表 1. Agilent Bio-Monolith Protein A 和 G 亲和色谱柱对不同 IgG 亚类的结合亲和性 [1,2] 抗体 Protein A Protein G 人人 IgG 人 IgG 人 ++++ 人 IgG
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- 婷璋 卢
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1 Bio-Monolith Protein G 色谱柱 更多 mab 滴度测定选择 应用简报 生物制剂与生物仿制药 作者 Phu T. Duong 安捷伦科技 ( 中国 ) 有限公司 前言 近年来, 单克隆抗体 (mab) 已成为可满足多种疾病治疗需求的主要生物制药产品 这些经特别设计的抗体具有特定基因构成, 能够更好地靶向病原 在这些抗体的开发过程中,Protein A 和 Protein G 分析型亲和色谱柱可用于测定各种细胞培养上清液中的抗体滴度或浓度, 以选出高产量的克隆 惰性聚合物 Monolith 可用作 Protein A 和 Protein G 色谱柱的担体 两种色谱柱都对抗体具有较高亲和性, 因此它们能够仅结合细胞培养上清液中的抗体 然而它们的选择性各有不同, 如表 1 所示 本应用简报主要介绍 Agilent Bio-Monolith Protein G 色谱柱 该色谱柱专为获得高速 高载样量而设计 文中给出的数据表明它同时具备线性与特异性 线性分析结果表明色谱柱在细胞培养上清液 mab 准确定量分析中的超高性能 此外, 使用寿命分析数据能够反映色谱柱具有高重现性 较长寿命以及出色的稳定性与低反压 Bio-Monolith Protein G 色谱柱是 Bio-Monolith Protein A 色谱柱的补充产品, 可为单克隆抗体滴度测定提供更多选择
2 表 1. Agilent Bio-Monolith Protein A 和 G 亲和色谱柱对不同 IgG 亚类的结合亲和性 [1,2] 抗体 Protein A Protein G 人人 IgG 人 IgG 人 ++++ 人 IgG 人 IgA ++ 人 IgD ++ 人 IgE ++ 人 IgM ++ 小鼠小鼠 IgG 小鼠 IgG2a 小鼠 IgG2b 小鼠 小鼠 IgM +/ 抗体片段人 Fab + + 人 F(ab )2 + + 人 scfv + + 人 Fc + + 人 K + + 人 l = 强亲和性 +++ = 中等亲和性 ++ = 弱亲和性 + = 微弱亲和性 = 无亲和性 材料与方法 磷酸二氢钠一水合物 ( 西格玛奥德里奇公司, 部件号 S3522, 分子量 ) 磷酸氢二钠二水合物 ( 西格玛, 部件号 71643, 分子量 ) 一水柠檬酸 ( 西格玛, 部件号 C7129, 分子量 21.14) 氯化钠 ( 西格玛, 部件号 S5886, 分子量 58.44) 磷酸,85%( 重量 %) 水溶液, 纯度为 99.99%( 基于痕量杂质检测 )( 西格玛, 部件号 ) 氢氧化钠溶液,5% 52% 水溶液,IC 洗脱液 (FLUKA 7264, 分子量 4) 甘氨酸 ( 用于电泳 ), 纯度 99%( 西格玛, 部件号 G8898, 分子量 75.7) 冰乙酸 ( 西格玛, 部件号 A9967, 分子量 6.5) 2 盐酸,36.5% 38.%, 生物试剂, 用于分子生物学研究 ( 西格玛, 部件号 H1758) 大肠杆菌细胞裂解试剂盒 ( 西格玛, 部件号 CB5) 中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞上清液和裂解液 昆虫细胞上清液 CHO 细胞衍生的人源单克隆抗体 (IgG2 和 ), 购自 CreativeBio Labs 方法 流动相 A 结合缓冲液与清洗缓冲液, 含有 5 mm 的磷酸钠缓冲液,pH 7.4 分别将 27.6 g 磷酸二氢钠一水合物与 35.6 g 磷酸氢二钠二水合物各溶解于 1 L 去离子水中, 制得两种储备液 (.2 M) 含有 5 mm 磷酸钠缓冲液与 5 mm 氯化钠的 2 L ph 7. 磷酸钠溶液的配制方法为 : 1. 将 195 ml 磷酸二氢钠一水合物储备液与 35 ml 磷酸氢二钠二水合物储备液混合 利用磁力搅拌器振摇混合 2. 加入 5.8 g 氯化钠, 并继续搅拌 3. 加入 1 L 去离子水 4. 测定溶液 ph, 用 NaOH 或 3 M 磷酸将 ph 调节至 将溶液倒入 2 L 容量瓶, 并加水定容至刻度 流动相 B 为含有.1 M 柠檬酸的 ph 2. 洗脱缓冲液, 配制方法是将 21 g 一水柠檬酸溶解于约 6 ml 水中并缓慢搅拌 利用 1 M HCl 将 ph 调节至 2., 然后倒入 1 L 容量瓶并加水稀释 CHO 细胞上清液 裂解液 昆虫细胞裂解液 ( 所有样品均经过离心 ) 以及人源单克隆抗体 IgG1 IgG2 和 均购自纽约的 Creative BioLabs 大肠杆菌裂解液根据西格玛奥德里奇公司的推荐方案制备 [3] 试剂盒包括细菌细胞裂解试剂 CelLytic B (5 ml) 溶菌酶溶液 (1 1 ml) 核酸酶(25 单位 ) 以及混合蛋白酶抑制剂 (5 ml) 裂解液的制备方法是将 1. g 细胞体加入 1 ml CelLytic B 试剂中, 然后添加.2 ml 溶菌酶.1 ml 蛋白酶抑制剂和 5 单位的核酸酶 将混合物短暂涡旋混合 1 min( 手动或使用振荡器 ), 以确保充分提取可溶性蛋白 将混合物以 5 rpm 离心 1 min, 使所有不溶物沉淀 将可溶性蛋白质成分 ( 上清液 ) 从细胞碎片 ( 沉于试管底部的胞体 ) 中小心除去 上清液中的蛋白质浓度可通过 Bradford 蛋白浓度分析法估计, 本例中为 4 mg/ml
3 根据本文所述, 将 IgG1 IgG2 或 加标至部分上清液中 利用结合缓冲液 ( 或缓冲液 A) 将上清液稀释至 1 mg/ml 的最终浓度, 然后向其中加入 2 mg/ml 经纯化的人源单克隆抗体 ( 如 IgG1 IgG2 或 等 ) 条件 色谱柱 : Agilent Bio-Monolith Protein G 亲和色谱柱, 直径 5.2 mm, 长 4.95 mm( 部件号 ) 结合缓冲液 : A:5 mm 磷酸钠,pH 7.4 洗脱缓冲液 : B:.1 M 柠檬酸,pH 2. 样品 : 参见色谱图 进样量 : 参见色谱图 流速 : 1. ml/min( 或参见色谱图 ) 梯度 : 时间 (min) % A 温度 : 25 C 检测器 : UV,28 nm 系统 : Agilent 126 Infinity 生物惰性四元液相色谱 结果与讨论 特异性与选择性 如表 1 所示,Protein G 色谱柱对不同人源单克隆抗体亚类的结合亲和性高于 Protein A 色谱柱, 并且只有 Protein G 对 亚类具有亲和性 图 1A 中的数据表明了 Bio-Monolith Protein G 色谱柱的特异性及其滴度监测能力, 即确定上清液中抗体是否存在及其浓度的能力 研究中使用含有纯化重组人源 mab (CHO 细胞上清液加标物 ) 的样品进样至色谱柱中 这一 mab 在 CHO 细胞系中得到了表达 数据表明 是由该色谱柱捕获并从中洗脱的唯一一种蛋白质, 流速 1. ml/min 时在 1.6 min 左右出峰, 其中所有宿主细胞蛋白质均未被色谱柱捕获, 而是以流穿峰形式被洗脱 为表明 Protein A 与 Protein G 色谱柱不同的选择性, 两种色谱柱中均分别进样单克隆抗体 IgG1 IgG2 和 进行了分析 上述两种色谱柱均可捕获 IgG1 和 IgG2 ( 相关数据未显示 ), 但 Bio-Monolith Protein A 未能捕获, 后者作为流穿峰被洗脱, 因此 仅可被 Bio-Monolith Protein G 捕获并从中洗脱 ( 对比图 1A 和 1B) (UV 28 nm) (UV 28 nm) , A Bio-Monolith Protein A (min) B Bio-Monolith Protein G CHO (min) 图 1. A) Bio-Monolith Protein A 色谱柱对 不具备结合力 以流穿峰形式被洗脱 2 mg/ml 人源 与结合缓冲液混合 ( 色谱柱进样量 3 µl) B) Agilent Bio-Monolith Protein G 色谱柱能专属性快速捕获加标 的收获细胞培养物中的 (5 µl 2. mg/ml 混合 1 mg/ml CHO 细胞上清液进样至色谱柱 ) 此外本研究还进行了更加可靠的检测来确证 Bio-Monolith Protein G 色谱柱的特异性, 即它对宿主细胞蛋白质并不具有结合亲和性 实验中使用的宿主细胞蛋白质来自大肠杆菌细胞裂解液 CHO 细胞裂解液 上清液以及昆虫细胞裂解液 上述裂解液中含有的宿主细胞蛋白质提取自含十二烷基硫酸钠 ( 可显著影响与色谱柱非特异性结合的物质 ) 的裂解缓冲液 这些样品中均不含抗体, 仅含有宿主蛋白质 进行这项检测的原因为, 如果色谱柱设计不合理, 处理棘手样品时将得到非特异性结果 图 2 表明色谱柱没有吸附任意宿主细胞上清液中的任何蛋白 所有宿主蛋白质均以流穿峰的形式被洗脱 数据表明 Bio-Monolith Protein G 色谱柱对宿主细胞蛋白质无亲和性 3
4 (UV 28 nm) (UV 28 nm) (UV 28 nm) (UV 28 nm) 图 2. 采用 Agilent Bio-Monolith Protein G 色谱柱与利用结合缓冲液稀释的 1 mg/ml 宿主细胞蛋白质得出的特异性分析结果 所有样品的进样量均为 5 µl A) 昆虫细胞裂解液,B) CHO 细胞上清液,C) CHO 细胞裂解液,D) 大肠杆菌裂解液 准确定量在开发初期阶段选择细胞系时 mab 滴度的准确定量至关重要, 生产阶段也是如此, 因为此时通过细胞培养上清液中的 mab 量即可确定最佳收获时间 为证明 Bio-Monolith Protein G 色谱柱在准确定量 mab 方面的能力, 本研究使用不同量 (µg) 的纯化 IgG 进样至色谱柱 将峰面积数据与生成的 IgG 量用于绘制线性曲线, 以确定分析准确性 图 3 为通过 Protein G 色谱柱得到的峰面积线性, 数据表明色谱柱可用于具有不同浓度范围的收获细胞培养介质中 mab 的定量分析 色谱柱最低进样量为 2µgIgG 进样 2µg 时, 信噪比不高于 1:1( 相关数据未显示 ) 这一色谱柱的最大载样量约为 4 5 µg IgG( 相关数据未显示 ), 涵盖了细胞系选择和生产过程中所能达到的量 (*S) IgG (μg) IgG1 IgG2 R 2 =.9959 R 2 =.996 R 2 =.9989 图 3. Agilent Bio-Monolith Protein G 色谱柱定量分析单克隆抗体 线性曲线包括 25 2 µg IgG 的峰面积数据 4
5 比其他供应商的 Protein G 色谱柱具有更宽的载样量范围图 4A 显示 Bio-Monolith Protein G 色谱柱与其他供应商的 mm,4å Protein G 色谱柱在宽 载样范围下的线性对比结果 安捷伦色谱柱能够达到 25 2 µg 的线性载样范围, 而其他色谱柱仅可 在 25 1 µg 内生成线性的数据, 与他们文献中的推荐范围一致 在较高载样范围下无法保持线性的原因是色谱柱无法在高载样量下保留所有物质 实际上在载样量为 2 µg 时, 其他供应商的 Protein G 色谱柱会出现 mab 的流穿峰 ( 部分 无法在色谱柱上保留, 并以流穿峰形式被洗脱 ), 如图 4B 所示 A R 2 =.9987 Agilent Bio-Monolith Protein G Protein G 14 (*S) Agilent Bio-Monolith Protein G (UV 28 nm) (μg) B Agilent Bio-Monolith Protein G 2 μg (UV 28 nm) Protein G μg (min) (min) 图 4. A) Agilent Bio-Monolith Protein G 色谱柱与其他供应商的 Protein G 色谱柱的线性载样范围对比 B) 在 2 µl 载样量下, 其他供应商的色谱柱出现了流穿峰, 而 Bio-Monolith Protein G 则未观察到流穿峰 说明 Bio-Monolith Protein G 具有更高载样量 5
6 快速分离 Bio-Monolith Protein G 专为快速分离而设计 图 5 通过 在 和 2.5 ml/min 等流速下的分析结果, 证明了此色谱柱在多种流速下的快速 mab 捕获和洗脱能力 ( 色谱柱的最高运行流速可达 3. ml/min, 相 关数据未显示 ) 表 2 展示了流速和运行梯度 峰的保留时间随流速升高而缩短 但所有流速下的相对峰面积均相似 这表明在所有流速条件下色谱柱均具有相似的回收率 ( 表 3) 表 2. 评估 Agilent Bio-Monolith Protein G 色谱柱保留性能时所采用的流速和运行梯度 时间 (min) %A %B 1. ml/min ml/min ml/min ml/min %B %B 2. ml/min %B 表 3. Agilent Bio-Monolith Protein G 色谱柱在所有流速下均表现出相似的流穿峰与 峰之比 流速 (ml/min) 峰总面积 (mauu*s) 流穿峰面积 (*S) 流穿峰相对峰面积 (%) (UV 28 nm) (UV 28 nm) (UV 28 nm) (UV 28 nm) %B ml/min %B %B %B %B (min) B% %B %B B% 1.5 ml/min %B B% 1. ml/min 图 5. 在多种流速下对 在 Agilent Bio-Monolith Protein G 色谱柱上结合性能的评估 进样量为 5 µl(2. mg/ml 混合 5 mg/ml CHO 细胞宿主蛋白质 ) 峰面积 (*S) , , , 相对峰面积 (%) %B B% 6
7 图 6 显示了色谱柱反压的线性曲线 当色谱柱流速在 ml/min 范围内以.5 ml/min 的增量增大时, 反压以线性方式增大 色谱柱的最大反压为 15 bar Bio-Monolith Protein G 色谱柱的常用分离流速为 1. ml/min 仪器流速设定在 1. ml/min 时, 色谱柱反压约为 24 bar 流速升高至 2.5 ml/min 时, 色谱柱反压升至约 6 bar 如前所述, 高反压对色谱柱 IgG 结合力的影响最小 (bar) R 2 = (ml/min) 图 6. 流速与反压之间的关系 Agilent Bio-Monolith Protein G 色谱柱的反压随流速线性升高而线性增加 对不同洗脱缓冲液的兼容性 图 7 显示了不同洗脱缓冲液对 Bio-Monolith Protein G 色谱柱的兼容性 峰可通过多种酸性洗脱液洗脱得到 表 4 展示了酸性洗脱液的强度和 ph 值 这些洗脱液都能够以相似的保留时间将 从色谱柱上洗脱下来 ( 其他 IgG 得到的数据与此类似 ), 而 12 mm HCl 除外 ; 与其他洗脱缓冲液洗脱的 峰保留时间相比, 12 mm HCl 得到的 峰保留时间更长 将浓度提高至.1 M 后, 这种洗脱缓冲液的强度则能够获得与其他洗脱缓冲液类似的 保留时间 同样值得注意的是, 每种酸性洗脱液得到的 峰在峰宽和拖尾因子方面均会稍有不同 这表明不同的 IgG 条件下, 酸性洗脱液类型及其强度会对保留时间 峰宽以及拖尾因子产生不同影响 因此必须通过实验根据 IgG 和数据预期来确定酸性洗脱液种类及其浓度 表 4. 不同酸性洗脱液对 IgG 的兼容性与作用效果 峰编号酸性 PW 5% TF 1 ml/min 下的压力 (bar) 1.1 M 柠檬酸,pH M HCl % 乙酸 M 甘氨酸 mm HCl (UV 28 nm) (min) 图 7. 使用不同酸性洗脱液从 Agilent Bio-Monolith Protein G 色谱柱上洗脱得到的人源 峰 7
8 原位清洗后的色谱柱性能恢复图 8 表明 Bio-Monolith Protein G 色谱柱能够在原位清洗 (CIP) 后恢复其全部性能 方法是在使用加标 的 CHO 细胞上清液和裂解液进样 1 次以上之后, 使用 进样 数据表明色谱柱杂质较多时, 的峰宽增大, 峰高降低 ( 对比原位清洗前后的图 8A 和 8B) 图 8A 中的数据还表明部分 未被色谱柱捕获, 而是以流穿峰形式被洗脱 色谱柱经清洗后恢复了全部性能, 因此能够捕获全部 ( 见图 8B) 图 9 显示色谱柱正确清洗前后宽载样动态范围下的线性对比数据 CIP 前后的 峰面积非常接近并且具有良好的线性 数据表明色谱柱得到了有效清洗并适用于表 5 中的清洗方案 (UV 28 nm) (UV 28 nm) A B (min) (min) 图 8. A) 在超过 1 次进样后对 Agilent Bio-Monolith Protein G 色谱柱进样 色谱柱有较多杂质 B) 色谱柱经清洗后恢复了全部性能 表 5. Agilent Bio-Monolith Protein G 色谱柱的原位清洗方案 为防止污染物进入色谱柱的剩余部位, 首先应当以.2.5 ml/min 的流速反向冲洗色谱柱 步骤 解决方案 色谱柱冲洗用量 (CV) 1.1 M NaOH 去离子水 mm 磷酸钠缓冲液,pH 使用结合缓冲液重新平衡色谱柱 5 8
9 有些情况下, 仅仅对整体柱进行简单的再生是不够的 样品分子可能无法从色谱柱上彻底洗脱, 甚至有可能沉淀在色谱柱中 这类污染物沉积在整体柱上, 可能导致分离度和键合能力的降低 反压升高, 或使色谱柱完全堵塞 因此, 必须根据样品中存在的污染物类型设计特殊的原位清洗程序 有关再生建议的更多信息请参见用户指南 (*S) (μg) CIP CIP R² =.9997 R² =.9959 图 9. 宽载样动态范围内的 Agilent Bio-Monolith Protein G 色谱柱在原位清洗前后的线性对比 使用寿命与重现性 图 1 和 11 显示了 和 CHO 细胞上清液以及裂解液在 Bio-Monolith Protein G 色谱柱中连续 1 次进样后的结果 色谱柱首先接受 CHO 细胞上清液与裂解液的 4 次进样, 然后接受 1 次 进样 运行中将序列设置为不停顿的 1 次进样以实现清洗目的 峰保留时间与峰面积的完整性 ( 图 9) 以及 的峰拖尾因子和峰宽 ( 图 1) 几乎未发生变化, 并且未对色谱柱的结合 分离和洗脱性能产生影响 图 11 表明在 1 次进样研究中峰宽和拖尾因子所受影响极小 (min) A B 图 1. Agilent Bio-Monolith Protein G 色谱柱在原位清洗之前进样 1 次得到的重现性 A) 保留时间 B) 峰面积 每 4 次进样后记录 1 次进样, 共计进行超过 1 次进样 的保留时间和峰宽未发生变化 ( 标准偏差 = 2.5,n = 1) 图 11. 在 Agilent Bio-Monolith Protein G 色谱柱中进样超过 1 次时的峰宽和拖尾因子一致性 9
10 结论 Agilent Bio-Monolith Protein G 色谱柱对单克隆抗体亚类具有极高的亲和性 显然, 该色谱柱能够捕获并准确定量宽线性载样范围内的上清液中的 mab 色谱柱能够在不同的流速下有效地定量分析单克隆抗体, 并且不影响数据质量 运行反压明显较低, 说明 Bio-Monolith Protein G 色谱柱能够在低于 6 bar 的 HPLC 仪器中使用 该色谱柱可配合不同酸性洗脱液灵活使用, 因此可使实验设计变得简单直观 Agilent Bio-Monolith Protein A 和 G 色谱柱可互相补充, 因此 Protein G 色谱柱对 Protein A 色谱柱无法结合的 mab 具有亲和性, 反之亦然 这两种色谱柱能为更广泛的 mab 异构体快速滴度测定提供更多选择 参考文献 1. Richman, D. D.; Cleveland, P. H.; Oxman, M. N.; Johnson, K. M. The binding of 1. Staphylococci protein A by the sera of different animal species. J. Immunol. 1982, 128, Frank, M. B. Antibody Binding to Protein A and Protein G beads; 5. In Molecular Biology Protocols; Frank, M. B., Ed.; Oklahoma Medical Research Foundation, Oklahoma City, USA, Anon. CelLytic B Plus Kit. Catalog numbers CB5 and CB5. Technical Bulletin. Sigma-Aldrich, Corp. St. Louis, MO, USA. 更多信息 这些数据仅代表典型的结果 有关我们的产品和服务的详细信息, 请访问我们的网站 查找当地的安捷伦客户中心 : 免费专线 : , ( 手机用户 ) 联系我们 : LSCA-China_8@agilent.com 在线询价 : 仅供研究使用 不可用于诊断目的 安捷伦对本资料可能存在的错误或由于提供 展示或使用本资料所造成的间接损失不承担任何责任 本文中的信息 说明和技术指标如有变更, 恕不另行通知 安捷伦科技 ( 中国 ) 有限公司, 年 7 月 6 日, 中国出版 ZHCN
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~ 1 ~ ~ 2 ~ 1-1 UHPLC-SEC 法对治疗性抗体的分析 TSKgel UP-SW3 UHPLC HPLC A TSKgel UP-SW3 2 μm (4.6 mm ID. 15 cm B UHPLC-SEC 1.7 μm (4.6 mm ID. 15 cm mmol/l (ph 6.7 + 2SO4 mmol/l Na +.5 % NaN3.35 ml/ 25 UV 28 nm 5
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前言 体积排阻色谱 (SEC) 是分离治疗性 mab 中单体 低分子量 (LMW) 和高分子量 (HMW) 异构体的一种常用方法 原始条件下的 SEC 根据不同分子大小在填料孔隙中的差异化扩散来实现单体及其异构体的分离 mab 型药物的成功开发还需要评估强制降解研究中产生的聚集体和片段, 这类研究中
利妥昔单抗聚集体和片段的高分离度 SEC 分离与定量分析 Agilent 126 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统和 AdvanceBio SEC 3Å, 2.7 µm 色谱柱 应用简报 生物制剂与生物仿制药 作者 M.Sundaram Palaniswamy 安捷伦科技公司 Bangalore, India 摘要 单克隆抗体聚集可通过产品和环境因素等多种机制产生 体积排阻色谱 (SEC)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 40 94 88 82 77 72 67 62 57 53 48 44 40 37 33 29 26 23 20 17 14 11 8 39 94 88 82 77 71 66 61 57 52 48 44 40 36 32 28 25 22 18 15 12 9 7 38 94 88
前言 一些单克隆抗体 (mab) 和蛋白质在溶液中容易自发聚集 在许多生物制药应用中, 必须在各种条件下精确地表征和定量此类聚集的程度 体积排阻色谱 (SEC) 是一种表征和定量蛋白质聚集体的强大技术, 但是准确测量需要在适合天然蛋白质确证的条件下具有优异的色谱性能 为通过改善特定蛋白质的色谱峰形提
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(CIP) : /. :, 2004 ISBN T S CIP (2004) (1 : ) : * : : :
(CIP) : /. :, 2004 ISBN 7 5045 4510 4.... T S974. 2 CIP (2004) 044759 (1 : 100029 ) : * 787 1092 16 8. 25 176 2004 6 1 2004 6 1 : : 15. 00 : 010 64929211 : 010 64911190 : http: / / www. class. com. cn
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g ml 10% ph 色谱条件 kinetex C μm 100 A 4. 6 mm 150 mm 25 5 μl A B 10 mmol /L ml /min
25 4 2013 8 监测技术 5 1 2 1 ( 1. 江苏省疾病预防控制中心, 江苏南京 210009; 2. 南京医科大学第二附属医院, 江苏南京 210029) 5 Phenomenex kinetex C 18 2. 6 μm 4. 6 mm 150 mm 10 mmol /L ph 2. 5 + 60 40 DAD 280 nm 5 20. 0 mg /L ~ 100 mg /L 0.
( CIP) /. :, 2003 ISBN 7 81010 776 3.......... R24 65 CIP ( 2003) 102280 ( 2 ) 1200 ( 201203) 850 mm 1168 mm 1 /16 30. 5 881 5 301 10 400 2003 12 2 20
2 ) ( CIP) /. :, 2003 ISBN 7 81010 776 3.......... R24 65 CIP ( 2003) 102280 ( 2 ) 1200 ( 201203) 850 mm 1168 mm 1 /16 30. 5 881 5 301 10 400 2003 12 2 2003 12 3 ISBN 7 81010 776 3 / R 739 64. 00 ( ) )
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使 用 HPLC Online SPE 方 法 分 析 复 方 甘 草 制 剂 中 的 吗 啡 应 用 甘 草, 固 相 萃 取, 二 维 液 相 色 谱, 超 高 效 液 相 色 谱 作 者 肖 尧 李 浪 安 捷 伦 科 技 ( 中 国 ) 有 限 公 司, 北 京,100102 摘 要 目 的 : 建 立 两 种 复 方 甘 草 制 剂 中 吗 啡 成 分 测 定 的 Online SPE-UHPLC
材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析
生物技术通报 黄艳燕 黄靖华 卢福芝 孙靓 彭立新 周兴 黄日波 利用 的方法从鼠李糖乳杆菌基因组 中扩增到 乳酸脱氢酶基因 并连接到载体 上 构建表达质粒 将重组质粒 转化大肠杆菌 重组菌株经 诱导表达 电泳分 析表明 在大肠杆菌中实现了表达 表达产物的分子量约为 同时采用紫外分光光度法测定 乳酸脱氢酶的酶活 测得重组菌株的 乳酸脱氢酶活力为 最适反应温度为 最适 乳酸脱氢酶 克隆 表达 鼠李糖乳杆菌
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p 梯度洗脱用于改善单克隆抗体带电变体的分离 应用报告 生物制药 作者 Andrew Coffey Agilent Technologies, Inc. 摘要 离子交换是温和条件下分离蛋白质混合物的一个非常有用的技术, 最常见的是应用增加盐浓度的缓梯度溶液进行洗脱 p 梯度洗脱使用频率较低 ( 除专属应用外, 例如色谱聚焦 ), 并且需要复杂的缓冲液体系 尽管如此, 如今的四元液相色谱系统完全能够利用常规缓冲盐实现
!$"!" # # &$ I+C-C 57; 96J 9)&2&+# +*-.E2&BE&KF 9)&2&+# C-F-D+, *7 ) *! A+%)BC L-#*+&,B) %%M <DBEC IB!+.-DC 8-FF-&EB) $*(! 8# D* 2 (! *EF " 7 &5 )(! #
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兽医临床诊断学实验指导
兽 医 临 床 诊 断 学 实 验 指 导 河 北 科 技 师 范 学 院 动 物 科 学 系 临 床 兽 医 学 实 验 室 2009 年 2 月 目 录 学 生 实 验 守 则... 3 实 习 一 动 物 的 接 近 保 定 和 基 本 检 查 法...4 实 习 二 临 床 基 本 检 查 法 及 一 般 检 查...10 实 习 三 循 环 系 统 的 临 床 检 查...15 实 习 四
前言 材料与方法 软件 新型胰岛素类似物是人胰岛素产品的一种替代物 临床试验已经证明, 与人胰岛素相比, 这些类似物具有相同或更好的疗效 胰岛素类似物目前是市面上的长效型人胰岛素 美国食品药品监督管理局 (USFDA) 在 2 年 4 月批准了胰岛素类似物的使用 与小分子不同, 生物治疗药物来自于生
胰岛素生物仿制药与创新药物的体积排阻色谱分析 使用 Agilent AdvanceBio SEC 色谱柱 应用简报 生物制药 作者 M. Sundaram Palaniswamy 与 Andrew Coffey 安捷伦科技有限公司 摘要胰岛素是一种用于控制血糖稳态的小分子多肽激素 基因工程技术使生物制药公司开发出了各种长效胰岛素类似物 目前仍未出现用于胰岛素类似物分析的药典方法 本文根据 EP 方法草案,
第一章 图 １ １ 传染病的特征 ９ Ｔ ｈ１ Ｔ ｈ２ 细胞调节机制简图 正调节 负调节 细胞因子与细菌的相互作用机制目前尚未完全明了 有实验表明 细胞因子与细菌之间 存在有互利和互抑双重效应 例如 Ｔ Ｎ Ｆα 和 ＩＦＮγ 可抑制放线菌的生长而 ＩＬ ６ 的作用则 反之 ＩＬ １ ２ 和 ＧＭ ＣＳＦ 可促进某些致病性大肠杆菌生长而 ＩＬ １ｒａ 可抑制之 研究表 明 某些致病性大肠杆菌有与
技术详情 使用配有 Agilent TapeStation 分析软件 (A 版 ) 的 Agilent 4200 TapeStation 系统 RNA ScreenTape( 部件号 67-76) 和试剂 ( 部件号 和 67-78), 以及安捷伦高灵敏度 RNA Scree
技术概述 采用 RNA ScreenTape 分析法进行 DV 200 评估 作者 Eva Graf 安捷伦科技有限公司 Waldbronn, Germany 摘要 RNA 测序文库制备工作流程的成功与否在很大程度上取决于 RNA 起始材料的质量 采用 Agilent RNA ScreenTape 分析法获得的 RNA 完整值当量 (RIN e ) 是一种评估标准 RNA 测序的样品完整性的可靠且可重现的指标
前言 仪器间的方法转移对不同行业的所有实验室而言都是一项重要课题 1 尤其对于制药行业中的经验证方法, 仪器间的方法转移是必经过程, 但对于其他行业中的 QA/QC 也同样重要 仪器间方法转移的一个示例是将常规液相色谱方法从 Agilent 1100 系列四元液相色谱仪等旧设备转移到 Agilent
从 Agilent 1100 系列四元液相色谱仪到 Agilent 1260 Infinity II 液相色谱仪的方法转移 抗组胺药物分析的等效性证明 应用简报 小分子药物 作者 Sonja Krieger 安捷伦科技公司 Waldbronn, Germany 摘要对所有实验室而言, 将常规液相色谱方法从原有设备转移到新仪器都是一项重要课题 本应用简报介绍了用于抗组胺药物分析的常规液相色谱方法从 Agilent
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( CIP) /,. :, 2003. 10 ISBN 7-5624- 2977-4............ :. G479 CIP ( 2003) 087438 : : : : * : : 174 ( A ) : 400030 : ( 023) 65102378 65105781 : ( 023) 65103686 65105565 : http: / /www. cqup. com. cn :
(CIP) :. :, 2004 ( ) ISBN 7-5045 - 4705-0... - -. TS974.2 CIP (2004) 102047 ( 1 : 100029) : * 787 1092 16 6.75 167 2004 9 1 2004 9 1 : : 11.00 : 010-6
) ( ) (CIP) :. :, 2004 ( ) ISBN 7-5045 - 4705-0... - -. TS974.2 CIP (2004) 102047 ( 1 : 100029) : * 787 1092 16 6.75 167 2004 9 1 2004 9 1 : : 11.00 : 010-64929211 : 010-64911190 : http: www. class. com.
前言 Blend Assist 是一项在 Agilent 16 Infinity II 全能泵驱动程序中的软件功能 它利用 16 Infinity II 全能泵的四元混合能力在线稀释储备液 ( 缓冲液或改性剂 ) Blend Assist 可以用于液相色谱方法开发阶段, 通过改变缓冲液或改性剂的浓度
技术概述 配备 Blend Assist 的 Agilent 16 Infinity II 全能泵 使用 Blend Assist 实现快速优化并简化溶剂组成变化 Blend Assist.% TFA 手动混合.% TFA 作者 Melanie Metzlaff 和 Clarissa Dickhut 安捷伦科技公司 摘要 配备 Blend Assist 的 Agilent 16 Infinity II
三环胺类也是重要的色谱探针 图 1 显示了这些具有高 pka 值 ( ) 的化合物的结构 在 ph 为 7. 的条件下, 硅醇基处于离子化形态, 此时 TCA 等碱性探针处于高度质子化状态 在中性 ph 条件下, 硅醇基解离暴露活性位点与 TCA 发生离子交换作用 如果暴露的硅醇基越多
使用 HPH C18 分析三环抗抑郁药 应用简报 小分子制药 作者 William Long 安捷伦科技有限公司 前言 三环抗抑郁药 (TCA) 于 世纪 年代早期首次被发现, 并于 年代后期进入市场 它们的化学结构中包含三个环 四环抗抑郁药包含四个环, 是一类与三环抗抑郁药极为相似的抗抑郁化合物 环状抗抑郁药为首批开发出的抗抑郁药之一 尽管这类药物目前经常被副作用更少的新型药物取代, 但它们仍然是许多患者的良好选择
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在 Agilent HC(2)/TC(2) 反相柱上分离合成 / 人造的食用色素 应用报告 食物和调味品 作者 傅荣杰安捷伦科技有限公司上海英伦路 2 号浦东, 上海市 2 中国 摘要 为了改善食品和饮料的外观, 要使用许多合成或人造色素 ( 号红, 日落黄, 等 ), 这些化合物很容易用反相液相色谱进行分离 [], 使用一种新的 C8 反相柱和磷酸盐缓冲液 - 甲醇流动相, 进行梯度洗脱可以分离
Microsoft Word - 多肽水解氨基酸测定 doc
测试报告 样品信息 样品名称 多肽水解氨基酸测定 编号 W20140504-001 样品重量 \ 剂型 \ 收样日期 2014/05/04 测试期间 2014/05/04-05/08 样品描述 测试需求 测试成分 含测 参考标准 参考标准高效液相色谱法标样有 仪器信息 测试仪器高效液相色谱仪仪器型号安捷伦 1260 色谱条件 : 色谱柱 : 流动相 : 检测波长 : 月旭 Amino Acid,4.6
材料导报 研究篇 年 月 下 第 卷第 期 种球的制备 单步溶胀法制备分子印迹聚合物微球 洗脱处理 种子溶胀聚合机理 种球用量的影响
水相中 组氨酸单分散分子印迹聚合物微球的合成 表征及其识别性能研究 李思平等 李思平 徐伟箭 较佳工艺条件下 在水性体系中选用无皂乳液聚合法制得的单分散微米级聚苯乙烯微球为种球 分别以组氨酸 甲基丙烯酸 或丙烯酸胺 乙二醇二甲基丙烯酸酯 为模板分子 功能单体和交联剂 合成了 组氨酸分子印迹聚合物微球 研究了形貌 粒径及其分布以及模板分子与功能单体之间的相互作用 分别以 激光粒度分析仪紫外分光光度法和红外光谱表征功能单体与交联剂之间的共聚情况
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将传统方法转移成使用安捷伦 Poroshell 色谱柱的快速方法进行人参分析 应用报告 医药 作者 Rongjie Fu 安捷伦科技 ( 上海 ) 有限公司中国上海浦东英伦路 4 号邮编 摘要 本文实验将使用 4.6 5 mm,5 µm 色谱柱进行人参分析的传统方法转移到了 Agilent Poroshell EC-C8,. mm mm,.7 µm 色谱柱上 在线速度相同的情况下, 所需梯度时间从
使用 Agilent AdvanceBio MS Spent Media 色谱柱分离 15 种未衍生化的多糖和唾液酸 USP 标准品，并用 TOF MS 检测
应用简报 原材料与培养基分析 分离 种未衍生化的多糖和唾液酸 USP 标准品 使用 Agilent AdvanceBio MS Spent Media 色谱柱与 TOF MS 检测 作者 Richard Hurteau 安捷伦科技有限公司 Wilmington, DE, USA 摘要 多糖和唾液酸是生物处理器中所用培养基的常见组分, 需要在治疗性蛋白质 ( 如单克隆抗体 ) 的生产过程中对其进行监测
Agilent Poroshell 120 固定相在黄油抗氧化剂分离中的选择性比较 应用简报 食品检测与农业 作者 Rongjie Fu 安捷伦科技 ( 上海 ) 有限公司 摘要 对 Agilent Poroshell 120 的各种固定相 ( 包括 EC-C18 SB-C18 SB-Aq Bonu
Agilent Poroshell 1 固定相在黄油抗氧化剂分离中的选择性比较 应用简报 食品检测与农业 作者 Rongjie Fu 安捷伦科技 ( 上海 ) 有限公司 摘要 对 Agilent Poroshell 1 的各种固定相 ( 包括 EC-C1 SB-C1 SB-Aq Bonus- RP 和 Phenyl-Hexyl) 在九种人工抗氧化剂分离中的选择性进行了比较 然后采用 Agilent
应用简报 生物 QC 检测 使用 Agilent AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱分析合成多肽杂质 作者 Veronica Qin 安捷伦科技有限公司 摘要 通常, 使用 UV 检测的多肽色谱分离是通过 C18 柱以及三氟乙酸 (TFA) 改性的流动相完成, 这种方法可以改善分
应用简报 生物 QC 检测 使用 Agilent AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱分析合成多肽杂质 作者 Veronica Qin 安捷伦科技有限公司 摘要 通常, 使用 UV 检测的多肽色谱分离是通过 C18 柱以及三氟乙酸 (TFA) 改性的流动相完成, 这种方法可以改善分离度, 但同时会抑制质谱 (MS) 信号 甲酸 (FA) 是用于 MS 检测的首选流动相改性剂, 但它可能会导致传统
SEC 方法开发中的流动相优化
应用简报 制药与生物制药 SEC 方法开发中的流动相优化 作者 Richard Hurteau 安捷伦科技有限公司 Wilgton, DE, USA 摘要 单克隆抗体 (mab) 产品的聚集会影响其作为治疗药物的疗效 体积排阻色谱 (SEC) 是一种高效检测治疗性蛋白质和多肽中的聚集体的方法 本应用简报介绍了使用 Agilent AdvanceBio SEC 色谱柱表征标准蛋白质混合物中的单体 二聚体和聚集体过程中的方法优化
利用 Agilent 1290 Infinity II 液相色谱仪进行基于质量源于设计的方法开发 在 Waters Empower 3 CDS 控制下与 ISET 参与的方法转移相结合的高效方法开发工作流程 应用简报 药物开发与 QA/QC 作者 Vinayak A.K 和 Andreas Tei
利用 Agilent 1290 Infinity II 液相色谱仪进行基于质量源于设计的方法开发 在 Waters Empower 3 CDS 控制下与 ISET 参与的方法转移相结合的高效方法开发工作流程 应用简报 药物开发与 QA/QC 作者 Vinayak A.K 和 Andreas Tei 安捷伦科技有限公司 摘要 本应用简报展示了基于质量源于设计 (QbD) 原则分离氨氯地平及其已知 EP
前言 精油被应用于从清洁产品到香水等许多家居用品中, 其含有大量的芳香化合物 提取这些精油的两种主要方法是蒸馏和冷压 蒸汽蒸馏是给有机材料加热, 顾名思义, 冷压是一种不增加热量的机械过程 冷压提取工艺的优势在于, 沸点较高且分子量较高的化合物在蒸汽蒸馏过程中会发生损耗 分子量较高的化合物会产生更新
应用简报 香精与香料 在冷压粉红葡萄柚精油的分析中降低交叉污染并提高重现性 使用 Agilent J&W DB-HeavyWAX 气相色谱柱 作者 Vanessa Abercrombie 摘要 较高分子量芳香族化合物的存在可能导致交叉污染或拉长分析时间, 这就给冷压柑橘精油 ( 如粉红葡萄柚 ) 的分析带来了挑战性 Agilent J&W DB-HeavyWAX 色谱柱的最高恒温操作温度为 8 C,
第 期 黄雪莲等 响应面优化绿色木霉菌培养基 材料与方法 菌种 仪器与试剂 菌种的活化 单因素试验 响应面优化试验 优化工艺的验证 数据处理 结果与分析
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 响应面优化绿色木霉菌培养基 黄雪莲 于新 仲恺农业工程学院轻工食品学院 广东广州 利用响应面分析法对绿色木霉菌的培养基进行优化 通过测量不同营养条件下绿色木霉 菌落生长直径研究其生物学特性 在单因素实验的基础上 选定葡萄糖添加量 丙氨酸添加量和磷酸二氢钾添加量 个因素进行中心组合实验 建立二次回归方程 并应用响应面分析法进行优化 结果表明 绿色木霉菌最佳培养基为葡萄糖
前言 在药物开发的每个阶段均需深入分析治疗性蛋白的理化性质, 以确保药物的安全性及有效性 通常采用一些基于液相色谱的试验对蛋白药物进行鉴定并确定其完整性, 例如肽图分析,SEC 及 IEX P128 是一种抗葡萄球菌蛋白, 名义分子量为 28 kda 它在大肠杆菌中重组表达 本应用简报证实了 Agi
采用 Agilent 126 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统通过肽谱分析 SEC 和 IEX 对治疗性蛋白质进行理化表征 应用简报 生物制药 作者 Srividya Kailasam Jochen Strassner Faizy Ahmed 和 Martin Vollmer 安捷伦科技有限公司印度班加罗尔和德国瓦尔德布隆 45 4 35 3 25 2 15 5 2 4 6 8 1 12
第 期 等 乙腈 碳酸氢钠溶液混合物电嫁接叔丁氧羟基 乙二胺 7B7! " # $% # &'#! "% #!! #& (& )&# &#&# #*$% + %!, # $% "( ( # ( # "! #-.& #% & (& %" & %& & #& (& & )&# &#& # & "%&/
第 (, 卷第 ( 期 ( 1 年 月 )0 2032 =F 0=< D@ 6 G H7!.2(,222 7.2( $&.22( 1,./.,( EI.! "&7. B ( 2 '>20.2*' & &.201 21 -(5>2, 22222222222222222222222 # /, B, 1 -( 15 (, 2 2222222222222222222222222222222 >EE! "&7..:.!
实验部分材料 PNGase F 购自 Sigma-Aldrich (St. Louis, MO) 快速 PNGase F 购自 New England Biolabs (Ipswich, MA) 其余全部化学品均购自 Sigma-Aldrich (St. Louis, MO) 工作流程对 ADC 及
通过表征药物 / 抗体比率分析抗体药物偶联物 Agilent 9 Infinity 二元液相色谱系统与 Agilent 6 ifunnel Q-TOF 联用 应用简报 生物制药 作者 Ravindra Gudihal 和 Jing Chen 安捷伦科技公司 前言 抗体药物偶联物 (ADC) 是通过赖氨酸或半胱氨酸残基共价结合细胞毒性药物的单克隆抗体 ( 图 ) 抗体通过结合疾病状态( 如癌症 ) 相关细胞表面的表位,
前言 近年来, 亚 2 μm 填料颗粒色谱柱由于其柱效高而备受关注 它可在 van Deemter 方程估算的更高下运行 与最佳下的柱效相比, 较高的引起的柱效损失可以忽略 亚 2 μm 填料颗粒色谱柱减少了运行及循环时间, 可更快地获得分析结果 这类色谱柱的缺点是由于粒径小, 会显著地引起较高反压
使用 Agilent InfinityLab Poroshell 120 色谱柱最大限度地提高柱效 应用串联色谱柱技术,5 min 内理论板数可达 100000 应用简报 食品 环境 化学品 医药 作者 Angelika Gratzfeld-Hüsgen 和 Edgar Naegele 安捷伦科技公司 Waldbronn, 德国 摘要 基于表面多孔技术的色谱柱可替代亚 2 μm 颗粒色谱柱 配备这些色谱柱的
Agilent AdvanceBio Peptide Plus 生物液相色谱柱 提高蛋白质 / 多肽分析的可靠性
Agilent Peptide Plus 生物液相色谱柱 提高蛋白质 / 多肽分析的可靠性 AGILENT ADVANCEBIO PEPTIDE PLUS 生物液相色谱柱 可靠地表征一级序列并检测翻译后修饰 (PTM) LC/MS 肽谱分析可以同时评估多个关键属性, 具有很高的灵敏度和重现性 但是, 这种技术需要使用反相色谱柱, 通过甲酸等 MS 友好型添加剂提供稳定的可重现 结果 使用全新 Peptide
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GE Healthcare Life Sciences 数据文件 2897681 AA 蛋白质样品制备 Protein A Mag Sepharose Xtra 和 Protein G Mag Sepharose Xtra 是设计用于从各个物种中对单克隆和多克隆抗体进行有效 高容量纯化 / 筛选的磁珠 抗体被高度特异地捕获在 Mag Sepharose 上的 protein A 和 protein
Qubit-DNA RNA 总浓度测定 dsdna BR Assay Kits 各试剂加样量 : Buffer 标准 1 标准 2 样品 试剂 ( 荧光染色 ) 总量 ( 溶液体积 ) 50 或 250ml 1 或 5ml 1 或 5ml 待测 250µl 或 1.25ml 原始浓度 未知 0 ng
Qubit-DNA RNA 总浓度测定 dsdna BR Assay Kits 各试剂加样量 : 总量 ( 溶液体积 ) 50 或 250ml 1 或 5ml 1 或 5ml 待测 250µl 或 1.25ml 原始浓度 未知 0 ng/μl 100 ng/μl 待测 200 测定时要求浓度 未知 0 ng/μl 5000ng/ml 0~5000 ng/ml 1 备注 -Buffer:Qubit dsdna
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. ( CIP), 2004 /. 2. : (. ) ISBN 7-5077-2116-7......... : :. R473. 71-44 CIP ( 2004 ) 022284 : : : : : : 2 1 : 100078 : : 787mm 1092mm 16 : 7. 5 : 180 : 2005 3 2 : 2005 3 2 : 00001 10000 : 100. 00 ( 10
前言 监测挥发性有机酸和脂肪酸的种类是食品 香精 酒精饮料和其他行业中经常需要使用的分析方法 在生命科学研究中, 实验室通常通过分析细菌培养基中提取出的脂肪酸谱来鉴定细菌 还会经常对发酵中的厌氧或好氧消化的短链有机酸 (C 至 C) 进行监测 这一过程可以采用顶空 / 气相色谱结合, 或液液萃取然后
应用简报 食品检测 挥发性有机酸和脂肪酸分析的对比研究 使用 DB-FATWAX 超高惰性色谱柱及其他 WAX 气相色谱柱 作者 Yun Zou 安捷伦科技 ( 上海 ) 有限公司 摘要 本应用简报评估了 Agilent J&W DB-FATWAX 超高惰性气相色谱柱在 C C 游离脂肪酸水溶液 C C 有机酸和 Agilent WAX UI 测试混标分析中的性能 DB-FATWAX 超高惰性气相色谱柱对水性基质的重复进样具有出色的稳定性
安捷伦应用解决方案 单克隆抗体高分离度分离和定量 SEC 方法的开发和部分验证 配备 Agilent Bio SEC-3 色谱柱的 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统 应用简报 生物制药 mau 作者 M. Sundaram Palanisw
安捷伦应用解决方案 单克隆抗体高分离度分离和定量 SEC 方法的开发和部分验证 配备 Agilent Bio SEC-3 色谱柱的 Agilent 126 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统 应用简报 生物制药 作者 25 M. Sundaram Palaniswamy 安捷伦科技有限公司印度班加罗尔 15 5 5 1 摘要 体积排阻色谱 (SEC) 是用于高分子物质 ( 如蛋白质或聚合物
70 陈伟珠, 等 : 超高压液相色谱法测定鱼油中的 和 DHP-EE % (RSD 1.05 %) respectively. The RSD of repetition was 1.54 %(n=6) for and 1.25 %(n=6) for. This method was
DOI 10.3969/j.issn.1005-6521.2013.08.019 Food Research And Development 2013 3 34 6 69 1 2 1 1 * 1 1 1 1. 361005 2. 361005 : 采用超高压液相方法检测鱼油中的二十碳五烯酸乙酯 () 和二十二碳六烯酸乙酯 (), 采用 UPLC BEH C18(2.1 mm 50 mm,1.7 μm)
结果与讨论
苏德森 陈涵贞 林 虬 对花生油 大豆油 菜籽油 玉米油和葵花籽油分别进行加热试验 采用气相色谱法测定其不同加热温度和不同加热时间脂肪酸组成 分析研究食用油中反式脂肪酸形成和变化特点及其影响因素 结果表 明食用油加热至 时 其反式脂肪酸含量是未加热时的 倍以上 随着加热温度的升高或加热时间的延 长 食用油中反式脂肪酸种类和含量都增加 加热温度 加热时间和食用油中脂肪酸组成均是影响反式脂肪酸形成和变化的因素
采用 Poroshell SB-C18 快速分析精对苯二甲酸母液中的 8 种芳香羧酸 应用简报 作者 杨新磊 安捷伦科技 ( 中国 ) 公司 摘要本文采用 Agilent Infinity 1260 四元系统结合表面多孔层色谱柱 Poroshell SB-C18 分析了精对苯二甲酸母液中的 8 种芳
采用 Poroshell SB-C18 快速分析精对苯二甲酸母液中的 8 种芳香羧酸 应用简报 作者 杨新磊 安捷伦科技 ( 中国 ) 公司 摘要本文采用 Agilent Infinity 126 四元系统结合表面多孔层色谱柱 Poroshell SB-C18 分析了精对苯二甲酸母液中的 8 种芳香羧酸 ( 偏苯三酸 羟甲基苯甲酸 邻苯二甲酸 对苯二甲酸 4- 羧基苯甲醛 甲苯二甲酸 苯甲酸和对甲基苯甲酸
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应用安捷伦 ZORBAX 超高压快速高分离度 HILIC Plus 色谱柱的 LC/MS/MS 测定不同进样溶剂对维生素 B 分析的影响 应用简报 食品检测与农业 作者 Anne E. Mack 安捷伦科技有限公司 摘要 Agilent 29 Infinity 液相色谱与 Agilent 64A 三重四极杆质谱联用系统上, 采用安捷伦 ZORBAX 超高压快速高分离度 HILIC Plus 色谱柱对维生素
材料 方法
生物技术通报 姜燕 采用鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 和胶体金标记鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 及对照抗体羊抗鼠 利用双抗体免疫夹心反应原理特异性地结合人血红蛋白抗原 在 内可得到胶体金显色结果的原理研制便潜血单克 隆一步法胶体金检测试卡 用于诊断因各种原因引起的消化道出血疾病 应用杂交瘤技术制备两株鼠抗人血红蛋白 抗 体 方法检测 效价 免疫胶体金技术制备胶体金检测试卡 法检测 效价的结果显示 鼠抗人
材料與方法
10-12 250-350 Sprague-Dawley rat ( SD ) 12 ( AM 8 00-PM 8 00 ) (Control group) (HS) (Heat shock group) 15 0 4 6 16 24 (PAE) ( Pulmonary air embolism group) 20 40 (25 l/min) 40 17 20 (HS&PAE) 15 4 16 20
(CIP) /. :,2005 ( /, ) ISBN R247.1 TS CIP (2005) ( ht tp : / / www. tcmonline. com. cn ) ( ) 787 mm
(CIP) /. :,2005 ( /, ) ISBN 7 81010 907 3.......... R247.1 TS972.161 CIP (2005) 105141 ( ht tp : / / www. tcmonline. com. cn ) ( 1200 201203 ) 787 mm 1092 mm 1/ 32 10 217 1 4 100 2005 11 1 2005 11 1 ISBN
5990-9029CHCN_5989_5672.qxd
将 中 国 药 典 测 定 胰 岛 素 的 方 法 转 换 为 使 用 Agilent Poroshell 色 谱 柱 的 方 法 应 用 报 告 生 物 制 药 作 者 Rongjie Fu 安 捷 伦 科 技 有 限 公 司 ( 上 海 ) 英 伦 路 4 号 上 海 3 中 国 摘 要 中 国 药 典 (Ch. P) 规 定 的 检 验 胰 岛 素 的 方 法 需 使 用 传 统 的 4.6
前言 脂肪在食品营养与食品化学领域的研究中发挥着重要作用 脂肪由复杂的脂肪酸混合物组成, 包括饱和 单不饱和以及多不饱和的各种碳链长度的化合物 由于脂肪酸在体内的作用取决于结构的不同, 因此有必要对食品中含有的脂肪酸进行详细的组成分析 测定食品中的总脂肪与反式脂肪含量时, 对脂肪酸及其甲酯衍生物 (
应用简报 食品检测 改善对 37 种脂肪酸甲酯的分析 使用三种类型的毛细管气相色谱柱 作者 Yun Zou 安捷伦科技 ( 上海 ) 有限公司中国上海, 邮编 200131 Hua Wu 安捷伦科技 ( 中国 ) 有限公司中国北京, 邮编 100102 摘要 脂肪酸甲酯 (FAME) 的分析可用于鉴定食品中的脂类组分, 是食品分析中最重要的应用之一 本应用简报详细介绍了在 Agilent J&W CP-Sil
前言 蛋白质由多种不同的包含弱酸性 ( 羧基 ) 和弱碱性 ( 氨基 ) 基团的氨基酸组成 因此, 蛋白质是种两性分子, 在特定 ph 值范围内大多以两性离子形式存在 在 某一 ph 值下, 蛋白质所带净电荷为零, 且不与任何带电介质相互作用, 此时的 ph 值即为等电点 (pi) 在离子交换色谱
使用安捷伦缓冲液顾问软件优化阳离子交换色谱法的蛋白质分离使用 gilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统进行蛋白质分离 技术概述 作者 Sonja Schneider Jochen Strassner 安捷伦科技公司德国瓦尔德布隆 mu 175 150 125 100 75 50 RNse Pi 9.6 Pi 10 10.5 Pi 11.35 25 0 10 15 20 25
不同基源石斛属 植物 不同来源商品石斛
徐蓓 杨莉 陈崇崇 王峥涛 徐珞珊 建立黄草类石斛的薄层色谱 定性鉴别方法 采用薄层色谱法 考察不同基源石斛及商品药材中专属性成分联苄类化合物毛兰素 石斛酚 杓唇石斛素 和 三羟基 甲氧基联苄 的薄层色谱行为 对石斛药材进行定性鉴别 通过 种不同基源的石斛及 批商品石斛的薄层色谱鉴别 证明此方法专属性强 操作简单 重复性好 为石斛的鉴别提供了一种准确 有效的新方法 本方法可用于黄草类石斛的鉴别 为中药石斛的质量标准研究提供科学依据
前言 多种氨基酸以百万分之一 (ppm) 和十亿分之一 (ppb) 级的水平广泛存在于植物材料中 之前的研究中发现 1, 使用配备低 ph 与正离子模式质谱检测的亲水相互作用色谱 (HILIC) 模式分析未衍生化氨基酸, 能够获得出色的分离度与灵敏度 本应用简报对这些条件进一步优化, 以对植物中的氨
应用简报 食品检测 代谢组学 农药化学 环境 使用 LC/MS 检测通过亲水相互作用色谱 (HILIC) 对植物基质中的未衍生化氨基酸进行定量分析 作者 Yuxiong Huang Weiwei Li 和 Arturo Keller 美国加州大学圣塔芭芭拉分校 Tarun Anumol 和 Adam Bivens 安捷伦科技公司 摘要 本应用简报介绍了一种使用三重四极杆液质联用系统定量分析多种未衍生化氨基酸的方法
结果与讨论
金青哲 谢 峰 丁志华 施峰华 王兴国 利用碳同位素比值法进行花生油和玉米油掺合物的检测研究 用气相色谱仪获得 转化途径 的玉米油和 转化途径的花生油的脂肪酸组成 再用气相色谱 燃烧 同位素比值质谱仪确定三种主要脂肪 酸 的 值 利用所测得的数据 构建了玉米油与花生油混合油中主要脂肪酸的 值 混合比例的标准曲线 结果表明 玉米油与花生油的 值差异很大 应用试验中将花生油与一种未知的其他植物油进行掺和
( C I P). :, 2001. 5 ISBN 7-5308-3025-2 /,.... R544. 1 CIP ( 2001) 11807 : : : : 189 3000 20 ( 022 ) 2 730631 4 7 87 1092 1 / 3 2 8. 25 15 8 000 20 01
( C I P). :, 2001. 5 ISBN 7-5308-3025-2 /,.... R544. 1 CIP ( 2001) 11807 : : : : 189 3000 20 ( 022 ) 2 730631 4 7 87 1092 1 / 3 2 8. 25 15 8 000 20 01 6 1 2001 6 1 : 1 00 000 : 000. 00 ( 1 ) ( 1 ) ( 1
利用 Agilent J&W DB-624UI 超高惰性气相色谱柱分析有机酸和醇类 应用简报 食品检测与农业 作者 Pat Sasso 和 Ken Lynam 安捷伦科技公司 摘要 通过分析 26 种脂肪族短链 芳香族醇类和羧酸混合物, 得到合适的峰形和分离度来评估最新推出的 Agilent J&W
利用 Agilent J&W DB-624UI 超高惰性气相色谱柱分析有机酸和醇类 应用简报 食品检测与农业 作者 Pat Sasso 和 Ken Lynam 安捷伦科技公司 摘要 通过分析 26 种脂肪族短链 芳香族醇类和羧酸混合物, 得到合适的峰形和分离度来评估最新推出的 Agilent J&W DB-624UI 色谱柱 将该色谱柱与非安捷伦 624 固定相进行了比较 挥发性范围狭窄的有机酸 (C3
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图 书 在 版 编 目 (CIP) 数 据 与 考 场 / 张 克 敏, 兰 燕 主 编. 重 庆 : 西 南 师 范 大 学 出 版 社,2003.10 ISBN 7 唱 5621 唱 2973 唱 8 Ⅰ 畅 畅 畅 畅 Ⅱ 畅 1 张 畅 畅 畅 2 兰 畅 畅 畅 Ⅲ 畅 文 课 高 中 教 材 Ⅳ 畅 G634 畅 341 中 国 版 本 图 书 馆 CIP 数 据 核 字 (2003)
(CIP) :, 2003 ISBN 7 81010 715 1 /...........R151.2 CIP (2002) 105855 ( 530 200032) 850 mm1168 mm 1/ 32 11.25 283 1 4 100 2003 4 1 2003 4 1 ISBN 7 810
(CIP) :, 2003 ISBN 7 81010 715 1 /...........R151.2 CIP (2002) 105855 ( 530 200032) 850 mm1168 mm 1/ 32 11.25 283 1 4 100 2003 4 1 2003 4 1 ISBN 7 81010 715 1/ R680 22.00 ,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, 20,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,
CIP ) / :,2006.2 ISBN 7-80702 - 188-8..........K.23 CIP (2006) 080136 :960 640mm 1/ 16 : 55 :1080 2006 3 2 1 :5000 ISBN 7-80702 - 188-8/ K 23 ( 3 ) :
CIP ) / :,2006.2 ISBN 7-80702 - 188-8..........K.23 CIP (2006) 080136 :960 640mm 1/ 16 : 55 :1080 2006 3 2 1 :5000 ISBN 7-80702 - 188-8/ K 23 ( 3 ) : 260.00 ( 1 ) ( 1 ) ( 1 ) ( 2 ) ( 3 ) ( 3 ) ( 4 ) (
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: : (CIP) / :, 2006.3 ISBN 7-5385 - 2026-0..........I222 CIP (2006) 021873 :8501168mm 1/ 32 :200 :3000 2006 1 2 : 2000 ISBN 7-5385 - 2026-0/ I393 :498.00 ( 22 ) : : : ,,,,,,,,,,, : 7 8, 8 8, 8 9, 9 10
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: : (CIP) / :, 2006.3 ISBN 7-5385 - 2026-0..........I222 CIP (2006) 021873 :8501168mm 1/ 32 :200 :3000 2006 1 2 : 2000 ISBN 7-5385 - 2026-0/ I393 :498.00 ( 22 ) : : : ,,,,,,,,,,, : 7 8, 8 8, 8 9, 9 10
使用 Agilent J&W DB-WAX 超高惰性毛细管气相色谱柱对蒸馏酒进行分析 应用简报 香精 香料和食品 作者 Kenneth Lynam 安捷伦科技公司 Yun Zou 安捷伦科技公司上海 摘要 Agilent J&W DB-WAX 超高惰性气相色谱柱对含有大量水或水 - 乙醇混合物的蒸馏
使用 Agilent J&W DB-WAX 超高惰性毛细管气相色谱柱对蒸馏酒进行分析 应用简报 香精 香料和食品 作者 Kenneth Lynam 安捷伦科技公司 Yun Zou 安捷伦科技公司上海 摘要 Agilent J&W DB-WAX 超高惰性气相色谱柱对含有大量水或水 - 乙醇混合物的蒸馏酒样品具有出色的稳定性 这款色谱柱的高惰性可确保醇类 醛类及有机酸等难以分析的挥发性同系物获得完美峰形
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( CIP). :, 2006 ISBN 7-224-07586-8... ( ). E289. 413 - - CIP (2006) 022989 ( 147 : 710003) 787mm 1092mm 16 29 24 650 2006 3 1 2006 3 1 1 1000 ISBN 7-224-07586-8 E 57 128.00 ISBN 7-224-07586-8 E 57 : 128.00
附件四：作品送展表（夾於作品說明書第一頁，請勿裝訂）
嘉 義 市 第 31 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明 書 科 別 : 生 活 與 應 用 科 學 科 組 別 : 國 小 組 作 品 名 稱 : 果 真 有 酵 - 水 果 酵 素 的 應 用 關 鍵 詞 : 水 果 酵 素 環 保 編 號 : 1 摘 要 本 研 究 主 要 的 目 的 是 蒐 集 常 見 的 水 果, 利 用 多 餘 的 果 皮 和 剩 餘 的 果 肉 製 造
ZH_单克隆抗体以及高级聚集体的体积排阻色谱分析方法开发
单克隆抗体及其高聚体的体积排阻色谱分析方法开发 Paula Hong 和 Kenneth J. Fountain 沃特世公司 ( 美国马萨诸塞州米尔福德市枫树街 34 号 ) 应用优势 稳定分析 mab 单体和聚集体 高通量 SEC 分离 一致的纯度曲线 高级聚集体的可重现定量分析 简单的 SEC 方法开发 简介自生物类似药问世以来, 其中存在的蛋白质聚集体就一直是影响其安全性和疗效的一大阻碍 1
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对于碱性化合物的分析, 从来没有一种液相柱能够获得真正对称的色谱峰 安捷伦结束您的困惑 新型 ZORBAX Eclipse Plus 液相柱 ZORBAX Eclipse 色谱柱系列产品 我已经记不起上一次分离碱性化合物得到理想的对称峰是什么时候了 我们实验室经常浪费很多时间来重新评价柱子的性能和方法 近来我在实验室的所有时间似乎都是在不断地试用不理想的色谱柱 嘧啶 阿米替林 苯海拉明, 分离这些碱性化合物需要时间和耐心
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Agilent Technologies 安捷伦科技公司版权所有 2002 根据美国联邦政府和国际著作权的有关法律未经安捷伦公司许可和书面授权不得对本书的任何部分以任何形式或手段进行复制包括电子版储存和检索或翻译成外文 G1176-97000 2002 年 5 月第 1 版美国印刷安捷伦科技公司 2850 Centerville Road Wilmington, Delaware 19808-1610
Microsoft Word - 文档 1
习 题 集 一 选 择 题 1. 下 列 有 关 假 药 劣 药 的 说 法, 哪 些 正 确?( ) A. 药 品 所 含 成 分 与 国 家 药 品 标 准 规 定 的 成 分 不 符 的 为 假 药 ; B. 以 非 药 品 冒 充 药 品 或 者 以 他 种 药 品 冒 充 此 种 药 品 的 为 假 药 ; C. 药 品 成 分 的 含 量 不 符 合 国 家 药 品 标 准 的, 为 劣
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, 90, 6000 t, 1333 ha,, 500 600 t,, 131.3 ha,,,,,,,,,, ,, 9 10, 11 12, 3 4,,,,, 0.067ha 500 1000kg,, 0.067ha 2000 3000kg, 4000 5000kg,,,,,,,,,,,,,,,, ,, ( ),,,,, : 1.,,,,,,,,,,,,, 2., 11, 23 31 , 7, 37,,,
,,,,,,,, 6,,,,,,, ( ),,,,,,,, 1 2, 2003 7 ( 3 ) ( 7 ) ( 9 ) ( 12 ) ( 12 ) ( 13 ) ( 15 ) ( 16 ) ( 17 ) ( 18 ) ( 18 ) ( 19 ) ( 20 ) ( 20 ) ( 22 ) ( 27 ) ( ) ( 27 ) () ( 28 ) 1 2 30 ) ( ) ( 30 ) () ( 33 )
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无限卓越的 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统 生物分子 分析能力 Agilent 1260 Infinity 生物惰性液相色谱系统无限卓越的生物分子分析能力 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统确立了生物分子分析在性能 可靠性 耐用性方面的新标准 1260 Infinity 生物惰性液相色谱系统基于成熟的 1200 Infinity
Really Good Antibodies Bethyl 二抗产品册 超过 670 种抗小鼠 兔子 山羊和大鼠的二抗 bethyl.com
Really Good Antibodies Bethyl 二抗产品册 超过 670 种抗小鼠 兔子 山羊和大鼠的二抗 bethyl.com Bethyl 公司 Bethyl Laboratories, Inc. ) 成立于1972年 一直秉承改善生活的理念致力于科学研究的理念 提供高质量的抗体产品 和抗体定制服务 Bethyl所销售的每一个抗体都是在德克萨斯州的蒙哥马利的唯一工厂生产 并且都经过Bethyl
使 小 趙 有 機 可 趁 二 員 工 法 紀 觀 念 薄 弱 小 趙 身 為 主 管, 竟 假 藉 職 務 之 便, 利 用 平 時 得 經 常 申 請 出 差 之 機 會, 虛 立 出 差 名 目, 實 係 法 紀 觀 念 薄 弱 使 然 肆 具 體 改 進 措 施 或 建 議 一 訂 定 或
案 例 一 未 實 際 出 差, 詐 領 差 旅 費 壹 案 情 摘 要 小 趙 為 某 機 關 主 管, 負 責 該 機 關 業 務 之 進 行 及 督 導 等 職 務, 為 依 法 令 服 務 於 國 家 所 屬 機 關 而 具 有 法 定 職 務 權 限 之 公 務 員 小 趙 自 101 年 9 月 19 日 起, 意 圖 為 自 己 不 法 所 有, 利 用 出 差 督 導 辦 理 業 務
前言 本研究开发出的单步高效固相萃取 (SPE) 样 品前处理流程适用于同时提取尿液中的多巴胺 肾上腺素 去甲肾上腺素 变肾上腺素 去甲变肾上腺素和 3- 甲氧酪胺 ( 图 1) 将不同的每种分析物加标至洁净尿液中制得校准物 液相色谱 / 三重四极杆质谱仪 (LC/MS/MS) 非常适用于像上述多种
通过单次 LC/MS/MS 运行分析尿液中的儿茶酚胺类 变肾上腺素类和 3- 甲氧酪胺 使用 Agilent Bond Elut Plexa SPE Agilent 19 Infinity 液相色谱和 646 三重四极杆液质联用系统 应用简报 临床研究 作者 Linda Côté 与 Christophe Deckers 加拿大安捷伦科技公司 St-Laurent, Québec, Canada 摘要本研究中开发出了一种用于尿液中儿茶酚胺
A B C D E F G H J L K M N O P Q R S T X W Y Z 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56
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赵世嘏 高乃云 楚文海 微曝气工艺是在常规 基础上发展起来的 试验表明在紫外光强 投加量为 三氯乙酸 初始浓度约为 的情况下 后该工艺对 的去除达到 以上 工艺效果受 光强 投加量 初 始浓度和 的影响 其他条件一定时 随着 光强和 投加量的增大 去除率增加 然而 投加量超过 后 去除效果增加缓慢 对不同初始浓度 时去除率最 高 而后浓度增加 去除率下降 中性或弱酸性 条件下更有利于降解 消毒副产物
GBZ －2004.doc
C 52 GBZ GBZ/T 160.30 2004 Methods for determination of inorganic phosphorus compounds in the air of workplace 2004 5 21 2004 12 1 GBZ/T 160.30-2004 GBZ 1 GBZ 2 [ Phosphorus pentoxide Phosphorus pentasulfide
Layout 1
硅胶填料的孔径和粒径大小对一种小分子蛋白质 胰岛素分离的影响 应用报告 生物制药 作者 Rongjie Fu 安捷伦科技有限公司 ( 上海 ) 英伦路 4 号上海 3 中国 Maureen Joseph Agilent Technologies, Inc. 85 Centerville Road Wilmington, DE 988 USA 摘要 本文采用不同孔径和粒径的硅胶填料色谱柱对胰岛素这种小分子蛋白质进行分离
卫生检验学实习指导.doc
2007.3 1 ... 1 V B2... 4... 7... 9... 12... 14... 17... 19... 25... 29... 31... 34 2 1. 2. 3. ph= 3-9( ph=5-6) Fe 2+ lgk =21.3 510nm, 1.1 10 4 Fe 2+ Fe 3+ Fe 2+ Fe 2+ 1. 1 cm l ml2m15ml 25ml 2. 1. 000
煤 炭 学 报 仪器与药品 黏土矿物的提纯 黏土样品的制备 红外光谱 分析 射线衍射 分析 射线光电子能谱 分析
张明青 刘炯天 单爱琴 刘汉湖 为了深刻认识煤泥水中 同黏土矿物颗粒之间的相互作用 笔者用 溶液在不同 值条件下分别同高岭土和蒙脱土作用 测定黏土作用前后的 射线衍射 红外光谱和 射线光电子能谱 实验证实了在 溶液中 在黏土表面以静电形式吸附 在 溶液中 以 沉淀和静电形式吸附 此外 在 以上的溶液中还可能存在一 羟基络合吸附形式 提出了 沉淀吸附和一羟基络合吸附的吸附过程模式 黏土颗粒表面的 沉淀使颗粒间形成的非选择性
Separation Report No
分离报告 No.074 TSKgel 液相色谱柱在单克隆抗体分离中的应用 目录 1. 简介 1 2. 分离模式与纯化方法 1 3. 应用 3 4. 总结 8 3604 Horizon Drive, Suite 100,King of Prussia, PA 19406 1. 简介近年来, 随着生物技术的发展, 单克隆抗体已成为治疗药物和诊断试剂的主要成分 由于商业应用不断增加, 对单克隆抗体进行快速简单的纯化工作变得非常重要
校园之星
x x x x x x C H N O V x B x x x x S S x mm cm cm cm cm x x x x x x x x A A B X B B ml x x B
(CIP) /. :, 2004 ISBN T S CIP (2004) ( 1 : ) : * : : :
(CIP) /. :, 2004 ISBN 7 5045 4591 0....T S974. 2 CIP (2004) 059489 ( 1 : 100029) : * 787 1092 16 6. 75 2 165 2004 8 1 2004 8 1 : : 13. 00 : 010 64929211 : 010 64911190 : http : / / www.class.com.cn : 010
Microsoft Word - 前頁（總）.doc
骨 有 明 訊 肌 動 蛋 白 絲 與 細 胞 形 態 關 係 之 研 究 科 別 : 生 物 科 第 48 屆 科 學 展 覽 北 二 區 佳 作 作 者 : 呂 苹 瑋 范 競 勻 指 導 老 師 : 陳 季 瑄 老 師 壹 摘 要 本 研 究 以 人 類 的 子 宮 頸 癌 細 胞 (HeLa cell) 為 細 胞 骨 架 的 觀 察 對 象, 經 過 培 養 與 繼 代, 利 用 免 疫
! 第"期 丁健桦 等 复杂基质中柠檬酸的液相微萃取 为碳酸 型 茶 饮 料! 为 果 汁 型 碳 酸 饮 料 " 和 # 为 碳酸饮料 由不同厂家生产!! "# 色谱条件!! 色 谱 柱 $%& (%)* #, "# 结果与讨论 "!!# 影响 "#$% 的因素 +, - "# 分 析 柱 $%
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RS Pro 以实惠的价格 提供您所需的品质与性能 细节决定成败 正确的选择可以提高整个组织的效率和生产力 每个决策 每个环节都很重要 因此 RS Pro 为您提供了约 40,000 种产品供您选择 这些产品均经过产品质量测试 专为严苛的制造和工业环境而设计 并在不断推陈出新 RS Pro 深知每个
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( CIP) /. :, 2004 ISBN 7-5331 - 3569-5......... :. R277.57 CIP (2003) 109359 : : 16 :250002 : ( 0531 ) 2065109 :www. lkj. com. cn : jn- publi c
( CIP) /. :, 2004 ISBN 7-5331 - 3569-5......... :. R277.57 CIP (2003) 109359 : : 16 :250002 : ( 0531 ) 2065109 :www. lkj. com. cn : sdkj @ jn- publi c. sd. cninfo. net : : 16 :250002 : ( 0531 ) 2020432