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2013 年 7 月 Vol. 31 No. 7 July 2013 Chinese Journal of Chromatography 709 ~ 713 研 究 论 文 DOI: 10. 3724 / SP. J. 1123. 2012. 12025 高 效 液 相 色 谱 串 联 质 谱 法 测 定 保 健 食 品 中 的 23 种 精 神 药 品 朱 琳 1 ꎬ 阮 丽 萍 2# ꎬ 刘 华 良 2 ꎬ 吉 文 亮 2 1ꎬ2 ꎬ 马 永 建 (1. 东 南 大 学 公 共 卫 生 学 院 ꎬ 江 苏 南 京 210009ꎻ 2. 江 苏 省 疾 病 预 防 与 控 制 中 心 ꎬ 江 苏 南 京 210009) 摘 要 : 建 立 了 高 效 液 相 色 谱 串 联 质 谱 (HPLC MS / MS) 同 时 测 定 保 健 食 品 中 23 种 违 禁 精 神 药 品 的 检 测 方 法 ꎮ 样 品 经 甲 醇 超 声 振 荡 提 取 20 minꎬ 于 12 000 r / min 下 离 心 后 进 行 HPLC MS / MS 分 析 检 测 ꎮ 采 用 Agilent Eclipse Plus C 18 柱 分 离 ꎬ 流 动 相 A 为 10 mmol / L 甲 酸 铵 溶 液 ꎬ 流 动 相 B 为 乙 腈 甲 醇 (1 1ꎬ v / v) 溶 液 ꎬ 梯 度 洗 脱 ꎻ 采 用 电 喷 雾 离 子 源 正 负 离 子 模 式 切 换 多 反 应 监 测 (MRM) 模 式 检 测 ꎮ 23 种 精 神 药 品 在 线 性 范 围 内 线 性 关 系 良 好 ꎬ 相 关 系 数 (R 2 ) 均 大 于 0 990ꎻ 检 出 限 在 0 02 ~ 1 0 μg / L 之 间 ꎻ3 个 添 加 水 平 的 回 收 率 为 82 3% ~ 114 8%ꎬ 相 对 标 准 偏 差 (RSD) 在 1 3% ~ 13 7% 之 间 ꎮ 样 品 筛 查 结 果 发 现 13 种 保 健 品 中 有 1 种 样 品 非 法 添 加 了 安 宁 ꎬ1 种 样 品 添 加 了 奥 沙 西 泮 ꎬ2 种 样 品 添 加 了 扎 来 普 隆 ꎮ 该 方 法 选 择 性 强 灵 敏 度 高 处 理 方 法 简 单 ꎬ 可 用 于 保 健 品 中 违 禁 镇 静 安 神 类 化 学 药 品 的 测 定 ꎮ 关 键 词 : 高 效 液 相 色 谱 串 联 质 谱 ꎻ 精 神 药 品 ꎻ 保 健 食 品 中 图 分 类 号 :O658 文 献 标 识 码 :A 文 章 编 号 :1000 8713(2013)07 0709 05 Simultaneous determination of 23 sedative drugs in health foods by high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry ZHU Lin 1 ꎬ RUAN Liping 2# ꎬ LIU Hualiang 2 ꎬ JI Wenliang 2 ꎬ MA Yongjian 1ꎬ2 (1. School of Public Healthꎬ Southeast Universityꎬ Nanjing 210009ꎬ Chinaꎻ 2. Jiangsu Provincial Center for Disease Control and Preventionꎬ Nanjing 210009ꎬ China) Abstract: An analytical method using HPLC MS / MS was developed for qualitative and quantita tive analysis of 23 sedative drugs in health foods. The method was based on the sonication assisted extraction of the health food samples using 10 ml methanol. The extract was then iso lated by centrifugation and the supernatant was separated on an Agilent Eclipse Plus C 18 column with gradient elution at a flow rate of 300 μl / min. A binary mobile phase was 10 mmol / L ammonium formate (solvent A) and acetonitrile / methanol (1 1ꎬ v / vꎻ solvent B). The electro spray ionization (ESI) source in positive ion mode or negative ion mode was used for multiple reaction monitoring ( MRM). The external standard method was used for the quantification. The calibration graphs were linear in their concentration ranges with the correlation coefficients more than 0 990. The limits of detection (LODꎬ S / N = 3) were between 0 02-1 0 μg / L. The recoveries for all the drugs in health foods were 82 3% - 114 8% with the relative standard deviations less than 14 1% at three spiked levels. Thirteen kinds of health foods were testedꎬ in which meprobamate and oxazepan were found in one sample separatelyꎬ and zaleplon was found in two samples. The method is specificꎬ sensitiveꎬ easy and quick and suitable for the confirmation and quantification of the 23 sedative drugs in health foods. Key words: high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry ( HPLC MS / MS) ꎻ sedative drugsꎻ health foods 慢 性 失 眠 一 直 是 困 扰 各 国 民 众 的 常 见 病 多 发 病 [1] ꎮ 精 神 药 品 包 括 苯 二 氮 类 巴 比 妥 类 非 苯 二 氮 类 抗 焦 虑 剂 [2] ꎬ 常 用 于 治 疗 失 眠 焦 虑 等 临 床 疾 病 ꎻ 但 这 类 药 物 副 作 用 大 ꎬ 且 治 标 不 治 本 ꎬ 需 长 期 服 # 并 列 第 一 作 者. 通 讯 联 系 人. Tel:(025)68359366ꎬE mail:mayongjian@ jscdc. cn. 基 金 项 目 : 江 苏 省 科 技 厅 科 技 支 撑 计 划 项 目 (BE2010745). 收 稿 日 期 :2012 12 19

710 色 谱 第 31 卷 用 ꎬ 易 产 生 依 赖 性 ꎮ 某 些 生 产 厂 家 利 用 保 健 品 成 分 复 杂 质 量 标 准 不 完 善 等 监 管 空 缺 ꎬ 在 保 健 品 中 非 法 添 加 精 神 药 品 以 提 高 其 产 品 的 疗 效 ꎬ 欺 骗 消 费 者 ꎮ 建 立 保 健 品 中 非 法 添 加 精 神 药 品 的 快 速 检 测 方 法 对 防 止 和 打 击 此 类 不 法 行 为 ꎬ 保 障 人 民 健 康 具 有 极 为 重 要 的 意 义 ꎮ 精 神 药 品 的 滥 用 一 直 是 全 球 关 注 的 重 点 之 一 ꎮ 各 类 基 质 中 多 种 微 量 精 神 药 品 的 检 测 均 有 报 道 ꎬ 包 括 血 液 [3] 尿 液 [4] 头 发 和 指 甲 [5] 唾 液 [6] 奶 制 品 [7] 动 物 组 织 [8] [9ꎬ10] 中 成 药 及 保 健 品 等 ꎮ 检 测 方 法 有 薄 层 色 谱 法 [11] 酶 联 免 疫 分 析 法 ( ELISA ) [12] HPLC 法 [13ꎬ14] GC 法 [15ꎬ16] GC MS 法 [17] [18ꎬ19] HPLC MS / MS 法 和 UPLC Q TOF MS [20] 法 等 ꎮ 保 健 食 品 中 通 常 含 有 多 种 中 药 材 ꎬ 基 质 复 杂 多 样 ꎬ 薄 层 扫 描 法 ELISA 和 HPLC 法 在 定 性 时 容 易 出 现 假 阳 性 ꎬ 已 经 不 适 用 于 保 健 食 品 中 精 神 药 品 分 析 的 要 求 ꎮ GC 和 GC MS 对 部 分 药 物 的 分 析 需 要 进 行 衍 生 化 ꎬ 费 时 较 长 ꎮ HPLC MS / MS 法 灵 敏 度 高 ꎬ 选 择 性 和 特 异 性 好 ꎬ 在 多 组 分 微 量 成 分 的 分 析 上 显 示 出 了 极 大 的 优 越 性 ꎬ 被 越 来 越 多 地 用 于 保 健 食 品 中 非 法 添 加 化 学 药 物 的 研 究 ꎮ 目 前 已 报 道 的 检 测 [7-10] [3-6] 方 法 多 为 同 时 检 测 几 种 或 十 余 种 精 神 药 品 ꎬ 而 且 多 为 早 期 临 床 上 使 用 的 镇 静 安 神 类 药 物 ꎮ 随 着 医 药 行 业 的 发 展 ꎬ 更 多 的 化 学 药 物 用 于 失 眠 症 的 治 疗 [21ꎬ22] ꎮ 生 产 企 业 也 会 选 择 尚 未 被 监 测 的 活 性 成 分 添 加 ꎮ 建 立 专 属 性 强 灵 敏 度 高 定 性 和 定 量 准 确 能 同 时 检 测 数 十 种 精 神 药 品 的 分 析 方 法 势 在 必 行 ꎮ 本 研 究 收 集 了 临 床 上 具 有 镇 定 安 神 效 果 的 23 种 化 学 药 物 ꎬ 建 立 了 可 以 对 其 同 时 检 测 和 确 证 的 HPLC MS / MS 法 ꎬ 为 保 健 食 品 中 违 禁 精 神 药 品 的 监 督 提 供 了 有 力 的 工 具 ꎮ 1 实 验 部 分 1. 1 仪 器 试 剂 与 材 料 ACCELA 高 效 液 相 色 谱 仪 TSQ Quantum Ac cess Max 三 重 四 极 杆 质 谱 仪 ( 配 电 喷 雾 离 子 源 ꎬ 美 国 Thermo Fisher 公 司 生 产 )ꎻ D 78224 超 声 波 清 洗 机 ( 德 国 Elma 公 司 生 产 )ꎻ Sigma 1 14 离 心 机 ( 德 国 赛 多 利 斯 公 司 )ꎻ 甲 醇 乙 腈 和 甲 酸 铵 均 为 色 谱 纯 ( 迪 马 公 司 )ꎻ 实 验 用 水 为 Milli Q 纯 水 系 统 ( Milli pore 公 司 ) 制 备 ꎮ 标 示 具 有 改 善 睡 眠 功 能 的 保 健 食 品 样 品 购 自 本 地 超 市 及 本 实 验 室 检 品 ꎮ 23 种 精 神 药 品 标 准 品 : 阿 普 唑 仑 ( alprazo lam) 异 戊 巴 比 妥 ( amobarbital) 氯 硝 安 定 ( clon azepam) 氯 氮 卓 ( chlordiazepoxide) 安 定 ( diaze pam) 艾 司 唑 仑 ( estazolam) 劳 拉 西 泮 ( lozaze pam) 安 宁 ( meprobamate) 安 眠 酮 ( methaqua lone) 咪 唑 安 定 ( midazolam) 硝 基 安 定 ( nitraze pam) 去 甲 安 定 ( nordiazepam) 奥 沙 西 泮 ( oxaze pan) 苯 巴 比 妥 ( phenobarbital ) 三 唑 仑 ( trizo lam) 扎 来 普 隆 (zaleplon)(1 mg / ml 甲 醇 溶 液 ꎬ 美 国 Cerilliant 公 司 )ꎻ 阿 扎 哌 隆 ( azaperone) 和 氯 丙 嗪 (chlorpromazine) ( 德 国 Dr. Ehrenstorfer 实 验 室 )ꎻ 巴 比 妥 ( barbital) 和 氯 氮 平 ( clozapine) ( 中 国 食 品 药 品 检 定 研 究 院 )ꎻ 氟 哌 啶 醇 ( haloperidol) 奋 乃 静 ( perphenazine) 和 赛 拉 嗪 ( xylazine) ( Sigma 公 司 )ꎮ 标 准 溶 液 : 精 确 称 取 一 定 量 的 固 体 标 准 品 ꎬ 以 甲 醇 为 溶 剂 ꎬ 分 别 制 备 质 量 浓 度 为 1 g / L 的 标 准 储 备 液 ꎮ 购 于 Cerilliant 公 司 的 上 述 对 照 品 甲 醇 溶 液 亦 作 为 标 准 储 备 液 ꎮ 于 - 20 冰 箱 中 保 存 ꎮ 分 别 精 密 量 取 上 述 23 种 对 照 品 溶 液 适 量 ꎬ 置 于 10 ml 量 瓶 中 ꎬ 加 甲 醇 定 容 至 刻 度 ꎬ 得 含 巴 比 妥 苯 巴 比 妥 和 异 戊 巴 比 妥 均 为 100 mg / Lꎬ 含 安 眠 酮 氟 哌 啶 醇 阿 扎 哌 隆 咪 唑 安 定 氯 氮 平 和 奋 乃 静 均 为 2 mg / Lꎬ 含 其 他 14 种 对 照 品 均 为 10 mg / L 的 混 合 对 照 品 储 备 液 ꎮ 1. 2 样 品 处 理 取 供 试 品 ( 片 剂 ꎬ 取 数 片 ꎬ 研 细 ꎻ 胶 囊 剂 ꎬ 取 数 粒 ꎬ 倾 取 内 容 物 ꎬ 研 细 )ꎬ 准 确 称 取 1 0 g 样 品 于 10 ml 容 量 瓶 中 ꎬ 加 甲 醇 适 量 ꎬ 超 声 提 取 20 minꎬ 放 冷 ꎬ 加 甲 醇 至 刻 度 ꎬ 摇 匀 ꎮ 于 12 000 r / min 离 心 5 minꎬ 上 清 液 用 于 HPLC MS / MS 测 定 ꎮ 1. 3 实 验 条 件 色 谱 条 件 : 色 谱 柱 为 Agilent Eclipse Plus C 18 柱 (100 mm 2 1 mmꎬ 3 5 μm)ꎮ 流 动 相 A 为 10 mmol / L 甲 酸 铵 溶 液 ꎬ 流 动 相 B 为 乙 腈 甲 醇 (1 1ꎬ v / v) 溶 液 ꎮ 梯 度 洗 脱 程 序 :0 ~ 2 minꎬ 12% Bꎻ 2 ~ 6 minꎬ 12% B ~ 50% Bꎻ 6 ~ 12 minꎬ 50% Bꎻ 12 ~ 17 minꎬ 50% B ~ 100% Bꎻ 17 ~ 18 minꎬ 100% B ~ 12% Bꎻ 18 ~ 23 minꎬ 12% Bꎮ 流 速 0 3 ml / minꎬ 柱 温 30 ꎬ 进 样 体 积 10 μlꎮ 质 谱 条 件 : 电 喷 雾 电 离 正 离 子 模 式 (ESI + ) 和 负 离 子 模 式 (ESI - ) 切 换 ꎻ 多 反 应 监 测 (MRM)ꎻ 喷 雾 电 压 : + 3 0 kv 或 - 2 5 kvꎻ 辅 助 气 ( N 2 ) 流 量 :3 0 L / minꎻ 鞘 气 ( N 2 ) 流 量 :12 L / minꎻ 碰 撞 气 ( Ar) 压 力 :0 200 Pa(1 5 mtor)ꎻ 毛 细 管 温 度 :350 ꎻ 气 化 温 度 :400 ꎮ 其 他 质 谱 参 数 见 表 1ꎮ

第 7 期 朱 琳 ꎬ 等 : 高 效 液 相 色 谱 串 联 质 谱 法 测 定 保 健 食 品 中 的 23 种 精 神 药 品 711 表 1 23 种 精 神 药 品 在 MRM 模 式 下 检 测 的 质 谱 参 数 Table 1 MS parameters for the 23 sedative drugs in MRM mode Drug t R / min Tube lens / V MRM transition (m / z) Collision energy / ev Barbital 4. 86-56 183. 0 > 140. 1 13 183. 0 > 42. 6 20 Meprobamate 5. 92 66 219. 2 > 158. 2 5 219. 2 > 97. 32 11 Xylazine 5. 88 90 221. 02 > 90. 3 22 221. 0 > 164. 2 25 Amobarbital 7. 43-67 225. 0 > 182. 1 15 225. 0 > 42. 6 21 Phenobarbital 6. 02-60 231. 0 > 188. 1 13 231. 0 > 42. 5 16 Methaqualone 8. 11 94 251. 0 > 132. 1 26 251. 0 > 91. 22 37 Nordiazepam 10. 2 96 271. 0 > 140. 1 27 271. 0 > 208. 1 26 Nitrazepam 7. 78 98 282. 0 > 236. 1 23 282. 0 > 180. 1 35 Diazepam 12. 36 98 285. 0 > 154. 1 25 285. 0 > 91. 2 40 Oxazepan 8. 16 90 288. 0 > 242. 0 19 288. 0 > 269. 9 13 Estazolam 8. 04 98 295. 0 > 267. 1 24 295. 0 > 241. 1 23 Chlordiazepoxide 9. 05 80 300. 1 > 227. 0 23 300. 1 > 282. 0 21 Zaleplon 7. 04 101 306. 0 > 236. 0 25 306. 0 > 263. 9 20 Alprazolam 8. 83 98 309. 0 > 205. 3 40 309. 0 > 165. 0 29 Clonazepam 7. 88-71 314. 0 > 278. 0 18 314. 0 > 285. 9 19 Chlorpromazine 14. 49 75 319. 0 > 86. 3 19 319. 0 > 214. 1 40 Lozazepam 8. 37-64 319. 0 > 283. 0 16 319. 0 > 291. 0 13 Midazolam 11. 62 100 326. 0 > 291. 2 26 326. 0 > 209. 1 32 Clozapine 13. 56 93 327. 1 > 192. 1 41 327. 1 > 227. 0 31 Azaperone 11. 33 93 328. 0 > 165. 2 20 328. 0 > 121. 3 22 Trizolam 8. 8 106 343. 0 > 308. 0 24 343. 0 > 165. 0 31 Haloperidol 8. 43 89 376. 0 > 165. 1 22 376. 0 > 123. 1 34 Perphenazine 15. 83 94 404. 0 > 171. 1 21 Quantitative ion. 404. 0 > 143. 1 26 管 透 镜 电 压 和 碰 撞 能 量 进 行 了 优 化 ꎬ 得 到 的 各 物 质 的 特 征 离 子 和 碰 撞 能 量 如 表 1 所 示 ꎮ 23 种 化 合 物 的 母 离 子 均 为 准 分 子 离 子 峰 [ M + H] + 或 [ M - H] - ꎻ 2 种 电 离 方 式 可 以 同 时 检 测 ꎮ 为 了 获 得 良 好 的 分 离 效 果 和 离 子 化 效 率 ꎬ 本 实 验 对 流 动 相 进 行 了 优 化 ꎮ 分 别 比 较 了 甲 醇 和 乙 腈 作 为 有 机 相 ꎬ 水 乙 酸 铵 和 甲 酸 铵 作 为 水 相 的 分 离 效 果 ꎮ 结 果 将 甲 醇 和 乙 腈 按 1 1 的 体 积 比 混 合 作 为 有 机 相 的 分 离 效 果 最 好 ꎻ 水 相 中 加 入 缓 冲 盐 ꎬ 多 个 化 合 物 的 拖 尾 峰 形 得 到 明 显 的 改 善 ꎬ 响 应 值 增 大 ꎻ 甲 酸 铵 与 乙 酸 铵 相 比 ꎬ 能 使 保 留 时 间 短 的 化 合 物 出 峰 时 间 延 长 ꎬ 减 少 了 基 质 的 干 扰 ꎮ 最 终 将 流 动 相 确 定 为 甲 醇 乙 腈 (1 1ꎬ v / v) 为 有 机 相 ꎬ10 mmol / L 甲 酸 铵 溶 液 作 水 相 ꎬ 梯 度 洗 脱 分 离 ꎮ 优 化 条 件 下 23 种 精 神 药 品 标 准 溶 液 的 MRM 谱 图 见 图 1ꎮ 2 结 果 与 讨 论 2. 1 实 验 条 件 考 察 2. 1. 1 HPLC MS / MS 条 件 优 化 首 先 利 用 流 动 注 射 的 方 式 对 各 种 待 测 化 合 物 的 Fig. 1 图 1 23 种 精 神 药 品 标 准 溶 液 的 MRM 谱 图 Chromatograms of a mixed standard solution of the 23 sedative drugs in MRM mode

712 色 谱 第 31 卷 2. 1. 2 提 取 溶 剂 的 选 择 本 实 验 中 23 种 目 标 化 合 物 于 甲 醇 中 均 有 较 好 的 溶 解 度 ꎬ 故 选 择 不 同 浓 度 的 甲 醇 水 溶 液 作 提 取 溶 剂 ꎬ 比 较 其 提 取 效 果 ꎮ 试 验 结 果 表 明 ꎬ 甲 醇 浓 度 越 低 ꎬ 提 取 液 的 颜 色 越 深 ꎬ 水 溶 性 杂 质 越 多 ꎮ 对 于 大 多 数 保 健 品 ꎬ 以 100% 甲 醇 提 取 时 ꎬ 高 速 离 心 后 的 提 取 液 比 较 洁 净 ꎬ 无 需 进 一 步 净 化 ꎬ 简 化 了 样 品 前 处 理 过 程 ꎬ 最 终 确 定 以 甲 醇 为 提 取 液 ꎮ 2. 2 方 法 学 考 察 2. 2. 1 标 准 曲 线 和 基 质 效 应 为 了 比 较 样 品 基 质 对 目 标 化 合 物 质 谱 响 应 的 影 响 ꎬ 以 阴 性 口 服 液 和 阴 性 胶 囊 样 品 制 作 空 白 基 质 溶 液 ꎬ 分 别 添 加 相 应 的 标 准 品 制 备 空 白 基 质 匹 配 的 混 合 标 准 溶 液 ꎮ 分 别 以 各 分 析 物 的 峰 面 积 (Y) 和 对 应 的 质 量 浓 度 (Xꎬ μg / L) 进 行 线 性 回 归 计 算 ꎬ 得 到 线 性 方 程 和 相 关 系 数 ꎮ 巴 比 妥 异 戊 巴 比 妥 苯 巴 比 妥 的 线 性 范 围 为 0 1 ~ 10 μg / Lꎬ 安 眠 酮 咪 唑 安 定 氯 硝 安 定 阿 扎 哌 隆 氟 哌 啶 醇 奋 乃 静 的 线 性 范 围 为 0 002 ~ 0 2 μg / Lꎬ 其 他 14 种 化 合 物 的 线 性 范 围 为 0 01 ~ 1 μg / Lꎮ 在 线 性 范 围 内 ꎬ 各 分 析 物 均 有 良 好 的 线 性 关 系 ( 相 关 系 数 R 2 均 不 小 于 0 990)ꎮ 口 服 液 和 胶 囊 样 品 基 质 使 得 某 些 目 标 化 合 物 质 谱 信 号 增 加 或 减 少 ꎬ 如 赛 拉 嗪 安 眠 酮 硝 基 安 定 扎 来 普 隆 氯 硝 安 定 氯 氮 平 阿 扎 哌 隆 等 ꎬ 但 其 斜 率 变 化 均 在 标 准 曲 线 斜 率 的 ± 20% 范 围 内 ꎬ 因 而 可 忽 略 基 质 效 应 [23ꎬ24] ꎮ 2. 2. 2 检 出 限 与 定 量 限 取 混 合 对 照 品 储 备 液 用 甲 醇 倍 比 稀 释 后 测 定 ꎬ 以 信 噪 比 约 为 3 时 对 应 的 各 标 准 溶 液 浓 度 为 检 出 限 ꎻ 以 信 噪 比 约 为 10 时 对 应 的 各 标 准 溶 液 浓 度 为 定 量 限 ꎮ 各 目 标 药 物 的 检 出 限 和 定 量 限 结 果 见 表 2ꎮ 2. 2. 3 加 标 回 收 率 和 精 密 度 以 不 含 目 标 化 合 物 的 口 服 液 和 胶 囊 保 健 品 为 本 底 ꎬ 分 别 在 3 个 加 标 水 平 进 行 加 标 回 收 率 测 定 ꎮ 巴 比 妥 苯 巴 比 妥 和 异 戊 巴 比 妥 的 3 个 加 标 水 平 分 别 为 0 1 1 和 10 mg / Lꎻ 安 眠 酮 氟 哌 啶 醇 阿 扎 哌 隆 咪 唑 安 定 氯 氮 平 和 奋 乃 静 6 种 化 合 物 分 别 为 0 002 0 02 和 0 2 mg / Lꎻ 其 他 14 种 化 合 物 分 别 为 0 01 0 1 和 1 mg / Lꎻ 平 行 测 定 6 次 ꎬ 以 评 价 该 方 法 的 准 确 度 ꎮ 所 得 到 的 平 均 加 标 回 收 率 和 相 对 标 准 偏 差 (RSD) 见 表 2ꎮ 所 得 结 果 均 符 合 食 品 理 化 检 测 要 求 [25] ꎮ 表 2 23 种 精 神 药 品 的 检 出 限 定 量 限 及 其 在 空 白 口 服 液 和 胶 囊 保 健 品 中 的 加 标 回 收 率 和 精 密 度 Table 2 Limits of detection ( LODs) ꎬ limits of quantification ( LOQs) and recoveries and relative standard deviations (RSD) spiked in blank oral liquid and capsule samples at three spiked levels of the 23 sedative drugs Drug LOD / (μg / L) LOQ / (μg / L) Oral liquid Level 1 Level 2 Level 3 Recoveries (RSD) (n = 6) / % Capsule Level 1 Level 2 Level 3 Barbital 1 3 92. 5 (9. 2) 96. 7 (2. 9) 103. 9 (4. 8) 98. 4 (4. 2) 98. 8 (5. 7) 107. 3 (2. 4) Meprobamate 0. 1 0. 3 92. 2 (11. 2) 97. 0 (5. 6) 96. 7 (2. 4) 95. 1 (13. 7) 103. 4 (6. 1) 94. 1 (6. 4) Xylazine 0. 1 0. 3 101. 0 (3. 6) 104. 1 (4. 0) 95. 2 (6. 9) 101. 1 (3. 2) 106. 6 (7. 1) 91. 4 (7. 9) Amobarbital 1 3 95. 5 (4. 7) 102. 8 (5. 8) 99. 8 (3. 9) 102. 0 (8. 0) 93. 7 (4. 1) 101. 0 (2. 1) Phenobarbital 1 3 82. 3 (1. 9) 85. 6 (5. 3) 100. 5 (3. 2) 99. 5 (7. 0) 92. 5 (4. 1) 101. 8 (3. 5) Methaqualone 0. 02 0. 06 100. 2 (12. 7) 11. 6 (0. 5) 94. 0 (1. 4) 110. 3 (1. 1) 98. 7 (6. 5) 98. 3 (4. 3) Nordiazepam 0. 1 0. 3 85. 5 (9. 6) 105. 3 (5. 7) 94. 7 (0. 7) 112. 8 (7. 9) 99. 5 (8. 4) 101. 7 (6. 8) Nitrazepam 0. 1 0. 3 81. 6 (5. 8) 103. 6 (2. 6) 98. 0 (3. 1) 109. 2 (5. 5) 104. 9 (7. 3) 100. 4 (2. 4) Diazepam 0. 1 0. 3 88. 8 (12. 5) 110. 4 (4. 6) 95. 1 (2. 5) 108. 8 (7. 1) 106. 8 (9. 1) 99. 9 (6. 2) Oxazepan 0. 1 0. 3 95. 5 (14. 6) 94. 6 (2. 1) 98. 3 (4. 7) 98. 3 (10. 3) 98. 9 (2. 0) 103. 1 (7. 3) Estazolam 0. 1 0. 3 84. 5 (5. 2) 9. 8 (7. 2) 97. 3 (3. 1) 109. 8 (2. 6) 102. 8 (6. 4) 100. 4 (6. 1) Chlordiazepoxide 0. 1 0. 3 89. 4 (3. 2) 97. 1 (4. 5) 82. 7 (3. 3) 107. 7 (8. 2) 106. 7 (9. 7) 90. 2 (5. 0) Zaleplon 0. 1 0. 3 101. 8 (13. 6) 97. 1 (8. 7) 98. 2 (2. 7) 103. 6 (12. 0) 96. 5 (1. 2) 97. 1 (5. 6) Alprazolam 0. 1 0. 3 105. 5 (3. 8) 104. 4 (6. 4) 86. 1 (5. 7) 106. 1 (8. 7) 110. 1 (9. 0) 94. 8 (4. 7) Clonazepam 0. 1 0. 3 90. 5 (7. 5) 98. 6 (6. 8) 100. 2 (2. 6) 110. 4 (5. 7) 93. 2 (7. 3) 99. 7 (7. 2) Chlorpromazine 0. 1 0. 3 105. 7 (11. 1) 111. 6 (2. 0) 95. 3 (3. 2) 105. 3 (6. 5) 104. 5 (8. 6) 97. 9 (4. 6) Lozazepam 0. 1 0. 3 103. 3 (6. 7) 93. 6 (7. 4) 97. 1 (1. 8) 103. 5 (9. 5) 89. 5 (6. 1) 105. 5 (4. 8) Midazolam 0. 02 0. 06 91. 9 (5. 7) 108. 6 (5. 9) 97. 4 (2. 5) 99. 5 (7. 5) 111. 4 (3. 4) 94. 7 (4. 8) Clozapine 0. 02 0. 06 101. 8 (10. 3) 105. 7 (1. 3) 97. 9 (3. 3) 112. 2 (4. 4) 96. 8 (5. 3) 97. 3 (6. 0) Azaperone 0. 02 0. 06 90. 5 (9. 7) 103. 6 (2. 9) 96. 4 (1. 5) 114. 8 (1. 3) 109. 2 (4. 1) 96. 8 (5. 5) Trizolam 0. 1 0. 3 82. 3 (8. 1) 108. 9 (6. 2) 96. 2 (2. 2) 89. 0 (7. 6) 109. 4 (5. 5) 99. 8 (3. 3) Haloperidol 0. 02 0. 06 81. 9 (13. 3) 108. 1 (1. 4) 92. 5 (1. 3) 109. 1 (9. 6) 102. 9 (7. 5) 95. 8 (7. 4) Perphenazine 0. 02 0. 06 93. 6 (10. 7) 98. 9 (7. 0) 98. 7 (2. 3) 114. 9 (1. 4) 98. 1 (6. 7) 99. 1 (3. 5) Levels 1ꎬ 2ꎬ and 3: 0. 1ꎬ 1 and 10 mg / L for barbitalꎬ phenobarbital and amobarbitalꎻ 0. 002ꎬ 0. 02 and 0. 2 mg / L for methaqualoneꎬ haloperidolꎬ azaperoneꎬ midazolamꎬ clozapine and perphenazineꎻ 0. 01ꎬ 0. 1 and 1 mg / L for others.

第 7 期 朱 琳 ꎬ 等 : 高 效 液 相 色 谱 串 联 质 谱 法 测 定 保 健 食 品 中 的 23 种 精 神 药 品 713 2. 3 样 品 测 定 分 别 按 1 2 节 的 方 法 处 理 13 种 样 品 ꎬ 依 法 测 定 ꎮ 结 果 表 明 ꎬ13 种 保 健 品 中 有 一 种 添 加 了 安 宁 (207 μg / kg)ꎬ 一 种 添 加 了 奥 沙 西 泮 (5 1 mg / kg)ꎬ 2 种 添 加 了 扎 来 普 隆 ( 分 别 为 53 和 511 μg / kg)ꎮ 3 结 论 本 文 建 立 了 HPLC MS / MS 检 测 保 健 品 食 品 中 非 法 添 加 23 种 镇 静 安 神 类 化 学 药 品 的 方 法 ꎮ 从 实 际 样 品 的 检 测 结 果 来 看 ꎬ 本 方 法 准 确 可 靠 ꎬ 灵 敏 度 高 ꎬ 适 用 于 保 健 品 中 非 法 添 加 多 种 精 神 药 品 的 确 证 定 量 检 测 ꎬ 为 控 制 保 健 品 质 量 打 击 保 健 品 行 业 非 法 添 加 行 为 提 供 有 效 依 据 ꎮ 参 考 文 献 : [1] Morin C Mꎬ Espie C A. Insomnia A Clinical Guide to Assess ment and Treatment. New York: Kluwer Academic Publish ersꎬ 2004 [2] Caplan J Pꎬ Epstein L Aꎬ Quinn D Kꎬ et al. Neuropsychol Revꎬ 2007ꎬ 17: 363 [3] Sauve E Nꎬ Langϕdegård Mꎬ Ekeberg Dꎬ et al. J Chroma togr Bꎬ 2012ꎬ 883 / 884: 177 [4] Borrey Dꎬ Meyer Eꎬ Lambert Wꎬ et al. J Chromatogr Bꎬ 2001ꎬ 765: 187 [5] Irving R Cꎬ Dickson S J. Forensic Sci Intꎬ 2007ꎬ 166: 58 [6] Lund H M Eꎬ Φiestad E Lꎬ Gjerde Hꎬ et al. J Chromatogr Bꎬ 2011ꎬ 879: 3367 [7] Su H Bꎬ Li B Kꎬ Wu P Fꎬ et al. Journal of Qiqihar University of Medicine ( 苏 海 滨 ꎬ 李 百 舸 ꎬ 吴 鹏 飞 ꎬ 等. 齐 齐 哈 尔 医 学 院 学 报 )ꎬ 2011ꎬ 32(4): 514 [8] Zhang Jꎬ Shao Bꎬ Yin Jꎬ et al. J Chromatogr Bꎬ 2009ꎬ 877: 1915 [9] Yao Yꎬ Li H Yꎬ Zhang Q Mꎬ et al. Chinese Pharmaceutical Journal ( 姚 羽 ꎬ 李 慧 义 ꎬ 张 启 明 ꎬ 等. 中 国 药 学 杂 志 )ꎬ 2007ꎬ 42(3): 224 [10] Jin P Fꎬ Wang Z Hꎬ Wang W Fꎬ et al. Chinese Pharmaceu tical Journal ( 金 鹏 飞 ꎬ 王 志 宏 ꎬ 王 伟 夫 ꎬ 等. 中 国 药 学 杂 志 )ꎬ 2012ꎬ 47(6): 462 [11] Xiao L Hꎬ Liu J Jꎬ Guan X Yꎬ et al. China Modern Medi cine ( 肖 丽 和 ꎬ 刘 吉 金 ꎬ 关 潇 滢 ꎬ 等. 中 国 当 代 医 药 )ꎬ 2009ꎬ 16(14): 15 [12] Cooper Jꎬ Delahaut Pꎬ Fodey T Lꎬ et al. Analystꎬ 2004ꎬ 129(2): 169 [13] Mercolini Lꎬ Bugamelli Fꎬ Kenndler Eꎬ et al. J Chromatogr Bꎬ 2007ꎬ 846(1 / 2): 273 [14] Mercolini Lꎬ Mandrioli Rꎬ Iannello Cꎬ et al. Talantaꎬ 2009ꎬ 80(1): 279 [15] Nishioka R. J Chromatogr Bꎬ 1996ꎬ 681: 401 [16] Krogh Mꎬ Grefslie Hꎬ Rasmussen K Eꎬ et al. J Chromatogr Bꎬ 1997ꎬ 689(2): 357 [17] Gunnar Tꎬ Ariniemi Kꎬ Lillsunde P. J Chromatogr Bꎬ 2005ꎬ 818: 175 [18] Rust K Yꎬ Baumgartner M Rꎬ Meggiolaro Nꎬ et al. Forensic Sci Intꎬ 2012ꎬ 215: 64 [19] Lendoiro Eꎬ Quintela O ꎬ Castro A Dꎬ et al. Forensic Sci Intꎬ 2012ꎬ 217: 207 [20] Xu C Bꎬ Suo Rꎬ Zhang Fꎬ et al. Chinese Journal of Chro matography ( 许 成 保 ꎬ 锁 然 ꎬ 张 峰 ꎬ 等. 色 谱 )ꎬ 2012ꎬ 30 (5): 457 [21] Ishida Tꎬ Kudo Kꎬ Hayashida Mꎬ et al. J Chromatogr Bꎬ 2009ꎬ 877: 2652 [22] Chen X Qꎬ Jin Y Yꎬ Tang G. New Pharmacology. 17th ed. Beijing: People s Medical Publishing House ( 陈 新 谦 ꎬ 金 有 豫 ꎬ 汤 光. 新 编 药 物 学. 17 版. 北 京 : 人 民 卫 生 出 版 社 )ꎬ 2011 [23] Greulich Kꎬ Alder L. Anal Bioanal Chemꎬ 2008ꎬ 391: 183 [24] Gilbert López Bꎬ García Reyes J Fꎬ Lozano Aꎬ et al. J Chromatogr Aꎬ 2010ꎬ 1217: 6022 [25] GB / T 27404 2008