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1 浙江大学学报 医学版 年 月 '#9 % +,---)&'.!#($)'*' /* 0 /)"( 综 述 负性共刺激分子 2 在泌尿系肿瘤中的研究进展 陶 燕 洪 梅兰州大学第二医院泌尿外科研究所甘肃省泌尿系疾病研究重点实验室甘肃省泌尿系统疾病临床医学中心 甘肃兰州 摘 要 2 是近年来新发现的共刺激分子 家族成员之一 它通过抑制 细胞的增殖 活化以及细胞因子的合成来降低免疫应答 2 高表达于人类的肿瘤组织 其与泌尿系肿瘤的进展和预后均有联系 通过对 2 的研究将有助于为泌尿系肿瘤的早期诊断 预后判断及免疫治疗提供新的策略和方法 本文就国内外关于 2 与泌尿系肿瘤的有关研究进展进行综述 关键词 泌尿生殖系统肿瘤 / 病理生理学 淋巴细胞 / 生理学 抗原 6 免疫 细胞 综述 中图分类号 >> 文献标志码 1$!2#)'- # 3! 237 5" $! #$=.& $,$ 1> =4 $$$,$ +&- )) =.& )& )$! & #+,*- &/4'0!0 %2 "(!.+#9"*+":"* ;.&: &(+"'#!+"& (',.:! "#9 2 (.<(!(! "%";"+&.9 &*'#!+&.&:#.(,&(+%.&'% (',,.("+%,.&#":.!+"&!+"<!+"&!* 9+&",.&*'+"& &:#(2 "(:&'* +&;!;&.!#98,.(* " '#+",#%'! +' &.(5!9(+'*"(%!<(%&- +%!+2 8,.("& "(#&(#9.#!+* +&+%,.&.("&!*,.&&("(&:'.&#&"+' &.( <(+"!+"& &:2 :'+"& -"#,.&<"* - (+.!+"( :&. *"!&("(!* " '&+%.!,9&:'.&#&"+' &.(%"(!.+"#.<"-(+%.+,.&.(&:2.(!.% " '.&#&"+' &.( 收稿日期 接受日期 在线优先出版日期 基金项目 甘肃省科技计划项目 0 国家自然科学基金 兰州大学中央高校基本科研业务费项目 #$');9 作者简介 陶 燕 0 女 硕士 实习研究员 主要从事泌尿系肿瘤的分子生物学研究!"# +!&$"#& 通讯作者 洪 梅 女 博士 助理研究员 主要从事泌尿系肿瘤的分子生物学研究!"# "%&;)' *'

2 陶 燕 等 负性共刺激分子 2 在泌尿系肿瘤中的研究进展 " & 4.&"+!#&,#!((/,%9("&,!+%&#&9 #9,%&9+(/,%9("&#&9 +"( 6 '"+9 #'#!. <"- %)"!4"<5*"!#1" 0 泌尿系肿瘤是泌尿外科最常见的疾病之一 且其发病率和病死率在我国仍呈上升趋势 严重危害人民健康 因此对其早期诊断和治疗策略的研究受到广泛重视 肿瘤免疫是肿瘤发展过程中的重要因素 肿瘤细胞中的共刺激分子 家族的高表达可使肿瘤细胞逃避机体的免疫监视 家族属于免疫球蛋白超家族 该家族的不同成员可能对 细胞的活化产生刺激或抑制的影响 从而对免疫系统实现精密的调控 2 是近年来新发现的 家族成员之一 它通过抑制 细胞的增殖 活化以及细胞因子的合成来降低免疫应答 同时 2 高表达于人类的肿瘤组织 因此被认为是肿瘤诊断的预测因子 肿瘤组织中 2 的高表达可能抑制 细胞对肿瘤的杀伤 同时也直接促进肿瘤自身的恶性进展 因此 2 可能成为肿瘤免疫治疗的有效靶标 本文就 2 及其在泌尿系肿瘤中的研究进展作一综述 )'- 及其生理作用 年 个实验室利用蛋白质序列同源性分析同时发现了 家族的一个新成员 并分别将其命名为 基因位于人类染色体,> 编码一个含有 个氨基酸的蛋白 属于 型跨膜蛋白 其细胞外部分含有 和 6 结构域和多个 糖基化位点 小鼠与人 2 的氨基酸序列在进化上高度保守 2 的 广泛表达于人类的正常外周组织 但是免疫组织化学法未能在这些组织中检测到 2 蛋白的表达 说明 2 在转录 后其蛋白质翻译受到严格的限制 研究还发现 虽然 2 在正常的外周组织几乎不表达 但在多种肿瘤组织中表达却异常升高 如肾癌 卵巢癌 肺癌 乳腺癌 子宫内膜癌 前列腺癌 以及胃癌 食道癌 甲 0 状腺癌等 另外 几个研究小组发现在 种黑色素瘤细胞株中 2 的 和蛋白均有表达 不但在肿瘤组织中有 2 的表达 而 且在肿瘤患者的血清和恶性胸腔积液中也能检测到可溶性的 2 蛋白 2 的主要功能是降低 细胞的免疫应答 它能够抑制 细胞受体介导的 细胞增殖 同时能抑制 的产生 骨髓间充质干细胞能够抑制 细胞的活化和增殖 研究表明骨髓间充质干细胞表面的 2 分子通过诱导细胞周期 7 /7 期停滞以及阻止转录因子 的核移位来发挥 细胞抑制功能 给予 2 免疫球蛋白后 降低了 细胞的增殖和细胞毒 细胞活性 相反用抗体阻断 2 后则促进了 细胞的增殖和 的产生 2 在人类很多肿瘤中均有异常的表达升高 而且还与患者不良预后显著相关 研究发现 肿瘤微环境中的肿瘤相关巨噬细胞 +' &.!(&"!+*!.&,%! 5 表面表达 2 5 抑制了肿瘤特异性的 细胞免疫 促进了肿瘤的发展 肿瘤细胞的侵袭和转移也需要逃避宿主的免疫监视 有文献报道 胃癌和肺癌患者血循环中的 5 表达 2 明显升高 并且与肿瘤浸润和转移显著相关 除了 细胞免疫抑制外 还有众多文献报道了 2 在促进上皮细胞恶性转化中的直接作用 研究发现 2 过度表达会促进免疫缺陷鼠卵巢癌的发生 主要表现在增加细胞增殖率 增强细胞粘附 迁移和侵袭能力 此外 用小分子干扰 干扰胰腺癌细胞中 2 的表达后 可促进细胞间粘附和上皮钙黏着蛋白的表达 抑制细胞增殖 克隆形成能力和细胞迁徙能力 促进细胞凋亡和胱天蛋白酶活化 而且还抑制了. / 信号通路 0 2 在肿瘤发生中的作用机制还有待进一步深入研究 *)'- 与肾癌近年来 由于环境污染等因素的影响 肾癌的发病率逐年上升 在我国泌尿系恶性肿瘤中仅次于膀胱癌 肾癌典型的局部表现 血尿 腰痛 腹部肿块 在临床出现的概率低于 0? 这些表现

3 浙江大学学报 医学版 &'.!#&:%)"!4"<.("+95*"!#1"( 临床出现时多已为肾癌晚期 无法行根治性手术切除 临床上? 以上的肾癌患者多无明显症状和体征 一般是在体检时无意发现的 如果能早期诊断并积极治疗 可大大提高患者的生存率 因此寻找可作为早期诊断标志物的特异性分子指标具有十分重要的临床意义 另外肾癌对放疗和化疗均不敏感 对于晚期和术后复发的患者 亟需建立有效的免疫治疗方法 目前国内外有关 2 与肾癌的关系研究成果提示 2 有望成为肾癌早期诊断的标志物以及治疗的分子靶标.! ; 等对 0 例肾细胞癌.!##!."&!66 患者的肿瘤新鲜冰冻标本进行了检测 发现肿瘤细胞 2 的表达与不良临床病理特征 包括全身症状 肿瘤坏死 肿瘤大小 临床分期 病理分级和病死率 显著相关 另外 肿瘤组织中血管内皮的 2 阳性率 >0? 也显著高于癌旁组织 >0? 提示 2 可能参与肿瘤血管的新生和维持 这些数据表明 2 是 66 患者预后判断的有用标志物 并可能成为 66 免疫治疗的有效靶标 目前对于肾癌的诊断和预后缺乏特异性和敏感性较高的分子标志物 而组织标志物不能早期诊断肾癌 也不能动态分析肾癌的预后 因此血清标志物和尿标志物成为肾癌分子标志物研究的重点 而 2 可以以可溶性形式存在于血液和体液中 %&,(& 等用酶联免疫吸附法 1 检测了 位肾透明细胞癌 #!.# 患者的血清可溶性 2 发现 6666 和正常对照组的检出率分别为 0>0? 和 >? 而平均浓度分别为 > /# 和 > /# 5 为 期 6666 患者血平均 2 浓度分别为 > >>0> /# 提示了 2 作为 6666 血清标志物的重要价值 ' 等评价了临床早期 66 手术标本中 2 的表达与患者预后和复发的关系 对 份标本进行免疫组织化学染色 发现 2 表达阳性与 期 66 的术后复发呈显著性相 关 吴岩等用 1 检测了 例肾癌根治术前后患者血清 2 水平的变化并随访 个月 发现术前血清 2 水平明显高于术后 随着术后时间的延长患者血清 2 水平逐步下降 但复发患者术后 2 水平随肿瘤的复发而增高 这些研究说明 2 有望成为预测肾癌复发的 分子标志物 %! 等研究了 2 在肾癌中的亚细胞定位与其功能的关系 发现 66 标本中 2 的细胞膜定位与肿瘤浸润淋巴细胞呈负性相关 提示 2 可抑制 细胞向肿瘤组织中趋化 在多个肾癌细胞株中过表达 2 后 促进了肿瘤细胞的增殖 2 通过上调 69#" 和 69#" 促进 7 /1 期进展 同时还增强了细胞对化疗药物的耐药性 然而 当 2 的核定位序列突变后 其 细胞抑制功能增强了 但对细胞周期的促进作用却消失了 这些数据说明 2 的 细胞抑制功能依赖其细胞膜定位 而 2 促进肿瘤细胞增殖和对抗凋亡的作用则与其细胞核定位密切相关 因此 以上 2 在肾癌中的表达及其与肾癌发生发展相关性的研究结果提示 2 有望成为肾癌新的早期诊断 靶向治疗和预后判断的分子指标,)'- 与前列腺癌 前列腺癌是老年男性生殖系统常见的恶性肿瘤之一 以手术和内分泌治疗为主 其早期症状多数并不明显 在发现时常常已为晚期 对于晚期 复发性或激素非依赖性的患者尚无有效治疗方案 因此国内外许多学者都在探求基因水平的调控方法和寻找免疫治疗新靶点 以期在前列腺癌的治疗上取得突破 2 分子有望成为前列腺癌免疫治疗的新靶点! 等用免疫组织化学法检测了 例经根治性前列腺切除术患者的前列腺癌标本中 2 的表达情况 发现 2 在? 的标本阳性表达 在 0? 的标本强阳性表达 同时对这些患者进行 年的随访调查 结果发现 2 强阳性表达的患者在手术后更容易发生肿瘤扩散 而且出现复发和死亡的风险也加大 提示 2 的高表达与前列腺癌的转移和复发显著相关 钱韵等用免疫组织法检测了 份前列腺癌标本中 2 的表达情况 同时将其与患者临床病理特征的关系进行了评价 他们发现 2 在前列腺癌组织的胞浆和 或 胞膜呈弥漫性表达 而且其表达量显著高于正常的前列腺组织 相对于肿瘤分级较低患者的前列腺癌组织 2 在分级较高患者的癌组织中表达量显著增高 说明 2 在前列腺癌组织中的表达与患

4 陶 燕 等 负性共刺激分子 2 在泌尿系肿瘤中的研究进展 者肿瘤分级密切相关 这为前列腺癌的诊断和预后判断提供了新的肿瘤标志物 在细胞水平 朱森良等研究了 2 与前列腺癌增殖和凋亡的关系 他们设计合成了能够有效抑制 2 表达的小分子干扰 序列 将其转染人前列腺癌 40 细胞 结果发现干扰 2 表达后 细胞生长增殖速度明显高于阴性对照组 同时细胞凋亡率也明显高于对照组 这表明 2 与前列腺癌细胞的恶性生长相关 靶向沉默 2 后能够发挥抗肿瘤作用 2 可以通过抑制 细胞的活性来逃避机体免疫监视 也可以直接抑制肿瘤细胞凋亡来促进肿瘤的恶性增殖 因此封闭肿瘤组织中 2 的表达有可能成为前列腺癌免疫治疗的新策略 -)'- 与膀胱癌 膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤 发病率居泌尿系恶性肿瘤首位? 左右的膀胱癌为尿路移行细胞癌 虽然多为非肌层浸润型 但经尿道电切治疗后 B0 年内的复发率很高 且部分患者会发生分期和 或 分级进展 进而需行膀胱部分或全切手术 卡介苗或联合细胞因子灌注治疗膀胱癌也不能避免部分患者复发或者分级进展 因此准确判断膀胱癌患者的预后并采取有效措施以减少肿瘤的复发和进展具有重要临床意义 2 是否参与膀胱癌的发生发展以及免疫 逃逸 目前文献已有报道 刘维辉等利用免疫组织化学法检测 份膀胱移行细胞癌组织中 2 的表达 发现正常的癌旁组织不表达 2 蛋白 而其在膀胱移行细胞癌中的表达显著增高 而且 2 表达与膀胱移行细胞癌的 5 分期和组织学分级密切相关 他们同时用 1 检测 0 例膀胱移行细胞癌患者外周血可溶性 2 的含量 发现患者血清中可溶性 2 的含量显著高于正常对照组 组织病理学分级低级别患者 2 表达也低于组织病理学分级高级别患者 这提示 2 参与了膀胱移行细胞癌的发生发展 它可能通过结合 细胞表面的受体来下调 细胞的免疫活性 帮助肿瘤逃避机体的免疫监视 因此 2 对膀胱移行细胞癌的诊断和预后评估具有重要的参考价值. 结 语 自 年发现 2 分子后 2 在 细 胞免疫应答中具有明显的抑制作用使其靶向治疗成为了肿瘤研究的热点 上述研究发现 2 高表达于泌尿系肿瘤组织中 并与患者肿瘤分级显著相关 这表明 2 可能与泌尿系肿瘤的进展和预后有关 有望成为泌尿系肿瘤早期诊断和预后判断的新型分子标志物 但目前关于 2 分子的研究还存在很多未知的领域 比如该分子受体的研究 其在肿瘤发生发展过程中的具体作用机制等 继续对 2 信号途径进行深入研究 有望为泌尿系肿瘤乃至其他多种肿瘤的诊断和免疫治疗提供新的策略 参考文献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

5 浙江大学学报 医学版 &'.!#&:%)"!4"<.("+95*"!#1"( !# % "(%"%#98,.(* " *'+!#!* #&;'#!.;.!(+! = +!# 2 3 "(&<.8,.(* " %"%."( '+." *& +."&"*!*&!."&!(!* "<.(#9 &.#!+* -"+% +' &.#":"#+.!+"& 8" !#2!* 8!.%"%#98,.(* " %'!,.&(+!+!.!*!(&"!+* -"+% *"(!((,.!*!*,&&.&'+& ( !# 6#""!# ("":"! &: +% 2 &.'#!+&.9 &#'#!(!&<#,.&&(+"!.."!(+."!. =/ =4 2 +!# 2 8,.("&!(&"!+(-"+%!.,.&.("&!*,.*"+(,!+"+( ('.<"<!# " %'! (&,%!!# ('! &'(#!."&! ## ##$ !# 2 8,.("& "(!(&"!+* -"+%!.,.&.("&!*,.*"+(,!+"+('.<"<!#" %'! +%9.&"*!. / !# % 8,.("& " %'! #!&! "+(!(&"!+"& -"+%,!+"+(('.<"<!#!*!+"+' &." '.(,&( !# 8,.("& &:2 " ;#&&* &:,!+"+(-"+%!(+."!.,.*"+(+' &.,.&.("&!*,.&&("( / 0 徐春华 于力克 可溶性协同刺激分子 2 对恶性胸腔积液的诊断价值 中华医学杂志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吴 岩 陈一鸣 程晓冬 等 肾癌根治术前后患者血清 (2 水平变化及意义 山东医药 0 =4! 62 "" 627 "!&*& +!#<#%!!* ("":"!&:2 " (.' &:,!+"+(;:&.!*!:+..!*"!#,%.+& 9 $ 0 / 0 " 6%"( 27 =42 4 +!#%&(+"'#!+&.9 &#'#2,.& &++' &.,.&.("&!* #,.&#":.!+"& +%.&'% +.!(#&!+""+&'#'( 000 钱 韵 姚航平 沈 玲 等 2 在前列腺癌中的表达及其临床意义 浙江大学学报 医学版 0 ' 3 2!," 12 " +!# 8,.("& &:2 ",.&(+!+!.!* "+( #""!#("":"! /!>$

6 陶 燕 等 负性共刺激分子 2 在泌尿系肿瘤中的研究进展 0 62" 0 0 " 6%"( 朱森良 孙晓青 (" 靶向沉默 2 基因对人前列腺癌 40 细胞增殖和凋亡的影响 河南外科学杂志 24 1#"! 14 "!&" % :+( &: ("#"&:2 8,.("& ;9("& +%,.&#":.!+"&!*!,&,+&("(&:%'!,.&(+!+!. 40 #( /!" " 6%"( 刘维辉 李永生 朱绍兴 等 2 在膀胱尿路 上皮癌组织和血清中的表达及临床意义 现代泌尿生殖肿瘤杂志 0 4 ="%'" &(% 24 1%!&8" +!#8,.("&!* #""!#("":"!&:2 " +"('!* (.' &:,!+"+(-"+% ;!#**.'.&+%#"!#!."&!/!#" 6 12 " 0 " 6%"( 本文编辑 沈 敏 蒋婉洁 学术动态 透明质酸水凝胶和蛋白聚糖酶抑制剂联合使用治疗骨关节炎 近日 浙江大学基础医学系欧阳宏伟研究团队提出了联合使用透明质酸水凝胶和蛋白聚糖酶抑制剂治疗骨关节炎的方法 相关研究论文 %! #"&.!+"& &:!.+"#!*.!+"& ;9510 "%";"+&.*#"<.* "!%9!#'.&"!"* %9*.&# 发表在国际生物医学期刊 生物材料 ;$ 上 此项研究主要由陈鹏飞 朱守安等完成 论文网址为 % +, //---("*".+& /("/!.+"#/, "/10 透明质酸是临床上常用的关节润滑液 研究人员通过醛基和己二酸二酰肼修饰透明质酸 经过核磁共振以及红外吸收光谱确认基团的成功修饰之后 将两种透明质酸混合成胶 从而制备出一种具有缓释效果 提供细胞良好的生长环境的生物材料 蛋白聚糖酶 510 是主要的降解蛋白聚糖的酶类 在骨关节炎中蛋白聚糖酶表达量增多 蛋白聚糖降解也增多 而临床上利用蛋白聚糖酶来治疗骨关节炎的研究较少 因此研究人员先构建了一个体外软骨模型 然后通过白细胞介素 来模拟炎症环境 结果发现通过使用蛋白聚糖酶抑制剂可以明显减少炎症导致的蛋白聚糖降解 最后研究人员构建了两种骨关节炎大鼠模型 通过联合使用透明质酸水凝胶和蛋白聚糖酶抑制剂来治疗骨关节炎 取得了良好的治疗效果 这些研究结果提示透明质酸水凝胶可以作为软骨修复的生物材料 蛋白聚糖酶 510 可以成为骨关节炎药物研究的靶点 #!<&,"."*&# 局部缓释给药促进神经干细胞修复脊髓损伤 脊髓损伤 (,"!#&.* ")'.9 16 是人类所受最具破坏性的创伤之一 现今尚无有效的治疗方法能够获得 16 后运动功能的恢复 细胞周期抑制剂 :#!<&,"."*&# 已经在动物模型上展现了它促进 16 修复的潜能 然而 :#!<&,"."*&# 全身用药后副作用大 其促进修复的作用机制也尚不明确 为此浙江大学基础医学系欧阳宏伟团队研究人员试图寻求局部给药的新方法 并探索其作用机制 研究人员以 7 微球为载体 将 :#!<&,"."*&# 局部缓释到脊髓半切损伤点 结果显示 :#!<&,"."*&# 微球长达 * 的缓释可明显减少星形胶质细胞炎性因子的合成以及胶质瘢痕和空洞的形成 #!<&,"."*&# 微球局部给药也促进了 16 动物的运动功能恢复 研究结果证明 :#!<&,"."*&# 微球的局部缓释能够通过抑制星形胶质细胞增生和炎性因子的合成来促进 16 的修复 相关研究论文,!".&:(,"!#&.* ")'.9;9"%";"+"& &:!(+.&9+.&-+%!* ":#!!+&.9:!+&.(9+%("(+%.&'% #&!#*#"<.9&::#!<&,"."*&#" 7!&,!.+"#( 已经发表在 生物材料 ;$ 上 论文网址为 % +, //---("*".+& /("/!.+"#/, "/1 该研究得到了国家自然科学基金 国家重点科研项目 国家高技术研究发展计划 计划 国家教育部博士点专项基金 浙江省科技厅项目的资助 由任浩博士等完成

7 北京大学学报 医学版 # +94* 4 ' % 论著!! "# $ #% %"&!%'!! $ "( )& * $ +,-.)/ ) 01 " * ). " 2")3 )01 ( /" 433% /1 " 0 "51 " -.)/$ 6',)") 4.))%) 0

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