茂县土地岭大熊猫走廊带

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院牧
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1 中国组织工程研究第 16 卷第 42 期出版 Chinese Journal of Tissue Engineering Research October 14, 2012 Vol.16, No.42 doi: /j.issn [ 张建东, 张天东, 陶若奇, 杨生为. 大豆异黄酮干预去势大鼠骨密度及成骨细胞雌激素受体 α 的表达 [J]. 中国组织工程研究, 2012,16(42): 大豆异黄酮干预去势大鼠骨密度及成骨细胞雌激素受体 α 的表达张建东, 张天东, 陶若奇, 杨生为兰州市第一人民医院骨科, 甘肃省兰州市张建东, 男, 1966 年生, 江苏省徐州市人, 汉族,2005 年兰州大学毕业, 硕士, 副主任医师, 主要从事脊髓损伤及骨质疏松的研究 163.com 中图分类号 :R318 文献标识码 :A 文章编号 : (2012) 收稿日期 : 修回日期 : ( /W T) 文章亮点 : 大豆异黄酮可增加去势大鼠骨密度, 提高去势大鼠成骨细胞雌激素受体 α 的表达, 促进成骨细胞增殖关键词 : 去势大鼠 ; 大豆异黄酮 ; 骨密度 ; 雌激素受体 ; 骨质疏松 ; 组织工程摘要背景 : 大豆异黄酮是一类植物雌激素, 对绝经后骨质疏松症治疗具有重要意义目的 : 进一步验证大豆异黄酮对去势大鼠骨密度和成骨细胞雌激素受体 α 表达的影响方法 : 将 12 月龄去势雌性 SD 大鼠随机分为 3 组, 大豆异黄酮组和对照组大鼠摘除双侧卵巢, 假手术组只进行手术入路, 不切除卵巢大豆异黄酮组切除卵巢后, 每日灌胃大豆异黄酮, 连续 40 d 对照组喂等量生理盐水结果与结论 : 喂饲 40 d 后对照组大鼠左侧股骨骨密度值显著低于假手术组 (P < 0.05), 提示骨质疏松模型成功大豆异黄酮组大鼠左侧股骨骨密度高于对照组 (P < 0.05); 大豆异黄酮组雌激素受体 α 的表达量高于对照组 (P < 0.05) 提示大豆异黄酮可增加去势大鼠骨密度, 提高去势大鼠成骨细胞雌激素受体 α 的表达, 促进成骨细胞增殖 Effect of soy isoflavones on the bone mineral density and the expression of estrogen receptor alpha in osteoblasts of ovariectomized rats Zhang Jian-dong, Zhang Tian-dong, Tao Ruo-qi, Yang Sheng-wei Abstract BACKGROUND: Soy isoflavones (SIF) is a type of plant estrogen that has significance for osteoporosis after menostasia. Department of Orthopedics, Lanzhou First People s Hospital, Lanzhou , Gansu Province, China Zhang Jian-dong, Master, Associate chief physician, Department of Orthopedics, Lanzhou First People s Hospital, Lanzhou , Gansu Province, China Zhangjd86@163.com Received: Accepted: OBJECTIVE: To investigate the effect of SIF on the femoral bone mineral density and the expression of osteoblasts estrogen receptor α in osteoblasts of ovariectomized rats. METHODS: Thirty 12-month-old female ovariectomized rats were randomly divided into three groups: sham operation group, SIF group and control group. The rats in the SIF group and control group were excised bilateral ovarian, while the rats in the sham operation group were only performed operative approach without excision of ovarian. After the ovarian was excised, the rats in the SIF group were given SIF every day for 40 days continuously, and the rats in the control group were given the same dose of normal saline. RESULTS AND CONCLUSION: After 40 days, the value of the left femoral bone mineral density in the control group was significantly lower than that of the sham operation group (P < 0.05); the expression of estrogen receptor α in osteoblasts of SIF group was higher than that of the control group (P < 0.05). These findings suggest that SIF can increase the bone mineral density, improve the expression of estrogen receptor α in osteoblasts of ovariectomized rats, and promote the proliferation of osteoblasts. Zhang JD, Zhang TD, Tao RQ, Yang SW. Effect of soy isoflavones on the bone mineral density and the expression of estrogen receptor alpha in osteoblasts of ovariectomized rats. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu. 2012;16(42):

2 张建东, 等. 大豆异黄酮干预去势大鼠骨密度及成骨细胞雌激素受体 α 的表达主要试剂 : 0 引言试剂来源大豆异黄酮是一类典型的植物雌激素, 其化学结构与雌激素十分相似 [1], 具有弱雌激素样作用, 具有抗肿瘤 [2] 抗氧化 [3] 预防骨质疏松症等诸多生理功能 [4] 可防治骨质疏松症, 尤其是绝经期妇女的骨质疏松症, 且对乳腺子宫等器官无不良影响, 但其防治骨质疏松症的机制尚不十分清楚绝经后妇女约有 25% 患骨质疏松症, 骨质疏松症以骨的高转换为特征, 主要是由卵巢功能衰退, 雌激素分泌不足, 雌激素受体在骨组织表达减少引起的雌激素受体在骨组织成骨细胞和破骨细胞均有表达, 雌激素通过雌激素受体对骨组织产生一个多位点的作用, 维持骨吸收和骨形成的平衡表达增加说明成骨细胞占优势, 骨质形成增加 ; 表达减少说明破骨细胞占优势, 骨破坏增加, 骨吸收与骨形成偶联失衡, 破骨细胞性骨吸收超过了成骨细胞性骨形成, 导致骨量减少, 骨密度下降, 脆性增加绝经后骨质疏松症的治疗方法中最针对病因的治疗方法为雌激素替代疗法但由于补充雌激素对机体其它靶器官 ( 如乳腺和子宫 ) 有不良影响 [5], 故其应用受到一定限制本实验以 12 月龄雌性 SD 大鼠为实验对象, 去卵巢模拟女性绝经期后体内雌激素水平, 观察大豆异黄酮对去势大鼠成骨细胞雌激素受体 α 和骨密度的影响采用了 RT-PCR 检测成骨细胞雌激素受体 αmrna 的表达, 观察大豆异黄酮干预后受体表达的变化, 从分子水平进一步探讨大豆异黄酮对绝经后骨质疏松症的作用机制 1 材料和方法设计 : 随机对照动物实验时间及地点 : 实验于 2010 年 5 月至 2011 年 2 月在兰州大学基础医学院免疫实验室完成, 实验室的生物安全的防护水平达到 BSL-2 材料 : 实验动物 : 清洁级 12 月龄雌性 SD 大鼠 30 只, 体质量 g, 由兰州大学医学院实验动物中心提供, 许可证号受试物 : 大豆异黄酮类提取物, 由大连绿峰天然生物制品公司提供总异黄酮含量 22%,Daidzin9.5%, Daidzein1.5%,Genistin 10.3%,Genistein 0.7%, 除去配糖体, 其总有效成分 14.4% TRIZOL MBI Fermentas 公司 PCR 引物博上公司反转录试剂盒 SYBR 日本 TKR 公司雌二醇放射免疫试剂盒原子高科公司实验方法 : 去除卵巢 : 将大鼠随机分 3 组, 每组 10 只大豆异黄酮组和对照组以 20 g/l 戊巴比妥钠 (40 mg/kg) 麻醉, 行背部肋下入路, 将双侧卵巢摘除假手术组只进行手术入路, 不切除卵巢分组和饲养 : 大豆异黄酮组切除卵巢后, 每日灌胃大豆异黄酮 50 mg/kg, 剂量 1.5 ml/kg, 生理盐水配制, 称质量 1 次 / 周, 调整剂量灌胃 1 次 /d, 连续 40 d; 对照组喂等量生理盐水 ; 假手术组喂等量饲料, 去除标准饲料配方中的大豆粉, 其他营养成分不变称质量与取材 : 实验前后称质量, 每周称质量,40 d 后, 禁食 12 h, 各组大鼠行 20 g/l 戊巴比妥钠 (40 mg/kg) 腹腔注射麻醉, 腹主动脉取血处死, 即刻取左后肢股骨, 剥离干净后以纱布包裹标记, 置于生理盐水中,-20 冰箱中保存, 待测骨密度采用 QDR-4500W 型双能 X 射线骨密度检测仪 (DEA) 测试大鼠股骨骨密度 RNA 提取 : 大鼠腰椎采用 Trizol 法提取细胞 RNA, 电泳, 通过凝胶图像分析, 检验 RNA 是否降解引物的设计合成和反转录反应 : 雌激素受体 α 上游引物 :TGG GCA CCT GTC TCC TTT; 下游引物 :ATC CCT CTT TGC GTT TGG 使用前用焦炭酸二乙酯 (DEPC) 水解成 10 μmol/l 浓度的引物溶液反转录 :1 吸光光度仪测定 RNA 的吸光度值 (A 值 ), 用于检测 RNA 纯度及其浓度 2 反转录过程 RNA 500 ng 根据浓度计算出体积, 冰水浴,4 保存实时荧光定量 : SYBR GREEN PCR 反应, 在微量离心管中加入 DEPC SYBR 上游引物和下游引物等, 得到扩增曲线与 Ct 值, 熔解曲线分析主要观察指标 :1 各组大鼠股骨骨密度测量结果 2 成骨细胞雌激素受体 α mrna 的表达统计学分析 : 由第一作者应用 SPSS 11.0 进行统计学分析, 组间数据比较采用单因素方差分析 2 结果 2.1 实验动物数量分析实验选用大鼠 30 只, 分为 3 ISSN CN /R CODEN: ZLKHAH 7805

www.crter.org 张建东, 等. 大豆异黄酮干预去势大鼠骨密度及成骨细胞雌激素受体 α 的表达组, 每组 10 只, 无数据脱失, 全部进入结果分析 2.

3 张建东, 等. 大豆异黄酮干预去势大鼠骨密度及成骨细胞雌激素受体 α 的表达组, 每组 10 只, 无数据脱失, 全部进入结果分析 2.2 各组大鼠股骨骨密度测量结果见表 1 表 1 各组大鼠股骨骨密度 Table 1 The femoral bone mineral density (BMD) of rats in each group (x _ ±s) Group BMD (g/cm 2 ) Sham 0.083±0.017 Control 0.053±0.015 a Soy isoflavones 0.074±0.012 b a P < 0.05, vs. sham operation group; b P < 0.05, vs. control group 喂饲 40 d 后对照组大鼠左侧股骨骨密度值显著低于假手术组 (P < 0.05), 提示骨质疏松模型成功大豆异黄酮组大鼠左侧股骨骨密度值显著高于对照组 (P < 0.05) 2.3 成骨细胞雌激素受体 α mrna 的表达实验显示成骨细胞雌激素受体 α 和 β-actin 荧光定量 PCR 扩增曲线及熔解曲线表现为单一的熔解峰, 表明各样本的荧光定量 PCR 为特异性扩增见图 1 Figure 1 Fluorescence quantitative PCR curve of estrogen receptor alpha (ERα) in osteoblasts 图 1 成骨细胞雌激素受体 ERα 萤光定量 PCR 扩增曲线由于 Ct 值与扩增片段的实际拷贝数呈反比, 即 Ct 值越低, 样本中的实际含量越高 [4] 本实验荧光定量 PCR 检测结果见表 2 表 2 各组大鼠成骨细胞雌激素受体 α mrna 的表达 Table 2 The expression of estrogen receptor α (ERα) mrna in rats of each group (x _ ±s) Group ERα CT/β-actin CT Sham 0.983±0.026 Control 1.392±0.048 a Soy isoflavones 1.037±0.046 b a P < 0.01, vs. sham operation group; b P < 0.05, vs. control group 对照组大鼠雌激素受体 α 的 Ct 值明显高于假手术组, 差异有显著性意义 (P < 0.01), 说明对照组大鼠雌激素受体 α mrna 含量明显低于假手术组 ; 大豆异黄酮组大鼠雌激素受体 α 的 Ct 值明显低于对照组, 差异有显著性意义 (P < 0.01), 说明大豆异黄酮组大鼠雌激素受体 α mrna 含量明显高于对照组但大豆异黄酮组大鼠雌激素受体 α 的 Ct 值与假手术组比较差异无显著性意义 (P > 0.05), 说明大豆异黄酮组大鼠雌激素受体 αmrna 含量与假手术组相近 3 讨论更年期妇女综合征已成为影响妇女健康的严重问题, 其中绝经期骨质疏松症是其主要并症雌激素水平降低, 对成骨细胞的刺激减弱, 使骨形成和骨吸收平衡失调, 导致绝经妇女骨吸收超过骨形成而导致骨钙丢失骨的快速丢失导致骨质疏松症, 是绝经后骨质疏松发病的最重要的原因绝经后妇女骨质疏松发病率是同龄男性的 6 倍 [6], 其直接后果是骨折, 严重影响生活质量雌激素补充疗法还可以保持腰椎髋部前臂等的骨量, 可减少全身各部位骨折发生危险约 50% 雌激素替代疗法虽疗效确定, 但是长期应用雌激素的安全性 ( 乳癌发生率及已患癌症复发率的影响, 子宫癌胆结石及深部静脉血栓的可能性 ) 子宫出血等使患者感到不安的问题仍在研究之中大豆异黄酮是一类植物雌激素, 主要有金雀异黄素 ( 染料木黄酮 ) 和大豆苷原两种, 其结构与雌激素相似, 故能够与雌激素受体结合, 从而表现出两种重要的生物学活性 : 雌激素活性和抗雌激素活性 [7] 大豆异黄酮有类似雌激素的作用, 具有选择雌激素受体与之结合发挥拮抗作用, 阻止雌二醇 DNA 的激活和蛋白质结合, 避免了上述并发症所以许多人提倡通过膳食中大豆制品的摄入来吸收植物雌激素以防治骨质疏松现很多研究把大豆异黄酮作为雌激素替代物防治绝经后骨质疏松症本实验以大豆异黄酮为受试物以去势雌性大鼠为实验对象, 结果表明, 在喂饲 40 d 后, 去势组大鼠左侧股骨骨密度显著低于假手术组, 提示骨量丢失, 骨强度下降, 骨质疏松模型形成通过大豆异黄酮灌胃, 大豆异黄酮组大鼠左侧股骨骨密度值显著高于对照组说明大豆异黄酮可以增加骨强度, 减少骨量的丢失推测可能的原因是由于切除卵巢引起大鼠体内的内分泌系统发生紊乱, 破坏了骨代谢平衡 ; 雌激素和具有弱雌激素作用的异黄酮补充体内雌激素水平的变化, 维持内分泌系统的稳定, 保持了体内无机元素, 尤其是骨矿物质的 7806

4 张建东, 等. 大豆异黄酮干预去势大鼠骨密度及成骨细胞雌激素受体 α 的表达代谢平衡去势大鼠由于雌激素水平降低, 而雌激素对垂体促性腺激素的分泌和合成呈负反馈作用雌激素水平的下降, 诱导下丘脑弓状核和室旁核脉冲式分泌促性腺激素释放激素至门脉循环, 进而刺激垂体释放促卵泡素和促黄体素增加大豆异黄酮对去势大鼠血清性激素的这种调节作用可能是由于其结构与内源性雌激素相似, 可与下丘脑雌激素受体结合, 提高大鼠体内的雌激素效应绝经后妇女雌激素减少, 引起雌激素受体 α 的表达水平下降, 进而基因转录活性进一步下降, 成骨细胞凋亡加速, 成骨功能减低, 骨代谢偶联失衡, 导致绝经后骨质疏松症的发生雌激素受体 α 对维持骨骼的强度很重要, 绝经后的女性骨量下降, 可能是由于体内缺少雌激素受体 α 人骨组织上雌激素受体的数量在一定程度上决定是否发生骨质疏松及发病的严重程度, 雌激素受体数量减少越多, 骨质疏松的程度就越严重 [8] 目前, 对于成骨细胞雌激素受体的 2 个亚型与骨代谢的密切联系作了部分研究 [9] : 雌激素受体以雌激素受体 α 和雌激素受体 β2 种亚型广泛存在于人体内雌激素根据其结合的受体亚型, 选择性激活细胞内信号传导途径, 表现出多种生物学活性 [10-11] 雌激素对骨吸收的调控作用是通过某些细胞因子的介导和直接对破骨细胞作用完成的雌激素通过与成骨细胞上的雌激素受体特异性结合, 能直接促进成骨细胞功能从而促进骨形成, 调节着雌激素与骨吸收骨形成之间的关系, 从而对骨代谢及骨重建起重要的调控作用因此, 雌激素受体在骨质疏松症的发生过程中起枢纽作用 [12] 配体通过与雌激素受体 α 相互作用对成骨细胞发挥生物学效应在雌激素 - 雌激素受体效应机制中, 雌激素受体比雌激素似乎扮演了更重要角色 [13] 因此, 雌激素受体在成骨细胞中的作用机制研究也显得更为重要 [14] 哪种亚型是成骨细胞的优势表达雌激素受体亚型, 雌激素受体亚型对成骨细胞的具体调控机制是什么, 这些问题的阐明将为治疗骨质疏松等骨代谢相关疾病提供新线索 [15] 最新研究表明, 雌激素主要通过破骨细胞上的雌激素受体 α 对松质骨发挥保护作用, 而对占到骨骼总数 80% 的皮质骨的保护作用则通过骨细胞成骨细胞或其他的细胞类型实现 [16] 此外, 绝经后骨质疏松还与遗传因素有关 [17] 雌激素受体 a 基因的突变与骨质疏松也是密不可分的, 雌激素受体 a 基因的遗传突变决定绝经前后妇女的雌激素水平的高低 [18] 此外, 雌激素受体基因多态性与骨质疏松密切相关, 雌激素受体的基因多态性有可能用于指导治疗选择, 但雌二醇水平与雌激素受体多态性无关 [19] 雌激素受体多态性与骨骼特征的关系存在特异性, 不同年龄段与骨密度相关的多态性位点不同 [20] 总之, 绝经后雌激素水平下降是绝经后骨质疏松症发病的主要原因, 随着年龄增长和绝经后体内雌激素水平降低, 雌激素对骨骼的调节作用是复杂的, 雌激素受体在骨代谢中可能行使着不同的功能, 它们对骨骼发挥保护作用的确切机制尚未阐明 [21] RT-PCR 结果显示, 喂饲 40 d 后, 检测成骨细胞雌激素受体的表达, 通过与内参照 β-actin 的比较可对其表达进行相对定量, 对照组大鼠雌激素受体 α 的 Ct 值明显高于假手术组,2 组比较有显著性差异, 说明对照组大鼠雌激素受体 α mrna 含量明显低于假手术组提示随着雌激素水平的降低, 导致成骨细胞雌激素受体 α 的表达减少, 进而基因转录活性进一步下降, 成骨细胞凋亡加速, 成骨功能减低, 骨代谢偶联失衡, 导致绝经后骨质疏松症的发生在大豆异黄酮干预 40 d 后, 大豆异黄酮组成骨细胞雌激素受体 α mrna 的表达明显高于对照组但与假手术组比较无显著性差异, 说明大豆异黄酮组大鼠雌激素受体 α mrna 含量与假手术组相近提示大豆异黄酮能明显上调成骨细胞雌激素受体 α mrna 的表达, 上调成骨细胞雌激素受体 α mrna 数量, 成骨细胞的雌激素受体 α 在大豆异黄酮干预下发挥作用, 成骨细胞的活性与雌激素受体 α mrna 表达之间存在正相关从而推测大豆异黄酮可能通过提高成骨细胞雌激素受体的表达, 直接促进成骨细胞形成新骨, 提高成骨细胞数量, 或间接地介导胞外信号调控激酶快速激活, 增加成骨细胞增殖, 促进成骨细胞的分化, 抑制成骨细胞凋亡, 调节着雌激素与骨吸收骨形成之间的关系, 从而对骨代谢及骨重建起重要的调控作用, 对因雌激素水平下降而出现成骨细胞和破骨细胞的脱偶联现象起到一定的调节作用 [22-23] 绝经后雌激素水平下降是绝经后骨质疏松症发病的主要原因, 随着年龄增长和绝经后体内雌激素水平降低, 雌激素对骨骼的调节作用是复杂的, 骨细胞上的雌激素受体与绝经后骨质疏松的发生有重要的关系, 雌激素受体 α 在骨代谢中行使着调节作用 [20] 实验结果表明, 大豆异黄酮可增加去势大鼠骨密度, 对去势大鼠成骨细胞雌激素受体 αmrna 的表达影响较为显著 4 参考文献 [1] Rimoldi G, Christoffel J, Seidlova-Wuttke D, et al. Effects of chronic genistein treatment in mammary gland, uterus, and vagina. Environ Health Perspect.2007; 115 (Suppl1): ISSN CN /R CODEN: ZLKHAH 7807

5 张建东, 等. 大豆异黄酮干预去势大鼠骨密度及成骨细胞雌激素受体 α 的表达 [2] Farina HG, Pomies M, Alonso DF, et al. Antitumor and antiangiogenic activity of soy isoflavone genistein in mouse models of melanoma and breast cancer. Oncol Rep.2006;16 (4): [3] Ruan YJ,Zhu XH,Wu SZ,et al.zhongguo Shiyan Dongwu Xuebao.2002;9(3): 阮云军, 朱小虎, 吴赛珠, 等. 雌激素替代治疗去卵巢大鼠血清一氧化氮含量的变化 [J]. 中国实验动物学报,2002,9(3): [4] Ward WE, Fonseca D. Soy isoflavones and fatty acids: effects on bone tissue postovariectomy in mice. Mol Nutr Food Res.2007;51(7): [5] Ishida H, Hesugi T, Hiraik, et al. Preventive effects of the plant isoflavones, daidzin and genistein on bone in ovariectomized rats fed a caleium-defieient diet. Biol Pharm Bull.1998;21(1): [6] Liu ZH.Beijing:Science Press.1998:144 刘忠厚. 骨质疏松学 [M]. 北京 : 科学出版社,1998:144. [7] Setchell L, Zimmer-Nechemias L, Cai J, et al. Phytoestrogens : the biochemistry, physiology, and implications for human health of soy isoflavones. AmJ Clin Nutr.1998;68 (Suppl):1333. [8] Xu YL. Guowai Yixue:Fuchanke Fence.2005;32(5): 许咏乐. 雌激素受体与绝经后骨质疏松 [J]. 国外医学 : 妇产科分册, 2005,32(5): [9] Bai XH. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu yu Linchuang Kangfu.2008;9(37): 白旭华. 雌激素受体与绝经后骨质疏松症 [J]. 中国组织工程研究与临床康复,2008,9(37): [10] Imai Y, Kondoh S, Kouzmenko A, et al.minireview: osteoprotective action of estrogens is mediated by osteoclastic estrogen receptor-alpha. Mol Endocrinol. 2010; 24(5): [11] Nakamura T.1mai Y,Matsumoto T,et al.estrogen prevents bone loss via estrogen receptor alpha and induction of Fas ligand in osteoclasts.cell.2007;130(5): [12] Hou NN,Zhu YM,Huang HF.Fenzi Xibao Shengwu Xuebao. 2006;39(4): 侯宁宁, 朱依敏, 黄荷风. 雌激素受体 α 和 β 在不同雌激素干预大鼠骨代谢中的表达 [J]. 分子细胞生物学报,2006,39(4): [13] Ishimi Y,Yoshida M,Wakimoto S,et al,genistein,a soybean isoflavone,affects bone marrow Iymphopoiensis and prevents bone loss in castrated male mice.bone 2002;31(1): [14] Ishimi Y,Arail N,Wang XX,et al.difference in effective dosage of genistein on bone and uterus in ovariectomized mice.biochem Biophys Res Commun 2000;274: [15] Ou WJ,Yao ZW,Luo JY, et al.disan Junyi Daxue Xuebao. 2010;32(1): 欧文君, 姚珍薇, 骆建云, 等. 雌激素受体 2 基因多态性与绝经后女性骨密度的相关性研究 [J]. 第三军医大学学报,2010,32(1): [16] Martin-Millan M,Almeida M,Ambrogini E,et al.the estrogen receptor-alpha in osteoelasts mediates the protective effects of estrogens on cancellous but not cortical bone.mol Endocrinol. 2010;24(2): [17] Dundar U,Solak M,Kavuncu V,et al.evidence of association of vitamin D receptor Apa I gene polymorphism with bone mineral density in postmenopausal women with osteoporosis. Clin RheumatoI.2009;28: [18] Yasovanthi J,Pulls Reddy B,Venkata Karunakar K,et al.association of estrogen receptor alpha gene polymorphisnas with BMD and their affect on estradiol levels in pre-and postmenopausal women in south Indian population from Andhra Pradesh.Clin China Acta.2010 Jan 28.[Epab ahead of print] [19] Brodowska A,Starezewski A,Brodowski J,et al.the bone mass density in postmenopausal women using hormonal replacement therapy in relation to polymorphism in vitamin D receptor and estrogen receptor genes.gynecol Endocrinol. 2009; 25(5): [20] Massart F,Marini F,Bianchi G,et al.age-specific effects of estrogen receptors polynaorphisms on the bone traits in healthy fertile women:the BONTURNO study.reprod Biol Endocrinol. 2009;7:32. [21] Shang M.Zhongguo Guzhi Shusong Zazhi.2010;16(4): 商敏. 雌激素受体 α 及 β 亚型与绝经后骨质疏松的关系 [J]. 中国骨质疏松杂志,2010,16(4): [22] Ge JR,Lin YP,Zhu XX, et al. Zhongguo Guzhi Shusong Zazhi.2004; 10(4): 葛继荣, 林一萍, 朱小香, 等. 绝经后骨质疏松人群雌激素受体基因 Xbal 多态性和年龄对骨密度的影响 [J]. 中国骨质疏松杂志,2004, 10(4): [23] Ge JR,Xie LH,Chen K, et al. Zhongguo Zhuzhi Gongcheng Yanjiu yu Linchuang Kangfu.2009;13(28): 葛继荣, 谢丽华, 陈可, 等. 维生素 D 受体基因多个位点多态性与绝经后妇女骨密度及骨转换生化标志物的关系 [J]. 中国组织工程研究与临床康复,2009,13(28): 来自本文课题的更多信息 -- 作者贡献 : 设计实施评估者分别为第一二及三作者利益冲突 : 课题未涉及任何厂家及相关雇主或其他经济组织直接或间接的经济或利益的赞助伦理要求 : 实验过程中对动物的处置应符合 2009 年 Ethical issues in animal experimentation 相关动物伦理学标准的条例文章概要 : 文章要点 : 验证大豆异黄酮对去势大鼠骨密度和成骨细胞雌激素受体 α 表达的影响关键信息 : 大豆异黄酮可增加去势大鼠骨密度, 提高去势大鼠成骨细胞雌激素受体 α 的表达, 促进成骨细胞增殖作者声明 : 文章为原创作品, 数据准确, 内容不涉及泄密, 无一稿两投, 无抄袭, 无内容剽窃, 无作者署名争议, 无与他人课题以及专利技术的争执, 内容真实, 文责自负 7808

- 14 - Drug Evaluation Research 第 36 卷第 1 期 2013 年 2 月料 ), 山西皇城相府药业有限公司, 批号 20111003 ( 人口服推荐剂量为每日 3 次, 每次 4 粒, 成人体质量按 60

- 14 - Drug Evaluation Research 第 36 卷第 1 期 2013 年 2 月料 ), 山西皇城相府药业有限公司, 批号 20111003 ( 人口服推荐剂量为每日 3 次, 每次 4 粒, 成人体质量按 60 Drug Evaluation Research 第 36 卷第 1 期 2013 年 2 月 - 13 - 柴青消癖胶囊对乳腺增生模型大鼠的治疗作用研究 * 刘聪, 岳永花, 郝旭亮山西省中医药研究院, 山西太原 030012 摘要 : 目的探讨柴青消癖胶囊对乳腺增生模型大鼠的治