...
材料與方法
10-12 250-350 Sprague-Dawley rat ( SD ) 12 ( AM 8 00-PM 8 00 ) (Control group) (HS) (Heat shock group) 15 0 4 6 16 24 (PAE) ( Pulmonary air embolism group) 20 40 (25 l/min) 40 17 20 (HS&PAE) 15 4 16 20
<4D6963726F736F667420576F7264202D20B5DAC1F9D5C22020BBD2B7D6BCB0BCB8D6D6D6D8D2AABFF3CEEFD4AACBD8BAACC1BFB5C4B2E2B6A8A3A8B8C4B9FDA3A92E646F63>
第 六 章 灰 分 及 几 种 重 要 矿 物 元 素 含 量 的 测 定 第 一 节 灰 分 的 测 定 一 概 述 食 品 的 组 成 十 分 复 杂, 除 含 有 大 量 有 机 物 质 外, 还 含 有 丰 富 的 无 机 成 分, 这 些 无 机 成 分 包 括 人 体 必 须 的 无 机 盐 ( 或 称 矿 物 质 ), 其 中 含 量 较 多 的 有 Ca Mg K Na S P C1
第25章 抗心律失常药.ppt
Antiarrthythmic Drugs Antiarrthythmic Drugs China Medical University > < > < 一 心肌细胞膜电位 １ 静息电位 resting membrane potential RMP 细胞在静息时 膜电位呈外正内负的极化 状态 所测得的电位差为静息膜电位 ２ 动作电位 ａｃｔｉｏｎ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ＡＰ 心肌细胞兴奋引起膜去 心肌细胞兴奋引起膜去
(Microsoft Word - 6630\274B\313\241\265\330.doc)
題 目 : 誰 的 氣 量 大? 班 級 : 六 年 六 班 科 目 : 自 然 科 組 員 : 劉 芊 華 宋 瑀 恬 詹 舒 評 戴 宜 君 ( 第 九 組 ) 指 導 老 師 : 顏 君 叡 壹 研 究 動 機 五 年 級 自 然 課 曾 學 習 過 簡 易 滅 火 器 的 製 作, 從 寶 特 瓶 中 不 斷 的 冒 出 的 氣 泡, 令 我 們 覺 得 非 常 有 趣 它 的 原 理 是
校园之星
CO Na HCO AL SO Na SO Al O H SiO C H O CO H O CH CH Cl KClO KCl O P O P O MgCO MgCO AgI Fe O H gs PbS PbCO Pb O H H S PbS CO H O PbS H O PbSO H O CuS Cu S CuCO Ca O H CoCl H O CoCl H O born to
2 2 NH 3 2NaCl+ CaCO 3 ==== Na 2CO 3 + CaCl 2 ö Å 过, 同 样 加 快 了 扩 散 速 度 溶 剂 则 是 从 低 浓 度 溶 液 中 通 过 渗 透 膜 向 高 浓 度 溶 液 中 扩 散 溶 液 的 浓 度 越 高, 渗 透 压 就 愈 大 随 着 温 度 升 高, 渗 透 压 逐 渐 增 加, 导 致 蛋 黄 失 水 率 增 加 [4] 因
![过, 同 样 加 快 了 扩 散 速 度 溶 剂 则 是 从 低 浓 度 溶 液 中 通 过 渗 透 膜 向 高 浓 度 溶 液 中 扩 散 溶 液 的 浓 度 越 高, 渗 透 压 就 愈 大 随 着 温 度 升 高, 渗 透 压 逐 渐 增 加, 导 致 蛋 黄 失 水 率 增 加 [4] 因](/thumbs/42/22980499.jpg "过, 同 样 加 快 了 扩 散 速 度 溶 剂 则 是 从 低 浓 度 溶 液 中 通 过 渗 透 膜 向 高 浓 度 溶 液 中 扩 散 溶 液 的 浓 度 越 高, 渗 透 压 就 愈 大 随 着 温 度 升 高, 渗 透 压 逐 渐 增 加, 导 致 蛋 黄 失 水 率 增 加 [4] 因")
F * 迟 玉 杰, 胥 伟, 刘 振 宇 150030 摘 要 : 关 键 词 : 近 年 来, 世 界 蛋 品 开 发 和 蛋 制 品 加 工 有 了 长 足 的 发 展, 欧 美 发 达 国 家 投 入 大 量 的 资 金 和 科 技 力 量 进 行 研 究 和 开 发, 许 多 发 达 国 家 禽 蛋 制 品 深 加 工 比 重 已 达 其 禽 蛋 总 量 的 20-25%, 其 产 品 多
9.1.乳房炎
1. 1 3 4 5 -- -- 1 3 2 3,, 3 4 2. : 1 2 3 4 6~12h 2 1~2d (1) 15~18 7~15b 70% 2%~5% 2 3 2. 1 2 3. 3-7d 3-4 ( ) 1 2 3% 2 3 2% 1% 2 3 3 5 10mg 10% 4. (1) (2) (3) (4) (5) (1) (2) 3
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保 护 你 的 肾 第 一 章 肾 的 概 述 肾 位 于 腰 部, 故 素 问 脉 要 精 微 论 说 : 腰 者, 肾 之 府 由 于 肾 藏 有 先 天 之 精, 为 脏 腑 阴 阳 之 本, 生 命 之 源, 故 称 为 先 天 之 本 肾 在 五 行 属 水, 肾 与 膀 胱 互 为 表 里 肾 藏 精, 主 生 长 发 育 和 生 殖 : 精 有 精 华 之 意, 指 人 体 最 重 要
赵世嘏 高乃云 楚文海 微曝气工艺是在常规 基础上发展起来的 试验表明在紫外光强 投加量为 三氯乙酸 初始浓度约为 的情况下 后该工艺对 的去除达到 以上 工艺效果受 光强 投加量 初 始浓度和 的影响 其他条件一定时 随着 光强和 投加量的增大 去除率增加 然而 投加量超过 后 去除效果增加缓慢 对不同初始浓度 时去除率最 高 而后浓度增加 去除率下降 中性或弱酸性 条件下更有利于降解 消毒副产物
食 品 与 生 物 技 术 学 报 第 卷
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 山药多糖研究进展 王洪新 王远辉 江南大学食品学院 江苏无锡 山药是药食兼用植物 山药多糖被认为是山药中重要的活性物质 综述山药多糖的提取分离工艺 纯化方法 化学结构分析和生理活性研究的现状 为未来研究山药多糖的新提取工艺 探讨构效关系 作用机制提供参考 山药多糖 研究进展 提取与分离 食 品 与 生 物 技 术 学 报 第 卷 第 期 王洪新等 山药多糖研究进展
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DAB 70 1 S-100 2 3 EMA 4 Ig κλ B B Ig κ+/λ+ Ig κ+λ+ bcl-2 90% bcl-2 bcl-2 5 6 7 8 c-erb-2cmycp53 nm23 EGFR PCNAKi-67 Ki-67 PCNA EGFR 9 10 6 T B 10 CMVHPVHSV HBV 1 1.1 5~10 1.2 1~2ml HankRPMI-1640 500r/min
( ) 039 (CIP) /. :, ISBN TS CIP ( 2005) : : : : * ( ) : ( 010 ) / www. cip. com. cn
( ) 039 (CIP) /. :, 2005. 3 ISBN 7-5025-6678-3... -. TS211. 4 CIP ( 2005) 012222 : : : : * ( 3 100029 ) : ( 010 ) 64982530 http:/ / www. cip. com. cn * 850mm 1168mm 1/ 32 7 196 2005 4 1 2005 4 1 ISBN 7-5025-6678-3/
1 2-14 I + A + 1 2 2 I 8 5 14 7 5 14 2 3 Ε K = RT ZF + K ln [ ] + [ K ] 0 i ( mv) + K Ε K = 595. lg [ ] 0 ( mv) + [ K ] i 60% 40% 20% 15% 4% 1% 55
- [Ca 3(PO 4) 2] Ca ( PO ) + 3SiO + 5C = 3CaSiO + 5CO + 2P 3 4 2 2 3 2 1 4 39. 96 99. 60 + 37. 96 0. 96 + 3597. 34 = 39. 95 100 4096. 688. + 39. 96 001. + 38. 96 9308. = 3910. 100
第六章 肠梗阻
第 六 章 肠 梗 阻 第 一 节 概 述 肠 内 容 物 不 能 顺 利 通 过 肠 道, 称 为 肠 梗 阻 肠 梗 阻 是 外 科 常 见 的 急 腹 症 之 一, 诊 断 困 难, 发 展 快 病 情 重, 常 需 急 症 处 置 仅 次 于 急 性 阑 尾 炎, 胆 道 疾 病, 占 第 三 位 病 情 严 重 的 绞 窄 性 肠 梗 阻 的 死 亡 率 仍 达 10% 左 右 一 分 类
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梅 Aug 2014 Vol. 1 Issue 7 + 1 常 的 糖尿病篇 Page 1 Ø Ø 我不需要自己, 那是 生的事情? Ø Ø Ø Ø 么 时 药 + more on 2 Lorem 梅 Aug 2014 Vol. 1 Issue 7 Ipsum 于血糖 : 我不需要自己, 那是 生的事情 2 梅 Aug 2014 Vol. 1 Issue 7 Lorem Ipsum 1) 2) 晚
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疾 病 名 小 儿 烧 伤 英 文 名 Burn in children 缩 写 别 名 ICD 号 T20-T32 概 述 小 儿 烧 伤, 这 里 指 12 岁 以 下 儿 童 烧 伤, 占 同 期 住 院 烧 伤 患 者 的 35% 左 右 特 别 是 1~5 岁 小 儿 最 易 受 伤, 占 整 个 小 儿 烧 伤 的 2/3 左 右 5 岁 以 后, 发 育 及 智 力 等 逐 渐 成 长,
1 2 3 3.1 3.2 3.3 PM10 3.4 TVOC 4 4.1 4.2 1 1 1 (m 3 /h. ) 3~5 30 1~2 20 20 20 20 30 10 20 20 20 25 4.3 2 2 PM10 0.08 mg/m 3 500 cfu/m 3 500 cfu/m 3 β- 4.4 3 3 20 g/m 2 00 cfu/cm 2 00 cfu/cm 2 2 4.5 4.5.1
标题
浙江理工大学学报 ( 自然科学版 ), 第 39 卷, 第 3 期,2018 年 5 月 JournalofZhejiangSciGTechUniversity (NaturalSciences) Vol.39,No.3,May2018 DOI:10.3969/j.issn.1673G3851(n).2018.03.015 维生素 C 对内皮细胞和平滑肌细胞增殖的影响 郝亚, 白雪, 阮世超, 庄青叶,
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103- 衛 生 與 護 理 類 專 業 科 目 ( 一 ) 1. 有 關 原 始 生 物 起 源 的 演 化 大 方 向 中, 下 列 何 者 正 確? (A) 由 好 氧 厭 氧 (B) 由 構 造 複 雜 構 造 簡 單 (C) 由 異 營 自 營 (D) 由 多 細 胞 單 細 胞. 植 物 的 莖 頂 及 根 尖 細 胞 利 用 能 量 進 行 細 胞 分 裂, 與 下 列 何 種 生 命
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7 , () ( ) 10! :,,,, 1 ,,,,,,, 64,,,,, 2003,,,,! 2 ( 1) (10) (16) (24) (34) (38) (42) (46) (51) (69) (78) (94) (114) (119) 1 (124) (136) (146) (152) (162) (168) (174) (178) (190) () (203) (204) (249)
科 学 出 版 社 职 教 技 术 出 版 中 心 www.aboo 科 学 出 版 社 职 教 技 术 出 版 中 心 www.aboo 科 学 出 版 社 职 教 技 术 出 版 中 心 www.aboo 科 学 出 版 社 职 教 技 术 出 版 中 心 www.aboo 科 学 出 版 社 职 教 技 术 出 版 中 心 www.aboo 科 学 出 版 社 职 教 技 术 出 版
材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析
生物技术通报 黄艳燕 黄靖华 卢福芝 孙靓 彭立新 周兴 黄日波 利用 的方法从鼠李糖乳杆菌基因组 中扩增到 乳酸脱氢酶基因 并连接到载体 上 构建表达质粒 将重组质粒 转化大肠杆菌 重组菌株经 诱导表达 电泳分 析表明 在大肠杆菌中实现了表达 表达产物的分子量约为 同时采用紫外分光光度法测定 乳酸脱氢酶的酶活 测得重组菌株的 乳酸脱氢酶活力为 最适反应温度为 最适 乳酸脱氢酶 克隆 表达 鼠李糖乳杆菌
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理 類 CNIB-92-06 行 92 年 1 1 92 年 12 31 參 行 93 年 2 28 益 見 利 RAW264.7 來 LPS 見 論 (NO) (NOS ) L-arginine guanidino 類 神 NOS 類 神 nnos 類 enos 兩 NO 類 i NOS LPS 刺 來 量 NO (Kilbourn and Griffith, 1992). 量 NO (septic
附件四：作品送展表（夾於作品說明書第一頁，請勿裝訂）
嘉 義 市 第 31 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明 書 科 別 : 生 活 與 應 用 科 學 科 組 別 : 國 小 組 作 品 名 稱 : 果 真 有 酵 - 水 果 酵 素 的 應 用 關 鍵 詞 : 水 果 酵 素 環 保 編 號 : 1 摘 要 本 研 究 主 要 的 目 的 是 蒐 集 常 見 的 水 果, 利 用 多 餘 的 果 皮 和 剩 餘 的 果 肉 製 造
教师招聘中学化学1-11.FIT)
教 师 招 聘 考 试 中 学 化 学 历 年 真 题 汇 编 试 卷 渊 一 冤 渊 时 间 院 员 圆 园 分 钟 满 分 院 员 缘 园 分 冤 一 尧 单 项 选 择 题 渊 每 小 题 圆 分 袁 共 缘 园 分 冤 员 援 石 墨 烯 是 由 碳 原 子 构 成 的 单 层 片 状 结 构 的 新 材 料 渊 结 构 示 意 图 如 图 所 示 冤 袁 可 由 石 墨 剥 离 而 成 袁
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論 : 類 90028 老 寧 : 量 力 狀 力 降 了 力 便 料 不 不 立 不 利 療 了 不 度 狀 不 度 類 狀 up regulate TLR 類 : 葉 Discorea yam 來 神 1 益 益 精 列 料 料 兩 類 1. 來 殺 2. 淋 識 力 B APC macrophage monocyte immature dendritic cell idc 淋 2 Dendritic
科展初稿_0317（原始檔）.doc
倒 不 出 來 的 果 汁 探 討 果 汁 變 果 凍 的 原 因 及 生 活 上 的 應 用 摘 要 打 果 汁 自 行 飲 用 在 民 眾 的 生 活 中 極 其 常 見, 但 為 增 加 果 汁 的 營 養 價 值 和 口 感 常 會 依 個 人 的 偏 好 加 入 水 果 以 外 的 成 份, 如 在 果 汁 中 加 入 奶 粉, 則 會 使 果 汁 發 生 結 凍 的 現 象, 針 對 結
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神 奇 的 滅 孑 師 太 ~~ 探 討 日 常 生 活 常 用 水 溶 液 及 植 物 對 於 消 滅 孑 孓 之 成 效 壹 研 究 動 機 春 眠 不 覺 曉, 處 處 蚊 子 咬, 夜 來 巴 掌 聲, 蚊 子 死 多 少? 夏 天 即 將 到 來, 蚊 子 的 惡 夢 一 直 困 擾 著 我 們 了, 班 上 同 學 舉 起 手 腳 指 著 一 個 一 個 紅 豆 冰 咒 念, 真 是 令
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知 识 目 标 : 了 解 药 物 鉴 别 的 意 义 学 习 目 标 理 解 药 物 鉴 别 试 验 的 项 目 掌 握 药 物 鉴 别 试 验 的 常 用 方 法 能 力 目 标 : 能 熟 练 应 用 药 物 鉴 别 的 常 用 方 法 对 药 物 进 行 鉴 别 第 一 节 概 述 药 物 的 鉴 别 试 验 是 根 据 药 物 的 组 成 分 子 结 构 和 理 化 性 质, 采 用 化
卫生检验学实习指导.doc
2007.3 1 2...1 VB2...4...7...9...12...14...17...19...19...20...26...31...33...37 B1...44 1. 2 3. ph= 3-9( ph=5-6) lgk =21. 3. 510nm, 1.1X10 4 Fe 2+ - 1. 1 cm l ml2m15ml 25ml 2 1. 000? 10-3 mol/l 0.4822g
g ml 10% ph 色谱条件 kinetex C μm 100 A 4. 6 mm 150 mm 25 5 μl A B 10 mmol /L ml /min
25 4 2013 8 监测技术 5 1 2 1 ( 1. 江苏省疾病预防控制中心, 江苏南京 210009; 2. 南京医科大学第二附属医院, 江苏南京 210029) 5 Phenomenex kinetex C 18 2. 6 μm 4. 6 mm 150 mm 10 mmol /L ph 2. 5 + 60 40 DAD 280 nm 5 20. 0 mg /L ~ 100 mg /L 0.
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第 3 章 动 物 生 理 学 实 验 的 基 本 操 作 技 术 3 畅 1 动 物 生 理 学 实 验 常 用 手 术 器 械 3 畅 2 实 验 动 物 及 其 选 择 3 畅 3 实 验 动 物 的 编 号 捉 拿 固 定 方 法 3 畅 4 实 验 动 物 的 给 药 方 法 3 畅 5 动 物 的 麻 醉 3 畅 6 实 验 动 物 的 采 ( 取 ) 血 与 处 死 方 法 3 畅 7
目 录 运 动 解 剖 学 实 验 讲 义 ( 王 蕊 ) 人 体 生 理 学 实 验 讲 义 ( 王 建 设 ) 运 动 生 理 学 实 验 讲 义 ( 王 建 设, 党 晓 云 ) 生 物 化 学 实 验 讲 义 ( 翟 鹏 飞 ) 运 动 生 物 化 学 实 验 讲 义 ( 翟 鹏 飞 ) 体
运 动 人 体 科 学 实 验 指 导 河 南 师 范 大 学 体 育 学 院 运 动 人 体 科 学 实 验 室 2010.5 目 录 运 动 解 剖 学 实 验 讲 义 ( 王 蕊 ) 人 体 生 理 学 实 验 讲 义 ( 王 建 设 ) 运 动 生 理 学 实 验 讲 义 ( 王 建 设, 党 晓 云 ) 生 物 化 学 实 验 讲 义 ( 翟 鹏 飞 ) 运 动 生 物 化 学 实 验 讲
校园之星
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疾 病 名 老 年 人 高 渗 性 非 酮 症 糖 尿 病 昏 迷 英 文 名 senile hyperosmotic nonketotic diabetic coma 缩 写 别 名 老 年 高 渗 性 非 酮 症 糖 尿 病 昏 迷 ; 老 年 人 高 渗 性 昏 迷 ; 老 年 人 高 血 糖 脱 水 综 合 征 ICD 号 E13.0 概 述 高 渗 性 非 酮 症 糖 尿 病 昏 迷 (hyperosmotic
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A B=AB( ) AB=AB( ) 4P 50 2 === 2P 2 O 5 2KClO 3 2KCl 3O 2 NH 3 H 2 O CO 2 =NH 4 HCO 3 2KMnO 4 K 2 MnO 4 MnO 2 O 2 CO CO 2 ( ) 1.250 / 1.977 / 1 1 1 0.02 2CO O2 2CO 2 CO CuO Cu CO 2 CO 2 C 2CO Ca(OH) 2
福建农业学报 材料与方法 外植体无菌株系的建立 启动培养 增殖培养 继代培养 生根培养 瘤状苗的细胞学观察
福建农业学报 邓素芳 杨 旸 赖钟雄 福建农业学报 材料与方法 外植体无菌株系的建立 启动培养 增殖培养 继代培养 生根培养 瘤状苗的细胞学观察 邓素芳等 朱砂根成年茎段的离体培养研究 结果与分析 福建农业学报 第3期 邓素芳等: 朱砂根成年茎段的离体培养研究 带空洞, 无法观察 图1 朱砂根成年茎段的离体繁殖 Fig 1 I n vitro propagation of A crenata 图 2
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使 用 HPLC Online SPE 方 法 分 析 复 方 甘 草 制 剂 中 的 吗 啡 应 用 甘 草, 固 相 萃 取, 二 维 液 相 色 谱, 超 高 效 液 相 色 谱 作 者 肖 尧 李 浪 安 捷 伦 科 技 ( 中 国 ) 有 限 公 司, 北 京,100102 摘 要 目 的 : 建 立 两 种 复 方 甘 草 制 剂 中 吗 啡 成 分 测 定 的 Online SPE-UHPLC
中 草 药
中 草 药 致 谢 李 沛 赵 继 敏 郑 智 敏 江 亚 楠 等 病 理 生 理 学 教 研 室 老 师 在 实 验 中 给 予 的 指 导 和 帮 助 狄 建 彬 顾 振 纶 赵 笑 东 钱 培 刚 蒋 小 岗 郭 次 仪 中 草 药 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 8 期 10 年 8 月 1324 LDL C 非常明显升高 (
1 cal = 4.18 J N 0 = 6.02 10 : 1.00 : 12.0 : 14.0 : 16.0 : 32.0 23 1 40 2 1. (A) (B) (C) (D) (E) (C) (A) ( ) (B) ( ) (D) (NaI KIO 3 ) (E) ( Ca 2+ Mg 2+ Fe 2+ ) (C) 1 2 3 75 6 (Ga 29.8 2403 ) 310 K 1.3
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第 三 章 黄 酒 酿 造 工 艺 黄 酒 是 我 国 的 民 族 特 产 和 传 统 食 品, 也 是 世 界 上 最 古 老 的 饮 料 酒 之 一, 是 以 谷 物 为 主 要 原 料, 利 用 酒 药 麦 曲 或 米 曲 中 含 有 的 多 种 微 生 物 的 共 同 作 用, 酿 制 而 成 的 发 酵 酒 第 一 节 原 料 和 辅 料 黄 酒 生 产 的 主 要 原 料 是 酿 酒 用
第 一 节 概 述 85 这 些 元 素 具 有 一 定 营 养 生 理 功 能, 发 现 了 实 验 性 的 缺 乏 症, 因 此 这 些 矿 物 元 素 可 能 也 是 动 物 必 需 的 矿 物 元 素 动 物 对 这 些 元 素 的 需 要 量 都 非 常 低, 一 般 不 出 现 缺 乏
第 八 章 矿 物 质 营 养 矿 物 元 素 是 动 物 营 养 中 的 一 大 类 无 机 营 养 素 现 已 确 认 动 物 体 组 织 中 含 有 约 45 种 矿 物 元 素 但 是 并 非 动 物 体 内 的 所 有 矿 物 元 素 都 在 体 内 起 营 养 代 谢 作 用 在 二 十 世 纪 五 十 年 代 以 前 已 发 现 有 13 种, 五 十 年 代 和 六 十 年 代 又
生 水 简 称 比 比 重 物 生 一 率值 制 作血 涂 片 用 曰 用 值 分 作 染液和 染 液 染 色 在 放大 短 径 值 全 部 数据 经 生 物 统 计 学 处 理 一 记录 了 测 定 日 以 上 午 体长 幅 值 为 材 料 鱼在 采 血 前 均 进 测 定 取 鳞片 作 了 年
!! 生 水 简 称 比 比 重 物 生 一 率值 制 作血 涂 片 用 曰 用 值 分 作 染液和 染 液 染 色 在 放大 短 径 值 全 部 数据 经 生 物 统 计 学 处 理 一 记录 了 测 定 日 以 上 午 体长 幅 值 为 材 料 鱼在 采 血 前 均 进 测 定 取 鳞片 作 了 年 龄 鉴定 同 时 一 为 测 定 时 间 室 外 气 温 池 水水 温 一 值 和测 定 简称
目 錄 第 一 章 緒 論 第 一 節 研 究 背 景 與 動 機... 2 第 二 節 研 究 目 的... 2 第 三 節 研 究 方 法... 2 第 二 章 溫 泉 的 歷 史... 3 第 三 章 溫 泉 法 律 與 分 布 第 一 節 溫 泉 的 法 律 / 定 義... 5 第 二 節
修 平 科 技 大 學 應 用 日 語 系 題 目 : 日 本 の 温 泉 と 台 湾 の 温 泉 指 導 教 師 : 古 瀨 和 彥 老 師 姓 名 : 袁 緣 姓 名 : 楊 錡 學 號 :BX99063 學 號 :BX99512 中 華 民 國 103 年 01 月 10 日 目 錄 第 一 章 緒 論 第 一 節 研 究 背 景 與 動 機... 2 第 二 節 研 究 目 的... 2 第
3 3 3 1.01 105 74 100 100 = 10 100 90 = 11.1 50 98 x 245 20 100 100 1 1 = = -12 1/ 12 = = 12 1/ 12-26 2.65710 = 11.6610-27 -12 6 6 2N 100% = 2 14 100% CO( NH ) 60 2 2