5 期 郝 俊 杰 等 : 杀 菌 剂 种 子 处 理 对 镰 孢 菌 侵 染 玉 米 的 影 响 121 玉 米 是 我 国 重 要 的 粮 食 作 物 苗 期 的 相 关 病 害 主 要 有 苗 枯 病 和 根 腐 病, 会 造 成 缺 苗 弱 苗 根 和 胚 轴 腐 烂 等 现 象, 进 而
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- 魄 袁
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1 玉 米 科 学 2013,21(5):120~126 Journal of Maize Sciences 文 章 编 号 : (2013) 杀 菌 剂 种 子 处 理 对 镰 孢 菌 侵 染 玉 米 的 影 响 郝 俊 杰, 刘 佳 中, 孙 静, 谢 淑 娜, 王 婧, 王 静 ( 河 南 省 农 业 科 学 院 植 物 保 护 研 究 所 / 农 业 部 华 北 南 部 作 物 有 害 生 物 综 合 治 理 重 点 实 验 室 / 河 南 省 农 作 物 病 虫 害 防 治 重 点 实 验 室, 郑 州 ) 摘 要 : 采 用 室 内 培 养 皿 法 和 室 外 盆 栽 两 种 方 法, 分 析 杀 菌 剂 种 子 处 理 ( 嘧 菌 脂 咯 菌 腈 精 甲 霜 灵 克 菌 丹 ) 单 独 和 复 合 使 用 对 特 定 镰 孢 菌 种 ( 禾 谷 镰 孢 菌 F. graminearum 轮 枝 镰 孢 菌 F. verticillioides 和 层 出 镰 孢 菌 F. proliferatum) 的 影 响 盆 栽 试 验 方 差 分 析 表 明, 多 个 性 状 其 菌 株 效 应 表 现 显 著, 大 多 性 状 的 互 作 等 变 异 效 应 不 显 著 ; 室 内 试 验 的 方 差 分 析 表 明, 除 了 品 种 种 子 处 理 间 的 互 作 效 应 不 显 著 以 外, 其 余 变 异 来 源 均 表 现 显 著 或 极 显 著 两 种 方 法 均 表 明, F. graminearum 具 有 更 强 的 致 病 力 盆 栽 试 验 表 明, 多 数 性 状 的 种 子 处 理 间 没 有 显 著 差 别, 就 根 长 和 干 重 来 说, 使 用 咯 菌 腈 处 理 的 效 果 相 对 较 好 室 内 结 果 表 明, 含 有 咯 菌 腈 和 克 菌 丹 处 理 的 种 子 均 具 有 较 好 效 果, 其 中 以 单 独 使 用 咯 菌 腈 效 果 最 好 杀 菌 剂 处 理 对 不 同 镰 孢 菌 菌 株 具 有 不 同 的 影 响, 所 有 杀 菌 剂 处 理 对 F. graminearum 的 效 果 均 差 于 对 F. proliferatum 和 F. verticillioides 的 效 果 嘧 菌 脂 种 子 处 理 的 效 果 最 差, 单 独 使 用 咯 菌 腈 的 效 果 最 好 关 键 词 : 玉 米 ; 镰 孢 菌 种 ; 种 子 处 理 中 图 分 类 号 :S 文 献 标 识 码 :A Effects of Fungicide Seed Treatments on Maize Seeding Infected with Fusarium Species HAOJun-jie, LIU Jia-zhong, SUN Jing, XIE Shu-na, WANG Jing, WANG Jing (Plant Protection Institute, Henan Academy of Agricultural Sciences/ Key Laboratory of Integrated Pest Management on Crops in Southern Region of North China, Ministry of Agriculture/ Henan Key Laboratory for Control of Crop Diseases and Insect Pests, Zhengzhou , China) Abstract: To evaluate several fungicidal seed treatments(azoxystrobin, fludioxonil, mefenoxam, and captan) a- gainst three Fusarium species(f. graminearum, F. verticillioides and F. proliferatum) that infect maize seed or seedlings, we conducted experiments using a petri plate assay in the laboratory and a potting medium in the natural conditions. In the laboratory experiments, the results of analysis of variance showed the other effects besides the variety seed treatments interactions were all significant(p 0.05). In the potting medium experiments, only the isolate effects of the several traits were significant. Both evaluation methods identified that the F. graminearum isolate appeared to be more aggressive than both the isolates of F. verticillioides and F. proliferatum. In the potting medium experiments, there were no significant differences among the seed treatments, although individual fludioxonil was the relative effective treatment from the untreated control according to root length and dry weight. In the laboratory experiments, the results demonstrated that fungicide seed treatments containing fludioxonil and captan had significant differences from the untreated control, and the individual fludioxonil was the most effective among the fungicidal seed treatments in terms of preventing fungal colonization and decay of the seeds and radicles. In the laboratory experiments, there also were differential effects of the fungicides against individual Fusarium isolates. All the fungicides a- gainst F. graminearum had less effective than the other two Fusarium isolates. Overall, the use of individual fludioxonil was the most effective, and azoxystrobin was the least effective against different Fusarium species. Key words: Maize; Fusarium species; Seed treatment 收 稿 日 期 : 基 金 项 目 : 十 二 五 科 技 支 撑 计 划 重 大 项 目 (2012BAD04B07) 河 南 省 农 业 科 学 院 科 技 发 展 专 项 资 金 作 者 简 介 : 郝 俊 杰 (-), 男, 博 士, 副 研 究 员, 主 要 从 事 玉 米 病 害 研 究 Tel: haojjds@yahoo.com.cn
2 5 期 郝 俊 杰 等 : 杀 菌 剂 种 子 处 理 对 镰 孢 菌 侵 染 玉 米 的 影 响 121 玉 米 是 我 国 重 要 的 粮 食 作 物 苗 期 的 相 关 病 害 主 要 有 苗 枯 病 和 根 腐 病, 会 造 成 缺 苗 弱 苗 根 和 胚 轴 腐 烂 等 现 象, 进 而 影 响 后 期 的 群 体 数 量 和 产 量 玉 米 苗 病 可 由 种 传 或 土 传 病 原 菌 引 起, 包 括 有 曲 霉 菌 (Aspergillus) 镰 孢 菌 (Fusarium) 赤 霉 菌 (Gibberella) [1,2] 腐 霉 菌 (Pythium) 丝 核 菌 (Rhizoctonia) 等, 其 中 [3] 腐 霉 菌 和 镰 孢 菌 是 较 常 见 的 病 原 菌 就 镰 孢 属 (Fusarium Link) 来 说, 包 含 有 数 十 个 种, 部 分 是 对 农 作 物 生 产 危 害 比 较 普 遍 和 严 重 的 病 原 菌, 如 禾 谷 镰 孢 菌 (F. graminearum) 轮 枝 镰 孢 菌 (F. verticillioides) 和 层 出 镰 孢 菌 (F. proliferatum) [4], 这 些 种 镰 孢 菌 既 能 通 过 种 子 传 播, 也 可 在 土 壤 和 农 作 物 秸 秆 中 存 活, 播 种 玉 米 后 均 可 能 侵 染 种 子 和 植 株, 造 成 玉 米 的 根 腐 [5~7] 茎 腐 和 穗 腐 等 病 害 镰 孢 菌 的 寄 主 广 泛, 如 引 起 玉 米 相 关 病 害 的 禾 谷 镰 孢 菌, 也 是 小 麦 赤 霉 病 的 病 原, 对 黄 淮 海 大 面 积 小 麦 玉 米 连 作 区 通 过 农 业 措 施 来 防 治 相 关 病 害 是 困 [8,9] 难 的, 且 还 有 加 重 相 关 病 害 发 生 的 可 能 目 前, 对 于 玉 米 种 传 和 土 传 相 关 病 害 的 防 控 主 要 通 过 杀 菌 剂 [10] 拌 种 进 行, 但 不 同 的 杀 菌 剂 其 作 用 机 理 和 防 治 对 象 可 能 不 同, 如 克 菌 丹 (Captan) 和 咯 菌 腈 (Fludioxonil) 是 针 对 镰 孢 菌 比 较 广 谱 的 杀 菌 剂, 而 甲 霜 灵 (Metalaxyl) 和 精 甲 霜 灵 (Mefenoxam) 是 针 对 卵 菌 比 较 专 一 的 杀 菌 剂 侵 染 玉 米 的 镰 孢 菌 有 多 种, 其 传 播 途 径 也 有 自 己 的 特 点, 同 一 种 杀 菌 剂 对 不 同 镰 孢 菌 种 的 抑 菌 效 果 和 防 效 也 可 能 不 同, 同 一 镰 孢 菌 对 不 同 的 杀 菌 剂 其 敏 感 性 也 可 能 不 同 本 文 选 择 目 前 市 场 上 流 通 并 常 用 的 几 种 商 业 杀 菌 剂, 对 玉 米 种 子 进 行 拌 种, 通 过 室 外 盆 栽 试 验 和 室 内 培 养 皿 上 的 发 芽 试 验, 分 析 其 对 常 见 的 几 种 镰 孢 菌 的 防 效, 并 评 估 利 用 室 内 培 养 皿 法 检 验 杀 菌 剂 处 理 玉 米 种 子 对 镰 孢 菌 的 效 果 1 材 料 与 方 法 1.1 种 子 镰 孢 菌 菌 株 杀 菌 剂 与 种 子 处 理 试 验 选 用 两 个 玉 米 品 种 : 郑 单 958 和 浚 单 20, 均 为 不 包 衣 种 子 选 用 禾 谷 镰 孢 菌 F. graminearum(s19-1) 轮 枝 镰 孢 菌 F. verticillioides(s99-4) 和 层 出 镰 孢 菌 F. prolif 原 eratum(s88-1), 均 为 本 实 验 室 2011 年 从 河 南 省 采 集 的 玉 米 茎 基 部 ( 茎 基 腐 病 株 ) 上 分 离 的 菌 株, 并 进 行 了 形 态 和 分 子 鉴 定 选 用 4 种 杀 菌 剂 : 嘧 菌 脂 咯 菌 腈 精 甲 霜 灵 和 克 菌 丹, 获 取 的 形 式 均 为 商 业 产 品, 采 用 单 一 或 组 合 使 用 对 玉 米 种 子 进 行 拌 种 ( 表 1), 咯 菌 腈 + 精 甲 霜 灵 和 克 菌 丹 种 子 处 理 用 量 依 据 其 产 品 推 荐 用 量, 其 他 杀 菌 剂 处 理 的 用 量 参 考 相 关 文 献 的 推 荐 用 量, 未 处 理 种 子 作 为 对 照 (CK) 表 1 杀 菌 剂 种 子 处 理 用 量 和 生 产 商 Table 1 Fungicide seed treatments, dosage and producer 种 子 处 理 商 品 用 量 (g /100 kg 种 子 ) 生 产 商 Seed treatment Commercial product Dosage Producer 嘧 菌 脂 阿 米 西 达 1 先 正 达 作 物 保 护 有 限 公 司 咯 菌 腈 + 精 甲 霜 灵 满 适 金 先 正 达 作 物 保 护 有 限 公 司 克 菌 丹 武 将 65 美 国 科 聚 亚 农 化 公 司 嘧 菌 脂 + 克 菌 丹 1+65 咯 菌 腈 适 乐 时 2.5 先 正 达 作 物 保 护 有 限 公 司 对 照 (CK) 1.2 接 种 体 的 准 备 [11] 参 考 王 晓 鸣 等 方 法, 将 选 定 的 镰 孢 菌 菌 株 分 别 接 种 于 玉 米 粒 培 养 基 上, 培 养 10 d 后, 待 菌 丝 布 满 玉 米 子 粒 后 用 于 接 种 1.3 盆 栽 试 验 与 数 据 收 集 将 已 灭 菌 的 蛭 石 和 沙 子 ( 体 积 比 3 颐 1) 混 匀 后 作 为 基 质, 按 照 3% ( 接 种 体 / 基 质 ) 的 浓 度 将 接 种 体 和 基 质 混 匀 后 装 入 直 径 25 cm 塑 料 花 盆 中, 每 盆 约 2.5 kg 将 装 完 基 质 的 花 盆 浇 水 后 过 夜, 第 2 天 播 种 在 室 外 利 用 自 然 的 光 照 和 温 度 进 行 试 验 2012 年 4 月 26 日 播 种, 将 种 子 距 离 花 盆 边 缘 2 cm 呈 圆 形 进 行 摆 播, 每 盆 播 种 10 粒 种 子, 作 为 1 个 小 区 试 验 按 完 全 随 机 区 组 设 计,4 次 重 复, 未 处 理 种 子 和 未 拌 接 种 体 的 基 质 作 为 对 照 播 种 后 每 两 天 浇 水 1 次, 保 证 基 质 的 湿 度 播 种 后 8 13 和 20 d 分 别 调 查 出 苗 情 况 21 d 后, 将 玉 米 苗 从 花 盆 中 拔 出 并 用 水 清 洗 后, 分 别 测 量 根 和 地 上 部 分 的 长 度 对 于 根 部 腐 烂 情 [12] 况 的 调 查 参 考 Lamprecht 等 方 法, 按 照 0~4 级 的
3 122 玉 米 科 学 21 卷 分 级 标 准 :0 为 无 根 腐 ;1 为 0~25% 根 腐 ;2 为 25%~ 50% 根 腐 ;3 为 50%~75% 根 腐 ;4 为 75%~100% 根 腐 以 上 数 据 均 单 株 调 查, 采 用 每 个 小 区 的 平 均 数 进 行 分 析 每 个 小 区 的 玉 米 苗 在 120 杀 青 1 h 后, 80 连 续 烘 干 48 h 后 称 量 干 重 1.4 培 养 皿 法 试 验 与 数 据 收 集 参 考 Broders 等 的 方 法, 选 用 直 径 8 cm 的 培 养 皿, 采 用 1.7% 的 WA( 水 琼 脂 ) 培 养 基, 每 皿 约 15 ml 采 用 直 径 5 mm 的 打 孔 器 将 PDA 上 的 新 鲜 菌 丝 块 转 置 在 培 养 皿 的 中 央,25 下 培 养 4 d 后, 将 10 粒 玉 米 种 子 呈 圆 形 摆 置 于 距 离 培 养 皿 边 缘 1 cm 的 WA 上, 其 中 对 照 种 子 先 用 3% 的 NaClO 处 理 2 min, 25 下 培 养,7 d 后 调 查 种 子 发 芽 及 腐 烂 情 况 按 照 1~5 级 分 级 标 准 进 行 调 查 :1 为 种 子 萌 发, 健 康 的 幼 苗 根 部 无 明 显 侵 染 痕 迹 ;2 为 极 少 被 侵 染, 萌 发, 1% ~19% 幼 苗 根 部 有 斑 ;3 为 部 分 被 菌 丝 覆 盖, 萌 发,20%~75% 幼 苗 根 部 有 斑 ;4 为 完 全 被 覆 盖, 萌 发, 大 于 75% 幼 苗 根 部 有 斑 ;5 为 完 全 被 覆 盖, 未 萌 发 1.5 统 计 分 析 利 用 SAS 9.1(SAS Institute, Cary, NC) 软 件 中 的 GLM 程 序 进 行 方 差 分 析, 采 用 Waller-Duncan k-ratio (k=100) 法 对 种 子 处 理 和 镰 孢 菌 菌 株 进 行 比 较 (P 0.05) 2 结 果 与 分 析 2.1 盆 栽 试 验 在 播 种 后 8 13 和 20 d, 分 别 对 盆 栽 试 验 的 出 苗 情 况 进 行 调 查, 由 于 同 一 小 区 3 次 调 查 的 结 果 几 乎 没 有 差 别, 因 此 采 用 第 3 次 调 查 的 数 据 进 行 方 差 分 析 结 果 表 明, 出 苗 数 除 品 种 间 差 别 显 著 外 (P<0.05), 菌 株 间 种 子 处 理 间 等 其 他 变 异 来 源 均 不 显 著 ( 表 2) 3 种 镰 孢 菌 菌 株 间 的 变 异 除 出 苗 数 不 显 著 以 外, 苗 高 根 长 干 重 和 根 腐 等 均 极 显 著 (P<0.01), 说 明 不 同 镰 孢 菌 对 玉 米 苗 期 的 生 长 发 育 有 不 同 的 影 响 种 子 处 理 间 只 有 根 长 和 干 重 的 变 异 为 极 显 著 和 显 著, 其 余 性 状 均 不 显 著 对 于 品 种 和 菌 株 的 互 作 效 应, 除 出 苗 数 和 根 腐 性 状 不 显 著 外, 其 余 3 个 性 状 均 达 显 著 或 极 显 著 水 平, 说 明 品 种 间 的 抗 性 存 在 差 别 对 于 品 种 种 子 处 理 菌 株 种 子 处 理 品 种 菌 株 种 子 处 理 的 互 作 效 应, 大 多 调 查 性 状 均 不 显 著 Table 2 表 2 盆 栽 试 验 和 室 内 试 验 相 关 性 状 的 方 差 分 析 Analysis of variance for the relative traits in the potting medium and the laboratory trials 盆 栽 试 验 室 内 试 验 Potting medium trial Laboratory trial 变 异 来 源 自 由 度 出 苗 数 苗 高 根 长 干 重 根 腐 种 子 / 胚 根 的 腐 烂 Source of variation DF ( 株 / 盆 ) (g) (0~4 级 ) (1~5 级 ) No. of seedlings Plant height Root length Dry weight Root decay Seed/radicle decay MS F MS F MS F MS F MS F MS F 品 种 * ** ** * ** 菌 株 ** ** ** ** ** 种 子 处 理 ** * ** 品 种 菌 株 * * ** ** 品 种 种 子 处 理 ** 菌 株 种 子 处 理 ** ** 品 种 菌 株 种 子 处 理 ** * 两 个 玉 米 品 种 的 出 苗 率 均 在 90% 以 上, 与 对 照 相 比,3 种 镰 孢 菌 对 出 苗 没 有 影 响, 郑 单 958 的 出 苗 率 要 好 于 浚 单 20( 表 3) 郑 单 958 的 3 种 接 菌 处 理 的 苗 高 和 对 照 相 比 没 有 显 著 差 别, 接 种 F. verticil 原 lioides 菌 株 的 苗 高 要 显 著 高 于 接 种 另 外 两 种 镰 孢 菌 的 苗 高 ; 浚 单 20 对 照 的 苗 高 均 高 于 接 种 处 理, 其 中 接 种 F. proliferatum 菌 株 的 苗 高 显 著 低 于 对 照 及 接 种 F. graminearum 和 F. verticillioides 菌 株 的 苗 高 两 个 品 种 接 种 镰 孢 菌 的 根 长 均 分 别 大 于 对 照, 对 于 郑 单 958, 其 接 种 F. graminearum 和 F. verticillioides 菌 株 的 根 长 分 别 和 对 照 差 别 显 著, 而 接 种 F. prolif 原 eratum 菌 株 的 根 长 和 对 照 差 别 不 显 著, 但 接 种 3 种 镰 孢 菌 处 理 间 的 根 长 没 有 显 著 差 别 ; 对 于 浚 单 20, 接 种 F. graminearum 菌 株 处 理 的 根 长 显 著 高 于 对 照 及 接 种 F. verticillioides 菌 株 的 处 理, 接 种 F. verticil 原 lioides 和 F. proliferatum 菌 株 处 理 的 根 长 和 对 照 差 别 不 显 著 两 个 品 种 接 种 镰 孢 菌 处 理 的 干 重 均 低 于 对 照, 除 接 种 F. verticillioides 菌 株 的 郑 单 958 干 重
4 5 期 郝 俊 杰 等 : 杀 菌 剂 种 子 处 理 对 镰 孢 菌 侵 染 玉 米 的 影 响 123 与 对 照 差 别 不 显 著 以 外, 其 余 接 菌 处 理 的 干 重 均 显 著 低 于 对 照 两 个 品 种 接 种 处 理 间 的 根 腐 严 重 度 与 对 照 的 差 别 均 显 著, 其 中 菌 株 间 根 腐 发 生 的 严 重 度 依 次 为 F. graminearum >F. proliferatum >F. verticil 原 lioides> 对 照 表 3 镰 孢 菌 菌 株 F. graminearum F. verticillioides 和 F. proliferatum 对 盆 栽 和 室 内 试 验 相 关 性 状 的 影 响 Table 3 Effect of F. graminearum, F. verticillioides and F. proliferatum on the relative traits in the potting medium and the laboratory trials 盆 栽 试 验 室 内 试 验 Potting medium trial Laboratory trial 菌 株 出 苗 数 苗 高 根 长 干 重 根 腐 种 子 / 胚 根 的 腐 烂 Strain ( 株 / 盆 ) (g) (0~4 级 ) (1~5 级 ) No. of seedlings Plant height Root length Dry weight Root decay Seed/radicle decay 郑 单 958 浚 单 20 郑 单 958 浚 单 20 郑 单 958 浚 单 20 郑 单 958 浚 单 20 郑 单 958 浚 单 20 郑 单 958 浚 单 20 F. graminearum 9.58 a 9.63 a b a a a c b 1.08 a 1.03 a 3.71 a 3.13 a F. verticillioides 9.42 a 9.29 a a a a b ab b 0.19 c 0.20 c 2.29 b 2.46 b F. proliferatum 9.67 a 9.00 a b b ab ab b c 0.63 b 0.43 b 2.38 b 2.17 c 对 照 (CK) 9.54 a 9.13 a ab a b b a a 0.00 d 0.00 d 1.00 c 1.00 d 注 : 小 写 字 母 表 示 纵 向 比 较 平 均 数 的 显 著 性 (P<0.05) 下 表 同 Note: Means in a column followed by the same letter do not different significantly(p<0.05). The same as the following tables. 两 个 玉 米 品 种 的 5 种 种 子 处 理 和 对 照 相 比, 在 出 苗 数 苗 高 干 重 和 根 腐 性 状 方 面 差 别 均 不 显 著 ( 表 4); 对 于 根 长, 两 个 品 种 经 药 剂 拌 种 处 理 均 大 于 对 照, 但 郑 单 958 种 子 处 理 间 及 与 对 照 相 比 均 不 显 著 ; 浚 单 20 种 子 处 理 中 除 用 咯 菌 腈 + 精 甲 霜 灵 拌 种 的 根 长 显 著 大 于 对 照 以 外, 其 余 处 理 相 比 均 不 显 著 Table 4 表 4 种 子 处 理 对 盆 栽 和 室 内 试 验 相 关 性 状 的 影 响 Effect of fungicidal seed treatments on the relative traits in the potting medium and the laboratory trials 盆 栽 试 验 室 内 试 验 Potting medium trial Laboratory trial 种 子 处 理 Seed treatment 出 苗 数 ( 株 / 盆 ) 苗 高 根 长 干 重 (g) 根 腐 (0~4 级 ) 种 子 / 胚 根 的 腐 烂 (1~5 级 ) No. of seedlings Plant height Root length Dry weight Root decay Seed/radicle decay 郑 单 958 浚 单 20 郑 单 958 浚 单 20 郑 单 958 浚 单 20 郑 单 958 浚 单 20 郑 单 958 浚 单 20 郑 单 958 浚 单 20 嘧 菌 脂 9.63 a 9.75 a a a a ab a a 0.40 a 0.38 a 2.69 a 2.69 a 咯 菌 腈 + 精 甲 霜 灵 9.25 a 8.88 a a a a a a a 0.46 a 0.38 a 2.19 b 2.06 b 克 菌 丹 9.44 a 9.31 a a a a ab a a 0.41 a 0.41 a 2.19 b 1.88 b 嘧 菌 脂 + 克 菌 丹 9.75 a 9.06 a a a a ab a a 0.60 a 0.42 a 2.06 b 1.88 b 咯 菌 腈 9.75 a 9.06 a a a a ab a a 0.51 a 0.51 a 2.00 b 1.75 b 对 照 (CK) 9.50 a 9.50 a a a a b a a 0.46 a 0.39 a 2.94 a 2.88 a 2.2 室 内 试 验 培 养 皿 法 的 方 差 分 析 结 果 表 明, 除 了 品 种 种 子 处 理 间 的 互 作 效 应 不 显 著 以 外, 其 余 变 异 来 源 均 为 显 著 或 极 显 著 ( 表 2) 两 个 品 种 的 接 菌 处 理 与 对 照 差 别 均 显 著 ( 表 3) 对 于 郑 单 958, 接 种 F. graminearum 其 种 子 发 芽 及 腐 烂 严 重 程 度 显 著 于 F. verticillioides 和 F. prolifera 原 tum, 而 后 两 者 间 的 差 别 不 显 著 ; 对 于 浚 单 20,3 种 镰 孢 菌 接 种 处 理 间 存 在 显 著 差 别, 其 中 腐 烂 严 重 度 依 次 为 F. graminearum >F. verticillioides >F. prolifera 原 tum> 对 照 同 一 菌 株, 两 个 品 种 间 种 子 腐 烂 严 重 度 的 变 化 没 有 一 致 性 进 一 步 对 种 子 处 理 间 进 行 比 较, 培 养 皿 法 的 结 果 表 明, 两 个 品 种 经 药 剂 拌 种 的 腐 烂 程 度 均 低 于 对 照 ( 表 4), 除 了 嘧 菌 脂 拌 种 处 理 和 对 照 差 别 不 显 著 以 外, 其 余 拌 种 处 理 均 和 对 照 差 别 显 著 两 个 品 种 药 剂
5 124 玉 米 科 学 21 卷 拌 种 处 理 中 嘧 菌 脂 拌 种 处 理 的 腐 烂 程 度 显 著 高 于 其 余 4 种 药 剂 处 理, 而 其 余 4 种 药 剂 处 理 间 差 别 不 显 著 整 体 上 来 说, 咯 菌 腈 拌 种 处 理 效 果 最 好, 克 菌 丹 或 嘧 菌 脂 + 克 菌 丹 的 效 果 次 之 统 计 分 析 结 果 表 明, 菌 株 与 拌 种 处 理 间 具 有 显 著 的 互 作, 菌 株 间 相 比,F. graminearum 比 F. verticil 原 lioides 和 F. proliferatum 具 有 更 强 的 侵 染 力, 各 个 种 子 处 理 中 接 种 F. graminearum 的 腐 烂 程 度 均 显 著 高 于 接 种 F. verticillioides 和 F. proliferatum 及 对 照 ( 表 5), 而 F. verticillioides 和 F. proliferatum 间 差 别 均 不 显 著 从 菌 落 形 态 上 观 察, 在 菌 株 间 及 种 子 处 理 间 也 有 一 些 不 同, 接 种 F. graminearum 的 所 有 种 子 处 理 均 没 有 抑 菌 圈 形 成, 而 接 种 F. verticillioides 和 F. proliferatum 菌 株 培 养 皿, 经 克 菌 丹 或 克 菌 丹 + 嘧 菌 脂 处 理 的 两 个 品 种, 在 接 种 11 d 后, 从 培 养 皿 背 面 观 察, 有 一 个 环 形 的 抑 菌 圈, 但 接 种 F. verticil 原 lioides 的 更 明 显, 而 相 对 防 效 较 好 的 咯 菌 腈 处 理 和 单 独 使 用 的 嘧 菌 脂 处 理, 并 没 有 发 现 形 成 抑 菌 圈 现 象 ( 图 1) Table 5 表 5 培 养 皿 法 接 种 不 同 镰 孢 菌 和 不 同 种 子 处 理 的 相 互 影 响 Interactional effects of fungicidal seed treatments on seed/radicle decay on an artificial culture medium with isolates of three Fusarium specie 种 子 处 理 Seed treatment 禾 谷 镰 孢 菌 F. graminearum 镰 孢 菌 Fusarium species 轮 枝 镰 孢 菌 层 出 镰 孢 菌 F. verticillioides F. proliferatum 对 照 Control 均 值 Mean 嘧 菌 脂 3.75 a AB 3.25 b A 2.75 b AB 1.00 c A 2.69 咯 菌 腈 + 精 甲 霜 灵 3.25 a B 2.00 b B 2.25 b B 1.00 c A 2.13 克 菌 丹 3.38 a B 2.00 b B 1.75 b BC 1.00 c A 2.03 嘧 菌 脂 + 克 菌 丹 2.88 a B 2.00 b B 2.00 b BC 1.00 c A 1.97 咯 菌 腈 3.25 a B 1.63 b B 1.63 b C 1.00 c A 1.88 对 照 (CK) 4.00 a A 3.38 b A 3.25 b A 1.00 c A 2.91 均 值 注 : 小 写 字 母 表 示 横 向 相 比, 大 写 字 母 表 示 纵 向 相 比,P=0.05 Note: Transverse (lowercase) and length ways (capital letter) test of significant difference at the P=0.05 level. A B C D E F 注 :A 为 F. graminearum+ 咯 菌 腈 ;B 为 F. verticillioides+ 克 菌 丹 ;C 为 F. proliferatum+ 克 菌 丹 ;D 为 F. verticillioides+ 咯 菌 腈 ;E 为 F. verticillioides;f 为 F. verticillioides+ 克 菌 丹 Note: A, F. graminearum + fludioxonil; B, F. verticillioides + captan; C, F. proliferatum + captan; D, F. verticillioide + fludioxonil; E, F. verti 原 cillioides; F, F. verticillioides + captan. Fig.1 图 1 培 养 皿 法 接 种 不 同 镰 孢 菌 的 郑 单 958 幼 芽 Maize seedlings grown of Zhengdan958 in artificially infested with Fusarium species using a petri plate assay
6 5 期 郝 俊 杰 等 : 杀 菌 剂 种 子 处 理 对 镰 孢 菌 侵 染 玉 米 的 影 响 125 同 一 镰 孢 菌 菌 株, 不 同 的 种 子 处 理 和 对 照 相 比, 除 嘧 菌 脂 处 理 和 对 照 差 别 不 显 著 以 外, 其 余 4 种 种 子 处 理 均 与 对 照 差 别 显 著 ( 表 5) 接 种 F. graminearum 的 种 子 处 理 间 差 别 均 不 显 著 ; 接 种 F. verticillioides 的 种 子 处 理 间, 经 嘧 菌 脂 拌 种 的 腐 烂 程 度 显 著 高 于 其 余 4 种 种 子 处 理, 而 其 余 4 种 处 理 间 差 别 不 显 著, 但 以 咯 菌 腈 处 理 的 危 害 程 度 最 轻 ; 接 种 F. prolifera 原 tum 的 种 子 处 理 间 相 比, 同 样 以 咯 菌 腈 处 理 的 危 害 程 度 最 轻, 其 与 嘧 菌 脂 及 咯 菌 腈 + 精 甲 霜 灵 差 别 显 著, 其 余 均 不 显 著 总 的 来 说, 咯 菌 腈 对 镰 孢 菌 的 防 治 效 果 最 好 3 讨 论 本 文 采 用 室 外 和 室 内 两 种 方 法 对 相 同 的 种 子 菌 株 种 子 处 理 进 行 比 较 分 析, 盆 栽 试 验 调 查 的 几 个 性 状 中, 除 菌 株 间 效 应 以 外, 多 数 效 应 不 显 著, 而 培 养 皿 法 的 结 果 表 明, 多 数 效 应 表 现 为 显 著, 二 者 方 差 分 析 的 结 果 差 别 较 大 两 种 试 验 方 法 的 结 果 均 表 明, F. graminearum 菌 株 比 F. verticillioides 和 F. proliferatum 菌 株 具 有 更 强 的 侵 染 力, 这 与 Munkvold & O Mara 的 研 究 结 果 相 同 对 于 种 子 处 理 试 验, 已 [13~15] 发 表 的 研 究 采 用 的 方 法 有 多 环 境 下 的 大 田 试 验 温 室 条 件 下 的 盆 栽 试 验 或 受 环 境 影 响 较 小 的 实 验 室 内 的 检 测 等 尽 管 大 田 试 验 能 够 为 种 子 处 理 的 效 果 提 供 关 键 的 数 据, 但 不 同 地 点 或 环 境 中 可 能 存 在 不 同 的 病 原 菌 和 微 生 物 及 他 们 间 的 互 作 等, 很 难 明 确 某 一 拌 种 处 理 或 杀 菌 剂 对 特 定 真 菌 种 的 效 果, 且 大 田 试 验 存 在 许 多 不 稳 定 的 因 素, 比 如 Bradley 对 于 大 豆 种 子 处 理 试 验 结 果 表 明, 多 数 环 境 下 产 量 和 根 部 性 状 没 有 明 显 的 差 别 本 文 采 用 盆 栽 试 验 方 法, 主 要 参 考 Lamprecht & Tewoldemedhin 在 分 析 F. graminearum 复 合 种 中 不 同 进 化 种 致 病 力 差 别 的 试 验 方 法, 主 要 区 别 在 于 本 文 将 盆 栽 试 验 置 于 室 外, 而 后 者 在 温 室 中 进 行, 这 可 能 造 成 根 腐 程 度 存 在 差 别 Lamprecht & Tewoldemedhin 的 结 果 表 明, 进 化 种 的 根 腐 级 别 在 1~3 级 之 间 相 比 较,Munkvold & O Mara 采 用 的 是 将 一 定 浓 度 的 镰 孢 菌 孢 子 悬 浮 液 接 入 基 质 中, 将 其 置 于 温 室 中 诱 导 其 发 病, 对 多 个 性 状 来 说, 种 子 处 理 间 除 了 苯 醚 甲 环 唑 与 对 照 间 表 现 显 著 差 别 以 外, 其 余 处 理 间 均 不 显 著, 同 本 文 的 结 果 较 相 似, 处 理 间 变 异 较 小 尽 管 本 文 的 接 菌 量 已 经 超 过 Lamprecht & Tewoldemedhin 的 实 验 接 菌 量, 但 由 于 本 研 究 的 盆 栽 试 验 置 于 室 外, 不 能 控 制 温 度 和 空 气 湿 度 以 及 光 照 的 变 化, 受 环 境 的 影 响 较 大, 发 病 级 别 平 均 多 在 1 级 以 下, 发 病 较 轻, 没 有 充 分 体 现 本 文 镰 孢 菌 菌 株 的 致 病 力, 导 致 不 能 真 正 反 映 不 同 种 子 处 理 对 不 同 镰 孢 菌 的 反 应 培 养 皿 法 研 究 结 果 表 明, 多 个 变 异 来 源 是 显 著 的, 充 分 地 说 明 试 验 方 法 的 灵 敏 性, 该 方 法 还 被 用 来 分 析 不 同 F. graminearum 菌 株 在 玉 米 和 大 豆 上 致 病 力 的 差 别 同 样,Munkvold & O Mara 也 采 用 培 养 皿 法 研 究 了 镰 孢 菌 和 种 子 处 理 的 相 互 影 响, 不 同 的 是 前 者 采 用 的 是 在 培 养 基 上 接 种 一 定 量 的 孢 子 悬 浮 液, 而 本 文 接 种 的 是 一 定 体 积 的 菌 落, 二 者 的 结 果 均 体 现 了 该 方 法 的 灵 敏 性, 且 本 文 另 外 发 现 接 种 F. verticillioides 和 F. proliferatum 菌 株 的 培 养 皿, 经 克 菌 丹 或 克 菌 丹 + 嘧 菌 脂 处 理 有 一 个 明 显 的 抑 菌 圈, 表 明 克 菌 丹 与 不 同 镰 孢 菌 种 之 间 的 互 作 有 差 别, 这 可 能 与 克 菌 丹 的 作 用 机 理 有 关 克 菌 丹 为 广 谱 非 内 吸 性 杀 菌 剂, 以 保 护 作 用 为 主, 兼 有 一 定 治 疗 作 用 ; 嘧 菌 脂 也 为 广 谱 性 杀 菌 剂, 但 具 有 保 护 和 治 疗 作 用, 有 渗 透 和 内 吸 活 性, 持 效 期 15 d 左 右 两 种 评 价 方 法 相 比, 实 验 室 内 的 方 法 比 盆 栽 方 法 更 加 敏 感 和 节 约 时 间 两 种 方 法 均 表 明,F. graminearum 具 有 更 强 的 致 病 力, 但 室 外 的 盆 栽 试 验 表 明, 多 数 性 状 的 不 同 种 子 处 理 间 没 有 显 著 差 别, 就 根 长 和 干 重 的 性 状 来 说, 使 用 咯 菌 腈 处 理 的 效 果 相 对 较 好 ; 室 内 的 结 果 发 现, 含 有 咯 菌 腈 和 克 菌 丹 处 理 的 均 具 有 明 显 的 效 果, 其 中 以 单 独 使 用 咯 菌 腈 效 果 最 好, 盆 栽 试 验 的 结 果 也 与 其 相 似 Munkvold & O Mara 发 现 苯 醚 甲 环 唑 在 阻 止 菌 落 定 殖 和 胚 根 腐 烂 方 面 比 咯 菌 腈 效 果 要 好, 但 咯 菌 腈 能 更 快 地 促 进 胚 根 生 长 ;Solorzano & Malvick 的 研 究 也 表 明, 咯 菌 腈 在 提 高 玉 米 出 苗 群 体 和 产 量 方 面 具 有 较 好 的 效 果, 本 试 验 研 究 结 果 与 其 相 似 此 外, 室 内 的 培 养 皿 法 还 表 明, 杀 菌 剂 对 不 同 镰 孢 菌 菌 株 具 有 不 同 的 影 响, 所 有 杀 菌 剂 处 理 对 F. graminearum 的 效 果 均 差 于 对 F. proliferatum 和 F. verticillioides 的 效 果 总 的 比 较 嘧 菌 脂 的 效 果 最 差, 单 独 使 用 咯 菌 腈 的 效 果 最 好, 甚 至 好 于 咯 菌 腈 + 精 甲 霜 灵 复 用 的 效 果, 这 可 能 与 其 作 用 对 象 有 关 已 有 报 道 发 现 咯 菌 腈 对 Rhizoctonia 和 Fusarium spp. 有 效 果, 对 Phytophthora 和 Pythium spp. 没 有 活 性, 咯 菌 腈 主 要 通 过 抑 制 与 葡 萄 糖 磷 酰 化 有 关 的 转 运 来 抑 制 菌 丝 生 长, 属 于 非 内 吸 性 杀 菌 剂, 用 于 种 子 处 理 可 防 治 种 子 带 菌 及 土 壤 传 播 的 真 菌 病 害, 持 效 期 长 甲 霜 灵 和 精 甲 霜 灵 对 卵 菌 纲 的 相 关 病 [16] 原 菌 有 较 好 的 作 用
7 126 玉 米 科 学 21 卷 参 考 文 献 : [1] McGee, D C. Seed pathology: its place in modern seed production[j]. Plant Dis., 1981, 65: [2] Solorzano C D, Malvick D K. Effects of fungicide seed treatments on germination, population, and yield of maize grown from seed infected with fungal pathogens[j]. Field Crops Research, 2011, 122: [3] Mao W, Lewis J A, Hebbar P K, et al. Seed treatment with a fungal or a bacterial antagonist for reducing corn damping-off caused by species of Pythium and Fusarium[J]. Plant Dis., 1997, 81: [4] Kabeere F, Hampton J G, Hill M J. Transmission of Fusarium gramin 原 earum Schwabe from maize seeds to seedlings [J]. Seed Sci. Technol, 1997, 25: [5] Munkvold G P, O Mara J K. Laboratory and growth chamber evaluation of fungicidal seed treatments for maize seedling blight caused by Fusarium species[j]. Plant Dis., 2002, 86: [6] Wilke A L, Bronson C R, Tomas A, et al. Seed transmission of Fusari 原 um verticillioides in maize plants grown under three different temperature regimes[j]. Plant Dis., 2007, 91: [7] Cotten T K, Munkvold G P. Survival of Fusarium moniliforme, F. pro 原 liferatum, and F. subglutinans in maize stalk residue[j]. Phytopathology, 1998, 88: [8] Carter J P, Rezanoor H N, Holden D, et al. Variation in pathogenicity associated with the genetic diversity of Fusarium graminearum[j]. Eur. J. Plant Pathol, 2002, 108: [9] Broders K D, Lipps P E, Paul P A, et al. Evaluation of Fusarium graminearum associated with corn and soybean seed and seedling disease in Ohio[J]. Plant Dis., 2007, 91: [10] Munkvold G P. Seed pathology progress in academia and industry[j]. Annu. Rev. Phytopathol, 2009, 47: [11] 王 晓 鸣, 石 洁, 晋 齐 鸣, 等. 玉 米 病 虫 害 田 间 手 册 - 病 虫 害 鉴 别 与 抗 性 鉴 定 [M]. 北 京 : 中 国 农 业 科 学 技 术 出 版 社,2010. [12] Lamprecht S C, Tewoldemedhin Y T, Botha W J, et al. Fusarium graminearum species complex associated with maize crowns and roots in the KwaZulu-Natal province of South Africa[J]. Plant Dis., 2011, 95: [13] Bradley C A. Effect of fungicide seed treatments on stand establishment, seedling disease, and yield of soybean in North Dakota[J]. Plant Dis., 2008, 92: [14] Munkvold G P, Shriver J M. Evaluation of seed treatment fungicides for corn[j]. Fungicide and Nematicide Tests, 2000, 55: 432. [15] Munkvold G P, Carlton W M. Evaluation of seed treatment fungicides for corn[j].fungicide and Nematicide Tests, 1996, 51: 286. [16] Hewitt H G. Fungicides in Crop Protection[M]. New York: CAB International, ( 责 任 编 辑 : 高 阳 ) ( 上 接 第 119 页 ) 的 产 量 及 产 量 构 成 因 素 的 影 响 趋 势 是 一 致 的 除 子 粒 含 水 率 以 外, 百 粒 重 每 穗 粒 数 和 产 量 均 随 施 氮 量 表 现 出 先 增 加 后 降 低 的 趋 势 此 外, 郑 单 958 和 先 玉 335 产 量 随 施 氮 量 的 增 加 均 呈 单 峰 曲 线 变 化, 拟 合 系 数 达 极 显 著 水 平 (P<0.01) 不 同 施 氮 水 平 下 先 玉 335 产 量 高 于 郑 单 958, 差 异 均 达 显 著 水 平 (P<0.05) 参 考 文 献 : [1] 李 维 岳. 吉 林 玉 米 [M]. 长 春 : 吉 林 科 技 出 版 社,2000. [2] 石 德 权, 郭 庆 法, 汪 黎 明, 等. 我 国 玉 米 品 质 现 状 问 题 及 发 展 优 质 食 用 玉 米 对 策 [J]. 玉 米 科 学,2001,9(2):3-7. [3] 李 楠, 刘 淑 霞, 刘 伟, 等. 草 原 土 壤 施 用 复 混 肥 的 研 究 [J]. 草 业 学 报,2002,11(1): [4] 刘 海 龙, 何 萍, 金 继 运, 等. 施 氮 对 高 淀 粉 玉 米 和 普 通 玉 米 子 粒 可 溶 性 糖 和 淀 粉 积 累 的 影 响 [J]. 植 物 营 养 与 肥 料 学 报,2009,15 (3): [5] 韩 守 良. 高 油 玉 米 子 粒 含 油 率 脂 肪 酸 组 成 酯 酶 同 工 酶 活 性 变 化 规 律 及 其 子 粒 品 质 影 响 的 研 究 [M]. 北 京 : 中 国 农 业 大 学 出 版 社,1995. [6] 詹 其 厚. 氮 肥 不 同 用 量 对 玉 米 产 量 的 影 响 及 肥 效 分 析 [J]. 安 徽 农 业 科 学,1997,25(4): [7] 杨 艳 涛, 秦 富. 当 前 玉 米 市 场 贸 易 及 产 业 政 策 分 析 [J]. 国 家 农 业 政 策 分 析 与 决 策 支 持 系 统 开 放 实 验 室 研 究 简 报,2013,256(2): 1-8. [8] 姜 艳 喜, 王 振 华, 金 益 林, 等. 玉 米 收 获 期 子 粒 含 水 量 相 关 性 状 的 遗 传 及 育 种 策 略 [J]. 玉 米 科 学,2004,12(1): [9] Troyer A F, Ambrose W B. Plant characteristics affecting field drying rate of ear corn[j]. Crop Science, 1971, 11: ( 责 任 编 辑 : 胡 娟 )
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