+++ 期 效 果 不 佳 因 此 建 立 接 近 人 类 肝 癌 临 床 特 征 的 动 物 模 型 对 于 观 察 体 内 生 长 和 转 移 规 律 研 究 肿 瘤 对 各 种 治 疗 的 反 应 以 及 寻 找 新 的 肝 癌 治 疗 方 法 具 有 重 要 意 义 荧 光 素 酶 $ /!

++ 实 验 研 究 联 合 生 物 素 荧 光 成 像 建 立 大 鼠 肝 癌 模 型 及 其 初 步 应 用 潘 立 超 张 爱 群 柏 佳 谭 晓 宇 葛 新 兰 赖 彦 华 董 家 鸿 摘 要 目 的 利 用 荧 光 素 酶 标 记 的 肝 癌 细 胞 建 立 可 供 活 体 观 察 的 大 鼠 肝 癌 模 型 在 此 基 础 上 观 察 选 择 性 结 扎 门 静 脉 和 胆 管 对 肿 瘤 生 长 和 转 移 的 影 响 方 法 以! "#$% & 为 载 体 将 荧 光 素 酶 基 因 转 染 至 大 鼠 肝 癌 细 胞 皮 下 接 种 大 鼠 取 瘤 块 异 体 种 植 于 大 鼠 肝 脏 左 外 叶 活 体 观 察 肿 瘤 生 长 状 态 肝 癌 建 模 成 功 后 随 机 将 大 鼠 分 为 三 组 即 种 植 叶 门 静 脉 联 合 胆 管 双 结 扎 组 单 纯 门 静 脉 结 扎 组 和 假 手 术 组 分 别 于 结 扎 后 ' 周 和 周 处 死 解 剖 肝 肺 肾 观 察 肝 内 外 肿 瘤 生 长 和 转 移 情 况 结 果 皮 下 和 肝 内 种 植 大 鼠 的 成 瘤 率 均 为 ' 转 染 荧 光 素 酶 肝 内 种 植 周 后 接 种 肝 叶 活 体 观 察 可 见 荧 光 信 号 荧 光 信 号 范 围 和 强 度 随 时 间 的 推 移 增 加 周 时 肿 瘤 仍 呈 局 部 生 长 未 见 明 显 肝 内 和 肺 转 移 门 脉 联 合 胆 管 结 扎 术 后 不 仅 原 位 肿 瘤 体 积 增 大 并 且 于 结 扎 后 周 出 现 肺 转 移 免 疫 组 化 显 示 肝 内 瘤 灶 绝 大 多 数 肿 瘤 细 胞 呈 甲 胎 蛋 白 ( 免 疫 反 应 阳 性 部 分 瘤 细 胞 显 示 阳 性 结 论 细 胞 能 在 大 鼠 肝 内 成 瘤 并 活 体 显 示 门 脉 联 合 胆 管 结 扎 可 加 快 肝 癌 生 长 和 转 移 关 键 词 肝 癌 肝 癌 模 型 大 鼠 生 物 素 荧 光 成 像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原 发 性 肝 癌 是 严 重 危 害 人 类 生 命 健 康 的 重 大 疾 56' 2+- " 272$0%2' )'')2 '*2 *2 '+ 作 者 单 位 ' )*+ 解 放 军 总 医 院 肝 胆 外 科 通 信 作 者 董 家 鸿 电 子 信 箱 % 7 + ','-+2 " 病 居 我 国 恶 性 肿 瘤 发 病 率 的 第 * 位 全 球 新 发 肝 癌 病 例 有 ** 发 生 在 中 国 我 国 肝 癌 死 亡 率 在 各 种 癌 症 死 亡 中 居 第 位 ' 肝 细 胞 癌 占 原 发 性 肝 癌 的 )* 以 上 其 发 病 机 理 复 杂 临 床 治 疗 远

+++ 期 效 果 不 佳 因 此 建 立 接 近 人 类 肝 癌 临 床 特 征 的 动 物 模 型 对 于 观 察 体 内 生 长 和 转 移 规 律 研 究 肿 瘤 对 各 种 治 疗 的 反 应 以 及 寻 找 新 的 肝 癌 治 疗 方 法 具 有 重 要 意 义 荧 光 素 酶 $ /! 0/ 基 因 作 为 报 告 基 因 被 广 泛 应 用 于 生 物 医 学 研 究 利 用 荧 光 素 酶 标 记 肿 瘤 细 胞 进 行 活 体 观 察 为 肿 瘤 研 究 提 供 了 有 力 工 具 然 而 目 前 肿 瘤 活 体 观 察 多 用 裸 鼠 皮 下 种 植 模 型 基 因 修 饰 肝 癌 小 鼠 成 本 高 而 大 鼠 在 针 对 肝 癌 的 复 杂 操 作 如 手 术 及 介 入 治 疗 方 面 具 有 明 显 优 势 本 研 究 在 精 准 肝 胆 外 科 理 念 的 指 引 下 + 对 大 鼠 肝 癌 原 位 肝 癌 模 型 进 行 了 较 为 详 细 的 描 述 并 利 用 此 模 型 初 步 观 察 了 结 扎 门 静 脉 和 胆 管 对 肝 肿 瘤 生 长 转 移 的 影 响 材 料 与 方 法 '2 实 验 动 物 雄 性 大 鼠 ' 周 龄 体 重 ; * 购 自 美 国! /0$ /!! 1!$/0 解 放 军 总 医 院 实 验 动 物 中 心 9( 条 件 下 饲 养 自 由 摄 食 饮 水 2 荧 光 素 酶 基 因 转 染 通 过! "#$% & 慢 病 毒 载 体 将 荧 光 素 酶 $!/ # $ /! 0/ 基 因 转 染 大 鼠 肝 癌 细 胞 '- '. 购 自. 用 嘌 呤 霉 素! "#$% 筛 选 获 得 稳 定 表 达 $ /! 0/ 的 肝 癌 细 胞 细 胞 在 含 ' 胎 牛 血 清 的 培 养 基 购 自. 产 品 号 + + * 5 条 件 下 培 养 为 获 得 荧 光 强 度 细 胞 数 目 关 联 曲 线 取 标 记 细 胞 倍 比 稀 释 接 种 于 - 孔 培 养 板 待 细 胞 贴 壁 后 加 入 荧 光 素 底 物 $ /!$% 5 65 9 置 活 体 荧 光 成 像 仪 :$ 15 )+ 中 检 测 荧 光 信 号 得 到 细 胞 发 光 曲 线 以 此 确 定 接 种 细 胞 用 量 待 接 种 细 胞 用 * " 培 养 瓶 培 养 当 细 胞 铺 满 瓶 底 约 ) 时 消 化 悬 浮 (9 洗 涤 次 用 无 血 清 培 养 液 制 成 单 细 胞 悬 液 调 整 细 胞 浓 度 为 <' " += 瘤 细 胞 皮 下 种 植 取 雄 性 大 鼠 乙 醚 浅 麻 醉 后 固 定 充 分 暴 露 两 侧 腋 窝 局 部 皮 肤 消 毒 吸 取 细 胞 悬 液 2' " 皮 下 注 射 用 棉 签 按 压 穿 刺 点 '* 秒 确 认 无 出 血 以 及 液 体 流 出 为 验 证 细 胞 与 大 鼠 同 源 性 取 9 大 鼠 只 皮 下 接 种 等 量 细 胞 与 大 鼠 平 行 观 察 = 肝 原 位 种 植 当 皮 下 种 植 大 鼠 的 肿 瘤 体 积 达 约 * "" + 时 切 开 皮 肤 取 出 肿 瘤 修 剪 成 体 积 为 ' "" + 瘤 块 若 干 * 放 入 冷 生 理 盐 水 中 备 用 另 取 大 鼠 采 用 异 氟 烷 吸 入 麻 醉 腹 部 剃 毛 消 毒 沿 腹 白 线 逐 层 开 腹 暴 露 肝 脏 用 无 菌 棉 签 固 定 肝 左 外 叶 距 离 肝 脏 边 缘 约 ' " 处 将 腔 内 载 有 瘤 块 的 穿 刺 针 以 肝 表 面 '*> 角 度 刺 入 肝 实 质 内 约 + ; "" 注 意 穿 刺 深 度 勿 将 肝 脏 刺 穿 用 导 丝 将 瘤 块 轻 轻 推 入 掌 控 导 丝 穿 出 时 超 出 针 尖 不 超 过 ' "" 完 整 拔 出 穿 刺 针 瞬 时 按 压 穿 刺 点 约 ' "$% 检 查 穿 刺 针 内 无 瘤 块 滞 留 逐 层 关 腹 *= 活 体 观 察 肿 瘤 生 长 皮 下 接 种 后 密 切 观 察 种 植 部 位 有 无 肿 瘤 生 长 肿 瘤 可 触 及 后 每 周 次 用 游 标 卡 尺 直 接 测 量 肿 瘤 的 最 长 径 和 垂 直 方 向 最 大 径 采 用 公 式 &"" +? < 计 算 肿 瘤 体 积 肝 内 种 植 细 胞 大 鼠 只 连 续 活 体 成 像 观 察 每 周 ' 次 连 续 周 成 像 前 乙 醚 麻 醉 大 鼠 腹 腔 注 射 荧 光 素 钾 2 " 大 鼠 仰 卧 固 定 平 置 于 活 体 成 像 仪 机 箱 内 于 注 射 发 光 底 物 后 ' "$% 采 集 大 鼠 活 体 荧 光 影 像 -= 门 静 脉 和 胆 管 结 扎 肝 原 位 种 植 模 型 大 鼠 ') 只 种 植 后 周 随 机 分 为 + 组 分 别 为 门 静 脉 联 合 胆 管 双 结 扎 ( 组 门 静 脉 结 扎 (& 组 和 假 手 术 组 手 术 后 处 理 后 周 和 周 每 组 各 处 死 + 只 各 组 结 扎 步 骤 为 术 前 禁 食 异 氟 烷 吸 入 麻 醉 消 毒 取 腹 部 正 中 切 口 暴 露 肝 脏 以 及 肝 门 在 显 微 镜 下 分 离 肝 左 叶 和 中 叶 共 干 的 门 静 脉 肝 动 脉 和 胆 管 '( 组 用 * 丝 线 分 别 结 扎 左 中 叶 的 门 静 脉 和 胆 管 关 腹 (& 组 用 * 丝 线 结 扎 左 中 叶 的 门 静 脉 主 干 关 腹 + 假 手 术 组 分 离 后 * "$% 关 腹 = 病 理 观 察 采 用 乙 醚 麻 醉 下 腔 静 脉 放 血 处 死 大 鼠 解 剖 肝 肺 肾 观 察 有 无 瘤 灶 所 处 部 位 和 数 目 取 肝 内 种 植 肿 瘤 及 其 周 围 肝 组 织 ' 甲 醛 固 定 脱 水 并 石 蜡 包 埋 后 切 成 * " 厚 切 片 染 色 观 察 免 疫 组 化 采 用 9( 两 步 法 组 织 切 片 脱 蜡 后 分 别 用 抗 甲 胎 蛋 白 ( 抗 体 '@* " 和 抗 $ /! 0/'@ $ 0 孵 育 过 夜 其 他 步 骤 参 照 染 色 试 剂 盒 说 明 书 )= 统 计 学 处 理 肿 瘤 体 积 以 /A* 表 示 不 同 结 扎 方 式 下 肝 肿 瘤 大 小 的 比 较 用 9(99 ' 2 软 件 显 著 性 分 析 用 0 检 验 B = * 为 差 异 有 显 著 性 结 果 '= 大 鼠 皮 下 成 瘤 模 型 皮 下 接 种 细 胞 悬 液 ' 周 后 指 尖 可 触 及 米 粒 大 小 肿 瘤 随 后 肿 瘤 逐 渐

++ 增 大 图 ' 接 种 后 周 肿 瘤 体 积 最 大 可 达 '+ * "" + 于 此 时 点 处 死 解 剖 大 鼠 肝 肺 未 见 肿 瘤 转 移 相 应 9 大 鼠 皮 下 接 种 处 未 显 示 肿 瘤 生 长 大 鼠 皮 下 成 瘤 率 为 ' 观 察 期 内 肿 瘤 仅 在 接 种 部 位 局 限 性 生 长 未 发 现 内 脏 转 移 = 大 鼠 原 位 移 植 肝 癌 模 型 该 方 法 周 成 瘤 率 为 ' 不 同 时 点 解 剖 大 鼠 可 见 肿 瘤 在 种 植 肝 叶 内 逐 渐 增 大 第 周 时 肿 瘤 体 积 最 大 可 达 ) * "" + 图 ' 无 一 发 现 肝 内 和 肺 转 移 灶 肝 内 接 种 瘤 块 成 功 率 较 高 短 期 内 肿 瘤 局 限 性 生 长 周 时 开 始 突 出 于 肝 表 面 并 侵 犯 毗 邻 组 织 如 膈 肌 此 时 未 见 肺 转 移 作 为 肿 瘤 活 体 成 像 定 量 依 据 体 外 细 胞 荧 光 检 测 显 示 荧 光 强 度 与 细 胞 数 成 正 比 图 大 鼠 活 体 荧 光 显 示 肿 瘤 体 积 与 解 剖 所 见 基 本 符 合 追 踪 大 鼠 体 内 荧 光 信 号 只 大 鼠 均 于 周 后 在 接 种 肝 叶 部 位 显 示 肿 瘤 轮 廓 肿 瘤 直 径 随 着 时 间 的 延 长 而 增 大 图 + 周 时 双 肺 未 见 荧 光 信 号 有 ' 只 大 鼠 肝 内 发 现 静 脉 癌 栓 图 图 -, 细 胞 数 与 发 光 强 度 关 系 图., 活 体 成 像 下 不 同 时 点 大 鼠 肝 脏 肿 瘤 生 长 情 况 = 肝 肿 瘤 病 理 染 色 染 色 可 见 肿 瘤 与 周 围 正 常 肝 组 织 分 界 明 显 瘤 灶 内 癌 细 胞 呈 粗 小 梁 状 排 列 核 异 型 和 分 裂 相 多 见 图 * 免 疫 组 化 染 色 显 示 几 乎 所 有 癌 细 胞 均 呈 ( 强 阳 性 染 色 图 * 而 免 疫 反 应 强 阳 性 细 胞 散 在 于 肿 瘤 内 部 多 数 癌 细 胞 呈 弱 阳 性 反 应 图 * 两 者 均 为 胞 浆 染 色 正 常 肝 脏 细 胞 两 者 均 为 阴 性 讨 论 图 +, 大 鼠 皮 下 成 瘤 模 型 以 及 肝 内 成 瘤 模 型 的 肿 瘤 生 长 情 况 += 选 择 性 肝 门 结 扎 对 肿 瘤 生 长 转 移 的 影 响 ( 以 及 (& 后 ' 周 ( 组 肝 肿 瘤 体 积 为 *+ A ' =*"" + 此 时 (& 组 和 假 手 术 组 肿 瘤 体 积 分 别 为 *+ A' =*"" + * - A +=+ "" + 三 组 差 异 无 统 计 学 意 义 所 有 大 鼠 肝 肿 瘤 均 在 种 植 部 位 局 限 性 生 长 ( 以 及 (& 后 周 ( 肿 瘤 增 加 至 * A+'=+"" + 其 中 只 大 鼠 可 见 肺 转 移 灶 + 另 两 组 肿 瘤 也 见 增 大 (& 和 假 手 术 组 肿 瘤 体 积 分 别 为 )'+ A* =+"" + )' A *=) "" + 明 显 小 于 ( 组 B = * (& 与 假 手 术 组 差 异 无 统 计 学 意 义 也 均 未 见 明 显 肺 转 移 另 外 三 组 大 鼠 均 未 见 肿 瘤 肝 内 播 散 ( 组 肝 门 阻 断 后 周 肝 癌 是 我 国 人 群 常 见 的 恶 性 实 体 瘤 多 年 来 一 直 是 肿 瘤 生 物 学 和 治 疗 学 研 究 重 点 而 肝 癌 动 物 模 型 的 建 立 和 应 用 占 有 重 要 地 位 动 物 肝 癌 可 通 过 自 发 诱 发 移 植 以 及 转 基 因 等 不 同 方 法 获 得 - 由 于 遗 传 背 景 清 楚 可 供 选 择 的 研 究 工 具 多 样 动 物 体 型 便 于 操 作 和 饲 养 等 原 因 肝 癌 研 究 仍 首 选 小 鼠 ) 近 年 来 大 鼠 在 肝 癌 肝 硬 化 以 及 肝 移 植 作 为 模 型 动 物 较 为 广 泛 大 鼠 肝 癌 模 型 在 肝 癌 治 疗 和 转 移 复 发 机 理 研 究 等 领 域 应 用 报 道 增 多 ' 建 立 大 鼠 肝 癌 模 型 以 诱 发 和 移 植 为 主 诱 发 大 鼠 肝 癌 所 需 时 间 长 病 死 率 相 对 较 高 且 肝 癌 出 现 的 时 间 部 位 病 灶 数 等 存 在 个 体 差 异 '' 而 移 植 性 肝 癌 动 物 模 型 是 指 用 肝 癌 组 织 或 细 胞 源 于 动 物 或 人 移 植 到 动 物 体 内 肝 脏 肝 外 组 织 或 器 官 或 非 肝 脏 来 源 的 恶 性 肿 瘤 如 乳 腺 癌 等 移 植 到 动 物 的 肝 脏 所 形 成 的 肝 癌 动 物 模 型 '' 此 法 肿 瘤 细 胞 生 长 速 率 高 度 一 致 肿 瘤 位 置 和 大 小 也 能 根 据 研 究 目

++* 大 体 观 染 色 <' 免 疫 组 化 染 色 抗 ( < ( 周 肝 静 脉 癌 栓 染 色 <' 图 /, 门 静 脉 联 合 胆 管 双 结 扎 和 门 静 脉 结 扎 术 后 肿 瘤 的 生 长 转 移 情 况 * 染 色 <' * 免 疫 组 化 染 色 抗 ( <' * 免 疫 组 化 染 色 C 抗 $ /! 0/ < 图 0, 肿 瘤 组 织 的 病 理 学 以 及 免 疫 组 化 观 察 的 而 控 制 实 验 动 物 间 的 个 体 差 异 小 接 种 成 活 率 高 且 实 验 周 期 一 般 较 短 ' 便 于 跟 踪 观 察 不 同 干 预 手 段 对 肿 瘤 生 长 和 转 移 的 影 响 本 研 究 使 用 的 是 免 疫 功 能 健 全 的 大 鼠 瘤 细 胞 来 自 :!/%# 1 "$ $ 诱 导 大 鼠 肝 癌 经 体 外 传 代 获 得 的 细 胞 后 者 接 种 至 9 大 鼠 皮 下 未 成 瘤 进 一 步 确 认 了 与 的 同 源 性 尽 管 大 鼠 模 型 越 来 越 多 地 用 于 肝 癌 研 究 '+'* 但 文 献 中 缺 少 对 细 胞 在 大 鼠 成 瘤 规 律 尤 其 肿 瘤 荧 光 活 体 观 察 方 法 学 方 面 的 详 细 报 道 为 此 我 们 从 操 作 细 节 时 间 节 点 成 瘤 规 律 肿 瘤 分 子 特 征 等 方 面 对 大 鼠 肝 癌 模 型 进 行 了 较 为 详 细 的 研 究 结 果 显 示 该 肝 癌 模 型 的 优 点 有 ' 成 瘤 率 高 无 论 瘤 细 胞 皮 下 种 植 还 是 瘤 块 肝 内 移 植 大 鼠 成 瘤 率 均 为 ' 成 瘤 速 度 快 大 鼠 皮 下 种 植 周 可 明 显 触 及 肝 内 移 植 周 可 通 过 活 体 荧 光 成 像 显 示 局 部 成 瘤 + 瘤 体 位 置 明 确 可 根 据 研 究 需 要 在 肝 脏 表 面 任 意 选 择 瘤 块 种 植 部 位 相 对 于 门 静 脉 肝 包 膜 及 肝 实 质 内 注 射 细 胞 悬 液 此 法 可 在 一 定 时 间 内 确 保 肿 瘤 在 种 植 处 局 限 性 生 长 不 易 发 生 腹 腔 播 散 识 别 方 式 多 不 仅 可 人 为 标 记 如 基 因 转 染 癌 细 胞 进 行 活 体 观 察 而 且 细 胞 高 表 达 肝 细 胞 癌 特 异 性 标 志 蛋 白 ( 可 通 过 免 疫 组 化 在 组 织 学 水 平 发 现 微 小 瘤 灶 关 于 肿 瘤 活 体 观 察 有 人 借 助 6 可 显 示 早 期 直 径 "" 的 瘤 灶 并 且 影 像 学 特 征 也 与 人 相 似 但 是 该 法 测 试 成 本 和 专 业 技 术 要 求 高 本 研 究 将 荧 光 素 酶 基 因 转 染 细 胞 移 植 肝 内 生 长 后 可 对 肿 瘤 生 长 转 移 情 况 进 行 活 体 观 察 这 种 方 法 不 但 显 像 本 身 技 术 难 度 小 易 于 操 作 而 且 荧 光 素 酶 转 染 效 率 高 表 达 稳 定 同 时 对 肿 瘤 细 胞 生 长 亦 无 明 显 干 扰 利 用 大 鼠 肝 癌 模 型 观 察 选 择 性 肝 门 阻 断 对 肝 内 肿 瘤 生 长 和 转 移 的 影 响 发 现 联 合 结 扎 荷 瘤 肝 叶 的 门 静 脉 和 分 支 胆 管 后 肿 瘤 生 长 明 显 快 于 单 纯 门 静 脉 结 扎 和 假 手 术 大 鼠 并 且 随 时 间 推 移 该 处 理 组 大 鼠 出 现 肺 转 移 临 床 上 对 某 些 肝 癌 患 者 术 前 可 行 荷 瘤 肝 叶 门 静 脉 栓 塞 术 (& 刺 激 保 留 肝 叶 再 生 以 降 低 大 部 肝 切 除 术 后 肝 功 不 全 发 生 率 动 物 实 验 表 明 与 肝 门 阻 断 相 比 单 纯 阻 断 门 静 脉 不 对 肝 肿 瘤 生 长 产 生 明 显 影 响 '- 从 而 支 持 术 前 (& 对 肿 瘤 患 者 是 安 全 的 我 们 的 另 一 研 究 发 现 在 大 鼠 (& 基 础 上 增 加 同 侧 胆 管 阻 断 可 进 一 步 加 快 保 留 肝 叶 再 生 但 对 患 侧 肿 瘤 有 何 影 响 并 不 确 定 本 文 在 大 鼠 肝 癌 模 型 上 的 初 步 研 究 结 果 提 示 胆 管 结 扎 胆 汁 淤 积 可 以 促 进 肿 瘤 生 长 和 转 移 因 此 对 于 门 静 脉 和 胆 管 联 合 结 扎 刺 激 肝 再 生 的 安 全 性 还 需 要 进 一 步 研 究 大 鼠 肝 癌 模 型 为 相 关 研 究 提 供 了 有 力 工 具

++- 参 考 文 献 ' 高 杰 朱 继 业 2 卫 生 部 原 发 性 肝 癌 诊 疗 规 范 '' 年 版 解 读 8 2 中 华 普 通 外 科 杂 志 ' )- +- *2 陈 惠 李 坤 雨 陈 斐 等 2 用 于 活 体 成 像 的 小 鼠 肝 癌 移 植 瘤 模 型 的 建 立 8 2 兰 州 大 学 学 报 医 学 版 ' +)'' '*2 + 董 家 鸿 黄 志 强 2 精 准 肝 切 除 ' 世 纪 肝 脏 外 科 新 理 念 8 2 中 华 外 科 杂 志 ''- ''- *2 张 学 彬 王 平 周 大 勇 等 2 大 鼠 肝 细 胞 癌 模 型 的 影 像 学 特 征 8 2 中 华 肝 脏 病 杂 志 ''* -'2 * $D 9 E :. /1 2.E 0!/0/0 $ /!1 "! "/1 01 0$0 #!/ $% 1 / 1$ % $! 1$% /% 1 / $! /%$1!/ 0 8 2( 9 5: ' '2 - /$%!#43 /6 & % & $/! /! /2 3/!$"/%1 " 0/ " / 0! / 1 /!!$% "!/0/! 8 2 6%18 3 ( 1 +-)-2 :/ / (&$ % /!$/ " % 9/1 2 3/!$"/%1 " / 0 / 1 /!!$% " 8 28/ 1 ) )*)*)) 2 ) 胡 建 军 李 崇 辉 王 洪 东 等 2 保 留 肝 动 脉 入 肝 血 流 阻 断 法 对 肝 硬 化 大 鼠 肝 脏 的 保 护 作 用 8 2 中 华 肝 胆 外 科 杂 志 '+ ' '- -*2 陆 宏 伟 张 玉 君 余 强 等 2 冷 保 存 慢 性 排 斥 反 应 构 建 移 植 肝 胆 管 病 大 鼠 模 型 8 2 中 华 肝 胆 外 科 杂 志 '+' ) - '- *2 ' 刘 嘉 申 恒 巧 顾 红 梅 等 2 肝 癌 动 物 模 型 的 构 建 及 其 应 用 现 状 8 2 肿 瘤 药 学 '+''+'*2 '' 李 晓 娟 白 云 峰 崔 智 等 2 常 用 实 验 动 物 肝 癌 模 型 研 究 进 展 8 2 中 国 比 较 医 学 杂 志 ' +2 ' 徐 玉 音 陈 莉 2 肝 癌 动 物 模 型 建 立 的 方 法 8 2 临 床 与 实 验 病 理 学 杂 志 '' * )2 '+! /% / /1 2%1$0/%0/. /1 $"" % 1 /! #! / 1 /!!$% " 1!/ 1"/%1$%! 11 "!" / 8 2%% 9! 5% ')'+ +2 ' 5.. 0 $! $# 1 E /1 2 0 $ 1/ 4$% 0/$% $ $1!!/ /01 "!!/!/%/ 1/! $ /!1! %0 %1 1$ % $%! 1 / 1 " " / 8 2"8.! %0 %1 + +**2 '* 9 "$1 &! 7 0 % /12 2 /% $! 0"/ $ 1/ $ % /%/1 /! #$%! 1" /!1 1 $ / 1 /!!$% " 8 2/ 1 # '+ ' )'2 '- 9 $ $ /% E /1 2(!/0/! $% / 1$!1/!#!$%!1 1!$ $% 0$ %!/ /01 / 1! 1 / 1!$% " $% "$/ 1/!$0 /"$!//! 0$ % 8 2/ 1 # /0/! ' ' ' ' ++2 收 稿 日 期 '* 病 例 报 告 异 位 肝 肝 细 胞 癌 一 例 唐 广 山 异 位 肝 /1 $ $ /! 临 床 罕 见 异 位 肝 的 原 发 性 肝 细 胞 癌 更 为 罕 见 徐 州 医 学 院 附 属 淮 安 医 院 曾 收 治 ' 例 现 报 道 如 下 患 者 男 -' 岁 左 上 腹 包 块 半 年 明 显 进 行 性 消 瘦 体 检 左 中 腹 部 可 扪 及 质 韧 包 块 血 压 ' -* "" ' ""? ='++ 4( 血 常 规 肾 功 能 正 常 0 抗 / 抗 阳 性 丙 氨 酸 转 氨 酶 - 碱 性 磷 酸 酶 '=- 甲 胎 蛋 白 ++ '+ &: 定 量 '=*+ < ' 卧 位 醛 固 酮 ) = " 立 位 醛 固 酮 ' =) ". 检 查 平 扫 显 示 左 侧 腹 膜 后 肾 上 腺 区 可 见 类 圆 形 软 组 织 肿 块 其 边 界 尚 清 晰 临 近 的 胰 腺 脾 脏 左 肾 受 压 平 扫 肿 块 内 部 密 度 不 均 周 围 呈 软 组 织 密 度 中 央 可 见 不 规 则 形 低 密 度 影 大 小 为 ''=* "<''= "< " 增 强 扫 描 显 示 动 脉 期 可 见 肿 块 的 软 组 织 部 分 呈 点 状 强 化 门 脉 期 及 肝 静 脉 期 软 组 织 部 分 明 显 持 续 强 化 而 中 央 的 不 规 则 低 密 度 区 始 终 未 见 强 化 平 扫 及 增 强 时 所 示 层 面 腹 腔 内 及 腹 膜 后 均 未 见 明 显 肿 大 淋 巴 结 影 图 ' 结 合. 及 临 床 表 现 考 虑 左 侧 肾 上 腺 肿 瘤 术 中 见 肿 瘤 来 源 于 左 侧 肾 上 腺 区 大 小 约 ''=) "<''=* "< =* " 肿 瘤 于 左 肾 上 方 将 左 肾 压 向 后 下 方 术 中 触 压 瘤 体 患 者 血 压 及 心 率 56' 2+- " 272$0%2' )'')2 '*2 *2 ' 作 者 单 位 + 淮 安 徐 州 医 学 院 附 属 淮 安 医 院 影 像 中 心 通 信 作 者 唐 广 山 电 子 信 箱 1 0 0)),0$% 2 " 未 见 明 显 变 化 肿 瘤 为 实 性 与 周 围 组 织 有 粘 连 肾 静 脉 与 肿 瘤 间 有 滋 养 血 管 丛 完 整 切 除 肿 瘤 肿 瘤 切 面 呈 灰 褐 色 肿 瘤 内 未 见 明 显 出 血 钙 化 灶 病 理 左 肾 上 腺 送 检 灰 白 灰 黄 肿 瘤 ''=) "<''=* "< =* " 大 小 镜 检 可 见 肿 瘤 细 胞 免 疫 组 化 / #1/ 灶 ( 灶 ) 灶 0 C 灶 C9#% C 综 合 及 免 疫 组 化 结 果 考 虑 为 肝 细 胞 性 肝 癌 副 肝 来 源 图 图 +, 患 者. 增 强 图 像 动 脉 期 病 灶 部 分 轻 度 强 化 中 心 区 未 见 明 显 强 化 图 -, 患 者 病 理 图 片 < 讨 论 异 位 肝 组 织 是 指 发 生 在 肝 脏 以 外 且 解 剖 学 上 与 肝 脏 无 联 系 的 肝 组 织 发 生 于 肝 脏 以 外 与 肝 脏 相 连 的 则 称 为 副 肝 叶 异 位 肝 与 副 肝 叶 区 分 比 较 难 也 有 作 者 认 为 异 位 肝 应 包 括 副 肝 叶 ' 异 位 肝 非 常 少 见 发 生 率 约 为 = 异 位 肝 发 生 部 位 较 多 主 要 见 于 胆 囊 其 次 为 胸 下 转 第 + ' 页