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1 动 物 的 选 择 与 应 用 ( 一 ) 口 服 避 孕 药 物 的 筛 选 研 究 目 前 国 内 外 广 泛 应 用 的 口 服 避 孕 药 ( 孕 激 素 与 雌 激 素 的 复 合 片 以 及 单 纯 孕 激 素 药 片 ) 其 避 孕 效 果 都 非 常 好, 但 还 存 在 一 定 副 作 用 为 了 提 高 口 服 避 孕 药 的 可 接 受 率, 有 必 要 寻 找 更 加 理 想 的 有 效 安 全 经 济 方 便 的 药 物 筛 选 口 服 避 孕 药 的 实 验 动 物 多 使 用 啮 齿 类 实 验 动 物, 因 为 它 们 具 有 规 律 的 动 情 周 期, 排 卵 有 明 显 的 指 标, 易 于 检 测, 价 格 便 宜, 而 具 有 月 经 周 期 的 灵 长 类 动 物 反 而 不 是 都 被 选 择 的 对 象 因 为 这 类 动 物 来 源 困 难, 价 格 昂 贵, 排 卵 和 月 经 周 期 难 于 检 测 当 动 物 实 验 证 实 某 药 物 有 抗 生 育 的 效 果 后, 还 必 须 进 行 各 种 药 理 实 验 1. 孕 激 素 活 性 测 定 根 据 Mcphail 的 方 法, 以 未 成 熟 雌 性 家 兔 子 宫 内 膜 的 变 化 为 观 察 指 标 ; 2. 妊 娠 维 持 实 验 一 般 选 大 鼠 为 动 物 模 型 ; 3. 雌 激 素 活 性 及 抗 雌 激 素 活 性 测 定 用 未 成 年 或 去 卵 巢 未 成 熟 大 鼠 为 动 物 模 型, 以 子 宫 称 重 或 阴 道 涂 片 为 观 察 指 标 ; 4. 雄 激 素 活 性 及 抗 雄 激 素 活 性 测 定 用 大 鼠 或 小 鼠 为 动 物 模 型, 以 前 列 腺 腹 侧 及 储 精 囊 称 重 为 观 察 指 标 ; 5. 对 促 性 腺 激 素 分 泌 的 影 响 用 啮 齿 类 或 其 它 种 类 动 物 为 实 验 模 型, 以 是 否 抑 制 排 卵 或 测 定 外 周 血 的 促 性 腺 激 素 含 量 为 观 察 指 标 ; 6. 蜕 镇 痛 形 成 实 验 用 小 鼠 为 动 物 模 型 ; 7. 糖 皮 质 激 素 活 性 测 定 用 大 量 为 动 物 模 型 以 上 7 个 为 基 本 实 验, 根 据 需 要 还 可 以 增 添 其 它 实 验 ( 二 ) 避 孕 药 物 的 药 理 研 究 1. 女 用 避 孕 药 物 研 究 最 基 本 方 法 是 抗 生 育 实 验, 就 是 在 与 雄 性 动 物 合 笼 前 和 合 笼 交 配 期 间, 给 雌 性 动 物 服 药, 观 察 药 物 对 生 育 的 影 响 以 检 查 雌 性 动 物 怀 孕 百 分 率 和 每 只 孕 鼠 之 胚 胎 数 为 指 标 如 果 能 找 到 一 种 药 具 有 防 止 受 精 卵 着 床 的 作 用 或 中 断 早 期 妊 娠 的 作 用, 那 就 不 必 天 天 服 药, 而 只 在 需 要 时 服 用 这 是 避 孕 药 研 究 工 作 者 多 年 来 的 一 项 设 想 常 需 要 作 抗 着 床 和 抗 早 孕 实 验 抗 着 床 实 验 是 将 雌 鼠 与 雄 鼠 合 笼, 每 天 上 午 检 查 雌 鼠 阴 道 口 有 无 阴 栓, 于 出 现 阴 栓 后 第 1~

2 5 天, 每 日 给 药 一 次, 于 阴 栓 出 现 后 第 12 天 处 死 动 物, 以 胚 胎 数 和 怀 孕 百 分 率 为 指 标 阴 栓 是 某 些 啮 齿 类 动 物 在 交 配 后, 随 即 形 成 的 一 种 白 色 浆 液 性 物 质, 堵 塞 在 阴 道 至 子 宫 颈 的 腔 内, 称 为 阴 栓 (Vaginal plug) 是 检 查 动 物 已 否 交 配 的 一 种 标 志, 将 出 现 阴 栓 的 当 天 算 为 妊 娠 零 天 阴 栓 是 由 雄 鼠 精 囊 腺 和 凝 固 腺 的 分 泌 物 在 阴 道 内 凝 固 而 成 的 产 物 小 白 鼠 一 般 在 交 配 后 4~5 分 钟 内 形 成 大 的 阴 栓 可 凸 出 于 阴 道 口, 小 的 阴 道 或 子 宫 颈 内, 需 要 翻 开 阴 道 口 才 能 查 见 阴 栓 一 般 在 交 配 后 一 小 时 起 渐 渐 软 化, 经 16~24 小 时 后 脱 落 但 也 有 只 存 在 4~5 小 时, 而 最 多 的 可 存 在 48 小 时 以 上 小 鼠 阴 栓 比 较 牢 固, 大 鼠 的 阴 栓 不 牢 固, 容 易 脱 落, 所 以 检 查 大 鼠 阴 栓 时, 除 检 查 阴 道 外, 还 应 在 笼 底 寻 找 阴 栓 亦 可 用 生 理 盐 水 冲 洗 阴 道, 在 显 微 镜 下 检 查 冲 洗 液 中 有 无 精 子, 有 精 子 表 示 已 交 配 抗 早 孕 实 验 是 在 着 床 ( 出 现 阴 栓 后 第 5 天 着 床 ) 以 后 给 药, 一 般 于 阴 栓 出 现 后 第 6~9 天 连 续 给 药 4 天, 第 12 天 处 理, 以 检 查 胚 胎 数 和 死 胎 为 指 标 抗 生 育 抗 着 床 和 抗 早 孕 实 验 中 最 常 用 的 动 物 为 壮 年 的 28~35g 的 小 鼠, 也 可 用 体 重 200~250 体 重 的 大 鼠 在 探 讨 一 个 避 孕 药 的 作 用 原 理 时, 有 时 需 要 检 查 一 个 药 物 有 没 有 抑 制 排 卵 作 用 需 要 进 行 抗 排 卵 实 验, 常 选 用 体 重 2~3.5kg 的 雌 兔 进 行 实 验 2. 男 用 避 孕 药 物 研 究 长 期 以 来, 对 男 用 避 孕 药 的 研 究 不 很 重 现, 进 展 缓 慢 药 物 能 抑 制 精 子 的 生 成 过 程, 干 扰 男 性 生 殖 活 动 的 激 素 调 节 ; 干 扰 副 性 腺 和 改 变 精 液 的 理 化 特 性 等, 均 可 达 到 不 孕 的 目 的 现 在 认 为, 精 子 形 态 的 成 熟 是 在 睾 丸, 而 生 理 的 成 熟 是 在 副 睾 药 物 作 用 于 副 性 腺, 干 扰 精 子 成 熟 或 改 变 精 液 理 化 性 质 所 引 起 的 男 性 不 孕 似 较 理 想 常 选 用 成 年 雄 性 大 白 鼠 作 实 验, 如 观 察 药 物 对 大 白 鼠 生 育 力 的 影 响 ; 对 大 白 鼠 精 子 数 的 影 响 ; 对 大 白 鼠 精 子 活 动 力 的 影 响 以 及 对 雄 性 激 素 的 作 用 等 实 验 中 常 需 要 采 集 实 验 动 物 的 精 液, 采 集 的 方 法 有 电 刺 激 法 假 阴 道 法 按 摩 法 以 及 直 接 杀 取 法 电 刺 激 法 适 用 于 多 种 实 验 动 物, 尤 其 是 野 生 实 验 动 物 的 采 精, 其 原 理 是 通 过 刺 激 输 卵 管 壶 腹 附 近 的 神 经 末 稍, 引 起 低 级 射 精 中 枢 兴 奋 而 促 使 动 物 射 精 所 用 电 刺 激 采 精 器 的 主 要 技 术 参 数 为 : 电 源 电 压 - 交 流 220V; 输 出 可 调 电 压 0~20V; 可 高 频 率 20~60Hz: 输 出 电 流 0~1000mA: 输 出 波 形 - 正 弦 波 或 方 波 假 阴 道 法 是 用 硬 质 外 壳 衬 以 胶 质 内 胎 制 成 的 采 精 器 械, 内 部 注 以 温 水 和 充 气, 适 当 加 以 润 滑, 使 其 与 雌 性 动 物 生 殖 道 的 内 环 境 相 似, 以 诱 起 雄 性 动 物

3 射 精 常, 常 适 用 于 兔 的 采 精 猫 在 有 发 情 母 猫 引 诱 情 况 下, 当 公 猫 爬 跨 时, 也 可 使 用 此 法 采 精, 但 象 水 貂 那 样 在 交 配 时 雌 雄 动 物 长 时 间 紧 密 拥 抱 的 动 物, 无 法 使 用 假 阴 道 按 摩 法 主 要 用 于 狗 的 采 精, 这 是 因 为 狗 在 交 配 时, 雄 狗 阴 茎 的 球 状 海 绵 体 充 血 胀 大 并 和 雌 狗 的 阴 道 锁 结, 采 取 假 阴 道 法 采 精 有 一 定 困 难, 故 多 采 用 按 摩 法 狗 的 射 精 分 为 3 段, 前 段 为 尿 道 腺 的 分 泌 物, 约 为 0.25~2.0ml 的 透 明 液 体 : 中 段 排 出 的 是 浓 精, 约 0.5~3.0ml; 第 3 段 则 为 大 量 透 明 的 前 列 腺 分 泌 物, 量 可 达 3~20ml, 但 几 乎 不 含 精 子 按 摩 法 对 于 调 教 好 的 雄 狗 方 便 易 行, 并 可 存 细 胞 观 察 射 精 情 况, 收 集 所 需 部 分, 无 需 特 殊 设 备 但 不 能 用 于 野 生 犬 科 或 陌 生 猛 犬 直 接 杀 取 法 适 于 前 面 几 种 方 法 不 适 用 时 采 用, 如 小 白 鼠 水 貂 等, 系 将 动 物 处 死, 取 其 输 卵 管 和 附 睾 丸, 用 生 理 盐 水 或 其 它 专 门 稀 释 液 冲 洗, 制 成 精 子 悬 浮 液 备 用 常 用 实 验 动 物 采 精 方 法 和 精 液 特 点 见 表 表 各 种 动 物 精 液 采 取 方 法 和 精 液 特 点 动 物 采 取 法 交 配 射 精 颜 色 精 液 量 精 液 密 活 力 畸 形 ph 时 间 时 间 ( 毫 度 万 / 率 升 ) 立 方 毫 % 米 牛 假 阴 道 法 瞬 间 瞬 间 乳 白 5~6 90 ~ 卅 70< ~ 电 刺 激 法 马 假 阴 道 法 暂 时 数 秒 至 淡 50 ~ 20~30 同 上 ~ 阴 道 内 采 10 数 秒 取 猪 假 阴 道 法 10 分 5 ~ 10 灰 白 200 ~ 20 同 上 5~ ~ 分 绵 羊 假 阴 道 法 电 刺 激 法 瞬 间 瞬 间 乳 白 0.5 ~ 同 上 同 上 6.4 ~ 7.2 山 羊 同 上 同 上 同 上 乳 白 带 同 上 同 上 同 上 同 上 同 上 黄 狗 按 摩 法 10 分 1 分 乳 白 0.5 ~ 10~15 同 上 10 ~ 6.6 ~

4 假 阴 道 法 家 兔 假 阴 道 法 阴 道 内 采 取 10 秒 瞬 间 乳 白 0.5 ~ ~60 同 上 同 上 6.6 ~ 6.8 大 鼠 乙 醚 麻 醉 同 上 同 上 乳 白 同 上 0.1 同 上 - 鸡 电 刺 激 法 2 秒 1 秒 同 上 0.1 ~ 200 ~ 卄 < ~ 卅 70< 7.4 ( 三 ) 中 枢 神 经 系 统 对 促 性 腺 激 素 分 泌 的 调 节 作 用 研 究 不 同 动 物 的 中 枢 神 经 系 统 对 垂 体 促 性 腺 激 素 分 泌 的 调 节 是 有 很 大 差 异 的 如 灵 长 类 和 大 鼠 的 垂 体 以 同 样 的 方 式 对 促 黄 体 素 释 放 激 素 起 反 应, 并 以 同 样 的 形 式 被 大 剂 量 雌 激 素 或 雄 激 素 所 抑 制 这 两 种 动 物 的 中 枢 神 经 系 统, 在 自 发 性 排 卵 中 都 是 必 不 可 少 的, 这 是 它 们 的 共 同 点 但 调 节 大 鼠 促 性 腺 激 素 释 放 的 中 枢 是 视 前 结 节 系 统, 若 视 前 区 受 损, 则 在 排 卵 前 雌 激 素 不 能 导 致 促 黄 体 激 素 的 释 放 而 这 一 区 域 受 损 不 影 响 恒 河 猴 促 黄 体 激 素 的 释 放, 因 为 恒 河 猴 促 性 腺 素 释 放 的 调 节 中 枢 是 结 节 漏 头 斗 状 系 统, 这 是 它 们 的 不 同 点 在 中 枢 神 经 系 统 对 促 性 腺 激 素 调 节 的 研 究 中, 大 鼠 是 常 用 的 动 物 模 型, 因 这 方 面 已 积 累 了 大 量 的 有 关 研 究 资 料 : 价 格 便 宜, 易 于 饲 养, 有 规 律 的 性 周 期 便 于 检 测, 且 周 期 短, 易 于 安 排 实 验, 排 卵 前 有 自 发 的 LH 峰, 所 得 的 结 果 一 般 易 于 在 猴 子 身 上 得 到 重 复 阴 道 涂 片 可 以 准 确 地 判 断 大 鼠 和 小 鼠 动 情 周 期 的 各 个 阶 段, 从 而 可 推 测 排 卵 前 LH 峰 及 排 卵, 但 此 方 法 很 少 用 于 田 鼠, 因 为 田 鼠 在 动 情 周 期 阴 道 有 渗 出 物, 所 以 不 一 定 要 做 阴 道 涂 片 推 测 灵 长 类 LH 峰, 须 测 定 外 周 血 的 孕 激 素 水 平, 如 单 独 根 据 月 经 出 血 期 来 推 测 有 可 能 导 致 判 断 的 错 误 大 鼠 小 鼠 和 田 鼠 的 黄 体 期 不 能 自 发 地 变 成 功 能 性 黄 体, 在 正 常 情 况 下, 需 交 配 诱 发 黄 体 激 素 的 分 泌, 而 恒 河 猴 和 人 则 自 发 性 功 能 黄 体 家 兔 和 猫 是 诱 发 性 ( 交 配 ) 排 卵, 一 旦 排 卵 发 生, 则 黄 体 能 自 发 地 变 为 功 能 性 的 ( 四 ) 神 经 内 分 泌 学 研 究 通 过 对 人 性 行 为 的 内 分 泌 研 究, 发 现 人 类 性 活 动 大 多 可 以 用 动 物 实 验 来 阐 明, 而 最 好 的 动 物 模 型 不 一 定 是 灵 长 类 Nadle 分 析 了 大 猩 猩 黑 猩 猩 和 猩 猩 的

5 性 活 动 行 为, 结 果 发 现 在 新 皮 层 发 育 及 智 能 上, 他 们 大 体 上 是 相 等 的, 但 在 性 活 动 方 面 却 有 很 大 的 不 同, 大 猩 猩 交 配 大 多 集 中 在 月 经 周 期 中 期, 且 雌 性 动 物 起 主 导 作 用, 猩 猩 可 以 在 周 期 的 任 何 时 期 进 行 交 配, 没 有 明 显 的 排 卵 标 志, 雄 性 动 物 的 性 要 求 很 强 烈, 在 交 配 中 占 主 导 地 位, 黑 猩 猩 属 这 两 者 之 间 所 以 虽 然 灵 长 类 最 接 近 人 类, 但 用 它 作 神 经 内 分 泌 学 研 究 所 得 的 结 果 也 能 完 全 适 用 于 人, 而 较 小 的 动 物 如 大 鼠, 其 性 活 动 与 人 也 有 共 同 点, 如 在 大 鼠 的 动 物 实 验 及 人 类 的 临 床 观 察 中, 均 存 在 维 持 性 功 能 的 雄 性 激 素 水 平 比 维 持 生 育 功 能 的 水 平 低, 人 类 性 功 能 随 年 龄 的 增 长 而 减 退, 某 些 器 官 出 现 肥 大 等 变 化 在 大 鼠 也 都 有 发 生, 所 以 大 鼠 用 于 性 活 动 研 究, 也 是 一 个 较 好 的 模 型

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